CN1902228A - 猴免疫球蛋白序列 - Google Patents

Abstract

来自食蟹猴重链和轻链恒定区的核苷酸编码序列及氨基酸序列。描述了具有食蟹猴恒定区的嵌合抗体。

Description

猴免疫球蛋白序列

相关申请的相互参照

[001]本申请要求保护美国临时申请No.60/517,970(申请于2003年11月7日)的权益。

发明领域

[002]本发明涉及到猴免疫球蛋白序列。

发明背景

[003]猴被用于抗体的评价。例如，较低等的灵长类动物如猴经常被用作疾病研究的动物模型。在那些使用猴来研究疾病的例子中，可引入抗体来确定其处理或治疗疾病的有效性。在特定例子中，测试的抗体来自其它物种。

[004]与其它任何外源抗原一样，引入的外源抗体会触发猴的免疫系统产生针对该抗体的反应。例如，接受小鼠抗体的人体会产生针对该小鼠抗体的免疫反应(Exley A.R.et al.，Lancet 335：1275-77(1990))。同样的，在特定例子中猴会对所测试的来自其它物种的抗体产生抗体。猴对外源抗体的免疫反应可能会抑制这些抗体的功能，因此会阻碍对外源抗体的评估。

[005]嵌合抗体含有一种以上物种的氨基酸序列，相比那些只含有不同于宿主物种氨基酸序列的抗体，在特定例子中嵌合抗体可能会降低宿主针对其的免疫反应。例如上文所述，人会针对小鼠抗体产生免疫反应。当小鼠抗体的部分序列被人抗体序列取代时，人针对所得嵌合抗体的免疫反应会被降低(LoBuglio A.F.et al.，PNAS-USA 86：4220-24(1989))。

发明简述

[006]在特定实施方案中，提供的分离多肽包含选自SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：14或SEQ ID NO：20所列出的氨基酸序列并且还包含一个抗体重链可变区。

[007]在特定实施方案中，提供的分离多肽包含SEQ ID NO：30所示氨基酸序列。

[008]在特定实施方案中，提供的分离多核苷酸包含含有选自SEQ IDNO：6、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：12、SEQ IDNO：14或SEQ ID NO：20所示氨基酸序列的多肽的编码序列，并且还包含编码含有抗体重链可变区的多肽的序列

[009]在特定实施方案中，提供的分离多核苷酸包含编码含有SEQ IDNO：30所示氨基酸序列的多肽的序列并且还包含编码含有抗体轻链可变区多肽的序列。

[010]在特定实施方案中，提供的分离抗体包含SEQ ID NO：6、SEQ IDNO：8、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：20所示的氨基酸序列及包含SEQ ID NO：30所示氨基酸序列的多肽。

[011]在特定实施方案中，提供了一种制备多肽的方法。

[012]在特定实施方案中，提供了一种制备嵌合抗体的方法。

[013]在特定实施方案中，提供了一种评价抗体效果的方法，包括：

a)向食蟹猴(cynomolgus monkey)体内导入一个嵌合抗体，它含有抗体的轻链和重链可变区以及食蟹猴抗体的轻链和重链恒定区；及

b)评价该嵌合抗体在食蟹猴体内的效果。

附图简述

[014]图1显示了编码cyno3-16食蟹猴抗体重链恒定区(SEQ ID NO.1)的cDNA核苷酸序列和cyno3-16食蟹猴抗体重链恒定区氨基酸序列(SEQ ID NO.2)。

[015]图2显示了编码cyno33食蟹猴抗体重链恒定区(SEQ ID NO.3)的基因组DNA核苷酸序列，和cyno33食蟹猴抗体重链恒定区氨基酸序列(SEQ ID NO.4)。

[016]图3显示了编码cyno2-4食蟹猴抗体重链恒定区(SEQ ID NO.5)的基因组核苷酸序列，和cyno2-4食蟹猴抗体重链恒定区氨基酸序列(SEQ ID NO.6)。

[017]图4显示了编码cyno2-4cys食蟹猴抗体重链恒定区(SEQ ID NO.7)的基因组核苷酸序列，和cyno2-4cys食蟹猴抗体重链恒定区氨基酸序列(SEQ ID NO.8)。

[018]图5显示了编码cynods1食蟹猴抗体重链恒定区(SEQ ID NO.9)的基因组核苷酸序列，和cynods1食蟹猴抗体重链恒定区氨基酸序列(SEQ ID NO.10)。

[019]图6显示了编码cyno439食蟹猴抗体重链恒定区(SEQ ID NO.11)的cDNA核苷酸序列，和cyno439食蟹猴抗体重链恒定区氨基酸序列(SEQ ID NO.12)。

[020]图7显示了编码cyno686食蟹猴抗体重链恒定区(SEQ ID NO.13)的cDNA核苷酸序列，和cyno686食蟹猴抗体重链恒定区氨基酸序列(SEQ ID NO.14)。

[021]图8显示了编码cyno35食蟹猴抗体重链恒定区(SEQ ID NO.15)的基因组核苷酸序列，和cyno35食蟹猴抗体重链恒定区氨基酸序列(SEQ ID NO.16)。

[022]图9显示了编码cyno36食蟹猴抗体重链恒定区(SEQ ID NO.17)的基因组核苷酸序列，和cyno36食蟹猴抗体重链恒定区氨基酸序列(SEQ ID NO.18)。

[023]图10显示了编码cyno477食蟹猴抗体重链恒定区(SEQ ID NO.19)的cDNA核苷酸序列，和cyno477食蟹猴抗体重链恒定区氨基酸序列(SEQ ID NO.20)。

[024]图11显示了编码cyno32食蟹猴抗体重链恒定区(SEQ ID NO.21)的基因组核苷酸序列，和cyno32食蟹猴抗体重链恒定区氨基酸序列(SEQ ID NO.22)。

[025]图12显示了编码cyno3-18食蟹猴抗体重链恒定区(SEQ ID NO.23)的cDNA核苷酸序列，和cyno3-18食蟹猴抗体重链恒定区氨基酸序列(SEQ ID NO.24)。

[026]图13显示了编码cyno1-3食蟹猴抗体重链恒定区(SEQ ID NO.25)的cDNA核苷酸序列，和cyno1-3食蟹猴抗体重链恒定区氨基酸序列(SEQ ID NO.26)。

[027]图14显示了编码cyno1-4食蟹猴抗体重链恒定区(SEQ ID NO.27)的cDNA核苷酸序列，和cyno1-4食蟹猴抗体重链恒定区氨基酸序列(SEQ ID NO.28)。

[028]图15显示了编码cynoKappa食蟹猴抗体轻链恒定区(SEQ IDNO.29)的cDNA核苷酸序列，和cynoKappa食蟹猴抗体轻链恒定区氨基酸序列(SEQ ID NO.30)。

[029]图16显示了特定模式食蟹猴免疫球蛋白恒定区的核酸序列比对。恒定区可被分为3个序列家族，而铰链编码区表现出家族间的最大差异。用粗体突显的序列是与克隆所用引物对应的内源序列。

A.5个具有相似铰链编码序列的恒定区。

B.5个具有相似铰链区的恒定区。其中两个恒定区cyno686和cyno439中发现有一个21核苷酸的插入序列，而在cyno2-4、cyno2-4cy或cyno2-4ds中不存在。Cyono2-4和cyno2-4cys相同，除了41位核苷酸由G取代C，从而使Cys密码子取代Ser密码子。cyno2-4ds1包含cyno33的前288个核苷酸，这288个核苷酸取代了cyno2-4的前288个核苷酸。

C.4个相关恒定区。

[030]图17显示了特定食蟹猴免疫球蛋白恒定区序列的氨基酸序列对比。斜体部分表示C_H1区域，粗体部分表示铰链区，正常部分表示C_H2区域，斜体并加粗部分表示C_H3区域。

[031]图18显示了特定的可用作嵌合抗体轻链可变区的示例性核苷酸序列(A)和氨基酸序列(B)。列出了框架区(FR)和CDR区。

[032]图19显示了特定的可用作嵌合抗体轻链可变区的示例性核苷酸序列(A)和氨基酸序列(B)。列出了框架区(FR)和CDR区。

特定的首选实施方案详述

[033]这里所用的本节标题仅用来组织文章，而不是用以限制所述主题。本申请以任何目的所引用的所有或部分参考均完整的通过引用结合到本文。

定义

[034]标准方法可用于重组DNA、寡核苷酸合成、组织培养和转化(如电穿孔和脂转染法)。酶促反应和纯化技术可根据制造商说明书进行，使用本领域常规方法进行或按本文所述方法进行。上述技术和方案通常可根据本领域常规方法和本文引用讨论的多种通用或更具体参考所述来进行。例如参见Sambrook et al.Molecular Cloning：ALaboratory Manual(2d ed.，Cold Spring Harbor Laboratory Press，ColdSpring Harbor，N.Y.(1989))，特地通过引用被结合到本文。除了明确限定，本文所述的分析化学、有机合成化学、医学和药学所用的命名和实验程序和技术均为本领域熟知和常用的。可用标准技术进行化学合成、化学分析、药物制备、配伍和给予，以及对病人的治疗。

[035]以下术语与本公开所用的一致，除非特别指明，应理解为具以下含义：

[036]这里所用的“分离的多核苷酸”指基因组DNA、cDNA或合成起源或是其某些组合的多核苷酸，由于其起源该“分离的多核苷酸”(1)不与“分离的多核苷酸”天然条件下存在于其中的多核苷酸的全部或部分相连，(2)连接到一个天然条件下不与其相连的多核苷酸，(3)不作为更长序列的一部分天然条件下存在于其中。

[037]这里所用的“分离的多肽”指由cDNA、重组RNA或合成起源或其一些组合编码的多肽，它(1)至少不含有一些通常存在在一起的蛋白；(2)基本上不含有同一来源的蛋白，例如来自同一物种的蛋白；(3)被不同物种细胞所表达；或(4)天然条件下不存在。

[038]这里所用的术语“多肽”作为通用术语是指任何多肽，其含有两个或多个被肽键或修饰肽键彼此连接的氨基酸，也就是肽电子等排体。“多肽”既指短链，通常指肽、寡肽或寡聚物，也指长链，通常指蛋白。多肽可含有那些与密码子通常编码不同的氨基酸。

[039]多肽包括被天然方法修饰的氨基酸序列，例如翻译后修饰，也包括用本领域熟知的化学方法修饰的氨基酸序列。这些修饰在基础教材中有充分描述，在专著中有更加详细的描述，在大部分研究文献中也有描述。修饰可发生在多肽的任何部位，包括肽骨架、氨基酸侧链、氨基或羧基末端。这些修饰在一个给定多肽中可于多个部位以相同或不同程度存在。并且，在特定实施方案中，给定多肽可含有多种形式的修饰，例如天然序列的一个或多个氨基酸的删除、添加和/或取代。在特定实施方案中，多肽可发生泛素化作用从而发生分支，并且在特定实施方案中多肽可为有或无分支的环状结构。环状、分支和分支的环状多肽可以是翻译后的自然过程或合成方法导致的结果。修饰包括但不限于，乙酰化、酰化、ADP-核糖基化、酰胺化、生物素酰化，共价结合于黄素、共价结合于亚铁血红素、共价结合于核苷酸或核苷酸衍生物、共价结合于脂或脂衍生物、共价结合于磷脂酰肌醇，交联、环化、形成二硫键、脱甲基化、形成共价交联、形成胱氨酸、形成焦谷氨酸、甲酰化、γ-羧基化、糖基化、形成GPI锚、羟基化、碘处理、甲基化、豆蔻酰化、氧化、水解处理、磷酸化、异戊二烯化、外消旋化、硒酰化、硫酸化、tRNA介导的添加氨基酸到蛋白(例如精胺酰化)和泛素化。术语“多肽”也包含以下物质的氨基酸序列的序列：cyno3-16、cyno33、cyno2-4、cyno2-4cys、cynods1、cyno439、cyno686、cyno35、cyno36、cyno477、cyno32、cyno3-18、cyno1-3、cyno1-4、cynoKappa、H1、H2、H3、H4、H5、H6、H7、H8、H9、H10、H11、H12、H13、H14、L1、L2、L3、L4、L5、L6(如下描述，SEQ ID NOS：2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、61-74和81-86)，和这些序列有一个或多个氨基酸被删除、添加、取代的序列。

[040]这里所用的用于对象的术语“天然存在”是指对象可在自然中找到的事实。例如存在于生物体中(包括病毒)的多肽或多核苷酸，该生物体可从天然来源中分离并且没有被人类在实验室中特意修饰，或该生物体就是天然存在的。

[041]这里所用的术语“可操作性连接”(operably linked)是指各部分间的相互关系使各部分以既定方式发挥作用。例如以使编码序列的表达在与控制序列相容的条件下获得的方式将控制序列“可操作性连接”到编码序列上。

[042]这里所用的术语“控制序列”指能够影响其所连接的编码序列表达和加工的多核苷酸序列。这种控制序列的性质依赖宿主种类而不同。依据特定实施方案，原核生物控制序列可包含启动子、核糖体结合部位和转录终止序列。根据特定实施方案，真核生物控制序列可包含启动子和转录终止序列。在特定实施方案中“控制序列”可包含前导序列和/或融合伴侣序列。

[043]这里所用的术语“多核苷酸”是指长度至少为10个碱基的核苷酸聚合物。在特定实施方案中核苷酸至少包括核糖核酸、脱氧核糖核酸和两者修饰形式中的任一种。该术语包括单链和双链形式的DNA。术语“多核苷酸”也包括含有SEQ ID NOS：1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、47-60和75-80序列的核酸序列。在特定实施方案中多核苷酸的核苷酸序列与图1-15 18A和19A所示核苷酸序列有约90、或约95、或约96、或约97、或约98、或约99％的一致性。

[044]这里所用的术语“寡核苷酸”包括通过天然存在的寡核苷酸键连接到一起的天然存在和/或修饰后的核苷酸，和/或非天然存在的寡核苷酸键。寡核苷酸是通常包含长度在200碱基或更低的多核苷酸的子集。在特定实施方案中，寡核苷酸长度为10-60碱基。在特定实施方案中，寡核苷酸长度为12、13、14、15、16、17、18、19或20-40碱基。寡核苷酸可以是单链或双链，例如用于构建基因突变体的寡核苷酸。本发明的寡核苷酸可以是有义或反义寡核苷酸。

[045]术语“天然存在核苷酸”包括脱氧核糖核酸和核糖核酸。术语“经修饰的核苷酸”包括带有修饰或取代的糖基等等的核苷酸。术语“寡核苷酸键”包括如硫代磷酸酯键(phosphorothioate)、二硫代磷酸酯键(phosphorodithioate)、硒代磷酸酯键(phosphoroselenoate)、二硒代磷酸酯键(phosphorodiselenoate)、phosphoroanilothioate、phoshoraniladate、phosphoroamidate等寡核苷酸键。参见如LaPlanche等人在Nucl.Acids Res.14：9081(1986)；Stec等人在J.Am.Chem.Soc.106：6077(1984)；Stein等人在Nucl Acids Res.16：3209(1988)；Zon等人在Anti-Cancer Drug Design 6：539(1991)；Zon等人在寡核苷酸及类似物的应用方法(Oligonucleotides and Analogues：A Practical Approach，pp.87-108(F.Eckstein，Ed.，Oxford UniversityPress，Oxford England(1991)))；Stec等人在美国专利号5,151,510；Uhimann和Peyman在Chemical Reviews 90：543(1990)中所公开的，在这里特地通过完整引用结合到本文。在特定实施方案中寡核苷酸可包含用以检测的标签。

[046]用已知方法可易于计算出相关多肽的一致性和相似性。这些方法包括但不限于在Computational Molecular Biology，Lesk，A.M.，ed.，Oxford University Press，New York(1988)；Biocomputing：Informaticsand Genome Projects，Smith，D.W.，ed.，Academic Press，New York(1993)；Computer Analysis of Sequence Data，Part 1，Griffin，A.M.，and Griffin，H.G.，eds.，Humana Press，New Jersey(1994)；SequenceAnalysis in Molecular Biology，von Heinje，G.，Academic Press(1987)；Sequence Ahalysis Primer，Gribskov，M.and Devereux，J.，eds.，M.Stockton Press，New York(1991)；和Carillo et al.，SIAM J.AppliedMath.，48：1073(1988)中所述的方法。在特定实施方案中多肽的氨基酸序列与图1-15、18B和19B所示氨基酸序列有约90、或95、或96、或97、或98、或99％的一致性。

[047]设计确定一致性的首选方法以得到待测序列间的最大匹配度。确定一致性的方法在公众可获得的计算机程序中有描述。确定两个序列间一致性的首选计算机程序方法包括但不限于GCG程序包，它包含有GAP(Devereux et al.，Nucl.Acid.Res.，12：387(1984))，Genetics Computer Group，University of Wisconsin，Madison，WI，BLASTP，BLASTN和FASTA(Altschul et al.，J.Mol.Biol.，215：403-410(1990))。BLASTX程序来自公众可得的美国国家生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information(NCBI))和其它来源(BLAST Manual，Altschul et al.NCB/NLM/NIH Bethesda，MD20894；Altschul et al.，supra(1990))。熟知的Smith Waterman算法也可用来确定一致性。

[048]对两个氨基酸序列的某些对比方案可能会导致两个序列间仅有一个短区域相匹配，并且这个小的比对区域可能有很高的序列一致性，尽管两个全长序列间没有显著联系。相应的，在特定实施方案中选择的比对方法(GAP程序)产生的序列对比跨越靶多肽至少50个连续氨基酸。

[049]计算机例如使用计算机算法GAP(Genetics Computer Group，University of Wisconsin，Madison，WI)，两个待确定序列一致性百分比的多肽会被比对找出各自氨基酸最优的匹配(由算法确定的“匹配范围”)。在特定实施方案中，将空位开放罚分(gap opening penalty)(它作为3X平均对角线而计算；“平均对角线”是所用对比矩阵的平均对角线；“对角线”是由特定对比矩阵分配给每个最佳氨基酸匹配的分值或数值)，空位拓展罚分(gap extension penalty)(通常是空位开放罚分的1/10)，以及对比矩阵(例如PAM 250或BLOSUM62)和算法联合使用。在特定实施方案中，算法也使用标准对比矩阵(PAM 250对比矩阵参见Dayhoff et al.，Atlas of Protein Sequenceand Structure，5(3)(1978)，BLOSUM 62对比矩阵参见Henikoff et al.，Proc.Natl.Acad.Sci USA，89：10915-10919(1992))。

[050]在特定实施方案中，多肽序列的对比参数包括以下：

算法(Needleman et al.，J.Mol.Biol.48：443-453(1970))；

对比矩阵(BLOSUM 62，Henikoffet al.，supra(1992))；

空位罚分(Gap Penalty)：12；

空位长度罚分(Gap Length Penalty)：4；

相似性阈值(Threshold of Similarity)：0。

[051]GAP程序可以有效使用上述参数。在特定实施方案中上述参数为用GAP算法进行的多肽对比的默认参数(连同无末端空位罚分一起(along with no penalty for end gaps))。

[052]这里所用的20个常规氨基酸及其缩写遵循常规用法。参见Immunology--A Synthesis(2nd Edition，E.S.Golub and D.R.Gren，Eds.，Sinauer Associates，Sunderland，Mass.(1991))，它通过特地引用完整的结合到本文。20个常规氨基酸的立体异构体(如D-氨基酸)、非天然氨基酸例如α-、α-双取代氨基酸、N-烷基氨基酸、乳酸和其它非常规氨基酸也可以是本发明多肽的合适成分。非常规氨基酸的实例包括如但不限于，4-羟脯氨酸、γ-羧基谷氨酸、ε-N，N，N-三甲基赖氨酸、ε-N-乙酰赖氨酸、O-磷酸丝氨酸、N-乙酰丝氨酸、N-甲酰基甲硫氨酸、3-甲基组氨酸、5-羟基赖氨酸、σ-N-甲基精氨酸和其它相似氨基酸和亚氨基酸(如4-羟脯氨酸)。这里所用的多肽符号中，左手方向为氨基末端方向，右手方向为羧基末端方向，与标准用法和惯例一致。

[053]类似的除非特别指出，单链多核苷酸序列的左手端是5’末端，双链多核苷酸序列的左手方向指5’方向。5′到3′方向添加初生RNA转录物指转录方向；DNA链上与RNA有相同序列的序列区域和从5’到RNA转录物5’末端的序列区域为“上游序列”；DNA链上与RNA有相同序列的序列区域和从3’到RNA转录物3’末端的序列区域为“下游序列”。

[054]保守性氨基酸取代可包括在非天然存在的氨基酸残基，典型的是通过化学合成肽掺入而不是通过生物系统合成。这些非天然存在氨基酸残基包括拟肽(peptidomimetics)和其它逆向或反向形式的氨基酸部分。

[055]天然存在的残基可基于共同侧链特性分类：

1)疏水，正亮氨酸、Met、Ala、Val、Leu、Ile；

2)中性亲水，Cys、Ser、Thr、Asn、Gln；

3)酸性，Asp、Glu；

4)碱性，His、Lys、Arg；

5)影响侧链方向的残基，Gly、Pro；

6)芳香族，Trp、Tyr、Phe。

[056]例如，非保守性取代可包括将这些种类的一个成员替换另一个种类的成员。

[057]依据特定实施方案在进行这种变化时可考虑氨基酸亲水指数。每个氨基酸都根据其疏水性和电荷特性被指定了一个亲水指数。它们是：异亮氨酸(+4.5)、缬氨酸(+4.2)、亮氨酸(+3.8)、苯丙氨酸(+2.8)、半胱氨酸/胱氨酸(+2.5)、甲硫氨酸(+1.9)、丙氨酸(+1.8)、甘氨酸(-0.4)、苏氨酸(-0.7)、丝氨酸(-0.8)、色氨酸(-0.9)、酪氨酸(-1.3)、脯氨酸(-1.6)、组氨酸(-3.2)、谷氨酸(-3.5)、谷氨酰胺(-3.5)、天冬氨酸(-3.5)、天冬酰胺(-3.5)、赖氨酸(-3.9)和精氨酸(-4.5)。

[058]本领域技术人员了解氨基酸亲水指数在赋予对蛋白的相互生物功能上的重要性。Kyte et al.，J.Mol.Biol.，157：105-131(1982)。众所周知，某些氨基酸取代其它具有与其相似亲水指数或值的氨基酸后蛋白仍保留相似的生物活性。在特定实施方案中根据亲水指数进行变化时，包括取代亲水指数在±2内的氨基酸。在特定实施方案中包括取代掉亲水指数在±1内的氨基酸，而在特定实施方案中包括取代亲水指数在±0.5内的氨基酸。

[059]本领域技术人员也了解根据亲水性可有效取代相似氨基酸，尤其是借此创造的生物功能性蛋白或肽是用于免疫方案，如本实例。在特定实施方案中，蛋白的最大局部平均亲水性由其邻近氨基酸亲水性决定，与蛋白的免疫原性和抗原性相关，也就是与蛋白的生物学特性相关。

[060]以下为指定的氨基酸残基亲水性值：精氨酸(+3.0)、赖氨酸(+3.0)、天冬氨酸(+3.01)、谷氨酸(+3.01)、丝氨酸(+0.3)、天冬酰胺(+0.2)、谷氨酰胺(+0.2)、甘氨酸(0)、苏氨酸(-0.4)、脯氨酸(-0.5 1)、丙氨酸(-0.5)、组氨酸(-0.5)、半胱氨酸(-1.0)、甲硫氨酸(-1.3)、缬氨酸(-1.5)、亮氨酸(-1.8)、异亮氨酸(-1.8)、酪氨酸(-2.3)、苯丙氨酸(-2.5)和色氨酸(-3.4)。在特定实施方案中基于相似亲水性进行改变时包括取代亲水指数在±2内的氨基酸，在特定实施方案中则包括取代亲水指数在±1内的氨基酸，而在特定实施方案中包括取代亲水指数在±0.5的氨基酸。可根据亲水性从一级氨基酸序列鉴定表位。这些区域也称为“表位核心区域”。

[061]示例性氨基酸取代列于表1。

                        表1氨基酸取代

原氨基酸残基	示例性取代	具体示例性取代
			Ala	Val，Leu，Ile	Val
Arg	Lys，Gln，Asn	Lys
			Asn	Gln	Gln
Asp	Glu	Glu
			Cys	Ser，Ala	Ser
Gln	Asn	Asn
			Glu	Asp	Asp
Gly	Pro，Ala	Ala
			His	Asn，Gln，Lys，Arg	Arg
Ile	Leu，Val，Met，Ala，Phe，正亮氨酸(Norleucine)	Leu
			Leu	Ile，Val，Met，Ala，Phe，正亮氨酸	Ile
Lys	Arg，1，4-二氨基丁酸，Gln，Asn	Arg
			Met	Leu，Phe，Ile	Leu
Phe	Leu，Val，Ile，Ala，Tyr	Leu
			Pro	Ala	Ala
Ser	Thr，Ala，Cys	Thr
			Thr	Ser	Ser
Trp	Tyr，Phe	Tyr
			Tyr	Trp，Phe，Thr，Ser	Phe

Val

Ile，Met，Leu，Phe，Ala，正亮氨酸

Leu

[062]技术人员可使用已知方法来确定这里所列多肽的合适变异体。在特定实施方案中本领域技术人员通过对确信为非活性重要区域的定位来鉴别出分子的合适区域而不破坏分子活性。在特定实施方案中技术人员可鉴别出分子中的在相似多肽中为保守性的残基和部分序列。在特定实施方案中甚至可对那些对生物活性和结构重要的区域进行保守性氨基酸替换而不破坏生物活性，或者不对多肽结构产生不利影响。

[063]此外，本领域技术人员可回顾结构-功能研究，这些研究鉴定了相似多肽中对活性或结构重要的残基。考虑到这种比较，技术人员可根据对类似蛋白的活性和结构而言很重要的氨基酸残基从而预测出一个蛋白中与该氨基酸残基相应的的氨基酸残基的重要性。本领域技术人员可选择用化学上相似的氨基酸取代这种预测为重要的氨基酸残基。

[064]本领域技术人员也可与相似多肽结构比较来分析三维结构和氨基酸序列。考虑到这些信息，本领域技术人员可预测关于抗体三维结构的抗体氨基酸残基顺序。在特定实施方案中本领域技术人员可选择不对预测出现在蛋白表面的残基进行根本改变，因为这种残基可能涉及到与其它分子的重要相互作用。而且本领域技术人员可制备在每个所需氨基酸残基部位都含有单个氨基酸取代的试验变异体。随后使用本领域已知的活性检测方法来筛选这些变异体。这些变异体可被用来收集关于合适变异体的信息。例如发现一个特殊氨基酸残基的变化会导致失活、非所希望性地降低活性或得到非适合活性，则有这种变化的变异体应加以避免。换句话说，根据这些例行实验所收集到的信息，本领域技术人员可容易的确定哪些氨基酸中单独或与其它突变组合发生的进一步替换应加以避免。

[065]已经有许多致力于预测二级结构的科学出版物。参见Moult J.，Curr.Op.in Biotech.，7(4)：422-427(1996)，Chou et al.，Biochemistry，13(2)：222-245(1974)；Chou et al.，Biochemistry，113(2)：211-222(1974)；Chou et al.，Adv.Enzymol.Relat.Areas Mol.Biol.，47：45-148(1978)；Chou et al.，Ann.Rev.Biochem.，47：251-276and Chou et al.，Biophys.J.，26：367-384(1979)。另外，当前有计算机程序来辅助预测二级结构。一种预测二级结构的方法的是根据同源性建模。例如，两个具有30％以上的序列一致性或者40％以上相似性的多肽或蛋白通常有相似的结构拓扑学。最近发展的蛋白结构数据库(proteinstructural database，PDB)提高了二级结构的可预测性，包括多肽或蛋白结构内的可能折叠数。参见Holm et al.，Nucl.Acid.Res.，27(1)：244-247(1999)。有文献(Brenner et al.，Curr.Op.Struct.Biol.，7(3)：369-376(1997))称给定多肽或蛋白的折叠数是有限的，一旦关键结构数被确定，则结构预测的准确性将大大提高。

[066]另外的二级结构预测方法包括“联系算法”(threading)(Jones，D.，Curr.Opin.Struct.Biol.，7(3)：377-87(1997)；Sippl et al.，Structure，4(1)：15-19(1996))，“概况分析”(profile analysis)(Bowie et al.，Science，253：164-170(1991)；Gribskov et al.，Meth.Enzym.，183：146-159(1990)；Gribskov et al.，Proc.Nat.Acad.Sci.，84(13)：4355-4358(1987))和“进化连锁法”(evolutionary linkage)(Holm，supra(1999)，andBrenner，supra(1997))。

[067]在特定实施方案中抗体变异体包括糖基化变异体，其中多肽的糖基化位点的数目和/或类型相比亲代多肽氨基酸序列发生了改变。在特定实施方案中蛋白变异体相比天然蛋白，其N-连接的糖基化位点数目增多或减少。一个N-连接的糖基化位点具有Asn-X-Ser或Asn-X-Thr的序列特征，其中指定为X的氨基酸残基可以是除脯氨酸外的任一氨基酸残基。产生这个序列的氨基酸残基的替换，提供了一个添加新N-连接的糖链的潜在新位点。另一选择是，除去这一序列的替换，将除去现有的N-连接的糖链。也可对N-连接的糖链进行重排，除去一个或多个N-连接的糖基化位点(典型的是天然存在的糖基化位点)或产生更多的新N-连接的糖基化位点。

[068]在特定实施方案中抗体变异体包括半胱氨酸变异体。特定实施方案中半胱氨酸变异体相比亲代氨基酸序列有一个或多个半胱氨酸残基被删除或被其它氨基酸替换(例如丝氨酸)。在特定实施方案中半胱氨酸变异体相比亲代氨基酸序列有一个或多个半胱氨酸残基被添加或被其它氨基酸替换(例如丝氨酸)。在特定实施方案中当抗体要再折叠为生物活性构造例如在分离了不可溶的包涵体后，半胱氨酸变异体可能是有用的。在特定实施方案中半胱氨酸变异体的半胱氨酸残基数目比天然蛋白少。在特定实施方案中半胱氨酸变异体的半胱氨酸残基数目比天然蛋白多。在特定实施方案中半胱氨酸变异体的半胱氨酸残基数目为偶数，使未配对半胱氨酸间的相互作用降到最低。

[069]依照特定的实施方案，替换的氨基酸是那些：(1)降低对蛋白水解作用的易感性，(2)降低对氧化作用的易感性，(3)改变形成蛋白复合物的结合亲和力，(4)改变亲和力，和/或(5)赋予或修饰该多肽的其它物理化学和功能特性。依照特定的实施方案，单个或多个氨基酸替换(在特定实施方案中为保守氨基酸替换)可以发生在天然存在序列中(特定实施方案中在多肽形成分子间接触区域以外的部分)。在特定实施方案中，典型的保守性氨基酸替换可不对亲代序列的结构特征产生实质改变(例如氨基酸替换不会破坏亲代序列中存在的螺旋结构，或破坏亲代序列特有的其它二级结构类型)。多肽二级和三级结构经典实例的描述参见：蛋白质、结构和分子原理(Proteins，Structures and Molecular Principles(Creighton，Ed.，W.H.Freeman and Company，New York(1984)))；蛋白质结构导论(Introduction to Protein Structure(C.Branden and J.Tooze，eds.，Garland Publishing，New York，N.Y.(1991)))；和Thornton等Nature354：105(1991)，均通过引用结合到本文。

[070]这里所用的术语“多肽片段”指删除了氨基末段和/或羧基末端的多肽。在特定实施方案中，片段长度至少为5-467氨基酸。可以理解的是在特定实施方案中片段长度至少为5、6、8、10、14、20、50、70、100、150、200、250、300、350、400或450氨基酸。

[071]肽类似物通常用于制药工业作为具有与模板肽相似特性的非肽药物。这些种类的非肽化合物被称为“肽类似物”(peptide mimetics或peptidomimetics)。Fauchere，J.Adv.Drug Res.15：29(1986)；Veber和Freidinger TINS p.392(1985)；及Evans等J.Med.Chem.30：1229(1987)，都特地通过引用结合到本文。通常在计算机分子建模辅助下开发这类化合物。与治疗有效的肽结构相似的肽类似物可用来产生相似的治疗或预防效果。总的来说，肽类似物与范例多肽(paradigmpolypeptide)例如人抗体(也就是具有生化特性或药理活性的多肽)的结构相似，但有一个或多个肽键任选被选自以下的连接键用本领域熟知方法取代：-CH₂NH-、-CH₂S-、-CH₂-CH₂-、-CH＝CH-(顺式和反式)、-COCH₂-、-CH(OH)CH₂-和-CH₂SO-。在特定实施方案中可将共有序列的一个或多个氨基酸用同样类型的D-氨基酸系统替换(如用D-赖氨酸替换L-赖氨酸)，以产生更加稳定的肽。此外，可用本领域所知方法(Rizo and Gierasch Ann.Rev.Biochem.61：387(1992)，通过引用结合到本文)来产生包含一致序列或大体相同的一致序列变体的约束(constrained)肽；例如通过添加一个能够形成分子内二硫键的内部半胱氨酸残基来使肽发生环化。

[072]“抗体”(Antibody)或“抗体肽”(antibody peptide(s))指一个完整抗体或其片段。在特定实施方案中，抗体片段可以是结合片段，它与完整抗体竞争特异性结合。在特定实施方案中，用重组DNA技术生产结合片段。在特定实施方案中用酶促或化学切开完整抗体来生产结合片段。结合片段包括但不限于F_ab、F_ab′、F_(ab′)2、F_v、F_acb和单链抗体。非抗原结合片段包括但不限于F_c片段。

[073]“嵌合抗体”指一种抗体，它含有融合到其它分子的第一物种抗体的可变区，例如融合到第二物种的抗体恒定区，如食蟹猴抗体恒定区。在特定实施方案中，第一物种可以不同于第二物种。在特定实施方案中，第一物种可以与第二物种相同。在特定实施方案中，嵌合抗体是“猴源化(monkeyized antibodies)”抗体，它含有改变后的可变区(通过突变或CDR移植(CDR grafting))，与猴可变区已知序列的一部分匹配。典型的CDR移植包括将一个具有所需特异性抗体的CDR移植到一个猴抗体的FRs上，从而用猴序列替换若干或大量非猴序列。因此猴源化抗体与猴抗体更匹配(在氨基酸序列上)。

[074]术语“重链”包括含有足够可变区序列使得对特定抗原具有特异性的任何多肽。术语“轻链”包括含有足够可变区序列使得对特定抗原表位具有特异性的任何多肽。全长的重链包含一个可变区V_H和三个恒定区C_H1、C_H2及C_H3。V_H区位于多肽的氨基末端，C_H3区位于羧基末端。这里所用的术语“重链”(heavy chain)包括全长的重链及其片段。全长的轻链包含一个可变区V_L和一个恒定区C_L。与重链类似，轻链的可变区位于多肽的氨基末端。这里所用的术语“轻链”包括全长的轻链及其片段。F_ab片段包含一个轻链、C_H1和一个重链的可变区。F_ab分子的重链不能与其它重链分子形成二硫键。F_ab′片段含有一个轻链和一个含有更多恒定区的重链，其在C_H1区和C_H2区间，以致可在两个重链间形成链内二硫键，从而形成一个F_(ab′)2分子。F_acb片段与F_(ab′)2分子相似，除了它的重链恒定区延伸到C_H2区的末端。F_v区包含重链和轻链的可变区，但是缺少恒定区。单链抗体是F_v分子，其重链和轻链可变区间由一个柔韧性连接物所连接，从而形成单个的构成一个抗原结合区域的多肽链。单链抗体在如WO 88/01649、美国专利Nos.4,946,778和5,260,203中有详细描述。F_c片段含有重链的C_H2和C_H3区及多个恒定区，其在C_H1和C_H2之间，以致可在两个重链间形成链内二硫键。

[075]在特定实施方案中，双价抗体(bivalent antibody)不同于“多效抗体”(multispecific)或“多功能抗体”(multifunctional)，一向被理解为每种均具有相同的结合位点。

[076]当过量抗体使与配体结合的受体数量减少至少约20％、40％、60％、80％、85％或更多时(体外竞争性结合检测所得)，该抗体实质上抑制了配体与受体的结合。

[077]术语“抗原表位”(epitope)包括能特异性的与免疫球蛋白或T细胞受体结合的任何多肽决定簇(determinant)。在特定实施方案中，表位决定簇包括分子表面的化学活性基团如氨基酸、糖侧链、磷酰基或磺酰基，并且在特定实施方案中可具有特殊的三维结构特征，和/或特殊的电荷特性。抗原表位是抗原结合抗体的区域。在特定实施方案中，当抗体在复杂的蛋白和/或大分子混合物中优先识别出其靶抗原时，它就特异性结合到抗原上。在特定实施方案中，当解离常数≤1μM、特定实施方案中当解离常数≤100nM及特定实施方案中当解离常数≤10nM时，抗体特异性结合到抗原上。

[078]这里所用的术语“试剂(agent)”指化合物、化合物的混合物、生物大分子或来自生物材料的提取物。

[079]这里所用的术语“标记”或“标记的”指掺入一个可探测的标记物，例如通过掺入放射性标记的氨基酸或连接上能被标记的抗生物素探测到的生物素部分(如用含有荧光标记或酶促反应活性标记的链霉亲和素，可通过光学或比色方法检测到)。在特定实施方案中，标签或标记物也可以是有治疗作用的。标记多肽和糖蛋白的各种方法为本领域熟知并可使用。多肽标记的例子包括但不限于以下：放射性同位素或放射性核素(如³H、¹⁴C、⁵N、³⁵S、⁹⁰Y、⁹⁹Tc、¹¹¹In、¹²⁵I、¹³¹I)、荧光标记(如FITC、若丹明、镧系元素磷光体)、酶标记(如辣根过氧化物酶、β-半乳糖苷酶、荧光素酶、碱性磷酸酶)、化学发光标记，生物素酰化标记，二级报告体识别的预定多肽抗原表位(如亮氨酸拉链配对序列、二级抗体结合位点、金属结合区域、表位标签)。在特定实施方案中，标记物通过不同长度的间隔臂连接在多肽上，以减少潜在的空间阻碍。

[080]这里所用的术语“生物样品”包括但不限于来自生命体或前生命体的任何数量的物质。这种生命体包括但不限于人、小鼠、猴、大鼠、兔和其它动物。这种物质包括但不限于血液、血清、尿液、细胞、器官、组织、骨骼、骨髓、淋巴结和皮肤。

[081]这里所用的术语“药剂或药物”指当向病人适当给药时能诱导出所需疗效的化合物或组合物。

[082]这里所用的术语“调节剂”(modulator)是能变化或改变分子活性或功能的化合物。例如，调节剂可引起分子的特定活性或功能大小比在无调节剂时的所得到的增加或降低。在特定实施方案中，调节剂是抑制剂，它降低了分子的至少一种活性或功能大小。特定分子的活性和功能示例包括但不限于，结合亲和力、酶活性和信号转导。特定抑制剂示例包括但不限于，蛋白、肽、抗体、肽抗体(peptibodies)、糖或有机小分子。肽抗体在如WO01/83525中有描述。

[083]这里所用的“大体纯”意思是目标物表现为优势种类(即摩尔数比组合物中其它各种类都要高)。在特定实施方案中一种大体纯化的部分指在所有存在的大分子物质中目标物至少占约50％(摩尔数)的组合物。在特定实施方案中，一种大体纯的组合物将包含存在于组合物中所有大分子物质的至少约80％、85％、90％、95％或99％。在特定实施方案中，目标物纯化至基本同质(常规方法探测不到组合物中的杂质)，其中组合物基本上由单一大分子物质组成。

[084]术语“患者”包括人和受试动物。

[085]本申请中除非特别说明则所用的单数形式也包括相应的复数形式。本申请中除非特别说明则所用的“或”是指“和/或”。此外，所用的术语“包括”以及其他形式如“包含”和“内含”无限定含义。并且诸如“要素”(element)或“成分”(component)的术语除非特别说明则既包括含有一个单元的成分也包括含有多个子单元的成分。

[086]在特定实施方案中，本申请讨论了某些编码重链和轻链恒定区的多核苷酸。在特定实施方案中，本申请讨论了某些包含重链和轻链恒定区的多肽序列。在特定些实施方案中，这些恒定区多核苷酸和多肽来源于食蟹猴。在特定实施方案中多核苷酸包含选自SEQ IDNOS：1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27和29的核苷酸序列。在特定实施方案中多肽包含选自SEQ ID NOS：2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28和30的序列。在特定实施方案中多核苷酸含有氨基酸序列的编码序列，该氨基酸序列选自SEQ ID NOS：2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28和30的序列。在特定实施方案中提供了相应于互补决定区(CDR′s)，具体说是从CDR1到CDR3的可变区序列。在特定实施方案中可变区多核苷酸和多肽来源于人。在特定实施方案中可变区多核苷酸含有选自SEQ ID NOS：47-60和SEQ ID NOS：75-80的核苷酸序列。在特定实施方案中多肽含有选自SEQ ID NOS：61-74和SEQ ID NOS：81-86的序列。在特定实施方案中可变区多核苷酸和多肽来源于食蟹猴。依据特定实施方案，也提供了表达包含来源于食蟹猴恒定区的免疫球蛋白分子的细胞系。

[087]在特定实施方案中提供了包含至少部分猴序列和其它种序列的嵌合抗体。在特定实施方案中这种嵌合抗体比其它无猴序列的抗体可使猴体内免疫反应降低。例如在特定情况下将含有目的抗原表位的抗原导入到动物宿主(如小鼠)体内，如此产生了针对该抗原表位的特异性抗体。在特定情况下可从自然暴露于该抗原表位的宿主获得生物样品再得到针对该抗原表位的特异性抗体。在特定情况下将人免疫球蛋白(Ig)座导入到内源性Ig基因失活的小鼠体内，从而提供了得到完全人单克隆抗体(Mabs)的可能性。在特定情况下这种来自其它物种的抗体可引起猴体内对抗体本身的免疫反应，因此阻碍了对这些抗体的评估。在特定实施方案中将抗体部分氨基酸替换为猴序列可降低猴的抗抗体反应规模。

[088]在特定实施方案中嵌合抗体包含第一物种的可变区和第二物种的恒定区。在特定实施方案中，恒定区是食蟹猴恒定区。可变区的示例包括但不限于人、小鼠、猪、豚鼠、食蟹猴和兔可变区。在特定实施方案中可将重链和轻链可变区的框架区替换为来源于食蟹猴的框架区序列。

[089]可用本领域普通技术人员熟知的方法来制备嵌合抗体。在特定实施方案中可将编码重链可变区的第一物种多核苷酸与编码重链恒定区的第二物种多核苷酸融合。在特定实施方案中可将编码轻链可变区的第一物种多核苷酸与编码轻链恒定区的第二物种多核苷酸融合。在特定实施方案中可将这些融合的核苷酸序列或通过单个的表达载体(如质粒)导入到细胞中。在特定实施方案中可用含有至少一种表达载体的细胞来生成多肽。在特定实施方案中可将这些融合的核苷酸序列或通过分离的表达载体导入到细胞中。在特定实施方案中宿主细胞既表达嵌合重链也表达嵌合轻链，二者结合产生嵌合抗体。在特定实施方案中可用含有至少一个表达载体的细胞来制备嵌合抗体。产生和表达嵌合抗体的示例方法讨论如下。

[090]在特定实施方案中可将功能性区域C_H1、C_H2、C_H3和插入序列进行重组以建立一个不同的抗体恒定区。例如在特定实施方案中可以在血清半衰期、抗体四聚体的装配和折叠及改进的效应子功能方面对这种杂合恒定区实施最优化处理。在特定实施方案中可通过在恒定区氨基酸序列中引入单点突变并对所得抗体进行如上文列举的改进性质试验，来产生修饰的抗体恒定区。

[091]在特定实施方案中含有猴氨基酸序列的嵌合抗体可被用来开展对人和动物疾病的治疗。示例的治疗包括但不限于HIV、癌症和炎症的治疗。例如在特定实施方案中可发展结合到人病原体如病毒的小鼠抗体，用在有猴动物模型的人类疾病研究中。在特定实施方案中为了确定结合到特定抗原表位的抗体是否有利于治疗人，可在对人体尝试治疗以前，评估包含小鼠抗体可变区和猴抗体恒定区的嵌合抗体在猴身上治疗该疾病的有效性。因此在特定实施方案中提供了评估抗体效果的方法，包括：a)将含有来自一个抗体的重链和轻链可变区及来源于食蟹猴抗体的重链和轻链恒定区的嵌合抗体导入到食蟹猴体内；及b)评估该嵌合抗体在食蟹猴体内的效果。在特定实施方案中可通过测量猴体内病原体数量的减少和该疾病症状的减轻来评估抗体效果。当然治疗并不限于针对病原体引起的疾病。在特定实施方案中可由其它方法在猴体内引起疾病，包括导入外源物(例如致癌物)和基因操作。在特定实施方案中可通过检测猴体内的一种过多种不良事件来评估抗体效果。术语“不良事件”(adverseevent)包括但不限于在接受了没有接受该抗体的猴体内不出现的抗体的猴的不良反应(adverse reaction)。在特定实施方案中不良事件包括但不限于发热、对抗体的免疫反应、炎症或猴死亡。

天然存在的抗体结构

[092]天然存在的抗体结构单元代表性的包含一个四聚体。典型的这种四聚体每个由相同两对多肽链组成，每对含有一个全长“轻链”(在特定实施方案中约25kDa)和一个全长“重链”(在特定实施方案中约50-70kDa)。每条链的氨基末端部分典型的包含一个长约100-110氨基酸或更长可变区序列，该序列通常负责抗原识别。每条链的典型羧基末端定义为恒定区，可负责效应子功能。抗体效应子功能包括激活补体和刺激调理吞噬作用。典型的人轻链分为λ和κ轻链。典型的人重链分为μ、δ、γ、α或ε链，相应抗体亚型分别定义为IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。IgG有几个亚类，包括但不限于IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。IgM的亚类包括但不限于IgM1和IgM2。IgA也被类似的细分为亚类，包括但不限于IgA1和IgA2。在全长轻和重链区内，可变区和恒定区典型的由约12个氨基酸或更长的“J”区域连接；重链区还包括约10个氨基酸或更长的“D”区域。参见基本免疫学第七章(Fundamental Immunology Ch.7)(Paul，W.，ed.，2nd ed.Raven Press，N.Y.(1989)，通过引用完整结合到本文)。每条轻/重链的可变区配对形成典型的抗原结合位点。

[093]典型的可变区表现出相同的相对保守框架区(FR)结构，由三个也称为互补决定区或CDR的超可变区连接。每对两条链上的CDR典型通过框架区排列，使得能够与特异的抗原表位结合。不论是轻链还是重链可变区从N-末端到C-某端通常都包含FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3和FR4区域。每个区域的氨基酸排布通常与下文的定义一致：免疫学上重要的蛋白Kabat序列(Kabat Sequences ofProteins of Immunological Interest)(National Institutes of Health，Bethesda，Md.(1987 and 1991))，或Chothia & Lesk，J.Mol.Biol 196：901-917(1987)；Chothia et al.，Nature 342：878-883(1989)。

双特异性或双功能性抗体

[094]一个典型的双特异性或双功能性抗体是人工杂种抗体，含有两个不同的重/轻链对和两个不同的结合位点。双特异性抗体可通过不同方法来生产，包括但不限于杂交瘤的融合或F_ab′片段的连接。参见Songsivilai & Lachmann，Clin.Exp.Immunol.79：315-321(1990)，Kostelny et al.J.Immunol.148：1547-1553(1992)。

[095]在特定实施方案中，本发明提供了包含所有食蟹猴抗体重链和/或轻链恒定区或其功能性部分的融合蛋白。该融合蛋白可包含任何所需的附加多肽序列，任选包含一个或多个接头序列。附加的多肽序列可包含如，全部或部分天然存在的多肽序列。可使用任何天然存在多肽序列或其部分序列，例如来自一个能与其它分子如其他蛋白结合的蛋白的多肽序列。与其它蛋白结合的天然存在多肽序列的例子包括从受体蛋白、配体蛋白、多亚基蛋白、转录因子蛋白、核糖体蛋白和细胞骨架蛋白得来的序列。其它适用于这种融合蛋白的天然存在多肽序列的例子包括具有酶活性的多肽序列，例如具有蛋白修饰酶活性，如激酶活性、磷酸酶或蛋白酶活性。其它实施方案中，添加的多肽序列不是天然存在的。例如，可以是天然存在蛋白的修饰、突变或其它衍生物。另一选择是，它可以是人工序列。这种实施方案中非天然存在多肽序列赋予融合蛋白所需的特性，如稳定性、溶解性、可探测性等。在一个实施方案中，非天然存在的多肽序列使融合蛋白与所需靶分子例如其它蛋白结合。靶蛋白的例子包括受体蛋白和配体。融合蛋白可能，比如对靶分子的功能性无影响，或者可以影响靶分子的功能，例如可以提高或降低靶分子的功能水平。这种融合蛋白可通过任何机制对靶蛋白发挥作用，例如通过空间上阻碍靶分子与其效应物和/或底物分子间的相互作用，或者通过变构改变靶分子对其效应物和/或底物分子的亲和力。可使用本领域所知的任何技术来设计或选择适用于本发明融合蛋白实施方案的多肽序列。一个实施方案中制得了一个融合蛋白文库，并根据单个融合蛋白结合到所需靶分子的能力来从文库中选出一个或多个融合蛋白。涉及到本发明融合蛋白的方法和组合物的其它实例可参考美国专利No.6,660,843(通过引用完整的结合到本文)。在特定实施方案中本发明的融合蛋白是作为适用于受试者的药用组合物的一部分来提供的，受试者例如灵长类如食蟹猴或人类。其它实施方案中本发明提供了使用融合蛋白处理受试者例如灵长类如食蟹猴或人类的方法。

抗体的制备

[096]在特定实施方案中对食蟹猴嵌合抗体重链和轻链的保守性修饰(并相应修饰编码多核苷酸)会产生功能和化学性质与原有嵌合抗体相似的抗体。相反，可通过选择显著改变以下三方面作用的重链和轻链的氨基酸序列中的替换来对食蟹猴嵌合抗体的功能和/或化学性质进行实质上的修饰，这三方面为a)维持替换所在区域的分子骨架结构方面，如片层和螺旋的形成，b)维持分子在靶位点的电荷或疏水性方面，c)维持侧链大小方面，。

[097]例如“保守性氨基酸替换”可包括将天然氨基酸残基替换为非天然氨基酸残基，使该位置氨基酸残基的极性或电荷受很少的影响或者没有影响。另外，多肽中的任何天然残基均可用丙氨酸替换，如前述的“丙氨酸扫描诱变”(alanine scanning mutagenesis)。

[098]本领域技术人员可在需要替换时确定所需的氨基酸替换(无论是保守性或非保守性)。在特定实施方案中可用氨基酸替换来鉴定嵌合食蟹猴抗体的重要残基，例如那些可能提高或降低嵌合抗体对给定抗原亲和力或嵌合抗体的效应子功能的残基。

[099]在特定实施方案中可在除了杂交瘤细胞系外的细胞系中表达抗体。在特定实施方案中编码特定抗体包括嵌合抗体的序列可用来转化合适的哺乳动物宿主细胞。依据特定的实施方案，可用任何已知方法将多核苷酸导入宿主细胞来转化，包括如将多核苷酸包装到病毒(或病毒载体)中并用该病毒(或载体)转化宿主细胞，或用本领域已知方法转染细胞，如美国专利Nos.4,399,216、4,912,040、4,740,461和4,959,455例证(这些专利据此通过引用结合到本文)。在特定实施方案中所用的转化方法可依赖于待转化的宿主。将异源多核苷酸导入哺乳动物细胞的方法为本领域所熟知，包括但不限于葡聚糖介导的转染、磷酸钙沉淀、聚溴化季铵(polybrene)介导的转染、原生质体融合、电穿孔、多核苷酸的脂质体包囊和直接将DNA显微注射入胞核。

[0100]可用作表达宿主的哺乳动物细胞系为本领域所熟知，包括但不限于许多来自美国典型培养物保藏中心(American Type CultureCollection，ATCC)的无限增殖细胞系，这其中包括但不限于中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary，CHO)、E5细胞、HeLa细胞、幼仓鼠肾细胞(baby hamster kidney，BHK)细胞、猴肾脏细胞(COS)、人肝癌细胞(human hepatocellular carcinom，如Hep G2)及许多其他细胞系。在特定实施方案中可通过确定哪种细胞系具有高水平表达抗体能力并且产生的抗体具有组成型抗原结合特性来选择细胞系。

[0101]依据特定实施方案，抗体可用于检测生物样品中的特定抗原。在特定实施方案中，使得可鉴定出产生该蛋白的细胞或组织。在特定实施方案中可结合到特定蛋白的抗体并封闭与其它结合化合物的相互作用的抗体，可能有治疗用途。

[0102]在特定实施方案中提供了对病人的治疗方法，包括给予治疗上有效量的抗体。在这种特定实施方案中，附加的治疗剂按治疗上有效量给予。

[0103]在特定实施方案中，将抗体与治疗上有效量的附加治疗剂联合使用。示例性治疗剂包括但不限于称为BMP-1到BMP-12的骨骼形态发生因子(bone morphogenic factors)；β-转化生长因子(TGF-β)和TGF-β家族成员；白细胞介素-1(IL-1)抑制剂，包括但不限于IL-1ra及其衍生物和Kinere^TM；TNFα抑制剂，包括但不限于可溶性TNFα受体，依坦西普(Enbrel^TM)，抗TNFα抗体，Remicade^TM和D2E7抗体；甲状旁腺素及其类似物；甲状旁腺相关蛋白及其类似物；E系列前列腺素；二磷酸盐(例如阿仑膦酸钠(alendronate)等)；骨增强矿物质，例如氟化物和钙；非类固醇类抗炎药(NSAIDs)，包括但不限于COX-2抑制剂，例如西乐葆(Celebrex^TM)和万络(Vioxx^TM)；免疫抑制剂，例如甲氨蝶呤或来氟米特(leflunomide)；丝氨酸蛋白酶抑制剂，包括但不限于分泌型白细胞蛋白酶抑制剂(SLPI)；IL-6抑制剂，包括(但不限于IL-6抗体)；IL-8抑制剂，包括(但不限于IL-8抗体)；IL-18抑制剂，包括(但不限于IL-18结合蛋白和IL-18抗体)；白细胞介素-1转化酶(ICE)调节剂；纤维母细胞生长因子FGF-1到FGF-10和FGF调节剂；PAF拮抗剂；角化细胞生长因子(KGF)、KGF相关分子和KGF调节剂；基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase(MMP))调节剂；氮氧化物合酶(NOS)调节剂，包括但不限于可诱导NOS的调节剂；肾上腺皮质激素受体调节剂；谷氨酸受体调节剂；脂多糖(LPS)水平调节剂；和去甲肾上腺素和调节剂以及其模仿物。示例的附加治疗剂细节实例参见如PCT公布说明书No.WO03/0002713。

[0104]在特定实施方案中，考虑到条件和所需治疗水平，可以给予两种、三种或更多种药物。在特定实施方案中，这些药物可通过包含于同一制剂中一起提供。在特定实施方案中这些药物和抗体可通过包含在同一制剂中一起提供。在特定实施方案中这些药物可通过包含在治疗药盒中一起提供。在特定实施方案中这些试剂可分开提供。在特定实施方案中当使用基因治疗形式给药时，编码蛋白试剂和/或抗体的基因可插入到同一载体中。在特定实施方案中编码蛋白试剂和/或抗体的基因可处于同一个启动子区域的控制下。在特定实施方案中编码蛋白试剂和/或抗体的基因可在独立的载体中。

[0105]在特定实施方案中本发明提供了药用组合物，该组合物含有治疗上有效量的抗体和药学上可接受的稀释剂、载体、增溶剂、乳化剂、防腐剂和/或辅助剂。

[0106]在特定实施方案中本发明提供了药用组合物，其含有治疗上有效量的抗体和至少一种治疗上有效量的附加治疗剂，以及药学上可接受的稀释剂、载体、增溶剂、乳化剂、防腐剂和/或辅助剂。在特定实施方案中至少一种附加的治疗剂选自骨骼形态发生因子BMP-1到BMP-12；β-转化生长因子(TGF-β)和TGF-β家族成员；白细胞介素-1(IL-1)抑制剂，包括(但不限于)IL-1ra及其衍生物和Kinere^TM；TNFα抑制剂，包括(但不限于)可溶性TNFα受体，依坦西普，抗TNFα抗体，Remicade^TM和D2E7抗体；甲状旁腺素及其类似物；甲状旁腺相关蛋白及其类似物；E系列前列腺素；二磷酸盐(例如阿仑膦酸钠等)；氟化物和钙；非类固醇类抗炎药(NSAIDs)，包括但不限于COX-2抑制剂，例如Celebrex^TM和Vioxx^TM；免疫抑制剂，例如甲氨蝶呤或来氟米特；丝氨酸蛋白酶抑制剂(SLPI)例如分泌白细胞蛋白酶抑制剂(SLPI)；IL-6抑制剂，包括但不限于IL-6抗体；IL-8抑制剂，包括但不限于IL-8抗体；IL-18抑制剂，包括但不限于IL-18结合蛋白和IL-18抗体；白细胞介素-1转化酶(ICE)调节剂；纤维原细胞生长因子FGF-1到FGF-10和FGF调节剂；PAF拮抗剂；角化细胞生长因子(KGF)，KGF相关分子和KGF调节剂；基质金属蛋白酶调节剂；氮氧化物合酶(NOS)调节剂，包括但不限于可诱导NOS的调节剂；肾上腺皮质激素受体调节剂；谷氨酸受体调节剂；脂多糖(LPS)水平调节剂；和去甲肾上腺素和调节剂以及它们的类似物。示例的附加治疗剂内容参见PCT公布说明书No.WO03/0002713。

[0107]在特定实施方案中可取的制剂原料优选在所用剂量和浓度下对受体无毒的原料。

[0108]在特定实施方案中药用组合物可含有以修饰、维持或保持如下性能，pH、渗透性、粘性、透明度、颜色、等渗性、气味、无菌度、稳定性、溶出或释放速率、组合物的吸附或渗透能力的制剂原料。在特定实施方案中合适的制剂原料包括但不限于氨基酸，(例如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、精氨酸或赖氨酸)；抗微生物剂；抗氧化剂(例如抗坏血酸、亚硫酸钠、或亚硫酸氢钠)；缓冲剂(例如硼酸盐、碳酸氢盐、Tris-HCl、柠檬酸盐、磷酸盐或其它有机酸)；湿胀剂(bulking agents)(例如甘露醇和甘氨酸)；螯合剂(cheatingagents)(例如乙二胺四乙酸、EDTA)；复合剂(complexing agents)(例如咖啡因、聚乙烯吡咯烷酮、β-环糊精或羟丙基-β-环糊精)；填充剂(fillers)；单糖；二糖；其它糖类(例如葡萄糖、甘露糖或糊精)；蛋白(例如血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白)；着色剂、调味剂和稀释剂；乳化剂；亲水聚合物(例如聚乙烯吡咯烷酮)；小分子多肽；成盐平衡离子(例如钠离子)；防腐剂(例如苯扎氯铵、安息香酸、水杨酸、硫柳汞、苯乙醇、对羟基苯甲酸甲酯对羟基苯甲酸丙酯，洗必太、山梨酸和过氧化氢)；溶剂(例如甘油、丙二醇或聚乙二醇)；糖醇(例如甘露醇和山梨醇)；悬浮剂；表面活性剂或湿润剂(例如帕洛沙姆、PEG、脱水山梨醇酯、聚山梨酸酯如聚山梨酸酯20、聚山梨酸酯80、曲拉通(triton)、氨基丁三醇(tromethamine)、卵磷脂、胆固醇、泰洛沙泊(tyloxapal)；稳定性提高试剂(例如蔗糖和山梨醇)；张力增强试剂(例如碱金属卤化物，优选氯化钠或氯化钾、甘露醇、山梨醇)；给药载体；稀释剂；赋形剂和/或药物辅助剂。(Remington′s Pharmaceutical Sciences，18th Edition，A.R.Gennaro，ed.，Mack Publishing Company(1990).

[0109]在特定实施方案中用本领域所知的半衰期延长载体将抗体和/或添加的治疗分子连接起来。这种载体包括但不限于F_c区域、聚乙二醇和葡聚糖。这种载体在如美国专利申请系列No.09/428,082和公开的PCT申请说明书No.WO 99/25044中有描述，并据此通过引用结合到本文。

[0110]在特定实施方案中，本领域技术人员可根据如预期给药途径、递药形式和所需剂量来确定最佳药用组合物。参见如Remington的药物科学(Remington′s Pharmaceutical Sciences，supra)。在特定实施方案中这些组合物可影响本发明抗体的物理状态、稳定性、体内释放速率和体内清除速率。

[0111]在特定实施方案中，药用组合物中的主要媒介或载体性质可以是水性或非水性。例如，在特定实施方案中合适的媒介或载体可以是注射用水、生理盐水溶液或人工脑脊液，也可在组合物中补充其它常用物质用以肠胃外投药。在特定实施方案中，中性缓冲盐水或盐水与血清白蛋白的混合液是另外的示例性载体。在特定实施方案中药用组合物含有pH值约7.0-8.5的Tris缓冲液或pH值约4.0-5.5醋酸盐缓冲液，还可进一步包含山梨醇或合适的替代物。添加的药用载体包括但不限于油，包括石油、动物油、植物油、花生油、豆油、矿物油、芝麻油等。葡萄糖和甘油水溶液也可被用作液体载体，尤其是用作注射液。在特定实施方案中，含有抗体的组合物有或没有至少一种附加的治疗剂，其制备可通过将选出的具有所需纯度的组合物与任选配方剂(Remington′s Pharmaceutical Sciences，supra)混合，并制成冻干块或水溶液来储存。此外在特定实施方案中可使用合适的辅料例如蔗糖将含有抗体(有或没有至少一种附加的治疗剂)的混合物用冻干法按配方制造。

[0112]在特定实施方案中可选出用以胃肠外给药的药用组合物。在特定实施方案中可选出用以吸入或通过消化道例如口腔递药的药用组合物。这种药学上可接受的组合物的制备在本领域技术范围内。

[0113]在特定实施方案中制剂成分在给药部位以可接受的浓度存在。在特定实施方案中使用缓冲液来维持组合物在生理pH或稍低的pH，典型的保持在约pH5-8之间。

[0114]在特定实施方案中当打算胃肠外给药时，治疗组合物的形式可以是在药学可行的载体中无热原且含有所需抗体，有或无附加治疗剂的注射用水溶液。在特定实施方案中用以注射的载体是无菌蒸馏水，无或有至少一种附加的治疗剂的抗体按配方制备成适于保藏的无菌等渗溶液。在特定实施方案中制备可包括所需分子和介质的配制，这种介质例如注射用的微球体、可生物蚀解颗粒、聚合化合物(例如聚乳酸和聚乙醇酸)、珠子或脂质体，提供产物的控释或缓释，然后可通过长效注射来给药。在特定实施方案中也可使用透明质酸，它可产生增加循环中持续时间的作用。在特定实施方案中可使用可移植的给药设备来导入所需分子。

[0115]在特定实施方案中药用组合物可制成吸入剂。在特定实施方案中可将抗体(有或没有至少一种附加的治疗剂)制成干粉形式用以吸入。在特定实施方案中可将含有抗体(有或没有至少一种附加的治疗剂)的吸入溶液与一种喷射剂一起配成气雾剂来给药。在特定实施方案中溶液可制成喷雾。此外PCT公布说明书No.PCT/US94/001875描述了化学修饰蛋白的肺部给药。

[0116]在特定实施方案中可以考虑口服给予制剂。在特定实施方案中通过这种方式给药的抗体(无或有至少一种附加的治疗剂)可以与或不与那些通常用在配制固体剂型中的载体(例如药片或胶囊)一起配制。在特定实施方案中，可对胶囊加以涉及以使制剂的活性部分在胃肠道中某一点释放时使生物利用度最大化而体循环前的降解最小化。在特定实施方案中可包含至少一种附加治疗剂以促进抗体和/或任何附加治疗剂的吸收。在特定实施方案中也可使用稀释剂、调味剂、低熔点蜡、植物油、润滑剂、悬浮剂、药片崩解剂和粘合剂。

[0117]在特定实施方案中药用组合物可含有治疗上有效量的抗体(有或没有至少一种附加的治疗剂)，处于适合制成药片的无毒辅料混合物中。在特定实施方案中通过将药片溶解在无菌水或另一合适载体中，可制成单位剂量形式的溶液。在特定实施方案中合适的赋形剂包括但不限于惰性稀释剂，例如碳酸钙、碳酸钠或碳酸氢钠、乳酸、磷酸钙；粘合剂，例如淀粉、明胶、阿拉伯胶；润滑剂例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。

[0118]另外的药用组合物包括制剂对本领域技术人员而言是显而易见的，该制剂含有抗体及无或有至少一种附加的治疗剂，制成缓释或控释给药制剂。在特定实施方案中本领域技术人员也了解制成多种其它可缓释或控释给药方法的技术，例如脂质体载体、可生物蚀解微粒或多孔珠和长效注射剂。例如参见PCT公布说明书No.PCT/US93/00829，对多孔多聚微粒聚合物药用组合物的控释给药进行了描述。在特定实施方案中持续释放的制剂可包括成形制品如膜或微胶囊形式的半透性聚合物基质。缓释基质可包括聚酯、水凝胶、聚交酯(U.S.3,773,919和EP 058,481)、L-谷氨酸和γ-乙基-L-谷氨酸共聚物(Sidman et al.，Biopolymers，22：547-556(1983))、聚(2-羟乙基-异丁烯酸酯)(Langer et al.，J.Biomed.Mater.Res.，15：167-277(1981)and Langer，Chem.Tech.，12：98-105(1982))、乙烯醋酸乙烯酯(Langeret al.，supra)或聚(D(-)-3-羟基丁酸)(EP 133,988)。在特定实施方案中缓释组合物也可包括脂质体，可用本领域所知几种方法的任意一种来制备。如参见Eppstein等，Proc.Natl.Acad.Sci，USA，82：3688-3692(1985)；EP 036,676；EP 088,046和EP 143,949。

[0119]在特定实施方案中用以体内给药的药用组合物是无菌的。在特定实施方案中这可通过用无菌滤膜过滤来实现。在特定实施方案中当组合物为冻干形式时，使用这种方法的灭菌操作可在冻干和解冻操作之前或之后进行。在特定实施方案中用来胃肠外给药的组合物可以冻干形式或溶液形式保存。在特定实施方案中胃肠外组合物通常置于一个有无菌入口的容器中，例如静脉内溶液袋和玻璃瓶，瓶子具有皮下注射针头可穿透的塞子。

[0120]在特定实施方案中当药用组合物制备完成后，它可以溶液、混悬液、凝胶、乳剂、固体、脱水或冻干粉形式保存于无菌瓶中。在特定实施方案中这种制剂可以即用形式保存，或以给药前充配的形式(如冻干)保存。

[0121]在特定实施方案中本发明所指的药剂盒用来产生单剂量给药单元。在特定实施方案中每个药剂盒可同时装有第一种存有干蛋白的容器和第二种存有水性制剂的容器。在本发明的特定实施方案中，药剂盒装有预先充填的单和多室注射器(如液体注射器和装有冻干粉和稀释剂的二室注射器(lyosyringes))。

[0122]在特定实施方案中在治疗中使用含有抗体(无或有至少一种附加的治疗剂)的药用组合物有效剂量，可通过如治疗环境和治疗目的来确定。因此本领域技术人员将认识到，依据特定的实施方案合适的治疗剂量水平是变化的，部分依赖于所传递的分子、所用抗体(有或没有至少一种附加的治疗剂)的适应症、给药途径和病人尺寸(体重、身体表面积或器官大小)和/或病人状况(年龄和总体健康)。在特定实施方案中临床医生可测定剂量并修改给药途径以得到最佳治疗效果。在特定实施方案中典型剂量范围依赖于上述因素可从0.1μg/kg至约100mg/kg或更高。在特定实施方案中剂量范围可从0.1μg/kg到约100mg/kg；或1μg/kg到约100mg/kg；或5μg/kg到约100mg/kg。

[0123]在特定实施方案中根据配方中所用抗体和/或任何附加的治疗剂的药物动力学参数来确定给药频率。在特定实施方案中临床医生开出组合物处方直至得到所需效果。因此在特定实施方案中组合物可单剂量给药，或随着时间进行双剂量或更多次剂量给药(可含有相同量或不同量所需分子)，或者通过植入装置或导管进行连续输注。适当剂量的进一步精确化由本领域技术人员按常规进行，并且这也在他们例行任务的范围内。在特定实施方案中可通过使用合适的剂量-反应数据来确定合适的剂量。

[0124]在特定实施方案中药用组合物的给药途径与已知方法一致，例如口服，通过静脉内、腹膜内、大脑内(脑实质内，intra-parenchymal)、脑室内(intracerebroventricular)、肌肉内、眼内、脉管内、门脉内(intraportal)或病灶内(intralesional)注射途径；通过缓释系统或植入装置给药。在特定实施方案中组合物的给药可通过单次快速静脉注射或持续输注给药，或通过植入装置给药。

[0125]在特定实施方案中可通过植入吸收或包裹了所需分子的膜、纱布或其他合适材料来进行局部给药。在特定实施方案中当使用植入装置时，该装置可被移植到任何合适的组织或器官中，可以扩散、时控释放丸剂或连续给药方式来传递所需分子。

[0126]在特定实施方案中可能需要以先体外后体内方式使用含有抗体(有或没有至少一种附加的治疗剂)的药用组合物。在这种情况下，从病人体内取出的细胞、组织和/或器官暴露于含有抗体(有或没有至少一种附加的治疗剂)的药用组合物，然后将该细胞、组织和/或器官重移植回病人体内。

[0127]在特定实施方案中可使用如本文所述的方法来对某种细胞进行遗传设计，使其表达并分泌多肽，然后通过植入该细胞来传递抗体和/或任何附加的治疗剂。在特定实施方案中这种细胞可以是动物细胞或人细胞，同时可以是自身细胞、异源或异种细胞。在特定实施方案中这种细胞可以是无限增殖的。在特定实施方案中为了降低发生免疫反应的几率，可将这种细胞进行包囊以避免周围组织的渗透。在特定实施方案中这种包囊材料是典型的生物相容半透性聚合物外壳(enclosures)或膜，使蛋白产物得以释放又阻止了病人免疫系统或周围组织的其它有害因子对细胞的损伤。

                          实施例

                          实施例1

从食蟹猴序列中克隆重链恒定区

[0128]如下文所述克隆食蟹猴天然抗体重链恒定区的多核苷酸。

[0129]A.为得到cyno3-16恒定区，从食蟹猴全血中纯化的食蟹猴B细胞中分离RNA。从该RNA合成cDNA，将此cDNA作为模板，用以下引物5-′GCCTCCACCAAGGGCCCTCG-3′(SEQ ID NO：31)和5′-TTTACCCGGAGACAGGGAGAG-3′(SEQ ID NO：32)进行PCR。使用Expand High Fidelity PCR System(Roche)并添加5％DMSO进行PCR。样品先在94℃温育2min；然后是40个循环，每个循环在以下条件进行：94℃30s，45℃或50℃30s，72℃1min或1.5min。样品在最后一个PCR循环后再于72℃温育7min。所用PCR引物浓度为30pmol，所用模板cDNA为2μl。

[0130]B.为得到cyno2-4和cyno33恒定区，从食蟹猴B细胞的细胞系分离的基因组DNA作为PCR模板。使用两套不同引物来扩增这些cyno IgG恒定区。5′-GCCTCCACCAAGGGCCCTCG-3′(SEQ IDNO：33)和5′-TTTACCCGGAGACAGGGAGAG-3′(SEQ ID NO：34)用来扩增cyno2-4，5′-GTCACATGGCACCACCTCTCT-3′(SEQ IDNO：35)和5′-GGTACGTGCCAAGCATCCTCG-3′(SEQ ID NO：36)用来扩增cyno33。如实施例1A所述进行PCR反应，只不过使用1μl基因组DNA作为模板。

[0131]在初始克隆之后，通过在合适的PCR引物中引入一个Nhe I或Not I限制性酶切位点，将每个编码食蟹猴恒定区的多核苷酸构建成一个Nhe I-Not I盒。具体说，在每个恒定区的5’端导入一个Nhe I位点，来进行核苷酸修饰。这没有改变氨基酸序列。在终止密码子3’端直接导入一个Not I位点。

[0132]C.通过在编码cyno2-4序列的多核苷酸上进行定点突变PCR来构建cyno2-4cys恒定区。使用QuikChange Site-Directed MutagenesisKit(Stratagene)进行定点突变。通过引入一个单点突变将C_H1区的第三个丝氨酸变成半胱氨酸。所用引物为，5′-CTGGCGTCCTGCTCCAGGAGC-3′(SEQ ID NO：37)和5′-GCTCCTGGAGCAGGACGCCAG-3′(SEQ ID NO：38)。

[0133]D.cynods1恒定区包含cyno33和cyno2-4恒定区序列。如上实施例1A所述进行PCR扩增得到编码cyno33 C_H1区1到94位氨基酸的多核苷酸，通过使用本领域已知方法在引物中引入Nhe I和SalI位点来产生Nhe I-Sal I盒。所用引物为5′-GCTAGCACCAAGGGCCCATCGGTCTT-3′(SEQ ID NO：39)和5′-AACTGTCTTGTCGACCTTGGTGTTG-3′(SEQ ID NO：40)。通过如上实施例1A所述进行PCR来扩增编码cyno2-4 C_H1区、铰链区、C_H2区和C_H3区的多核苷酸3’末端，以产生一个Sal I-Not I盒，所用引物为5’-CAACACCAAGGTCGACAAGAGAGTT-3’(SEQ ID NO：41)和5’-GCGGCCGCTCATTTACCCGGAGACACGGAG-3’(SEQ ID NO：42)。Sal I位点的导入不改变多肽序列。将Nhe I-Sal I盒和Sal I-Not I盒连接在一起，得到编码cynods1恒定区的多核苷酸序列。所得构建体含有cyno33的C_H1区域，只不过C_H1区倒数第二个氨基酸发生了T到R转换。铰链区、C_H2和C_H3区由cyno2-4多核苷酸序列编码。

[0134]E.为得到cyno686和cyno439恒定区，从食蟹猴混合淋巴组织中分离RNA，并藉此制备一个cDNA文库。以该cDNA为模板，用引物5′-CGTCTCTAGTGCCTCCACCAAGGGCCCATC-3′(SEQ IDNO：43)和5′-GCATGTCGACTCATTTACCCGGAGACAGGGAGAG-3′(SEQ ID NO：44)进行PCR。PCR反应混合物包括浓度为5pmol/μl的两种引物各2μl；5μl Stratagene 10×Pfu缓冲液；10nmoldNTPs(A，C，G，T)混合液0.5μl；2.5U/μl Stratagene Pfupolymerase 0.5μl；1μl cDNA模板；和39μl无菌水。反应液终体积为50μl。用以下参数进行28个PCR循环，每个循环为94℃20s，60℃30s，74℃150s。使用Invitrogen PCRII TOPO-TA克隆系统(K4600-01SC)按系统提供的说明书进行PCR产物克隆。

[0135]可根据上述通用方法进行附加重链恒定区的分离。按上述方法制备的cyno3-16、cyno2-4、cyno33、cyno2-4cys、cynods克隆和附加克隆可进行核酸序列和氨基酸序列相似性比较。如见图16和17。

                          实施例2

食蟹猴序列轻链恒定区的克隆

[0136]从食蟹猴B细胞的细胞系克隆编码食蟹猴轻链κ恒定区的天然多核苷酸。从该细胞系分离RNA，并由此RNA合成cDNA。cDNA被用作PCR模板，引物为5′-ATCAAACGAGCTGTGGCTGCACCA-3′(SEQ ID NO：45)和5′-CAGGTGGGGGCACTTCTCCCT-3′(SEQID NO：46)。使用Expand High Fidelity PCR System(Roche)并添加5％DMSO进行PCR。样品先于94℃温育2min；然后进行40个循环，每个循环在以下条件中进行：94℃30s，45℃30s，72℃1min。样品在最后一个PCR循环后再于72℃温育7min。所用PCR引物浓度为30pmol，使用2μl的cDNA制品。

[0137]初始克隆之后，通过PCR将编码食蟹猴κ恒定区的多核苷酸构建成一个BssH II-Not I盒。在恒定区的5’末端引入一个BssH II位点来进行核苷酸修饰。这并不改变氨基酸序列。在终止密码子3’端引入一个Not I位点。

                          实施例3

嵌合重链和轻链的装配及嵌合抗体的生产

嵌合重链

[0138]制备的全长重链分子包含重链可变区和食蟹猴恒定区。通过PCR合成编码可变区的多核苷酸，以产生一个Sal I-Nhe I盒或一个Sal I-Apa I盒。这两种盒均包含Kozak序列和可变区编码序列5’的前导序列。Sal I-Apa I盒的3’末端包含有编码食蟹猴恒定区的前5个氨基酸的核酸。某些示例性嵌合重链可用图18提供的重链可变序列制备。

[0139]为制备cyno3-16重链质粒，将Sal I-Apa I可变区盒连接到实施例1A所述的食蟹猴恒定区盒的Apa I位点，位于自恒定区起点后的5个氨基酸。所得构建体插入到瞬时表达载体pDC414-N的Sal I和Not I位点之间。

[0140]为制备cyno33重链质粒，将Sal I-Apa I可变区盒连接到实施例1B所述的食蟹猴恒定区盒的Apa I位点，位于自恒定区起点后的5个氨基酸。所得构建体插入到瞬时表达载体pDC414-N的Sal I和Not I位点之间。

[0141]为制备cyno2-4重链质粒，将Sal I-Nhe I可变区盒连接到实施例1B所述的食蟹猴恒定区盒编码多核苷酸的Nhe I位点。所得构建体插入到pDC414-N的Sal I和Not I位点之间。

[0142]为制备cynodsl重链质粒，将Sal I-Nhe I可变区盒连接到实施例1D所述的食蟹猴恒定区盒编码多核苷酸的Nhe I位点。所得构建体也插入到pDC414-N的Sal I和Not I位点之间。

[0143]pDC414-N是修饰过的pDC412(Ettehadieh et al.，Cytotechnology 38：11-14(2002))。pDC414-N含有Epstein-Barr复制起点(Shirakata and Hirai，J.Biochem.123：175-181(1998))最低限度的120bp序列，取代了pDC412中2.1kb的Epstein-Barr复制起点。pDC414-N载体骨架中也除去了Nhe I位点。

[0144]为制备cyno2-4cys重链质粒，将Sal I-Nhe I可变区盒连接到实施例1C所述的cyno2-4cys恒定区编码多核苷酸的Nhe I位点。所得构建体插入到pDC409(Giri et al.，EMBO J.13：2822-2830(1994))的Sal I和Not I位点之间。

嵌合轻链

[0145]制备的全长轻链分子含有轻链可变区和食蟹猴恒定区。通过PCR将可变区合成为Sal I-BssH II盒。该盒包含Kozak和可变区5’的前导序列。依据各种实施方案，可将任何物种的任何轻链可变区与食蟹猴重链恒定区结合。某些示例性嵌合轻链可用图19提供的轻链可变序列制备。

[0146]为了制备轻链质粒，将Sal I-BssH II可变区盒连接到实施例2所述的Not I-BssH II恒定区盒的BssH II位点。所得Sal I-Not I盒插入到pDC414-N的Sal I和Not I位点之间。依据本领域所熟知的过程，构建这些嵌合重链和轻链的方法必需酶切、连接和转化到细菌宿主细胞内。

嵌合抗体的制备

[0147]使用Ettehadieh et al.(Cytotechnology 38：11-14(2002))所述方法将嵌合食蟹猴重链和轻链质粒共转染到E5细胞内，以进行抗体的瞬时表达。通常使用DEAE/葡聚糖处理并随后用DMSO休克细胞来进行转染。转染后，这些细胞在含有0.5％胎牛血清的低血清培养基上生长7d。从细胞上清中纯化抗体。

[0148]先用PBS(pH 7.4磷酸盐缓冲液)平衡4.6×100mm蛋白A树脂柱(POROS20 A，Perseptive Biosystems)后，上清以10ml/min的流速过柱。收集流出液。用40ml pH 7.4PBS洗涤柱子，并用15ml 0.1MGlycine pH 2.7+0.3M NaCl溶液洗脱蛋白，收集15×1-ml的流分。使用100μl 1.0M pH 8.0的Tris液中和流分。

[0149]使用蛋白200plus lab chip kit(Agilent)来制备样品，并按制造厂家的说明运行Agilent 2100生物分析仪和蛋白200检测仪。对含有cyno3-16、cyno33和cyno2-4的抗体，用3μl PBS和1μl抗体样品混合。对含有cyno2-4cy和cynods1的抗体，使用4μl抗体样品。这4μl样品然后与2μl变性、非还原性溶液混合。该样品在100℃下加热3min，然后用84μl蒸馏水稀释。取这些稀释样品6μl用于实验室芯片，以分析存在的抗体。

[0150]另一选择是，可按本领域标准方法在SDS-PAGE凝胶上分析样品。嵌合轻链分子量约为23.3kDa，嵌合重链分子量约为49.7kDa。在SDS-PAGE凝胶上，这些嵌合轻链分子量约为29kDa，嵌合重链分子量约为53kDa。

[0151]用透析或用过滤单位大于10k的离心超滤器(AmiconCentricon Plus 10k MWCO)(产品号UFC2LGC24)于4℃3000rpm离心，将含有抗体的流分转移到pH 7.2或6.8的PBS中。转移到PBS后，用22μm滤膜对样品进行无菌过滤。

                          实施例4

测量嵌合抗体对抗原表位的结合能力

[0152]为测试某些示例性抗体的活性，对它们进行活性试验，以期阻断IL4和IL13对B细胞上CD23的诱导。如参见T.Defrance等(JExp Med 165：1459(1987))和J.Punnonen等(Proc.Nat.Acad.Sci.90：3730-34(1993))，各自描述了IL 4和IL 13对B细胞上CD23的诱导。在活性试验中，将抗体滴定到含有IL 4的B细胞培养液中。用检测细胞表面CD23的荧光抗体进行FACS分析，来测量对CD23表达的抑制作用。

                          实施例5

测量嵌合抗体的F_c结合能力

[0153]将稀释两倍后的浓度为20mg/ml(nM)的嵌合抗体滴加到PBS中稀释6倍，用过量(1mM)生物素酰化的可溶hulL-4R(用氨基己酰-生物素-N-羟基-琥珀酸酰亚胺酯制得(Zymed cat.no.004302))4℃下预温育30min。按制造厂家的说明用氨基己酰-生物素-N-羟基-琥珀酸酰亚胺酯制得生物素酰化的可溶hulL-4R(Zymed cat.no.004302)。这个试验适用于任何嵌合抗体及其识别的抗原。T细胞移除的外周血单核细胞(PBMC)在无血清RPMI中37℃温育1h，使结合F_cR的嗜细胞IgG脱落。然后滴加复合的抗hulL-4R ab/生物素-hulL-4R使细胞染色。在PBS中洗涤细胞两次，以150×g转速离心。然后此细胞与链霉亲和素-藻红蛋白(Molecular Probes，cat.no.S-866)(在PBS中以1∶150稀释)在4℃下温育30min。在PBS中洗涤细胞两次，以150×g转速离心。然后通过流式细胞分析法对单核细胞大小设置门控从而探测复合体结合情况。

                                    序列表

<110>AMGEN INC.

     Aldrich，Teri

     Shen，Wenyan

     Jacobsen，Frederick W.

     Morris，Arvia E.

     Allen，Martin J.

<120>Monkey Immunoglobulin Sequences

<130>A-951

<140>--to be assigned

<141>2004-11-04

<150>US 60/517,970

<151>2003-11-07

<160>86

<170>PatentIn version 3.2

<210>1

<211>999

<212>DNA

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>1

gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcgccct cctccaggag cacctccgag     60

agcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ctgaacccgt gaccgtgtcg    120

tggaactcag gctccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca    180

gggctctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc    240

tacgtctgca acgtaaacca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagata    300

aaaacatgtg gtggtggcag caaacctccc acgtgcccac cgtgcccagc acctgaactc    360

ctggggggac cgtcagtctt cctcttcccc ccaaaaccca aggacaccct catgatctcc    420

cggacccctg aggtcacgtg cgtggtggta gacgtgagcc aggaagaccc cgatgtcaag    480

ttcaactggt acgtaaatgg cgcggaggtg catcatgccc agacgaagcc acgggagacg    540

cagtacaaca gcacatatcg tgtggtcagc gtcctcaccg tcacgcacca ggactggctg    600

aacggcaagg agtacacgtg caaggtctcc aacaaagccc tcccggcccc catccagaaa    660

accatctcca aagacaaagg gcagccccga gagcctcagg tgtacaccct gcccccgtcc    720

cgggaggagc tgaccaagaa ccaggtcagc ctgacctgcc tggtcaaagg cttctacccc    780

agcgacatcg tcgtggagtg ggagagcagc gggcagccgg agaacaccta caagaccacc    840

ccgcccgtgc tggactccga cggctcctac ttcctctaca gcaagctcac cgtggacaag    900

agcaggtggc agcaggggaa cgtcttctca tgctccgtga tgcatgaggc tctgcacaac    960

cactacaccc agaagagcct ctccctgtct ccgggtaaa                           999

<210>2

<211>333

<212>PRT

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>2

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Arg

1               5                   10                  15

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

            20                  25                  30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ser Leu Thr Ser

        35                  40                  45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

    50                  55                  60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr

65                  70                  75                  80

Tyr Val Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

                85                  90                  95

Arg Val Glu Ile Lys Thr Cys Gly Gly Gly Ser Lys Pro Pro Thr Cys

            100                 105                 110

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

        115                 120                 125

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

    130                 135                 140

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Asp Val Lys

145                 150                 155                 160

Phe Asn Trp Tyr Val Asn Gly Ala Glu Val His His Ala Gln Thr Lys

                165                 170                 175

Pro Arg Glu Thr Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

            180                 185                 190

Thr Val Thr His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Thr Cys Lys

        195                 200                 205

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Gln Lys Thr Ile Ser Lys

    210                 215                 220

Asp Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

225                 230                 235                 240

Arg Glu Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

                245                 250                 255

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Val Val Glu Trp Glu Ser Ser Gly Gln

            260                 265                 270

Pro Glu Asn Thr Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly

        275                 280                 285

Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

    290                 295                 300

Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

305                 310                 315                 320

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

                325                 330

<210>3

<211>1581

<212>DNA

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>3

gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcgtcct gctccaggag cacctcccag     60

agcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaacccgt gaccgtgtcg    120

tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc aggctgtcct acagtcctca    180

gggctctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cactcagacc    240

tacgtctgca acgtcgttca tgagcccagc aacaccaagg tggacaagac agttggtgag    300

aggccagcga gggaaggggg gtgtctgctg gaagccaggc tcggccctcc tgcctggaca    360

aactctggct gtgcagcccc agcccagggc agcagggcag gccccgtctg tcttctcacc    420

cagaggcctc tgcccacccc actcatgctc agggagccag tcttctggct ttttccacca    480

ggctctgagc aggcacaggc tggatgcccc taccccaggc cctgcacaca caggggcagg    540

tgctgggctc agacctgcca agagccatat ctgggaggac cctgccctga cctaagccca    600

ccccaaaggc caaactccac tccctcagct cagacacctt ctctcctccc acatcccagt     660

aactcccaat cttctctctg cagggctccc atgtcgttcc acgtgcccac cgtgcccagg     720

taagccagcc caggcctcac cctccagctc aaggtgggac aagcgcccta gagtggcctg     780

tgtccaggga caggccctgc ccgggtgctg acacgtccac ctccatctct tcctcagctg     840

aactcctggg gggaccgtca gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga     900

tttcccggac ccctgaggtc acgtgcgtgg tggtagacgt gagccaggaa gaacccgatg     960

tcaagttcaa ctggtacgtg gacggcgtgg aggtgcacaa tgcccagacg aagccacggg    1020

aggagcagtt caacagcacg taccgcgtgg tcagcgtcct caccgtcaca caccaggact    1080

ggctgaacgg caaggagtac acgtgcaagg tctccaacaa agccctcccg gccccaaagc    1140

agaaaactgt ctccaaaacc aaaggtggga cccgcggggc acgagggcca cgtggacaga    1200

ggccggctca gcccaccctc tgccctggga gtgaccgctg tgccaacctc tgtccctaca    1260

gggcagcccc gagagccaca ggtgtacacc ctgcccccgc cccgggagga gctgaccaag    1320

aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctacc ccagcgacat cgtcgtggag    1380

tgggcgagca acgggcagcc ggagaacacc tacaagacca ccccgcccgt gctggactcc    1440

gacggctcct acttcctcta cagcaagctc accgtggaca agagcaggtg gcagcagggg    1500

aacaccttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac ccagaagagc    1560

ctctccgtgt ctccgggtaa a                                              1581

<210>4

<211>326

<212>PRT

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>4

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Ser Cys Ser Arg

1               5                   10                  15

Ser Thr Ser Gln Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

            20                  25                  30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

        35                  40                  45

Gly Val His Thr Phe Gln Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

    50                  55                  60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr

65                  70                  75                  80

Tyr Val Cys Asn Val Val His Glu Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

                85                  90                  95

Thr Val Gly Leu Pro Cys Arg Ser Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Glu

            100                 105                 110

Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp

        115                 120                 125

Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp

    130                 135                 140

Val Ser Gln Glu Glu Pro Asp Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly

145                 150                 155                 160

Val Glu Val His Asn Ala Gln Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn

                165                 170                 175

Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Thr His Gln Asp Trp

            180                 185                 190

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Thr Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro

        195                 200                 205

Ala Pro Lys Gln Lys Thr Val Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu

    210                 215                 220

Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Pro Arg Glu Glu Leu Thr Lys Asn

225                 230                 235                 240

Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile

                245                 250                 255

Val Val Glu Trp Ala Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Thr Tyr Lys Thr

            260                 265                 270

Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys

        275                 280                 285

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Thr Phe Ser Cys

    290                 295                 300

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu

305                 310                 315                 320

Ser Val Ser Pro Gly Lys

                325

<210>5

<211>1579

<212>DNA

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>5

gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcgtcct cctccaggag cacctccgag      60

agcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaacccgt gactgtgtcg     120

tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca     180

gggctctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc     240

tacgtctgca acgtcgttca tgagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttggtgag     300

aggccagcga gggaggggga gtgtctgctg gaagccatgc tcggccctcc tgcctggaca     360

aaccctggct gtgcagcccc agcccagggc agcagggcag gcccggtctg tctcctcacc     420

cagaggcctc tgcccacccc actcatgctc agggagacag tcttctggct ttttccacca     480

gactccgagc aggcacaggc tggatgcccc taccccaggc tctgcacaca taggggctgg     540

tgctgggctc agacctgcca agagccatat ctgggaggac cctgctcctg acctaagccc     600

accccaaagg ccaaactcca ctccctcagc tcggaaacct tctctcctac cagatcccag     660

taactcccaa tcttctctct gcagagttca cacccccatg cccaccatgc ccaggtaagc     720

cagcccaggc ctcgccctcc agctcaaggt gggacaagtg ccctagagtg gcctgtgtcc     780

agggacaggc cccgcctggg tgctgacatg cccacctcca tctcttcctc agcacctgaa     840

ctcctggggg gaccgtcagt cttcctcttc cccccaaaac ccaaggacac cctcatgatc     900

tcccggaccc ctgaggtcac atgcgtggtg gtggacgtga gccaggaaga ccccgaggtc     960

cagttcaact ggtacgtgga cggcgtggag gtgcatcatg cccagacgaa gccacgggag    1020

aggcagttca acagcacgta ccgcgtggtc agcgtcctca ccgtcacaca ccaggactgg    1080

ctgaacggca aggagtacac gtgcaaggtc tccaacaaag gcctcccggc ccccatcgag    1140

aaaaccatct ccaaagccaa aggtgggacc cgcggggccc gagggccacg tggacagagg    1200

ccggctcagc ccaccctctg ccctgggagt gaccgctgtg ccaacctctg tccctacagg    1260

gcagccccga gagccgcagg tgtacatcct gcccccgccc caggaggagc tgaccaagaa    1320

ccaggtcagc ctgacctgcc tggtcacagg cttctacccc agcgacatcg ccgtggagtg    1380

ggagagcaac gggcagccgg agaacaccta caagaccacc ccgcccgtgc tggactccga    1440

cggctcctac ttcctctaca gcaagctcat cgtggacaag agcaggtggc agcaggggaa    1500

caccttctca tgctccgtga tgcatgaggc tctgcacaac cactacaccc agaagagcct    1560

ctccctgtct ccgggtaaa                                                 1579

<210>6

<211>325

<212>PRT

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>6

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Ser Ser Ser Arg

1               5                   10                  15

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

            20                  25                  30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

        35                  40                  45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

    50                  55                  60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr

65                  70                  75                  80

Tyr Val Cys Asn Val Val His Glu Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

                85                  90                  95

Arg Val Glu Phe Thr Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu

            100                 105                 110

Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr

        115                 120                 125

Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val

    130                 135                 140

Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val

145                 150                 155                 160

Glu Val His His Ala Gln Thr Lys Pro Arg Glu Arg Gln Phe Asn Ser

                165                 170                 175

Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Thr His Gln Asp Trp Leu

            180                 185                 190

Asn Gly Lys Glu Tyr Thr Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala

        195                 200                 205

Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro

    210                 215                 220

Gln Val Tyr Ile Leu Pro Pro Pro Gln Glu Glu Leu Thr Lys Asn Gln

225                 230                 235                 240

Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala

                245                 250                 255

Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Thr Tyr Lys Thr Thr

            260                 265                 270

Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu

        275                 280                 285

Ile Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Thr Phe Ser Cys Ser

    290                 295                 300

Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser

305                 310                 315                 320

Leu Ser Pro Gly Lys

                325

<210>7

<211>1579

<212>DNA

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>7

gctagcacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcgtcct gctccaggag cacctccgag     60

agcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaacccgt gactgtgtcg    120

tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca    180

gggctctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc    240

tacgtctgca acgtcgttca tgagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttggtgag    300

aggccagcga gggaggggga gtgtctgctg gaagccatgc tcggccctcc tgcctggaca    360

aaccctggct gtgcagcccc agcccagggc agcagggcag gcccggtctg tctcctcacc    420

cagaggcctc tgcccacccc actcatgctc agggagacag tcttctggct ttttccacca    480

gactccgagc aggcacaggc tggatgcccc taccccaggc tctgcacaca taggggctgg    540

tgctgggctc agacctgcca agagccatat ctgggaggac cctgctcctg acctaagccc    600

accccaaagg ccaaactcca ctccctcagc tcggaaacct tctctcctac cagatcccag     660

taactcccaa tcttctctct gcagagttca cacccccatg cccaccatgc ccaggtaagc     720

cagcccaggc ctcgccctcc agctcaaggt gggacaagtg ccctagagtg gcctgtgtcc     780

agggacaggc cccgcctggg tgctgacatg cccacctcca tctcttcctc agcacctgaa     840

ctcctggggg gaccgtcagt cttcctcttc cccccaaaac ccaaggacac cctcatgatc     900

tcccggaccc ctgaggtcac atgcgtggtg gtggacgtga gccaggaaga ccccgaggtc     960

cagttcaact ggtacgtgga cggcgtggag gtgcatcatg cccagacgaa gccacgggag    1020

aggcagttca acagcacgta ccgcgtggtc agcgtcctca ccgtcacaca ccaggactgg    1080

ctgaacggca aggagtacac gtgcaaggtc tccaacaaag gcctcccggc ccccatcgag    1140

aaaaccatct ccaaagccaa aggtgggacc cgcggggccc gagggccacg tggacagagg    1200

ccggctcagc ccaccctctg ccctgggagt gaccgctgtg ccaacctctg tccctacagg    1260

gcagccccga gagccgcagg tgtacatcct gcccccgccc caggaggagc tgaccaagaa    1320

ccaggtcagc ctgacctgcc tggtcacagg cttctacccc agcgacatcg ccgtggagtg    1380

ggagagcaac gggcagccgg agaacaccta caagaccacc ccgcccgtgc tggactccga    1440

cggctcctac ttcctctaca gcaagctcat cgtggacaag agcaggtggc agcaggggaa    1500

caccttctca tgctccgtga tgcatgaggc tctgcacaac cactacaccc agaagagcct    1560

ctccgtgtct ccgggtaaa                                                 1579

<210>8

<211>325

<212>PRT

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>8

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Ser Cys Ser Arg

1               5                   10                  15

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

            20                  25                  30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

        35                  40                  45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

    50                  55                  60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr

65                  70                  75                  80

Tyr Val Cys Asn Val Val His Glu Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

                85                  90                  95

Arg Val Glu Phe Thr Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu

            100                 105                 110

Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr

        115                 120                 125

Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val

    130                 135                 140

Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val

145                 150                 155                 160

Glu Val His His Ala Gln Thr Lys Pro Arg Glu Arg Gln Phe Asn Ser

                165                 170                 175

Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Thr His Gln Asp Trp Leu

            180                 185                 190

Asn Gly Lys Glu Tyr Thr Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala

        195                 200                 205

Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro

    210                 215                 220

Gln Val Tyr Ile Leu Pro Pro Pro Gln Glu Glu Leu Thr Lys Asn Gln

225                 230                 235                 240

Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala

                245                 250                 255

Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Thr Tyr Lys Thr Thr

            260                 265                 270

Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu

        275                 280                 285

Ile Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Thr Phe Ser Cys Ser

    290                 295                 300

Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser

305                 310                 315                 320

Val Ser Pro Gly Lys

                325

<210>9

<211>1579

<212>DNA

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>9

gctagcacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcgtcct gctccaggag cacctcccag      60

agcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaacccgt gaccgtgtcg     120

tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc aggctgtcct acagtcctca     180

gggctctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cactcagacc     240

tacgtctgca acgtcgttca tgagcccagc aacaccaagg tcgacaagag agttggtgag     300

aggccagcga gggaggggga gtgtctgctg gaagccatgc tcggccctcc tgcctggaca     360

aaccctggct gtgcagcccc agcccagggc agcagggcag gcccggtctg tctcctcacc     420

cagaggcctc tgcccacccc actcatgctc agggagacag tcttctggct ttttccacca     480

gactccgagc aggcacaggc tggatgcccc taccccaggc tctgcacaca taggggctgg     540

tgctgggctc agacctgcca agagccatat ctgggaggac cctgctcctg acctaagccc     600

accccaaagg ccaaactcca ctccctcagc tcggaaacct tctctcctac cagatcccag     660

taactcccaa tcttctctct gcagagttca cacccccatg cccaccatgc ccaggtaagc     720

cagcccaggc ctcgccctcc agctcaaggt gggacaagtg ccctagagtg gcctgtgtcc     780

agggacaggc cccgcctggg tgctgacatg cccacctcca tctcttcctc agcacctgaa     840

ctcctggggg gaccgtcagt cttcctcttc cccccaaaac ccaaggacac cctcatgatc     900

tcccggaccc ctgaggtcac atgcgtggtg gtggacgtga gccaggaaga ccccgaggtc     960

cagttcaact ggtacgtgga cggcgtggag gtgcatcatg cccagacgaa gccacgggag    1020

aggcagttca acagcacgta ccgcgtggtc agcgtcctca ccgtcacaca ccaggactgg    1080

ctgaacggca aggagtacac gtgcaaggtc tccaacaaag gcctcccggc ccccatcgag    1140

aaaaccatct ccaaagccaa aggtgggacc cgcggggccc gagggccacg tggacagagg    1200

ccggctcagc ccaccctctg ccctgggagt gaccgctgtg ccaacctctg tccctacagg    1260

gcagccccga gagccgcagg tgtacatcct gcccccgccc caggaggagc tgaccaagaa    1320

ccaggtcagc ctgacctgcc tggtcacagg cttctacccc agcgacatcg ccgtggagtg    1380

ggagagcaac gggcagccgg agaacaccta caagaccacc ccgcccgtgc tggactccga    1440

cggctcctac ttcctctaca gcaagctcat cgtggacaag agcaggtggc agcaggggaa    1500

caccttctca tgctccgtga tgcatgaggc tctgcacaac cactacaccc agaagagcct    1560

ctccgtgtct ccgggtaaa                                                 1579

<210>10

<211>325

<212>PRT

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>10

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Ser Cys Ser Arg

1               5                   10                  15

Ser Thr Ser Gln Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

            20                  25                  30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

        35                  40                  45

Gly Val His Thr Phe Gln Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

    50                  55                  60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr

65                  70                  75                  80

Tyr Val Cys Asn Val Val His Glu Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

                85                  90                  95

Arg Val Glu Phe Thr Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu

            100                 105                 110

Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr

        115                 120                 125

Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val

    130                 135                 140

Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val

145                 150                 155                 160

Glu Val His His Ala Gln Thr Lys Pro Arg Glu Arg Gln Phe Asn Ser

                165                 170                 175

Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Thr His Gln Asp Trp Leu

            180                 185                 190

Asn Gly Lys Glu Tyr Thr Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala

        195                 200                 205

Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro

    210                 215                 220

Gln Val Tyr Ile Leu Pro Pro Pro Gln Glu Glu Leu Thr Lys Asn Gln

225                 230                 235                 240

Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala

                245                 250                 255

Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Thr Tyr Lys Thr Thr

            260                 265                 270

Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu

        275                 280                 285

Ile Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Thr Phe Ser Cys Ser

    290                 295                 300

Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser

305                 310                 315                 320

Val Ser Pro Gly Lys

                325

<210>11

<211>1019

<212>DNA

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>11

cgtctctagt gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggtgtcct gctccaggag     60

cacctccgag agcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaacccgt    120

gaccgtgtcg tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct    180

acagtcctca gggctctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg    240

cacccagacc tacgtctgca acgtcgttca tgagcccagc aacaccaagg tggacaagag    300

agttgagttc acacgcccat gtgatgacac aactccccca tgcccaccgt gcccagcacc    360

tgaactcctg gggggaccgt cagtcttcgt cttcccccca aaacccaagg acaccctcat    420

gatctcccgg acccctgagg tcacgtgcgt ggtggtggac gtgagccagg aagaccccga    480

ggtccagttc aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcac aatgcccaga cgaagccgcg    540

ggagaggcag ttcaacagca catatcgtgt ggtcagcgtc ctcaccgtca cgcaccagga    600

ctggctgaac ggcaaggagt acacgtgcaa ggtctccaac aaagccctcc cggcccccat    660

ccagaaaacc atctccaaag acaaagggca gccccgagag cctcaggtgt acaccctgcc    720

cccgtcccgg gaggagctga ccaagaacca ggtcagcctg acctgcctgg tcaaaggctt    780

ctaccccagc gacatcgtcg tggagtggga gagcagcggg cagccggaga acacctacaa    840

gaccacgccg cccgtgctgg actccgacgg ctcctacttc ctctacagca agctcaccgt    900

ggacaagagc aggtggcagc aggggaacgt cttctcatgc tccgtgatgc atgaggctct    960

gcacaaccac tacacccaga agagcctctc cctgtctccg ggtaaatgag tcgacatgc    1019

<210>12

<211>335

<212>PRT

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>12

Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Val Ser

1               5                   10                  15

Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val

            20                  25                  30

Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala

        35                  40                  45

Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly

    50                  55                  60

Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly

65                  70                  75                  80

Thr Gln Thr Tyr Val Cys Asn Val Val His Glu Pro Ser Asn Thr Lys

                85                  90                  95

Val Asp Lys Arg Val Glu Phe Thr Arg Pro Cys Asp Asp Thr Thr Pro

            100                 105                 110

Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val

        115                 120                 125

Phe Val Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr

    130                 135                 140

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu

145                 150                 155                 160

Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Gln

                165                 170                 175

Thr Lys Pro Arg Glu Arg Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser

            180                 185                 190

Val Leu Thr Val Thr His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Thr

        195                 200                 205

Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Gln Lys Thr Ile

    210                 215                 220

Ser Lys Asp Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro

225                 230                 235                 240

Pro Ser Arg Glu Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu

                245                 250                 255

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Val Val Glu Trp Glu Ser Ser

            260                 265                 270

Gly Gln Pro Glu Asn Thr Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser

        275                 280                 285

Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

    290                 295                 300

Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu

305                 310                 315                 320

His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

                325                 330                 335

<210>13

<211>1015

<212>DNA

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>13

cgtctctagt ccaccaaggg cccatcggtc ttccccctgg tgtcctgctc caggagcacc     60

tccgagagca cagcggccct gggctgcctg gtcaaggact acttccccga acccgtgacc    120

gtgtcgtgga actcaggcgc cctgaccagc ggcgtgcaca ccttcccggc tgtcctacag    180

tcctcagggc tctactccct cagcagcgtg gtgaccgtgc cctccagcag cttgggcacc    240

cagacctacg tctgcaacgt cgttcatgag cccagcaaca ccaaggtgga caagagagtt    300

gagttcacac gcccatgtga tgacacaact cccccatgcc caccgtgccc agcacctgaa    360

ctcctggggg gaccgtcagt cttcgtcttc cccccaaaac ccaaggacac cctcatgatc    420

tcccggaccc ctgaggtcac gtgcgtggtg gtggacgtga gccaggaaga ccccgaggtc    480

cagttcaact ggtacgtgga cggcgcggag gtgcatcatg cccagacgaa gccacgggag    540

acgcagtaca acagcacata tcgtgtggtc agcgtcctca ccgtcacgca ccaggactgg    600

ctgaacggca aggagtacac gtgcaaggtc tccaacaaag ccctcccggc ccccatccag    660

aaaaccatct ccaaagacaa agggcagccc cgagagcctc aggtgtacac cctgcccccg    720

tcccgggagg agctgaccaa gaaccaggtc agcctgacct gcctggtcaa aggcttctac    780

cccagcgaca tcgtcgtgga gtgggagagc agcgggcagc cggagaacac ctacaagacc    840

acgccgcccg tgctggactc cgacggctcc tacttcctct acagcaagct caccgtggac    900

aagagcaggt ggcagcaggg gaacgtcttc tcatgctccg tgatgcatga ggctctgcac    960

aaccactaca cccagaagag cctctccctg tctccgggta aatgagtcga catgc        1015

<210>14

<211>333

<212>PRT

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>14

Arg Leu Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Val Ser Cys Ser

1               5                   10                  15

Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Lau Val Lys Asp

            20                  25                  30

Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr

        35                  40                  45

Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr

    50                  55                  60

Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln

65                  70                  75                  80

Thr Tyr Val Cys Asn Val Val His Glu Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp

                85                  90                  95

Lys Arg Val Glu Phe Thr Arg Pro Cys Asp Asp Thr Thr Pro Pro Cys

            100                 105                 110

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Val

        115                 120                 125

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

    130                 135                 140

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln

145                 150                 155                 160

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Ala Glu Val His His Ala Gln Thr Lys

                165                 170                 175

Pro Arg Glu Thr Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

            180                 185                 190

Thr Val Thr His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Thr Cys Lys

        195                 200                 205

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Gln Lys Thr Ile Ser Lys

    210                 215                 220

Asp Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

225                 230                 235                 240

Arg Glu Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

                245                 250                 255

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Val Val Glu Trp Glu Ser Ser Gly Gln

            260                 265                 270

Pro Glu Asn Thr Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly

        275                 280                 285

Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

    290                 295                 300

Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

305                 310                 315                 320

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

                325                 330

<210>15

<211>1584

<212>DNA

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>15

gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcgtcct gctccaggag cacctcccag      60

agcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaacccgt gaccgtgtcg     120

tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc aggctgtcct acagtcctca     180

gggctctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cactcagacc     240

tacgtctgca acgtcgttca tgagcccagc aacaccaagg tggacaagac agttggtgag     300

aggccagcga gggaaggggg gtgtctgctg gaagccaggc tcggccctcc tgcctggaca     360

aactctggct gtgcagcccc agcccagggc agcagggcag gccccgtctg tcttctcacc     420

cagaggcctc tgcccacccc actcatgctc agggagccag tcttctggct ttttccacca     480

ggctctgagc aggcacaggc tggatgcccc taccccaggc cctgcacaca caggggcagg     540

tgctgggctc agacctgcca agagccatat ctgggaggac cctgccctga cctaagccca     600

ccccaaaggc caaactccac tccctcagct cagacacctt ctctcctccc acatcccagt     660

aactcccaat cttctctctg cagggctccc atgtcgttcc acgtgcccac cgtgcccagg     720

taagccagcc caggcctcac cctccagctc aaggtgggac aagcgcccta gagtggcctg     780

tgtccaggga caggccctgc ccgggtgctg acacgtccac ctccatctct tcctcagctg     840

aactcctggg gggaccgtca gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga     900

tttcccggac ccctgaggtc acgtgcgtgg tggtagacgt gagccaggaa gaacccgatg     960

tcaagttcaa ctggtacgtg gacggcgtgg aggtgcacaa tgcccagacg aagccacggg    1020

aggagcagtt caacagcacg taccgcgtgg tcagcgtcct caccgtcaca caccaggact    1080

ggctgaacgg caaggagtac acgtgcaagg tctccaacaa agccctcccg gccccaaagc    1140

agaaaactgt ctccaaaacc aaaggtggga cccgcggggc acgagggcca cgtggacaga    1200

ggccggctca gcccaccctc tgccctggga gtgaccgctg tgccaacctc tgtccctaca    1260

gggcagcccc gagagccaca ggtgtacacc ctgcccccgc cccgggagga gctgaccaag    1320

aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctacc ccagcgacat cgtcgtggag    1380

tgggagagca gcgggcagcc ggagaacacc tacaagacca ccccgcccgt gctggactcc    1440

gacggctcct acttcctcta cagcaagctc accgtggaca agagcaggtg gcagcagggg    1500

aacaccttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac ccagaagagc    1560

ctctccgtgt ctccgggtaa atga                                           1584

<210>16

<211>326

<212>PRT

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>16

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Ser Cys Ser Arg

1               5                   10                  15

Ser Thr Ser Gln Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

            20                  25                  30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

        35                  40                  45

Gly Val His Thr Phe Gln Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

    50                  55                  60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr

65                  70                  75                  80

Tyr Val Cys Asn Val Val His Glu Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

                85                  90                  95

Thr Val Gly Leu Pro Cys Arg Ser Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Glu

            100                 105                 110

Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp

        115                 120                 125

Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp

    130                 135                 140

Val Ser Gln Glu Glu Pro Asp Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly

145                 150                 155                 160

Val Glu Val His Asn Ala Gln Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn

                165                 170                 175

Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Thr His Gln Asp Trp

            180                 185                 190

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Thr Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro

        195                 200                 205

Ala Pro Lys Gln Lys Thr Val Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu

    210                 215                 220

Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Pro Arg Glu Glu Leu Thr Lys Asn

225                 230                 235                 240

Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile

                245                 250                 255

Val Val Glu Trp Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Thr Tyr Lys Thr

            260                 265                 270

Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys

        275                 280                 285

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Thr Phe Ser Cys

    290                 295                 300

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu

305                 310                 315                 320

Ser Val Ser Pro Gly Lys

                325

<210>17

<211>1584

<212>DNA

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>17

gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcgtcct gctccaggag cacctcccag     60

agcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaacccgt gaccgtgtcg    120

tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc aggctgtcct acagtcctca    180

gggctctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc    240

tacgtctgca acgtcgttca tgagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttggtgag    300

aggccagcga gggaaggggg gtgtctgctg gaagccaggc tcggccctcc tgcctggaca    360

aactctggct gtgcagcccc agcccagggc agcagggcag gccccgtctg tctcctcacc    420

cagaggcctc tgcccacccc actcatgctc agggagccag tcttctggct ttttccacca    480

ggctctgagc aggcacaggc tggatgcccc taccccaggc cctgcacaca caggggcagg    540

tgctgggctc agacctgcca agagccatat ctgggaggac cctgccctga cctaagccca    600

ccccaaaggc caaactccac tccctcagct cagacacctt ctctcctccc acatcccagt    660

aactcccaat cttctctctg cagggctccc atgtcgttcc acgtgcccac cgtgcccagg    720

taagccagcc caggcctcac cctccagctc aaggtgggac aagcgcccta gagtggcctg    780

tgtccaggga caggccctgc ccgggtgctg acacgtccac ctccatctct tcctcagctg    840

aactcctggg gggaccgtca gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga    900

tttcccggac ccctgaggtc acgtgcgtgg tggtagacgt gagccaggaa gaacccgatg     960

tcaagttcaa ctggtacgtg gacggcgtgg aggtgcacaa tgcccagacg aagccacggg    1020

aggagcagtt caacagcacg taccgcgtgg tcagcgtcct caccgtcaca caccaggact    1080

ggctgaacgg caaggagtac acgtgcaagg tctccaacaa agccctcccg gccccaaagc    1140

agaaaactgt ctccaaaacc aaaggtggga cccgcggggc acgagggcca cgtggacaga    1200

ggccggctca gcccaccctc tgccctggga gtgaccgctg tgccaacctc tgtccctaca    1260

gggcagcccc gagagccaca ggtgtacacc ctgcccccgc cccgggagga gctgaccaag    1320

aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctacc ccagcgacat cgtcgtggag    1380

tgggcgagca acgggcagcc ggagaacacc tacaagacca ccccgcccgt gctggactcc    1440

gacggctcct acttcctcta cagcaagctc accgtggaca agagcaggtg gcagcagggg    1500

aacaccttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac ccagaagagc    1560

ctctccgtgt ctccgggtaa atga                                           1584

<210>18

<211>326

<212>PRT

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>18

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Ser Cys Ser Arg

1               5                   10                  15

Ser Thr Ser Gln Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

            20                  25                  30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

        35                  40                  45

Gly Val His Thr Phe Gln Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

    50                  55                  60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr

65                  70                  75                  80

Tyr Val Cys Asn Val Val His Glu Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

                85                  90                  95

Arg Val Gly Leu Pro Cys Arg Ser Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Glu

            100                 105                 110

Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp

        115                 120                 125

Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp

    130                 135                 140

Val Ser Gln Glu Glu Pro Asp Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly

145                 150                 155                 160

Val Glu Val His Asn Ala Gln Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn

                165                 170                 175

Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Thr His Gln Asp Trp

            180                 185                 190

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Thr Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro

        195                 200                 205

Ala Pro Lys Gln Lys Thr Val Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu

    210                 215                 220

Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Pro Arg Glu Glu Leu Thr Lys Asn

225                 230                 235                 240

Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile

                245                 250                 255

Val Val Glu Trp Ala Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Thr Tyr Lys Thr

            260                 265                 270

Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys

        275                 280                 285

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Thr Phe Ser Cys

    290                 295                 300

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu

305                 310                 315                 320

Ser Val Ser Pro Gly Lys

                325

<210>19

<211>978

<212>DNA

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>19

tccaccaagg gcccatcggt cttccccctg gcgtcctgct ccaggagcac ctcccagagc     60

acagcggccc tgggctgcct ggtcaaggac tacttccccg aacccgtgac cgtgtcgtgg    120

aactcaggcg ccctgaccag cggcgtgcac accttcccgg ctgtcctaca gtcctcaggg    180

ctctactccc tcagcagcgt ggtgaccgtg ccctccagca gcttgggcac ccagacctac    240

gtctgcaacg tcgttcatga gcccagcaac accaaggtgg acaagacagt tgggctccca    300

tgtcgttcca cgtgcccacc gtgcccagct gaactcctgg ggggaccgtc agtcttcctc    360

ttccccccaa aacccaagga caccctcatg atttcccgga cccctgaggt cacgtgcgtg    420

gtggtggacg tgagccagga agaacccgat gtcaagttca actggtacgt ggacggcgtg    480

gaggtgcaca atgcccagac aaagccgcgg gaggagcagt tcaacagcac gtatcgcgtg    540

gtcagcgtcc tcaccgtcac acaccaggac tggctgaacg gcaaggagta cacgtgcaag    600

gtctccaaca aagccctccc ggccccaagg cagaaaactg tctccaaaac caaagggcag    660

ccccgagagc cgcaggtgta caccctgccc ccgccccggg aggagctgac caagaaccag    720

gtcagcctga cctgcctgat caaaggcttc taccccagcg acatcgtcgt ggagtgggcg    780

agcaacgggc agccggagaa cacctacaag accacgccgc ccgtgctgga ctccgacggc    840

tcctacttcc tctacagcaa gctcaccgtg gacaagagca ggtggcagca ggggaacacc    900

ttctcatgct ccgtgatgca tgaggctctg cacaaccact acacccagaa gagcctctcc    960

ctgtctccgg gtaaatga                                                  978

<210>20

<211>325

<212>PRT

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>20

Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Ser Cys Ser Arg Ser

1               5                   10                  15

Thr Ser Gln Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe

            20                  25                  30

Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly

        35                  40                  45

Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu

    50                  55                  60

Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr

65                  70                  75                  80

Val Cys Asn Val Val His Glu Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr

                85                  90                  95

Val Gly Leu Pro Cys Arg Ser Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Glu Leu

            100                 105                 110

Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr

        115                 120                 125

Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val

    130                 135                 140

Ser Gln Glu Glu Pro Asp Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val

145                 150                 155                 160

Glu Val His Asn Ala Gln Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser

                165                 170                 175

Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Thr His Gln Asp Trp Leu

            180                 185                 190

Asn Gly Lys Glu Tyr Thr Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala

        195                 200                 205

Pro Arg Gln Lys Thr Val Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro

    210                 215                 220

Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Pro Arg Glu Glu Leu Thr Lys Asn Gln

225                 230                 235                 240

Val Ser Leu Thr Cys Leu Ile Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Val

                245                 250                 255

Val Glu Trp Ala Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Thr Tyr Lys Thr Thr

            260                 265                 270

Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu

        275                 280                 285

Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Thr Phe Ser Cys Ser

    290                 295                 300

Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser

305                 310                 315                 320

Leu Ser Pro Gly Lys

                325

<210>21

<211>1584

<212>DNA

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>21

gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcgtcct gctccaggag cacctcccag     60

agcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaacccgt gaccgtgtcg    120

tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc aggctgtcct acagtcctca    180

gggctctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc    240

tacgtctgca acgtcgttca tgagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttggtgag    300

aggccagcga ggggaggggg gtgtctgctg gaagccaggc tcggccctcc tgcctggaca    360

aactctggct gtgcagcccc agcccagggc agcagggcag gccccgtctg tctcctcacc    420

cagaggcctc tgcccacccc actcatgctc agggagccag tcttctggct ttttccacca    480

ggctctgagc aggcacaggc tggatgcccc taccccaggc cctgcacaca caggggcagg    540

tgctgggctc aggcctgcca agagccatat ctgggaggac cctgccctga cctaagccca    600

ccccaaaggc caaactccac tccctcagct cagacacctt ctctcctccc acatcccagt    660

aactcccaat cttctctctg cagggctccc atgtcgttcc acgtgcccac cgtgcccagg    720

taagccagcc caggcctcac cctccagctc aaggtgggac aagcgcccta gagtggcctg    780

tgtccaggga caggccctgc ccgggtgctg acacgtccac ctccatctct tcctcagctg    840

aactcctggg gggaccgtca gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga    900

tttcccggac ccctgaggtc acgtgcgtgg tggtagacgt gagccaggaa gaacccgatg    960

tcaagttcaa ctggtacgtg gacggcgtgg aggtgcacaa tgcccagacg aagccacggg   1020

aggagcagtt caacagcacg taccgcgtgg tcagcgtcct caccgtcaca caccaggact   1080

ggctgaacgg caaggagtac acgtgcaagg tctccaacaa aggcctcccg gcccccatcg   1140

agaaaaccat ctccaaagcc aaaggtggga cccgcggggc ccgagggcca cgtggacaga   1200

ggccggctca gcccaccctc tgccctggga gtgaccgctg tgccaacctc tgtccctaca   1260

gggcagcccc gagagccgca ggtgtacatc ctgcccccgc cccaggagga gctgaccaag   1320

aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaca ggcttctacc ccagcgacat cgccgtggag   1380

tgggagagca acgggcagcc ggagaacacc tacaagacca ccccgcccgt gctggactcc   1440

gacggctcct acttcctcta cagcaagctc atcgtggaca agagcaggtg gcagcagggg   1500

aacaccttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac ccagaagagc    1560

ctctccgtgt ctccgggtaa atga                                           1584

<210>22

<211>326

<212>PRT

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>22

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Ser Cys Ser Arg

1               5                   10                  15

Ser Thr Ser Gln Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

            20                  25                  30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

        35                  40                  45

Gly Val His Thr Phe Gln Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

    50                  55                  60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr

65                  70                  75                  80

Tyr Val Cys Asn Val Val His Glu Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

                85                  90                  95

Arg Val Gly Leu Pro Cys Arg Ser Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Glu

            100                 105                 110

Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp

        115                 120                 125

Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp

    130                 135                 140

Val Ser Gln Glu Glu Pro Asp Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly

145                 150                 155                 160

Val Glu Val His Asn Ala Gln Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn

                165                 170                 175

Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Thr His Gln Asp Trp

            180                 185                 190

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Thr Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro

        195                 200                 205

Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu

    210                 215                 220

Pro Gln Val Tyr Ile Leu Pro Pro Pro Gln Glu Glu Leu Thr Lys Asn

225                 230                 235                 240

Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile

                245                 250                 255

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Thr Tyr Lys Thr

            260                 265                 270

Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys

        275                 280                 285

Leu Ile Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Thr Phe Ser Cys

    290                 295                 300

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu

305                 310                 315                 320

Ser Val Ser Pro Gly Lys

                325

<210>23

<211>996

<212>DNA

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>23

gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcgccct cctccaggag cacctccgag     60

agcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ctgaacccgt gaccgtgtcg    120

tggaactcag gctccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca    180

gggctctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc    240

tacgtctgca acgtaaacca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagata    300

acatgtggtg gtggcagcaa acctcccacg tgcccaccgt gcccagcacc tgaactcctg    360

gggggaccgt cagtcttcct cttcccccca aaacccaagg acaccctcat gatctcccgg    420

acccctgagg tcacgtgcgt ggtggtagac gtgagccagg aagaccccga tgtcaagttc    480

aactggtacg taaatggcgc ggaggtgcat catgcccaga cgaagccacg ggagacgcag    540

tacaacagca catatcgtgt ggtcagcgtc ctcaccgtca cgcaccagga ctggctgaac    600

ggcaaggagt acacgtgcaa ggtctccaac aaagccctcc cggcccccat ccagaaaacc    660

atctccaaag acaaagggca gccccgagag cctcaggtgt acaccctgcc cccgtcccgg    720

gaggagctga ccaagaacca ggtcagcctg acctgcctgg tcaaaggctt ctaccccagc    780

gacatcgtcg tggagtggga gagcagcggg cagccggaga acacctacaa gaccaccccg    840

cccgtgctgg actccgacgg ctcctacttc ctctacagca agctcaccgt ggacaagagc    900

aggtggcagc aggggaacgt cttctcatgc tccgtgatgc atgaggctct gcacaaccac    960

tacacccaga agagcctctc cctgtctccg ggtaaa                              996

<210>24

<211>332

<212>PRT

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>24

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Arg

1               5                   10                  15

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

            20                  25                  30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ser Leu Thr Ser

        35                  40                  45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

    50                  55                  60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr

65                  70                  75                  80

Tyr Val Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

                85                  90                  95

Arg Val Glu Ile Thr Cys Gly Gly Gly Ser Lys Pro Pro Thr Cys Pro

            100                 105                 110

Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe

        115                 120                 125

Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val

    130                 135                 140

Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Asp Val Lys Phe

145                 150                 155                 160

Asn Trp Tyr Val Asn Gly Ala Glu Val His His Ala Gln Thr Lys Pro

                165                 170                 175

Arg Glu Thr Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr

            180                 185                 190

Val Thr His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Thr Cys Lys Val

        195                 200                 205

Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Gln Lys Thr Ile Ser Lys Asp

    210                 215                 220

Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg

225                 230                 235                 240

Glu Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly

                245                 250                 255

Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Val Val Glu Trp Glu Ser Ser Gly Gln Pro

            260                 265                 270

Glu Asn Thr Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser

        275                 280                 285

Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln

    290                 295                 300

Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His

305                 310                 315                 320

Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

                325                 330

<210>25

<211>999

<212>DNA

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>25

gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcgccct cctccaggag cacctccgag     60

agcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ctgaacccgt gaccgtgtcg    120

tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca    180

gggctctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc    240

tacgtctgca acgtaaacca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagata    300

aaaacatgtg gtggtggcag caaacctccc acgtgcccac cgtgcccagc acctgaactc    360

ctggggggac cgtcagtctt cctcttcccc ccaaaaccca aggacaccct catgatctcc    420

cggacccctg aggtcacatg cgtggtggtg gacgtgagcc aggaagaccc cgaggtccag    480

ttcaactggt acgtaaacgg cgcggaggtg catcatgccc agacgaagcc acgggagacg    540

cagtacaaca gcacgtaccg cgtggtcagc gtcctcaccg tcacacacca ggactggctg    600

aacggcaagg agtacacgtg caaggtctcc aacaaagccc tcccggcccc catccagaaa    660

accatctcca aagacaaagg gcagccccga gagcctcagg tgtacaccct gcccccgtcc    720

cgggaggagc tgaccaagaa ccaggtcagc ctgacctgcc tggtcaaagg cttctacccc    780

agcgacatcg tcgtggagtg ggagagcagc gggcagccgg agaacaccta caagaccacc    840

ccgcccgtgc tggactccga cggctcctac ttcctctaca gcaagctcac cgtggacaag    900

agcaggtggc agcaggggaa cgtcttctca tgctccgtga tgcatgaggc tctgcacaac    960

cactacaccc agaagagcct ctccctgtct ccgggtaaa                           999

<210>26

<211>333

<212>PRT

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>26

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Arg

1               5                   10                  15

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

            20                  25                  30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

        35                  40                  45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

    50                  55                  60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr

65                  70                  75                  80

Tyr Val Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

                85                  90                  95

Arg Val Glu Ile Lys Thr Cys Gly Gly Gly Ser Lys Pro Pro Thr Cys

            100                 105                 110

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

        115                 120                 125

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

    130                 135                 140

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln

145                 150                 155                 160

Phe Asn Trp Tyr Val Asn Gly Ala Glu Val His His Ala Gln Thr Lys

                165                 170                 175

Pro Arg Glu Thr Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

            180                 185                 190

Thr Val Thr His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Thr Cys Lys

        195                 200                 205

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Gln Lys Thr Ile Ser Lys

    210                 215                 220

Asp Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

225                 230                 235                 240

Arg Glu Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

                245                 250                 255

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Val Val Glu Trp Glu Ser Ser Gly Gln

            260                 265                 270

Pro Glu Asn Thr Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly

        275                 280                 285

Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

    290                 295                 300

Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

305                 310                 315                 320

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

                325                 330

<210>27

<211>999

<212>DNA

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>27

gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcgccct cctccaggag cacctccgag     60

agcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ctgaacccgt gaccgtgtcg    120

tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca    180

gggctctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc    240

tacgtctgca acgtaaacca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagata    300

aaaacatgtg gtggtggcag caaacctccc acgtgcccac cgtgcccagc acctgaactc    360

ctggggggac cgtcagtctt cctcttcccc ccaaaaccca aggacaccct catgatctcc    420

cggacccctg aggtcacatg cgtggtggtg gacgtgagcc aggaagaccc cgaggtccag    480

ttcaactggt acgtaaacgg cgcggaggtg catcatgccc agacgaagcc acgggagacg    540

cagtacaaca gcacgtaccg cgtggtcagc gtcctcaccg tcacacacca ggactggctg    600

aacggcaagg agtacacgtg caaggtctcc aacaaagccc tcccggcccc catccagaaa    660

accatctcca aagacaaagg gcagccccga gagcctcagg tgtacaccct gcccccgtcc    720

cgggaggagc tgaccaagaa ccaggtcagc ctgacctgcc tggtcaaagg cttctacccc    780

agcgacatcg tcgtggagtg ggagagcagc gggcagccgg agaacaccta caagaccacc    840

ccgcccgtgc tggactccga cggctcctac ttcctctaca gcaagctcac cgtggacaag    900

agcaggtggc agcaggggaa cgtcttctca tgctccgtga tgcatgaggc tctgcacaac    960

cactacaccc agaagagcct ctccctgtct ccgggtaaa                           999

<210>28

<211>333

<212>PRT

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>28

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Arg

1               5                   10                  15

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

            20                  25                  30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

        35                  40                  45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

    50                  55                  60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr

65                  70                  75                  80

Tyr Val Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

                85                  90                  95

Arg Val Glu Ile Lys Thr Cys Gly Gly Gly Ser Lys Pro Pro Thr Cys

            100                 105                 110

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

        115                 120                 125

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

    130                 135                 140

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln

145                 150                 155                 160

Phe Asn Trp Tyr Val Asn Gly Ala Glu Val His His Ala Gln Thr Lys

                165                 170                 175

Pro Arg Glu Thr Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

            180                 185                 190

Thr Val Thr His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Thr Cys Lys

        195                 200                 205

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Gln Lys Thr Ile Ser Lys

    210                 215                 220

Asp Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

225                 230                 235                 240

Arg Glu Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

                245                 250                 255

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Val Val Glu Trp Glu Ser Ser Gly Gln

            260                 265                 270

Pro Glu Asn Thr Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly

        275                 280                 285

Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

    290                 295                 300

Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

305                 310                 315                 320

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

                325                 330

<210>29

<211>324

<212>DNA

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>29

cgcgctgtgg ctgcaccatc tgtcttcatc ttcccgccat ctgaggatca ggtgaaatct     60

ggaactgtct ctgttgtgtg cctgctgaat aacttctatc ccagagaggc cagcgtaaag    120

tggaaggtgg atggtgtcct caaaacgggt aactcccagg agagtgtcac agagcaggac    180

agcaaggaca acacctacag cctgagcagc accctgacgc tgagcagcac agactaccag    240

agtcacaatg tctatgcctg cgaagtcacc catcagggcc tgagctcgcc cgtcaccaag    300

agcttcaaca gaggagagtg ttag                                           324

<210>30

<211>107

<212>PRT

<213>食蟹猴(Macaca fascicularis)

<400>30

Arg Ala Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Glu Asp

1               5                   10                  15

Gln Val Lys Ser Gly Thr Val Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

            20                  25                  30

Tyr Pro Arg Glu Ala Ser Val Lys Trp Lys Val Asp Gly Val Leu Lys

        35                  40                  45

Thr Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Asn

    50                  55                  60

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Ser Thr Asp Tyr Gln

65                  70                  75                  80

Ser His Asn Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

                85                  90                  95

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

            100                 105

<210>31

<211>20

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>引物

<400>31

gcctccacca agggccctcg                                                20

<210>32

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>引物

<400>32

tttacccgga gacagggaga g                                              21

<210>33

<211>20

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>引物

<400>33

gcctccacca agggccctcg                                                20

<210>34

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>引物

<400>34

tttacccgga gacagggaga g                                              21

<210>35

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>引物

<400>35

gtcacatggc accacctctc t                                              21

<210>36

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>引物

<400>36

ggtacgtgcc aagcatcctc g                                              21

<210>37

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>引物

<400>37

ctggcgtcct gctccaggag c                                              21

<210>38

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>引物

<400>38

gctcctggag caggacgcca g                                              21

<210>39

<211>26

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>引物

<400>39

gctagcacca agggcccatc ggtctt                                         26

<210>40

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>引物

<400>40

aactgtcttg tcgaccttgg tgttg                                          25

<210>41

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>引物

<400>41

caacaccaag gtcgacaaga gagtt                                          25

<210>42

<211>30

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>引物

<400>42

gcggccgctc atttacccgg agacacggag                                     30

<210>43

<211>30

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>引物

<400>43

cgtctctagt gcctccacca agggcccatc                                     30

<210>44

<211>34

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>引物

<400>44

gcatgtcgac tcatttaccc ggagacaggg agag                                34

<210>45

<211>24

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>引物

<400>45

atcaaacgag ctgtggctgc acca                                           24

<210>46

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>引物

<400>46

caggtggggg cacttctccc t                                              21

<210>47

<211>345

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>47

gaggttcagc tggtgcagtc tgggggaggc ttggtacatc ctggggggtc cctgagactc     60

tcctgtgcag gctctggatt caccttcagt agaaatgcta tgttctgggt tcgccaggct    120

ccaggaaaag gtctggagtg ggtatcaggt attggtactg gtggtgccac aaactatgca    180

gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaatg ccaagaactc cttgtatctt    240

caaatgaaca gcctgagagc cgaggacatg gctgtgtatt actgtgcaag agggaggtac    300

tactttgact actggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cctca                    345

<210>48

<211>345

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>48

gaggttcagc tggtgcagtc tgggggaggc ttggtacatc ctggggggtc cctgagactc     60

tcctgtgcag gctctggatt caccttcagt agaaatgcta tgttctgggt tcgccaggct    120

ccaggaaaag gtctggagtg ggtatcaggt attggtactg gtggtgccac aagctatgca    180

gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaatg ccaagaactc cttgtatctt    240

caaatgaaca gcctgagtgc cgaggacatg gctgtgtatt actgtgcaag agggaggtac    300

tacttcaccc actggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cctca                    345

<210>49

<211>347

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>49

gaggttcagc tggtgcagtc tgggggaggc ttggtacatc ctggggggtc cctgagactc     60

tcctgtgcag gctctggatt caccttcagt agaaatgcta tgttctgggt tcgccaggct    120

ccaggaaaag gtctggagtg ggtatcaggt attggtactg gtggtgccac aagctatgca    180

gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaatg ccaagaactc cttgtatctt    240

caaatgaaca gcctgagagc cgaggacatg gctgtgtatt actgtgcaag agggaggtac    300

tggtacaaca actggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cctcaca                  347

<210>50

<211>345

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>50

gaggttcagt tggtgcagtc tgggggaggc ttggtacatc ctggggggtc cctgagactc     60

tcctgtgcag gctctggatt caccttcagt agaaatgcta tgttctgggt tcgccaggct    120

ccaggaaaag gtctggagtg ggtatcaggt attggtactg gtggtgccac aaactatgca    180

gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaatg ccaagaactc cttgtatctt    240

caaatgaaca gcctgagagc cgaggacatg gctgtgtatt actgtgcaag agggaggtac    300

tacttcccgt ggtggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cctca                    345

<210>51

<211>345

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>51

gaggttcagc tggtgcagtc tgggggaggc ttggtacatc ctggggggtc cctgagactc     60

tcctgtgcag gctctggatt caccttcagt agaaatgcta tgttctgggt tcgccaggct    120

ccaggaaaag gtctggagtg ggtatcaggt attggtactg gtggtgccac aaactatgca    180

gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaatg ccaagaactc cttgtatctt    240

caaatgaaca gcctgagagc cgaggacatg gctgtgtatt actgtgcaag agggaggtac    300

tacttcacga ggtggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cctca                    345

<210>52

<211>345

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>52

gaggttcagt tggtgcagtc tgggggaggc ttggtacatc ctggggggtc cctgagactc     60

tcctgtgcag gctctggatt caccttcagt agaaatgcta tgttctgggt tcgccaggct    120

ccaggaaaag gtctggagtg ggtatcaggt attggtactg gtggtgccac aaactatgca    180

gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaatg ccaagaactc cttgtatctt    240

caaatgaaca gcctgagagc cgaggacatg gctgtgtatt actgtgcaag agggaggtac    300

tggtacccgt ggtggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cctca                    345

<210>53

<211>345

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>53

gaggttcagc tggtgcagtc tgggggaggc ttggtacatc ctggggggtc cctgagactc     60

tcctgtgcag gctctggatt caccttcagt agaaatgcta tgttctgggt tcgccaggct    120

ccaggaaaag gtctggagtg ggtatcaggt attggtactg gtggtgccac aagctatgca    180

gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaatg ccaagaactc cttgtatctt    240

caaatgaaca gcctgagagc cgaggacatg gctgtgtatt actgtgcaag agggaggtac    300

tggtacccgt ggtggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cctca                    345

<210>54

<211>345

<212>DNA

<213>人工序列；

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>54

gaggttcagt tggtgcagtc tgggggaggc ttggtacatc ctggggggtc cctgagactc     60

tcctgtgcag gctctggatt caccttcagt agaaatgcta tgttctgggt tcgccaggct    120

ccaggaaaag gtctggagtg ggtatcaggt attggtactg gtggtgccac aaactatgca    180

gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaatg ccaagaactc cttgtatctt    240

caaatgaaca gcctgagagc cgaggacatg gctgtgtatt actgtgcaag agggaggtac    300

tggttcccgt ggtggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cctca                    345

<210>55

<211>345

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>55

gaggttcagc tggtgcagtc tgggggaggc ttggtacatc ctggggggtc cctgagactc     60

tcctgtgcag gctctggatt caccttcagt agaaatgcta tgttctgggt tcgccaggct    120

ccaggaaaag gtctggagtg ggtatcaggt attggtactg gtggtgccac aagctatgca    180

gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaatg ccaagaactc cttgtatctt    240

caaatgaaca gcctgagagc cgaggacatg gctgtgtatt actgtgcaag agggaggtac    300

tggttcccgt ggtggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cctca                    345

<210>56

<211>345

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>56

gaggttcagt tggtgcagtc tgggggaggc ttggtacatc ctggggggtc cctgagactc     60

tcctgtgcag gctctggatt caccttcagt agaaatgcta tgttctgggt tcgccaggct    120

ccaggaaaag gtctggagtg ggtatcaggt attggtactg gtggtgccac aaactatgca    180

gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaatg ccaagaactc cttgtatctt    240

caaatgaaca gcctgagagc cgaggacatg gctgtgtatt actgtgcaag agggaggtac    300

tggtacccgt ggtggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cctca                    345

<210>57

<211>345

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>57

gaggttcagc tggtgcagtc tgggggaggc ttggtacatc ctggggggtc cctgagactc     60

tcctgtgcag gctctggatt caccttcagt agaaatgcta tgttctgggt tcgccaggct    120

ccaggaaaag gtctggagtg ggtatcaggt attggtactg gtggtgccac aagctatgca    180

gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaatg ccaagaactc cttgtatctt    240

caaatgaaca gcctgagagc cgaggacatg gctgtgtatt actgtgcaag agggaggtac    300

tggtacccgt ggtggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cctca                    345

<210>58

<211>345

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>58

gaggttcagc tggtgcagtc tgggggaggc ttggtacatc ctggggggtc cctgagactc     60

tcctgtgcag gctctggatt caccttcagt agaaatgcta tgttctgggt tcgccaggct    120

ccaggaaaag gtctggagtg ggtatcaggt attggtactg gtggtgccac aagctatgca    180

gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaatg ccaagaactc cttgtatctt    240

caaatgaaca gcctgagagc cgaggacatg gctgtgtatt actgtgcaag agggaggtac    300

tacttcccgt ggtggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cctca                    345

<210>59

<211>345

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>59

gaggttcagc tggtgcagtc tgggggaggc ttggtacatc ctggggggtc cctgagactc     60

tcctgtgcag gctctggatt caccttcagt agaaatgcta tgttctgggt tcgccaggct    120

ccaggaaaag gtctggagtg ggtatcaggt attggtactg gtggtgccac aagctatgca    180

gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaatg ccaagaactc cttgtatctt    240

caaatgaaca gcctgagtgc cgaggacatg gctgtgtatt actgtgcaag agggaggtac    300

tacttcccgt ggtggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cctca                    345

<210>60

<211>345

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>60

gaggttcagt tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc     60

tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt agaaatgcta tgttctgggt tcgccaggct    120

ccaggaaaag gtctggagtg ggtatcaggt attggtactg gtggtgccac aagctatgca    180

gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaatg ccaagaactc cttgtatctt    240

caaatgaaca gcctgagagc cgaggacacg gctgtgtatt actgtgcaag agggaggtac    300

tacttcccgt ggtggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cctca                    345

<210>61

<211>115

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>61

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly

1               5                   10                  15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn

            20                  25                  30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

        35                  40                  45

Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys

    50                  55                  60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu

65                  70                  75                  80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

                85                  90                  95

Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

            100                 105                 110

Val Ser Ser

        115

<210>62

<211>115

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>62

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly

1               5                   10                  15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn

            20                  25                  30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

        35                  40                  45

Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys

    50                  55                  60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu

65                  70                  75                  80

Gln Met Asn Ser Leu Ser Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

                85                  90                  95

Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Thr His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

            100                 105                 110

Val Ser Ser

        115

<210>63

<211>115

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>63

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly

1               5                   10                  15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn

            20                  25                  30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

        35                  40                  45

Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys

    50                  55                  60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu

65                  70                  75                  80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

                85                  90                  95

Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Asn Asn Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

            100                 105                 110

Val Ser Ser

        115

<210>64

<211>115

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>64

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly

1               5                   10                  15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn

            20                  25                  30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

        35                  40                  45

Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys

    50                  55                  60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu

65                  70                  75                  80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

                85                  90                  95

Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

            100                 105                 110

Val Ser Ser

        115

<210>65

<211>115

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>65

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly

1               5                   10                  15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn

            20                  25                  30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

        35                  40                  45

Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys

    50                  55                  60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu

65                  70                  75                  80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

                85                  90                  95

Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Thr Arg Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

            100                 105                 110

Val Ser Ser

        115

<210>66

<211>114

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>66

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly

1               5                   10                  15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn

            20                  25                  30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

        35                  40                  45

Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys

    50                  55                  60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu

65                  70                  75                  80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

                85                  90                  95

Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

            100                 105                 110

Val Ser

<210>67

<211>115

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>67

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly

1               5                   10                  15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn

            20                  25                  30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

        35                  40                  45

Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys

    50                  55                  60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu

65                  70                  75                  80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

                85                  90                  95

Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr ProTrp Trp Gly  Gln Gly Thr Leu Val Thr

            100                 105                 110

Val Ser Ser

        115

<210>68

<211>115

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>68

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly

1               5                   10                  15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn

            20                  25                  30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

        35                  40                  45

Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys

    50                  55                  60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu

65                  70                  75                  80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

                85                  90                  95

Arg Gly Arg Tyr Trp Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

            100                 105                 110

Val Ser Ser

        115

<210>69

<211>115

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>69

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly

1               5                   10                  15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn

            20                  25                  30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

        35                  40                  45

Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys

    50                  55                  60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu

65                  70                  75                  80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

                85                  90                  95

Arg Gly Arg Tyr Trp Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

            100                 105                 110

Val Ser Ser

        115

<210>70

<211>115

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>70

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly

1               5                   10                  15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn

            20                  25                  30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

        35                  40                  45

Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys

    50                  55                  60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu

65                  70                  75                  80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

                85                  90                  95

Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

            100                 105                 110

Val Ser Ser

        115

<210>71

<211>115

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>71

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly

1               5                   10                  15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn

            20                  25                  30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

        35                  40                  45

Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys

    50                  55                  60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu

65                  70                  75                  80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

                85                  90                  95

Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

            100                 105                 110

Val Ser Ser

        115

<210>72

<211>115

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>72

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly

1               5                   10                  15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn

            20                  25                  30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

        35                  40                  45

Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys

    50                  55                  60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu

65                  70                  75                  80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

                85                  90                  95

Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

            100                 105                 110

Val Ser Ser

        115

<210>73

<211>115

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>73

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly

1               5                   10                  15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn

            20                  25                  30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

        35                  40                  45

Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys

    50                  55                  60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu

65                  70                  75                  80

Gln Met Asn Ser Leu Ser Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

                85                  90                  95

Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

            100                 105                 110

Val Ser Ser

        115

<210>74

<211>115

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>74

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1               5                   10                  15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn

            20                  25                  30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

        35                  40                  45

Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys

    50                  55                  60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu

65                  70                  75                  80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

                85                  90                  95

Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

            100                 105                 110

Val Ser Ser

        115

<210>75

<211>327

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>75

gaaattgtgt tgacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc     60

ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agcagctact tagcctggta ccagcagaaa    120

cctggccagg ctcccaggct cctcatcttt ggtgcatcca gcagggccac tggcatccca    180

gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag    240

cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagtatggta gctcacctcc gtggacgttc    300

ggccaaggga ccaaggtgga aatcaaa                                        327

<210>76

<211>327

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>76

gaaattgtgt tgacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc     60

ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc aacagctact tagcctggta ccagcagaaa    120

cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggtgcatcca gcagggcccc tggcatccca    180

gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag    240

cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagtatgatc actcagcagg gtggacgttc    300

ggccaaggga ccaaggtgga gatcaaa                                        327

<210>77

<211>327

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>77

gaaattgtgt tgacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccggggga aagagccacc     60

ctctcctgca gggccagtca gactgttaac agcgactact tagcctggta ccagcagaaa    120

ccgggccagg ctcccaggct cctcatctat ggtgcatcca gcagggccac tggcatccca    180

gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag    240

cctgaagatt ttgcagtcta ttactgtcag cagtatggta ggtcacctcc gtggacgttc    300

ggccaaggga ccaaagtgga tatcaaa                                        327

<210>78

<211>327

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>78

gaaattgtga tgacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc     60

ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agcgactact tagcctggta ccagcagaaa    120

cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggtgcatcta gcagggcctc tggcatccca    180

gacaggttca gtggcagtgg gtttgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag    240

cctgaagatt ttgcaatata ttactgtcag cagtatggta gctcacctcc gtggacgttc    300

ggccaaggga ccaaggtgga aatcaaa                                        327

<210>79

<211>327

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>79

gatattgtgc tgacccagtc tccagccacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc     60

ctctcctgca gggccagtca gagtgttaac agcaactact tagcctggta ccagcagaaa    120

cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggtacatcct acagggccac tggcatccca    180

gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcac cagactggag    240

cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagtatggta gctcaccacc gtggacgttc    300

ggccaaggga cacgactgga gattaaa                                        327

<210>80

<211>327

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>80

gatattgtgc tgacgcagac tccagccacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc     60

ctctcctgca gggccagtca gagtgttggc agcagctact tagcctggta ccagcagaga    120

cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggtgcatcca gcagggccac tggcatcccg    180

gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcacgatcag cagactggag    240

cctgaagatt ttgcagtgta ttattgtcag cagtatggaa gttcacctcc gtggatgttc    300

ggccaaggga ccaaggtgga gatcaaa                                        327

<210>81

<211>109

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>81

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1               5                   10                  15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ser

            20                  25                  30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu

        35                  40                  45

Ile Phe Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser

    50                  55                  60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu

65                  70                  75                  80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro

                85                  90                  95

Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

            100                 105

<210>82

<211>109

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>82

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1               5                   10                  15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Asn Ser

            20                  25                  30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu

        35                  40                  45

Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Pro Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser

    50                  55                  60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu

65                  70                  75                  80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp His Ser Ala

                85                  90                  95

Gly Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

            100                 105

<210>83

<211>109

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>83

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1               5                   10                  15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Thr Val Asn Ser Asp

            20                  25                  30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu

        35                  40                  45

Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser

    50                  55                  60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu

65                  70                  75                  80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Arg Ser Pro

                85                  90                  95

Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys

            100                 105

<210>84

<211>109

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>84

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1               5                   10                  15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asp

            20                  25                  30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu

        35                  40                  45

Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser

    50                  55                  60

Gly Ser Gly Phe Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu

65                  70                  75                  80

Pro Glu Asp Phe Ala Ile Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro

                85                  90                  95

Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

            100                 105

<210>85

<211>109

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>85

Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1               5                   10                  15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Asn Ser Asn

            20                  25                  30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu

        35                  40                  45

Ile Tyr Gly Thr Ser Tyr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser

    50                  55                  60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Thr Arg Leu Glu

65                  70                  75                  80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro

                85                  90                  95

Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys

            100                 105

<210>86

<211>109

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>识别抗IL-4R的抗体可变区序列

<400>86

Asp Ile Val Leu Thr Gln Thr Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1               5                   10                  15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Gly Ser Ser

            20                  25                  30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu

        35                  40                  45

Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser

    50                  55                  60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu

65                  70                  75                  80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro

                85                  90                  95

Pro Trp Met Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

            100                 105

Claims (37)

1.一种分离的多肽，所述多肽包含SEQ ID NO：6、SEQ IDNO：8、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：14或SEQ ID NO：20所示的氨基酸序列，并且还包含抗体重链可变区。

2.权利要求1的分离的多肽，其中所述抗体重链可变区是食蟹猴抗体重链可变区。

3.权利要求1的分离的多肽，其中所述抗体重链可变区是非食蟹猴物种的抗体重链可变区。

4.权利要求1的分离的多肽，其中所述抗体重链可变区是人抗体重链可变区。

5.权利要求1的分离的多肽，其中所述抗体重链可变区是小鼠抗体重链可变区。

6.一种分离的多肽，所述多肽包含SEQ ID NO：30所示氨基酸序列，并且还包含抗体轻链可变区。

7.权利要求6的分离的多肽，其中所述抗体轻链可变区是食蟹猴抗体轻链可变区。

8.权利要求6的分离的多肽，其中所述抗体轻链可变区是非食蟹猴物种的抗体轻链可变区。

9.权利要求6的分离的多肽，其中所述抗体轻链可变区是人抗体轻链可变区。

10.权利要求6的分离的多肽，其中所述抗体轻链可变区是小鼠抗体轻链可变区。

11.一种分离的多核苷酸，所述多核苷酸包含两种多肽的编码序列，其中一种多肽包含SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：14或SEQ ID NO：20所示氨基酸序列，另一种多肽包含抗体重链可变区。

12.权利要求11的分离的多核苷酸，其中所述编码包含抗体重链可变区的多肽的序列是食蟹猴重链可变区的编码序列。

13.权利要求11的分离的多核苷酸，其中所述编码包含抗体重链可变区的多肽的序列是非食蟹猴物种的抗体重链可变区的编码序列。

14.权利要求11的分离的多核苷酸，其中所述编码包含抗体重链可变区的多肽的序列是人抗体重链可变区的编码序列。

15.权利要求11的分离多核苷酸，其中所述编码包含抗体重链可变区的多肽的序列是小鼠抗体重链可变区的编码序列。

16.一种分离的多核苷酸，所述多核苷酸包含两种多肽的编码序列，其中一种多肽包含SEQ ID NO：30所示氨基酸序列，另一种多肽包含抗体轻链可变区。

17.权利要求16的分离的多核苷酸，其中所述编码包含抗体轻链可变区的多肽的序列是食蟹猴抗体轻链可变区的编码序列。

18.权利要求16的分离的多核苷酸，其中所述编码包含抗体轻链可变区的多肽的序列是非食蟹猴物种的抗体轻链可变区的编码序列。

19.权利要求16的分离的多核苷酸，其中所述编码包含抗体轻链可变区的多肽的序列是人抗体轻链可变区的编码序列。

20.权利要求16的分离的多核苷酸，其中所述编码包含抗体轻链可变区的多肽的序列是小鼠抗体轻链可变区的编码序列。

21.权利要求11的分离的多核苷酸，其中所述分离的多核苷酸包含SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：13或SEQ ID NO：19所示的核苷酸序列。

22.权利要求16的分离的多核苷酸，其中所述分离的多核苷酸包含SEQ ID NO：29所示的核苷酸序列。

23.一种分离的抗体，所述抗体包含的第一多肽包含SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：14或SEQ ID NO：20所示的氨基酸序列，包含的第二多肽包含SEQ IDNO：30所示的氨基酸序列。

24.权利要求23的分离的抗体，进一步包含食蟹猴重链可变区和食蟹猴轻链可变区。

25.权利要求23的分离的抗体，进一步包含非食蟹猴物种的重链可变区和非食蟹猴物种的轻链可变区。

26.权利要求25的分离的抗体，其中所述重链可变区和轻链可变区来源于同一物种。

27.权利要求23的分离的抗体，进一步包含人抗体重链可变区和人抗体轻链可变区。

28.权利要求23的分离的抗体，进一步包含小鼠抗体重链可变区和小鼠抗体轻链可变区。

29.一种评估抗体效果的方法，包括：

a)将包含抗体轻链和重链可变区及食蟹猴抗体轻链和重链恒定区的嵌合抗体引入到食蟹猴体内；和

b)评估该嵌合抗体在食蟹猴体内的效果。

30.权利要求29的方法，其中所述评估包括评估该嵌合抗体治疗或预防猴疾病的有效性。

31.权利要求29的方法，其中所述评估包括检测猴体内的不良事件。

32.一种表达载体，所述表达载体包含权利要求11的分离的多核苷酸。

33.一种表达载体，所述表达载体包含权利要求16的分离的多核苷酸。

34.一种细胞，所述细胞至少含有权利要求32或33的表达载体中的一种。

35.一种制备多肽的方法，包括：

a)在适于表达该多肽的条件下培养含有权利要求32的表达载体的细胞；和

b)分离该多肽。

36.一种制备多肽的方法，包括：

a)在适于表达该多肽的条件下培养含有权利要求33的表达载体的细胞；和

b)分离该多肽。

37.一种制备嵌合抗体的方法，包括：

a)在适于表达该嵌合抗体的条件下，培养含有权利要求32的表达载体并进一步含有权利要求33的表达载体的细胞；和

b)分离该嵌合抗体。

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