CN1444948B - 灯盏花素脂质体及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明是灯盏花素脂质体及其制备方法，它克服了灯盏花素口服吸收差，生物利用度低的缺点，提高了灯盏花素注射剂的稳定性。由灯盏花素与磷脂、胆固醇等辅料制备而成的脂质体或前体脂质体，其中还可加入支持剂等辅料。膜材磷脂可以采用天然磷脂或合成磷脂，磷脂与药物的重量比为0.1∶1～50∶1。制备方法可以采用乙醇注入法、薄膜分散法、反相蒸发法、挤出法、机械法，支持剂可以是山梨醇、甘露醇、蔗糖、氯化钠、水溶性淀粉、右旋糖苷、甜菊糖、葡萄糖、乳糖等。支持剂与磷脂的比例为0.01∶1～500∶1。本发明可用于制备治疗脑血栓、冠心病等心脑血管疾病的药物。

Description

灯盏花素脂质体及其制备方法

技术领域：

本发明涉及医药技术领域，确切地说它是一种灯盏花素脂质体(包括前体脂质体)及其制备方法。

背景技术：

灯盏花素是从中草药灯盏花[Erigeron breriscapus(vant)Handmazz]中提取分离的黄酮类有效成分，在治疗脑血栓形成、脑梗塞、中风后瘫痪、冠心病心绞痛等心脑血管疾病上有非常显著的效果，大量临床研究表明，其治疗效果显著优于复方丹参。药理研究表明，灯盏花素具有扩张脑血管、舒张冠状动脉的作用，能降低脑血管阻力，提高血脂屏障通透性，显著增加脑血流量和心脏冠脉流量，改善微循环并有对抗血小板聚集，抑制体内凝血功能，促进纤溶活性。临床上主要用来治疗脑血栓形成、脑梗塞、冠心病和心绞痛等心脑血管疾病，疗效确切。

但灯盏花素口服生物利用度低。灯盏花素为灯盏花乙素为主和含有少量灯盏花甲素的混合物，灯盏花乙素的化学结构为4’，5，6-三羟基黄酮-7-葡萄糖醛酸苷，含有一个羧基，口服时在胃和小肠中主要以洲离的分子形式存在而难以溶解，造成吸收差，生物利用度低。有专利(公开号CN1228959)将灯盏花素制成软胶囊，速溶片(公开号CN12552277A)和磷脂复合物(公开号：CN1359682A)，改善灯盏花素的溶出速度。灯盏花素注射剂稳定性差，易缓慢水解、氧化和沉淀，较难解决澄明度差或易变的问题。为提高稳定性，有专利(公开号：CN118356)在注射液处方中加入亚硫酸氢钠等抗氧剂。也有专利(公开号：CN1133180)注射用灯盏花素冻干剂及制备工艺；公开号：CN1095934灯盏花素粉针剂及制备方法)将灯盏花素制成冻干粉针。而将灯盏花素制成脂质体和前体脂质体未见报道。

发明内容：

本发明的目的是提供灯盏花素脂质体和前体脂质体及其制备方法，以改善灯盏花素口服吸收差，生物利用度低；灯盏花素注射剂稳定性差的缺陷。同时，作为膜材的磷脂，本身无毒，而且能增强人体免疫力，具有许多保健功能。大量研究证明，磷脂可降低血清胆固醇、甘油三酯含量，预防动脉硬化并可清扫血管使其柔软，能显著减轻动脉粥状硬化及心肌缺血——再灌注损伤程度，清除动脉硬化引发的心脑血管疾病等多种慢性病变的诱发因素。因此磷脂对心脑血管疾病有积极的预防治疗作用，将灯盏花素制成脂质体，磷脂能与灯盏花素发挥协同和辅助治疗作用。增加灯盏花素对心脑血管疾病的疗效。

本发明是由灯盏花素与磷脂加胆固醇(也可不加胆固醇)等辅料制备而成的脂质体(含纳米脂质体)。制备方法可以采用前体脂质体法、乙醇注入法、薄膜分散法、反相蒸发法、pH梯度法、挤出法、机械法(包括使用均质机、乳匀机、高压乳匀机、挤出仪、纳米机、匀浆机、高压微射流等各种机械设备制备脂质体的方法)等制备脂质体和纳米脂质体的各种方法。制备脂质体的磷脂，可以是大豆卵磷脂、氢化大豆磷脂，也可以是合成磷脂，由乙醇注入法、薄膜分散法、反相蒸发法、挤出法、机械法制备灯盏花素脂质体，其组成包括：灯盏花素和磷脂、胆固醇、V_E等辅料。其中磷脂与灯盏花素的重量比为0.1∶1～50∶1，胆固醇与磷脂的重量比为0～2∶1。

通过前体脂质体法制备脂质体的处方为：灯盏花素、支持剂、磷脂、胆固醇、V_E等。磷脂与灯盏花素的重量比为0.1∶1～50∶1，胆固醇与磷脂的重量比为0～2∶1，支持剂与磷脂的比例为0.01∶1～500∶1。支持剂可以是山梨醇、甘露醇、蔗糖、氯化钠、水溶性淀粉、右旋糖苷、甜菊糖、葡萄糖、乳糖等所用可用于冻干支持剂的药用材料或药用辅料。制备前体脂质体的方法，可以采用减压旋转薄膜法、喷雾干燥法、流化床法或冻干法等各种造粒方法和干燥及包衣方法。前体脂质体使用前加水或缓冲液通过振摇、搅拌、超声水化形成脂质体，或制备成胶囊剂、片剂、颗粒剂等。在消化道中遇水直接自发形成脂质体。

用灯盏花素脂质体(或前体脂质体)可以制成口服液、口服乳、胶囊剂、片剂、颗粒剂、注射液、冻干粉针、输液乳剂、微乳剂、粉针剂等剂型。

本发明的优点是：改善了灯盏花素口服吸收差，生物利用度低的不足，提高了灯盏花素注射剂的稳定性，利用磷脂作膜材，将灯盏花素制成脂质体，磷脂能与灯盏花素发挥协同和辅助作用，提高灯盏花素对心脑血管疾病的疗效。

具体实施方式：

本发明的具体制备方法，由下列实施实例举例说明，但本发明的保护范围，不局限于此。

实施例1：

乙醇注入法制备灯盏花素脂质体

取大豆磷脂，胆固醇，V_E加无水乙醇溶解后注入灯盏花素水溶液中，恒温高速搅拌，减压蒸发除去乙醇，过微孔滤膜整粒，即得灯盏花素脂质体，包封率为64.8％。

实施例2：

薄膜分散法制备灯盏花素脂质体

取大豆磷脂，胆固醇，V_E用15ml氯仿溶解于150ml茄形瓶中，在旋转薄膜蒸发器上减压成膜并除尽有机溶剂，加10ml灯盏花素水溶液水化，过微孔滤膜整粒，得灯盏花素脂质体，包封率为59.2％。

实施例3：

反相蒸发法制备灯盏花素脂质体

称取大豆磷脂、胆固醇、V_E加5ml氯仿使溶解，再加入10ml乙醚，然后加入15ml灯盏花素的磷酸盐缓冲液中，浴式超声使形成均—单相体系，减压蒸发去除氯仿乙醚至凝胶形成，继续减压蒸发5～10分钟，涡旋振荡至水性悬浊液即脂质体形成。包封率为24.6％。

实施例4：

减压旋转薄膜法制备灯盏花素前体脂质体

取山梨醇和灯盏花素以等量递加法混合均匀后置于100ml茄形瓶中，于一经改良的旋转蒸发仪上减压预热30min，取大豆磷脂、胆固醇、V_E适量溶于乙醇中，分批加入磷脂的乙醇液，真空旋转蒸发。在乙醇液全部加完后继续减压蒸发30～40min，将粉末取出置于干燥器中过夜后过筛(40目，450μm)，即得灯盏花素前体脂质体。包封率为21.9％。

实施例5：

流化床法制备灯盏花素前体脂质体

山梨醇和灯盏花素以等量递加法混合均匀后置于流化床中，取大豆磷脂、胆固醇、V_E适量溶于无水乙醇中，通过流化床沸腾一步制粒，过筛，即得灯盏花素前体脂质体。

实施例6：

流化床法制备灯盏花素前体脂质体

灯盏花素加蒸馏水，再加0.1N NaOH调pH使溶解，用蒸馏水调整体积(A液)；另取大豆磷脂、胆，固醇、V_E溶于无水乙醇中(B液)，将B液在搅拌下缓慢加入A液中，喷于流化床中的乳糖中，通过流化床沸腾一步制粒，过20目和60目筛，即得灯盏花素前体脂质体颗粒。流化床沸腾制粒条件，仪器；日本产FD-MP-01型粉末包衣机。

实施例7：

喷雾干燥法制备灯盏花素前体脂质体

灯盏花素加水，0.1N NaOH调pH使溶解，加入乳糖和EDTA并使溶解(A液)。另取大豆磷脂、胆固醇、VE溶于100ml无水乙醇中(B液)。将B液在搅拌下缓慢加入A液中，喷雾干燥制粒，过筛，即得灯盏花素胶体脂质体。

实施例8：

喷雾干燥法制备灯盏花素前体脂质体

乙醇注入法、薄膜分散法制备的脂质体，喷雾干燥，即得灯盂花素前体脂质体。

实施例9：

由前体脂质体制备灯盏花素脂质体

取实施例7制得的前体脂质体2g，加水10ml振摇10min水化，即得灯盏花素脂质体，显微镜放大1000倍观察可看到脂质体。

实施例10：

冷冻干燥法制备灯盏花素前体脂质体

大豆磷脂、胆固醇，适量VE加无水乙醇溶解后在高速搅拌缓慢注入灯盏花素水溶液中，减压蒸发除去乙醇。冷冻干燥24小时，得灯盏花素前体脂质体。

实施例11：

将灯盏花素脂质体过0.22μm微孔滤膜灭菌，充N₂，灌封，得灯盏花素脂质体注射液。

实施例12：

将灯盏花素脂质体加入10％蔗糖，过0.22μm微孔滤膜灭菌，分装，冷冻干燥，得粉针剂。

实施例13：

将灯盏花素前体脂质体过筛，分装，得灯盏花素脂质体颗粒剂。

实施例14：

将灯盏花素前体脂质体过筛，装胶囊，得灯盏花素脂质体胶囊剂。

实施例15：

将灯盏花素前体脂质体过筛，压片，得灯盏花素脂质体片剂。

Claims (1)

1.灯盏花素前体脂质体，包括灯盏花素、大豆磷脂、胆固醇、V_E、支持剂，其特征在于：磷脂与灯盏花素的重量比为0.1∶1～50∶1，胆固醇与磷脂的重量比为2∶1，支持剂与磷脂的比例为0.01∶1～500∶1，其是通过如下方法制备而成的：

灯盏花素加蒸馏水，再加0.1N NaOH调pH使溶解，用蒸馏水调整体积得A液；另取大豆磷脂、胆固醇、V_E溶于无水乙醇中得B液，将B液在搅拌下缓慢加入A液中，喷于流化床中的乳糖中，通过流化床沸腾一步制粒，过20目和60目筛，即得灯盏花素前体脂质体颗粒。