CN1733149A - 一种抗炎抗病毒药物组合物及其制备工艺 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种抗炎抗病毒的中药及其制备工艺。该中药是由下列重量份的原料药制备而成：夏枯草9～20份，紫花地丁15～30份，鱼腥草15～25份。该制备工艺是按配方称取三味药材，通过水提、醇沉、纯化或浓缩，加适当辅料制备而成。该中药具有清热散火、抗炎、抗菌、抗病毒的功效，用于治疗上、下呼吸道感染具有良好的效果；该制备工艺简单，成本低。

Description

一种抗炎抗病毒药物组合物及其制备工艺

技术领域

本发明属于中药制药领域，涉及一种抗炎抗病毒药物组合物，本发明还涉及该药物组合物的制备工艺。

背景技术

夏枯草，为唇形科夏枯草属植物夏枯草的花序、果穗及全草。味苦辛，性寒。功能为清肝明目、散结消肿。主治头痛眩晕、目赤肿痛、瘰疬瘿瘤等病证。全草含三萜皂甙，其甙元是齐墩果酸，还含有游离的齐墩果酸、熊果酸、芸香甙、金丝桃甙、顺咖啡酸、反咖啡酸、鞣质、挥发油、少量生物碱及水溶性盐类(主要为氯化钾)。花穗中含飞燕草素和矢车菊素的花色甙、d-樟脑、d-小茴茵香酮等。经动物实验证实，本品具有一定的抗肿瘤作用，另外，本品煎剂对十多种细菌均有较强的抑制作用。

紫花地丁(Philippine Violet Herb)，别名箭头草、独行虎、羊角子、米布袋。性味：苦、辛、寒、无毒。紫花地丁全草含甙类、黄酮类、蜡、蜡酸(Cerotic acid)及不饱和酸等的酯类。主治治疔疮，痈肿，瘰疬，黄疸，痢疾，腹泻，目赤，喉痹，毒蛇咬伤。配蒲公英，清热解毒，散结消肿力量增强；配银花，解毒凉血，消肿散热之功增强。

鱼腥草，性味辛、微寒，归肺经，有清热解毒、消肿、利尿的功效。配芦根、桔梗、瓜萎等可治肺痈(肺脓疡)；配黄芩、贝母等可疗肺热咳嗽；配野菊花、蒲公英、金银花等可治热毒疮疡；配车前子、白茅根、海金砂等可治湿热淋症；配黄连、白头翁、白芍、黄芩等可治湿热痢疾，也可用鲜品外敷用以治疗热毒疮疡症。此外，药理研究还表明，本品具有较好的抑菌、提高免疫力、抗炎、镇痛、止血、镇咳、利尿等作用，甚至能预防胃癌和肺癌。文献表明(王爱平王春华，鱼腥草注射液治疗急性上呼吸道感染32例疗效观察，中华医药杂志第3卷第6期)：鱼腥草注射液为新鲜鱼腥草蒸馏液，主要有效成分为癸酰乙醛、甲基正壬酮、月桂醛等挥发油(每1ml注射液相当于新鲜鱼腥草2g)。具有清热、解毒之功效，现代药理学研究表明，鱼腥草注射液有抗病毒、抗菌、抗炎镇痛、止咳及增强特异性及非特异性免疫(促进外周白细胞吞噬功能，免疫球蛋白形成，增强细胞免疫、体液免疫反应及天然杀伤细胞的活性，增强患者血及痰中溶菌酶活性及血清溶解素水平)的功能，是一种理想的标本兼治中药制剂。用于急性上呼吸道感染，经临床观察效果较好，临床可推广应用。

目前，临床上采用的抗炎抗病毒中药有很多种，但还未见有将夏枯草、紫花地丁、鱼腥草配伍用于抗炎抗病毒的中药组合物。

发明内容

本发明的目的是提供一种抗炎抗病毒的中药组合物。

本发明另一个目的是提供上述药物组合物的制备工艺。

本发明的技术方案是根据祖国医学的原理，夏枯草清火明目，散结消肿，鱼腥草清热解毒、消痈排脓，紫花地丁清热解毒、凉血消肿，三药合用，具有清热散火、抗炎、抗菌、抗病毒的功效，用于治疗上、下呼吸道感染具有良好的效果。

本发明的目的是通过下列措施来实现的：

一种抗炎抗病毒的中药，它是由下列重量份的原料药制备而成：

夏枯草9～20份，紫花地丁15～30份，鱼腥草15～25份。

所述的中药，它的药剂是任何一种药剂学上允许的剂型。

所述的中药，它的剂型是注射液、口服液、丸剂、片剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂、微囊剂或滴丸剂。

所述的中药的制备工艺，包含下列步骤：

a.水提：按配方称取三味药材，加水煎煮2～3次，每次1～2h，合并煎液，过滤，滤液浓缩至60℃热测相对密度为1.05～1.15；

b.醇沉：加乙醇使含醇量达60～80％，静置、冷藏24～72h，过滤，滤液回收乙醇；同法醇沉操作1～2次，得回收乙醇后的提取液；

c.将回收乙醇后的提取液纯化得预配液，加入药学上可接受的辅料，按常规工艺制成所需剂型，或者

d.取回收乙醇后的提取液浓缩成60～80℃热测相对密度为1.05～1.30的浸膏，加入药学上可接受的辅料，按常规工艺制成所需剂型。

所述的中药的制备工艺，步骤c中的纯化工艺为将提取液上中空纤维超滤柱超滤，取分子截留量小于10000的滤液，得预配液；或者将提取液上聚酰胺柱用60～95％的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，得预配液；或者将提取液加4％的明胶水溶液适量，静置，加乙醇使含醇量达60～80％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，得预配液。

中空纤维超滤柱是通过选用一定分子量大小的纤维膜，以达到去除大于该分子量的所有杂质，保留小于该分子量的有效成分。

本发明的有益效果：

一、实验试剂：

5％葡萄糖注射液，复方丹参注射液，维生素C注射液，生理盐水。

二、实验动物：

小鼠，大鼠，家兔。

三、实验方法及结果：

1、本注射液(按实施例1制备)抗炎作用

1.1对小鼠耳壳二甲苯致肿的影响：

取小鼠30只，健康，体重20±2g，雌雄兼用，随机分3组，每组10只，给药组尾静脉注射本注射液5.2ml/kg。阳性对照组尾静脉注射复方丹参注射液1.3ml/kg加维生素C注射液2.6ml/kg，空白对照组尾静脉注射5％葡萄糖注射液5.2ml/kg，给药5d。末次给药30min后，将二甲苯0.03m1均匀滴于右耳壳上，左耳壳滴等量的蒸馏水对照。40min后处死小鼠，用直径8mm的打孔器在双耳对称处取下耳片.用分析天平称重，左右两耳片重量差为肿胀度。结果见表1。

表1  本发明药物对小鼠耳壳肿胀的影响

组别	动物数(只)	鼠耳肿胀度(mg x±s)	肿胀抑制率(％)
				空白对照组阳性对照组给药组	101010	9.8±1.79.5±2.67.0±2.6* △	3.128.6

与空白对照组比，^*P＜0.05；与阳性对照组比较，△P＜0.01

1.2对由蛋清诱发大鼠足跖炎症的影响：

取大鼠30只，健康，体重140±10g，雌雄兼用。随机分3组，每组10只。给药组尾静脉注射本注射液3.6ml/kg；阳性对照组尾静脉注射复方丹参注射液0.9ml/kg加维生素C注射液1.8ml/kg，空白对照组尾静脉注射5％葡萄糖注射液3.6ml/kg。给药5d，末次给药15min后，灌胃给水10ml，然后立即于大鼠后左足跖皮下注射10％的新鲜蛋清0.1ml，分别于5min、30min、60min、120min、240min、360min测定大鼠左右足跖的厚度，以其差值为肿胀度，结果见表2。

表2  对大鼠由蛋清所致足跖肿胀的影响

组别	动物数(只)	大鼠足跖肿胀度(cm)(x±s)
								5min	30min	1h	2h	4h	6h
		空白对照组阳性对照组给药组	101010	0.194±0.0430.209±0.0400.144±0.040* △	0.315±0.0390.312±0.1090.228±0.040* △	0.278±0.0270.269±0.0490.188±0.049* △	0.251±0.0410.223±0.0750.162±0.044* △							0.214±0.0520.187±0.0480.137±0.018* △	0.158±0.0340.132±0.0430.101±0.018* △

给药组与空白对照组比较，^*P＜0.01；与阳性对照组比较，△P＜0.05

以上结果表明，本注射液对二甲苯诱导小鼠耳壳急性炎症有较强的抑制作用；对蛋清引起的大鼠足跖炎症，在不同时间的肿胀度也均有很强的抑制作用，且优于对照药。

1.3对棉球肉芽组织增生的影响：

取体重140-170g大鼠40只，雌雄各半，随机分为4组，乙醚麻醉后给大鼠鼠蹊部各包埋20mg无菌棉球一个制作肉芽组织增生模型。各组按体表面积计算大鼠的用药量观察对棉球肉芽组织增生的影响。1组予本注射液5.2ml/kg，2组予本注射液2.6ml/kg，3组注射0.5％地塞米松磷酸钠0.005ml/kg，4组给等量生理盐水，均腹腔注射连续给药7天，于第8天处死大鼠，分离肉芽组织，置80℃烤箱中干燥5小时后称重。结果，1、2、3组均能抑制棉球肉芽组织增生，见表3。

表3  本注射液对大鼠肉芽组织增生的影响

组别	动物数(只)	肉芽肿干重(mg)
			1组2组3组4组	10101010	28.23±10.8932.13±13.2436.25±14.3183.15±21.83

2、抑菌试验：

2.1制造阳性疮疡及急性腹膜炎病理模型：将12只家兔随机分为实验组和对照组。在每只家兔左侧同一部位剪毛、剃毛，用手术刀切约1cm长小口，深及皮下，从伤口向内注入5亿个/kg金黄色葡萄球菌，形成阳性疮疡；同时，给每只兔腹腔注射接种大肠杆茵K8830亿个/kg，造成急性腹膜炎症模型。实验组提前3天采用耳静脉注射本注射液，每只兔按10ml/kg·次，每天早晚各1次，共给药8天，结束前24小时停止给药；对照组不给任何药物，比较各组差异。

本注射液对家兔接种金色葡萄球菌形成阳性疮疡的试验结果如表4。接种3天后，对照组家兔伤口皮肤周围有红、肿、热、触痛等炎症反应。

表4  本注射液对家免实验阳性疮疡的影响

组别	n/p	溃烂面积(m2)
					体表(x±s)	皮内侧(x±s)	肌肉层(x±s)
		实验组对照组实：对E/C	65P	0.573±0.0331.899±0.389＜0.01				0.021±0.0200.861±0.094＜0.01	0.017±0.0091.093±0.103＜0.01

捕杀观察家兔腹腔接种大肠杆菌K₈₈形成急性腹膜炎症试验，结果见表5。

表5  本注射液对家免实验性腹膜炎的主要病理变化

内容	对照组					实验组
												1	2	7	8	10	3	4	5	6	11	12
	腹壁小脓肿腹壁脓肿肠管浆膜面渗出物肠管浆膜面局限性小肠肿肠管浆膜面散在性小脓肿肠管出血坏死肠管间游离性脓肿肝表面脓性渗出物肝被膜下小脓肿	+++++++--	+++++-++-	++++-++--	+++++-++-	+++++++--	---------	---------	--+------	---+-----	--+------												---------

注：“+”表示有病理变化；“-”表示无病理变化

2.2体内抑菌试验：小鼠40只，雌雄各半，随机分为实验组和对照组。每只小鼠皮下接种0.2ml稀释度为10-3的培养菌液，同时给实验组小鼠注射本注射液1.0ml/只，对照组小鼠腹腔注射生理盐水1.0ml/只，每天早晚各1次，连续注射1周，观察其死亡、存活数，并进行统计学数据处理。

接种沙门氏杆菌小鼠保护试验的结果见表6。

表6  接种沙门氏杆菌小鼠保护试验结果

组别	小鼠(只)	死亡(只)	死亡率(％)	存活(只)	存活率(％)
						实验组对照组总数	101020	21012	20100	808	80

差异极显著

接种枯草杆菌小鼠保护试验的结果见表7。

表7  接种枯草杆菌小鼠保护试验结果

组别	小鼠(只)	死亡(只)	死亡率(％)	存活(只)	存活率(％)
						实验组对照组总数	101020	11011	10100	909	90

差异极显著

结果表明，家免体表创口接种化脓性金色葡萄球菌后，局部溃烂面积，无论是体表、皮内侧，或是肌肉层，实验组较对照组均有极显著性差异(P＜0.01)；家免腹腔接种大肠杆菌K88后，第6天捕杀观察腹腔内脏炎症变化，对照组于6天内可全部形成急性化脓性弥漫性腹膜炎；实验组除2只有少许浆膜渗出物和1只形成局限腹膜炎外，其余3只无任何病理变化；本注射液不仅对沙门氏杆菌、枯草杆菌的生长有较强的抑制作用，实验组较对照组均有极显著性差异(P＜0.01)，而且可减少小鼠死亡率，提高存活率，有其治疗作用。

2.3、体外抑菌作用：采用试管内药液稀释法进行体外抑菌实验。用肉汤培养基将本注射液稀释成1∶2，……1∶16，……1∶256(按倍数稀释，如表8稀释度)。经高压灭菌30min后，待冷却每管加二白金耳培养6h的菌液，于37℃温箱中培养24h后，观察各管中细菌生长情况，结果见表8。最低抑菌浓度(MIC)：对金葡菌为0.032g/mL；对肺炎双球菌为0.063g/mL；对溶血性链球菌为0.063g/mL；对流感杆菌为0.13g/mL，对大肠杆菌为0.25g/mL。

表8  本注射液的体外抑菌作用(试管法)

药液稀释度	药液浓度(g/ml)	金黄色葡萄球菌	肺炎双球菌	溶血性链球菌	沙门氏杆菌	大肠杆菌
							1∶2561∶1281∶641∶321∶161∶8	0.00780.01560.03120.06250.1250.25	+++0000	+++++00	+++++00	+++++++00	++++++++000

“++”明显生长 “+”少量生长 “0”无菌

3、抗病毒试验

3.1、本注射液对不同稀释度的单纯疱疹病毒1型、2型(HSV-1，HSV-2)抑制实验：待Vero细胞长成单层后，将HSV-1，HSV-2稀释成10、100、1000和10000四个TCID₅₀的病毒攻击量，将每个TCID₅₀的病毒接种8管，其中4管为本注射液组，4管为病毒对照组，另设4管作药物细胞对照组。病毒对照组换维持液，本注射液组和药物细胞对照组均换本注射液的最大无毒浓度药液，即浓度为1000μg/ml药液。然后将所有培养管旋转培养一周，每天观察记录细胞病变情况，当病毒对照组出现++-+++时判断结果。

3.2不同稀释度的本注射液对单纯疱疹病毒的抑制实验：待Vero细胞长成单层后，用100TCID₅₀的病毒攻击量接种各管，将本注射液稀释成1000μg/ml，500μg/ml，250μg/ml，125μg/ml和62.5μg/ml五个浓度，每个浓度设4管作本注射液组，4管作药物细胞对照组，另设4管作公共病毒对照组，将所有培养管旋转培养一周，每天观察记录细胞病变情况，当病毒对照组出现++-+++时判断结果。

本注射液对不同稀释度RSV抑制实验结果表明：当病毒感染量大于或等于100TCID₅₀时，本注射液组与病毒对照组相比，病变程度有显著差异。当病毒感染量小于100TCID₅₀时，本注射液无细胞病变出现，而病毒对照组则有25％细胞出现病变(见表9)。

表9  本注射液对不同稀释度单纯疱疹病毒抑制实验结果

病毒感染量(TCID50)	本注射液组	病毒对照组	药物细胞对照组
				＞100100＜100	++-++++-	+++-++++++-++++	---

注：-细胞无病变，+25％细胞病变 ++50％细胞病变，+++75％细胞病变，++++100％细胞病变。

不同稀释度的本注射液对单纯疱疹病毒的抑制实验结果表明：本注射液抑制单纯疱疹病毒的TD₀、IC₅₀、MTC和TI值分别是1000μg/ml，500μg/ml，250μg/ml和4。随着药液浓度下降，本注射液抑制单纯疱疹病毒的作用减弱。本注射液的1000μg/ml、500μg/ml和250μg/ml三个浓度组与病毒对照组相比，病变程度有显著差异。(见表10)

表10  不同稀释度的本注射液对单纯疱疹病毒的抑制实验结果

	本注射液组					病毒对照组	药物细胞对照组
								C(μg/ml)	1000	500	250	125	62.5
阳性率	±	+	++	++-+++	++-+++									++-+++	-

本实验显示：当病毒攻击量为100TCID₅₀时，本注射治能保护75％的细胞免遭病毒攻击；当病毒攻击量小于100TCID₅₀时，则能完全保护细胞而不出现病变。而且进一步研究其抑制单纯疱疹病毒的TD₀，IC₅₀，MTC和TI值分别为1000μg/ml，500μg/ml，250μg/ml和4。

实验采用的本发明药物根据实施例1制备，但不仅限于注射剂，其它所有实施例均能得出上述实验结果。

具体实施方式

以下通过实施例对本发明作进一步的阐述。

实施例中原料药材按100g/份计算。

实施例1：

处方：夏枯草15份，紫花地丁20份，鱼腥草20份。

制备工艺：按处方量称取三味药材，加水煎煮3次，每次1h，合并煎液，过滤，滤液浓缩至相对密度为1.10(60℃热测)，加乙醇使含醇量达70％，静置、冷藏36h，过滤，滤液回收乙醇，再加乙醇使含醇量达80％，静置、冷藏48h，过滤，滤液回收乙醇，加4％的明胶水溶液适量，静置，加乙醇使含醇量达80％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，得预配液，加注射用水至5000ml，加入浓度为0.15％的亚硫酸氢钠，活性碳脱色，粗滤，精滤，5ml/支灌封，灭菌，制成注射液1000支。

实施例2：

处方：夏枯草15份，紫花地丁20份，鱼腥草20份。

制备工艺：按处方量称取三味药材，加水煎煮2次，每次2h，合并煎液，过滤，滤液浓缩至相对密度为1.10(60℃热测)，加乙醇使含醇量达60％，静置、冷藏24h，过滤，回收乙醇，滤液上聚酰胺柱，用60％、80％、95％的乙醇梯度洗脱，收集洗脱液，回收乙醇后，得预配液，加注射用水至2000ml，再加入浓度为0.3％的维生素C，活性碳脱色，粗滤，精滤，2ml/支灌封，灭菌，制成注射液1000支。

实施例3：

处方：夏枯草10份，紫花地丁15份，鱼腥草15份。

制备工艺：按处方量称取三味药材，加水煎煮2次，每次1.5h，合并煎液，过滤，滤液浓缩至相对密度为1.10(60℃热测)，加乙醇使含醇量达60％，静置、冷藏48h，过滤，滤液回收乙醇，上中空纤维超滤柱超滤，先用50000分子截留量的纤维膜滤去大部分大分子杂质，再用10000分子截留量的纤维膜除去分子量为1～5万的杂质，取分子量小于10000的滤液，得预配液，再加入浓度为0.2％的焦亚硫酸钠，加注射用水至10000ml，活性碳脱色，粗滤，精滤，10ml/支灌封，灭菌，制成注射液1000支。

实施例4

取例1、例2或例3项下的预配液，加入浓度为0.1～0.3％的亚硫酸氢钠，加葡萄糖或氯化钠调节等渗，按常规工艺制成大输液，规格为100ml/瓶、250l/瓶或500ml/瓶。

实施例5

取例1、例2或例3项下的预配液，常规加入蔗糖、亚硫酸氢钠和苯甲酸酯，再加注射用水至10000ml，按常规工艺制成口服液1000支。

实施例6

处方：夏枯草12份，紫花地丁20份，鱼腥草15份。

制备工艺：按处方量称取三味药材，加水煎煮3次，每次2h，合并煎液，过滤，滤液浓缩至相对密度约为1.15(60℃热测)，加乙醇使含醇量达70％，静置、冷藏48h，过滤，回收乙醇；取回收乙醇后的提取液减压浓缩成相对密度为1.30的稠浸膏(60℃热测)，常规加入糊精、羧甲基纤维素钠、交联聚维酮，按常规工艺制成胶囊剂1000粒。

实施例7

处方：夏枯草12份，紫花地丁20份，鱼腥草15份。

制备工艺：按处方量称取三味药材，加水煎煮3次，每次2h，合并煎液，过滤，滤液浓缩至相对密度约为1.10(60℃热测)，加乙醇使含醇量达70％，静置、冷藏48h，过滤，回收乙醇；取回收乙醇后的提取液减压浓缩成相对密度为1.15的浸膏(60℃热测)，常规加入预胶化淀粉、羧甲基淀粉钠、羟丙甲纤维素钠、硬脂酸镁适量，按常规工艺制成片剂1000片。

实施例8

处方：夏枯草12份，紫花地丁20份，鱼腥草15份。

制备工艺：按处方量称取三味药材，加水煎煮2次，每次2h，合并煎液，过滤，滤液浓缩至相对密度约为1.05(60℃热测)，加乙醇使含醇量达60％，静置、冷藏48h，过滤，滤液回收乙醇；取回收乙醇后的提取液减压浓缩成相对密度为1.25的浸膏(60℃热测)，常规加入蔗糖粉、糊精，按常规工艺制成颗粒剂1000袋。

Claims (5)

1、一种抗炎抗病毒的中药，其特征在于它是由下列重量份的原料药制备而成：

夏枯草9～20份，紫花地丁15～30份，鱼腥草15～25份。

2、根据权利要求1所述的中药，其特征在于它的药剂是任何一种药剂学上允许的剂型。

3、根据权利要求2所述的中药，其特征在于所说的剂型是注射液、口服液、丸剂、片剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂、微囊剂或滴丸剂。

4、如权利要求1所述的中药的制备工艺，其特征在于它包含下列步骤：

a.水提：按配方称取三味药材，加水煎煮2～3次，每次1～2h，合并煎液，过滤，滤液浓缩至60℃热测相对密度为1.05～1.15；

b.醇沉：加乙醇使含醇量达60～80％，静置、冷藏24～72h，过滤，滤液回收乙醇；同法醇沉操作1～2次，得回收乙醇后的提取液；

c.将回收乙醇后的提取液纯化得预配液，加入药学上可接受的辅料，按常规工艺制成所需剂型，或者

d.取回收乙醇后的提取液浓缩成60～80℃热测相对密度为1.05～1.30的浸膏，加入药学上可接受的辅料，按常规工艺制成所需剂型。

5、根据权利要求4所述的中药的制备工艺，其特征在于步骤c中的纯化工艺为将提取液上中空纤维超滤柱超滤，取分子截留量小于10000的滤液，得预配液；或者将提取液上聚酰胺柱用60～95％的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，得预配液；或者将提取液加4％的明胶水溶液适量，静置，加乙醇使含醇量达60～80％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，得预配液。