CN1699370A - 青蒿琥酯盐及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种青蒿琥酯盐及其制备方法和应用。在水或/和有机醇溶剂中，pH为6～8.5的条件下，将青蒿琥酯与碳酸氢钠、碳酸钠、氢氧化钠、碳酸氢钾、碳酸钾或氢氧化钾中的一种反应，即获得目标产物。本发明的青蒿琥酯钠盐毒性较小，通过动物试验证明与青蒿琥酯具有相同的治疗作用和治疗效果，但其在水中的溶解度却大大提高，医护人员可按常规注射操作，使用方便。结构通式为上式，其中M代表Na或K。

Description

青蒿琥酯盐及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种青蒿琥酯的衍生物，具体涉及一种青蒿琥酯盐。

背景技术

青蒿琥酯是一种有效的应用十分广泛的抗疟药。青蒿琥酯的制备方法和理化性能在中国药学通报，1980，15(4)，183；发明专利公报，1986，2(14)，5等文献中已经有公开的报道，为一种略溶于水的药物。市售的注射剂，如桂林南药股份有限公司生产的青蒿琥酯在使用时需要将5％的碳酸氢钠溶液0.6ml注入青蒿琥酯中，充分混摇使澄清，形成青蒿琥酯与钠的水溶液，进行注射。使用不便，而且容易出现差错，亟待改进。

发明内容

本发明需要解决的技术问题是公开一种易溶于水的固体青蒿琥酯盐及其制备方法，以克服现有的青蒿琥酯所存在的缺陷，满足有关方面的需要。

本发明另一个需要解决的技术问题是公开一种青蒿琥酯盐的制剂。

本发明再一个需要解决的技术问题是公开所述的青蒿琥酯盐在制备治疗抗疟、抗血吸虫、无名高烧、节育、免疫调节剂或抗癌药物中的应用。

本发明最后需要解决的技术问题是公开所述的青蒿琥酯盐在运输、储藏过程的条件。

本发明的青蒿琥酯盐，其结构通式为：

其中M代表Na或K；

优选的为Na；

优选的化合物为青蒿琥酯钠盐，分子式：C₁₉H₂₇O₈Na，分子量：406.43。

所说的青蒿琥酯盐是一种白色结晶粉末，溶于二氯甲烷、三氯甲烷、乙醇和丙酮中，极易溶于水。

本发明还涉及一种药物制剂，其特征在于，含有治疗有效量的所说的青蒿琥酯盐和医药学上可接受的载体，优选含有青蒿琥酯盐的重量百分比为0.01～99.9％；

所说的制剂为注射剂、冻干粉针剂、固体制剂如：片剂、胶囊剂、颗粒剂或口服液等。所说的制剂可采用本领域公知的方法进行制备。

所说的医药学上可接受的载体是指药学领域常规的药物载体，如稀释剂、赋形剂如水、乙醇等；填充剂，如乳糖、微晶纤维素、淀粉、蔗糖等；粘合剂，如纤维素衍生物明胶、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解剂，如羟甲基淀粉钠、羟丙基纤维素、微粉硅胶等；润滑剂，如硬脂酸镁、滑石粉等。

本发明的青蒿琥酯盐的制备方法包括如下步骤：

在水或/和有机醇溶剂中，pH为6～8.5的条件下，将青蒿琥酯与碳酸氢钠、碳酸钠、氢氧化钠、碳酸氢钾、碳酸钾或氢氧化钾中的一种反应，优选碳酸氢钠，反应温度为0～30℃，反应时间为5～60分钟，收集反应产物，得白色结晶粉末，青蒿琥酯钠盐，收率可达到97％。

所说的有机醇溶剂选自C₂～C₄的一元醇，优选乙醇或异丙醇；

选用碳酸氢钠、氢氧化钠、碳酸氢钾或氢氧化钾时，青蒿琥酯与碳酸氢钠、氢氧化钠、碳酸氢钾或氢氧化钾的摩尔比为1～4.6，优选理论配比的1.05倍；

选用碳酸钠或碳酸钾时，青蒿琥酯与碳酸钠或碳酸钾的摩尔比为0.5～9.2，优选理论配比的0.525倍；

按照本发明，最好将碳酸氢钠、碳酸钠或氢氧化钠配制成摩尔浓度为0.1～2mol/L的水溶液，以方便使用；

由于青蒿琥酯钠盐易溶于水，其冻干粉针剂既可作静脉注射，也可作肌肉注射。本发明的青蒿琥酯钠盐在20℃以下稳定，可用于治疗恶性疟、脑型疟及各种危重疟疾的抢救和治疗；每天注射一次65mg，连用5-7天；第一天剂量加倍，总剂量390-520mg；儿童按1.3mg/kg计算药量，具体可根据患者的年龄、病情由医师决定。

本发明的青蒿琥酯钠盐除了用于抗疟，还可用于抗血吸虫，无名高烧、节育、免疫调节剂或抗癌。

本发明的青蒿琥酯钠盐毒性较小，通过动物试验，证明与青蒿琥酯具有相同的治疗作用和突出的治疗效果，其在水中的溶解度大大高于青蒿琥酯，医护人员可按常规注射操作，使用方便。

具体实施方式

                             实施例1

青蒿琥酯分子量：384.43

青蒿琥酯6g(0.0156mol/L)，加18ml水，再加入摩尔浓度为0.5mol/L的碳酸氢钠水溶液33ml，于25℃下搅拌反应20分钟，反应毕，以活性炭脱色、过滤，滤液冷冻干燥，得白色结晶粉末青蒿琥酯钠6.1g，收率96.2％。

元素分析：C₁₉H₂₇O₈Na(理论值％：C56.14，H6.71，Na5.66；实验值％：C55.94，H6.80，Na5.72)

IR(KCL)：ν3416，2928，1747，1582，1132，878cm^-1。

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ5.67-5.69(10-H)，5.56(12a-H)，2.44-2.48(15-H)，2.11-2.14(14-H)，1.29(3-CH₃)，0.89-0.90(6-CH₃)，0.77-0.78(9-CH₃)。MS：m/z406(M⁺)

青蒿琥酯钠的结构鉴定：

根据青蒿琥酯钠的质谱，高质量端的最强峰为m/z407，由于是正电离模式，故青蒿琥酯钠的分子质量为406。

在IR谱中，青蒿琥酯：3228cm^-1处缔合O-H键的伸缩强振动峰在青蒿琥酯钠中无吸收，同时青蒿琥酯钠：1581.5cm^-1处明显可见钠与羧酸反应生成盐的特征峰；¹H-NMR检测结果也表明，青蒿琥酯钠在12.5ppm处的-COOH峰消失，这些可以确定青蒿琥酯钠样品已形成-COONa结构。

UV谱表明：青蒿琥酯钠在50℃0.1mol/L氢氧化钠溶液反应1小时得到的UV谱与青蒿琥酯在相同条件下得到的UV谱是完全一致的，证明青蒿琥酯钠、青蒿琥酯在碱性条件反应得到同一最终产物；

¹³C-NMR表明青蒿琥酯钠有19个吸收峰，化学位移值与青蒿琥酯基本一致。

综上所述，可推断目标物已形成-COONa结构。

                             实施例2

青蒿琥酯分子量：384.43

青蒿琥酯38.4g(0.1mol)，加115ml乙醇，再加入105ml摩尔浓度为1mol/L的氢氧化钠水溶液，于30℃下搅拌反应30分钟，反应毕，加入活性炭脱色、过滤，浓缩、冷却，结晶、过滤、干燥，得白色结晶粉末青蒿琥酯钠37.6g。收率92.6％。

                             实施例3

青蒿琥酯38.4g(0.1mol)，加体积浓度为75％的乙醇水溶液115ml，再加入摩尔浓度为2mol/L的氢氧化钾溶液52.5ml，于室温下搅拌反应20分钟，反应毕，以少量活性炭脱色、过滤，浓缩、冷却，结晶、过滤、干燥，得结晶粉末青蒿琥酯钾盐35.9g。收率85％。

元素分析：C₁₉H₂₇O₈K 422.53(理论值％：C54.01，H6.45，K9.25；

实验值％：C54.05，H6.35，K9.37)

IR(KCL)：v3416，2928，1747，1582，1132，878cm^-1。

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ5.67-5.69(10-H)，5.56(12a-H)，2.44-2.48(15-H)，2.11-2.14(14-H)，1.29(3-CH₃)，0.89-0.90(6-CH₃)，0.77-0.78(9-CH₃)。MS：m/z423(M⁺)

实施例4

冻干粉针剂的制备：

将实施例1的青蒿琥酯钠盐滤液计量灌装于西林瓶中，半盖胶塞，冷冻干燥，压塞，出箱，轧铝盖，即得冻干粉针剂。

                             实施例5

片剂：

将530克实施例1的青蒿琥酯钠盐，316克的微晶纤维素、106克羟丙基纤维素、13克羟甲基淀粉钠、5克微粉硅胶、5克硬脂酸镁混合粉碎，采用本领域公知的方法制备成为片剂10,000片。

每片重量为0.0975克，每片含青蒿琥酯钠盐0.053克，经检测，含量为标示量的99.4％。

薄膜包衣片：

将530克实施例1的青蒿琥酯钠盐，316克的微晶纤维素、106克羟丙基纤维素、13克羟甲基淀粉钠、5克微粉硅胶、5克硬脂酸镁混合粉碎，采用本领域公知的方法制备成为素片10,000片，再以5克IV丙烯酸树脂、乙醇适量，在包衣机内包衣即得青蒿琥酯钠盐薄膜包衣片。

每片重量为0.098克，每片含青蒿琥酯钠盐0.053克，经检测，含量为标示量的99.2％。

胶囊剂：

将530克实施例1的青蒿琥酯钠盐，1470克的乳糖、3％的羟丙基纤维素，采用本领域公知的方法制备成为胶囊10,000粒，每粒重量为0.21克，其中青蒿琥酯钠盐0.053克，经检测，含量为标示量的99.8％。

                             实施例6

实施例1的化合物的抗疟药效学试验：

将实施例4的青蒿琥酯钠冻干粉针剂注射剂对实验动物进行试验，结果表明，青蒿琥酯钠注射剂对鼠疟、猴疟、及体外培养的恶性疟原虫红内期无性体均显示出很强的杀灭血液裂殖体的作用，而且具有高效、速效以及与氯喹无交叉耐药性等特点。其杀虫速度比目前临床常用的抗疟药都快。

试验方法：

青蒿琥酯钠、二盐酸奎宁各设33.5、10.6、3.35mg/kg三个剂量组.每组三只猴；每只猴静脉接种5×10⁸被寄生红细胞.当疟原虫红细胞寄生率达到2.5％时开始给药.经小腿后隐静脉缓慢匀速推注；按此法每日给药一次，连续7天，首次给药后每4小时涂厚薄血片一次，24小时后每8小时涂一次；转阴后每天涂一次至15天，15天后隔日一次.检查疟原虫红细胞寄生率.

实验用体重为2000-3000克的恒河猴进行，把恒河猴分成3组，每组3只，与二盐酸喹宁静脉注射剂、青蒿琥酯注射剂平行对比，治疗诺氏疟原虫感染的恒河猴。

采用静脉注射的方法，将实施例4的制剂与二盐酸喹宁注射于恒河猴，

实施例4的制剂的剂量为，二盐酸喹宁的剂量33.6mg/kg，青蒿琥酯注射剂的剂量3.36mg/kg，实施例4的制剂的剂量仅为二盐酸喹宁的1/10，经检测，其杀虫速度仍优于喹宁，使原虫减少90％的时间，青蒿琥酯钠(3.36mg/Kg)13.2小时，而喹宁(33.6mg/Kg)为50.5小时，阴转时间分别为40小时和104小时。试验结果见表1。

表1

青蒿琥酯钠和二盐酸奎宁静脉注射对诺氏猴疟原虫

红内期无性体的杀虫速度结果的统计表

药物	剂量	动物数(只)	给药前原虫平均寄生率‰	平均原虫下降50％时间(h)	平均原虫下降90％时间(h)	转阴时间(h)
							青蒿琥酯钠(实施例4)	33.610.63.36	333	38.025.815.4	6.44.97.0	17.313.913.2	564240
二盐酸喹宁	33.610.63.36	333	29.832.223.7	6.93.310.2	50.5未达90％未达90％	104未转阴未转阴

青蒿琥酯钠和氯喹各设9个剂量组，仿Trager和Jensen氏微量血培养法(1976)。置37℃恒温下连续培养48小时，涂薄血片镜检计数5000个红细胞内感染的乘原虫数，求出各浓度药井，以对照井原虫平均寄生率为100％，计算各剂量组的减虫率，

用回归方法求出Ec50及Ec90.)结果表明：青蒿琥酯钠对体外培养的人体恶性疟原虫Fcc-1株的半数有效浓度Ec₅₀为2.71×10^-9M/ml，也优于氯喹((3.70×10^-9M/ml)。

一般药理：

青蒿琥酯钠在40倍抗鼠疟SD₉₀剂量(200mg/Kg)下，对小鼠神经系统无明显影响；只有在剂量增至300mg/Kg时才出现反应迟钝等神经系统抑制现象。16倍SD₉₀剂量时对豚鼠、兔、狗、猴也无明显影响；而在剂量增至32倍SD₉₀(160mg/Kg)时，家兔才出现先兴奋后抑制的脑电波。

青蒿琥酯钠在32倍以下鼠疟SD₉₀剂量下对兔、狗的呼吸、血压、心率、心电图均无明显影响；当剂量增至64倍SD₉₀时，可见呼吸频率和心率变慢，血压下降，但心电图仍正常。

青蒿琥酯钠剂量在ED₉₀的8倍时，对鼠、豚鼠、兔、狗、猴等实验动物的神经、呼吸、循环等系统未显示出药理活性。

                             实施例7

毒理试验：

本品的安全范围较大，其半数致死量(LD₅₀)在小鼠为769.0±69.7mg/Kg，大鼠为553.1±26.5mg/Kg，化疗指数为792.8，安全指数为79.9，狗单次静脉注射青蒿琥酯钠，剂量在33mg/Kg，未见任何毒性作用，50mg以上/Kg时，仅有网织红细胞一过性轻度下降，给狗静脉注射，剂量为11.25mg/Kg/天，连续14天，无明显毒性作用，剂量加倍，出现轻度中毒反应，剂量增至45mg/Kg天时，可致重度中毒，其表现为外周血网织红细胞减少，停药后一周恢复正常。

Ames实验，小鼠骨髓微核试验以及V79细胞染色体畸变试验，结果均为阴性，表明该药无致突变作用。

给雄性大鼠皮下注射青蒿琥酯钠(6.5，13，26mg/Kg)，连续90天，对其生殖功能没有影响，但给妊娠大鼠皮下注射青蒿琥酯钠呈现一定的胚胎毒作用，表现为胚胎吸收。

                             实施例8

药代动力学：

对动物和人的药代动力学进行了研究。静脉注射后用RIA法测定血药浓度。兔血药浓度半衰期为12～23分钟，狗20～30分钟。本药在动物体内分布较广，以肠、肝、肾较高。尿、便排泄物中仅有少量，主要为代谢产物。药代动力学研究表明，血药浓度时程为双指数函数(二室开放模型)衰减，末相消除半衰期平均为38分钟。尿药排泄速度在给药后30～80分钟达高峰，其下降的时程变化与血药时程变化基本一致，亦呈双指数函数衰减，但末相消除较缓慢，平均消除半衰。

Claims (10)

1.一种青蒿琥酯盐，其特征在于，结构通式为：

其中M代表Na或K。

2.根据权利要求1所述的青蒿琥酯盐，其特征在于，M代表Na或K。

3.根据权利要求2所述的青蒿琥酯盐，其特征在于，所说的青蒿琥酯盐为青蒿琥酯钠盐或青蒿琥酯钾盐。

4.一种药物制剂，其特征在于，含有治疗有效量的权利要求1、2或3所说的青蒿琥酯盐和医药学上可接受的载体。

5.根据权利要求4所述的药物制剂，其特征在于，所说的制剂为注射剂、冻干粉针剂、固体制剂如：片剂、胶囊剂、颗粒剂或口服液。

6.根据权利要求1、2或3所述的青蒿琥酯盐的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：在水或/和有机醇溶剂中，pH为6～8.5的条件下，将青蒿琥酯与碳酸氢钠、碳酸钠、氢氧化钠、碳酸氢钾、碳酸钾或氢氧化钾中的一种反应，优选碳酸氢钠，反应温度为0～30℃，反应时间为5～60分钟，收集反应产物。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所说的有机醇溶剂选自C₂～C₄的一元醇。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，将碳酸氢钠、碳酸钠、氢氧化钠、碳酸氢钾、碳酸钾或氢氧化钾配制成为摩尔浓度为0.1～2mol/L的水溶液。

9.权利要求1、2或3所述的青蒿琥酯盐在制备治疗抗疟、抗血吸虫、无名高烧、节育、免疫调节剂或抗癌药物中的应用。

10.权利要求1、2或3所述的青蒿琥酯盐的储藏条件为0～20℃。