CN1785287A - 小儿咳喘灵制剂的质量控制方法 - Google Patents
小儿咳喘灵制剂的质量控制方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1785287A CN1785287A CN 200510003293 CN200510003293A CN1785287A CN 1785287 A CN1785287 A CN 1785287A CN 200510003293 CN200510003293 CN 200510003293 CN 200510003293 A CN200510003293 A CN 200510003293A CN 1785287 A CN1785287 A CN 1785287A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution
- reference substance
- product
- methanol
- need testing
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明公开了小儿咳喘灵制剂的质量控制方法，该方法采用薄层色谱法含有一种或几种药材进行鉴别；另外，该方法还提供了高效液相色谱法测定药物中甘草酸成分的含量。各制剂以相当每日服用生药量的成品量为单位量，每单位量含甘草酸不少于4.38mg。
Description
技术领域：
本发明涉及小儿咳喘灵制剂的质量控制方法，特别是涉及小儿咳喘灵口服液、糖浆、颗粒剂和膏滋的质量控制方法。
背景技术：
小儿咳喘灵口服液及小儿咳喘灵冲剂，对治疗小儿上呼吸道感染，气管炎、肺炎、咳嗽等症有显著效果，已列入《卫生部药品标准·中药成方制剂》第四册(WS3-B-0689-91)，但该制剂采用了传统提取工艺，提取物中留存了大量的杂质，给药物应用带来了副作用，由此限制了药效的发挥。又由于标准中只提出了相对密度、PH检查及理化鉴别，并无定性鉴别和含量指标。其质量控制更是难于保证。因此本申请人于2000年8月25日申请了名称“一种小儿咳喘灵中药制剂及其制备方法”的发明专利，申请号20051003180.X，运用新工艺新剂型对原制备工艺进行了改进，提高了制剂质量。与此同时，提高小儿咳喘灵制剂的产品质量标准已迫在眉睫，因此本申请人又对该中药制剂的质量控制方法进行了定性定量探究。经过一系列的方法学考察，得到了一种科学的质量检测方法。从而达到了提高小儿咳喘灵制剂质量标准的目的，可以作为上述制剂的质量控制方法。
中药制剂长期以来，质量难以有效控制，有效控制中药产品的质量是一个重大的课题，现有技术中采用的方法不完整，少数针对性不强，使用这些方法难以达到真正控制质量的目的。以上小儿咳喘灵制剂由于缺少质量控制方法，难以控该制剂的质量；给正常的生产经营带来了困难，利用已知的一些技术难以对该制剂产品提供好的质量控制方法，本发明针对现有技术的不足，采用新的手段对小儿咳喘灵制剂的质量进行控制，特别是采用用高效液相色谱法测定该药物中甘草酸单铵的含量和用薄层色谱法鉴别成品中中药材，解决了该制剂质量控制的难题。本发明针对小儿咳喘灵制剂的特点以及本发明配方，提供了一种实用的质量控制方法。
发明内容：
本发明的目的在于提供小儿咳喘灵制剂的质量控制方法，该方法包括鉴别和含量测定的步骤。
本发明所述的制剂，具体包括口服液、糖浆剂、颗粒剂和膏滋等。
本发明所述的小儿咳喘灵制剂是由如下重量配比的中药原料制成的：麻黄25g、金银花250g、苦杏仁125g、板蓝根250g、石膏375g、甘草125g、瓜萎125g及适量辅料。
本发明所述的制剂，其制备方法可以采用以下方法：
通过将上述配方的中药原料经过提取或其他方式加工，制成药物活性物质，随后，以该物质为原料，需要时加入药物可接受的载体，按照制剂学的常规技术制成胶囊、颗粒剂、片剂。所述活性物质可以通过选自以下方式的方法得到，如：通过粉碎、压榨、煅烧、研磨、过筛、渗漉、萃取、水提、醇提、酯提、酮提、层析等方法得到、这些活性物质可以是浸膏形式的物质，可以是干浸膏也可以是流浸膏，根据制剂的不同需要决定制成不同的浓度。
本发明的制剂，在制成制剂时根据需要可以加入药物可接受的载体，这些载体可以是任何适合制成本发明制剂的载体。
本发明所述制剂，优选的制备方法为：以上原料，石膏、苦杏仁、甘草、板蓝根、瓜萎加水，煎煮1小时，滤过。药渣与麻黄、金银花加水煎煮1小时，滤过，合并滤液，静置，取上清液，浓缩成相对密度约1.10(50℃)的流浸膏，加乙醇使含醇量达65％，搅匀，静置冷藏，滤取上清液，滤过，回收乙醇，浓缩至适量，然后按制剂学常规方法，加入适量辅料制成口服液、糖浆剂、颗粒剂和或膏滋。
以上制剂及其制备方法还包括本申请人申请的发明专利(《一种小儿咳喘灵中药制剂及其制备方法》申请号20051003180.X)，都可以通过本发明质量控制方法进行质量保证。
本发明质量控制方法包括鉴别和含量测定的步骤。
其中鉴别步骤选自以下方法中的一种或几种：
(1)按重量或体积取本品，加入稀盐酸，溶液显钙盐(中国药典2000年版一部附录IV)与硫酸盐(中国药典2000年版一部附录IV)的鉴别反应。
(2)按重量或体积取本品，加入氨水，用乙醚-乙醇提取，取乙醚提取液，用无水硫酸钠脱水，滤过，挥去乙醚，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液。另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液。照(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，分别吸取供试品溶液、对照品溶液，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇为展开剂，氨水饱和下展开，取出，凉干，喷以0.5％茚三酮乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。
(3)按重量或体积取本品，加氯仿，盐酸，加热回流，放冷，滤过，滤液加水洗涤，弃水层，氯仿液加无水硫酸钠，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇溶解，作为供试品溶液。另取甘草次酸对照品，加乙醇制成溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90℃)-苯-醋酸乙酯-冰醋酸为展开剂，展开，取出，凉干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。
(4)按重量或体积取本品，用稀盐酸调，用醋酸乙酯提取，取醋酸乙酯提取液，加活性炭，置水浴上微热搅拌，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液。另取金银花对照药材，加水微沸煎煮，滤过，滤液放冷，用稀盐酸调，用醋酸乙酯提取，取醋酸乙酯提取液，加活性炭，置水浴上微热搅拌，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的未活化的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水为展开剂，展开，取出，凉干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
(5)按重量或体积取本品，用氯仿提取，取氯仿层，用1％氢氧化钠溶液洗涤，再用蒸馏水洗涤，取氯仿层，挥干，作为供试品溶液。另取靛玉红对照品，加乙醚制成溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液，对照品溶液，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以苯-氯仿-丙酮为展开剂，展开，取出，凉干。
优选的鉴别步骤选自以下方法中的一种或几种：
(1)按重量或体积取本品1-5g或1-5ml，加入稀盐酸2-8ml，溶液显钙盐(中国药典2000年版一部附录IV)与硫酸盐(中国药典2000年版一部附录IV)的鉴别反应。
(2)按重量或体积取本品15-30g或15-30ml，加入氨水1-10ml，用乙醚-乙醇(6-11∶1-4)提取，取乙醚提取液，用无水硫酸钠1.5-5g脱水，滤过，挥去乙醚，残渣加甲醇1-3ml溶解，作为供试品溶液。另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液。照(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液5-10ul、对照品溶液2-5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(7-13∶1.4-2.2)为展开剂，氨水饱和下展开，取出，凉干，喷以0.5％茚三酮乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
(3)按重量或体积取本品15-30g或15-30ml，加氯仿15-45ml，盐酸2-10ml，加热回流15-45min，放冷，滤过，滤液加水洗涤1-3次，每次10-30ml，弃水层，氯仿液加无水硫酸钠1-3g，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1-3ml溶解，作为供试品溶液。另取甘草次酸对照品，加乙醇制成溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5-10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90℃)-苯-醋酸乙酯-冰醋酸(1-6∶6-10∶2-6∶0.3-0.7)为展开剂，展开，取出，凉干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
(4)按重量或体积取本品15-30g或15-30ml，用稀盐酸调PH1-4，用醋酸乙酯提取1-3次，每次15-30ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0-3.0g，置水浴上微热搅拌2-6min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1-3ml使溶解，作为供试品溶液。另取金银花对照药材1.0-4.0g，加水80-120ml微沸煎煮20-40min，滤过，滤液放冷，用稀盐酸调PH1-4，用醋酸乙酯提取1-3次，每次15-30ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0-3.0g，置水浴上微热搅拌2-6min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1-3ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5-10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的未活化的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水(4-9∶1.1-1.5∶0.3-0.7∶0.3-0.7)为展开剂，展开，取出，凉干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
(5)按重量或体积取本品85-120g或85-120ml，用氯仿提取1-3次，每次15-50ml，合并氯仿层，用1％氢氧化钠溶液洗涤2-4次，每次20-40ml，再用蒸馏水洗涤2-4次，每次20-40ml，取氯仿层，挥干1-2ml，作为供试品溶液。另取靛玉红对照品，加乙醚制成溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液15-30ul，对照品溶液2-10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以苯-氯仿-丙酮(3-7∶2-6∶1.2-2.4)为展开剂，展开，取出，凉干。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
更优选的鉴别步骤选自以下方法中的一种或几种：
(1)按重量或体积取本品2ml或2g，加入稀盐酸5ml，溶液显钙盐(中国药典2000年版一部附录IV)与硫酸盐(中国药典2000年版一部附录IV)的鉴别反应。
(2)按重量或体积取本品20g或20ml，加入氨水1ml，用乙醚-乙醇(8∶2)提取2次，每次20ml，合并乙醚提取液，用无水硫酸钠3g脱水，滤过，挥去乙醚，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液。另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液10ul、对照品溶液5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(10∶1.8)为展开剂，氨水饱和下展开，取出，凉干，喷以0.5％茚三酮乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
(3)按重量或体积取本品20g或20ml，加氯仿30ml，盐酸5ml，加热回流30min，放冷，滤过，滤液加水洗涤3次，每次20ml，弃水层，氯仿液加无水硫酸钠2g，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml溶解，作为供试品溶液。另取甘草次酸对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90℃)-苯-醋酸乙酯-冰醋酸(4∶8∶4∶0.5)为展开剂，展开，取出，凉干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
(4)按重量或体积取本品20g或20ml，用稀盐酸调PH1-2，用醋酸乙酯提取3次，每次20ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0g，置水浴上微热搅拌3min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取金银花对照药材2.0g，加水100ml微沸煎煮30min，滤过，滤液放冷，用稀盐酸调PH1-2，用醋酸乙酯提取3次，每次20ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0g，置水浴上微热搅拌3min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的未活化的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水(7∶1.2∶0.5∶0.5)为展开剂，展开，取出，凉干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
(5)按重量或体积取本品100g或100ml，用氯仿提取3次，每次20ml，合并氯仿层，用1％氢氧化钠溶液洗涤3次，每次20ml，再用蒸馏水洗涤3次，每次30ml，取氯仿层，挥干1ml，作为供试品溶液。另取靛玉红对照品，加乙醚制成每1ml含1.0mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液20ul，对照品溶液5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以苯-氯仿-丙酮(5∶4∶2)为展开剂，展开，取出，凉干。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的质量控制方法其中含量测定为对本发明制剂中甘草酸单铵含量的测定，其步骤为：
照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-2.5％醋酸水溶液(25-38∶51-73)为流动相；检测波长为253±3nm。理论板数按甘草酸单铵盐峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备取甘草酸单铵盐对照品约11-15mg，精密称定，置90-110ml量瓶中，用45-55％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，
供试品溶液的制备精密量取装量项下的本品2ml，置10ml量瓶中，用45-55％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，取上清液滤过(0.45μm)，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2-5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每支含甘草以甘草酸(C42H62O16)计不得少于4.38mg。
上述色谱条件流动相的数值范围优选的乙腈-2.5％醋酸水溶液比例(33∶67)为最佳；检测波长253nm为最佳。对照品溶液的制备最好取甘草酸单铵盐对照品约13mg，用甲醇溶解时，浓度最佳为50％，对照品溶液最佳定容至100ml，即每1ml含甘草酸单铵盐对照品0.13mg，折合甘草酸为0.1273mg)；供试品溶液的制备最好选用50％甲醇溶解。
以上所述本品为口服液、糖浆、颗粒剂或膏滋制剂，对于口服液和糖浆，直接量取，进行测定，对于颗粒或膏滋，测定时需要将其溶解于溶剂中，作为供试液，常规的方法是，取颗粒或膏滋1-10g加10-100ml溶剂溶解。
与现有技术相比：本发明质量控制方法对产品的质量控制更为有效，精密度良好、重现性良好、稳定性高。
本发明各个实验例供试品所用制剂均可采用实施例1、2和3所述的口服液、糖浆剂和颗粒剂，也可以与上述实施例所述的口服液、糖浆剂和颗粒剂具有相同原料组成的其他制剂。
以下通过实验例说明本发明的效果。
实验例1本发明质控方法对制剂所含成分含量测定的选定
“小儿咳喘灵制剂”系由七味中药组方而成，经对每一味药材进行资料查阅，并结合该药的制备工艺，对麻黄中麻黄碱、金银花中绿原酸、苦杏仁中苦杏仁苷和甘草中甘草酸进行了含量研究。
麻黄中主要含麻黄碱及麻黄次碱等多种生物碱、挥发油及芹菜素、芦丁、槲皮素等黄酮类成分，此外，麻黄中还有肉桂酸、香豆酸、儿茶酚鞣质等多种成分。对麻黄的含量测定，文献报道较多的是麻黄中麻黄碱的含量测定，参考有关文献资料对麻黄中麻黄碱的含量测定方法，进行了麻黄碱的含量测定研究。经多次多批样品测定，确定麻黄碱含量非常低，不宜作含量控制指标，故未将麻黄碱含量测定列入质量标准正文。
金银花主要含绿原酸、异绿原酸、挥发油及微量元素等成分。在制剂的含量测定研究过程中，我们曾对多批样品中绿原酸进行含量测定，但测定结果均偏低，总收率约为25％，估计部分被处方中多种生物碱等碱性物质中和所致，故未将绿原酸含量测定列入质量标准正文。
苦杏仁主要含苦杏仁苷、苦杏仁酶、油酸、亚油酸等脂肪酸、β-紫罗兰酮等挥发性物质、氨基酸等。在研究过程中，发现苦杏仁苷的含量波动较大，不甚稳定。经资料查阅，苦杏仁苷受苦杏仁酶和樱叶酶等β-葡萄糖苷酶的作用可水解，依次生成野樱皮苷和扁桃腈，再分解生成苯甲醛和氢氰酸。考虑到上述不稳定因素，未将苦杏仁苷含量测定列入质量标准正文。
综合以上因素，采用高效液相色谱法测定甘草中甘草酸的含量。
实验例2甘草酸单铵测定的方法学研究
据文献资料报道，甘草中主要含三萜类化合物如甘草甜素、甘草酸单铵盐、甘草酸水解物甘草次酸、皂苷、黄酮类化合物甘草苷、甘草素等成分。对甘草的含量测定，文献报道较多的是甘草中甘草酸的含量测定，其含量测定方法有滴定法、电位滴定法、比色法、紫外分光光度法、薄层扫描法、高效液相色谱法等。参考有关文献资料对甘草中甘草酸的含量测定方法，对制剂中甘草酸的含量进行了测定，并对测定的方法学进行了考察。
7.1仪器 岛津LC-10ATvp高效液相色谱仪，LC-10ATvp输液泵；SPD-M10Avp二级阵列检测器；SCL-10Avp系统控制器；CTO-10ASvp恒温柱箱；CLASS-VP6.1工作站数据处理系统；微量进样器(25μl)，HAMILTON公司。
7.2试药 乙腈(色谱纯)、冰醋酸(分析纯)、注射用水、甘草酸单铵盐对照品(中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用，批号：0731-9704)。
7.3色谱条件色谱柱：Hypersil ODS2(5.0×200mm)大连伊利特；流动相：乙腈-2.5％醋酸水溶液(33∶67)；检测波长：253nm；流速：1ml/min；柱温：30℃；进样量：5μl。
7.4系统适用性试验
分别取甘草酸单铵盐对照品溶液、供试品溶液和缺甘草的阴性供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱，甘草酸单铵盐的保留时间(tR)约为14.5分钟，阴性样品色谱图在甘草酸单铵盐峰位置处无假阳性峰，甘草酸单铵盐和相近的杂质峰分离完全(分离度＞1.5)，即本试验条件下甘草酸单铵盐与其他组分分离完全。理论塔板数以甘草酸单铵盐峰计算为6200。
7.5线性关系考察
7.5.1标准溶液的制备
精密称取甘草酸单铵盐对照品13.4mg，置100ml量瓶中，用50％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml含甘草酸单铵盐对照品0.125mg，折合甘草酸为0.1224mg)。
7.5.2标准曲线的绘制
精密吸取甘草酸单铵盐对照品溶液2、4、6、8、10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱(见表2)，以峰面积A(μV·s)对质量数x(μg)进行线性回归计算，得线性回归方程为：A＝884578.02×X-13495.70，r＝0.99991(见附图1甘草酸工作曲线图)，精密量取对照品溶液5μl注入液相色谱仪，所得峰面积为527842，将一供试品溶液进样分析所得峰面积分别用回归方程和一点法计算含量，结果的相对偏差为0.0014％，故本发明采用一点法计算含量。甘草酸线性范围：0.2448μg～1.224μg。
表2 甘草酸线性关系考察
| 甘草酸进样量(μg) | 甘草酸峰面积(μV·s) |
| 0.24480.48960.73440.97921.224 | 2072404121016390718525321069748 |
7.6精密度试验
按本发明中含量测定项下色谱条件，精密吸取甘草酸单铵盐对照品溶液(每1ml含甘草酸单铵盐对照品0.125mg，折合甘草酸为0.1224mg)5μl，注入液相色谱仪，测定峰面积，重复进样5次，结果列入表4，平均峰面积为528717.8，RSD为0.14％。
表4 甘草酸单铵盐对照品的精密度试验
| 进样次数 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 平均值 | RSD(％) |
| 峰面积 | 527842 | 528193 | 528623 | 529399 | 529532 | 528717.8 | 0.14 |
结果可见，该法精密度良好。
7.7重现性试验
分别精密量取本品2ml，按本发明中含量测定项下供试液的制备方法制备5份供试液，进样，测定峰面积，计算结果列入表5，甘草酸平均含量为0.9392mg/ml，RSD为1.58％。结果可见，该法重现性良好。
表5 制剂供试品中甘草酸的重现性试验
| 进样次数 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 平均值 | RSD(％) |
| 含量(mg/ml) | 0.9528 | 0.9556 | 0.9240 | 0.9385 | 0.9251 | 0.9392 | 1.58 |
7.8供试品溶液中甘草酸的稳定性试验
精密量取本品2ml，按本发明中中含量测定项下供试液的制备方法制备供试液，分别于0、2、4、6、8小时测定甘草酸峰面积(见表6，附图1)，结果表明，供试品溶液中甘草酸在8小时内稳定。
表6 制剂供试品中甘草酸的稳定性试验
| 时间(小时) | 0 | 2 | 4 | 6 | 8 | 平均值 | RSD(％) |
| 峰面积 | 492033 | 482523 | 484747 | 489104 | 486687 | 487019 | 0.76 |
7.9回收率试验
采用加样回收法，分别精密量取5份已测定含量的样品(平均含量为0.9392mg/ml)1ml，置10ml量瓶中，精密加甘草酸单铵盐对照品溶液(每1ml含甘草酸单铵盐对照品0.181mg，折合甘草酸为0.1773mg)5ml，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过(0.45um)，制得供试液。分别精密吸取5ul注入液相色谱仪，记录色谱，测定含量，计算回收率(结果见表7)，平均回收率为99.34％，RSD为2.02％。
表7 供试品溶液中甘草酸测定回收率试验
| 实验次数 | 样品量(ml) | 含甘草酸(mg) | 加入甘草酸(mg) | 测得量(mg) | 回收率(％) | 平均回收率(％) | RSD(％) |
| 12345 | 11111 | 0.93920.93920.93920.93920.9392 | 0.8865 | 1.83351.79261.82541.81221.8355 | 100.996.2799.9798.48101.1 | 99.34 | 2.02 |
7.10样品测定
按本发明制备供试品溶液和对照品溶液，分别进样5μl，记录色谱，测定峰面积，按下式计算含量：
式中：Ai：供试品溶液峰面积
As：对照品溶液峰面积
Cs：对照品(甘草酸)溶液浓度(mg/ml)
10：定容体积(ml)
2：取样量(ml)
根据严格按照生产工艺制备3批样品，测定样品中甘草酸含量，测定结果见表8。
表8 3批样品中甘草酸含量测定结果
| 样品 | 含量(mg/ml) | 平均值(mg/ml) | |
| 1 | 2 | ||
| 030105030113030121 | 0.9350.9030.962 | 0.9210.8850.953 | 0.9280.8940.958 |
根据多批小试及三批中试样品测定结果，样品中甘草酸的煎煮收率、醇沉收率分别约在50％、70％，因此制剂中甘草酸含量限度计算如下：
甘草酸含量限度＝制剂含甘草药材(mg/ml)×药材含甘草酸限度(药典规定)×煎煮收率×醇沉收率×每支装量(ml)＝125000/2000×2％×50％×70％×10＝4.38mg。
故制定本品每支含甘草以甘草酸(C42H62O16)计，不得少于4.38mg。
具体实施方式：
以下通过实施例进一步说明本发明，但不作为对本发明的限制，下述实施例均可达到上述实验例的效果。
实施例1小儿咳喘灵口服液
【处方】麻黄25g、石膏375g、苦杏仁125g、瓜萎125g、板蓝根250g、金银花250g、甘草125g
【制法】以上七味，苦杏仁、石膏、板蓝根、甘草、瓜萎加水煎煮1小时，滤过；药渣与麻黄、金银花再加水煎煮1小时，滤过，合并滤液，静置，取上清液，浓缩成相对密度约1.10(50℃)的流浸膏，加乙醇使含醇量达65％，搅匀，静置冷藏，滤取，回收乙醇，浓缩至适量，加入甜菊糖及防腐剂适量，搅拌均匀，滤过，加水至为2000ml，分装，每支装10ml，即得。
【鉴别】(1)取本品2ml，加入稀盐酸5ml，溶液显钙盐(中国药典2000年版一部附录IV)与硫酸盐(中国药典2000年版一部附录IV)的鉴别反应。
(2)取本品20ml，加入氨水1ml，用乙醚-乙醇(8∶2)提取2次，每次20ml，合并乙醚提取液，用无水硫酸钠3g脱水，滤过，挥去乙醚，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液。另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液10ul、对照品溶液5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(10∶1.8)为展开剂，氨水饱和下展开，取出，凉干，喷以0.5％茚三酮乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
(3)取本品20ml，加氯仿30ml，盐酸5ml，加热回流30min，放冷，滤过，滤液加水洗涤3次，每次20ml，弃水层，氯仿液加无水硫酸钠2g，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml溶解，作为供试品溶液。另取甘草次酸对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90℃)-苯-醋酸乙酯-冰醋酸(4∶8∶4∶0.5)为展开剂，展开，取出，凉干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
(4)取本品20ml，用稀盐酸调PH1-2，用醋酸乙酯提取3次，每次20ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0g，置水浴上微热搅拌3min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取金银花对照药材2.0g，加水100ml微沸煎煮30min，滤过，滤液放冷，用稀盐酸调PH1-2，用醋酸乙酯提取3次，每次20ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0g，置水浴上微热搅拌3min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的未活化的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水(7∶1.2∶0.5∶0.5)为展开剂，展开，取出，凉干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
(5)取本品100ml，用氯仿提取3次，每次20ml，合并氯仿层，用1％氢氧化钠溶液洗涤3次，每次20ml，再用蒸馏水洗涤3次，每次30ml，取氯仿层，挥干1ml，作为供试品溶液。另取靛玉红对照品，加乙醚制成每1ml含1.0mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液20ul，对照品溶液5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以苯-氯仿-丙酮(5∶4∶2)为展开剂，展开，取出，凉干。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
【含量测定】甘草酸单铵的含量测定：照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-2.5％醋酸水溶液(33∶67)为流动相；检测波长为253nm。理论板数按甘草酸单铵盐峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备取甘草酸单铵盐对照品约13mg，精密称定，置100ml量瓶中，用50％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液的制备精密量取装量项下的本品2ml，置10ml量瓶中，用50％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，取上清液滤过(0.45μm)，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每支含甘草以甘草酸(C42H62O16)计不得少于4.38mg。
实施例2小儿咳喘灵糖浆
【处方】麻黄25g 石膏375g 苦杏仁125g 瓜萎125g 板蓝根250g金银花250g 甘草125g
【制法】以上七味，苦杏仁、石膏、板蓝根、甘草、瓜萎加水煎煮1小时，滤过；药渣与麻黄、金银花再加水煎煮1小时，滤过，合并滤液，静置，取上清液，浓缩成相对密度约1.10(50℃)的流浸膏，加乙醇使含醇量达65％，搅匀，静置冷藏，滤取，回收乙醇，浓缩至适量与适量防腐剂一起加入到单糖浆中，混匀，搅拌均匀，滤过，加水至为2000ml，分装，每支装10ml，即得。
【质量控制方法】
鉴别、含量测定方法同实施例1，其中每支含甘草以甘草酸(C42H62O16)计不得少于4.38mg。
实施例3小儿咳喘灵膏滋
【处方】麻黄25g 石膏375g 苦杏仁125g 瓜萎125g 板蓝根250g金银花250g 甘草125g
【制法】以上七味，苦杏仁、石膏、板蓝根、甘草、瓜萎加水煎煮1小时，滤过；药渣与麻黄、金银花再加水煎煮1小时，滤过，合并滤液，静置，取上清液，浓缩成相对密度约1.10(50℃)的流浸膏，加乙醇使含醇量达65％，搅匀，静置冷藏，滤取，回收乙醇，浓缩至适量。取蔗糖，加适量水配成蔗糖液煮沸溶化，滤过，加酒石酸，保温4小时，使之成为转化糖。再将上述稠膏加入转化糖内，搅拌均匀，煮沸，低温浓缩至60℃时的相对密度1.65时，加入苯甲酸钠混匀，稍冷，及时置于罐装桶中，密封冷却至80℃，即得
【质量控制方法】
鉴别、含量测定方法同实施例1，其中每克膏滋含甘草以甘草酸(C42H62O16)计不得少于4.38mg。
实施例4小儿咳喘灵颗粒
【制法】以上七味，苦杏仁、石膏、板蓝根、甘草、瓜萎加水煎煮1小时，滤过；药渣与麻黄、金银花再加水煎煮1小时，滤过，合并滤液，静置，取上清液，浓缩成相对密度约1.10(50℃)的流浸膏，加乙醇使含醇量达65％，搅匀，静置冷藏，滤取，回收乙醇，浓缩至适量。另将适量蔗糖与上述浸膏混匀，干燥，粉碎，制粒，烘干，混匀，制成颗粒1000g，分装，即得。
【质量控制方法】
鉴别方法包括以下方法中的一种或几种：
(1)取本品1g，加入稀盐酸2，溶液显钙盐(中国药典2000年版一部附录IV)与硫酸盐(中国药典2000年版一部附录IV)的鉴别反应。
(2)取本品15g，加入氨水1ml，用乙醚-乙醇(6∶1)提取，取乙醚提取液，用无水硫酸钠1.5g脱水，滤过，挥去乙醚，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液。另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液。照(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液5ul、对照品溶液2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(7∶1.4)为展开剂，氨水饱和下展开，取出，凉干，喷以0.5％茚三酮乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
(3)取本品15g，加氯仿15ml，盐酸2ml，加热回流15min，放冷，滤过，滤液加10ml水洗涤，弃水层，氯仿液加无水硫酸钠1g，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml溶解，作为供试品溶液。另取甘草次酸对照品，加乙醇制成溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90℃)-苯-醋酸乙酯-冰醋酸(1∶6∶2-6∶0.3)为展开剂，展开，取出，凉干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
(4)取本品15g，用稀盐酸调PH2，用15ml醋酸乙酯提取，取醋酸乙酯提取液，加活性炭2.0g，置水浴上微热搅拌2min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取金银花对照药材1.0g，加水80ml微沸煎煮20min，滤过，滤液放冷，用稀盐酸调PH2，用15ml醋酸乙酯提取，取醋酸乙酯提取液，加活性炭2.0g，置水浴上微热搅拌2min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的未活化的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水(4∶1.1∶0.3∶0.3)为展开剂，展开，取出，凉干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
(5)取本品85g，用15ml氯仿提取，取氯仿层，用1％氢氧化钠溶液洗涤2次，每次20ml，再用蒸馏水洗涤2次，每次20ml，取氯仿层，挥干1ml，作为供试品溶液。另取靛玉红对照品，加乙醚制成溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液15ul，对照品溶液2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以苯-氯仿-丙酮(3∶2∶1.2)为展开剂，展开，取出，凉干。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
【含量测定】照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-2.5％醋酸水溶液(25∶51)为流动相；检测波长为250nm。理论板数按甘草酸单铵盐峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备取甘草酸单铵盐对照品约11mg，精密称定，置90ml量瓶中，用45-55％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，
供试品溶液的制备精密量取装量项下的本品2ml，置10ml量瓶中，用45％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，取上清液滤过(0.45μm)，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每支含甘草以甘草酸(C42H62O16)计不得少于4.38mg。
实施例5小儿咳喘灵口服液
麻黄5g、金银花50g、苦杏仁25g、板蓝根50g、石膏75g、甘草25g和瓜萎25g、薄荷脑5g、阿斯巴甜100g。
【制法】1)取以上处方中石膏、苦杏仁、甘草、板蓝根、瓜萎、金银花六味药，加9倍水，煎煮2.5小时，滤过。药渣再加8倍水煎煮1.5小时，滤过，合并滤液，静置，取上清液，浓缩成相对密度约1.09(50℃)的流浸膏，加乙醇使含醇量达80％，搅匀，冷藏24小时，滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度约1.22(60℃)的稠膏，备用。
2)麻黄粉碎，加入10倍量PH为2.8的盐酸溶液，浸泡2小时后煎煮2次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，药液调PH至7.45备用；
上述原料药，加入薄荷脑、阿斯巴甜，混合均匀，制成口服液，加水至为2000ml，分装，每支装10ml，即得。
【鉴别】(1)取本品2ml，加入稀盐酸5ml，溶液显钙盐(中国药典2000年版一部附录IV)与硫酸盐(中国药典2000年版一部附录IV)的鉴别反应。
(2)取本品20ml，加入氨水1ml，用乙醚-乙醇(8∶2)提取2次，每次20ml，合并乙醚提取液，用无水硫酸钠3g脱水，滤过，挥去乙醚，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液。另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液10ul、对照品溶液5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(10∶1.8)为展开剂，氨水饱和下展开，取出，凉干，喷以0.5％茚三酮乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
(3)取本品20ml，加氯仿30ml，盐酸5ml，加热回流30min，放冷，滤过，滤液加水洗涤3次，每次20ml，弃水层，氯仿液加无水硫酸钠2g，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml溶解，作为供试品溶液。另取甘草次酸对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90℃)-苯-醋酸乙酯-冰醋酸(4∶8∶4∶0.5)为展开剂，展开，取出，凉干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
(4)取本品20ml，用稀盐酸调PH1-2，用醋酸乙酯提取3次，每次20ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0g，置水浴上微热搅拌3min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取金银花对照药材2.0g，加水100ml微沸煎煮30min，滤过，滤液放冷，用稀盐酸调PH1-2，用醋酸乙酯提取3次，每次20ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0g，置水浴上微热搅拌3min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的未活化的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水(7∶1.2∶0.5∶0.5)为展开剂，展开，取出，凉干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
(5)取本品100ml，用氯仿提取3次，每次20ml，合并氯仿层，用1％氢氧化钠溶液洗涤3次，每次20ml，再用蒸馏水洗涤3次，每次30ml，取氯仿层，挥干1ml，作为供试品溶液。另取靛玉红对照品，加乙醚制成每1ml含1.0mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液20ul，对照品溶液5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以苯-氯仿-丙酮(5∶4∶2)为展开剂，展开，取出，凉干。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
【含量测定】甘草酸单铵的含量测定：照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-2.5％醋酸水溶液(33∶67)为流动相；检测波长为253nm。理论板数按甘草酸单铵盐峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备取甘草酸单铵盐对照品约13mg，精密称定，置100ml量瓶中，用50％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液的制备精密量取装量项下的本品2ml，置10ml量瓶中，用50％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，取上清液滤过(0.45μm)，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每支含甘草以甘草酸(C42H62O16)计不得少于4.38mg。
实施例6小儿咳喘灵口服液
【处方】麻黄25g、石膏375g、苦杏仁125g、瓜萎125g、板蓝根250g、金银花250g、甘草125g
【制法】同实施例1
【质量控制方法】
鉴别方法包括以下方法中的一种或几种：
(1)取本品5ml，加入稀盐酸8ml，溶液显钙盐(中国药典2000年版一部附录IV)与硫酸盐(中国药典2000年版一部附录IV)的鉴别反应。
(2)取本品30ml，加入氨水10ml，用乙醚-乙醇(11∶4)提取，取乙醚提取液，用无水硫酸钠5g脱水，滤过，挥去乙醚，残渣加甲醇3ml溶解，作为供试品溶液。另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液。照(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液8ul、对照品溶液4ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(13∶2.2)为展开剂，氨水饱和下展开，取出，凉干，喷以0.5％茚三酮乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
(3)取本品30ml，加氯仿45ml，盐酸10ml，加热回流45min，放冷，滤过，滤液加水洗涤3次，每次30ml，弃水层，氯仿液加无水硫酸钠3g，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇3ml溶解，作为供试品溶液。另取甘草次酸对照品，加乙醇制成溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各8ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90℃)-苯-醋酸乙酯-冰醋酸(6∶10∶6∶0.7)为展开剂，展开，取出，凉干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
(4)取本品30ml，用稀盐酸调PH4，用醋酸乙酯提取3次，每次30ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭3.0g，置水浴上微热搅拌6min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，作为供试品溶液。另取金银花对照药材4.0g，加水120ml微沸煎煮40min，滤过，滤液放冷，用稀盐酸调PH4，用醋酸乙酯提取3次，每次30ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0-3.0g，置水浴上微热搅拌6min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各8ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的未活化的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水(9∶1.5∶0.7∶0.7)为展开剂，展开，取出，凉干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
(5)取本品ml，用氯仿提取3次，每次50ml，合并氯仿层，用1％氢氧化钠溶液洗涤4次，每次40ml，再用蒸馏水洗涤4次，每次40ml，取氯仿层，挥干2ml，作为供试品溶液。另取靛玉红对照品，加乙醚制成溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液30ul，对照品溶液10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以苯-氯仿-丙酮(7∶6∶2.4)为展开剂，展开，取出，凉干。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
【含量测定】照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-2.5％醋酸水溶液(38∶51-73)为流动相；检测波长为256nm。理论板数按甘草酸单铵盐峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备取甘草酸单铵盐对照品约15mg，精密称定，置110ml量瓶中，用55％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，
供试品溶液的制备精密量取装量项下的本品2ml，置10ml量瓶中，用55％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，取上清液滤过(0.45μm)，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每支含甘草以甘草酸(C42H62O16)计不得少于4.38mg。
实施例7小儿咳喘灵口服液
【处方】麻黄25g、石膏375g、苦杏仁125g、瓜萎125g、板蓝根250g、金银花250g、甘草125g
【制法】同实施例1
【质量控制方法】
鉴别方法包括以下方法中的一种或几种：
(1)取本品4ml，加入稀盐酸6ml，溶液显钙盐(中国药典2000年版一部附录IV)与硫酸盐(中国药典2000年版一部附录IV)的鉴别反应。
(2)取本品28ml，加入氨水8ml，用乙醚-乙醇(9∶2)提取，取乙醚提取液，用无水硫酸钠3.5g脱水，滤过，挥去乙醚，残渣加甲醇2.5ml溶解，作为供试品溶液。另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液。照(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液6ul、对照品溶液3ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(9∶1.8)为展开剂，氨水饱和下展开，取出，凉干，喷以0.5％茚三酮乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
(3)取本品28ml，加氯仿35ml，盐酸7ml，加热回流35min，放冷，滤过，滤液加水洗涤2次，每次25ml，弃水层，氯仿液加无水硫酸钠2.5g，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2.5ml溶解，作为供试品溶液。另取甘草次酸对照品，加乙醇制成溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各6ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90℃)-苯-醋酸乙酯-冰醋酸(4∶7∶5∶0.4)为展开剂，展开，取出，凉干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
(4)取本品28ml，用稀盐酸调PH3，用醋酸乙酯提取2次，每次25ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭2.5g，置水浴上微热搅拌5min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取金银花对照药材2.5g，加水110ml微沸煎煮35min，滤过，滤液放冷，用稀盐酸调PH3，用醋酸乙酯提取2次，每次25ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭2.5g，置水浴上微热搅拌5min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2.5ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各7ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的未活化的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水(5∶1.4∶0.4∶0.4)为展开剂，展开，取出，凉干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
(5)取本品90ml，用氯仿提取2次，每次25ml，合并氯仿层，用1％氢氧化钠溶液洗涤3次，每次35ml，再用蒸馏水洗涤3次，每次35ml，取氯仿层，挥干2ml，作为供试品溶液。另取靛玉红对照品，加乙醚制成溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液28ul，对照品溶液7ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以苯-氯仿-丙酮(4∶3∶1.9)为展开剂，展开，取出，凉干。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
【含量测定】本发明口服液的质量控制方法，其中甘草酸单铵含量的测定方法为：
照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-2.5％醋酸水溶液(35∶70)为流动相；检测波长为254nm。理论板数按甘草酸单铵盐峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备取甘草酸单铵盐对照品约14mg，精密称定，置105ml量瓶中，用48％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，
供试品溶液的制备精密量取装量项下的本品2ml，置10ml量瓶中，用48％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，取上清液滤过(0.45μm)，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各4μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每支含甘草以甘草酸(C42H62O16)计不得少于4.38mg。
Claims (10)
1、一种小儿咳喘灵制剂的质量控制方法，其特征在于，该方法包括鉴别和含量测定的步骤。
2、权利要求1的方法，其特征在于，所述小儿咳喘灵制剂是口服制剂。
3、权利要求1的方法，其特征在于，所述口服制剂是小儿咳喘灵口服液、糖浆、颗粒剂或膏滋。
4、权利要求1的方法，其特征在于，所述鉴别方法选自以下方法中的一种或几种：
a.按重量或体积取本品，加入稀盐酸，溶液显钙盐的中国药典2000年版一部附录IV与硫酸盐的中国药典2000年版一部附录IV的鉴别反应；
b.按重量或体积取本品，加入氨水，用乙醚-乙醇提取，取乙醚提取液，用无水硫酸钠脱水，滤过，挥去乙醚，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液。另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液。照中国药典2000年版一部附录VIB试验，分别吸取供试品溶液、对照品溶液，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇为展开剂，氨水饱和下展开，取出，凉干，喷以0.5％茚三酮乙醇溶液，加热至斑点显色清晰；
c.按重量或体积取本品，加氯仿，盐酸，加热回流，放冷，滤过，滤液加水洗涤，弃水层，氯仿液加无水硫酸钠，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇溶解，作为供试品溶液。另取甘草次酸对照品，加乙醇制成溶液，作为对照品溶液。照中国药典2000年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以60-90℃石油醚-苯-醋酸乙酯-冰醋酸为展开剂，展开，取出，凉干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰；
d.按重量或体积取本品，用稀盐酸调，用醋酸乙酯提取，取醋酸乙酯提取液，加活性炭，置水浴上微热搅拌，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液。另取金银花对照药材，加水微沸煎煮，滤过，滤液放冷，用稀盐酸调，用醋酸乙酯提取，取醋酸乙酯提取液，加活性炭，置水浴上微热搅拌，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为对照药材溶液。照中国药典2000年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的未活化的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水为展开剂，展开，取出，凉干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点；
e.按重量或体积取本品，用氯仿提取，取氯仿层，用1％氢氧化钠溶液洗涤，再用蒸馏水洗涤，取氯仿层，挥干，作为供试品溶液。另取靛玉红对照品，加乙醚制成溶液，作为对照品溶液。照中国药典2000年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液，对照品溶液，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以苯-氯仿-丙酮为展开剂，展开，取出，凉干；
其中所述含量测定，步骤为：
照中国药典2000年版一部附录VID高效液相色谱法测定；
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-2.5％醋酸水溶液25-38∶51-73为流动相；检测波长为253±3nm；理论板数按甘草酸单铵盐峰计算应不低于2000；
对照品溶液的制备 取甘草酸单铵盐对照品约11-15mg，精密称定，置90-110ml量瓶中，用45-55％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，
供试品溶液的制备 精密量取装量项下的本品2ml，置10ml量瓶中，用45-55％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，取上清液滤过0.45μm，即得；
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2-5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本品每一剂量单位含甘草以甘草酸C42H62O16计不得少于4.38mg。
5、权利要求4的方法，其特征在于，所述鉴别方法选自以下方法中的一种或几种：
a.按重量或体积取本品1-5g或1-5ml，加入稀盐酸2-8ml，溶液显钙盐的中国药典2000年版一部附录IV与硫酸盐的中国药典2000年版一部附录IV的鉴别反应；
b.按重量或体积取本品15-30g或15-30ml，加入氨水1-10ml，用乙醚-乙醇6-11∶1-4提取，取乙醚提取液，用无水硫酸钠1.5-5g脱水，滤过，挥去乙醚，残渣加甲醇1-3ml溶解，作为供试品溶液。另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液。照中国药典2000年版一部附录VIB试验，吸取供试品溶液5-10ul、对照品溶液2-5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇7-13∶1.4-2.2为展开剂，氨水饱和下展开，取出，凉干，喷以0.5％茚三酮乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点；
c.按重量或体积取本品15-30g或15-30ml，加氯仿15-45ml，盐酸2-10ml，加热回流15-45min，放冷，滤过，滤液加水洗涤1-3次，每次10-30ml，弃水层，氯仿液加无水硫酸钠1-3g，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1-3ml溶解，作为供试品溶液。另取甘草次酸对照品，加乙醇制成溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5-10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以60-90℃石油醚-苯-醋酸乙酯-冰醋酸1-6∶6-10∶2-6∶0.3-0.7为展开剂，展开，取出，凉干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点；
d.按重量或体积取本品15-30g或15-30ml，用稀盐酸调PH1-4，用醋酸乙酯提取1-3次，每次15-30ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0-3.0g，置水浴上微热搅拌2-6min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1-3ml使溶解，作为供试品溶液。另取金银花对照药材1.0-4.0g，加水80-120ml微沸煎煮20-40min，滤过，滤液放冷，用稀盐酸调PH1-4，用醋酸乙酯提取1-3次，每次15-30ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0-3.0g，置水浴上微热搅拌2-6min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1-3ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5-10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的未活化的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水4-9∶1.1-1.5∶0.3-0.7∶0.3-0.7为展开剂，展开，取出，凉干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点；
e.按重量或体积取本品85-120g或85-120ml，用氯仿提取1-3次，每次15-50ml，合并氯仿层，用1％氢氧化钠溶液洗涤2-4次，每次20-40ml，再用蒸馏水洗涤2-4次，每次20-40ml，取氯仿层，挥干1-2ml，作为供试品溶液。另取靛玉红对照品，加乙醚制成溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15-30ul，对照品溶液2-10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以苯-氯仿-丙酮3-7∶2-6∶1.2-2.4为展开剂，展开，取出，凉干。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
6、权利要求4的方法，其特征在于，所述鉴别方法选自以下方法中的一种或几种：
a.按重量或体积取本品2ml或2g，加入稀盐酸5ml，溶液显钙盐与硫酸盐的鉴别反应；
b.按重量或体积取本品20g或20ml，加入氨水1ml，用乙醚-乙醇8∶2提取2次，每次20ml，合并乙醚提取液，用无水硫酸钠3g脱水，滤过，挥去乙醚，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液。另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照中国药典2000年版一部附录VIB试验，吸取供试品溶液10ul、对照品溶液5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇10∶1.8为展开剂，氨水饱和下展开，取出，凉干，喷以0.5％茚三酮乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点；
c.按重量或体积取本品20g或20ml，加氯仿30ml，盐酸5ml，加热回流30min，放冷，滤过，滤液加水洗涤3次，每次20ml，弃水层，氯仿液加无水硫酸钠2g，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml溶解，作为供试品溶液。另取甘草次酸对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以60-90℃石油醚-苯-醋酸乙酯-冰醋酸4∶8∶4∶0.5为展开剂，展开，取出，凉干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点；
d.按重量或体积取本品20g或20ml，用稀盐酸调PH1-2，用醋酸乙酯提取3次，每次20ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0g，置水浴上微热搅拌3min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取金银花对照药材2.0g，加水100ml微沸煎煮30min，滤过，滤液放冷，用稀盐酸调PH1-2，用醋酸乙酯提取3次，每次20ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0g，置水浴上微热搅拌3min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的未活化的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水7∶1.2∶0.5∶0.5为展开剂，展开，取出，凉干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点；
e.按重量或体积取本品100g或100ml，用氯仿提取3次，每次20ml，合并氯仿层，用1％氢氧化钠溶液洗涤3次，每次20ml，再用蒸馏水洗涤3次，每次30ml，取氯仿层，挥干1ml，作为供试品溶液。另取靛玉红对照品，加乙醚制成每1ml含1.0mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液20ul，对照品溶液5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以苯-氯仿-丙酮5∶4∶2为展开剂，展开，取出，凉干。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。
7、权利要求4的方法，其特征在于，所述质量控制方法，其中含量测定步骤为：
照中国药典2000年版一部附录VID高效液相色谱法测定；
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-2.5％醋酸水溶液33∶67为流动相；检测波长为253nm；理论板数按甘草酸单铵盐峰计算应不低于2000；
对照品溶液的制备 取甘草酸单铵盐对照品约13mg，精密称定，置100ml量瓶中，用50％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得；
供试品溶液的制备 精密量取装量项下的本品2ml，置10ml量瓶中，用50％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，取上清液滤过0.45μm，即得；
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本品每支含甘草以甘草酸C42H62O16计不得少于4.38mg。
8、权利要求4的方法，其特征在于，所述本品为口服液、糖浆、颗粒剂或膏滋制剂。
9、权利要求4的方法，其特征在于，所述每一剂量单位是口服液每支、糖浆每10ml、颗粒剂每克、膏滋每克。
10、权利要求1的方法，其特征在于，所述小儿咳喘灵制剂由如下重量配比的中药原料制成的：麻黄25g、金银花250g、苦杏仁125g、板蓝根250g、石膏375g、甘草125g、瓜萎125g。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB200510003293XA CN100388933C (zh) | 2005-11-21 | 2005-11-21 | 小儿咳喘灵制剂的质量控制方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB200510003293XA CN100388933C (zh) | 2005-11-21 | 2005-11-21 | 小儿咳喘灵制剂的质量控制方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1785287A true CN1785287A (zh) | 2006-06-14 |
| CN100388933C CN100388933C (zh) | 2008-05-21 |
Family
ID=36782955
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CNB200510003293XA Expired - Fee Related CN100388933C (zh) | 2005-11-21 | 2005-11-21 | 小儿咳喘灵制剂的质量控制方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN100388933C (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105147800A (zh) * | 2015-09-18 | 2015-12-16 | 广东一方制药有限公司 | 一种麻杏石甘汤配方颗粒的制备方法及其质量控制方法 |
| CN107894488A (zh) * | 2017-10-27 | 2018-04-10 | 哈尔滨市康隆药业有限责任公司 | 一种浓缩型小儿咳喘灵口服液的质量控制方法 |
-
2005
- 2005-11-21 CN CNB200510003293XA patent/CN100388933C/zh not_active Expired - Fee Related
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105147800A (zh) * | 2015-09-18 | 2015-12-16 | 广东一方制药有限公司 | 一种麻杏石甘汤配方颗粒的制备方法及其质量控制方法 |
| CN107894488A (zh) * | 2017-10-27 | 2018-04-10 | 哈尔滨市康隆药业有限责任公司 | 一种浓缩型小儿咳喘灵口服液的质量控制方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN100388933C (zh) | 2008-05-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101036748A (zh) | 一种益气复脉、活血化瘀的益心舒中药制剂的质量控制方法 | |
| CN1895617A (zh) | 温肾养心、壮腰安神的中药制剂及制备方法和质量控制方法 | |
| CN1857642A (zh) | 一种解郁安神制剂的质量控制方法 | |
| CN1857434A (zh) | 一种新复方大青叶制剂的质量控制方法 | |
| CN101040915A (zh) | 一种双黄连注射液的制备方法及其成分检测方法 | |
| CN1785380A (zh) | 一种中药制剂的质量控制方法 | |
| CN1785255A (zh) | 一种中药制剂的质量控制方法 | |
| CN1621836A (zh) | 生脉注射剂的质量控制方法 | |
| CN1857551A (zh) | 一种中药制剂的质量控制方法 | |
| CN1785295A (zh) | 一种中药制剂的质量控制方法 | |
| CN1876089A (zh) | 一种治疗肾气虚证的药物组合物及其制备方法 | |
| CN1785281A (zh) | 一种安神口服液体制剂的质量控制方法 | |
| CN1903325A (zh) | 治疗糖尿病的降糖甲制剂及其制备方法和质量控制方法 | |
| CN1255678C (zh) | 四季三黄胶囊活性成分含量检测方法 | |
| CN1785347A (zh) | 一种小儿高热不退的中药制剂质量控制方法 | |
| CN1895411A (zh) | 茵栀黄制剂及制备方法和质量控制方法 | |
| CN1857435A (zh) | 护肝宁制剂的质量控制方法 | |
| CN1785287A (zh) | 小儿咳喘灵制剂的质量控制方法 | |
| CN1785267A (zh) | 复方胆通固体制剂的质量控制方法 | |
| CN1823975A (zh) | 一种宫炎平制剂及其质量控制方法 | |
| CN1857620A (zh) | 治疗视疲劳的药物制剂的质量控制方法 | |
| CN1857406A (zh) | 一种中药制剂的质量控制方法 | |
| CN101066437A (zh) | 复方斑蝥口服制剂的质量控制方法 | |
| CN1857588A (zh) | 一种仙灵骨葆制剂的质量控制方法 | |
| CN1806845A (zh) | 一种药物组合物及其制备方法、质量控制方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20080521 Termination date: 20211121 |