CN1740199A - 一种用海星壳制备胶原蛋白肽的工艺方法 - Google Patents

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Abstract

一种用海星壳制备胶原蛋白肽的工艺方法。利用海星壳作为提取材料，首先将海星壳用水洗净后放在稀碱水中浸泡除去其中的杂蛋白，然后加入稀盐酸对海星壳进行脱钙处理，再以醋酸溶液和酸性蛋白酶抽提并离心得到粗品胶原蛋白肽溶液，将上述粗品胶原蛋白肽溶液通过大孔树脂去除海星皂甙类有毒物质和色素等杂质成分得到纯品胶原蛋白肽清液，最后真空冷冻干燥得到胶原蛋白肽干品。所述酸性蛋白酶是胃蛋白酶。本发明充分利用海星壳为原材料，操作简单成本低廉，利用大孔吸附树脂除去海星壳内色素及皂甙类有毒物质等杂质成分，制得胶原蛋白肽纯度更高；可溶性好，常温水相即可溶解；无异味、具有很高的经济价值。

Description

一种用海星壳制备胶原蛋白肽的工艺方法
技术领域
本发明涉及一种用海星壳制备胶原蛋白肽的工艺方法
背景技术
胶原蛋白(Collagen)是一种高分子蛋白质，是动物体内含量最多的蛋白质，约占人体蛋白质的25～33％，相当于人体重的6％。它遍及全身各个组织器官，如骨骼、软骨、韧带、皮肤、角膜、各种内膜筋膜等等。其主要功能是维持皮肤和组织器官的形态和结构、也是修复各损伤组织的重要材料。骨骼中有机物成分中有70％～80％是胶原蛋白，骨骼生成时，必须首先合成充足的胶原蛋白纤维来组成骨骼的框架。因此，有人称胶原蛋白为骨骼中的骨骼。胶原蛋白也是皮肤中的主要成分，占皮肤中蛋白质含量的71％以上。皮肤的生长、修复和营养供给都离不开胶原蛋白。胶原蛋白可使肌肤充盈，保持皮肤弹性与润泽，维持皮肤细腻光滑，皱纹舒展，呈现质感和透明感，有效防止老化。胶原蛋白与皮肤保健的两大关键因素—抗皱与保湿都有关，且还在修复皮肤中有明显功效。
广泛用于食品、化妆品和饮料作为添加剂的胶原蛋白肽的主要来源是动物的皮、骨骼、肌腱和胎盘等，由于病原菌的侵入，疯牛病、疯羊病等疾病的不断出现，哺育类动物的胶原蛋白来源受到极大的冲击，而海星在沿海地区资源丰富且廉价易得，可以将其废弃的海星壳(去除内脏的壳体)作为新资源进行深度开发成高附加值产品，并且以新的工艺来制取胶原蛋白肽的纯度更高。
发明内容
本发明目的是充分利用海星壳作为胶原蛋白肽资源，提供一种用海星壳制备胶原蛋白肽的工艺方法。
本发明的方法是利用海星壳作为提取材料，首先将海星壳用水洗净后放在稀碱水中浸泡除去其中的杂蛋白，然后加入稀盐酸对海星壳进行脱钙处理，再以醋酸溶液和酸性蛋白酶抽提并离心得到粗品胶原蛋白肽溶液，将上述粗品胶原蛋白肽溶液通过大孔树脂去除海星皂甙类有毒物质和色素等杂质成分得到纯品胶原蛋白肽清液，最后真空冷冻干燥得到胶原蛋白肽干品。所述真空冷冻干燥条件是将所得清液-20℃预冷冻，装到冻干机进行真空冷冻，温度降到-54℃以下，真空度达到5mtorr干燥24小时以上；所述稀碱溶液可取NaOH或NaHCO3其质量与水体积比为0.5-1‰；醋酸(HAc)在水溶液中浓度为0.5～1％；所述酸性蛋白酶是胃蛋白酶，且胃蛋白酶与海星壳的质量比为1∶100为宜。
该工艺的主要特点：操作简单；利用大孔吸附树脂除去海星壳内色素及皂甙类有毒物质等杂质成分，制得胶原蛋白肽纯度更高；可溶性好，常温水相即可溶解；无异味、苦味；充分利用海星壳为原材料，成本低廉，具有很高的经济价值。
具体实施方式：
1、海星壳用水洗净捞出，放入0.5～1‰NaOH水溶液中，浸泡24～36小时，中间换液2～3次，以去除海星壳上的杂蛋白；
2、将海星壳放入1～2％盐酸溶液中浸泡，进行脱钙处理，每隔一定时间换酸液一次，直至加入酸液无气泡冒出后捞出海星壳。
3、将上述处理好的海星壳放入0.5～1％HAc溶液中，同时加入胃蛋白酶进行抽提，条件为：pH＝2-3，24～36小时，加酶量1∶100(酶∶海星壳)；
4、6000g离心30分钟收集上清液得到粗品胶原蛋白肽溶液；
5、取上清液通过AB-8大孔树脂柱去除皂甙类有毒物质和其他杂质成分；
6、将清液-20℃预冷冻、装到冻干机进行真空冷冻，温度降到-54℃以下，真空度达到5mtorr干燥24小时以上，即得到胶原蛋白肽干品。
实施例1：
1.将20克去除海星内脏的海星壳用水洗净捞出放入200mL 0.1％NaOH水溶液中，浸泡24小时，中间换液3次，以彻底去除海星壳上的杂蛋白；
2.将海星壳放入2％盐酸溶液中浸泡进行脱钙处理，无气泡冒出后换酸液，直至新加入酸液无气泡冒出后捞出海星壳。
3.将海星壳放入100mL 0.5％HAc溶液中，同时加入0.2克胃蛋白酶进行抽提，条件为：pH＝3，36小时，并用磁力搅拌器搅拌；
4.6000g离心30分钟去除沉淀收集上清液；如果所收集液体中仍有少许混浊，可用滤纸抽滤除去不溶成分，得到粗品胶原蛋白肽溶液；
5.取上清液以一定流速通过AB-8大孔树脂柱处理，去除皂甙类有毒物质和色素等杂质成分；
6.为进一步去除上述溶液中的盐分，使所提胶原蛋白纯度更高，最好再用蒸馏水作外液对抽提液进行透析24h，每隔6h更换一次透析外液；如果溶液中有沉淀产生可用3000g离心30分钟后收集上清液；
7.将所得上清液-20℃预冷冻、装到冻干机进行真空冷冻，温度降到-54℃以下，真空度达到5mtorr干燥24小时以上，即得到胶原蛋白肽干品。
实施例2：
1.将50克去除海星内脏的海星壳用水洗净捞出放入500mL 0.5‰NaHCO3水溶液中，浸泡36小时，中间换液2次，以彻底去除海星壳上的杂蛋白；
2.将海星壳放入1％盐酸溶液中浸泡，进行脱钙处理，无气泡冒出后即换酸液，直至新加入酸液无气泡冒出后捞出海星壳。
3.将海星壳放入250mL 1％HAc溶液中，同时加入0.5克胃蛋白酶进行抽提，条件为：pH＝2，30小时，并用磁力搅拌器搅拌使抽提充分；
4.6000g离心30分钟去除沉淀收集上清液；如果所收集液体中仍有少许混浊，可用滤纸抽滤除去不溶成分得到粗品胶原蛋白肽溶液；
5.取上清液以一定流速通过AB-8大孔树脂柱处理，去除皂甙类有毒物质和色素等杂质成分；
6.考虑到进一步去除溶液中的盐分，使所提胶原蛋白纯度更高，最好再用蒸馏水作为外液对抽提液进行透析，条件同上；
7.将所得清液-20℃预冷冻，装到冻干机进行真空冷冻，温度降到-54℃以下，真空度达到5mtorr干燥24小时以上，即得胶原蛋白肽干品。

Claims (6)

1、一种用海星壳制备胶原蛋白肽的工艺方法，首先将海星壳用水洗净后放在稀碱水中浸泡，然后加入稀盐酸对海星壳进行脱钙处理，再以醋酸溶液和酸性蛋白酶抽提并离心得到粗品胶原蛋白肽溶液。
2、如权利1所述的工艺方法，其特征是将上述粗品胶原蛋白肽溶液通过大孔树脂得到纯品胶原蛋白肽清液，最后真空冷冻干燥得到胶原蛋白肽干品。
3、如权利1所述的工艺方法，其特征是所述的稀碱溶液为NaOH或NaHCO3质量其与水体积比为0.5-1‰。
4、如权利1所述的工艺方法，其特征是所述的醋酸在水溶液中浓度为0.5～1％。
5、如权利1所述的工艺方法，其特征是所述的所述酸性蛋白酶是胃蛋白酶，且胃蛋白酶与海星壳的质量比为1∶100。
6、如权利2所述的工艺方法，其特征是真空冷冻干燥条件是将所得清液-20℃预冷冻，装到冻干机进行真空冷冻，温度降到-54℃以下，真空度达到5mtorr干燥24小时以上。
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