CN1861080A - 商陆皂苷元在制备防治乳腺增生药物的新用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了以中药商陆为原料提取的中药成分商陆皂苷元在预防和治疗乳腺增生方面的新用途。经大鼠口服和外用试验,证实商陆皂苷元在治疗前后对大鼠乳腺增生具有显著的预防和治疗作用,可做成口服制剂、外用制剂或胃肠道外给药制剂。商陆皂苷元具有较好的脂溶性,尤其适用于制备预防和治疗乳腺增生外用药物。
Description
技术领域
本发明涉及商陆皂苷元的新用途,尤其是涉及商陆皂苷元在预防和治疗乳腺增生方面的新用途。
背景技术
中药商陆系商陆属植物商陆(Phytolacca acinosa Roxb.)或垂序商陆(Phytolaccaamericana L.)的干燥根,性味苦寒有毒,归肺、脾、肾、大肠经。功能逐水消肿,通利二便,解毒散结,主治水肿胀满,小便不利,外敷痈肿疮毒,为历版中国药典收载品种。国内有报道可用于治疗慢性气管炎、乳腺增生和肿瘤。
从1984年Kassanis等从商陆中提取得到一种抗病毒的糖蛋白后,国内对商陆的的化学成份研究愈来愈多。迄今为止,已从商陆中分离出超过50种的化学成分,包括多种水种溶性成份三萜类皂苷及其配糖体、两种酸性杂多糖、脂溶性成分、蛋白多肽及微量元素等。
商陆皂苷甲为三萜类皂苷,化学式为:3-O-(β-D-吡喃葡萄糖-β-D-吡喃木糖)-2-羟基商陆酸-30-甲酯。已知商陆皂苷甲具有抗炎和抑制免疫的药理作用。
商陆皂苷元可通过商陆皂苷甲水解去除糖基来制备,亦可通过商陆直接提取分离得到(参见《中草药》,1984,15(12)22)。商陆皂苷元的化学式为:
已知苷元与糖基结合成苷以后,极性增加,水溶性增大。因此与商陆皂苷甲相比,商陆皂苷元极性更低,脂溶性更高。已知商陆皂苷元具有祛痰的药理作用。
发明内容
本发明的目的在于提供商陆皂苷元在制备预防或治疗乳腺增生的药物中的新用途。特别是商陆皂苷元作为外用药物用于预防和治疗乳腺增生的新用途。
所述预防或治疗乳腺增生药物的用途,其特征在于所述药物为含治疗有效量的商陆皂苷元和药学上可接受组分和/或载体。
所述预防或治疗乳腺增生药物的用途,其特征在于:所述药物为含商陆皂苷元,和药学上可接受组分和/或载体的口服制剂、胃肠道外给药制剂或外用制剂。
所述预防或治疗乳腺增生药物的用途,其特征在于:所述药物为含商陆皂苷元,和药学上可接受组分和/或载体的口服制剂,包括丸剂、散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、煎膏剂、糖浆剂、合剂、滴丸剂、酒剂。
所述预防或治疗乳腺增生药物的用途,其特征在于:所述药物为含商陆皂苷元,和药学上可接受组分和/或载体的胃肠道外给药制剂,包括注射剂、大输液、静脉滴注剂等。
所述预防或治疗乳腺增生药物的用途,其特征在于:所述药物为含商陆皂苷元,和药学上可接受组分和/或载体的外用制剂,包括贴膏剂、软膏剂、凝胶剂、搽剂、涂膜剂、洗剂、气雾剂或喷雾剂。
可与商陆皂苷元混合制备各种口服制剂如片剂、硬胶囊剂、颗粒剂的辅料有:崩解剂如羟丙基淀粉、羟丙纤维素、羧甲基淀粉钠、羧甲基纤维素钙、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠等;填充剂如乳糖、蔗糖、甘露醇、微晶纤维素、糊精、淀粉、磷酸钙、磷酸氢钙、硫酸钙、碳酸钙、环糊精、微粉纤维素等;润滑剂如滑石粉、硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸钙、微粉硅胶、氢化植物油、聚乙二醇4000和6000;润湿剂如:十二烷基硫酸钠、吐温80;骨架材料如羟丙甲纤维素、乙基纤维素等。可与本发明商陆皂苷元混合制备软胶囊的油相可以是大豆油、聚乙二醇400、棉籽油、花生油、麻油、玉米油、橄榄油等;亦可加增溶剂或潜溶剂及抗氧剂等,还可选用如下辅料:溶剂如聚乙二醇400、棉籽油、花生油、麻油、玉米油、橄榄油等;增溶剂或潜溶剂如:吐温80、聚氧乙烯醚蓖麻油、苯甲酸苄酯、乳酸乙酯等;抗氧剂如:没食子酸丙酯、特丁基苯酚(BHT)、维生素E等。
所述预防或治疗乳腺增生药物的用途,其特征在于:所述药物为含商陆皂苷元,和药学上可接受组分和/或载体的贴膏剂,包括橡胶膏剂、巴布膏剂和贴剂等。橡胶膏剂系指药材提取物或和化学药物与橡胶等基质混匀后,涂布于背衬材料上制成的贴膏剂。常用溶剂为汽油,常用基质有橡胶、松香、凡士林、羊毛脂和氧化锌等。也可用其他适宜溶剂和基质。巴布膏剂系指药材提取物、药材或和化学药物与适宜的亲水性基质混匀后,涂布于背衬材料上制成的贴膏剂。常用基质有羧甲基纤维素钠、明胶、甘油和微粉硅胶等。贴剂系指药材提取物或和化学药物与适宜的高分子材料制成的一种薄片状贴膏剂。主要由背衬层、药物贮库层、粘胶层以及防粘层组成。常用基质有乙烯、醋酸乙烯共聚物、硅橡胶和聚乙二醇等。贴膏剂常用的背衬材料有棉布、无纺布、纸等;常用的盖衬材料有防粘纸、塑料薄膜、铝箔聚乙烯复合膜、硬质纱布等。
所述预防或治疗乳腺增生药物的用途,其特征在于:所述药物为含商陆皂苷元,和药学上可接受组分和/或载体的凝胶剂。外用凝胶剂系指由药材提取物加适宜基质制成的、具凝胶特性的半固体或稠厚液体制剂。按分散介质不同,凝胶剂可分为水性凝胶与油性凝胶。水性凝胶基质一般由水、甘油或丙二醇与纤维素衍生物、卡波姆和海藻酸盐、西黄蓍胶、明胶、淀粉等构成;油性凝胶基质由液状石蜡与聚氧乙烯或脂肪油与胶体硅或铝皂、锌皂构成。必要时可加入保湿剂、防腐剂、抗氧剂、透皮促进剂等附加剂。
所述预防或治疗乳腺增生药物的用途,其特征在于:所述药物为含商陆皂苷元,和药学上可接受组分和/或载体的软膏剂。软膏剂系指药材提取物、药材细粉与适宜基质均匀混合制成的半固体外用制剂。常用基质分为油脂性、水溶性和乳剂基质,其中与乳剂基质制成的软膏又称为乳膏剂;油脂性基质常用的有凡士林、石蜡、液状石蜡、硅油、蜂蜡、硬脂酸等;水溶性基质主要有聚乙二醇;乳剂基质常用的有钠皂、三乙醇胺皂类、脂肪醇硫酸(酯)钠类(十二烷基硫酸钠)、聚山梨酯、羊毛脂、单甘油酯、脂肪醇等。必要时可加入保湿剂、防腐剂、抗氧剂或透皮促进剂。
所述预防或治疗乳腺增生药物的用途,其特征在于:所述药物为含商陆皂苷元,和药学上可接受组分和/或载体的搽剂。搽剂系指药材用乙醇、油或其他适宜的溶剂制成的澄清或混悬的外用液体制剂。常用的溶剂有水、乙醇、植物油、液状石蜡或甘油等,必要时可加适量防腐剂或抗氧剂。
所述预防或治疗乳腺增生药物的用途,其特征在于:所述药物为含商陆皂苷元,和药学上可接受组分和/或载体的涂膜剂。涂膜剂系指药材经适宜方法提取或溶解,与成膜材料制成的供外用涂抹,能形成薄膜的黏稠液体制剂。常用乙醇等易挥发的有机溶剂为溶剂;常用的成膜材料有聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、丙烯酸树脂类等,一般宜加入增塑剂、保湿剂等。
所述预防或治疗乳腺增生药物的用途,其特征在于:所述药物为含商陆皂苷元,和药学上可接受组分和/或载体的气雾剂或喷雾剂。气雾剂系指药材提取物、药材细粉与适宜的抛射剂共同封装在具有特制阀门装置的耐压容器中,使用时借助抛射剂的压力将内容物呈细雾状、泡沫状或其他形态喷出的制剂。其中以泡沫形态喷出的可称泡沫剂。不含抛射剂,借助手动泵的压力或其他方法将内容物以雾状等形态喷出的制剂称为喷雾剂。气雾剂和喷雾剂按内容物组成分为溶液型、乳液型或混悬型。可用于呼吸道吸入、皮肤、黏膜或腔道给药等。按药物的性质添加适宜的溶剂、增溶剂、助悬剂、乳化剂、稳定剂(如抗氧剂、表面活性剂、防腐剂)或其他附加剂。
所述预防或治疗乳腺增生药物的用途,其特征在于:所述药物为含商陆皂苷元,和药学上可接受组分和/或载体的洗剂。洗剂系指药材经适宜的方法提取制成的供皮肤或腔道涂抹或冲洗用的外用液体制剂。根据需要可加适量防腐剂、抗氧剂、助悬剂或乳化剂等。
具体实施方式
下面将描述本发明的几个实施例,但本发明的内容完全不局限于此。
实施例1
商陆总皂苷的提取
商陆粗粉,用60%乙醇回流提取2-4次,合并提取液,减压回收乙醇,得浓缩浸膏。浸膏以适量水稀释,用水饱和正丁醇反复多次萃取,合并正丁醇萃取液,活性炭脱色,减压回收正丁醇,得浅黄色粉末,即商陆总皂苷。
实施例2
商陆总皂苷的提取
商陆粗粉,用水煎煮提取2-4次,合并提取液,放置过夜,上清液过树脂柱(HPD-100等弱极性树脂或D101等非极性树脂),以2-4BV洗脱除去水溶性杂质,再以60%乙醇洗脱,醇液经减压浓缩得浓缩液,以活性炭脱色,减压回收溶剂,得浅黄色粉末,即商陆总皂苷。
实施例3
商陆皂苷甲的提取和分离
取商陆总皂苷,经硅胶柱层析,氯仿—甲醇(8.5∶1.5)洗脱,收集商陆皂苷甲流份,回收溶剂,干燥即得商陆皂苷甲。
参见:商陆有效成分的研究/I.三萜皂甙的分离与鉴定中草药1984,15(2)7-11
实施例4
商陆皂苷甲的分离
取商陆总皂苷,经反相填料进行色谱分离,以乙醇—水进行梯度洗脱,收集商陆皂苷甲流份,回收溶剂,干燥即得商陆皂苷甲。
实施例5
商陆皂苷元的分离
取商陆皂苷甲,用10倍量60%乙醇(V/W),再加入5倍量(V/W)浓盐酸,摇匀,水浴回流水解1小时,过滤沉淀,水洗至中性,干燥即得商陆皂甙元。
实施例6
商陆皂苷元的提取和分离
取商陆根粉,乙醇回流提取5次,合并提取液,减压回收乙醇,烘干,得干浸膏,加水,浓硫酸,加热使微沸4小时,放冷滤集固体物,水洗至中性,加乙醇、活性炭,回流30分钟,趁热过滤,滤液减压回收乙醇至1/2体积,倾入冷水,即有大量沉淀析出,过滤、水洗、干燥,即得商陆皂苷元粗品。
商陆皂苷元粗品装入硅胶柱顶层,依次以氯仿及不同比例的氯仿—甲醇洗脱,收集流份,重结晶,可得商陆皂苷元。
(参见《中草药》,1984,15(12)22:商陆皂甙元的分离及鉴别)
实施例7
为了更好的理解本发明的实质,下面列举商陆皂苷元的药效试验及结果来说明其在防治乳腺增生方面的新用途。
1、试验目的
为了证实商陆皂苷元具有预防和治疗乳腺增生的作用,和观察其药效强度和作用特点,为进一步研究提供试验依据,进行了以下相关药效学研究:
(1)商陆皂苷元软膏和商陆皂苷甲软膏外用对大鼠乳腺增生的影响;
(2)商陆皂苷元和商陆皂苷甲口服对大鼠乳腺增生的影响;
(3)商陆皂苷元和商陆皂苷甲口服预防给药对大鼠乳腺增生的影响。
2、受试药物
1)商陆皂苷元
外用:乳白色粉末,实验前制备成浓度为5%的软膏剂备用(含2%的氮酮);
灌胃给药:实验前用10%CMC-Na水溶液配制。
2)商陆皂苷甲
外用:乳白色粉末,实验前制备成浓度为10%的软膏剂备用(含2%的氮酮);
灌胃给药:实验前用蒸馏水配制。
3)阳性对照药
枸橼酸他莫昔芬片,白色片剂,10mg/片,德国先灵(南京)药业公司分装。实验前用蒸馏水配制成0.05mg/ml浓度。
3、实验方法及结果
3.1商陆皂苷元软膏和商陆皂苷甲软膏外用对大鼠乳腺增生的影响
3.1.1实验方法
3.1.1.1造模
选取雌性未孕Wistar大鼠,肌肉注射苯甲酸雌二醇注射液0.5mg/kg/d,连续50天。继而肌肉注射黄体酮注射液4mg/kg/d,连续10天。于造模第60天,用电子游标卡尺测量乳腺高度和直径。随机选取乳腺直径1mm的10只大鼠处死,摘取乳腺,通过病理切片镜下观察乳腺小叶明显增生,腺泡或导管处于扩张状态,腺管上皮增生,层次增多,腺泡内及导管内有分泌物存在,确认乳腺增生模型成功。
3.1.1.2分组及给药
选取上述对乳腺增生模型成功大鼠30只,按乳腺增生直径,随机分为三组,模型组、商陆皂苷甲组和商陆皂苷元组,每组10只。同时取同批正常动物10只作对照组。外用药组在左侧鼠蹊部第二颗乳腺周围1.5cm2反复涂抹商陆皂苷元外用软膏0.1g,每日一次,连续7天。对照组和模型组涂抹等量凡士林。上述各组大鼠于给药前和给药结束后分别测量乳腺直径和高度。
3.1.2实验结果(见表1)
1)涂抹外用药后与对照组比较,涂抹处皮肤无红斑、水肿等过敏反应。
2)商陆皂苷甲组给药后与给药前比较乳腺直径、高度明显降低(P<0.05);与模型组相比也明显下降(P<0.05)。结果见表1。
3)商陆皂苷元组给药后与给药前比较乳腺直径、高度明显降低(P<0.01);与模型组相比也明显下降(P<0.01);与商陆皂苷甲组比较,下降更明显。结果见表1。
表1 外用药治疗前后乳腺变化(
x±s)
分组 | 动物数(N) | 治疗前 | 治疗后 | ||
乳腺直径(mm) | 乳腺高度(mm) | 乳腺直径(mm) | 乳腺高度(mm) | ||
对照组模型组皂苷甲组皂苷元组 | 10101010 | 01.68±0.121.62±0.291.57±0.20 | 01.63±0.281.58±0.131.46±0.25 | 01.59±0.161.35±0.19*△1.18±0.19**△△ | 01.56±0.301.32±0.25*△1.15±0.26**△△ |
治疗前后比较*p<0.05,**p<0.01;与模型组比较△p<0.05,△△p<0.01
3.2商陆皂苷元和商陆皂苷甲口服对大鼠乳腺增生的影响
3.2.1实验方法
选取上述乳腺增生模型大鼠70只,按乳腺增生变化程度,随机分为7组,每组10只,模型组、阳性对照药枸橼酸他莫昔芬片0.5mg/kg组、商陆皂苷甲剂量组(6mg/kg)、商陆皂苷元4个剂量组(6、3、1.5mg/kg)。给药体积均为1ml/100g,每日一次,连续ig给药15天。模型组与正常对照组给予等体积的蒸馏水。于给药后第3、9、15天,测量大鼠乳腺直径,第16天将大鼠麻醉后,解剖摘取乳腺、肝、肾、肾上腺和卵巢,10%福尔马林固定,石蜡包埋,HE染色,切片,做病理组织学检查。
3.2.2实验结果(见表2)
表2 商陆皂苷元对大鼠乳腺增生的直径(mm)影响(
x±s)
组别 | 动物数(n) | 剂量(mg/kg/d) | 给药前 | 给药后 | ||
3d | 9d | 15d | ||||
对照组模型组皂苷元-1皂苷元-2皂苷元-3皂苷甲组阳性药组 | 10101010101010 | --631.560.5 | 01.57±0.121.62±0.361.58±0.161.59±0.141.55±0.211.56±0.19 | 01.53±0.111.44±0.231.46±0.271.53±0.151.42±0.13*1.48±0.17 | 01.48±0.131.33±0.22*△1.32±0.54*△1.31±0.17*△1.30±0.34*△1.11±0.20*△△ | 01.45±0.09*1.12±0.18**△△1.19±0.07**△1.14±0.23**△△1.09±0.09**△△1.04±0.21**△△ |
1.与模型组比较△P<0.05,△△P<0.01;
2.与给药前比较*P<0.05,**P<0.01;
结果表明:
1)商陆皂苷元各剂量组大鼠乳腺直径给药后与治疗前比较均有下降的趋势,随着给药时间的延长各剂量作用均加强,给药9、15天与治疗前、模型组比较均有统计学差异(p<0.05、p<0.01)。阳性对照药枸橼酸他莫昔芬片显示了与商陆皂苷甲和商陆皂苷元各剂量组同样的规律。
2)麻醉后处死解剖,肉眼观察心、肝、脾、肺、肾、卵巢等脏器未见明显病理改变。
3.3商陆皂苷元和商陆皂苷甲口服预防给药对大鼠乳腺增生的影响
3.3.1实验方法
选用Wistar大鼠雌性40只,体重200-220g,按体重随机分为四组,每组10只。对照组、模型组、商陆皂苷甲6mg/kg组和商陆皂苷元6mg/kg组,除对照组外,各组大鼠均肌肉注射苯甲酸雌二醇注射液0.5mg/kg/d,连续50天,继而注射黄体酮注射液4mg/kg·d,连续10天,对照组肌肉注射等体积的生理盐水,同时各给药组每日ig给药一次,连续60天,模型组,对照组给予等体积的蒸馏水,给药体积均为1ml/100g。当给药进行到53天时,各组大鼠乳腺逐渐出现红肿、涨大。采用游标卡尺测量各组大鼠左侧鼠蹊部第二颗乳腺直径。实验第60天时,将大鼠麻醉后,解剖摘取乳腺、卵巢、肝、肾、肾上腺,10%福尔马林固定,石蜡包埋,HE染色,切片,做病理组织学检查。
3.3.2实验结果
表3商陆皂苷元预防给药对大鼠乳腺增生影响(
x±s)
组别 | 动物数(n) | 剂量(mg/kg) | 乳腺直径(mm) |
对照组模型组皂苷元组皂苷甲组 | 10101010 | --66 | 0.19±0.431.54±0.27**1.06±0.19**△△1.12±0.09**△△ |
与对照组比:*p<0.05,**p<0.01;与模型组比:*p<0.05。
结果表明:商陆皂苷元6mg/kg组与模型组比较明显抑制乳腺增生(p<0.01),与商陆皂苷甲显示同样的效果。
通过以上两种给药方式观察了商陆皂苷元对大鼠乳腺增生模型乳腺直径及病理形态变化的影响,结果显示商陆皂苷元抑制乳腺增生的作用。
综上所述,可以得到本发明的优点在于:
(1)本发明发掘了已知化合物商陆皂苷元新的医药用途,开拓了一个新的应用领域。
(2)本发明中的商陆皂苷元具有显著的治疗和预防乳腺增生的效果,预示着很好的药用前景。
(3)本发明的原料来源丰富、价廉、制备工艺简单,可做成口服制剂、胃肠道外给药制剂或外用制剂。
(4)商陆皂苷元比商陆皂苷甲的脂溶性强,大大增加了透皮吸收力,可以制备用于防治乳腺增生的高效安全的外用制剂。
Claims (4)
1、商陆皂苷元在制备预防或治疗乳腺增生的药物中的用途。
2、权利要求1所述预防或治疗乳腺增生药物的用途,其特征在于所述药物为含治疗有效量的商陆皂苷元和药学上可接受组分和/或载体。
3、权利要求2所述预防或治疗乳腺增生药物的用途,其特征在于:所述药物为含商陆皂苷元,和药学上可接受组分和/或载体的口服制剂、胃肠道外给药制剂或外用制剂。
4、权利要求2所述预防或治疗乳腺增生药物的用途,其特征在于:所述药物为含商陆皂苷元,和药学上可接受组分和/或载体的外用制剂。
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PB01 | Publication | ||
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