CN1793135A - 由苦参生产苦参总黄酮及黄酮盐的方法 - Google Patents

Abstract

一种由苦参生产苦参总黄酮的方法是将10～120目的苦参和溶剂按比例混合，混合比例为：苦参的质量∶溶剂或溶液的体积＝1g∶3～10ml，提取其中的苦参生物碱和苦参总黄酮类成分，过滤，提取液经处理可将苦参生物碱和苦参总黄酮完全分离，苦参总黄酮富集相干燥可得到苦参总黄酮或苦参总黄酮盐类的产品。本发明具有实现分别提取苦参生物碱和苦参黄酮，原料成本低，工艺简单，适合工业生产。得到的苦参总黄酮及其盐类产品含量较高的优点。

Description

由苦参生产苦参总黄酮及黄酮盐的方法

技术领域

本发明涉及一种生产苦参总黄酮及黄酮盐的方法。

技术背景

黄酮类化合物是自然界广泛存在的一类天然产物，其基本母核为2—苯基色原酮类，指两个具有酚羟基的苯环(A、B环)通过中央3个碳原子相互连接而成的一系列化合物，按照中央3碳链的差异，可分为黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮类、二氢黄酮醇类、花色素类、查耳酮类、二氢查耳酮类、异黄酮类、二氢异黄酮类等等，实验证明类黄酮化合物对动物及人体有以下作用①抗氧化、清除自由基作用；②对维生素C有增效作用；③通过保护细胞免疫、免受致癌物的损害、抑制肿瘤细胞增殖及抗自由基作用而具抗癌作用；④能与金属螯合，保护酶和细胞膜的活性；⑤能降低血脂和血胆固醇；⑥异黄酮有类雌激素的作用；⑦保肝作用。蜂胶、银杏、沙棘等黄酮在市场上已获得成功。

苦参富含生物碱类和黄酮类成份，目前的研究主要集中在苦参生物碱方面，而从苦参根分离的黄酮类化合物已有32种，多数为二氢黄酮和二氢黄酮醇类，少数为黄酮类、黄酮醇类、异黄酮类、查耳酮类及多环系黄酮类，包括苦参醇A、B、D、E、F、J等等。苦参黄酮A环上有异戊烯取代基存在，并且大多数黄酮在A环的C8位上取代基以lavandulyl的分枝异戊烯基侧链形式存在，黄酮的异戊烯基化增加了黄酮化合物的亲脂性，使其在生物体内更容易透过细胞膜到达作用目标，因而异戊烯基黄酮具有较强的抗微生物活性、抗炎活性、抗癌活性以及酪氨酸酶抑制活性(天然产物研究与开发，2004，16(2)：172)。苦参黄酮类提取物对Alloxan糖尿病模型大鼠有明显降糖作用，而生物碱无降糖作用(海峡药学杂志，1998，10(1)：9)，有关苦参生物碱提取分离的报导很多，高红宁等(广东药学院学报，2003，19(4)：334)通过微滤、大孔树脂、醇沉精制氧化苦参碱与苦参总黄酮，但未实现生物碱与黄酮的分离；专利(200410030937.X)提供了一种苦参总黄酮的提取方法，但是，该方法中没有涉及苦参生物碱类与黄酮类有效成分的分离的内容和步骤，所得到的产品应该是苦参生物碱和苦参黄酮类的混合物产品。有关苦参异戊烯基黄酮类的提取分离鲜见报导。

黄酮盐类产品具有和黄酮的生物活性，化学性质相对稳定，可以和碱性药物配伍，易于保存等优点，有关其产品或生产工艺，尚未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种生产苦参总黄酮及黄酮盐的方法。

本发明是以苦参粉末为原料，溶剂提取苦参生物碱和苦参总黄酮。苦参生物碱都易溶于水、卤代烃、酯、酮和芳香类物质，而黄酮类活性物质易溶于碱液和醇、酮、酯等有机溶剂，但是不容于中性水或酸水。所以利用这些性质将生物碱和黄酮类物质提取并分离开来，得到较高含量的黄酮或其盐类产品。

本发明的具体操作步骤如下：

将10～120目的苦参和溶剂按比例混合，混合比例为：苦参的质量/溶剂或溶液的体积＝1g∶3～10ml，完全提取其中的苦参生物碱和苦参总黄酮类成分，过滤，提取液经处理可将苦参生物碱和苦参总黄酮完全分离，苦参总黄酮富集相干燥可得到苦参总黄酮或苦参总黄酮盐类的产品。

所述溶剂是指任何可以将苦参生物碱和黄酮类物质完全提取出来的液体物质，优选碱性水溶液或有机溶剂以及有机溶剂的各种混合溶液。

所述的碱性水溶液优选氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸氢纳等的任何浓度水溶液，pH值为9～14的溶液。

所述的有机溶剂为低级醇、低级酯、低级酮或者低级醇的酸、碱性溶液。

所述的有机溶剂和各种溶液优选甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙酸甲酯、丙酮等溶剂或甲醇—氨水溶液、乙醇—氨水溶液、甲醇—酸溶液、乙醇—酸溶液，也可以是这些溶液或溶剂的混合溶液或水溶液。

所述的甲醇—氨水溶液、乙醇—氨水溶液比例优选醇∶氨水＝100ml∶0.2～2ml；所述甲醇—酸溶液、乙醇—酸溶液优选盐酸、稀硫酸、稀硝酸或醋酸的醇溶液。

所述提取生物碱和黄酮类物质的方法可以是通过浸泡、渗漉、回流、超声振荡提取等任何可将生物碱和黄酮类物质完全提取出来的方法。

所述滤液经过的处理有二种方法。

方法一：如果提取生物碱及苦参黄酮用的溶剂为碱的水溶液，提取后，可以将提取液加酸至pH值为中性，黄酮类物质析出，固液分离得黄酮富集相；

所述调节pH值所用的酸优选盐酸、醋酸、硫酸或硝酸。

所述的方法也可以用如下方法代替，得到同样的效果：先用弱极性有机溶剂萃取提取液里的生物碱，然后对碱性水溶液干燥得到苦参总黄酮的盐类产品；也可以先用弱极性有机溶剂萃取提取液里的生物碱，然后对碱性水溶液加酸中和，使黄酮类物质析出，固液分离得到黄酮富集相。

所述弱极性有机溶剂优选低级卤代烃、芳香烃、低级酯、低级醚。

所述弱极性有机溶剂优选氯仿、甲苯、乙酸乙酯等。

方法二：如果提取液为碱的水溶液以外的任何上述溶液或溶剂，提取后，可以将提取液浓缩或蒸干，加水或酸水提取其中的生物碱，不溶于酸水的沉淀为黄酮类物质，固液分离得黄酮富集相。

如12.

所述干燥优选真空冷冻干燥、减压蒸馏、自然蒸发晾干、闪蒸或喷雾干燥。

本工艺提取制备的苦参总黄酮及其盐类可以制作成各种形式的产品，如粉末、制剂、口服液、胶囊等等。

本发明的优点：

本发明方法主要有以下特点：

1、苦参黄酮类成分大多数A环的C8位上都有以lavandulyl的分枝异戊烯基侧链形式存在的取代基，这是苦参黄酮类所独有的，是区别于提取黄酮类的重要特征。

2、所述lavandulyl分枝异戊烯基侧链增加黄酮的亲脂性，使其在生物体内更容易透过细胞膜到达作用目标，因而苦参总黄酮较其他黄酮具有更强的抗微生物活性、抗炎活性、抗癌活性以及酪氨酸酶抑制活性。

3、首次实现分别提取苦参生物碱和苦参黄酮，首次得到不含苦参生物碱的苦参总黄酮类及其盐类产品。

4、采用提取苦参碱后的苦参残渣为原料生产苦参总黄酮及其盐类产品，原料成本低，工艺简单，适合工业生产。

5、得到的苦参总黄酮及其盐类产品含量较高，总黄酮产品是黄色固体粉末，总黄酮盐类产品为红棕色固体结晶。

具体实施方式：

实施例1：

〔1〕10～40目的苦参粉末100g加入300ml甲醇，超声振荡提取30min，静置，过滤，滤饼用甲醇洗涤至无色且无生物碱；过滤，滤液浓缩至100ml，加入400ml水，黄酮类物质析出，过滤。

〔2〕减压蒸馏，得到黄色粉末产品，经检测含总黄酮80％(UV)。

实施例2：

〔1〕40～80目的苦参粉末100g加入300ml乙醇—氨水溶液，醇∶氨水＝100∶0.2(ml/ml)，渗漉至提取液无色且无生物碱，提取液浓缩至100ml，加入400ml的水，黄酮类物质析出，过滤。

〔2〕喷雾干燥，得到黄色粉末产品，经检测含总黄酮82％(UV)。

实施例3：

〔1〕80～100目的苦参粉末100g加入300ml乙醇—盐酸(10％)溶液，醇∶盐酸＝100∶1(ml/ml)，静置提取，过滤，滤饼重复提取至提取液无色且无生物碱，提取液合并浓缩至100ml，加入600ml水，黄酮类物质析出，过滤。

〔2〕黄酮富集相冷冻干燥，得到黄色粉末产品，经检测含总黄酮85％(UV)。

实施例4：

〔1〕80～120目的苦参粉末100g加入600ml丙酮—乙酸乙酯溶液，丙酮∶乙酸乙酯＝1∶1(ml/ml)，回流提取，过滤，重复上述操作至提取液无色且无生物碱，提取液蒸干，加入pH＝4的盐酸400ml，提取其中的生物碱，离心沉降，得到黄酮富集相。

〔2〕黄酮富集相自然晾干，得到黄色粉末产品，经检测含总黄酮88％(UV)。

实施例5：

〔1〕10～40目的苦参粉末100g加入pH值＝10的氢氧化钠溶液800ml，渗漉提取至提取液无色且无生物碱，加入盐酸至溶液呈中性，黄酮类成分析出，离心沉降，得到黄酮富集相。

〔2〕黄酮富集相自然蒸发晾干，得到黄色粉末产品，经检测含总黄酮80％(UV)。

实施例6：

〔1〕40～80目的苦参粉末100g加入pH值＝11的碳酸氢纳溶液1000ml，渗漉提取至提取液无色且无生物碱，提取液用氯仿萃取其中的生物碱至完全，碱水溶液加入硝酸至性，过滤，得到黄酮富集相。

〔2)黄酮富集相喷雾干燥，得到黄色粉末产品，经检测含总黄酮83％(UV)。

实施例7：

〔1〕80～100目的苦参粉末100g加入pH值＝12的碳酸纳溶液1000ml，静置提取，过滤，滤饼重复提取至提取液无色且无生物碱，提取液用氯仿萃取其中的生物碱至完全，得到含生物碱的有机相和黄酮类成分的水相。

〔2〕上述水相喷雾干燥，得到红棕粉末产品。

实施例8：

〔1〕100～120目的苦参粉末100g加入500ml乙酸乙酯，超声振荡提取30min，静置，过滤，滤饼用乙酸乙酯洗涤至无色且无生物碱；过滤，滤液合并蒸干，加入pH＝5的醋酸600ml，提取其中的生物碱，离心沉降，得到黄酮富集相。

〔2〕上述黄酮富集相减压蒸发，得到黄色粉末产品，经检测含总黄酮88％(UV)。

Claims (15)

1、一种由苦参生产苦参总黄酮及黄酮盐的方法，其特征在于包括如下步步骤：

将10～120目的苦参和溶剂按比例混合，混合比例为：苦参的质量：溶剂或溶液的体积＝1g∶3～10ml，提取其中的苦参生物碱和苦参总黄酮类成分，过滤，提取液经处理可将苦参生物碱和苦参总黄酮完全分离，苦参总黄酮富集相干燥可得到苦参总黄酮或苦参总黄酮盐类的产品。

2、如权利要求1所述的一种由苦参生产苦参总黄酮及黄酮盐的方法，其特征在于所述溶剂是碱性水溶液或有机溶剂以及有机溶剂的各种混合溶液。

3、如权利要求2所述的一种由苦参生产苦参总黄酮及黄酮盐的方法，其特征在于所述的碱性水溶液为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠或碳酸氢纳水溶液，pH值为9～14。

4、如权利要求2所述的一种由苦参生产苦参总黄酮及黄酮盐的方法，其特征在于所述的有机溶剂为低级醇、低级酯、低级酮或者低级醇的酸、碱性溶液。

5、如权利要求4所述的一种由苦参生产苦参总黄酮及黄酮盐的方法，其特征在于所述的有机溶剂为甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙酸甲酯、丙酮或甲醇-氨水溶液、乙醇-氨水溶液、甲醇-酸溶液、乙醇-酸溶液，也可以是这些溶液或溶剂的混合溶液或水溶液。

6、如权利要求5所述的一种由苦参生产苦参总黄酮及黄酮盐的方法，其特征在于所述的甲醇-氨水溶液、乙醇-氨水溶液为醇∶氨水＝100ml∶0.2～2ml。

7、如权利要求5所述的一种由苦参生产苦参总黄酮及黄酮盐的方法，其特征在于所述的甲醇-酸溶液、乙醇-酸溶液中的酸为盐酸、稀硫酸、稀硝酸或醋酸。

8、如权利要求1所述的一种由苦参生产苦参总黄酮及黄酮盐的方法，其特征在于所述的滤液经过的处理为：提取生物碱及苦参黄酮用的溶剂为碱的水溶液时，提取后，可以将提取液加酸至pH值为中性，黄酮类物质析出，固液分离得黄酮富集相。

9、如权利要求8所述的一种由苦参生产苦参总黄酮及黄酮盐的方法，其特征在于所述的酸为盐酸、醋酸、硫酸或硝酸。

10、如权利要求1所述的一种由苦参生产苦参总黄酮及黄酮盐的方法，其特征在于所述的滤液经过的处理为：提取生物碱及苦参黄酮用的溶剂为碱的水溶液时，先用弱极性有机溶剂萃取提取液里的生物碱，然后对碱性水溶液干燥得到苦参总黄酮的盐类产品。

11、如权利要求1所述的一种由苦参生产苦参总黄酮及黄酮盐的方法，其特征在于所述的滤液经过的处理为：提取生物碱及苦参黄酮用的溶剂为碱的水溶液时，先用弱极性有机溶剂萃取提取液里的生物碱，然后对碱性水溶液加酸中和，使黄酮类物质析出，固液分离得到黄酮富集相。

12、如权利要求10或11所述的一种由苦参生产苦参总黄酮及黄酮盐的方法，其特征在于所述弱极性有机溶剂为低级卤代烃、芳香烃、低级酯或低级醚。

13、如权利要求12所述的一种由苦参生产苦参总黄酮及黄酮盐的方法，其特征在于所述弱极性有机溶剂为氯仿、甲苯或乙酸乙酯。

14、如权利要求1所述的一种由苦参生产苦参总黄酮及黄酮盐的方法，其特征在于提取液为有机溶剂以及有机溶剂的各种混合溶液时，提取后，将提取液浓缩或蒸干，加水或酸水提取其中的生物碱，不溶于酸水的沉淀为黄酮类物质，固液分离得黄酮富集相。

15、如权利要求1或10所述的一种由苦参生产苦参总黄酮及黄酮盐的方法，其特征在于所述的干燥为真空冷冻干燥、减压蒸馏、自然蒸发晾干、闪蒸或喷雾干燥。