CN1720905A - β－细辛醚在制药中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及β－细辛醚在制药领域中的用途，尤其涉及在制备治疗或预防支气管哮喘、止咳化痰以及治疗脑病等药物中的用途。β－细辛醚具有舒张支气管平滑肌、止咳平喘的作用，用于治疗支气管哮喘；β－细辛醚具有抑制细胞凋亡，达到减轻脑损害，保护神经元的作用，对脑梗塞、脑出血等造成的缺血和缺氧脑损害有保护作用，用于治疗中风；β－细辛醚能降低脑电频率，有镇静安神作用，用于治疗癫痫。

Description

β-细辛醚在制药中的应用

技术领域

本发明涉及β-细辛醚的用途，尤其涉及在制药领域中的用途，特别涉及在治疗或预防支气管哮喘、止咳化痰以及治疗脑病等药物领域中的用途。

技术背景

祛痰开窍中药石菖蒲，对中枢神经系统、心血管系统、呼吸系统、消化系统都具有一定的药理作用。石菖蒲挥发油的主要成分是β-细辛醚(40-80％)和α-细辛醚(2-10％)，目前对石菖蒲的研究较多，而对其单体成分β-细辛醚的研究较少。有研究显示：石菖蒲可保护脑皮质神经细胞，抑制其凋亡(方永奇，匡忠生，谢宇晖等.石菖蒲对缺血再灌注脑损伤大鼠神经细胞凋亡的影响.现代中西医结合杂志，2002，11(17)：1647-79.)；其挥发油有镇静催眠作用，细辛醚是镇静作用的有效成分(杜毅，周超凡.石菖蒲临床应用与实验研究的概述.内蒙古中医药，1993，12(1)：40.)；石菖蒲能抑制脑内乙酰胆碱酯酶活力提高脑内乙酰胆碱水平，诱导c-jun基因表达，可改善多种记忆障碍模型，具有益智作用(吴宾，方永奇.石菖蒲益智作用的物质基础及其机理研究.中医药学刊，2004，22(9)：1635-41.)；可使豚鼠冠状动脉扩张，降低蛙心收缩频率和幅度(陈俐.石菖蒲药理作用的实验研究.广州医学院学报，2002，30(4)：75-8.)；能抑制离体家兔肠管自发性收缩，拮抗肠管痉挛，增强大鼠在体肠管蠕动及小鼠肠道推进功能(胡锦官，顾健，王志旺.石菖蒲及其有效成分对消化系统的作用.中药药理与临床，1999，15(2)：16-8.)；有舒张支气管平滑肌的作用(杨社华，王志旺，胡锦官.石菖蒲及其有效成分对豚鼠气管平滑肌作用的实验研究.甘肃中医学院学报，2003，20(2)：12-4.)。美国哈佛医学院的研究证明在石菖蒲的多种成分中，α-细辛醚、β-细辛醚和顺式甲基异丁香酚三个单体对β淀粉样蛋白诱导的PC12细胞的凋亡起保护作用，丁香酚、β-细辛醚、α-细辛醚3种单体能阻止细胞内钙离子的内流，可使神经细胞死亡率明显降低，并能使Aβ引起的凋亡细胞数量显著减少，具有抗细胞凋亡作用(Yoshifumi Irie，Wing Ming Keung.Rhizoma acorigraminei and its active principles protect PC-12 cells from the toxic effect of amyloid-βpeptide.Brain Research.2003.963.282-289)。Liao等的研究指出，石菖蒲对中枢系统的作用，可以通过石菖蒲作用于多巴胺D1和D2受体和GABA受体的GABA结合位点来解释，并且证实α-细辛醚在该过程中不起作用。提示起作用的可能是β-细辛醚(Liao JF，Huang SY，Jan YM，Yu LL，Chen CF.Centralinhibitory effects of water extract of Acori graminei rhizoma in mice.J Ethnopharmacol.1998.61(3).185-93)。β-细辛醚和α-细辛醚通过阻塞天冬酰氨(NMDA)受体，保护脑皮质细胞，减轻由NMDA或谷氨酸引起的神经毒性损伤作用(Cho J，Ho Kim Y，Kong JY，Ha Yang C，Gook Park C.Protection of cultured rat cortical neurons from excitotoxicity by asarone，a major essentialoil component in the rhizomes of Acorus gramineus.Life Sci.2002.71(5).591-599)。

发明内容

本发明解决的技术问题是提供β-细辛醚在制药领域中的用途，尤其涉及在制备治疗或预防支气管哮喘、止咳化痰以及治疗脑病等药物中的用途，特别涉及在制备治疗支气管哮喘、中风、癫痫药物中的用途。

为了更好的理解本发明的实质，下面用β-细辛醚的药理试验和结果来说明其在制药领域中的用途。

β-细辛醚可以用以下方法制备：石菖蒲加8倍量水，按《中国药典》一部附录挥发油提取法甲法，提取24小时，收集挥发油，挥发油精制提纯得β-细辛醚。

取β-细辛醚，加入适量的药学上可以接受的助溶剂，配制浓度分别为10g/L、100g/L、300g/L浓度的溶液，装入药瓶中密封，消毒制成产品备用。用药方法为喷入口腔。

取β-细辛醚，加入适量的药学上可以接受的助溶剂、防腐剂、甜味剂、芳香剂、抗氧化剂、pH调节剂等中的一种或几种，配制浓度分别为10g/L、20g/L、40g/L的治疗中风注射剂备用。用药方法为注射。

取β-细辛醚，加入适量的药学上可以接受的助溶剂，配制浓度分别为10g/L、100g/L、300g/L浓度的水溶液，装入药瓶制成口服液。服药方法为口服。

取β-细辛醚，加入适量的药学上可以接受的助溶剂，配制浓度分别为10g/L、100g/L、300g/L浓度滴丸，装入药瓶制成成品。服药方法为口服。

取EUDRAGIT(尤特奇)E100 10g，β-细辛醚2g，增塑剂5g，琥珀酸1g，氮酮1g。将EUDRAGIT E100和增塑剂、琥珀酸溶于乙醇、异丙醇混合溶媒中，加入β-细辛醚，使溶解，倒入铺好背衬层的特制模具中，均匀涂布，挥干溶媒，切块封装即得β-细辛醚油性经皮给药贴剂。用药方法为贴服。

上述样品分别进行其治疗哮喘、中风、癫痫的动物药效学实验。

本发明的治疗平喘、止咳、化痰效果、保护脑神经细胞等药效实验方法如下：

1)豚鼠平喘试验(喷雾致喘法)

FMMu豚鼠80只，体重180～200g，雌雄各半。动物筛选：将豚鼠分别置于气雾装置内，用超声波雾化器喷入1％卵蛋白40秒，观察豚鼠的引喘潜伏期(即从喷雾开始到哮喘发作的时间)，一般不超过150秒，超过150秒者认为不敏感，不予选用。

正式试验：将预选过的合格动物60只随机均分组为高剂量组、中剂量组、低剂量组、阳性对照组、灌胃给药组、模型对照组。每组10只，各组豚鼠分别喷雾或灌胃给药7天，每天2次。末次给药后1h，各鼠分别放入气雾装置内，按预选时的同样条件喷入1％卵蛋白40秒。记录哮喘潜伏时间和跌倒潜伏时间。

                            表1豚鼠平喘试验(喷雾致喘法)结果(x±s)

组别                   动物数量(只)     哮喘潜伏时间(s)      跌倒潜伏时间(s)

10g/Lβ-细辛醚组       10               57.20±22.45^*       78.40±32.79^*

100g/Lβ-细辛醚组      10               58.90±22.69^**      81.00±50.87^**

300g/Lβ-细辛醚组      10               59.40±18.97^***     85.30±22.45^***

10g/Lβ-细辛醚组(灌胃) 10               55.12±12.52^*       75.53±46.36^*

阳性对照组             10               58.36±18.72^**      80.09±39.21^**

模型对照组             10               37.73±9.11          45.27±20.59

注：与模型对照组比^*P＜0.05，^**P＜0.01，^***P＜0.001(下同)

2)豚鼠平喘试验(气管片法)

FMMu豚鼠50只，体重450-500g，雌雄各半，击毙，立即细心分离出气管，自甲状软骨下至气管分义处剪下全部气管，放入克-亨氏液内，在气管的腹面(软骨环面)纵行切开，再每隔3个软骨环横切，每段气管片的纵切口处用线缝上，相互连成一串。

将缝好的气管片标本放入盛有克-亨氏液的离体器官浴槽内，下端固定于玻璃通气钩，上端以较长的线连至拉力换能器上(负荷约1g)，以便记录反应。浴槽内温度恒定37℃，并持续供氧。标本平衡30分钟，给药，每加一药物接触15分钟，观察药物反应，然后换液，待基线恢复后，给另一药物。给药步骤为：(1).磷酸组胺0.5μg/ml(浴槽内浓度，下同)，观察有无收缩反应，确定标本的功能状况。如标本功能正常，记录反应张力。(2).以累积法加药后，观察受试药物对气管平滑肌的松弛作用。(3).换液。(4).用氯化乙酰胆碱(0.5μg/ml)代替磷酸组胺，重复(1)至(3)步骤。

                   表2豚鼠平喘试验(气管片法)结果(x±s，g)

组别                动物数量(只)       组胺                乙酰胆碱

                                       给药后张力降低值    给药后张力降低值

10g/Lβ-细辛醚组    10                 1.62±0.21^***       1.28±0.68^***

100g/Lβ-细辛醚组   10                 1.88±0.56^***       1.85±0.52^***

300g/Lβ-细辛醚组   10                 1.94±0.42^***       1.91±0.34^***

阳性对照组          10                 1.54±0.36^***       0.99±0.46^***

模型对照组          10                 0.16±0.19           0.035±0.065

3)小鼠止咳试验(二氧化硫刺激法)

NIH小鼠50只，雌雄各半，体重18-22g，随机组：高剂量组、中剂量组、低剂量组、阳性对照组、模型对照组。每组10只，各组小鼠分别喷雾给药7天，每天2次。末次给药1小时后，将小鼠放入500ml的广口瓶内，通入二氧化硫气体10ml，观察并记录各小鼠咳嗽的潜伏期(由通入二氧化硫开始至发生咳嗽所需的时间为潜伏期)。

二氧化硫气体制备：用250ml侧口烧瓶，侧口用橡皮管连接球胆，侧口烧瓶内盛亚硫酸钠，烧瓶瓶塞上装一滴定管，内放浓硫酸，打开滴定管上的活塞，浓硫酸滴下后，在瓶内产生二氧化硫气体，气体储于球胆中，用止血钳夹紧，应用时，用注射器吸取10ml，注入500ml广口瓶内。

                   表3小鼠止咳试验(二氧化硫刺激法)结果(x±s)

组别               动物数量(只)     咳嗽潜伏期(秒)       咳嗽次数(次)

10g/Lβ-细辛醚组   10               25.00±4.63^***      26.23±11.35^***

100g/Lβ-细辛醚组  10               28.86±3.32^***      22.57±12.21^***

300g/Lβ-细辛醚组  10               29.38±4.66^***      20.25±19.36^**

阳性对照组         10               26.50±9.89^**       29.00±16.27^**

模型对照组         10               13.20±5.02          49.90±7.25

4)小鼠化痰试验(气管段酚红法)

NIH小鼠50只，雌雄各半，体重18-22g，分组及给药同上。末次给药30分钟后，小鼠腹腔注射5％酚红(500mg/kgbw)，半小时后处死动物，剥离气管周围组织，剪下自甲状软骨下至气管分支处的一段气管，放入盛有2ml生理盐水的试管中，再加2滴1mol/L氢氧化钠，用分光光度计，在波长546nm下测OD值，用酚红标准曲线计算酚红排出量。

                   表4小鼠化痰试验(气管段酚红法)结果(x±s)

组别                     动物数量(只)         酚红排出量(μg/ml)

10g/Lβ-细辛醚组         10                   1.56±0.20^***

100g/Lβ-细辛醚组        10                   1.69±0.35^***

300g/Lβ-细辛醚组        10                   1.81±0.32^***

阳性对照组               10                   1.21±0.13^***

模型对照组               10                   0.56±0.11

5)小鼠抗炎试验(耳肿胀)

NIH小鼠50只，雄性，体重18-22g，分组及给药同上。末次给药后1h，每鼠左耳两面涂100％二甲苯致炎剂25μl致炎，右耳作对照。致炎1h后处死动物，沿耳廓基线剪下两耳，用直径9mm打孔器打下双耳同一部位圆片，电子分析天平称重，计算肿胀度。肿胀度＝左耳片重-右耳片重。

                  表5小鼠抗炎试验(耳肿胀)的结果(x±s)

组别                 动物数量(只)          肿胀度(mg)

10g/Lβ-细辛醚组     10                    5.21±5.13^*

100g/Lβ-细辛醚组    10                    6.31±6.52^*

300g/Lβ-细辛醚组    10                    5.65±6.35^*

阳性对照组           10                    4.65±3.86^**

模型对照组           10                    11.08±5.12

6)大鼠抗炎试验(肉芽肿)

SD大鼠50只，雄性，体重180-200g，分组同上。腹腔注射麻醉(水合氯醛300g/kg)，在每只鼠的左右蹊部，常规消毒，各切1cm长小口，用眼科镊将20mg的高压灭菌棉球(青霉素和链霉素混合液0.2ml，浸泡，烘干)从切口外植入皮下，随即缝合皮肤。从手术当日开始，各组每天给药2次，连续给药7天，第8天打开原切口，将棉球连同周围结缔组织一起取出，剔除脂肪组织，放烘箱中70℃烘干24h，称重。将称得的重量减去棉球原重量即得肉芽肿重量，比较各组肉芽肿重量。

                表6大鼠抗炎试验(肉芽肿)结果(x±s)

组别                 动物数量(只)          肉芽肿重(mg/100gbw)

10g/Lβ-细辛醚组     10                    18.11±3.75^**

100g/Lβ-细辛醚组    10                    17.25±6.23^**

300g/Lβ-细辛醚组    10                    15.92±8.16^***

阳性对照组           10                    16.10±6.54^***

模型对照组           10                    25.16±3.98

7)对小鼠免疫器官胸腺、脾脏的影响试验

NIH小鼠50只，雄性，体重18-22g，分组同上。每天喷雾给药2次，连续给药7天，末次给药1h后，摘眼球放血处死动物，称体重，摘取胸腺、脾脏称重，比较各组腺体指数。以胸腺和脾脏重量(mg)与体重(g)之比作为腺体指数。

                表7小鼠免疫器官胸腺、脾脏试验的结果(x±s)

组别                 动物数量(只)     胸腺指数(mg/10gbw)   脾指数(mg/10gbw)

10g/Lβ-细辛醚组     10               5.83±1.52^**        7.14±1.25^*

100/Lβ-细辛醚组     10               5.76±1.05^**        6.25±2.43^*

300g/Lβ-细辛醚组    10               5.52±1.15^**        6.38±2.21^*

阳性对照组           10               5.35±1.13^**        6.06±2.32^*

模型对照组           10               3.04±0.98           4.11±1.62

8)小鼠网状内皮系统炭粒廓清试验

NIH小鼠50只，体重18-22g，雄性，分组及给药同上。末次给药1h，于鼠尾静脉注入稀释中华墨汁(用1％明胶液稀释4倍)0.1ml/10gbw，于注入墨汁后30秒及6分钟用特制取血吸管从小鼠眼眶后静脉丛取血0.025ml，立刻吹入0.1％Na₂CO₃溶液2ml中，吸管于该液中吸入、吹出数次充分洗出吸管壁附着之血液，以0.025ml正常小鼠血溶于2ml0.1％Na₂CO₃溶液中校零，于分光光度计675nm处比色，计算吞噬指数K及吞噬系数α(校正吞噬指数)。

K＝(IogOD₁-IogOD₂)/(t₂-t₁)           α＝W*K^1/3/WLS

注：OD₁、OD₂为不同时间所取血样的光密度，t₂-t₁，为取血样的时间差，W为体重，WLS为肝脾合重。

                 表8小鼠网状内皮系统炭粒廓清试验的结果(x±s)

组别                动物数量(只)      吞噬指数K            吞噬系数α

10g/Lβ-细辛醚组    10                0.0536±0.0425^*     4.36±1.33^*

100g/Lβ-细辛醚组   10                0.0538±0.0321^*     4.93±1.61^*

300g/Lβ-细辛醚组   10                0.0429±0.0392^**    5.85±1.02^*

阳性对照组          10                0.0402±0.0316^**    5.26±1.75^*

模型对照组          10                0.0906±0.0453       3.12±1.63

9)大鼠脑缺血-再灌注损伤试验

缺血再灌注脑损伤模型制造：用水合氯醛(300mg/kg体重)腹腔注射麻醉，取仰卧位，分离暴露两侧颈总动脉，并分别置线备用，用动脉夹夹闭两侧颈总动脉60min后，再灌注，缝合伤口，造成缺血再灌注脑损伤模型。

SD大鼠随机分组：高、中、低剂量组、阳性对照组、模型对照组，各组动物腹腔注射给药7d，模型对照组给等体积生理盐水，每天2次。第7天给药后1小时，造成缺血再灌注脑损伤模型。在造模夹闭颈总动脉前，将针灸针插入大鼠的大脑颅骨表面(表层骨膜下)，先测量并记录大鼠血管夹闭前的脑电图；然后，用动脉夹夹闭两侧颈总动脉60分钟，同时记录脑电图；夹闭60分钟后，再灌注观察24小时，并记录再灌注24小时时的脑电图；处死大鼠，快速取脑皮质和海马，按细胞凋亡原位末端标记法检测神经细胞凋亡。显微镜下观察细胞凋亡情况。用北京航空航天大学病理图像分析系统，定量分析神经元凋亡数(每高倍视野，放大倍数72.5)及凋亡积分；Bax、Bcl-2基因蛋白用免疫组织化学法检测，定量分析凋亡细胞数、细胞的凋亡积分(光密度×面积)。其余脑组织测含水量[85℃烘干三天后称重；脑含水量(％)＝(湿脑重-干脑重)/湿脑重×100％]。

         表9石菖蒲提取部位对大鼠脑含水量的影响(x±s，n＝10)

组别                动物数n                脑含水量(％)

10g/Lβ-细辛醚组    8                      77.12±0.58^***

20g/Lβ-细辛醚组    8                      77.26±0.63^***

40g/Lβ-细辛醚组    8                      76.86±0.52^***

阳性对照组          8                      77.28±0.41^***

模型对照组          8                      78.11±0.54

                     表10对大鼠脑电图的影响(x±s)

组别                      夹闭前                               夹闭中                           夹闭后再灌注

                  频率Hz        波幅uv                频率Hz           波幅uv             频率Hz        波幅uv

10g/Lβ-细辛醚    14.80±2.68   9.15±2.12^***△△△  14.2±2.16^△△△  5.82±1.41^***△△△ 14.25±3.85^**  5.12±1.01^***△△△

20g/Lβ-细辛醚    14.20±2.55   8.70±2.20^***△△△  13.9±1.97^△△△  5.78±1.19^***△△△ 14.45±3.03^**  4.98±1.44^***△△△

40g/Lβ-细辛醚    15.06±2.56   8.96±2.50^***△△△  14.9±2.08^△△△  6.15±1.25^***△△△ 14.33±2.91^**  5.38±1.25^***△△△

阳性对照组        14.00±2.70   10.68±2.90^***    17.00±1.95^***  10.35±1.98^***   14.55±2.11^***  9.32±2.26

模型对照组        15.10±2.38   7.20±1.49         14.15±2.03     4.55±0.78        17.35±2.16      9.10±1.94

注：与阳性对照组比：△△△P＜0.001

                表11对大鼠脑神经细胞凋亡的影响(x±s，n＝10)

组别                            皮质                                海马

                  凋亡细胞数           凋亡积分          凋亡细胞数     凋亡积分

10g/Lβ-细辛醚组  51.9±36.1^***       716.1±255.1      0.78±0.52^*** 52.9±20.3^***

20g/Lβ-细辛醚组  49.5±25.4^***       625.0±289.9      0.81±0.42^*** 48.0±16.9^***

40g/Lβ-细辛醚组  48.8±42.2^***       664.0±312.5      0.88±0.54^*** 49.1±21.4^***

阳性对照组        42.5±38.2^***       615.8±303.6      0.85±0.58^*** 51.1±18.3^***

模型对照组        107.8±22.9          842.8±151.2      6.32±2.23     118.3±34.9

                  表12对BAX基因表达的影响(x±s，n＝10)

组别                     皮质积分                 海马积分

10g/Lβ-细辛醚           501.1±185.6^*           522.6±199.8^*

20g/Lβ-细辛醚           491.2±206.0^*           511.4±239.7^*

40g/Lβ-细辛醚           481.9±224.3^**          506.4±215.3^**

阳性对照组               475.6±216.5^***         509.1±203.8^**

模型对照组               835.6±330.9             961.5±363.5

注；与模型对照组比：^*P＜0.05，^**P＜0.01，^***P＜0.001(下同)

               表13对BCL-2基因表达的影响(x±s，n＝10)

组别                     皮质积分                 海马积分

10g/Lβ-细辛醚           140.7±45.6^*            68.5±15.5

20g/Lβ-细辛醚           141.8±33.7^*            67.5±17.7

40g/Lβ-细辛醚           143.9±35.8^**           66.8±20.1

阳性对照组               142.5±51.1^*            65.9±27.6

模型对照组               99.9±25.9               70.0±23.6

10)β-细辛醚体外皮肤渗透动力学试验

标准曲线制备：精密称取β-细辛醚对照品4.4mg，置50ml容量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，配制储备液(88μg/ml)。精密吸取2、1、0.2、0.5ml储备液于10ml量瓶中，用乙醇稀释到刻度，配成17.6、8.8、1.76、0.44μg/ml β-细辛醚对照品溶液，进样测量。以峰面积积分值(X)对β-细辛醚质量浓度(Y)进行回归，得标淮曲线Y＝3.86×10-4X+6.38×10-3，(r＝0.9995)。表明β-细辛醚在4.4～1320ng与峰面积有良好线性关系，精密度、稳定性考察都达到标准。

大鼠离体皮肤制备和处理：取成年雄性SD大鼠，体重300g～350g，用10％水合氯醛0.3ml/100g麻醉。背部皮肤剃去毛后剥取皮肤，除去皮下脂肪，用冰生理盐水冲洗3次。将皮肤置-4℃冰箱保存，第二天取出，自然解冻，用生理盐水冲洗干净。将处理好的皮肤固定在供药池和接受池之间，角质层面向供药池，真皮层面向接受池与接受液接触。

β-细辛醚溶剂体系和接收液的配制：取0.2mgβ-细辛醚溶于20ml乙醇，用水稀释至100ml，作为溶剂体系I；取0.2ml β-细辛醚和0.1g冰片溶于20ml乙醇，用水稀释至100ml，作为溶剂体系II；取0.2ml β-细辛醚、0.1g冰片和1ml水性氮酮溶于20ml乙醇，用水稀释至100ml，作为溶剂体系III；取0.2mlβ-细辛醚、0.1g冰片和3ml水性氮酮溶于20ml乙醇，用水稀释至100ml，作为溶剂体系IV；取0.2mlβ-细辛醚、0.1g冰片和5ml水性氮酮溶于20ml乙醇，用水稀释至100ml，作为溶剂体系V；称取0.9g氯化钠溶于100g 20％乙醇中，即得接收液。

透皮吸收实验：垂直式扩散池由供药池和接受池组成，接受池体积为6.5ml，池口有效扩散面积为2.8cm2。扩散池置于恒温水浴循环箱中保持37℃，接受池中置磁力搅拌子，以250r/min速度不断搅拌。将接受液加进接受池中并与真皮层密切接触，并注意从取样口排尽气泡。开动渗透扩散试验仪30min稳定后，将含β-细辛醚的不同溶剂体系加入供药池中。在0.5、1、2、3、5、7、10、13、23、24h分别吸取接受液1、1、1、1、2、2、2、5、3、1ml同时补充等量等温的空白接受液。吸取的接受液过0.45μm微孔滤膜，取续滤液测定。

药物通过皮肤的累积渗透量(M)计算：由于每次取接受液后，同时添加等量空白接液，因此测得浓度比真实浓度要低，故不同取样点M值按下列方程校正。

$M(\mathrm{\μg}/\mathrm{cm}2)=[\mathrm{Cn}*V+\underset{i=1}{\overset{n-1}{\mathrm{\Σ}}}\mathrm{Cn}-1*\mathrm{Vs}(n-1)]/\mathrm{\Δ}$

式中Cn为不同取样点时接受液实测浓度，V为接受池体积(6.5ml)，Vs(n-1)为不同时间点的取样体积，A为有效扩散面积(2.8cm2)。以累积透过量对时间进行线性回归，所得方程的斜率即为渗透速率P。

β-细辛醚体外皮肤渗透动力学试验结果

表14β-细辛醚在5种溶剂体系中24小时累积渗透量M(x±s，n＝6)

时间                                   β-细辛醚溶剂体系

/h    I                II               III                 IV                    V

0.5   2.203±0.296     2.838±0.776     2.226±0.387        2.154±0.293          2.357±0.738

1     2.499±0.219     2.769±0.960     2.319±0.389        2.292±0.275          2.491±0.431

2     3.038±0.330     3.147±0.931     2.938±0.228        2.947±0.333          2.92±0.542

3     5.155±1.877     3.571±1.142     3.713±0.561        3.812±0.260          3.326±0.652

5     11.685±5.423    6.816±3.230     7.040±2.574        7.259±1.512          5.308±1.549^*

7     29.998±16.195   15.578±9.699    14.116±6.316       11.553±2.289         8.728±3.591^*

10    76.274±32.015   30.757±18.529   29.364±13.258^*    21.810±5.016^*      14.251±5.846^*

13    118.434±30.645  67.293±38.005   47.741±19.232^**   31.957±6.964^**#     22.617±8.015^**#

23    315.683±86.967  218.245±76.401  126.941±38.395^**# 78.109±11.433^**#    65.709±17.890^**##△

24    352.624±87.049  231.117±77.072  146.635±46.512^**  96.238±14.926^**#    69.361±18.63^**#△

注：与溶剂体系I比较：^*P＜0.05  ^**P＜0.01

与溶剂体系II比较；#P＜0.05  ##P＜0.01

与溶剂体系III比较：△P＜0.05(表2同)

      表15β-细辛醚在5种溶剂体系中的M-t方程和渗透速率P(x±s)

溶剂体系   M-t方程               r                P(μg/cm².h)

I          M＝18.902t-112.49     0.9942           18.902±4.840

II         M＝14.558t-117.91     0.9991           14.558±3.727

III        M＝8.164t-55.18       0.9915           8.164±2.308**#

IV         M＝4.218t-20.03       0.9947           4.218±0.618**##△

V          M＝4.051t-27.91       0.9969           4.051±1.026**##△

通过一系列的实验表明；β-细辛醚具有药效作用，通过拮抗平滑肌细胞H1受体、M受体而起作用达到舒张支气管平滑肌、止咳平喘的作用；通过抑制凋亡基因bcl-2的表达，抑制细胞凋亡，达到减轻脑损害，保护神经元的作用，对脑梗塞、脑出血等造成的缺血和缺氧脑损害有保护作用；β-细辛醚能降低脑电频率，有镇静安神作用。

具体实施方式：

以下是本发明所述技术方案的非限制性实施例。

实施例1

取β-细辛醚10g和吐温5g，加入聚乙二醇等滴丸基质，制成含β-细辛醚1％的滴丸。

实施例2

取β-细辛醚10g，吐温-80 50g，氯化钠90g，加入1000ml水中，配置成浓度为1％水溶液，加热溶解，混合均匀后，装入药瓶中密封，消毒，制成β-细辛醚的注射剂形式。

实施例3

取β-细辛醚30g和吐温120g，蔗糖10g，加水定容至1000ml，配置成浓度为3％水溶液，混合均匀后，装入药瓶中密封，消毒成产品，口服液。

实施例4

取β-细辛醚50g、吐温-60 10g、吐温-80 20g、十六烷醇30g，加入500ml水和500ml丙二醇中，配置成浓度为5％丙二醇水溶液，加热溶解，混合均匀后，装入药瓶中密封，消毒成产品。

实施例5

取β-细辛醚100g和吐温20g，加入300ml乙醇，甜叶菊苷1g，加水定容至1000ml，配置成浓度为10％水溶液，混合均匀后，装入药瓶中密封，消毒成产品。

实施例6

取β-细辛醚200g，加吐温200g，甘油200ml，十八醇2g，香蕉香精2g，加水定容至1000ml，配置成浓度为20％水溶液，混合均匀后，用压灌法压入二氯二氟甲烷每瓶约5.5g，制成气雾剂。

实施例7

取β-细辛醚500g和吐温50g，加入450ml乙醇中，橙皮油10g，定容至1000ml，配置成浓度为50％水溶液，混合均匀后，装入药瓶中密封，消毒成产品。

实施例8

组成：

β-细辛醚           25g

β-环糊精           100g

乳糖                125g

滑石粉              40g

硬脂酸镁            10g

取β-环糊精包含β-细辛醚，低温干燥，其余物质依据比率混合均匀后装入标准的两段硬明胶胶囊，生产β-细辛醚的口服剂型。

实施例9

水性基质处方及制法：聚乙烯醇-124(PVA-124)0.7g，羧甲基纤维素钠(CMC-Na)0.7g，丙二醇10mL，吐温-80 0.5mL，氮酮1mL，西黄蓍胶1.2g，加含0.3％尼泊金乙酯的蒸馏水浸泡一定时间，水浴加热使溶，将0.2gβ-细辛醚溶于1mL 95％乙醇中，加入到基质中混匀，加蒸馏水配成20mL。摊涂于培养皿中，放置使凝固成形，即得片状的含β-细辛醚基质。在特制模具上铺好无纺布，涂上聚丙烯酸酯压敏胶，成为背衬层，将含有β-细辛醚的片状基质铺在背衬层上，再盖上铝塑膜作保护层，密封，即得β-细辛醚水性经皮给药贴剂。

Claims (3)

1.β-细辛醚在制备治疗或预防哮喘的药中的应用。

2.β-细辛醚在制备治疗或预防中风的药中的应用。

3.β-细辛醚在制备治疗癫痫的药中的应用。