CN1627942A - 黄花蒿离析苦艾素的方法 - Google Patents

Abstract

一种黄花蒿离析苦艾素的方法，尤指藉由黄花蒿植物药草所离析出的一种抗疟疾药剂，其中包括用乙醇提取药草，将水和己烷间的提取物分开，接着藉由蒸发结晶化得到苦艾素。所以本发明提供一种简单，迅速，经济效益及实用的方法于植物黄花蒿离析苦艾素的方法，同时产生的苦艾素有实质的数量与纯度消除习知技术的缺点。

Description

黄花蒿离析苦艾素的方法

技术领域

本发明涉及一种苦艾素离析的方法，尤指藉由黄花蒿植物药草所离析出的一种抗疟疾药剂，其中包括用乙醇提取药草，将水和己烷间的提取物分开，接着藉由蒸发结晶化使苦艾素从己烷相到产生实质上纯的苦艾素。

背景技术

苦艾素是一种倍半帖内酯的过氧化物，其具有抗疟疾的效能(KlaymanDL，1985，Science 228，1049)。根据临床研究，苦艾素及其半合成衍生物例如青蒿甲醚，青蒿琥酯和青蒿乙醚已经被使用于疟疾的治疗方面，其包含严重复杂、复合抗药、及侵脑性的疟疾。苦艾素及其衍生物在结构上与一般抗疟疾剂不同，因此没有抗药性和抗药力移转的问题。最近，已有报告指出可藉由化学合成产生苦艾素但其费用昂贵。

古老的方法(Klayman DL，Lin AJ，Acton N，Scovill JP，Hoch JM，MilhousWK&Theoharides AD，1984，Jour of Natural Products 47：715-717 and Rucker G，Mayer R&Manns D，1986，Planta Medica，3：245)其中包含用以石油醚提取植物原材然后借着色层分析法相对地将天然提取物层析于硅胶凝体上。最后将7.5％的乙酸乙酯混合入氯仿中用以洗提该层析柱而得到纯的苦艾素。

Later Singh A，Vishwakarma RA，Husain A，1988，Planta Medica 64，475-476提出用n-己烷提取植物的一部份然后藉由色层层析法将提取物层析于硅胶凝体上。在此例子中将乙腈与己烷混合用以进行洗提步骤。这些制备方法的主要缺点是在该程序中必须依赖色层分析法相对地将天然提取物层析于硅胶凝体上。因此在这程序中需要溶质与吸附剂的比率1∶44，所以费用是昂贵的。

另一种提取苦艾素的方法其中包含用己烷提取植物原材，然后分开己烷与乙腈之间的提取物，接着藉由色层层析法将乙腈相层析于硅胶凝体上(EIFerali FS，EISohli HN，1990，US Patent No.4,952,603)。对于较长的持续期间在己烷中慢速度提取乙腈需要热过滤器，而当进行分开步骤时，乙腈相对地成为昂贵的溶剂，增加生产苦艾素的费用。另一个缺点是该方法需要色层分析法来获得苦艾素。再一个缺点是青蒿酸会成为主要的，使之倾向用苦艾素进行洗提，因此影响苦艾素的纯度。

Jain DC，Tandon S，Bhakuni RS，Siddique MS，Kahol AP，Sharma RP，Kumar S，Bhattacharya AK，1999，US Patent No.5,955,084提议一个方法是藉由植物黄花蒿同时生产苦艾素与香精油。在该方法里提取苦艾素的基本方法论包含用以己烷提取植物原材，然后分开己烷与乙腈之间的提取物，接着藉由色层分析法将乙腈相层析于硅胶凝体上。此外该方法提议藉由水蒸馏从残留的榨渣提取香精油同时也描述一个青蒿酸的离析及其转换成苦艾素的方法。整个过程是由数个化学反应所复合混合的方法。然而某些问题依旧是没有解决，例如该方法消耗时间及费用昂贵，因为使用己烷作为提取溶剂，并藉由色层分析法分开己烷与乙腈之间的提取物。

Zhang J，Fan D and MaX(1994)Patent No.CN 1092073 A，提出一个藉由黄花蒿提取苦艾素的方法，包含以乙醇溶液(＜70％浓度)过滤黄花蒿的叶子，然后在一个连续的提取装置中藉由包含30％苯或乙酸乙酯的汽油提取过滤液。接着以活性碳将其漂白，最后使用乙醇浓缩及结晶苦艾素。在该方法中乙醇溶液体积大需要藉由包含30％苯或乙酸乙酯的汽油使乙醇分馏达到洁净以利回收。因此导致在乙醇中大部分提取化合物的转换：水的混合转换到汽油与苯的混合。浓缩汽油混合物后使用乙醇将苦艾素结晶化。在该方法中使用商业苯是不合适的因为可能有毒的影响。该方法在转换期间使用混合的溶剂所以之后不能再进一步使用。

Wheatley GW and Chapman TB，2001，US Patent No.6,180,105揭露生产苦艾素的另一种方法其中包含使用液态二氧化碳提取黄花蒿的干药草以及在结束后蒸发二氧化碳。该方法必须依靠液态二氧化碳装置(非常昂贵的装置)。

根据文献US Patent No.5,995,084得知藉由植物黄花蒿同时生产苦艾素与香精油的方法。前述发明中，从苦艾素未被盐基处理前青蒿酸是分开的。

根据文献No.09/538,892其中描述一种农业方法使植物黄花蒿的苦艾素达到最大产量。然而，该申请集中注意于植物栽种计划表的农业方法而不是苦艾素的提取。

以n-己烷石油醚为溶剂的提取方法会较花时间，而且还需要热过滤。这些溶剂本身是危险的。接着大部分的方法都使用色层分析法来获得苦艾素，这是主要导致生产费用提高的因素。

是以，由上可知，上述习知获取苦艾素的方法，在实际使用上，显然具有不便与缺失存在，而可待加以改善者。

因此，本发明人有感上述缺失之可改善，且依据多年来从事此方面的相关经验，悉心观察且研究，并配合学理之运用，而提出一种设计合理且有效改善上述缺失的本发明。

发明内容

本发明的主要目的，在于提供一种简单，迅速，经济效益及实用的方法于植物黄花蒿离析苦艾素而没用色层分析计的方法，同时产生的苦艾素有实在的数量与纯度消除习知技术的缺点。

为了达成上述之目的，本发明系对黄花蒿离析苦艾素提供一个方法，该方法包括：

(i)用非水极性溶剂提取黄花蒿的植物部份；

(ii)浓缩步骤(i)的提取物恢复极性溶剂；

(iii)加水至前述的浓缩提取物中；

(iv)加碳氢化合物溶剂分开步骤(iii)的水提取物成为一个水溶液层与一个有机层；

(v)从步骤(iv)溶液中分离有机层；

(vi)浓缩步骤(v)的有机层使获得多油液体；

(vii)加乙酸乙酯至步骤(vi)的多油液体中；

(viii)用以色彩吸收物质使步骤(vii)的溶液移除微绿的色素；

(ix)过滤该溶液移除色彩吸收物质；及

(x)蒸发该溶液之后接着藉由结晶化获得纯的苦艾素。

本发明的一个实施例，其中在步骤(i)中在提取时干叶子已被取得。

本发明的另一个实施例，在提取前叶子已成粉末的。

本发明还有另一个实施例，该非水的极性溶剂是由乙醇，甲醇，丙酮，异丁基甲烷及己烷所构成的群组中所选出的。

本发明再有另一个实施例，非水溶剂是乙醇。

本发明进一步的一个实施例，植物部分与非水溶剂的比率范围为1∶5到1∶10。

本发明更有一个实施例，用乙醇过滤药草持续4～6小时对植物部分的提取是有效用的。

本发明的另一个实施例，温度在20～50℃之间时将药草过滤是有效用的。

本发明的一个实施例，其中在步骤(ii)中乙醇提取物的体积比原先的体积减少从1/20th到1/100th。

本发明的另一个实施例，其中在步骤(ii)中于步骤(i)中溶剂的浓度重复使用后溶剂被恢复。

本发明还有另一个实施例，其中在步骤(iii)中加了四次数量的水至浓缩提取物中。

本发明还有另一个实施例，其中在步骤(iv)中该碳氢化合物溶剂是由戊烷，己烷与庚烷所构成的群组中所选出的。

本发明进一步的一个实施例，其中在步骤(iv)中碳氢化合物溶剂是己烷。

本发明更有一个实施例，其中在步骤(iv)中乙醇提取物水溶液与己烷比例为1∶1或2∶1。

本发明的另一个实施例，其中在步骤(v)中有机层被浓缩后的体积比原先体积减少1/20th到1/100th。

本发明的一个实施例，其中在步骤(vii)中10～20％(v/v)乙酸乙酯加入浓缩的己烷溶液中导致苦艾素结晶化。

本发明的另一个实施例，该色彩吸收剂是由硅藻土，活性化木炭与木炭所构成的群组中所选出的。

本发明还有另一个实施例，其中在步骤(x)中用以慢速的蒸馏并藉由结晶化得到苦艾素。

本发明的方法提供一种从黄花蒿植物族群离析苦艾素的改善方法。我们的方法包括以甲醇或乙醇来进行低温提取，一方面以快速与省能源来完成苦艾素的提取另一方面与惯常地使用己烷或石油醚进行提取的方法形成对比。在己烷或乙醚中进行提取是非常慢的而且需要热过滤超过数个小时。分开水和己烷之间的提取物是经济的并且此方法能增多苦艾素的提取物符合进步性，60～70％提取物的杂质离开水层并将苦艾素完全转换至己烷层。己烷馏分所得到的能于去除色彩步骤后直接结晶化而获得苦艾素，在此程序中不需使用色层分析法。因此本发明提供一种从黄花蒿植物族群离析苦艾素却不使用色层分析法的新方法。在温和情况进行提取方法会产生干净植物提取物以及避免苦艾素质量的降低。结果本发明该方法中每单位生物量回收的苦艾素比先前技术所需的费用大概只有一半而且也适合于小规模工业。

为了使贵审查委员能更进一步了解本发明为达成预定目的所采取的技术、手段及功效，请参阅以下有关本发明的详细说明与附图，相信本发明的目的、特征与特点，当可由此得一深入且具体的了解，然而所附图式仅提供参考与说明，并非用来对本发明加以限制者。

具体实施方式

一种黄花蒿离析苦艾素的方法，该方法包括：黄花蒿干的粉末叶子，能借着使用5到10倍体积的乙醇或甲醇非水的溶剂连续过滤4到6小时而被提取。该方法是从药草提取苦艾素可能需要使用同样溶剂比率到最大值重复3到4次。产生的提取物在真空下藉由蒸馏能浓缩到原来体积的1到5％。在提取方法中回收的溶剂能再次使用。将过量的水加入该浓缩物中使其有80％的水接下来分开水与己烷间的容量。分开水容量与己烷可以使用于比率为1∶1或2∶1v/v。用非极性溶剂分开水容量使用同样溶剂比率可重复3到5次为了确保最大量苦艾素转换到己烷馏分。在真空环境下被蒸馏之前结合己烷馏分可使其联合一起以获得原先体积的1～5％。浓缩液可为由亮到暗绿的多油液体。乙酸乙酯(10～20％v/v)加入该浓缩液中。用1～3％w/v色彩吸收物质活性木炭移除该液体中绿色素。获得微黄液体后移除活性化木炭并经由蒸发结晶化生产相当多地纯苦艾素而不需使用色层分析法。

本发明里的一个实施例干燥提取，以非水乙醇提取粉末叶子较先前使用己烷或二乙基乙醚溶剂有数个优点。其中提取速度快，提取物有较少数量的油腻物质，因为在精炼与结晶化步骤中油腻物质是个障碍物。

本发明的一个实施例是分开水和己烷间的提取物为了得到更多提取物有关于苦艾素以及从浓缩促进苦艾素的结晶化中移除许多杂质。

根据本发明的另一个实施例，使用水和己烷其比率为(1∶1或2∶1)，和己烷来进行乙醇提取物的分开，分开的程序可重复3～5次为了确保最大量的苦艾素转换至己烷层。该分开步骤结果为全部苦艾素转换至己烷层并伴随还原作用，也就是说只有原先提取物的30～35％重量是转换至己烷层。

根据本发明再有另一个实施例为己烷馏分可直接被使用于浓缩并与10～20％(v/v)的乙酸乙酯混合后藉由缓慢蒸发达到结晶化。

在习知技术里苦艾素的获得是凭借在己烷，石油醚中进行热提取，然而会花较多的时间。植物叶子的热提取需要用以更多的溶剂是危险的并且其提取物有更多染色物质与油腻物质，这些都是于精炼过程中的障碍物。反之，于室温下用乙醇来提取是快速的而且也可消除染色物质与油腻物质。分开己烷与20％乙腈水溶液之间的提取物导致苦艾素转换至乙腈水溶液层。藉由加入氯化钠在色层分析之前使其饱和而将水从乙腈水溶液层中分离出。在这乙腈的分离步骤费用是贵的。水与己烷结合，被使用于液体。液体的分离容易产生两个区分的层因为其密度不同。苦艾素的分离从经济观点比较其水与己烷结合会比习知技术的乙腈与己烷为一个更好的溶剂。分离的结果只有30～35％提取物的馏分余留在己烷里。所以苦艾素藉由蒸发结晶化可直接被结晶而不用色层分析法。

实施例1

苦艾素提取溶剂的选择

针对苦艾素的提取有不同的溶剂来测试为要选择一个最有效率的溶剂。在分离的管中分别地以甲醇，20％甲醇水溶液，乙醇，20％乙醇水溶液或己烷为溶剂提取黄花蒿10g干的粉末叶子。分别在2，4和6小时提取时间内要除去管中10ml的溶剂。在一个水浴上馏分被蒸发至干燥，提取物可溶于2ml溶剂与污渍(5μl)中并负载于薄层色层分析板上且与纯苦艾素溶解于个别溶剂1mg/ml中在一起。用以移动相己烷使薄层色层分析完成饱和于一个玻璃薄层色层分析槽中∶二乙醚(1∶1)，板子高15cm。之后藉由将板子浸入展开剂中(冰醋酸∶硫酸∶茴香醛，50∶1∶0.5)板子的干燥与污渍就显而易见，接着将板子加热至110℃持续15分钟直到苦艾素的污渍呈粉红色。对于定量，薄层色层分析双重波长型扫描机扫描结果薄层色层分析的污渍符合苦艾素其波长为540与610nm。结果得到在不同溶剂中提取出苦艾素的百分比并将其整理于表1。从表1中可以清楚看到纯的乙醇与甲醇提取苦艾素较己烷快速，然而，再过一段时间之后于甲醇与乙醇中的提取物苦艾素的浓度开始减少和己烷形成对比可能因为苦艾素分解或转化到另一个未知化合物。将水混合入甲醇中会导致提取苦艾素严重的衰退。乙醇与甲醇及己烷两者相比较下乙醇是可以在短时间下有效率提取更多的苦艾素。基于成本较低与高效率两个基础下乙醇将是一个合适的溶剂。

表1：在不同时间下用不同溶剂提取黄花蒿叶子。被提取的苦艾素数量表示为占整个干药草重量的百分比。

提取时间(小时)	在溶液中提取苦艾素的百分比
						甲醇	20％甲醇水溶液	乙醇	20％乙醇水溶液	己烷
	2	0.44	0.20	0.50	0.33						0.30
4						0.50	0.005	0.58	0.41	0.35
	6	0.50	0.005	0.59	0.45						0.56

实施例2

苦艾素的分离

纯的苦艾素(0.2g)被溶解于不同管中其中包含1∶1(v/v)两个不相溶的溶剂相混合，己烷与乙醇水溶液，乙醇浓度的变化从20到80％。在苦艾素完全溶于混合液之后，用以分离漏斗分离己烷与乙醇为两层。从不同测试管中藉由例1薄层色层分析测试在个别层中苦艾素含量百分比并将此结果整理于表2。

表2：数据显示在己烷与乙醇水溶液之间苦艾素的分离倾向。

分离的溶剂(1∶1v/v)	己烷层中含苦艾素的百分比	乙醇层中含苦艾素的百分比
			己烷∶20％乙醇水溶液	0	100
己烷∶40％乙醇水溶液	10	90
			己烷∶60％乙醇水溶液	70	30
己烷∶80％乙醇水溶液	100	0

本例子提出藉由维持高的比率苦艾素能选择性地从黄花蒿的乙醇提取物转换到己烷。从己烷馏分，苦艾素经由已知的蒸发结晶化方法可直接结晶化。

实施例3

在温度30℃下使用600ml的乙醇连续过滤超过四小时提取黄花蒿(100g)的干粉末叶子。使用相同溶剂比率重复四次提取的程序。结合的提取物于真空下浓缩至体积为50ml，然后再加水至浓缩的提取物中使体积增为250ml。之后用以250ml己烷分离四次。结合的己烷层于真空下减少成原先体积的5％并形成为暗绿色多油的液体。将20％v/v乙酸乙酯混合入该液体接着用以1％w/v活性木炭处理。该液体通过一张3mm华特曼滤纸过滤除去活性木炭。在过滤之后暗黄色液体需经过蒸发结晶化。蒸发结晶化后液体为白色，藉由真空过滤装置将针状物结晶体分离出并称重。最后整个结晶体产量为603mg。

实施例4

在温度30℃下使用1.0L的乙醇连续过滤超过四小时提取黄花蒿(100g)的干粉末叶子。使用相同溶剂比率重复四次提取的程序。结合的提取物于真空下浓缩至体积为80ml，然后再加水至浓缩的提取物中使体积增为400ml。之后用以250ml己烷分离四次。结合的己烷层于真空下减少成50ml并形成为暗绿色多油的液体。将20％v/v乙酸乙酯混合入该液体接着用1％w/v活性木炭处理。该液体被过滤如例3所述之后需经过蒸发结晶化。最后整个结晶体产量为605mg。

实施例5

在温度30℃下使用600ml的乙醇连续过滤超过四小时提取黄花蒿(100g)的干粉末叶子。使用相同溶剂比率重复四次提取的程序。结合的提取物于真空下浓缩至体积为50ml，然后再加水至浓缩的提取物中使体积增为250ml。之后用以125ml己烷分离五次。结合的己烷层于真空下减少成50ml并形成为暗绿色多油的液体。将20％v/v乙酸乙酯混合入该液体接着用1％w/v活性木炭处理。该液体通过一张华特曼滤纸过滤除去活性木炭。在过滤之后暗黄色液体需经过蒸发结晶化。蒸发结晶化后液体为白色，将针状物结晶体分离出并称重。最后整个结晶体产量为601mg。

实施例6

黄花蒿叶子提取过程如例3所述但在不同的温度20，30，40和50℃并于分开的玻璃瓶内下进行。每一个结合的提取物于真空下浓缩至体积为50ml，然后再加水至浓缩的每一个提取物中使体积增为250ml。之后用以250ml己烷个别地分离三次。结合的己烷层于真空下减少成它们原先体积的5％并形成为暗绿色多油的液体。将20％v/v乙酸乙酯混合入每一个液体接着用1％w/v活性木炭处理。该液体过滤及结果为暗黄色液体需于分开的玻璃瓶内个别地经过蒸发结晶化。最后将结晶分离出及称重。在温度为20，30，40和50℃结晶产量分别为410，603，600和550mg。

实施例7

在温度30℃下使用6.0L的乙醇连续过滤超过四小时提取黄花蒿(1.0Kg)的干粉末叶子。使用相同溶剂比率重复四次提取的程序。结合的提取物于真空下浓缩至体积为400ml，然后再加水至浓缩的提取物中使体积增为2.0L。之后用以2.0L己烷分离三次。结合的己烷层于真空下减少成300ml并形成为暗绿色多油的液体。将60ml乙酸乙酯混合入该液体接着用1％w/v活性木炭处理。该液体过滤及结果为暗黄色液体需经过蒸发结晶化。最后将结晶分离出及称重。整个苦艾素结晶体产量为5.95g。

实施例8

在温度30℃下使用600ml的甲醇连续过滤超过四小时提取黄花蒿(100g)的干粉末叶子。使用相同溶剂比率重复四次提取的程序。结合的提取物于真空下浓缩至体积为50ml，然后再加水至浓缩的提取物中使体积增为250ml。之后用以250ml己烷分离三次。结合的己烷层于真空下减少成原先体积的5％并形成为暗绿色多油的液体。将20％v/v乙酸乙酯混合入该液体接着用1％w/v活性木炭处理。该液体通过一张华特曼滤纸过滤除去活性木炭。在过滤之后暗黄色液体需经过蒸发结晶化。蒸发结晶化后液体为白色，藉由真空过滤装置将针状物结晶体分离出并称重。最后整个结晶体产量为320mg。

本发明方法的优点：

改善生产苦艾素的方法，本发明主要提供数个优点例如

1.用以乙醇进行提取是快速的并且节省时间。

2.在该提取制备方法中不需要加热所以能节省能源。

3.分离水与己烷之间的提取物以得到苦艾素是比乙腈与己烷为更好的选择因为是较经济的

4.在分离后己烷层不需使用色层分析法就可得到苦艾素的结晶化。

5.整个方法中比习知技术生产苦艾素的费用减少30～40％。

6.可避免于提取过程中因为使用商业等级己烷而使有毒化学污染物残留于苦艾素中。

7.不需用到液化二氧化碳昂贵的装置。

8.此法不需要非常大的基础设备，苦艾素的提取可在农业区域容易的有计划的实行。

9.在过程中溶剂可被恢复并重新使用所以整个方法是有效率及经济的。

以上所述，仅为本发明最佳之一的具体实施例的详细说明与图式，本发明的特征并不局限于此，并非用以限制本发明，本发明的保护范围应以下述申请专利的范围为准，凡附合本发明申请专利范围的精神与其类似变化的实施例，皆应包含于本发明范畴中，任何熟悉该项技艺者在本发明领域内，可轻易思及之变化或修饰皆可涵盖在以下本案的专利范围内。

权利要求书

(按照条约第19条的修改)

对于植物黄花蒿离析苦艾素的方法请求项1已经修正过包括用以非水的极性溶剂于低温下提取黄花蒿的植物部份。申请人修改的请求项指出于步骤(iii)，加水至浓缩提取物中得到大约80％水的提取物与步骤(iv)已被修改指出加碳氢化合物溶剂分开80％水的提取物成为一个水溶液层与一个有机层。

申请人恭敬地认为文件D1(Ronald J.Roth et al.：从黄花蒿离析青蒿酸)提供一个方法于高温情况下进行植物部分提取。相反的，本发明是在低温情况下进行植物部分提取，现在可看出修正请求项1的必须性。本发明的新颖性是在于低温下可进行提取的步骤。在温和情况进行提取方法会产生干净植物提取物以及避免苦艾素质量的降低。因此，申请人可以得到纯度较高的苦艾素，假如是D1方法是不可能的。并且，文件D1并没有加碳氢化合物溶剂分开提取物成为一个水溶液层与一个有机层的方法。

文件D2(EPO 908 460 A1)提供一个方法是藉由植物黄花蒿同时生产苦艾素与香精油。因此，可清楚看到本发明的目的完全与档D2不一样。此档没有提供加水至浓缩提取物中得到大约80％水的提取物与加碳氢化合物溶剂分开80％水的提取物成为一个水溶液层与一个有机层的方法。还有要注意的是在分离水与碳氢化合物溶剂之间的浓缩提取物步骤时，杂质会留于水中而苦艾素会转移到有机层。因此，使有机层有浓度高的苦艾素。另外，申请人认为水提取物的浓度在苦艾素转移到有机层中扮演一个重要的角色。申请人意外的发现80％苦艾素的浓度转移到有机层。这方面已清楚说明于表2。

由以上修正的观点，申请人恭敬地认为本发明与文件D1及D2是不一样的。

最后，申请人认为该请求项的修正是在原先说明书的范围内并没有多加材料或事物于该修正请求项内。事实上，请求项修正的部分是属于限制的性质。

1、一种黄花蒿离析苦艾素的方法，该方法包括：

(i)用非水极性溶剂于低温下提取黄花蒿的植物部份；

(ii)浓缩步骤(i)的提取物恢复极性溶剂；

(iii)加水至前述的浓缩提取物中得到大约80％水的提取物；

(iv)加碳氢化合物溶剂分开步骤(iii)80％水的提取物成为一个水溶液层与一个有机层；

(v)从步骤(iv)溶液中分离有机层；

(vi)浓缩步骤(v)的有机层使获得多油液体；

(vii)加乙酸乙酯至步骤(vi)的多油液体中；

(viii)用以色彩吸收物质使步骤(vii)的溶液移除微绿的色素；

(ix)过滤该溶液移除色彩吸收物质；及

(xi)蒸发该溶液之后接着藉由结晶化获得纯的苦艾素。

2、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中在步骤(i)中在提取时干叶子已取得。

3、如权利要求2所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中在提取前叶子已成粉末的。

4、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中该非水的极性溶剂是由乙醇，甲醇，丙酮，异丁基甲烷及己烷所构成的群组中所选出的。

5、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中非水溶剂是乙醇。

6、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中植物部分与非水溶剂的比率范围为1∶5到1∶10。

7、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中用乙醇过滤药草持续4～6小时对植物部分的提取是有效用的。

8、如权利要求5所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中温度在20～50℃之间将药草过滤是有效用的。

9、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中在步骤(ii)中极性提取物的体积比原先的体积减少1/20th到1/100th。

10、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中在步骤(ii)中于步骤(i)中浓度重复使用后溶剂被恢复。

11、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中在步骤(iii)中加了四次数量的水至浓缩乙醇提取物中。

12、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中在步骤(iv)中该碳氢化合物溶剂是由戊烷，己烷与庚烷所构成的群组中所选出的。

13、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中在步骤(iv)中碳氢化合物溶剂是己烷。

14、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中在步骤(iv)中乙醇提取物水溶液与己烷比例为1∶1或2∶1。

15、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中在步骤(v)中该有机层被浓缩后的体积比原先体积减少1/20th到1/100th。

16、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中在步骤(vii)中10～20％(v/v)乙酸乙酯加入浓缩的己烷溶液中导致苦艾素结晶化。

17、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中该色彩吸收剂是由硅藻土，活性化木炭与木炭所构成的群组中所选出的。

18、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中在步骤(x)中用以慢速的蒸馏并藉由结晶化得到苦艾素。

Claims (18)

1、一种黄花蒿离析苦艾素的方法，该方法包括：

(i)用非水极性溶剂提取黄花蒿的植物部份；

(ii)浓缩步骤(i)的提取物恢复极性溶剂；

(iii)加水至前述的浓缩提取物中；

(iv)加碳氢化合物溶剂分开步骤(iii)的水提取物成为一个水溶液层与一个有机层；

(v)从步骤(iv)溶液中分离有机层；

(vi)浓缩步骤(v)的有机层使获得多油液体；

(vii)加乙酸乙酯至步骤(vi)的多油液体中；

(viii)用以色彩吸收物质使步骤(vii)的溶液移除微绿的色素；

(ix)过滤该溶液移除色彩吸收物质；及

(xi)蒸发该溶液之后接着藉由结晶化获得纯的苦艾素。

2、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中在步骤(i)中在提取时干叶子已取得。

3、如权利要求2所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中在提取前叶子已成粉末的。

4、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中该非水的极性溶剂是由乙醇，甲醇，丙酮，异丁基甲烷及己烷所构成的群组中所选出的。

5、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中非水溶剂是乙醇。

6、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中植物部分与非水溶剂的比率范围为1∶5到1∶10。

7、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中用乙醇过滤药草持续4～6小时对植物部分的提取是有效用的。

8、如权利要求5所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中温度在20～50℃之间将药草过滤是有效用的。

9、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中在步骤(ii)中乙醇提取物的体积比原先的体积减少1/20th到1/100th。

10、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中在步骤(ii)中于步骤(i)中浓度重复使用后溶剂被恢复。

11、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中在步骤(iii)中加了四次数量的水至浓缩乙醇提取物中。

12、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中在步骤(iv)中该碳氢化合物溶剂是由戊烷，己烷与庚烷所构成的群组中所选出的。

13、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中在步骤(iv)中碳氢化合物溶剂是己烷。

14、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中在步骤(iv)中乙醇提取物水溶液与己烷比例为1∶1或2∶1。

15、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中在步骤(v)中该有机层被浓缩后的体积比原先体积减少1/20th到1/100th。

16、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中在步骤(vii)中10～20％(v/v)乙酸乙酯加入浓缩的己烷溶液中导致苦艾素结晶化。

17、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中该色彩吸收剂是由硅藻土，活性化木炭与木炭所构成的群组中所选出的。

18、如权利要求1所述的黄花蒿离析苦艾素的方法，其中在步骤(x)中用以慢速的蒸馏并藉由结晶化得到苦艾素。