CN1850836A - 一类青葙皂苷类化合物及其在医药领域的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及天然药物化学及医药技术领域，公开了从苋科(Amaranthcea)植物青葙中分离到的其化学结构通式为式(1)所示的两种青葙皂苷新化合物青葙苷A(Celosin A)和青葙苷B(Celosin B)的结构及其提取分离方法；以及包括所述二种新化合物在内，其化学结构通式为式(1)的青葙皂苷类化合物及其衍生物在制备治疗和预防包括脂肪肝、肝损伤、肝纤维化、肝硬化；冠心病、心肌梗塞、心肌缺血、脑缺血、脑梗塞、脑中风；糖尿病、高胰岛素血症、胰岛素抵抗力症、肥胖症、葡萄糖不耐受性、和/或高血压肥胖症、高脂血症；痴呆；抑郁或焦虑、失眠等疾病在内的药物方面的应用。

Description

一类青葙皂苷类化合物及其在医药领域的应用

技术领域

本发明涉及天然药物化学及医药技术领域，涉及从青葙(Celosia argentea L.)中提取分离的青葙皂苷类新化合物的结构，以及包括该新化合物及其衍生物在内的青葙皂苷类在制备治疗和预防肝病、心脑血管病、代谢性疾病、痴呆、抑郁或焦虑药物方面的应用。

背景技术

肝病、心脑血管病、代谢性疾病以及痴呆、抑郁或焦虑等都是危害人类健康的常见病和多发病。因此，研究和开发防治上述诸病的有效药物，始终是科研工作者努力的方向。

青葙子(Semen Celosiae)为苋科(Amaranthcea)青葙(Celosia argentea L.)的干燥成熟种子。味苦，性微寒，有清肝、明目、祛风热、降血压、抗炎之功效。常用于目赤肿痛、角膜炎、角膜云翳、虹膜睫状体炎、眩晕、皮肤风热瘙痒、疥癣的治疗。但是，到目前为止，没有一篇文献报道把青葙中的青葙皂苷成分用于制备预防和治疗肝病、心脑血管病、代谢性疾病、痴呆、抑郁或焦虑药物的报道。

发明内容

本发明的目的在于从天然产物中寻找安全有效的用于制备预防和治疗预防和治疗肝病、心脑血管病、代谢性疾病、痴呆、抑郁或焦虑的天然产物，经过不断努力，终于从苋科(Amaranthcea)植物青葙中分离到了青葙皂苷成分，分别命名为青葙苷A、青葙苷B；同时，发现青葙总皂苷、所有青葙中的皂苷类成分及其衍生物对上述疾病均有明显的预防和治疗作用，从而完成了本发明。

本发明的青葙总皂苷、所有青葙中的皂苷类成分及其衍生物可用于预防和治疗肝病、心脑血管病、代谢性疾病、痴呆、抑郁或焦虑。这些疾病包括脂肪肝、肝损伤、肝纤维化、肝硬化、冠心病、心肌梗塞、心肌缺血、脑缺血、脑梗塞、脑中风、糖尿病、高胰岛素血症、胰岛素抵抗力症、肥胖症、葡萄糖不耐受性、和/或高血压肥胖症、高脂血症；痴呆；抑郁或焦虑、失眠。

本发明是通过如下技术方案完成的，具体内容包括：两种青葙皂苷新化合物的提取分离，结构鉴定；青葙总皂苷、青葙中的皂苷类成分及其衍生物预防和治疗肝病、心脑血管病、代谢性疾病、痴呆、抑郁或焦虑的药理药效研究及与之相关的医药用途的研究。

(1)提取分离

本发明者利用采集于安徽毫州的青葙干燥成熟种子(药材称青葙子)，粉碎后用含水乙醇渗漉提取，提取液减压浓缩得浓缩液，浓缩液通过大孔树脂柱，依次用水、30％乙醇、60％乙醇和95％乙醇梯度洗脱。将30％和60％的乙醇洗脱液分别减压浓缩、干燥，分别得青葙总皂苷(青葙提取物)I和青葙总皂苷(青葙提取物)II，将青葙总皂苷(青葙提取物)I和青葙总皂苷(青葙提取物)II合并得青葙总皂苷(青葙提取物)。将青葙总皂苷经酸水解并脱色，得到3种苷元，分别为2-羟基-23-醛基-齐墩果酸、2-羟基-23-羧基-齐墩果酸、2-羟基-23-甲基-齐墩果酸。将青葙总皂苷进行反复硅胶柱层析，并用Sephadex LH-20或反向硅胶纯化，最终获得2个新化合物。

(2)结构鉴定

新化合物1

新化合物1为白色粉末，FAB-MS：m/z 793[M]，确定化合物分子量为794。UV(MeOH)显示化合物无明显紫外吸收。

¹H-NMR(C₅D₅N+D₂O，δ，ppm)中，显示该化合物有6个甲基取代，并且均为单峰：0.95、0.98、1.02、1.29、1.45、1.66(s，6×CH₃)；低场处有一活泼氢：9.76(s，1H)；5.48(s，1H)推测可能是双键上的氢；5.22(d，J＝7.2Hz)和4.94(d，J＝7.8Hz)推测可能是糖上的两个端基质子；3.5-4.5的氢可能是糖上的氢信号。从¹³C-NMR谱和DEPT谱中可知该化合物中含有9个季碳、16个-CH、10个-CH₂、6个-CH₃，结合其分子量可确定该化合物的分子式为：C₄₁H₆₂O₁₅。从¹³C-NMR(C₅D₅N+D₂O，δ，ppm)谱中可以看出，该化合物中有3个羰基(207.4，180.6，174.4)，且其中一个为醛基(207.4)；有一组双键(143.7，121.3)；103.7和102.4为两个糖上的端基碳信号。综合以上信息可以推断该化合物为五环三萜皂苷类，其苷元为齐墩果烷型，且连有两个糖。

依据HMQC谱可以对化合物1的碳氢作进一步的归属。

在HMBC谱中，1.66(3H，s)的氢和9.76(1H，s)的氢都与53.4的季碳相关，表明该甲基和醛基都连在4位的季碳上。174.4的碳与糖上的氢信号有相关，表明该化合物中有一个糖为葡萄糖醛酸。5.22(1H，d，J＝7.2Hz)的糖端基氢和84.0的碳有相关，表明该化合物中的两个糖是1→2位连接；4.94(1H，d，J＝7.8Hz)的糖端基氢和82.3的碳有相关，表明化合物中的两个糖是连接在苷元的3位上。对比参考文献[FUMIKO A.，TATSUO Y.，HmOTAKA S.et al.Triterpenoid glycosides from bark of Meliosma Lanceolata.Phytochemistry1996，42(3)：809-814]及化合物的¹³C-NMR和¹H-NMR谱，可以确定化合物1中所含糖为一分子β-D-葡萄糖醛酸和一分子α-L-阿拉伯糖。

对比齐墩果酸的¹³C-NMR谱数据，可以发现该化合物在38ppm处没有亚甲基信号，故推断该化合物的1位或2位有羟基取代。化合物的¹³C-NMR谱和参考文献[KOHDA H.，TANAKA S.，YAMAOKA Y.et al.Saponins from Amaranthus Hypochondriacus.Chem.Pharm.Bull.1991，39(10)：2609-2612]报道的数据基本一致，故确定化合物的苷元结构为：2-羟基-23-醛基-齐墩果酸。

综合以上分析，确定化合物1的结构为：2-羟基-23-醛基-3-O-[α-L-吡喃阿拉伯糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基]-齐墩果酸。为一新化合物，命名为青葙苷A(Celosin A)。

        表1  新化合物1的¹H NMR、¹³C-NMR及HMBC数据

           (600MHZ、C₅D₅N+D₂O，δ，ppm，)

位置	C	化学类型	H	HMBC
					12345678910	42.5467.7282.2753.4347.1219.1632.0138.8846.9135.04	CH2CHCHCCHCH2CH2CCHC	2.30，1.334.85(s)4.94(d，J＝3Hz)1.721.531.44，1.201.45	C-4，23，24，GlcA-1C-10，25

1112131415161718192021222324252627282930Glc-A-1Glc-A-2Glc-A-3Glc-A-4Glc-A-5Glc-A-6Ara-1Ara-2Ara-3Ara-4Ara-5

22.44121.36143.7141.2026.9822.6845.7840.8745.4329.7333.0431.33207.4210.3915.5616.3425.13180.5732.1822.68102.4284.0375.8872.7074.57174.41103.7070.2273.5069.2765.51

CH2CHCCCH2CH2CCHCH2CCH2CH2CHOCH3CH3CH3CH3COOHCH3CH3CHCHCHCHCHCOOHCHCHCHCHCH2

1.95，1.955.48(s)2.06，1.152.08，1.153.221.78，1.231.72，1.201.95，1.769.76(s)1.66(s)1.41(s)1.02(s)1.29(s)0.95(s)0.98(s)4.94(d，J＝7.8Hz)4.254.134.154.305.22(d，J＝7.2Hz)4.164.014.134.35，3.70

C-9，14C-13，14，17，19C-4，24C-3，4，5，23C-1，5，9，10C-7，9C-8，13，14，15C-19，20，21，30C-19，20，21，29C-3C-Ara-1C-GlcA-1，GlcA-6C-GlcA-2

新化合物2

新化合物2为白色粉末，FAB-MS：m/z 839[M]^-，确定化合物分子量为840。UV(MeOH)显示化合物无明显紫外吸收。

¹H-NMR(C₅D₅N+D₂O，δ，ppm)中，显示该化合物有6个甲基取代，并且均为单峰：1.80，1.38，1.09，1.05，1.26，0.86(s，6×CH₃)；5.50(s，1H)推测可能是双键上的氢；5.08(d，J＝7.2Hz)和5.01(d，J＝7.8Hz)推测可能是糖上的两个端基质子；3.5-4.5的氢是糖上的氢信号。从¹³C-NMR谱和DEPT谱中可知该化合物中含有9个季碳、17个-CH、10个-CH₂、6个-CH₃，结合其分子量可确定该化合物的分子式为：C₄₂H₆₄O₁₇。从¹³C-NMR(C₅D₅N+D₂O，δ，ppm)谱中可以看出，该化合物中有3个羰基(184.2，184.2，174.3)；有一组双键(143.7，121.3)；103.7和102.4为两个糖上的端基碳信号。综合以上信息可以推断该化合物为齐墩果烷型五环三萜皂苷。

对比化合物2和化合物1的¹³C-NMR和¹H-NMR谱可以发现，化合物2中母核上23位的醛基(207.4)信号变成了羧基(184.2)信号，其他基本未改变。对比化合物2和参考文献[MARIEA.，BERNARD H.，ZHEN H.et al.Jenisseensosides C and D biologically active acylatedtriterpene saponins from Silene Jenisseensis，Phytochemistry 1997，45(5)：985-990]的¹³C-NMR和¹H-NMR谱，可以确定化合物2中所含糖为一分子β-D-葡萄糖醛酸和一分子β-D-半乳糖。

依据HMQC谱可以对化合物2的碳氢作进一步的归属。综上所述，确定新化合物2的结构为：2-羟基-23-羧基-3-O-[β-D-吡喃半乳糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基]-齐墩果酸，为新化合物，命名为青葙苷B(Celosin B)。

             表2新化合物2的¹H NMR、¹³C-NMR及HMBC数据

                  (600MHZ、C₅D₅N+D₂O，δ，ppm，)

位置	C	化学类型	H	HMBC
					123456789101112131415161718192021222324252627	42.6469.0986.5852.3950.9019.7032.1938.4747.1834.9621.62120.13144.7640.9526.8222.5346.6341.1945.9629.4833.1631.35184.213.3015.4316.1324.96	CH2CHCHCCHCH2CH2CCHCCH2CHCCCH2CH2CCHCH2CCH2CH2COOHCH3CH3CH3CH3	2.20，1.214.704.55(d，J＝3.6Hz)2.001.74，1.552.15，1.921.741.88，1.885.50(s)2.20，1.102.00，0.983.291.68，1.261.34，1.181.75，1.321.80(s)1.38(s)1.05(s)1.26(s)	C-4C-4，23，24，GlcA-1C-4，25C-9，14C-3，4，23C-1，5，9，10C-7，8，9，14C-13，14，15

282930GlcA-1GlcA-2GlcA-3GlcA-4GlcA-5GlcA-6Gal-1Gal-2Gal-3Gal-4Gal-5Gal-6

184.232.1922.63102.6880.9275.7772.4374.77174.28102.3472.8173.6868.8875.1260.14

COOHCH3CH3CHCHCHCHCHCOOHCHCHCHCHCHCH2

0.86(s)1.09(s)5.08(d，J＝7.2Hz)4.263.964.104.455.01(d，J＝7.8Hz)3.954.273.964.134.35，4.08

C-19，20，21，30C-19，20.29C-3C-GlcA-1C-GlcA-1，GlcA-6C-GlcA-2

以上两种青葙皂苷化合物，迄今为止，尚未发现相关的专利或文献报道，是新化合物。

(3)青葙皂苷的活性试验

本发明用作药理和药效试验的化合物有：青葙总皂苷、青葙苷A、青葙苷B、皂苷元2-羟基-23-醛基-齐墩果酸、2-羟基-23-羧基-齐墩果酸、2-羟基-23-甲基-齐墩果酸等，都取得了良好效果。这些化合物均含有式(1)所示的母环，它们的化学结构通式为：

其中R₁、R₂分别代表：

R1：-H，-CH₃，阿拉伯糖葡萄糖醛酸基(-GlcA-Ara)，半乳糖葡萄糖醛酸基(-GlcA-Gal)，乙酰基(CH₃CO-)，乙基(CH₃CH₂-)，葡萄糖基(-Glc)，鼠李糖葡萄糖基(-Glc-Rha)，葡萄糖鼠李糖基(-Rha-Glc)，半乳糖基(-Gal)，葡萄糖醛(苷)酸基(-GlcA)，阿拉伯糖基(-Ara)，木糖基(-Xyl)，阿魏酰阿拉伯糖基(feruloyl-Ara-)，香豆酰阿拉伯糖基(coumaroyl-Ara-)；

R2：醛基(-CHO)，羧基(-COOH)，甲基(-CH₃)。

青葙皂苷及其衍生物的化学结构已经确定，其母环上各R基团见表3。

              表3青葙皂苷及其衍生物化学结构式母环上各R基团

编号	化合物名称	R1	R2
				1	2-羟基-23-醛基-齐墩果酸	-H	-CHO
2	2-羟基-23-羧基-齐墩果酸	-H	-COOH
				3	2-羟基-齐墩果酸	-H	-CH3
4	2-羟基-23-醛基-3-O-(阿拉伯糖-葡萄糖醛酸基)-齐墩果酸	-GlcA-Ara	-CHO
				5	2-羟基-23-羧基-3-O-(阿拉伯糖-葡萄糖醛酸基)-齐墩果酸	-GlcA-Ara	-COOH
6	2-羟基-3-O-(阿拉伯糖-葡萄糖醛酸基)-齐墩果酸	-GlcA-Ara	-CH3
				7	2-羟基-23-醛基-3-O-(半乳糖-葡萄糖醛酸基)-齐墩果酸	-GlcA-Gal	-CHO
8	2-羟基-23-羧基-3-O-(半乳糖-葡萄糖醛酸基)-齐墩果酸	-GlcA-Gal	-COOH
				9	2-羟基-3-O-(半乳糖-葡萄糖醛酸基)-齐墩果酸	-GlcA-Gal	-CH3
10	2-羟基-23-醛基-3-O-甲基-齐墩果酸	-CH3	-CHO
				11	2-羟基-23-羧基-3-O-甲基-齐墩果酸	-CH3	-COOH
12	2-羟基-3-O-甲基-齐墩果酸	-CH3	-CH3
				13	2-羟基-23-醛基-3-O-乙酰基-齐墩果酸	CH3CO-	-CHO
14	2-羟基-23-羧基-3-O-乙酰基-齐墩果酸	CH3CO-	-COOH
				15	2-羟基-3-O-乙酰基-齐墩果酸	CH3CO-	-CH3
16	2-羟基-23-醛基-3-O-乙基-齐墩果酸	CH3CH2-	-CHO
				17	2-羟基-23-羧基-3-O-乙基-齐墩果酸	CH3CH2-	-COOH
18	2-羟基-3-O-乙基-齐墩果酸	CH3CH2-	-CH3
				19	2-羟基-23-醛基-3-O-葡萄糖基-齐墩果酸	-Glc	-CHO
20	2-羟基-23-羧基-3-O-葡萄糖基-齐墩果酸	-Glc	-COOH
				21	2-羟基-3-O-葡萄糖基-齐墩果酸	-Glc	-CH3
22	2-羟基-23-醛基-3-O-(鼠李糖-葡萄糖基)-齐墩果酸	-Glc-Rha	-CHO
				23	2-羟基-23-羧基-3-O-(鼠李糖-葡萄糖基)-齐墩果酸	-Glc-Rha	-COOH

24	2-羟基-3-O-(鼠李糖-葡萄糖基)-齐墩果酸	-Glc-Rha	-CH3
				25	2-羟基-23-醛基-3-O-(葡萄糖-鼠李糖基)-齐墩果酸	-Rha-Glc	-CHO
26	2-羟基-23-羧基-3-O-(葡萄糖-鼠李糖基)-齐墩果酸	-Rha-Glc	-COOH
				27	2-羟基-3-O-(葡萄糖-鼠李糖基)-齐墩果酸	-Rha-Glc	-CH3
28	2-羟基-23-醛基-3-O-半乳糖基-齐墩果酸	-Gal	-CHO
				29	2-羟基-23-羧基-3-O-半乳糖基-齐墩果酸	-Gal	-COOH
30	2-羟基-3-O-半乳糖基-齐墩果酸	-Gal	-CH3
				31	2-羟基-23-醛基-3-O-(葡萄糖-醛酸基)-齐墩果酸	-GlcA	-CHO
32	2-羟基-23-羧基-3-O-(葡萄糖-醛酸基)-齐墩果酸	-GlcA	-COOH
				33	2-羟基-3-O-(葡萄糖-醛酸基)-齐墩果酸	-GlcA	-CH3
34	2-羟基-23-醛基-3-O-阿拉伯糖基-齐墩果酸	-Ara	-CHO
				35	2-羟基-23-羧基-3-O-阿拉伯糖基-齐墩果酸	-Ara	-COOH
36	2-羟基-3-O-阿拉伯糖基-齐墩果酸	-Ara	-CH3
				37	2-羟基-23-醛基-3-O-木糖基-齐墩果酸	-Xyl	-CHO
38	2-羟基-23-羧基-3-O-木糖基-齐墩果酸	-Xyl	-COOH
				39	2-羟基-3-O-木糖基-齐墩果酸	-Xyl	-CH3
40	2-羟基-23-醛基-3-O-阿魏酰阿拉伯糖基-齐墩果酸	feruloyl-Ara-	-CHO
				41	2-羟基-23-羧基-3-O-阿魏酰阿拉伯糖基-齐墩果酸	feruloyl-Ara-	-COOH
42	2-羟基-3-O-阿魏酰阿拉伯糖基-齐墩果酸	feruloyl-Ara-	-CH3
				43	2-羟基-23-醛基-3-O-香豆酰阿拉伯糖基-齐墩果酸	coumaroyl-Ara-	-CHO
44	2-羟基-23-羧基-3-O-香豆酰阿拉伯糖基-齐墩果酸	coumaroyl-Ara-	-COOH
				45	2-羟基-3-O-香豆酰阿拉伯糖基-齐墩果酸	coumaroyl-Ara-	-CH3

上述的化合物之一种或任意组合的混合物包括青葙提取物，其有效部位为总皂苷，也叫青葙总皂苷，该所述混合物中皂苷类化合物的总含量为0.01％-100％。

本发明的所有皂苷类化合物均可用于制备治疗肝病、心脑血管病、代谢性疾病、痴呆、抑郁或焦虑的药物。这些疾病包括脂肪肝、肝损伤、肝纤维化、肝硬化、冠心病、心肌梗塞、心肌缺血、脑缺血、脑梗塞、脑中风、糖尿病、高胰岛素血症、胰岛素抵抗力症、肥胖症、葡萄糖不耐受性、和/或高血压肥胖症、高脂血症；痴呆；抑郁或焦虑、失眠。

具体实施方式

现结合实施例对本发明作进一步说明，但本发明的内容并不仅仅所列举的实施例。实验用青葙于2004年9月采集于安徽毫州，并经本发明人鉴定。

实施例1.青葙苷A提取

本发明者利用采集于安徽毫州的青葙干燥成熟种子(药材称青葙子)，粉碎后用含水乙醇渗漉提取，提取液减压浓缩得浓缩液，浓缩液通过大孔树脂柱，依次用水、30％乙醇、60％乙醇和95％乙醇梯度洗脱，将30％和60％的乙醇洗脱液分别减压浓缩、干燥，分别得青葙总皂苷(青葙提取物)I和青葙总皂苷(青葙提取物)II，将青葙总皂苷(青葙提取物)I和青葙总皂苷(青葙提取物)II合并得青葙总皂苷(青葙提取物)。将青葙总皂苷经酸水解并脱色，得到3种苷元，分别为2-羟基-23-醛基-齐墩果酸、2-羟基-23-羧基-齐墩果酸、2-羟基-23-甲基-齐墩果酸。将青葙总皂苷I进行反复硅胶柱层析，以氯仿-甲醇(30∶1～1∶1)溶剂系统洗脱，收集氯仿-甲醇(2∶1～1∶1)的洗脱液，将此洗脱液浓缩后，再上硅胶柱，以甲醇-水(5∶1～1∶1)的溶剂系统洗脱，并用SephadexLH-20，得青葙苷A。

实施例2.青葙苷B提取

将青葙子用含水乙醇加热提取，提取液减压浓缩得浓缩液，浓缩液通过大孔树脂柱，依次用水、30％乙醇、60％乙醇和95％乙醇梯度洗脱，将60％的乙醇洗脱液减压浓缩、干燥得青葙总皂苷(青葙提取物)II。将青葙总皂苷II进行反复硅胶柱层析，以氯仿-甲醇(30∶1～1∶1)溶剂系统洗脱，收集氯仿-甲醇(2∶1～1∶1)的洗脱液，将此洗脱液浓缩后，再上硅胶柱，以甲醇-水(5∶1～1∶1)的溶剂系统洗脱，并用反向硅胶纯化，依次得青葙苷A、青葙苷B。

实施例3.药理药效试验

上述各化合物药理和药效学试验的方法基本相同，下面以青葙总皂苷(青葙提取物)、青葙苷A、青葙苷B为例详细说明如下：

一、皂苷类化合物对肝病的防治作用

为考察青葙皂苷在治疗急慢性肝病方面的疗效，木发明作了深入的药效学实验研究，药效学研究选用了四氯化碳(CCl₄)诱导的小鼠急性肝损伤模型、大鼠慢性肝纤维化模型以及高脂饲料诱导的慢性脂肪肝动物模型。前两个模型是经典的筛选保肝及肝纤维化防治药物的模型，第三种模型是被大家公认的与人体高血脂症性脂肪肝机制相似，用于高脂血症脂肪肝研究和调血脂药物开发的经典模型。

(一)对四氯化碳引起的小鼠急性肝损伤的保护作用

1.试验动物和方法：

昆明种小鼠60只，分为6组，每组10只，分别为：正常对照组，模型对照组，阳性对照组联苯双酯组、药物组：青葙总皂苷(1#)、青葙苷A(2#)、青葙苷B(3#)：剂量分别为3mg/Kg、2mg/Kg、2mg/Kg。连续口服给药3天，体积为0.2ml/10g，第3天给药后1h腹腔注射0.1％四氯化碳10ml/kg，18小时后摘眼球采血，离心血清测定天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和碱性磷酸酶(ALP)。

4.结果与结论

四氯化碳造模后，小鼠的血清AST、ALT和ALP明显升高，与正常对照组有非常显著的差异。1#、2#、3#连续口服给药3天，对四氯化碳引起的AST、ALT和ALP升高有明显的预防作用(见表4)。

结论：青葙皂苷类化合物对四氯化碳诱导的小鼠肝损伤有明显的预防作用。

表4青葙皂苷类化合物对四氯化碳引起肝损伤的保护作用血液生化指标

组别	剂量(mg/kg)	AST	ALT	ALP
					正常对照模型对照联苯双酯1#2#3#	--200322	127±21**411±56200±77**317±71**306±65**306±43**	69±14**241±50167±25**172±35**167±46**164±43**	310±19**462±28381±71**374±77**365±77**362±76**

与模型组比较：*p＜0.05 **p＜0.01

(二)对脂肪肝的治疗作用

随着人们生活水平的提高及饮食结构的变化，脂肪肝已成为一种常见病，多发病。本病常见于肥胖症、酒精性肝病、肝炎、糖尿病及高血脂症等患者，目前已成为一个公共卫生问题，严重危害人类健康。脂肪肝是多种肝毒性损伤的早期表现，可形成脂肪性肝炎和肝纤维化，甚至肝硬化。因此，脂肪肝的防治对防治慢性肝病的发展十分重要。然而，目前尚缺乏有效防治脂肪肝的药物，因此有必要开展脂肪肝防治药物研究。本发明的目的之一是提供防治脂肪肝的有效药物。

1、实验动物及方法：

Wister大鼠70只，体重180-230g，随机分成两组，第一组10只，为正常组，给与正常饲料；其余动物分为第二组，给与高脂饲料60天后，处死其中10只，做肝脏病理切片，确定脂肪肝模型成立后，随机分为下列5组，①脂肪肝模型组：连续给与高脂饲料；②非处理组：动物改食普通饲料，③3个药物组：动物改食普通饲料，给与药物1#-青葙总皂苷(青葙提取物)、2#-青葙苷A、3#-青葙苷B，剂量分别为3mg/Kg/d、2mg/Kg/d 2mg/Kg/d，连续给药30天。

2、观察指标：

a体重：分别在0、30、60、90天时称重

b血液生化指标：血清ALT、AST、血清总胆固醇，甘油三酯

c病理学检查：石蜡切片、HE染色，观察脂肪肝及炎症坏死程度。

3、实验结果：

结果表明：皂苷1#、2#、3#可明显降低血清中的胆固醇及甘油三酯，有效缓解高脂饲料引起的脂肪肝变性，改善因脂肪变性而导致的肝功能损害(表5、表6、表7)。

                        表5各实验组动物血清中血脂的变化

血脂	时间(天)	正常对照组	非处理组	模型对照组	1#	2#	3#
								甘油三酯(mmol/L)	0	0.7±0.3	0.7±0.3	0.7±0.3	0.8±0.3	0.8±0.3	0.8±0.2
60	0.7±0.2	1.4±0.3	1.1±0.3	1.3±0.2	1.1±0.2	1.1±0.4
							90		0.6±0.2	1.3±0.2	1.0±0.3	0.6±0.2**	0.6±0.2**	0.6±0.2**
胆固醇(mmol/L)	0	1.4±0.2	1.4±0.2	1.4±0.2	1.4±0.3	1.4±0.2									1.4±0.2
							60	1.3±0.1	2.9±0.6	2.9±1.0	3.1±1.1	3.0±1.0	3.0±0.1
	90	1.3±0.2	2.5±0.4	2.6±0.3	1.2±0.3**	1.3±0.2**								1.3±0.2**

与模型对照组比较，^**P＜0.01

                     表6各实验组动物血清转氨酶含量的变化

血脂	时间(天)	正常对照组	非处理组	模型对照组	1#	2#	3#
								ALT	0	60±8	60±18	52±7	56±10	58±7	58±9
60	55±6	55±13	54±9	56±12	54±10	56±9
							90		57±7	76±14	105±38	59±20**	55±10**	55±19**
AST	0	205±34	203±33	204±25	206±26	201±27									203±20
							60	202±38	219±33	217±48	219±42	217±26	215±37
	90	202±30	233±39	253±40	179±41**	167±30**								170±25**

与模型对照组比较，^**P＜0.01

                        表7各实验组动物肝脏脂肪变性的程度(％)

	正常(％)	轻度(％)	中度(％)	重度(％)
					正常对照组非处理组模型对照组1#2#3#	10000303030	0100707070	05040000	04060000

(三)对四氯化碳(CCl₄)诱发的大鼠慢性肝纤维化的作用

1、实验动物及方法：

雄性Wister大鼠120只，随机分为6组，每组20只；除正常对照组外，其余各组动物均每周皮下注射10％的CCl₄(5ml/Kg)2次，共12周；从开始注射CCl₄起，每天按药物剂量给药1次，共12周，给药方式：灌胃给药，给药剂量：阳性药物联苯双酯160mg/Kg/d，1#、2#、3#，剂量分别为3mg/Kg/d、2mg/Kg/d、2mg/Kg/d。

2、观察指标：

a.实验结束时，按试剂盒方法采血测定各指标；

b.取肝组织，按试剂盒方法测定羟脯氨酸(HP)含量；

c..取肝组织，HE染色，作病理组织学检查，计算胶原容积积分。

3、实验结果：

(1)肝功能、生化指标结果见表8、表9：模型对照组AST、ALT、TP、PIIIP、CIV与正常对照组相比，存在非常显著差异(P＜0.01)，阳性对照与各组药物组与模型对照组相比均存在非常显著差异(P＜0.01)，说明1#、2#、3#对肝脏均有保护作用。

(2)病理学检查结果：见表10，模型对照组的胶原容积积分与正常对照组相比，存在非常显著差异(P＜0.01)，阳性对照与各药物组与模型对照组相比均存在非常显著差异(P＜0.01)，说明1#、2#、3#均有明显的对抗肝纤维化的作用。

试验结果表明，本发明的皂苷类化合物对CCl₄所致的大鼠慢性肝纤维化有明显治疗作用。

            表8皂苷类化合物对CCl₄所致的大鼠慢性肝损伤后肝功能的影响

组别	AST(U/L)	ALT(U/L)	TP(g/L)	ALB(g/L))
					正常对照组模型对照组阳性药物1#2#3#	154±37**1361±292293±102**274±86**243±77**245±81**	69±24**821±232202±107**173±68**168±59**171±63**	66±11**34±866±9**62±8**64±14**61±16**	15±3**13±414±3**16±4**13±2**14±3**

与模型对照组比较，^**P＜0.01

   表9皂苷类化合物对CCl₄所致的大鼠慢性肝损伤后肝纤维化的影响

组别	HP(ng/mg)	PIIIP(ng/mL)	CIV(ng/mL)
				正常对照组模型对照组阳性药物1#2#3#	65.6±18.1**459.2±168.0163.4±67.4**153.1±52.2**132.9±39.1**141±42.1**	1.9±0.4**15.9±4.33.4±2.2**2.9±1.3**2.5±1.3**3.1±1.6**	26.1±3.2**87.1±22.439.2±13.1**36.5±8.7**33.6±8.9**34.3±11.2**

与模型对照组比较，^**P＜0.01

表10皂苷类化合物对CCl₄所致的大鼠慢性肝损伤后胶原容积积分的影响

组别	胶原容积积分(CVF，％)
		正常对照组模型对照组阳性药物1#2#3#	3.6±1.6**20.9±9.56.0±2.9**4.7±2.3**4.5±2.1**5.0±2.5**

与模型对照组比较，^**P＜0.01

二、皂苷类化合物的心脑血管活性

(一)对异丙肾上腺素(ISO)所至大鼠心肌缺血的治疗作用

1、实验动物与方法

健康雌性SD大鼠40只，随机分为5组，每组8只，分别为正常对照组、模型对照组和药物1#、2#、3#组。正常对照组和模型对照组分别预先灌胃给予生理盐水，药物组分别灌胃给药，每日1次，剂量分别为3mg/Kg/d、2mg/Kg/d、2mg/Kg/d，连续给药三天。模型对照组和药物组第二天和第三天给药1h后皮下注射ISO(1ml/Kg体重)，正常对照组给予等容量的生理盐水，分别记录最后一次给受试药物前及第2次给与ISO后30min的心电图，测量J点值，计算给与ISO后各组大鼠J点位移的绝对值。大鼠腹主动脉采血，肝素抗凝后离心分离血浆，分光光度法测定血浆中LDH活性单位。各给药组统计结果和模型组比较进行t-检验。乳酸脱氢酶(LDH)计算公式如下：

2、结果与结论

各组对ISO致大鼠心肌缺血II导联心电图J点位移变化见表11。各组对ISO致大鼠心肌缺血LDH活性单位变化见表12。

表11化合物对ISO所致大鼠心肌缺血J点位移的影响(n＝8)

组别	剂量(mg/kg)	J点位移(mv)
			正常对照组模型对照组1#2#3#	----322	0.63±0.28**1.53±0.310.77±0.23**0.71±0.27**0.78±0.21**

与模型对照组比较，^*p＜0.05，^**p＜0.01，

表12化合物对ISO大鼠LDH活性单位的影响(n＝8)

组别	剂量(mg/kg)	LDH活性单位
			正常对照组模型对照组1#2#3#	322	3053±448**4366±6843166±423*3158±473*3129±428*

与模型对照组比较，^*p＜0.05，^**p＜0.01，

实验结果表明，在大鼠皮下注射(s.c.)ISO后，模型组动物出现J点位移增大，血浆中LDH活力单位增加的显著性心肌缺血改变。药物1#、2#、3#组可以显著降低J点位移和血浆中LDH水平，与模型对照组相比存在显著差异(p＜0.05)，表明对ISO引起的大鼠心肌缺血有显著的抑制作用，并可减轻缺血心肌的损伤，因此对心肌有明显的缺血保护作用。。

(二)皂苷类化合物对大鼠冠状动脉结扎所致急性心肌缺血的保护作用

1、实验动物与方法

取体重200g左右的健康SD大鼠40只，雌雄各半，按体重随机分成4组：模型对照组(生理盐水10ml/kg)，阳性药物组普萘洛尔组(8mg/Kg)，药物1#、2#、3#组。所有样品经口服灌胃给药，给药体积为10ml/kg，每天1次，连续2d。

于末次给药后1h，腹腔注射12％水合氯醛3ml/kg进行麻醉，记录正常心电图，胸部去毛、消毒，沿左锁骨中线纵行切开皮肤约2cm，在第4或第5肋间钝性分离肌层，打开胸腔，剪开心包，轻压右侧胸廓，挤出心脏，在右侧圆锥与左心耳之间冠状静脉处结扎左冠状动脉后，把心脏放回胸腔，充分排出胸腔内空气，缝合关闭胸腔，呼吸机辅助呼吸，频率20次/分，潮气量5ml。结扎后即刻，1h，24h，48h分别描记一段心电图，并于24h、48h分别口服灌胃药物1#、2#、3#及生理盐水，药量同前。

在冠脉结扎50h后，大鼠再次麻醉，迅速取出心脏，用生理盐水冲洗，除去血污，剔除血管、脂肪等非心肌组织，用吸水纸吸去水分，称全心湿重。沿冠状沟切除心房，留下心室，称重，顺房室沟从心尖到心基部平行将心室肌横切成厚约0.1cm的心肌片4片，用生理盐水冲洗干净，将心肌片放在0.1％的N-BT溶液中，在37℃水浴条件下染色15min，染色后立即用水冲洗去多余的染料。梗死区不着色，非梗死区被N-BT溶液染成蓝色。剪去梗死心肌，称湿重，以梗死区湿重占全心湿重的百分比表示心肌梗死范围，结果见表13。

2、结果与结论

皂苷类化合物能够非常显著的降低心肌缺血引起的组织坏死，对缺血组织有明显的保护作用。

表13皂苷类化合物对冠状动脉结扎致大鼠急性心肌缺血模型缺血范围的影响(n＝10)

组别	剂量(mg/kg)	心肌梗塞范围(％)
			模型对照组普萘洛尔组1#2#3#	5322	20.50±4.7512.90±1.90**12.29±2.58**13.79±3.11**12.19±3.11**

与模型对照组比较，^**p＜0.01

(三)皂苷类化合物对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型，是公认的防治脑缺血(或脑中风、脑梗塞)模型，因此，本发明采用此模型研究皂苷类化合物的防治脑血管病活性。

1.试验动物与方法：

取雄性SD大鼠共48只，随机分成6组，每组8只，第1组为假手术组，第2组为模型组(注射等体积生理盐水)，第3组为阳性药物尼莫通注射液组(德国拜耳公司生产)，给药剂量2mg/Kg，第4、5、6组为1#、2#、3#组，给药剂量分别为3mg/Kg、2mg/Kg、2mg/Kg。给药时间为缺血1小时后尾静脉注射。

参照Longa EZ报道的线栓模型制备脑缺血再灌注损伤模型(Longa EZ，et al：Reversablemiddle cerebral artery occlusion without craniectomy in rat.Stroke，1989，20：84)。缺血2小时再灌注24小时后断头取脑，TTC染色，留取样本进行脑梗塞体积测定(详见张均田主编：现代药理实验方法学，第1241页，北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，1998年10月第1版)。

2、实验结果见表14：

表14皂苷类化合物对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

组别	药物	脑水肿(％)	梗塞面积(％)
				123456	假手术组模型组尼莫通1#2#3#	78.05±0.8080.55±0.7578.94±0.67*78.33±0.63**78.14±0.59**78.22±0.64**	0.0037.86±8.8917.43±7.13*10.51±5.41**10.40±5.52**10.62±5.12**

与模型组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01

从表14可以看出，1#、2#、3#均显著缩小脑梗死面积，减轻缺血侧脑半球水肿程度。表明，1#、2#、3#对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有较强保护作用。

三、皂苷类化合物对代谢病的防治作用

1、实验动物与方法：

取体重为180～240g的大鼠50只，雌雄各半，随机留取10只作为正常对照组，其余为实验组。实验组大鼠禁食12后，以左下腹腔一次性注射链尿佐菌素(STZ，美国公司)65mg/Kg(溶于PH4.5、0.1mmol/L枸橼酸盐缓冲液)，对照组注射等容积的枸橼酸盐缓冲液，注射48小时后，凡血糖浓度＞13mmol/L的尿糖呈强阳性者，并出现多饮、多食、多尿者为糖尿病模型，糖尿病大鼠再随机分为4组，每组10只，糖尿病模型组、皂苷类化合物1#、2#、3#治疗组，对照组和模型组喂饲普通饲料，除自由饮水外，每天以蒸馏水灌胃(2ml/d)。皂苷类化合物1#、2#、3#，每只大鼠按剂量灌胃4周，期间标准饲料和饮水不受限制，实验末，以戊巴比妥麻醉，心脏取血检测有关生化指标：①全血血糖测定：尾部采血20μL，用血糖试纸通过血糖仪测定。②测定LPO，采用TBA法。③SOD采用黄嘌呤氧化酶法。

2、结果与结论

结果见表15、表16、表17，与糖尿病模型组比较，1#、2#、3#全血血糖明显下降(P＜0.01)，大鼠多饮、多食、多尿症状明显改善，全血LPO含量明显下降，血浆SOD水平明显提高，表明1#、2#、3#的降血糖作用可能与其具有抗氧化活性成分抑制自由基的产生和加快自由基的清除有关。

代谢性疾病的关键是脂质代谢及糖代谢紊乱，本发明的化合物不仅可以降低胆固醇、调节血脂(见表5、表6)，改善脂质代谢，还可以降低血糖，调解糖代谢，从而对代谢性疾病发挥预防和治疗效果。

表15皂苷类化合物对实验性糖尿病大鼠血糖的影响

组别	造模后/给药前	给药4周后
			对照组模型组1#2#3#	3.85±1.2819.46±3.9819.48±3.0818.48±4.4818.48±4.39	4.04±2.20**19.00±2.975.12±1.65**5.08±2.08**5.47±1.48**

与模型组比较，^**P＜001

表16皂苷类化合物对实验性糖尿病大鼠全血LPO含量的影响

组别	造模前	造模后/给药前	给药4周后
				对照组模型组1#2#3#	5.11±1.295.37±2.135.33±2.415.10±2.175.41±2.33	5.16±2.8210.32±3.579.95±3.1610.17±3.819.99±3.09	5.74±2.3710.64±3.775.75±2.33**5.14±2.09**5.89±2.83**

    表17皂苷类化合物对实验性糖尿病大鼠血浆SOD活性的影响

组别	造模前	造模后/给药前	给药4周后
				对照组模型组1#2#3#	8.43±0.878.37±2.838.40±2.368.39±2.198.27±2.33	8.32±2.195.17±1.935.63±2.715.72±2.275.52±2.43	8.94±2.665.22±2.108.52±2.03**8.17±2.01**8.33±2.09**

四、皂苷类化合物对痴呆的治疗作用

老年性痴呆症的临床主要表现之一就是学习记忆功能障碍。学习和记忆是脑的重要功能之一，它反应脑的智力水平。而通过动物行为中所犯的错误多少可以衡量其学习和记忆的能力。东莨菪碱诱导的大鼠痴呆模型就是利用这种原理来研究药物对动物智力的影响。

我们采用MORRIS水迷宫法及避暗实验两种方法，应用东莨菪碱学习记忆障碍模型，来观察1#、2#、3#对大鼠学习记忆的影响。

1.MORRIS水迷宫法

1.1动物和方法

MORRIS水迷宫实验：SD大鼠(由第二军医大学实验动物中心提供)60只，随机分成6组，分别为空白组、模型组、阳性对照组及1#、2#、3#药物组。其中空白组与模型组以0.5％的羧甲基纤维素钠灌胃，阳性对照组灌胃给予Hup A 4mg/kg，药物组按20mg/kg灌胃给药，每天2次，共8天。每天第一次给药后1小时，开始进行MORRIS水迷宫训练。实验前一天让大鼠自由游泳2分钟以适应周围环境，从第一天开始，每天训练4次，每次随机选择一个入水点，将大鼠面向池壁放入水中，观察并记录大鼠寻找并爬上平台的路线图及所需时间(潜伏期)。4次训练大鼠分别从四个不同的人水点人水，如果大鼠在120秒内未找到平台，需将其引至平台。这时潜伏期记为120秒，每次训练间隔60秒，连续7天。第8天末次给药后1小时，空白组大鼠腹腔注射生理盐水1ml/kg，其余各组大鼠腹腔注射氢溴酸东莨菪碱2mg/kg。每只大鼠注射结束后25min由一固定入水点面向池壁被投入水中，观察并记录其寻找平台路线及找到平台的时间(潜伏期)。

避暗实验：SD大鼠60只，按前述分组方法随机分成6组，其中空白对照组与模型组以0.5％的羧甲基纤维素钠灌胃，对照组灌胃给予Hup A 4mg/kg，药物组按20mg/kg灌胃给药，每天2次，共8天。第8天末次给药后1小时开始训练，除空白对照组外，每组大鼠于训练前25min腹腔注射氢溴酸东莨菪碱2.0mg/kg，空白组为生理盐水1.0ml/kg。训练时将大鼠先放入箱内适应3min，然后接通电源，将动物背向洞口置于避暗箱明室，观察动物首次进入暗室的时间(潜伏期)和5min内进入暗室的总次数(犯错次数)。第9天重复避暗实验操作并记录潜伏期及犯错误数作为记忆指标。

2结果与结论  见表18和表19

由表20可以看出，与模型组相比，1#、2#、3#的大鼠寻找平台的潜伏期明显缩短，差异有统计学意义。

表18各组大鼠寻找平台的潜伏期

	给药剂量(mg/kg)	潜伏期(秒)
			假手术组模型组阳性药组1#2#3#	004322	6.3±3.5**19.6±11.410.8±8.3*7.7±6.3*7.5±6.4*7.4±6.1*

^*P＜0.05，^**P＜0.01与模型组比较

由表19可知，在避暗实验中，1#、2#、3#的大鼠所犯错误数显著低于模型组，而潜伏期则大大延长。

                    表19各组大鼠犯错次数及潜伏期比较

	给药剂量(mg/kg)	犯错次数	潜伏期(秒)
				假手术组模型组阳性药组1#2#3#	004322	0.7±0.5**14.6±7.64.5±4.1***4.1±4.3***3.8±3.6***3.7±3.5***	244.1±66.3***23.2±22.9151.7±134.4*176.0±143.3**185.2±127.4**186.3±127.1**

与模型组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01

上述研究结果表明，1#、2#、3#能明显改善痴呆大鼠的学习记忆功能，对痴呆具有一定的预防和治疗作用。

五、皂苷类化合物的抗抑郁或焦虑活性

小鼠强迫游泳实验(mouse forced swimming test)是经典的抑郁动物模型，故用其考察皂苷类化合物对实验性动物抑郁症的防治作用。

1、实验动物与方法

按张均田主编的《现代药理实验方法》(上册)第104页的方法进行。将小鼠(昆明种，雄性，20-23克)放入水深10厘米，水温25±1℃的量筒(20厘米高，14厘米直径)中游泳，使其产生恐惧心理，5分钟后取出，32℃下将毛烘干。24小时内分别给实验动物灌胃给药，再将小鼠放入上述环境中，测定小鼠在6分钟的后4分钟内保持游泳不动的时间，以不动时间的缩短作为判断药物抗抑郁作用的标准。本实验每组小鼠10只。①空白对照组，给予与药物实验组等量的生理盐水；②阳性对照组，给予药物氟西酊，剂量为6mg/Kg；③本发明1#、2#、3#剂量分别为：3mg/Kg、2mg/Kg、2mg/Kg，各组给药时间均为小鼠毛烘干后的24小时内的相同时间。给药途径分为三次灌胃给药，在最后一次灌胃给药60分钟后进行强迫游泳实验。

2、结果与结论：实验结果见表20。

表20皂苷类化合物对小鼠强迫游泳实验行为的影响结果

	组别	剂量(mg/Kg)	游泳不动时间(秒)
				空白对照组阳性对照组1#2#3#		6322	135.1±57.163.3±38.6**53.1±43.4**53.7±43.3**54.5±45.0**

与空白对照组比较^*P＜0.05，^**P＜0.01

从表20中可以看出，药物1#、2#、3#、均能显著减少小鼠强迫游泳不动时间，表明该类化合物均具有抗抑郁活性，因此可以用于制备防治抑郁或焦虑症的药物。

Claims (4)

1、一种新型青葙皂苷类新化合物，其特征在于该化合物具有化学结构通式(1)所示的化学结构：

                              式(1)

其中：R₁＝阿拉伯糖葡萄糖醛酸基(-GlcA-Ara)，R₂＝醛基(-CHO)为化合物1；

或R₁＝半乳糖葡萄糖醛酸基(-GlcA-Gal)，R₂＝羧基(-COOH)为化合物2；

化合物1的化学结构为：2-羟基-23-醛基-3-O-[α-L-吡喃阿拉伯糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基]-齐墩果酸，命名为青葙苷A(Celosin A)；

化合物2的结构为：2-羟基-23-羧基-3-O-[β-D-吡喃半乳糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基]-齐墩果酸，命名为青葙苷B(Celosin B)；

其结构分别为：

 化合物1                                 化合物2

2、一种包括权利要求1中所述二个新化合物在内，其化学结构通式为式(1)，其中R₁、R₂分别代表：

R₁：-H，-CH₃，阿拉伯糖葡萄糖醛酸基(-GlcA-Ara)，半乳糖葡萄糖醛酸基(-GlcA-Gal)，乙酰基(CH₃CO-)，乙基(CH₃CH₂-)，葡萄糖基(-Glc)，鼠李糖葡萄糖基(-Glc-Rha)，葡萄糖鼠李糖基(-Rha-Glc)，半乳糖基(-Gal)，葡萄糖醛(苷)酸基(-GlcA)，阿拉伯糖基(-Ara)，木糖基(-Xyl)，阿魏酰阿拉伯糖基(feruloyl-Ara-)，香豆酰阿拉伯糖基(coumaroyl-Ara-)；

R₂：醛基(-CHO)，羧基(-COOH)，甲基(-CH₃)；的青葙皂苷类化合物及其衍生物，其用于制备预防和治疗包括脂肪肝、肝损伤、肝纤维化、肝硬化、冠心病、心肌梗塞、心肌缺血、脑缺血、脑梗塞、脑中风、糖尿病、高胰岛素血症、胰岛素抵抗力症、肥胖症、葡萄糖不耐受性、和/或高血压肥胖症、高脂血症；早老或血管性痴呆；抑郁或焦虑、失眠在内之肝病、心脑血管病、代谢性疾病、痴呆、抑郁或焦虑疾病药物的药物方面的应用。

3、按权利要求2所述的青葙皂苷类化合物及其衍生物，是指包括2-羟基-23-醛基-齐墩果酸、2-羟基-23-羧基-齐墩果酸、2-羟基-齐墩果酸、2-羟基-23-醛基-3-O-(阿拉伯糖-葡萄糖醛酸基)-齐墩果酸、2-羟基-23-羧基-3-O-(阿拉伯糖-葡萄糖醛酸基)-齐墩果酸、2-羟基-3-O-(阿拉伯糖-葡萄糖醛酸基)-齐墩果酸、2-羟基-23-醛基-3-O-(半乳糖-葡萄糖醛酸基)-齐墩果酸、2-羟基-23-羧基-3-O-(半乳糖-葡萄糖醛酸基)-齐墩果酸、2-羟基-3-O-(半乳糖-葡萄糖醛酸基)-齐墩果酸、2-羟基-23-醛基-3-O-甲基-齐墩果酸、2-羟基-23-羧基-3-O-甲基-齐墩果酸、2-羟基-3-O-甲基-齐墩果酸、2-羟基-23-醛基-3-O-乙酰基-齐墩果酸、2-羟基-23-羧基-3-O-乙酰基-齐墩果酸、2-羟基-3-O-乙酰基-齐墩果酸、2-羟基-23-醛基-3-O-乙基-齐墩果酸、2-羟基-23-羧基-3-O-乙基-齐墩果酸、2-羟基-3-O-乙基-齐墩果酸、2-羟基-23-醛基-3-O-葡萄糖基-齐墩果酸、2-羟基-23-羧基-3-O-葡萄糖基-齐墩果酸、2-羟基-3-O-葡萄糖基-齐墩果酸、2-羟基-23-醛基-3-O-(鼠李糖-葡萄糖基)-齐墩果酸、2-羟基-23-羧基-3-O-(鼠李糖-葡萄糖基)-齐墩果酸、2-羟基-3-O-(鼠李糖-葡萄糖基)-齐墩果酸、2-羟基-23-醛基-3-O-(葡萄糖-鼠李糖基)-齐墩果酸、2-羟基-23-羧基-3-O-(葡萄糖-鼠李糖基)-齐墩果酸、2-羟基-3-O-(葡萄糖-鼠李糖基)-齐墩果酸、2-羟基-23-醛基-3-O-半乳糖基-齐墩果酸、2-羟基-23-羧基-3-O-半乳糖基-齐墩果酸、2-羟基-3-O-半乳糖基-齐墩果酸、2-羟基-23-醛基-3-O-(葡萄糖-醛酸基)-齐墩果酸、2-羟基-23-羧基-3-O-(葡萄糖-醛酸基)-齐墩果酸、2-羟基-3-O-(葡萄糖-醛酸基)-齐墩果酸、2-羟基-23-醛基-3-O-阿拉伯糖基-齐墩果酸、2-羟基-23-羧基-3-O-阿拉伯糖基-齐墩果酸、2-羟基-3-O-阿拉伯糖基-齐墩果酸、2-羟基-23-醛基-3-O-木糖基-齐墩果酸、2-羟基-23-羧基-3-O-木糖基-齐墩果酸、2-羟基-3-O-木糖基-齐墩果酸、2-羟基-23-醛基-3-O-阿魏酰阿拉伯糖基-齐墩果酸、2-羟基-23-羧基-3-O-阿魏酰阿拉伯糖基-齐墩果酸、2-羟基-3-O-阿魏酰阿拉伯糖基-齐墩果酸、2-羟基-23-醛基-3-O-香豆酰阿拉伯糖基-齐墩果酸、2-羟基-23-羧基-3-O-香豆酰阿拉伯糖基-齐墩果酸、2-羟基-3-O-香豆酰阿拉伯糖基-齐墩果酸在内的所述的化合物之一种或任意组合的混合物。

4、按权利要求3所述的化合物之一种或任意组合的混合物包括青葙提取物，其有效部位为总皂苷，也叫青葙总皂苷，其特征在于所述混合物中皂苷类化合物的总含量为0.01％-100％。