CN1844351A - 平菇菌株kzh－2及制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种平菇菌株KZH－2及制备方法，属于微生物技术领域。本发明的菌株Pleurotus osteatusKZH－1已于2006年01月25日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO.1601。利用该菌株制备的固体优良菌种，应用于平菇栽培生产，有着显著的社会、经济效益和广阔的应用前景。

Description

平菇菌株KZH-2及制备方法

技术领域

本发明属微生物技术领域，具体涉及平菇菌株KZH-2及制备方法。

背景技术

平菇Pleurotus ostreatus是目前栽培量最大的食用菌品种，现有平菇品种随着培养和使用时间的延长，个体的菌龄越来越大，新陈代谢机能逐渐减低，失去抗逆能力，渐渐失去原有的优良性状，商品性能降低，以至失去其使用价值。菌种遗传性发生变化；菌种被病毒寄生；培养条件不适合，不能满足它的生活要求，使其失去自我调节能力，失去正常的生理功能等因素是造成菌种退化的原因，是量变到质变的渐变结果，也是一种病态和衰老的综合表现。目前主要通过自然选育、杂交育种、诱变育种、菌种脱毒等方法来培育新的菌株和对原菌株性状进行复壮，确保菌种的优良特性。自然选育不需要特殊的设备，但要靠收集大量的不同条件下生长的菌株进行大量的对比试验，时间长，工作量大；杂交育种、诱变育种、菌种脱毒则需要特殊设备来完成，工艺复杂，受多种因素影响，结果不稳定。

发明内容

本发明克服了上述方法的不足，利用野生平菇资源，通过子实体分离、纯化、出菇试验筛选、培育出生长强壮、适应性强、商品性能具佳的优良菌株。

本发明采用的真菌是平菇Pleurotus ostreatus KZH-2；保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；地址：中国.北京.中关村；保藏日期：2006年01月25日；保藏登记入册的编号CGMCC NO.1601。

该平菇子实体中等至较大，菌盖直径5-18厘米，灰白色，扁半球形，平展后扇形，靠近柄部下凹有毛；菌肉白色，稍厚；菌褶白色，稍密；菌柄侧生、短，内实、白色，长1-3厘米，粗1-2厘米，基部具绒毛；孢子印白色，孢子近圆柱形，光滑无色。菌丝培养温度22-26℃，出菇温度5-28℃。该菌株适应性强，高产优质，性能稳定，适合多种培养料栽培。

本发明的技术方案：

①采集野生平菇子实体；

②组织分离；

③纯化菌株及菌株鉴定；

④出菇试验(生物学特性比较及生产性状比较)；

⑤确定优良菌株；

⑥菌种生产及菌种应用；

经过反复筛选，获得产量高、抗逆性强的平菇菌株KZH-1。

本发明真菌Pleurotus ostreatusKZH-2培养方法：

菌种分离纯化培养基：(PDA培养基)

马铃薯200克、葡萄糖20克、琼脂20克，兑水1000毫升。

平菇菌株分离及鉴定方法：

1、将平菇子实体组织块接种到上述试管琼脂培养基斜面上，于25℃下培养5-7天，对分离培养的试管每天观察记录，及时剔除已污染的试管，挑选出无污染、长势良好的菌株，获得平菇分离试管种。

2、将分离试管种菌丝块接种到上述琼脂培养基的平板培养皿上进行菌种纯化，2天后取尖端菌丝块接种在培养基斜面上，于25℃下培养7天，获得平菇纯化试管种。

3、用平菇纯化试管种，制作二级种，生产栽培种，进行出菇试验，获得子实体，确定分离得到的纯菌种为平菇菌种。

本发明平菇菌种的制备方法分为：固体菌种和液体菌种两种。

固体菌种制备方法：

固体培养基配方为：①麦粒或荞粒83％，杂木屑15％，石膏粉或碳酸钙2％。

②杂木屑78％、麸皮20％、蔗糖1％、石膏1％，含水量60％、PH自然。

③棉籽壳35％、木屑45％、麸皮18％、蔗糖1％、石膏1％，含水量60％、PH自然。

1、将平菇的菌丝体接种到试管琼脂培养基斜面上，培养基配方为PDA培养基，于25℃下培养7-8天，获得试管菌种。

2、采用前述固体培养基配方。将培养料混合后，加水拌均匀后，装入750ml的大口瓶中，压紧封口后在121℃灭菌120分钟，在无菌室冷却，接入试管菌种，于25℃培养25-30天，直到菌丝长满。

液体菌种制备方法：

液体培养基配方为：马铃薯20％、葡萄糖2％、蛋白胨0.2％、磷酸二氢钾0.05％、硫酸镁0.05％，余下为水，PH自然。

1、将平菇的菌丝体接种到试管琼脂培养基斜面上，培养基配方为PDA培养基，于25℃下培养7-8天，获得试管菌种。

2、将培养液装入500ml三角瓶内(每瓶装100ml)，培养基配方为前述液体培养基配方，用棉塞和牛皮纸封口，在0.15兆帕压力下灭菌30分钟，取出，冷至30时接种。

3、将试管种接种到500ml三角瓶(每瓶装100ml)液体培养基中，于25℃下摇床培养，转速为150r/min，培养时间5-7天。

4、将摇瓶菌种接种到25L自动发酵生产线的发酵罐中，通气量为1∶0.8v/(v·min)；搅拌转速为150r/min；接种量为5％；罐压：0.04Mpa；pH为6.0；温度为25℃；通气培养72小时，获得平菇液体菌种。

具体实施方式

实施例一：

1、将野生平菇子实体组织块接种到上述菌种分离纯化培养基斜面上，于25℃下培养7天，对分离培养的试管每天观察记录，及时剔除已污染的试管，挑选出无污染、长势良好的菌株，获得平菇分离试管种。

2、将分离试管种菌丝块接种到上述琼脂培养基的平板培养皿上进行菌种纯化，2天后取尖端菌丝块接种在培养基斜面上，于25℃下培养7天，获得平菇纯化试管种。

3、用平菇纯化试管种，制作二级种，生产栽培种，进行出菇试验，获得子实体，确定分离得到的纯菌种为平菇菌种。

4、将Pleurotus ostreatusKZH-2的菌丝体接种到试管琼脂培养基斜面上，培养基配方为PDA培养基，25℃下培养7天，获得试管种。

5、采用固体培养基配方麦粒或荞粒83％，杂木屑15％，石膏粉或碳酸钙2％。先把麦粒或荞粒用清水洗干净，用2％石灰水浸泡15小时左右，滤出，煮15分钟，倒出滤水，加入杂木屑，石膏粉或碳酸钙拌匀，装入750毫升的专用菌种瓶，封口，在121℃下灭菌120分钟，在无菌室冷却，接入试管菌种，于25℃培养30天，直到菌丝长满，获得菌种。

实施例二：

1、将野生平菇子实体组织块接种到上述菌种分离纯化培养基斜面上，于25℃下培养7天，对分离培养的试管每天观察记录，及时剔除已污染的试管，挑选出无污染、长势良好的菌株，获得平菇分离试管种。

2、将分离试管种菌丝块接种到上述琼脂培养基的平板培养皿上进行菌种纯化，2天后取尖端菌丝块接种在培养基斜面上，于25℃下培养7天，获得平菇纯化试管种。

3、用平菇纯化试管种，制作二级种，生产栽培种，进行出菇试验，获得子实体，确定分离得到的纯菌种为平菇菌种。

4、将Pleurotus ostreatusKZH-2的菌丝体接种到试管琼脂培养基斜面上，培养基配方为PDA培养基，25℃下培养7天，获得试管种。

5、采用前述固体培养基配方杂木屑78％、麸皮20％、蔗糖1％、石膏1％，含水量60％、PH自然。将培养料混合，加水拌均匀后，装入750ml的大口瓶中，压紧封口后在121℃灭菌120分钟，在无菌室冷却，接入试管菌种，于25℃培养30天，直到菌丝长满，获得平菇固体菌种。

实施例三：

1、将野生平菇子实体组织块接种到上述菌种分离纯化培养基斜面上，于25℃下培养7天，对分离培养的试管每天观察记录，及时剔除已污染的试管，挑选出无污染、长势良好的菌株，获得平菇分离试管种。

2、将分离试管种菌丝块接种到上述琼脂培养基的平板培养皿上进行菌种纯化，2天后取尖端菌丝块接种在培养基斜面上，于25℃下培养7天，获得平菇纯化试管种。

3、用平菇纯化试管种，制作二级种，生产栽培种，进行出菇试验，获得子实体，确定分离得到的纯菌种为平菇菌种。

4、将Pleurotus ostreatusKZH-2的菌丝体接种到试管琼脂培养基斜面上，培养基配方为PDA培养基，25℃下培养7天，获得试管种。

5、采用前述固体培养基配方棉籽壳35％、木屑45％、麸皮18％、蔗糖1％、石膏1％，含水量60％、PH自然。将培养料混合，加水拌均匀后，装入750ml的大口瓶中，压紧封口后在121℃灭菌120分钟，在无菌室冷却，接入试管菌种，于25℃培养30天，直到菌丝长满，获得平菇固体菌种。

实施例四：

1、将野生平菇子实体组织块接种到上述菌种分离纯化培养基斜面上，于25℃下培养7天，对分离培养的试管每天观察记录，及时剔除已污染的试管，挑选出无污染、长势良好的菌株，获得平菇分离试管种。

2、将分离试管种菌丝块接种到上述琼脂培养基的平板培养皿上进行菌种纯化，2天后取尖端菌丝块接种在培养基斜面上，于25℃下培养7天，获得平菇纯化试管种。

3、用平菇纯化试管种，制作二级种，生产栽培种，进行出菇试验，获得子实体，确定分离得到的纯菌种为平菇菌种。

4、将Pleurotus ostreatusKZH-2的菌丝体接种到试管琼脂培养基斜面上，培养基配方为PDA培养基，25℃下培养7天，获得试管种。

5、将试管种接种到500ml三角瓶中(每瓶装100ml)液体培养基中，培养基配方为：马铃薯20％、葡萄糖2％、蛋白胨0.2％、磷酸二氢钾0.05％、硫酸镁0.05％，余下为水，PH自然。于25℃下摇床培养，转速为150rpm，培养时间7天，获得一级液体菌种。

将一级液体菌种接种到25L自动发酵生产线的发酵罐中，通气量为1∶0.8v/(v·min)；搅拌转速为150r/min；接种量为5％；罐压：0.04Mpa；pH为6.0；温度为25℃；通气培养72小时，获得平菇液体菌种。

Claims (2)

1、一种平菇菌株KZH-2及制备方法，其特征在于所述菌株为(Pleurotus ostreatus)KZH-2，该菌株的保藏号为CGMCC NO.1601。

2、根据权利要求1所述的平菇菌株KZH-2及制备方法，所述菌株是经过常规固体培养获得的，其特征在于所述固体培养基配方和液体培养基配方如下：

固体培养基配方为：(1)麦粒或荞粒83％，杂木屑15％，石膏粉或碳酸钙2％；

或(2)杂木屑78％、麸皮20％、蔗糖1％、石膏1％、含水量60％、PH自然；

或(3)棉籽壳35％、木屑45％、麸皮18％、蔗糖1％、石膏1％，含水量60％、PH自然；

液体培养基配方为：马铃薯20％、葡萄糖2％、蛋白胨0.2％、磷酸二氢钾0.05％、硫酸镁0.05％，余下为水，PH自然。