CN1899327A - 墓头回总甙脂质体及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明是墓头回总甙脂质体及其制备方法，它克服了墓头回总甙口服吸收差，生物利用度低的缺点，提高了制剂的稳定性。由墓头回总甙与磷脂、胆固醇等辅料制备而成的脂质体或前体脂质体，其中还可加入支持剂等辅料。膜材磷脂可以采用天然磷脂或合成磷脂，磷脂与药物的重量比为0.1∶1～50∶1。制备方法可以采用乙醇注入法、薄膜分散法、反相蒸发法、挤出法、机械法，支持剂可以是山梨醇、甘露醇、蔗糖、氯化钠、水溶性淀粉、右旋糖苷、葡萄糖、乳糖等。支持剂与磷脂的比例为0.01∶1～500∶1。增强机体抗肿瘤的免疫机能，提取物不论口服或腹腔注射，对移植性小鼠肉瘤S－180及艾氏腹水癌，均有抑制作用；局部注射可使小鼠实体型腹水癌的局部肿瘤变干变硬，体外试验对艾氏腹水癌细胞具有明显的抑制和皮坏作用。

Description

墓头回总甙脂质体及其制备方法

技术领域

本发明涉及医药技术领域，确切地说它是一种墓头回总甙脂质体(包括前体脂质体)及其制备方法。

背景技术

墓头回(别名：追风箭、脚汗划、箭头风)为植物败酱科异叶败酱Patrinia beterophylla Bunge及糙叶败酱P.scabra Bunge的根或全草。产于辽宁、陕西、河南、河北、山西、广西等地。秋季刨采，洗净，晒干，生用。《本草纲目》草部第二十一卷三十八种。时珍曰：“《董炳集验方》治崩中，赤白带下，用一把，酒水各半盏，新红花一捻，煎七分，卧时温服，日近者一服，久则三服愈，其效如神。”墓头回为败酱科多年生草本植物异叶败酱(Patrinia hetero-phyllaBunge.)及糙叶败酱(P.scabra Bunge.)的根及根茎，具有清热解毒、消痈排脓、祛瘀止痛等功效；均含皂甙及挥发油。药理：能增强机体抗肿瘤的免疫机能，水提取物不论口服或腹腔注射，对移植性小鼠肉瘤S-180及艾氏腹水癌，均有抑制作用；局部注射可使小鼠实体型腹水癌的局部肿瘤变干变硬，从根部脱落，溃疡面亦可逐渐修得；体外试验对艾氏腹水癌细胞具有明显的抑制和皮坏作用。药效：败毒抗癌、涂湿祛瘀。墓头回总甙片治疗大肠癌的临床观察上海中医药杂志2000年12期中国肿瘤临床与康复2001年01期  观察墓头回总甙片治疗大肠癌的临床效果及配合化疗的增效减毒作用；是治疗大肠癌行之有效的药物，与化疗联用，可以提高临床效果，减轻化疗的副作用。治带良药墓头回中华实用中西医杂志2000年05期临床实践中，用墓头回配伍土茯苓，治疗妇人赤白带下，腥臭异常，或兼瘙痒者，屡试屡验。墓头回总甙片抗肿瘤作用的实验研究中国中医药科技1999年05期发现墓头回有体外抗癌作用，墓头回(异叶败酱)含有挥发油、皂甙及其它多种甙类，其挥发油已被证明具有镇静作用。墓头回中提取分离出总甙，进行了抗肿瘤作用的初步药效学研究。墓头回总苷片治疗大肠癌的临床研究中草药1999年07期墓头回(异叶败酱)总苷片结合手术、化疗治疗50例大肠癌患者，1年、2年、3年的生存率为79％、61％、40％。该制剂能增强患者体力状况，改善临床症状，显著降低癌胚抗原(CEA)水平；能够提高T细胞免疫功能，增强体内NK杀伤细胞活性。墓头回对小鼠免疫功能的影响中国中医基础医学杂志1998年04期墓头回多糖及皂甙均使小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率及吞噬指数提高(P＜0.05)；免疫器官重量有增进作用；淋巴细胞ANAE阳性百分率显著提高(P＜0.05)；血清溶血素生成值显著提高(P＜0.05)，而环磷酰胺组各项免疫指标均显著降低(P＜0.01)。结论：中药墓头回多糖及皂甙具有全面提高小鼠机体免疫系统的作用。中药墓头回提取物抗肿瘤活性的实验研究中兽医医药杂志1997年03期皂甙MS对移植性肿瘤肝癌Hep的作用较强，小鼠胸腺和脾脏重量略有增加，表明具有提高小鼠非特异性免疫功能的作用。墓头回总甙聚乳酸毫微粒冻干针剂；生物利用度低，而将墓头回总甙制成脂质体和前体脂质体未见推荐。

发明内容

本发明的目的是提供墓头回总甙脂质体和前体脂质体及其制备方法，以改善墓头回总甙难溶于水，口服吸收差，且生物利用度低。同时作为膜材的磷脂，本身无毒，而且能增强人体免疫力，具有许多保健功能。

本发明是由墓头回总甙与磷脂加胆固醇，也可不加胆固醇等辅料制备而成的(纳米)脂质体。制备方法可以采用前体脂质体法、乙醇注入法、薄膜分散法、反相蒸发法、PH梯度法、挤出法、机械法等制备脂质体和纳米脂质体的各种方法。机械法可为乳匀机、高压乳匀机、纳米机、匀浆机、高压微射流等各种机械设备制备脂质体的方法。制备脂质体的磷脂，可以是大豆卵磷脂、氢化大豆磷脂，也可以是合成磷脂，由乙醇注入法、薄膜分散法、反相蒸发法、挤出法、机械法制备墓头回总甙脂质体，其组成包括：墓头回总甙磷脂、胆固醇、VE等辅料.其中磷脂与墓头回总甙的重量比为0.1∶1～50∶1，胆固醇与磷脂的重量比为0～2∶1。

通过前体脂质体法制备脂质体的处方为：墓头回总甙、支持剂、磷脂、胆固醇、VE等。磷脂与墓头回总甙的重量比为0.1∶1～50∶1，胆固醇与磷脂的重量比为0～2∶1，支持剂与磷脂的比例为0.01∶1～500∶1。支持剂可以是山梨醇、甘露醇、蔗糖、氯化钠、水溶性淀粉、右旋糖苷、葡萄糖、乳糖等所用可用于冻干支持剂的药用材料或药用辅料。制备前脂质体的方法，可以采用减压旋转薄膜法、喷雾干燥法、流化床法或冻干法等各种造粒方法和干燥及包衣方法。前体脂质体使用前加水或缓冲液通过振摇、搅拌、超声水化形成脂质体，或制备成胶囊剂、片剂、颗粒剂等。在消化道中遇水直接自发形成脂质体。

用墓头回总甙脂质体(或前体脂体)可以制成片剂、口服液、口服乳、胶囊剂、颗粒剂、注射液、冻干粉针、输液乳剂、微乳剂、粉针剂等剂型。

本发明的优点是：改善墓头回总甙口服吸收差，生物利用度低的不足，利用磷脂作膜材，将墓头回总甙制成脂质体，磷脂能与墓头回总甙发挥协同和辅助作用，提高墓头回总甙的疗效。

具体实施方式：

本发明的具体制备方法，由下列实施实例举例说明，但本发明的保护范围，不局限于此。

实施例1：

乙醇注入法制备墓头回总甙脂质体：取大豆磷脂，胆固醇，VE加无水乙醇溶解后注入墓头回总甙水溶液中，恒温高速搅拌，减压蒸发除去乙醇，过微孔滤膜整粒，即得墓头回总甙脂质体，包封率可达64.8％。

实施例2：

薄膜分散法制备墓头回总甙脂质体：取大豆磷脂，胆固醇，VE用15ml氯仿溶解于150ml茄形瓶中，在旋转薄膜蒸发器上减压成膜并除尽有机溶剂，加10ml墓头回总甙水溶液水化，过微孔滤膜整粒，得墓头回总甙脂质体，包封率可达62.1％。

实施例3：

反相蒸发法制备墓头回总甙脂质体：称取大豆磷脂、胆固醇、VE加5ml氯仿使溶解，再加入10ml乙醚，然后加入15ml墓头回总甙的磷酸盐缓冲液中，浴式超声使形成均一单相体系，减压蒸发去除氯仿乙醚至凝胶形成，继续减压蒸发5～10分钟，涡旋振荡至水性悬浊液即脂质体形成。包封率可达28.5％。

实施例4：

减压旋转薄膜法制备墓头回总甙前体脂质体：取山梨醇和墓头回总甙以等量递加法混合均匀后置于100ml茄形瓶中，于一经改良的旋转蒸发仪上减压预热30分钟，取大豆磷脂、胆固醇、VE适量溶于乙醇液，真空旋转蒸发。在乙醇液全部加完后继续减压蒸发30～40分钟，将粉末取出置于干燥器中过夜后过筛(40目，450μm)，即得墓头回总甙前体脂质体。包封率可达24.8％。

实施例5：

流化床法制备墓头回总甙前体脂质体：山梨醇和墓头回总甙以等量递加法混合均匀后置于流化床中，取大豆磷脂、胆固醇、VE适量溶于无水乙醇中，通过流化床沸腾一步制粒，过筛，即得墓头回总甙前体脂质体。

实施例6：

流化床法制备墓头回总甙前体脂质体：墓头回总甙加蒸馏水，再加0.1NNaOH调PH使溶解，用蒸馏水调整体积(A液)；另取大豆磷脂、胆固醇、VE溶于无水乙醇中，通过流化床沸腾一步制粒，过20目和60目筛，即得墓头回总甙前体脂质体颗粒。

实施例7：

喷雾干燥法制备墓头回总甙前体脂质体：墓头回总甙加水，0.1N NaOH调PH使溶解，加入乳糖和EDTA并使溶解(A液)。另取大豆磷脂、胆固醇、VE溶于100ml无水乙醇中(B液)。将B液在搅拌下缓慢加入A液中，喷雾干燥制粒，过筛，即得墓头回总甙脂质体。

实施例8：

乙醇注入法、薄膜分散法制备的脂质体，喷雾干燥，即得墓头回总甙前体脂质体。

实施例9：

由前体脂质体制备墓头回总甙脂质体。取实施例7制得的前体脂质体2g，，加水10ml振摇10分钟并水化，即得墓头回总甙脂质体，显微镜放大1000倍观察可看到脂质体。

实施例10：

冷冻干燥法制备墓头回总甙前体脂质体：大豆磷脂、胆固醇、适量VE加无水乙醇溶解后在高速搅拌缓慢注入墓头回总甙水溶液中，减压蒸发除去乙醇。冷冻干燥24小时，得墓头回总甙前体脂质体。

实施例11：

将墓头回总甙脂质体过0.22μm微孔滤膜灭菌，充氮气，灌封，得墓头回总甙脂质体注射液。

实施例12：

将墓头回总甙脂质体加入10％蔗糖，过0.22μm微孔滤膜灭菌，分装，冷冻干燥，得粉针剂。

实施例13：

将墓头回总甙前体脂质体过筛，分装，得墓头回总甙脂质体颗粒剂。

实施例14：

将墓头回总甙前体脂质体过筛，装胶囊，得墓头回总甙脂质体胶囊剂。

实施例15：

将墓头回总甙前体脂质体过筛，压片，得墓头回总甙脂质体片剂。

本发明不限于以上所述的实施例。

Claims (8)

1、墓头回总甙脂质体及其制备方法，其特征在于：由墓头回总甙与磷脂等辅料制备而成的脂质体或前体脂质体。

2、根据权利要求1所述的墓头回总甙脂质体，其特征在于：其中可以加入胆固醇和支持剂。

3、根据权利要求1所述的墓头回总甙脂质体或前体脂质体，其特征在于：膜材磷脂可以采用天然磷脂，也可以是采用氢化大豆磷脂和合成磷脂等。

4、根据权利要求1所述的墓头回总甙脂质体或前体脂质体，其特征在于：磷脂与药物的重量比为0.1∶1～50∶1.且墓头回总甙0.18-0.60g。

5、根据权利要求2述的墓头回总甙脂质体或前体脂质体，其特征在于：支持剂可以山梨醇、甘露醇、蔗糖、氯化钠、水溶性淀粉、右旋糖苷、甜菊糖、葡萄糖、乳糖等，其中支持剂与磷脂的比例为：0.01∶1～500∶1。

6、根据权利要求1所述的墓头回总甙脂质体或前体脂质体，其特征在于：用该脂质体或前体脂质体可制得胶囊剂、片剂、颗粒剂、注射液、口服液、冻干粉针、输液等剂型。

7、一种如权利要求1所述的墓头回总甙脂质体的制备方法，其特征在于：制备方法可以采用前体脂质体法、乙醇注入法、薄膜分散法、反相蒸发法、挤出仪、机械法，PH梯度法等；机械法包括使用均质机、乳匀机、挤出机、纳米机、匀浆机、高压微射流等各种机械设备制备脂质体的方法。

8、一种如权利要求7所述的墓头回总甙前体脂质体的制备方法，其特征在于：采用前体脂质体法制备墓头回总甙脂质体，先制备前体脂质体，由制备的前体脂质体在使用前形成脂质体，或前体脂质体制备成胶囊剂、片剂、颗粒剂等，在消化道中遇水直接自发形成脂质体。