CN1738635A - 用多阶段干扰素传递曲线治疗肝炎病毒感染的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了治疗肝炎病毒感染的方法。这些方法包括以获得抗病毒剂的多阶段血清浓度曲线的给药方案用包含抗病毒剂的组合物。给药方案包括比目前通用的肝炎疗法不太常见的给药。采用本发明的方法获得的多阶段抗病毒剂血清浓度曲线影响病毒滴度迅速下降，继以病毒滴度进一步减少一段时间以获得持续病毒应答。

Description

用多阶段干扰素传递曲线治疗肝炎病毒感染的方法
发明领域
本发明涉及病毒感染尤其是肝炎病毒感染的治疗领域。
发明背景
丙型肝炎病毒(HCV)感染在美国是最常见的慢性血传播感染。虽然新感染的数量下降了，但据疾病控制中心(Centers for Disease Control)估计，美国有390万(1.8％)受感染的病人，慢性感染的负担是相当大的。慢性肝脏疾病是美国第十位的成人死亡原因，共计每年大约有25,000人死亡，约占所有死亡人数的1％。研究表明40％的慢性肝脏疾病与HCV有关，导致每年8,000到10,000人的死亡。与HCV相关的终末期肝病是成人中肝移植最常见的指征。
随着治疗效果的明显改善，对慢性丙型肝炎的抗病毒治疗在最近十年中迅速发展。然而，即使是使用聚乙二醇化的IFN-α加病毒唑的联合治疗，仍有40％到50％的病人治疗失败。这些病人通常被称为“治疗失败”病人，包括无反应者(指治疗期间病毒滴度居高不下的病人)和复发病人(指治疗初期病毒滴度下降，但随后在治疗过程中上升或在治疗结束后上升的病人)。目前这些病人无有效的治疗选择。特别是肝活检有晚期纤维化或肝硬化的病人有发展为晚期肝脏疾病并发症的高度危险，这些并发症包括腹水、黄疸、静脉曲张的出血、脑病和进行性肝衰竭，以及这些病人有显著增加肝细胞癌的危险。
慢性HCV感染的高流行对于美国未来的慢性肝脏疾病的负担是一个重大的公众健康问题。国家健康和营养检测调查中心(NHANES III)的数据表明，从20世纪60年代后期到20世纪80年代初期，特别在20-40岁的人中，新的HCV感染率大幅度上升。据估计患有20年或以上的长期HCV感染的人数从1990年到2015年会上升4倍多，从750,000到三百万以上。30或40岁感染的人的比例或许有更大的增长。由于HCV-相关的慢性肝病的风险与感染的持续时间有关，对于感染20年以上的患者具有肝硬化进行性增加的危险，这将导致在1965-1985间感染的患者中，与肝硬化有关的发病率和死亡率明显增加。
慢性丙型肝炎病毒感染以血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平的间歇或持续升高和循环中HCV RNA的恒定水平为特征。目前，被认可的疗法采用来源于天然淋巴细胞的α干扰素或使用特定亚型cDNA序列的重组方法或共有序列干扰素-α(IFN-α)。可接受的剂量方案是皮下施用IFN-α的每周三次，每次6-50μg，持续24-48周。
还进行了IFN-α的周期性施用，期望获得病毒的清除。为迅速清除并在体内降解IFN-α，重复给药被认为是必要的。在谋略取得更好的疗效时，已进行联合治疗，例如IFN-α和病毒唑的联合使用。在被基因型1病毒(这是最普遍的HCV菌株)感染的患者中，即便采用联合疗法也只有不到25％的患者被证实有持续的病毒应答。在试图进一步改进治疗方法时，许多研究者都试图通过添加聚合物链对IFN-α进行化学修饰以增加蛋白质的分子量和大小及延长全身性循环时间。尽管这些对IFN-α的操作增加了循环时间并进一步改善了功效，但该蛋白质的一个重要组分丧失了其生物活性。因此，需要将较大量的蛋白质给予伴随，这种施用产生副作用(如中性白细胞减少)的患者。
已经检验了包括IFN-α在内的治疗方案期间的病毒动力学。通常，在一些个体中看到病毒效价开始的迅速下降(早期病毒应答；EVR)。在开始治疗后的24-48小时内EVR使血清HCV RNA水平大约降低了0.5-3个log值。早期加强的应答将有助于获得持久的应答。在一些个体中，EVR之后血液中的病毒继续缓慢降低(第二阶段降低)。第二阶段降低是病毒水平在几周或几个月内较缓慢的降低。
尽管上述认可的治疗方案的有用性，但只有一小部分接受治疗的个体获得持续病毒应答。因此，需要有改进的治疗HCV感染的方法。本发明满足了这一需要。文献
美国专利6,172,046；6,245,740；5,824,784；5,372,808；5,980,884；公开的国际专利申请WO 96/21468；WO96/11953；Torre等(2001)J.Med.Virol.64：455-459；Bekkering等(2001)J.Hepatol.34：435-440；Zeuzem等(2001)Gastroenterol.120：1438-1447；Zeuzum(1999)J.Hepatol.31：61-64；Keeffe和Hollinger(1997)Hepatol.26：101S-107S；Wills(1990)Clin.Pharmacokinet.19：390-399；Heathcote等(2000)New Engl.J.Med.343：1673-1680；Husa和Husova(2001)Bratisl.Lek.Lists 102：248-252；Glue等。(2000)Clin.Pharmacol.68：556-567；Bailon等。(2001)Bioconj.Chem.12：195-202；和Neumann等(2001)Science 282：103；Zalipsky(1995)Adv.Drug Delivery Reiews S.16，157-182；Mann等(1002)Lancet 358：958-965。
发明概述
本发明提供了治疗肝炎病毒感染的方法。所述方法通常包括在一剂量方案中施用含有抗病毒剂的组合物以实现抗病毒剂的多阶段血清浓度曲线。所述剂量方案包括给药频率低于现有的肝炎疗法。用本发明方法获得的多阶段抗病毒剂血清浓度曲线可使病毒效价开始的迅速降低，然后病毒效价在一段时间内进一步降低，从而实现持续的病毒应答。
发明特征
一些实施方案中，本发明以在个体中治疗丙型肝炎病毒感染的方法为特征。所述方法通常包括给予包含有效量干扰素-α(IFN-α)的组合物，所述量可使IFN-α的第一血清浓度在约24-48小时的第一阶段内至少约为最高耐受剂量(MTD)的80％，然后使IFN-α的第二浓度约为MTD的50％或更低，所述第二浓度保持至少7天的第二阶段。一些实施方案中，实现了持续的病毒应答。
一些实施方案中，所述方法还包括在给予IFN-α之前施用约1-14天IFN-γ。
一些实施方案中，IFN-α以缓释型制剂(depot)给予。其它实施方案中，IFN-α通过连续输注给予。一些实施方案中，连续输注给予是通过泵实现的。其它实施方案中，IFN-α是通过单次皮下注射继以用泵的连续输注给予的。
一些实施方案中，本发明以在个体中治疗丙型肝炎病毒感染的方法为特征，所述方法通常包括在一种剂量方案中施用IFN-α，该方案包括第一阶段和第二阶段，其中，在第一阶段，IFN-α的第一血清浓度在约24小时的第一阶段内至少约为最高耐受剂量(MTD)的80％，在第二阶段，在第二阶段期间任何24小时内测得的最高IFN-α血清浓度与最低血清IFN-α浓度的比值小于3，其中，第二阶段期间IFN-α的最高浓度约为MTD的50％或更低。在一些实施方案中，在第二阶段期间任何24小时内测得的最高IFN-α血清浓度与最低血清IFN-α浓度的比值约为1。
一些实施方案中，本发明以在个体中治疗丙型肝炎病毒感染的方法为特征，所述方法通常包括给予包含有效量共有序列干扰素-α(CIFN)的组合物，所述量可使CIFN的第一血清浓度在约24-48小时的第一阶段内至少约为最高耐受剂量(MTD)的80％，然后使CIFN的第二浓度约为50％或低于MTD，所述第二浓度保持至少7天的第二阶段。
一些实施方案中，本发明以在个体中治疗丙型肝炎病毒感染的方法为特征，所述方法通常包括在一种剂量方案中施用共有序列IFN-α(CIFN)，该方案包括第一阶段和第二阶段，其中，在第一阶段，CIFN的第一血清浓度在约24小时的第一阶段内至少约为最高耐受剂量(MTD)的80％，在第二阶段，在第二阶段期间任何24小时内测得的最高CIFN血清浓度与最低血清CIFN浓度的比值小于3，其中，第二阶段期间IFN-α的最高浓度约为MTD的50％或更低。
一些实施方案中，本发明以在个体中治疗丙型肝炎病毒感染的方法为特征，所述方法通常包括在一种剂量方案中施用IFN-α，该方案包括第一阶段和第二阶段，其中，在第一阶段，在约24小时的第一阶段内得到IFN-α的第一血清浓度的C1max，在第二阶段，得到Csus约为C1max的50％或更低，其中，曲线下面积由作为时间函数的IFN-α血清浓度定义，在第二阶段期间任何24小时内不超过第2天-第3天的曲线下面积，如图2所示。
一些实施方案中，本发明以在个体中治疗丙型肝炎病毒感染的方法为特征，所述方法通常包括在一种剂量方案中施用共有序列IFN-α(CIFN)，该方案包括第一阶段和第二阶段，其中，在第一阶段，在约24小时的第一阶段内得到CIFN的第一血清浓度的C1max，在第二阶段，得到Csus约为C1max的50％或更低，其中，曲线下面积由作为时间函数的CIFN血清浓度定义，在第二阶段期间任何24小时内不超过第2天-第3天的曲线下面积，如图2所示。
附图简述
图1展示了干扰素-α治疗期间的病毒动力学，这里以血液中HCV病毒的清除率表示，它是用聚合酶链式反应之类的灵敏测量方法监测血清中病毒RNA水平获得的。
图2展示了控制释放可注射(CRI)系统或零级通量系统(zero-orderthroughput system)和推注给药期间血清IFN-α浓度的曲线。包括常规TIW方案后的病毒动力学以比较本发明所述治疗剂量方案的改进(见下文)。
图3展示了控制释放可注射(CRI)给药期间血清IFN-α浓度的曲线。一种情况下，早期浓度促进了开始的病毒减少(见虚线)。
图4展示了CRI治疗后的病毒动力学和药代动力学。这种情况下，早期病毒应答(EVR)与常规的TIW治疗类似。第二阶段中的高浓度Csus影响斜率，使斜率变陡(见虚线)。
图5展示了用IFN-α进行CRI治疗后的病毒动力学和药代动力学。这种情况下，早期病毒效价显著降低，第二阶段有急剧下降(见虚线)。
图6展示了用持续释放输送系统施用IFN-α期间的病毒动力学，这种用药方法可使药物的Cmax和Csus浓度反复达到明显持续的病毒应答。由于重复的Cmax和持续高的Csus，病毒效价的下降可被看作是一个步骤(见虚线)。
定义
术语“治疗”、“医治”等在这里指获得所需要的药理和/或生理效果。该效果就其全部或部分防止一种疾病或症状而言可能是预防性的，和/或就其部分或完全治疗一种疾病和/或由疾病引起的不良影响而言可能是治疗性的。“治疗”在本文中包括对所有哺乳动物疾病的任何治疗，特别是人类的疾病，包括(a)防止疾病或疾病的症状在那些对该疾病有易感性但尚未诊断为罹患该病的受治疗者中发生(如包括与原发性疾病伴随的或引起的疾病(就象慢性HCV感染会导致肝纤维化；(b)抑制疾病，就是阻止疾病的发展，(c)减轻疾病，就是造成疾病的消退。
术语“个体”、“宿主”、“受治疗者”和“病人”在本文中可互换使用，指哺乳动物，包括但不限于灵长目，包括猿猴和人。
术语“早期病毒应答(EVR)”可与“最初病毒应答”互换使用，“快速病毒应答”是指病毒效价在开始HCV感染治疗后约24小时、约48小时、约3天或约1周内病毒效价的降低。
术语“第二阶段降低”在这里是指病毒水平在EVR后数周或数月的缓慢降低。
术语“持续病毒应答”(SVR；也称为“持续应答”或“持久性应答”)在这里是指个体对HCV感染的治疗方案的反应，根据血清HCV滴度测定。通常，“持续病毒应答”是指在治疗停止后的至少约1个月、至少约2个月、至少约3个月、至少约4个月、至少约5个月或至少约6个月的时间内，在患者血清中未检测到HCV RNA(例如，每毫升血清少于约500、少于约200、或少于约100个基因组拷贝)。
术语“治疗失败病人”在本文中通常指对以前的HCV治疗没有反应的HCV感染病人(称为“无反应者”)或对以前的治疗一开始有反应(如初期病毒反应(IVR))，但没有维持治疗反应的人(称为“复发者”)。以前的治疗通常包括IFN-α单一治疗或IFN-α联合治疗，其IFN-α联合治疗可包括施用IFN-α和一种抗病毒剂如病毒唑。
术语“肝炎病毒感染”是指被一种或多种甲型、乙型、丙型、丁型或戊型病毒感染，特别关注血液传播的肝炎病毒感染。
术语“肝纤维化”在这里指由于慢性肝炎感染导致的肝脏中瘢痕组织的生长。
术语“肝功能”在这里指肝的正常功能，包括但不限于合成功能，包括但不限于合成蛋白质，如血清蛋白(如白蛋白，凝血因子，碱性磷酸酶，转氨酶(如丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶)，5’-核苷酶，γ-谷氨酰胺酰基转肽酶等)，合成胆红素，合成胆固醇和合成胆酸；肝的代谢功能，包括，但不限于碳水化合物代谢、氨基酸和氨代谢，激素代谢和脂质代谢；外源性药物的解毒；血流动力功能，包括内脏和门静脉的血液动力学；等等。
适合所述方法使用的药物输送装置包括但不限于注射装置；可植入装置，如泵，例如渗透泵，它可与导管连接或不连接；生物可降解的植入物；脂质体；缓释型制剂；以及微球体。
术语“给药事件”在这里指将一种抗病毒剂施用给有此需要的患者，该事件可包括一种或多种抗病毒剂从药物分配装置中释放。因此，术语“给药事件”在这里包括但不限于放置含有抗病毒剂的缓释型制剂；放置连续输送装置(如泵或其它控制释放可注射系统)；以及单次皮下注射继以放置连续输送系统。
术语“缓释型制剂”是指许多可植入的、生物可降解或不可降解的控制释放系统，它通常是非集装的并作为释放药物的药物储器(reservoir)。缓释型制剂包括聚合或非聚合的生物可降解物质，且可以是固体、半固体或液体形式。
术语“微球体”(也称为“微粒体”、“纳米球”或“纳米颗粒”)是指通常用聚合材料制成的小颗粒，其直径通常约为0.01μm-约0.1μm，或从约0.1μm-约10μm。
术语“治疗有效量”是指治疗剂的量或治疗剂的输送速度有效地促进所需的疗效。确切的所需疗效将根据被治疗的病况、施用剂型和此领域的一般技术人员了解的许多其它因素而异。
在进一步描述本发明前，因理解本发明不限于所描述的特定实施方案，这些实施方案当然是可用改变的。还需要理解，这里使用的术语仅是出于描述特定实施方案的目的，而并不是要限制本发明的范围，因为本发明的范围仅由附加的权利要求限定。
本文中提供的数值范围，应当理解为每个居中的数值，直到下限数值单位的十分之一，除非上下文清楚地表述，否则在该范围上下限之间的数值和在所述范围中任何其他确定的数值或居中的数值都包含在发明内。这些较小范围的上下限可被独立地包含在较小范围内，同时它们也包含在发明内，属于在所述范围中任何被(较小范围)特别除外的范围。所述的范围包括其一个或两个限定值，排除该一个或两个限定值的范围也包含在本发明中。
除非另有定义，本文中使用的所有技术和科学术语的含义与本发明所属领域的熟练技术人员对它们的普遍理解相同。虽然有许多与本文所述相似或等同的方法和材料能用于实践或测试本发明，但本文所述的是优先的方法和材料。本文纳入作为参考的所有出版物以提示和描述与所引用出版物有关的方法和/或材料。
必须注意，除非有上下文清楚表述，否则本文及所附的权利要求中的单数形式都包含复数内容。例如，文中提及的“剂量”包括这种剂量的复数，本文中提及的“方法”包括本领域中熟练技术人员所知晓的一种或多种方法和等价物，等等。
本文所讨论的出版物只是因为它们的公开早于本发明的申请日。本文不被认作承认本发明无权借助在先发明而发生于这种公开之前，而且，所提供的出版日期可能与实际出版日期不同，该实际出版日期需要独立地确定。
发明详述
本发明提供了治疗肝炎病毒感染的方法，特别关注丙型肝炎病毒(HCV)感染。所述方法通常包括给予个体有效量的抗病毒剂以降低个体中的病毒负载，尤其是在个体中获得持续的病毒应答。抗病毒剂用一种剂量方案输送给个体，这种剂量方案有效实现血清中抗病毒剂的多阶段浓度。设计所述抗病毒剂的多阶段浓度曲线时要考虑用IFN-α治疗丙型肝炎病毒(HCV)时观察到的病毒动力学。
现有的治疗HCV感染的IFN-α疗法通常包括每天(QD)、每隔一天(QOD)或每周三次(TIW)皮下注射IFN-α。通过数学建模分析了应答者中响应常规IFN-α疗法的HCV感染的动力学，通过RNA PCR确定，其结果显示在图1中。该研究清楚显示了治疗开始后24-48小时内的病毒快速减少期，其结果是使血清RNA水平降低了约0.5个log值-约3个log值或更高。这种早期病毒应答(EVR)对于减少病毒颗粒的产生是重要的。早期加强的应答通常预示更持久的应答。这种早期阶段通常后面有数天或数周的较缓慢的持续的病毒清除。通常，第二阶段取决于患者的特征。不局限于任何理论，病毒效价的第二阶段降低可能与清除病毒感染的细胞有关，如免疫系统介导的机制。第二阶段的斜率由患者的持续病毒应答(SVR)决定，例如较陡的第二阶段斜率通常与SVR和积极治疗结果有关。
在基于IFN-α的治疗方案期间病毒动力学和血清IFN-α浓度显示在图2-6中。同时显示了常规(如TIW)治疗和本发明所述的治疗剂量方案(例如控制释放治疗，如CRI治疗)的病毒动力学(VK；以病毒RNA(“RNA”)与时间的关系曲线表示)与血清IFN-α浓度(药代动力学(PK)；以血清IFN与时间的关系曲线表示)。搏动或重复施用活性成分后获得的IFN-α的最大血清浓度以C1max(图2-5)、C2max(图6)等表示。C1max、C2max等是等于或接近最大耐受剂量(MTD)。持续一段时间获得的血清IFN-α浓度以Csus表示(图2-6)。Csus约为MTD的50％。生物可利用的抗病毒剂的量以血清浓度与时间曲线下的面积或曲线下面积(AUC)表示。当出现副作用时血清中的阈浓度是指MTD。
现有治疗HCV感染的疗法有一些缺点。在延长治疗期间每天(QD)、每隔一天(QOD)或每周三次(TIW)注射IFN-α的剂量方案的缺点如下：(1)该剂量方案会令患者不适，一些情况下会使患者不配合治疗；(2)该剂量方案通常有副作用，这会给患者带来其它不适，一些情况下会使患者不配合治疗；(3)该剂量方案会产生“峰”(Cmax)和“谷”(Cmin)血清IFN-α浓度，在“谷”期间，病毒可复制和/或感染其它细胞和/或突变；(4)许多情况下，早期病毒应答期间病毒效价log值的降低不足以影响最终清除病毒的持续病毒应答(见图2；常规IFN-αTIW治疗后的病毒动力学)。
本发明提供的剂量方案可避免上述缺点，并可提供显著的优点，包括(1)因为以低于QD、QOD或TIW的频率给药，所以患者的不适减少了，这可能促使患者配合治疗；(2)由于给药将连续一段时间，就可避免“峰”(即Cmax)和“谷”(即Cmin)血清IFN-α浓度，例如Cmax与Cmin的比值减小；(3)由于避免了与剂量方案有关的峰/谷循环，从而减少了副作用；(4)由于避免了与剂量方案有关的峰/谷循环，从而减少了病毒复制、感染更多细胞和突变(即由于血清中抗病毒剂的水平更加恒定，故对病毒有恒定的“压力”)；(5)本发明所述的一种给药事件可同时产生病毒动力学的早期病毒应答和持续病毒应答阶段(例如见图5第III阶段)；(6)本发明所述的重复给药事件对持续病毒应答有影响，从而进一步降低病毒效价(例如见图6：C1max、C2max等对病毒有强大的阴性选择压力，可在剂量循环之间减少病毒突变和/或复制和/或逃避事件)；(7)本发明所述给药事件的第一阶段期间病毒效价log值的降低大于上述现有剂量方案(例如见图3第I阶段)；(8)持续阶段中恒定的高药物浓度(Csus)使第二阶段的斜率较陡(例如见图4第II阶段)；以及(9)由于增加了病毒效价log值的降低，第二阶段的结果更加好，即与上述现有剂量方案相比，持续病毒应答阶段病毒效价的降低更加迅速(斜率更陡)。
本发明提供了治疗肝炎病毒感染的方法，包括提供抗病毒剂的多阶段血清浓度的剂量方案。所述抗病毒剂的多阶段血清浓度是用低于现有疗法的给药频率获得的。
在第一阶段，IFN-α的血清浓度高，以提供最佳Cmax浓度同时使病毒效价中的斜率尽可能的陡，使病毒效价迅速下降从而降低IFN-α浓度将是有效的。这种最初的高剂量IFN-α被称为“首次剂量”或“最初负荷剂量”。
在第二阶段，IFN-α血清浓度低于第一阶段，并再次有效降低病毒效价。第一阶段应尽可能短，因为在此阶段输运的IFN-α的量是或接近个体可耐受的最大剂量(“MTD”)。一旦病毒效价在此开始的高剂量阶段迅速下降，就可减小IFN-α的浓度，而仍能获得足以使病毒效价进一步下降的AUC(例如见图3)。这种较低IFN-α浓度的第二阶段可被大多数个体耐受；因此为患者提供了最大舒适度并使他们最大可能地接受治疗。
所述第一阶段和第二阶段是在单次给药事件中实现的，例如，所述“单次给药事件”包括放置缓释型制剂；放置泵；以及将单次皮下注射继以放置泵相结合。单次给药事件是通过一种或多种剂型获得的，例如以下一种或多种：缓释型制剂；泵；和注射装置。
一些实施方案中，抗病毒剂是以缓释型制剂施用的。这种施用形式的优点在于缓释型制剂输运的特性，这通常被认为是不需要的，即植入或注射入患者后药物从缓释型制剂中释放的最初“爆发”。通过以缓释型制剂输送抗病毒剂，这将释放抗病毒剂的最初爆发，获得抗病毒剂的多阶段血清浓度。抗病毒剂释放的最初爆发影响抗病毒剂的第一血清浓度，这将有效地使病毒效价迅速降至低浓度抗病毒剂可处理的水平。抗病毒剂的较低血清浓度是通过最初爆发后抗病毒剂从缓释型制剂中持续释放获得的。
许多实施方案中，所述剂量方案包括单次给药事件。其它实施方案中，所述剂量方案是重复的。在所有情况下，采用这种输送系统重复施用提供了C1max、C2max等继之以一种稳态浓度(Csus，见图6)。
治疗肝炎感染的方法
本发明提供了治疗肝炎病毒感染的方法。所述方法通常包括以有效获得抗病毒剂的多阶段血清浓度的方式给予一定水平的抗病毒剂。用单次给药事件可实现第一阶段和第二阶段(例如放置(如植入或注射)缓释型制剂；放置连续输注装置，如泵；以及单次皮下注射和放置连续输送装置)相结合。
在本发明的所有实施方案中，本发明方法的剂量方案获得了抗病毒剂的血清浓度，其中血清抗病毒剂浓度的“峰”(Cmax；抗病毒剂的最高血清浓度)和“谷”(Cmin；抗病毒剂的最低血清浓度)被减小或避免。在所有实施方案中，本发明的剂量方案在第二阶段(例如治疗的第2-15天，治疗的第2-10天，治疗的第3-10天或治疗的第3-15天，见图2-6)中Cmax∶Cmin的比值小于约3.0，小于约2.5，小于约2.0或小于约1.5。一些实施方案中，所述剂量方案在第二阶段(例如治疗的第2-15天，治疗的第2-10天，治疗的第3-10天或治疗的第3-15天，见图2-6)中Cmax∶Cmin的比值约为1.0。
通常，在本发明的剂量方案中，在第二阶段的任何24小时期间内测得的第二阶段中抗病毒剂血清浓度的曲线面积(AUC)(即AUSsus)小于第一阶段的任何24小时期间内的AUC(即AUCmax)。换句话说，在第二阶段的任何24小时期间内测得的AUSsus小于第一阶段的任何24小时期间内测得的AUCmax。
第一阶段中抗病毒剂的血清浓度可使个体血清中的病毒效价有效降低1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5或5个log值。
第一阶段中抗病毒剂的血清浓度可使个体血清中的病毒效价在所述剂量方案开始后的约12-48小时、或约16-24小时内有效降低1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5或5个log值。
抗病毒剂的第二浓度保持约24-48小时、约2-4天，约4-7天，约1-2周，约2-4周，约4-6周，约6-8周，约8-12周，约12-16周、约16-24周或约24-48周。
在第二阶段，血清中抗病毒剂的浓度可使病毒效价有效降至不可检测水平，例如每毫升血清约1000-5000、约500-1000或约100-500个基因组拷贝。一些实施方案中，抗病毒剂的有效量是使病毒负荷有效降至每毫升血清100个基因组拷贝以下的量。
第二阶段中，抗病毒剂的血清浓度可有效获得持续病毒应答，例如在治疗结束后至少约1个月、至少约2个月、至少约3个月、至少约4个月、至少约5个月或至少约6个月后在患者血清中未发现可检测的HCV RNA(例如每毫升血清少于约500、少于约200、或少于约100个基因组拷贝)。
一些实施方案中，第一和第二阶段后至少有一个第三阶段。这些实施方案中的一些中，第三阶段包括以有效获得抗病毒剂的血清浓度等于或接近第一血清浓度的剂量施用抗病毒剂。在其中一些实施方案中，第四阶段包括以有效获得抗病毒剂的血清浓度等于或接近第二血清浓度的剂量施用抗病毒剂。
用IFN-α治疗HCV感染
在一些感兴趣的实施方案中，所述肝炎病毒是丙肝病毒(HCV)。在感兴趣的特定实施方案中，所述肝炎病毒是HCV，且所述抗病毒剂是干扰素-α(IFN-α)。
在第一阶段，所得IFN-α的血清浓度是或接近患者可耐受的最大水平。第一阶段中获得的血清浓度(第一浓度)在约10-约1000、约10-约500、约20-约250、约30-约100、或约50-约70国际单位(IU)/ml的范围内。第一血清浓度保持约6-12小时、约12-24小时或约24-48小时。
在第一阶段，施用的IFN-α的量可有效地使IFN-α的血清浓度为最大耐受剂量(MTD)的约65％-约70％、约70％-约75％、约75％-约80％、约80％-约85％、约85％-约90％、约90％-约95％或约95％-约100％。因此，在从剂量方案开始的约6-12小时、约12-24小时或约24-48小时内，IFN-α的血清浓度达到最大耐受剂量(MTD)的约65％-约70％、约70％-约75％、约75％-约80％、约80％-约85％、约85％-约90％、约90％-约95％或约95％-约100％。
获得IFN-α的第一血清浓度的施用剂量为约10-100μg、约20-70μg、约25-60μg、约30-50μg。这些不同的剂量是指游离干扰素，为获得这一剂量而施用的缓释型制剂的量将取决于药物负载效率，这将在下面讨论。
有效剂量的共有序列IFN-α包括每剂量约3μg、约9μg、约15μg、约18μg或约27μg。有效剂量的IFN-α2a和IFN-α2b范围从每剂量3百万国际单位(MIU)-10MIU。有效剂量的加入PEG(聚乙二醇)的IFN-α2a范围从每剂量90-180μg。有效剂量的加入PEG的IFN-α2b的范围为每剂量每千克体重0.5μg-1.5μg。
慢性丙型肝炎患者通常有水平为每毫升105-107基因组拷贝的循环病毒。在第一阶段，IFN-α的血清浓度使HCV效价有效降至每毫升血清约5×104-约105、约104-约5×104、或约5×103-约104基因组拷贝。
一些实施方案中，第一阶段中IFN-α的血清浓度有效地使HCV效价在剂量方案开始后的约12-48小时或约16-24小时内降至每毫升血清约5×104-约105、约104-约5×104、或约5×103-约104基因组拷贝。
一些实施方案中，第一阶段中IFN-α的血清浓度有效地使个体血清中的病毒效价降低1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5或5个log值。
一些实施方案中，第一阶段中IFN-α的血清浓度有效地使个体血清中的病毒效价在所述剂量方案开始后的约12-48小时、或约16-24小时内有效降低1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5或5个log值。
在第一阶段，所得IFN-α的血清浓度可有效地使病毒效价降至被感染个体可耐受的干扰素剂量可处理的水平。
在第二阶段，IFN-α以有效地使IFN-α的血清浓度低于患者可耐受的最大水平并可有效地进一步降低病毒效价的水平施用。在第二阶段，IFN-α以有效达到约5IU/ml-约50IU/ml的IFN-α血清浓度的剂量施用。一些实施方案中，IFN-α以有效达到约5IU/ml-约100IU/ml或更高的IFN-α血清浓度的剂量施用。在所述第二阶段，IFN-α的施用剂量约为0.5×106IU-约50×106IU。
在第二阶段，IFN-α以有效地使IFN-α的血清浓度达到并保持MTD的约10％-约15％、约15％-约20％、约20％-约25％、约25％-约30％、约30％-约35％、约35％-约40％、约40％-约45％或约45％-50％的水平施用。第二阶段的IFN-α的血清浓度低于MTD较好，这样可有效发挥抗病毒作用。因此，在剂量方案开始后的约48小时-约4天、约48小时-约7天、约48小时-约10天、或约48小时-约15天内，IFN-α的血清浓度可达到(通常可保持)MTD的约10％-约15％、约15％-约20％、约20％-约25％、约25％-约30％、约30％-约35％、约35％-约40％、约40％-约45％或约45％-50％。
IFN-α的第二浓度被保持约24-48小时、约2-4天，约4-7天，约1-2周，约2-4周，约4-6周，约6-8周，约8-12周，约12-16周、约16-24周或约24-48周。
在第二阶段，血清IFN-α的第二浓度使病毒效价有效降至每毫升血清约1000-5000、约500-1000或约100-500个基因组拷贝。一些实施方案中，IFN-α的有效量是使病毒负荷有效降至每毫升血清100个基因组拷贝以下的量。
血清IFN-α的第二浓度可有效获得持续病毒应答，例如在治疗结束后至少约1个月、至少约2个月、至少约3个月、至少约4个月、至少约5个月或至少约6个月，在患者血清中未发现可检测的HCV RNA(例如每毫升血清少于约500、少于约200、或少于约100个基因组拷贝)。
一些实施方案中，第一和第二阶段后至少有一个第三阶段。在其中一些实施方案中，第三阶段包括以有效获得IFN-α的血清浓度等于或接近第一血清浓度的剂量施用抗病毒剂。在其中一些实施方案中，第四阶段包括以有效获得IFN-α的血清浓度等于或接近第二血清浓度的剂量施用抗病毒剂。
联合治疗
一些实施方案中，所述联合治疗方法包括施用IFN-α和另一种治疗剂，如IFN-γ和/或病毒唑。在所有实施方案中，其中所述剂量方案包括施用IFN-α和其它制剂如IFN-γ和/或病毒唑，IFN-α被施用以达到上述IFN-α的多阶段血清浓度。
一些实施方案中，其它治疗剂是在IFN-α治疗的整个过程中施用的，从治疗阶段开始到结束。在其它实施方案中，其它治疗剂的施用期与IFN-α的治疗期重叠，例如在IFN-α治疗开始之前用其它治疗剂治疗，并在IFN-α治疗结束前结束；可在IFN-α治疗开始之后用其它治疗剂治疗，并在IFN-γ治疗结束后结束；可在IFN-α治疗开始之后用其它治疗剂治疗，并在IFN-α治疗结束前结束；或可在IFN-α治疗开始之前用其它治疗剂治疗，并在IFN-α治疗结束后结束。
在其它实施方案中，其它治疗剂是在IFN-α治疗开始前施用的，一旦IFN-α治疗开始就结束，例如，其它治疗剂被用于“致敏”剂量方案。
IFN-α和IFN-γ
一些实施方案中，干扰素-γ(IFN-γ)是与IFN-α分开施用的，例如以独立于IFN-α的制剂和给药事件施用IFN-γ。其它实施方案中，IFN-γ与IFN-α在同一制剂中施用(因此在同一给药事件中给予)。再在其它实施方案中，IFN-γ以独立于IFN-α的制剂给予，以提供上述多阶段血清浓度的给药方案施用。
IFN-γ的有效剂量范围为约0.5-500μg/m2，通常是约1.5-200μg/m2，取决于患者的大小。该活性基于106国际单位(IU)/50μg蛋白质。
如上所述，一种实施方案中，IFN-γ在独立于IFN-α的给药事件中施用。在一非限制的实施例中，IFN-γ以约1MIU/天的剂量施用14天；然后以5MIU/天施用14天；继以5MIU每周三次施用22周。
一些实施方案中，IFN-γ在IFN-α治疗的整个过程中施用。在其它实施方案中，IFN-γ的施用期与IFN-α的治疗期重叠，例如可在IFN-α治疗开始之前开始IFN-γ治疗并在IFN-α治疗结束前结束；IFN-γ治疗可在IFN-α治疗开始之后开始并在IFN-γ治疗结束后结束；IFN-γ治疗可在IFN-α治疗开始之后开始并在IFN-α治疗结束前结束；或IFN-γ治疗可在IFN-α治疗开始之前开始并在IFN-α治疗结束后结束。
一些实施方案中，在施用IFN-α之前施用IFN-γ一段时间。不局限于任何理论，IFN-γ会影响Th2到Th1的迁移。Th1免疫应答的增加将导致一旦开始施用IFN-α增加了病毒效价的降低速度。这些实施方案中，在IFN-α治疗开始之前施用IFN-γ约1-14天、约2-10天或约3-7天。这段时期被称为“致敏”期。在其中一些实施方案中，在整个IFN-α治疗阶段连续进行IFN-γ治疗。在其它实施方案中，IFN-γ治疗在IFN-α治疗结束前停止。在这些实施方案中，IFN-γ治疗的总时间(包括“致敏”期)约为2-30天、约4-25天、约8-20天，约10-18天，或约12-16天。再在其它实施方案中，一旦IFN-α治疗开始就结束IFN-γ治疗。
IFN-γ可用任何常规途径和方法施用，包括但不限于皮下、透皮和口服等。IFN-γ也可用本发明的方法施用，以提供IFN-γ的多阶段血清浓度。施用可通过注射、通过连续输注装置(如泵)等进行。许多实施方案中，IFN-γ是通过皮下注射施用的。
IFN-α和病毒唑
病毒唑，1-β-D-呋喃核糖基-1H-1，2，4-三唑-3-氨甲酰，由ICN制药有限公司(Costa Mesa，加利福尼亚)提供。该药记载于第11版默克索引(Merck Index)，化合物第8199号。该药的制造与配方描述于美国专利4,211,771。本发明也考虑到施用病毒唑的衍生物(见美国专利6,277,830)。病毒唑可以用胶囊或片剂的形式口服施用，或以与IFN-α相同或不同的施用形式或以与IFN-α相同或不同的途径施用。当然，这两种药剂的其他施用型式也可加以考虑，如通过鼻喷雾、透皮、静脉内，通过栓剂、缓释剂型等。只要释放出合适的剂量，不破坏活性成份，任何施用形式都会起作用。
病毒唑通常每日的施用量从约30mg到约60mg、从约60mg到约125mg、从约125mg到约200mg、从约200mg到约300mg、从约300mg到约400mg、从约400mg到约1200mg、从约600mg到约1000mg或从约700mg到约900mg。
在一些实施例中，在IFN-α治疗的全过程中都施用病毒唑。在其它实施方案中，病毒唑不太在IFN-α治疗的全过程中施用，例如仅在IFN-α治疗的第一阶段施用，仅在IFN-α治疗的第二阶段施用，或在IFN-α治疗方案的其它阶段施用。
抗病毒剂
可用本发明的方法输送任何种类的抗病毒剂。适合用于本发明方法的抗病毒剂包括但不限于IFN-α、IFN-γ和病毒唑。
干扰素-α
任何已知的IFN-α都可用于本发明。术语“干扰素-α”在这里是指可抑制病毒复制和细胞增殖以及调节免疫应答的相关多肽家族。术语“IFN-α”包括天然产生的IFN-α；合成的IFN-α；衍生的IFN-α(如PEG化的IFN-α，糖基化的IFN-α等)以及天然产生的IFN-α或合成的IFN-α的类似物；实质上任何IFN-α都具有如天然产生的IFN-α那样的抗病毒特性。
合适的α干扰素包括但不限于天然产生的IFN-α(包括但不限于天然产生的IFN-α2a、IFN-α2b)；重组干扰素-α2b，如Schering公司(Kenilworth，N.J.)的IntronA干扰素；重组干扰素-α2a，如Hoffmann-La Roche公司(Nutley，N.J.)的Roferon干扰素；重组干扰素-α2c，如BoehringerIngelheim制药有限公司(Ridgefield，Conn)的Beroforalpha 2干扰素；干扰素α-n1，一种天然α干扰素的提纯混合物，如日本Sumitomo公司的Sumiferon；如英国Glaxo-Wellcome Ltd.，London的Wellferon干扰素α-n1(INS)；干扰素α-n3，一种天然α干扰素的混合物，由Interferon Science制造和Purdue Frederick公司(Norwalk，Conn)提供，商品名为Alferon。
术语“IFN-α”还包括共有序列IFN-α。共有序列干扰素-α(也称为“CIFN”和“IFN-con”)包括但不限于如美国专利4,897,471和4,695,623公开的以氨基酸序列命名的IFN-con1、IFN-con2、IFN-con3；以及通过检测天然产生的干扰素α的共有序列确定的共有序列干扰素(如Infergen，Amgen，ThousandOaks，加利福尼亚)。编码IFN-con的DNA序列可按照上述专利或其他标准方法的描述进行合成。CIFN的使用特别引人关注。
术语“IFN-α”还包括经过衍生(如经过化学修饰)以改变某些性质如血清半衰期的IFN-α的衍生物。因此，术语“IFN-α”包括糖基化的IFN-α；用聚乙二醇衍生的IFN-α(“PEG化的IFN-α”)等等。PEG化的干扰素-α及其制备方法描述在美国专利5,382,657；5,981,709；5,824,784；5,985,265和5,951,974。PEG化的IFN-α包括PEG与上述任何IFN-α分子的结合物，包括但不限于结合PEG的干扰素-α2a(Roferon，Hoffmann-La Roche，Nutley，新泽西)，干扰素α2b(Intron，Schering-Plough，Madison，新泽西)，干扰素-α2c(Berofor Alpha，Boehringer Ingelheim，Ingelheim，德国)；以及通过检测天然产生的干扰素α的共有序列确定的共有序列干扰素(Infergen，Amgen，Thousand Oaks，加利福尼亚)。
干扰素-γ
可从公共数据库，如Genbank，杂志出版物等得到编码IFN-γ多肽的核酸序列。虽然对各种哺乳动物的IFN-γ感兴趣，但对于治疗人体疾病，一般使用人蛋白。人IFN-γ编码序列可在Genbank中找到，登录号为X13274；V00543和NM_000619。在Genbank中可找到相应的基因组序列，登录号J00219；M37265和V00536。参见，例如，Gray等(1982)Nature 295：501(Genbank X13274)和Rinderknecht等(1984)J.B.C.259：6790。
IFN-γ1b(Actimmune；人干扰素)是140个氨基酸的单链多肽。它在大肠杆菌中重组制备，且是未糖基化的。Rinderknecht等(1984)J.Biol.Chem.259：6790-6797。
用于本发明方法的IFN-γ可为任何天然的IFN-γ、重组IFN-γ及其衍生物，只要它们具有IFN-γ活性，特别是人IFN-γ活性。如本技术领域所知，人IFN-γ显示了干扰素特性的抗病毒和抗增殖性质，以及许多其它免疫调节活性。虽然IFN-γ基于上述提供的序列，但其蛋白质的产生和蛋白酶解加工可形成其加工变体。由Gray等(同上)提供的未加工的序列由166个氨基酸(aa)构成。虽然在大肠杆菌中产生的重组IFN-γ最初被认为有146个氨基酸(在氨基酸20开始)，但后来发现天然的人IFN-γ在残基23后切割，产生143氨基酸的蛋白质，或144氨基酸(若如细菌表达所需存在末端的甲硫氨酸)。在纯化过程中，成熟蛋白质在残基162(参见Gray等序列)后的C末端处再切割，得到139个氨基酸的蛋白质或140个氨基酸的蛋白质(若起始的甲硫氨酸存在，若需要细菌表达)。N-末端的甲硫氨酸是由mRNA翻译的“起始”信号AUG编码的人工制品，AUG在大肠杆菌表达的具体情况下不会被加工除去。在其它的微生物系统或真核表达系统中，可去除甲硫氨酸。
就用于本发明的方法而言，可使用任何天然的IFN-γ肽、它们的修饰物和变体，或一种或多种肽的组合。感兴趣的IFN-γ肽包括片段，并可在相对于全序列的羧基末端进行各种截断。只要氨基酸24-约149(从未加工的多肽残基开始计数)存在，这类片段就继续显示人γ干扰素的特性。在氨基酸155后可用外来的序列代替氨基酸序列而不会丧失活性。参见，例如美国专利号5,690,925，在此引入供参考。天然IFN-γ部分包括各种从氨基酸残基24-150；24-151；24-152；24-153；24-155和24-157扩展出来的分子。任何这些变体，和本领域已知且具有IFN-γ活性的其它变体可用于本发明的方法。
IFN-γ多肽序列可用本领域已知的各种方法进行改变，以在序列中产生目标性的改变。变体多肽通常与这里提供的序列基本上相似，即至少一个氨基酸不同，或可能至少两个氨基酸不同，但不会超过约10个氨基酸不同。序列改变可以是取代、插入或缺失。系统地引入丙氨酸或其它残基的扫描突变可用来测定关键的氨基酸。感兴趣的特定氨基酸替代包括保守和非保守的改变。保守氨基酸替代典型地包括下列基团内的取代：(甘氨酸，丙氨酸)；(缬氨酸，异亮氨酸，亮氨酸)；(天冬氨酸，谷氨酸)；(天冬酰胺，谷氨酰胺)；(丝氨酸，苏氨酸)；(赖氨酸，精氨酸)或(苯丙氨酸，酪氨酸)。
可以或不能改变基本氨基酸序列的感兴趣的修饰包括多肽的化学衍生化，如乙酰化或羧基化；引入或除去糖基化位点的氨基酸序列的改变；使蛋白质对PEG化敏感的氨基酸序列的改变等等。还包括糖基化修饰，如通过在其合成和加工过程中或进一步加工步骤中修饰多肽的糖基化方式进行的修饰，例如，通过将多肽暴露于影响糖基化的酶，如哺乳动物糖基化酶或去糖基化的酶。也包含具有磷酸化氨基酸残基的序列，如磷酸酪氨酸、磷酸丝氨酸或磷酸苏氨酸。
包括在本发明中是业已用普通化学技术修饰的多肽，以改进它们对蛋白酶解降解的耐受性，使溶解度性质最优化，或使它们更适合作为治疗剂。例如，可环化肽的骨架以增加稳定性(参见Friedler等(2000)J.Biol.Chem.275：23783-23789)。可使用的类似物包括非天然产生的L-氨基酸残基，如D-氨基酸或非天然产生的合成氨基酸。蛋白质可被PEG化以增加稳定性。
使用本领域已知的常规方法，通过重组方法体外合成制备多肽，或从诱导的或天然产生蛋白质的细胞中分离得到多肽。具体的序列和制备方法可由其方便性、经济性、所需的纯度等来决定。如果需要，在合成期间或表达期间可向多肽中引入各种基团，这可使其与其它分子或表面连接。这样，半胱氨酸可用来制备与金属离子络合物连接的硫醚、组氨酸，用来形成酰胺或酯的羧基，用来形成酰胺的氨基等等。
也可根据常规的重组体合成方法来分离和纯化多肽。可从表达宿主中制备裂解物，用HPLC、排阻层析、凝胶电泳、亲和层析或其它纯化技术来纯化裂解物。通常，使用的组合物包含至少20％重量的所需产品，更通常的是至少约75％重量，优选的是至少95％重量的所需产品，对于治疗用组合物，相对于产品制备和纯化方法中产生的污染物来说，通常包含至少约99.5％重量的所需产品。通常百分数是根据总蛋白。
病毒唑
病毒唑，1-β-D-呋喃核糖基-1H-1，2，4-三唑-3-氨甲酰由ICN制药有限公司(Costa Mesa，加利福尼亚)提供。该药记载于第11版默克索引(Merck Index)，化合物第8199号。该药的制造与配方描述于美国专利4,211,771。本发明也考虑到施用病毒唑的衍生物(见美国专利号6,277,830)。
肝脏寻靶系统
可采用任何已知的寻靶方法使这里所述的抗病毒剂对肝脏寻靶。那些精通此领域的技术人员知道许多化合物被证实为耙向肝细胞的化合物。这种肝脏寻靶化合物包括但不限于脱唾液酸糖肽；与半乳糖或乳糖残基结合的碱性聚氨基酸；半乳糖化的白蛋白；脱唾液酸糖蛋白-聚-L-赖氨酸结合物；乳糖胺化的(lactosaminated)白蛋白；乳糖化的白蛋白-聚-L赖氨酸结合物；半乳糖化的聚-L-赖氨酸；半乳糖-PEG-聚-L赖氨酸结合物；乳糖-PEG-聚-L赖氨酸结合物；脱唾液酸胎球蛋白和乳糖化的白蛋白。
一些实施方案中，肝寻靶化合物与抗病毒剂直接结合。其它实施方案中，肝寻靶化合物与抗病毒剂间接结合，例如通过接头。再在其它实施方案中，肝寻靶化合物与送递载体如脂质体或微球体结合，形成肝细胞靶向送递载体，并用肝细胞寻向传递载体输送抗病毒剂。
术语“对肝脏寻靶”和“肝细胞靶向的”是指抗病毒剂对肝细胞的寻靶，这样，施用给受治疗者的抗病毒剂有至少约25％、至少约30％、至少约35％、至少约40％、至少约45％、至少约50％、至少约55％、至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、或至少约90％或更多可通过肝门进入肝脏并与肝细胞结合(例如被肝细胞摄取)。
给药系统
任何已知的能够提供抗病毒剂的多阶段血清浓度曲线的传递系统都可用于本发明。此外，可采用任何已知传递系统的组合。
所述给药系统可用是任何装置，包括可植入的装置，例如，所述装置可基于机械输注泵、电机械输注泵、缓释型制剂、微球体。实际上，可提供上述控制释放(至少两阶段释放)的任何给药系统适合用于本发明。一些实施方案中，所述给药系统是缓释型制剂。其它实施方案中，所述给药系统是连续输送装置(如可注射系统、泵等)。再在其它实施方案中，所述给药系统是注射装置(如注射器和针头)和连续输送装置的组合。术语“连续输送装置”在这里可与“控制输送装置”互换使用，包括与导管、注射装置等组合的连续(例如，控制)输送装置(例如泵)，已知此领域中有很多这样的装置。
一些实施方案中，所述输送装置是缓释型制剂系统。缓释型制剂系统包括包埋有IFN-α或其它抗病毒剂的基体。该基体是聚合物或非聚合物。
某些实施方案中，给药系统包括缓释型制剂。
一些实施方案中，所述缓释型制剂包括聚合基体。例如，可使用来源于具有可水解的酯键的共聚或均聚的聚酯的聚合基体。此领域已知其中许多是生物可降解并产生无毒或低毒性的降解产物。这种聚合物的非限制性实施例有聚乙醇酸(PGA)和聚乳酸(PLA)、聚(DL-乳酸-共-乙醇酸)(DL PLGA)、聚(D-乳酸-共-乙醇酸)(D PLGA)以及聚(L-乳酸-共-乙醇酸)(L PLGA)。在聚(乳酸-共-乙醇酸)中乳酸和乙醇酸聚合物的比例在100∶0(即纯的聚交酯)-50∶50的范围内。其它有用的生物可降解或生物可侵蚀的聚合物包括但不限于聚(ε-己内酯)、聚(ε-己内酯-共-乳酸)、聚(ε-己内酰胺-共-乙醇酸)、聚(β-羟基丁酸)、聚(烷基-2-氰基丙烯酸酯)(poly-(alkyl-2-cyanoacrylate))、水凝胶如聚(羟乙基甲基丙烯酸酯)、聚酰胺、聚(氨基酸)(即L-亮氨酸、谷氨酸、L-天冬氨酸等)、聚(酯尿素)、聚(2-羟乙基DL-天冬酰胺)(poly(2-hydroxyethyl DL-aspartamide))、聚缩醛聚合物、聚原酸酯、聚碳酸酯、聚马来酰亚胺、多糖及其共聚物。
一些实施方案中，所述给药系统是乳酸-共-乙醇酸系统。这种系统描述在例如美国专利号6,183,781和5,654,008中。
其中一些实施方案中，所述缓释型制剂是高粘度液体，如非聚合、非水溶性液体载体物质，如乙酰蔗糖异丁酸酯(SAIB)或其它化合物，如美国专利号5,968,542和5,747,058中所述的化合物。例如可采用SABERTM系统(SouthernBiosystems有限公司)。
缓释型制剂基体中可包含释放修饰剂和/或添加剂。
术语“释放修饰剂”在这里是指一种当将其掺入聚合物/药物基体时可修饰基体的药物释放特性的物质。例如，释放修饰剂可降低或增加药物从基体释放的速度。一组释放控制剂包括含有金属的盐。
一类添加剂包括生物可降解的聚合物和低聚物。聚合物可用来改变要被送递的物质的释放特性、增加组合物的完整性或修饰组合物的特性。合适的生物可降解的聚合物和低聚物的非限制性例子包括：聚(交酯)、聚(交酯-共乙交酯)、聚(乙交酯)、聚(己内酯)、聚胺、聚酐、聚氨基酸、聚原酸酯、聚氰基丙烯酸酯、聚(膦嗪)、聚(磷酸酯)、聚酯酰胺、聚二噁酮、聚缩醛、聚缩酮、聚碳酸酯、聚原碳酸酯、可降解的聚氨酯、聚羟基丁酸酯、聚羟基戊酸酯、聚亚烷基草酸酯、聚乙烷基琥珀酸酯、聚(马来酸)、几丁质、脱乙酰壳多糖和上述物质的共聚物、三元聚合物、氧化纤维素、或组合物或混合物。
聚(α-羟酸)的例子包括聚(乙醇酸)、聚(DL-乳酸)和聚(L-乳酸)以及它们的共聚物。聚内酯的例子包括聚(ε-己内酯)、聚(δ-戊内酯)和聚(γ-丁内酯)。
其它添加剂包括生物不可降解的聚合物。可用作添加剂的不可侵蚀的聚合物的非限制性例子包括：聚丙烯酸酯、乙烯-乙酸乙烯酯聚合物、纤维素和纤维素衍生物、酰基取代的醋酸纤维素及其衍生物、不可侵蚀的聚氨酯、聚苯乙烯、聚氯乙烯、聚氟乙烯、聚(乙烯咪唑)、氯磺化聚烯烃和聚氧乙烷。
再一类可用于本发明组合物的添加剂是天然和合成的油和脂肪。来自动物或坚果植物种子的油类通常包括脂肪酸的甘油酯，主要是油酸、棕榈酸、硬脂酸和亚麻酸。
其它添加剂包括膜特性修饰剂和释放控制剂。膜特性修饰剂的例子包括增塑剂，例如三乙基柠檬酸盐、三醋精、聚乙二醇、环氧乙烷等。释放控制剂的例子包括无机碱(如氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾等)、有机碱(如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、利度卡因、丁卡因等)、无机酸(如硫酸铵、氯化铵等)、有机酸(如柠檬酸、乳酸、乙醇酸、抗坏血酸等)和固态可溶物，它在释放时可在包衣层中产生孔(如氯化钠晶体、葡萄糖、甘露醇、蔗糖等)。
一些实施方案中，给药系统是基于聚乙二醇和聚(乳酸-共乙醇酸)的含水可注射热敏凝胶，如美国专利号6,201,071；6,117,949和6,004,573中所述。例如，描述了包含水溶性、生物可降解的ABA-或BAB-型三嵌段共聚物的缓释型制剂，它是用大量疏水的A聚合物嵌段和少量亲水的PEG B聚合物嵌段制成的，其中A聚合物嵌段由生物可降解的聚酯构成，B聚合物嵌段的总平均分子量在2000和4900之间，该剂型具有反的热凝胶化特性。这种物质在体内形成凝胶缓释型制剂，药物可从中以控制速度释放。
一些实施方案中，所述给药系统是基于聚氨基酸的系统，如美国专利6,071,538、6,245,359、6,221,367和6,099,856所述。
其它实施方案中，所述给药系统是微球体。微球体在文献中有详细描述。
其它实施方案中，所述给药系统是泵，例如可植入的泵，尤其是可调节的植入泵。特别关注可调节泵的使用，尤其是在输送位置可调节的泵(例如在患者体外进行外部调节)。这种泵包括可编程的泵，它能在较长时间(例如24-72小时)提供高浓度的IFN-α或其它抗病毒剂，并使AUC血清IFN-α浓度达到治疗效果。
一些实施方案中，所述传递系统是Medipad装置(Elan国际药物有限公司)。
机械或电机械输注泵也适合用于本发明。例如，这种装置的例子包括美国专利4,692,147；4,360,019；4,487,603；4,360,019；4,725,852等所述的那些。通常，本发明的给药方法可用任何可再装满的泵系统实现。泵随时间提供一致的、可控制的释放。
在优选的实施方案中，所述给药系统是至少部分可植入的装置。可用此领域已知的方法将可植入装置植入任何合适的植入位置。植入位置是在受试者体内引入和放置药物输送装置的位置。植入位置包括但不限于真皮下、皮下、肌肉内或受试者体内其它合适的位置。因为便于植入和取出药物输送装置，皮下植入位置通常是优选的。
如上所述，可使用传递系统的组合。一个非限制性的实施例是，将具有最初药物释放或爆发特性的基于PLGA的系统与不具有爆发性药物释放的基于乙酰蔗糖异丁酸酯的系统相结合，以获得本发明所述的所需的曲线。另一个非限制性的例子是，负荷剂量(loading dose)如推注再加上零级通量作为实现的或获得的传递系统。可有这些传递系统的输递分子可以是α干扰素或PEG衍生的α干扰素。
根据给药系统，IFN-α可以口服、皮下、肌肉内、肠外或通过其它途径(如经皮、皮肤等)施用。当通过这些途径施用时可能会出现药物的爆发，但口服给药时药物进入门脉循环，因此可将药物有效靶向所需器官，即肝脏。
许多实施方案中，IFN-α是皮下输递的。
IFN-α和药学上可接受的赋形剂一起作为制剂施用给个体。本技术领域已知各种药学上可接受的赋形剂，在此不需要详细讨论。药学上可接受的赋形剂在各种出版物(如A.Gennaro(2000)的《雷明顿制药科学与实践》(Remington：TheScience and Practice of Pharmacy)，第20版，Lippincott，Williams，&Wilkins；《药物剂型和给药系统》(Pharmaceutical Dosage Forms and Drug DeliverySystems)(1999)H.C.Ansel等编，第7版，Lippincott，Williams，&Wilkins；以及《药物赋形剂手册》(Handbook of Pharmaceutical Excipients)(2000)A.H.Kibbe等编辑，第3版，Amer.Pharmaceutical Assoc.)中业已作了大量的描述。
IFN-α可与一种或多种其它治疗剂一起施用(即以单独制剂同时施用；以相同制剂同时施用；以单独制剂在约48小时、约36小时、约24小时、约16小时、约12小时、约8小时、约4小时、约2小时、约1小时、约30分钟或约15分钟或更少时间内施用)。
在其它实施方案中，用IFN-α和病毒唑治疗患者。病毒唑，1-β-D-呋喃核糖基-1H-1，2，4-三唑-3-氨甲酰，由ICN制药有限公司(Costa Mesa，加利福尼亚)提供。该药记载于第11版默克索引(Merck Index)，化合物第8199号。该药的制造与配方描述于美国专利4,211,771。病毒唑可以用胶囊或片剂的形式结合施用IFN-α口服施用。当然，这两种药剂的其他施用形式也可加以考虑，如通过鼻喷雾、透皮、静脉内，通过栓剂、缓释剂型等。只要释放出合适的剂量，不破坏活性成份，任何施用形式都会起作用。如果施用，病毒唑通常每日的施用量从约400mg到约1200mg、从约600mg到约1000mg或从约700mg到约900mg。
一些实施方案中，联合疗法包括IFN-α和IFN-γ。其中一些实施方案中，IFN-α和IFN-γ是在同一制剂中同时施用的。其它实施方案中，IFN-α和IFN-γ是单独施用的，例如以单独制剂的形式。其中一些实施方案中，IFN-α和IFN-γ是以单独制剂同时施用的。其它实施方案中，IFN-α和IFN-γ是以单独制剂相隔约5-15秒、约15-30秒、约30-60秒、约1-5分钟、约5-15分钟、约15-30分钟、约30-60分钟、约1-2小时、约2-6小时、约6-12小时、约12-24小时或约24-48小时内施用的。
确定治疗的效果
可通过测量病毒负荷，或通过测量与HCV感染有关的参数，包括但不限于肝纤维化来确定一种方法是否有效治疗肝炎病毒感染，尤其是HCV感染。
病毒负荷可通过测量血清中的病毒效价或水平来测定。这些方法包括但不限于定量聚合酶链式反应(PCR)和分支DNA(bDNA)试验。例如，已经建立了测量HCVRNA的病毒负荷(效价)的定量测定方法。这种测定方法许多可通过商业获得，包括定量反转录PCR(RT-PCR)(Amplicor HCV MonitorTM，Roche Molecular Systems，新泽西)；以及分支DNA(脱氧核糖核酸)信号扩增测定(QuantiplexTM HCV RNAAssay(bDNA)，Chiron公司，Emeryville，加利福尼亚)。例如参见Gretch等(1995)Ann.Intern.Med.123：321-329。
如上所述，一种方法是否有效治疗肝炎病毒感染，例如HCV感染，可通过测量与肝炎病毒感染有关的参数如肝纤维化来确定。肝纤维化的减少通过分析肝活检样品来确定。肝活检的分析包括评估两个主要部分：通过“分级”评估坏死炎症来测定疾病的严重程度和进展中的疾病活动性，通过“分期”来评估纤维化和实质或血管重塑的损伤以反应长期疾病的进展。参见，如Brunt(2000)Hepatol.31：241-246；和METAVIR(1994)Hepatology 20：15-20。基于肝活检的分析可给出评分。有许多标准化的评分系统，它们可定量评估纤维化的程度和严重性。这些评分系统包括METAVIR、Knodell、Scheuer、Ludwig和Ishak评分系统。
肝纤维化的血清标记也可作为本发明治疗方法的效果的指征进行测量。肝纤维化的血清标记物包括但不限于透明质酸盐、N-末端前胶原III肽、7S域的IV型胶原、C-末端前胶原I肽和层粘连蛋白。肝纤维化的另外生物化学标记物包括α-2-巨球蛋白、肝珠蛋白、γ球蛋白、载脂蛋白A和γ谷氨酰转肽酶。
一个非限制性的例子是用标准测定法测定血清丙氨酸转移酶(ALT)水平。通常，ALT水平小于约每毫升45国际单位被认为是正常的。一些实施方案中，IFNα的有效剂量是可将ALT水平有效降至约每毫升血清45IU以下的量。
治疗肝纤维化的方法
本发明提供了治疗肝纤维化的方法。所述方法包括施用上述抗病毒剂，其中个体中的病毒负荷被降低且肝纤维化被治疗。治疗肝纤维化包括降低肝纤维化发生风险；减轻与肝纤维化有关的症状；以及增加肝功能。
用这里所述的抗病毒剂治疗是否有效地降低肝纤维化可通过许多成熟的测量肝纤维化和肝功能的任何技术来确定。肝纤维化减少通过分析肝活检样品来决定。肝活检的分析包括评估两个主要部分：通过“分级”评估坏死炎症来测定疾病的严重程度和进展中的疾病活动性，通过“分期”来评估纤维化和实质或血管重塑的损伤以反应长期疾病的进展。参见，如Brunt(2000)Hepatol.31：241-246；和METAVIR(1994)Hepatology 20：15-20。基于肝活检的分析可给出评分。有许多标准化的评分系统，它们可定量评估纤维化的程度和严重性。这些评分系统包括METAVIR、Knodell、Scheuer、Ludwig和Ishak评分系统。
METAVIR评分系统基于肝活检的各种特征的分析，包括纤维化(门静脉纤维化、小叶中央性纤维化和肝硬化)；坏死(碎片状坏死和小叶坏死，嗜酸性收缩和气球样变性)；炎症(门静脉束炎症、门静脉淋巴聚集和门静脉炎症的分布)；胆管改变；和Knodell指数(门脉周性坏死、小叶坏死、门静脉炎症、纤维化和总体疾病活动性的评分)。METAVIR系统中每期的定义如下：0分，没有纤维化；1分，门静脉束的星状扩张但没有形成隔膜；2分，门静脉束扩张，稀有隔膜形成；3分，有许多隔膜，没有肝硬化；4分，肝硬化。
Knodell评分系统也称为肝炎活性指数，根据组织学特征分为4类：I.外周门静脉和/或桥接坏死；II.小叶内变性，局灶性坏死；III.门静脉炎症；和IV.纤维化。在Knodell分期系统中，评分如下：0分，没有纤维化；1分，轻度纤维化(纤维性门静脉扩张)；2分，中度纤维化；3分，严重纤维化(桥接纤维化)；4分，肝硬化。分数越高，肝组织损伤越严重。Knodell(1981)Hepatol.1：431。
Scheuer评分系统的评分如下：0分，没有纤维化；1分，扩大的、纤维化的门静脉束；2分；外周门静脉或门静脉-门静脉隔膜，但具有完整的结构；3分，纤维化，结构被扭曲，但没有明显的肝硬化；4分，可能或肯定的肝硬化。Scheuer(1991)J.Hepatol.13：372。
Ishak评分系统如Ishak(1995)J.Hepatol.22：696-699所述.0期，没有纤维化；1期，一些门静脉区域的纤维性扩张，有或没有短纤维隔膜；2期，大多数门静脉区域的纤维性扩张，有或没有短纤维隔膜；3期，大多数门静脉区域的纤维性扩张，偶有门静脉到门静脉(P-P)桥接；4期，门静脉区域的纤维性扩张，有明显的(P-P)桥接和门静脉到中心(P-C)桥接；5期，明显的(P-P和P-c)桥接，偶有小节结(不完全肝硬化)；6期，可能或肯定的肝硬化。抗纤维疗法的益处也可用Child-Pugh评分系统进行测定和评估，该评分系统包括一个多组成点系统，该系统基于血清胆红素水平异常，血清白蛋白水平异常，凝血酶原时间异常，腹水的存在和严重程度，和脑病的存在和严重程度。根据这些参数的异常性的存在和严重程度，患者可分为三类：A、B或C，其疾病严重程度递增。
在一些实施方案中，治疗有效量的抗病毒剂是基于治疗前和治疗后肝活检的纤维化期中有效改变一个单位或多个单位的抗病毒剂的量。在特定的实施方案中，治疗有效量的IFN-α和IFN-γ能减少肝纤维化至少一个单位(METAVIR、Knodell、Scheuer、Ludwig或Ishak评分系统中的单位)。
次级的或非直接的肝功能指数也可用来评价治疗的效果。根据胶原的特定染色和/或肝纤维化的血清标记对肝脏纤维化定量程度的形态计量计算机化的半自动评估也可作为患者治疗方法的效果的指征进行测定。肝功能的次级指数包括，但不限于血清转氨酶水平、凝血酶原时间、胆红素水平、血小板计数、门静脉压、白蛋白水平和Child-Pugh评分的评估。与未治疗的个体或用安慰剂治疗的个体的肝功能指数相比，有效量的抗病毒剂是有效增加肝功能指数至少约10％，至少约20％，至少约25％，至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％，至少约70％，至少约75％，或至少约80％或更多的量。本领域的熟练的技术人员可使用标准的分析方法(许多都可市售，且在临床上常规使用)容易地测得这类肝功能指数。
肝纤维化的血清标记也可作为本发明治疗方法的效果的指征进行测量。肝纤维化的血清标记物包括，但不限于透明质酸盐、N-末端前胶原III肽、7S域的IV型胶原、C-末端前胶原I肽和层粘连蛋白。肝纤维化的另外生物化学标记物包括α-2-巨球蛋白、肝珠蛋白、γ球蛋白、载脂蛋白A和γ谷氨酰转肽酶。
与未治疗个体或用安慰剂治疗的个体中的标记物的水平相比，抗病毒剂的治疗有效量是有效降低肝纤维化的标记物的血清水平至少约10％，至少约20％，至少约25％，至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％，至少约70％，至少约75％，或至少约80％或更多的量。本领域熟练的技术人员可使用标准的分析方法(许多都可市售，且在临床上常规使用)容易地测得这类肝纤维化的血清标记物。测量血清标记物的方法包括基于免疫的方法，如酶联免疫吸附测定(ELISA)、放射免疫分析等，使用对给定的血清标记物具有特异性的抗体。
也可使用功能性肝储备的定量试验来评估用抗病毒剂治疗的效果。这些试验包括：靛蓝清除(ICG)、半乳糖消除能力(GEC)、氨基比林呼吸试验(ABT)、安替比林清除试验、单乙基甘氨酰二甲代苯胺(MEG-X)清除试验和咖啡因清除试验。
本文使用的“与肝硬化有关的并发症”指失代偿性肝病的后遗症，即它们在肝纤维化后发生，并是肝纤维化发展的结果，它们包括，但不限于形成腹水、静脉曲张出血、门静脉高血压、黄疸、进行性肝功能不全、脑病、肝细胞癌、肝衰竭需要肝移植和与肝有关的死亡率。
抗病毒剂的治疗有效量是与未治疗个体或用安慰剂治疗的个体相比，能有效减少与肝硬化有关的疾病(如个体形成这些疾病的可能性)的发病率至少约10％，至少约20％，至少约25％，至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％，至少约70％，至少约75％，或至少约80％或更多的量。
用抗病毒剂治疗是否有效地减少与肝硬化有关的疾病的发病率可由该领域熟练的技术人员容易地测定。
肝纤维化的减少能增加肝功能。因此，本发明提供了提高肝功能的方法，通常包括给予治疗有效量的抗病毒剂。肝功能包括，但不限于合成蛋白质，如血清蛋白(如白蛋白，凝血因子，碱性磷酸酶，转氨酶(如丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶)，5’-核苷酶，γ-谷氨酰胺酰基转肽酶等)，合成胆红素，合成胆固醇和合成胆酸；肝的代谢功能，包括，但不限于碳水化合物代谢，氨基酸和氨代谢，激素代谢和脂质代谢；外源性药物的解毒；血流动力功能，包括内脏和门静脉的血液动力学；等等。
肝功能是否增加可由本领域熟练的技术人员使用成熟的肝功能试验容易地确定。这样，如白蛋白，碱性磷酸酶，丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、胆红素等肝功能标记物的合成可通过用标准的免疫学和酶分析测量血清中这些标记物的水平进行评估。用标准方法通过门静脉楔压和/或耐受力可测量内脏循环和门静脉的血流动力学。代谢功能可通过测量血清中氨水平进行测定。
肝脏通常分泌的血清蛋白是否在正常的范围内可通过使用标准的免疫学和酶分析方法测量这类蛋白质的水平来决定。本领域熟练的技术人员知道这类血清蛋白的正常范围。下列是非限定性实例。丙氨酸转氨酶的正常范围是约7-56单体/升血清。天冬氨酸转氨酶的正常范围是约5-40单位/升血清。胆红素用标准分析测量。正常的胆红素水平通常低于约1.2mg/dL。血清白蛋白水平用标准分析测量。血清白蛋白的正常水平是约35-55g/L。用标准分析测定凝血酶原时间的延长。正常的凝血酶原时间比对照长约不足4秒。
抗病毒剂的治疗有效量是能有效提高肝功能至少约10％，至少约20％，至少约30％，至少约40％，至少约50％，至少约60％，至少约70％，至少约80％或更多的量。例如，治疗有效量的抗病毒剂是能将肝功能的血清标记物的升高水平减少至少约10％，至少约20％，至少约30％，至少约40％，至少约50％，至少约60％，至少约70％，至少约80％或更多的量，或将肝功能的血清标记物水平降低到正常范围内。治疗有效量的IFNγ也是能将肝功能的血清标记物的降低水平增加至少约10％，至少约20％，至少约30％，至少约40％，至少约50％，至少约60％，至少约70％，至少约80％或更多的量，或将肝功能的血清标记物水平提高到正常范围内。
降低肝癌风险的方法
本发明提供了降低个体肝癌发生风险的方法。所述方法包括施用上述抗病毒剂，其中个体的病毒负荷被降低，同时其中个体发生肝癌的风险被降低。抗病毒剂的治疗有效量是能有效降低肝癌发生风险至少约10％、至少约20％、至少约25％、至少约30％、至少约35％、至少约40％、至少约45％、至少约50％、至少约55％、至少约60％、至少约65％、至少约70％或更多的量。例如，可用研究组确定肝癌发生风险是否降低，其中，用本发明方法治疗的个体降低了肝癌发生率。
适于治疗的对象
已被临床诊断为肝炎病毒，尤其是HCV感染的个体是适于本发明方法治疗的。受HCV感染的个体被检出血液中有HCV RNA和/或血清中有抗HCV抗体。这些个体包括天然个体(例如以前未对HCV进行治疗的个体)和以前对HCV治疗失败的个体(“治疗失败”患者)。治疗失败患者包括无反应者(指治疗期间HCV滴度居高不下的病人)和复发病人(指治疗初期HCV滴度下降，但随后在治疗过程中上升的病人)。在特别关注的实施方案中，个体HCV滴度是每毫升血清至少约105、至少约5×105、至少约106个HCV基因组拷贝。
实施例
列出了以下实施例为本领域的一般技术人员提供如何制造和使用本发明的完整揭示和描述，这些实施例不是要限制发明者认为是其发明的本发明的范围，也不是说以下实施例是所有或唯一使用的实施例。发明者尽量确保所用数值(如量、温度等)的准确性，但一些试验误差和偏差是可以理解的。除非另有说明，份是以重量表示的份，分子量是重均分子量，温度是摄氏度，压力是或接近大气压。
实施例1：
用IFN-α治疗HCV感染的个体。典型患者每毫升血清中约105-107个HCV基因组拷贝。IFN-α以给药系统输送，其中包含63-189μg IFN-α供1周释放，或126-378μg IFN-α供2周释放。
在一个治疗方案中，IFN-α通过皮下泵施用以便以40μg/天的零级输入水平皮下输注药物。
在不同的时间点，例如0小时、6小时、12小时、24小时、48小时、4天、7天、15天，测量血清中IFN-α浓度以及病毒滴度。结果显示在图6中。治疗结束后每个月进行一次类似的测量，持续6个月。
实施例2
IFN-α以每0.2-0.5ml 200-500mg的范围皮下注射施用。
典型的药物负载如下：0.1％w/w的药物负载提供10-50％的“爆发”或荷载剂量。因此，0.1％(0.1g/100g)的200mg剂量为200μg，在12-48小时内释放5-50％即10-100μg(第一级释放)，在10-16天达到以零级方式释放的剂量平衡(例如每天约5-10μg)。
在其它剂量方案中，药物荷载被调整并被“爆发控制”以提供经过调整的释放曲线：0.5％(0.5g/100g-0.005)的200mg剂量的药物荷载将提供1mg剂量，因此用适当控制爆发(5-20％)释放曲线多达1个月和每日维持释放曲线多达20μg/天，如在零级释放方式中所需的那样。
虽然本发明参照其特定的实施方案进行了描述，本领域的熟练技术人员应当理解，在不背离本发明的真实精神和范围的情况下可进行各种改变和替代等价物。另外，可进行许多修饰以使具体的情况、材料、组成、方法、加工步骤或步骤适应本发明的目的、精神和范围。所有这类修饰都在本发明的权利要求范围内。

Claims (13)

1.一种在个体中治疗丙肝病毒感染的方法，其特征在于，所述方法包括：
施用含有干扰素-α(IFN-α)的组合物，IFN-α的量可有效使IFN-α的第一血清浓度在约24-48小时的第一时段至少约为最大耐受剂量(MTD)的80％，继以IFN-α的第二浓度约为MTD的50％或更低，所述第二浓度维持至少7天的第二时段。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，获得了持续病毒应答。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括在施用IFN-α之前施用IFN-γ约1-14天。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，IFN-α以缓释型制剂施用。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，IFN-α通过连续输注施用。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述连续输注施用通过泵实现。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，IFN-α通过单次皮下注射继以泵的连续输注施用。
8.一种在个体中治疗丙肝病毒感染的方法，其特征在于，所述方法包括：
在一种包括第一阶段和第二阶段的给药方案中施用IFN-α，其中，在第一阶段，IFN-α的第一血清浓度在约24小时的第一时段内至少约为最高耐受剂量(MTD)的80％，在第二阶段，在第二阶段期间任何24小时内测得的最高IFN-α血清浓度与最低IFN-α血清浓度的比值小于3，其中，第二阶段期间IFN-α的最高浓度约为MTD的50％或更低。
9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，在第二阶段期间任何24小时内测得的最高IFN-α血清浓度与最低血清IFN-α浓度的比值约为1。
10.一种在个体中治疗丙肝病毒感染的方法，其特征在于，所述方法包括：
施用含有共有序列干扰素-α(CIFN)的组合物，CIFN的量可有效使CIFN的第一血清浓度在约24-48小时的第一时段至少约为最大耐受剂量(MTD)的80％，继以CIFN的第二浓度约为MTD的50％或更低，所述第二浓度维持至少7天的第二时段。
11.一种在个体中治疗丙肝病毒感染的方法，其特征在于，所述方法包括：
在一种包括第一阶段和第二阶段的给药方案中施用共有序列干扰素-α(CIFN)，其中，在第一阶段，CIFN的第一血清浓度在约24小时的第一时段内至少约为最高耐受剂量(MTD)的80％，在第二阶段，在第二阶段期间任何24小时内测得的最高CIFN血清浓度与最低血清CIFN浓度的比值小于3，其中，第二阶段期间IFN-α的最高浓度约为MTD的50％或更低。
12.一种在个体中治疗丙肝病毒感染的方法，其特征在于，所述方法包括：
在一种包括第一阶段和第二阶段的给药方案中施用IFN-α，其中，在第一阶段，在约24小时的第一时段内可获得IFN-α的第一血清浓度C1max，在第二阶段，获得的Csus约为C1max的50％或更低，其中，曲线面积由作为时间函数的IFN-α血清浓度定义，在第二阶段的任何24小时期间不大于第2天-第3天的曲线面积如图2所示。
13.一种在个体中治疗丙肝病毒感染的方法，其特征在于，所述方法包括：
在一种包括第一阶段和第二阶段的给药方案中施用共有序列IFN-α(CIFN)，其中，在第一阶段，在约24小时的第一时段内可获得CIFN的第一血清浓度值C1max，在第二阶段，获得的Csus约为C1max的50％或更低，其中，曲线面积由作为时间函数的CIFN血清浓度定义，在第二阶段的任何24小时期间不大于第2天-第3天的曲线面积如图2所示。
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