CN1608648A - 一种具有抗菌作用的中药组合物及制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种具有抗菌作用的中药组合物及制备方法。该中药组合物是由黄芩、黄柏、苦参、金银花、白头翁和白花蛇舌草的活性成分提取物与药用辅料组成的口服制剂。本发明中药组合物以中医理论为指导，配伍合理，并充分保留了各药物的有效成分，结合了现代提取、分析技术，使制剂有效成分可控，质量稳定，疗效确切。特别适用于制备治疗由支原体、衣原体感染所引起的生殖、泌尿系统疾病的药物。

Description

一种具有抗菌作用的中药组合物及制备方法

技术领域：

本发明涉及中药领域，具体涉及一种具有抗菌作用的中药组合物及制备方法。

背景技术：

支原体和衣原体可引起人体的多系统疾病。近年来，非淋菌性尿道炎NGU的发病率在上升，尤其是沙眼衣原体CT和解脲脲原体UU所引起的NGU正备受关注。据国外流行病症调查，青少年女性的CT感染率占40％，日本保田仁介等1988年报道盆腔炎病人中宫颈及子宫内膜CT的检出阳性率为20-40％。我国自1995年以来开展了生殖支原体分离培养及PCR技术进行快速诊断研究，研究发现UU在我国已婚妇女宫颈及阴道携带率相当高，为33-75.8％。由于支、衣原体等泌尿系统感染所引起的一系列疾病，如不孕症等，给社会和家庭带来了沉重的影响。多年来，西药抗菌素的广泛使用，给患者带来了一线生机。然而，目前临床上抗菌素的不规范使用，以至耐药菌株的产生，对广大支、衣原体感染者来说简直是雪上加霜。对此，目前临床上按中医传统理论组方进行治疗，取得很好疗效，但由于临床上组方混乱，使用麻烦，给患者带来许多不便。

由支原体、衣原体感染所引起的生殖系统、泌尿系统疾患在临床上一般无细菌感染引起疾患的起病急、症状重，它往往症状轻，只有不适感，甚至无明显症状，病程长，一般抗生素无明显疗效，而且易反复发作，会引起不孕不育症及习惯性流产等其它疾病。从中医理论分析，此系热毒为患，挟湿挟瘀。其邪毒聚于下焦，郁而发热，久而成瘀。使气机不制，浊阴不齐而病情缠绵不愈。

发明内容：

本发明所要解决的技术问题是在中医理论的基础上，合理组方，提供一种疗效确切，质量稳定，副反应少的具有抗菌作用的中药组合物。

本发明公开的具有抗菌作用的中药组合物，是由黄芩、黄柏、苦参、金银花、白头翁和白花蛇舌草的活性成份提取物与药用辅料组成的口服制剂。

本发明所述的活性成份提取物的生药重量百分比配方为10-30％黄芩、10-30％黄柏、8-15％苦参、10-30％金银花、10-30％白头翁和10-30％白花蛇舌草。

本发明所述的药用辅料为药物制剂制备中常用的药用辅料。

本发明所述的口服制剂为医学上可接受的各种制剂形式包括颗粒剂、胶囊剂、片剂及口服液等。

本发明活性成份配方中黄芩性味药寒，泻湿热为君，本草正曰：“黄芩枯者清上焦之火，实者凉下焦之热”，本草正疏曰：“黄芩，其性清肃所以祛邪，味药所以燥湿，阴寒所以能胜热，所以主治清热”。故为君。

黄柏，能“洲乙土之湿热，清乙木之郁……，而苦参有燥湿，祛风杀虫之效，二者同臣药。

金银花味甘寒，善化毒(《本草正》)，且泻中有补(《本草逢源》)，白头翁味苦又薄，合经文之中轻清发散之旨，达清热消瘀之目的，加上白花蛇舌草利湿解毒，同为佐使药，助黄芩黄柏苦参，达清热解毒，祛湿散瘀之功效。

本发明各生药相互配伍，相益得彰。此六味药药性皆寒都有清热之作用，同时又都有或燥或热的祛湿功能，紧紧抓住湿热为患之病因病机，《本草纲目》曰：“……热是风，湿是火也……”共奏清热祛湿之功效，解决主要矛盾。

同时本配方中一药有多效功能，能治兼症，同时各药性温和，配伍一起达到祛邪不伤正的目的。

本发明所要解决的另一技术问题在于提供上述中药组合物的制备方法。

本发明具有抗菌作用的中药组合物的制备包括下列步骤：

1、活性成份提取物制备

按配方量将黄芩、白头翁及白花蛇舌草用4-8倍量50-80％乙醇回流提取2次，合并滤液备用，药渣与黄柏、金银花、苦参一起加6-10倍量水煎煮二次，得滤液，合并两次的滤液，回收乙醇，浓缩成稠浸膏；

2、制剂制备

取上述活性成份提取物，按常规方法制成各种口服制剂，制剂采用薄层色谱法鉴别黄芩苷、绿原酸、熊果酸和苦参碱，用高压液相法测定黄芩苷的含量，控制单位剂量制剂黄芩苷的含量大于8mg。

本发明根据各生药的特性确定了上述制备方法：

黄芩为唇形科植物黄芩Scatellaria baicalensis Georgi的干燥根。从黄芩中已发现41种黄酮类化合物，其中黄芩苷和汉黄芩苷为黄芩的特征化学成分，该类成分溶于热水、乙醇，不溶于温水和冷水，若与其它药混煎后，滤过时易进入滤饼被作为杂质除去，损失较大，且已有实验研究表明，当黄芩与黄柏合并提取时，黄柏中的小檗碱、药根碱可与黄芩苷、汉黄芩苷生成分子量较大的水不溶物而析出；同时，药理实验也证明沉淀物确有药效作用。因此，黄芩采用乙醇提取，其残渣再用水提的方法。

白头翁为毛茛科植物白头翁Pulsatilla chinesis(Bge.)Regel的干燥根。主含原白头翁素(protoanemonin)、白头翁素(anemonin)等，这些成分不溶于水，通常提取方法为醇提取，因此采用醇提取，残渣用水提。

白花蛇舌草为茜草科(Rubiaceae)耳草属植物白花蛇舌草Hedyotis diffusaWilid的全草，主要含有熊果酸、齐墩果酸、豆甾醇、黄酮类等成分，实验证明黄酮类、熊果酸等成分易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯等有机溶剂，其醇提取效率明显高于水提取，故白花蛇舌草采用乙醇提取，残渣再用水提取的方法。

黄柏为芸香科植物黄皮树Phellodendron chinense Schneid.或黄檗Phellodendron amurense Rupr.的干燥树皮。主含小檗碱、药根碱等属季铵盐类，可溶于水。

金银花为忍冬科植物忍科Lonicera japoinca Thunb.、红腺忍冬Lonicera hypoglauca Miq.、山银花Lonicera confusa DC.或毛花柱忍冬Lonicera dasystyla Rehd.的干燥药蕾或带初开的花。主含绿原酸、异绿原酸及绿原酸四乙酰化合物等，在水中溶解性好，一般为水提取。

苦参为豆科植物苦参Soophora flavescens Ait.的干燥根。主要含苦参碱、氧化苦参碱和野靛碱等多种生物碱，均溶于水。其煎剂(8％)、水浸剂(1∶3)在体外对某些常见的皮肤真菌有不同程度的抑制作用，1％苦参碱对痢疾杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、乙型链球菌及金黄色葡萄球菌均有明显抑制作用，可见其抗菌消炎有效成分均溶于水，可用水提取之。

考虑到复方药物成分的复杂性，为了保证疗效，使提取工艺更合理有效，本发明根据药物所含化学成分及其药理作用，进行提取工艺的初步筛选，设计了7个不同的工艺方法，并以相同剂量给小鼠灌胃，观察药物的抗炎作用。

药物对抗H⁺所致毛细血管通透性增高的0D值的测定方法：取健康昆明小鼠100只随机均分10组，分别按3.0g/kg剂量对小鼠灌胃给药，给药后1小时后小鼠尾静脉静注1％伊文思蓝生理盐水溶液0.1ml/10g体重，立即腹腔注射0.6％HAc0.2ml/只，20分钟后脱颈椎处死，用10ml生理盐水分2次洗涤腹腔，吸管吸出洗涤液，3000rpm离心15分钟，取上清液于紫外分光光度计波长为590nm处比色测定吸光度。结果见下表1。

表1不同提取工艺的所得浸膏药效结果(各处方均以相同处方量设计单位)

名称	工艺一	工艺二	工艺三	工艺四	工艺五	工艺六	工艺七
								黄芩黄柏白头翁白花蛇舌草金银花苦参	全部水提，共提取2次，每次2小时。	全部20％醇提，共提取2次，每次2小时。	全部50％醇提，共提取2次，每次2小时。	全部80％醇提，共提取2次，每次2小时。	白头翁、白花蛇舌草醇提，提取2次，每次2小时，药渣合并其它药物水提，提取2次，每次2小时。	白头翁、白花蛇舌草醇提，药渣弃去，其它药物水提，提取2次，每次2小时。	白头翁、白花蛇舌草、黄芩醇提，提取2次，每次2小时，药渣合并其它药物水提，提取2次，每次2小时。
药效学抗炎指标OD值	0.129±0.025	0.137±0.018	0.156±0.021	0.164±0.020	0.124±0.020	0.139±0.030	0.115±0.034

从上述结果可知，提取工艺七最佳，因此本发明确定将方中药材有效成分分成二个部分提取，即：黄芩、白头翁和白花蛇舌草用乙醇提取，三味药醇提取后的残渣再和其它三味药黄柏、苦参及金银花一起用水煮提取。

本发明所要解决的再一技术问题是公开上述中药组合物在制备治疗由支原体、衣原体感染所引起的生殖、泌尿系统疾病药物中的应用。

本发明所述治疗由支原体、衣原体感染所引起的疾病，尤其是指解脲脲原体(UU)和沙眼衣原体(CT)引起的非淋菌性尿道炎，包括：尿频尿急尿短腹胀的非淋球菌性尿道炎及黄带，阴道不适伴下腹胀痛等非细菌性阴道炎附件炎等妇科疾患。

用本发明中药组合物胶囊剂(抗衣支胶囊)进行有关药效学试验：

一、实验材料

1、药物

本发明制剂抗衣支胶囊，注射用乳糖酸阿奇霉素1.0g/瓶，罗红霉素胶囊，150mg/粒，地塞米松片，0.75mg/片，氢氯噻嗪片，25mg/片，复方阿司匹林片0.5g/片，注射用硫酸庆大霉素，8万单位/2ml。

2、实验菌株

解脲脲原体(UU)标准株，ATCC27618，东南大学公共卫生学院提供。26株泌尿生殖道Ct菌株均由中山医科大学附属第一医院皮肤科采自病人，经MeCoy细胞培养分离得。

3、培养基

UU培养基，南京新创生物制品公司，进口分装。MeCoy细胞由中山医科大学免疫教研室提供。RPMI1640培养基，Gibco公司生产。

4、动物

大鼠：SD，体重130～150g，♀♂各半，由中科院上海实验动物中心提供。

小鼠：ICR，体重13～15g、18～22g，♀♂各半，由中科院上海实验动物中心提供。

二、方法与结果

1、抑菌作用

1.1体外抗UU试验：在96孔聚乙烯板上以UU培养基倍比稀释待检药物和对照药物，各孔药液量为180ul，具体药物浓度见下表。每孔接种浓度为10⁴CCU的UU培养物20ul，加盖密封。同时设立药物本底对照和阴、阳性对照。接种后置37℃、5％CO₂温箱中，24-48h后观察结果。培养液变红色为UU生长阳性，不变为阴性，说明UU已被抑制，所有阴性孔中最高稀释浓度为该菌株的最低抑菌浓度(MIC)，重复实验2次，取平均值。结果见表2。表2结果显示，抗衣支胶囊对UU的体外敏感性较高，其MIC浓度为7.81mg/ml。

                             表2、药物稀释浓度及试验结果

药物                             待检药浓度(mg/ml)                               MIC

              250   125   62.5  31.25  15.62   7.81   3.91   1.95   0.98   0.49  (mg/ml)

抗衣支胶囊1   -     -     -     -      -       -      +      +      +      +     7.81

注：“+”表示UU生长，“-”表示UU被抑制未生长。

1.2体外抗CT试验：首先以10倍稀释Ct菌株，将不同稀释度的菌液接种于96孔预先准备好的单层MeCoy细胞培养板中使之在37℃条件下培养48h，染色后使每个孔产生4.5×10³包涵体数量的最大稀释度为滴定浓度。然后在形成致密单层MeCoy细胞的96孔板中第1～11孔加入上述滴定浓度的Ct标准株50ul。此96孔板在室温下2000g离心1小时后置37℃体积分数为5％CO₂温箱中孵育2小时。然后吸掉上清液，用不含抗生素营养液配制的按浓度梯度125、62.5、31.3、15.6、7.81、3.9、1.96、0.98、0.49、0.25mg/ml共10个浓度的中药煎剂100ul分别加入2～11孔。第1和第12孔加入不含抗生素营养液，使每孔液体体积均为200ul。第1孔为阳性对照，第12孔为阴性对照。整块板室温下2000g离心1小时后置37℃体积分数为5％CO₂温箱中培养48小时。最后弃上清液，甲醇固定，碘染色，在倒置显微镜下观察结果。结果判定：在光镜下可见包涵体在细胞浆内染成棕黄色，镜下复孔均未见包涵体的最低稀释度为该中药的最小抑菌浓度(MIC)。参照标准：当MIC≤7.81mg/ml生药浓度时为较高敏感；当MIC在7.81-125mg/ml生药浓度时为中度敏感；当MIC＞125mg/ml生药浓度时为不敏感。微量细胞培养法和微量稀释法测定中药抗衣支胶囊及对照组对Ct的MIC值见表3。表3结果显示：Ct对抗衣支胶囊具有较高的敏感性，其MIC≤3.91mg/ml；Ct对对照药阿齐霉素极为敏感，MIC≤4ug/ml。

           表3各药物的体外抗沙眼衣原体活性情况

中药                     药物浓度(mg/ml)                                              MIC

                                                                                      (mg/ml)

              0.05   0.25  0.49  0.98  1.96  3.91   7.81   15.6   31.3  62.5  125

              ug

抗衣支胶囊    0      0     0     2     16    24      -      -     -     -      -      0.98-3.91

阿齐霉素      26     -     -     -     -     -       -      -     -     -      -      -

阴性对照      0      0     0     0     0     0       0      0     0     0      0      0

注：表中数字代表该药物在某浓度下被抑制的菌株数，“-”为非最低抑菌浓度。

1.3体内抗CT试验：参考文献，将动物随机分为六组：模型组、正常对照组、阳性对照组(罗红霉素组)、小剂量组(1.5g/kg)、中剂量组(3.0g/kg)和大剂量组(5g/kg)，每组10只。除正常对照组外，各组动物在阴道内以无菌注射器接种0.1mlCt接种液，每天一次，连续四天。动物感染后第五天，各组动物按表4所示剂量灌胃给药，每天一次，连续一周。观察动物外阴部红肿及分泌物情况，一周后处死动物，剖取子宫、卵巢等做病理检查。各组动物在给药后的症状观察见表4，动物病理检查结果见表5。

           表4各组动物在给药后的主观症状

                  剂量            红                 肿               分泌物

组别

                  g/kg     感染后   给药后    感染后   给药后    感染后    给药后

阴性对照组        -        0        1         0        0         0         0

模型对照组        -        8        7         9        7         9         7

抗衣支胶囊        1.5      7        2         7        2         5         1

抗衣支胶囊        3        8        1         7        2         6         0

抗衣支胶囊        5        8        2         7        1         6         0

罗红霉素组        5×10^-2 7        1         7        1         6         0

                        表5病理检查结果

组别              剂量(g/kg)       子宫                         卵巢                肾

                                                                可见各级卵泡

阴性对照组        -                未见异常                                         未见异常

                                                                (未见异常)

                                   8例子宫内膜可见炎细胞

模型对照组        -                                             未见异常            未见异常

                                   浸润，间质水肿

抗衣支胶囊        1.5              3例可见内膜炎细胞浸润        未见异常            未见异常

抗衣支胶囊        3                1例可见内膜炎细胞浸润        未见异常            未见异常

抗衣支胶囊        5                1例可见内膜炎细胞浸润        未见异常            未见异常

罗红霉素组        5×10^-2         1例可见内膜炎细胞浸润        未见异常            未见异常

2、抗炎作用

2.1对H⁺所致小鼠腹腔毛细血管通透性增加的作用

取健康小鼠50只随机均分5组，分别按表6所示剂量对小鼠灌胃给药，给药后1小时后小鼠尾静脉静注1％伊文思蓝生理盐水溶液0.1ml/10g体重，立即腹腔注射0.6％HAc0.2ml/只，20分钟后脱颈椎处死，用10ml生理盐水分2次洗涤腹腔，吸管吸出洗涤液，3000rpm离心15分钟，取上清液于紫外分光光度计波长为590nm处比色测定吸光度。结果见表6：给药组腹腔洗涤液吸光度值较对照组低，有显著性差异(P＜0.01或0.05)。提示抗衣支胶囊能明显抑制H+所致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进，有明显的抗急性炎症作用。

表6抗衣支胶囊对HAc致小鼠腹腔毛细血管通透性增高作用(X±S，n＝10)

                  剂量               动物数    吸收度

组别

                  (g/kg)             (只)      (OD值)

NS                -                  10        0.134±0.060

抗衣支胶囊        1.5                10        0.089±0.053^*

抗衣支胶囊        3.0                10        0.074±0.018^**

抗衣支胶囊        4.5                10        0.066±0.014^**

APC片             0.01               10        0.045±0.014^**

2.2对大鼠棉球肉芽肿的影响

取体重130～150g健康大鼠50只，♀♂各半，随机分为五组，分别按表7所示剂量对大鼠灌胃给药，对照组给同等剂量的生理盐水，每天一次，连续14天。于给药后第三天，各组动物用乙醚吸入麻醉，腹部用碘酒消毒，酒精脱碘。沿大鼠腹中线切1cm小口，持眼科镊将20mg的高压灭菌棉球(滴加庆大霉素0.2ml)从切处植入一侧腹股沟处，缝合皮肤切口。末次给药后1h，大鼠乙醚麻醉，打开切口，取出棉球，剔除脂肪，称重，并在烘箱60℃烘干，再称重，减去棉球原重量，即得肉芽肿湿重和干重。结果见表7。表7结果显示，大鼠埋植棉球11天即有肉芽肿形成，抗衣支胶囊中、大剂量组均可明显减轻肉芽肿的增生，与空白对照组相比有显著性差异(P＜0.01或0.05)。

表7抗衣支胶囊对大鼠棉球肉芽肿的影响(X±S，n＝10)

                 剂量         动物数

组别

                                        肉芽湿重(g)           肉芽干重(g)

                 (g/kg)       (只)

空白对照组        -           10        0.294±0.029          0.112±0.044

抗衣支胶囊        1.5         10        0.256±0.057          0.090±0.012

抗衣支胶囊        3           10        0.233±0.068^*        0.075±0.023^**

抗衣支胶囊        4.5         10        0.185±0.058^**       0.086±0.020^*

地塞米松组        0.02        10        0.161±0.034^**       0.044±0.012^**

3、利尿作用

取体重160～180g大鼠50只，♀♂各半，随机分为五组，试验前轻压下腹部膀胱排空，每只大鼠灌胃给予3ml/100g(体重)生理盐水，同时各组按表8所示剂量灌胃给药，对照组给同等剂量的生理盐水，立即放入代谢笼内，一笼一只，收集0～2小时、2～4小时和4～6小时三个时间段的尿量(ml)，进行统计分析。结果见表8。表8结果显示，抗衣支胶囊大、中、小剂组均有不同程度的利尿作用，于给药后2～4小时较明显，与对照组比较有显著性差异(P＜0.05)。

表8抗衣支胶囊对水负荷大鼠尿量的影响(X±S，n＝10)

                  剂量           动物数                给药后尿量(ml)

组别

                  (g/kg)         (只)      0～2小时          2～4小时           4～6小时

空白对照组        -              10        2.93±0.87        1.35±0.81         1.08±0.36

抗衣支胶囊        1.5            10        3.65±1.01        2.04±0.66^*       1.15±0.75

抗衣支胶囊        3              10        3.70±0.76        2.07±0.86^*       1.17±0.50

抗衣支胶囊        4.5            10        3.60±0.81        2.12±0.38^*       1.21±0.44

氢氯噻嗪组        0.016          10        5.86±1.55^**     2.20±0.68^**      1.22±0.35

3、扶正作用

4.1对小鼠胸腺、脾脏重量的影响：取健康合格小鼠50只，体重14-18g，♀♂各半，随机分为5组，分别按表9所示剂量对小鼠灌胃给药，对照组给同等剂量的生理盐水，每天一次，连续10天。于末次给药后1h脱椎处死动物剖取胸腺和脾脏，立即称重，计算其脏器指数(g/10g体重)进行统计处理，结果见表9。表9结果显示，抗衣支胶囊大、中剂量组可使胸腺指数明显增高(P＜0.01或0.05)，其大、中、小剂量组均有明显增高脾指数的作用(P＜0.01或0.05)。

表9抗衣支胶囊对小鼠胸腺、脾脏重量的影响(X±S，n＝10)

组别              剂量(g/kg)     胸腺指数(g/Kg体重)      脾脏指数(g/kg体重)

正常对照组        -              1.77±0.55              4.66±1.34

抗衣支胶囊        1.5            2.29±0.46              6.16±1.18^*

抗衣支胶囊        3.0            2.39±0.65^*            6.19±0.83^*

抗衣支胶囊        4.5            2.80±0.55^**           6.43±2.04^**

30％人参组        3              2.66±0.70^**           6.12±1.03^*

4.2对小鼠碳粒廓清的影响：  取健康合格小鼠50只，体重18～22g，♀♂各半，随机分为5组，分别按表10所示剂量对小鼠灌胃给药，对照组给同等剂量的生理盐水，每天一次，连续10天。于末次给药后1h于每鼠尾静脉注射用NS稀释5倍的印度墨水0.1ml/10g，并在注射后1、5min于小鼠眼眶静脉丛取血20μl，溶入2ml 0.1％Na₂CO₃溶液中摇匀，以试剂空白调零，于670nm处比色测定OD值。脱椎处死动物剖取肝脾，立即称重，按文献^[6]方法计算K与a值。结果见表10。表10结果显示，抗衣支胶囊各给药组均有明显提高小鼠碳粒廓清率的作用，与对照组相比有显著性差异(P＜0.01或0.05)，即有抗高免疫功能的作用。

表10抗衣支胶囊对小鼠碳粒廓清的影响(X±S，n＝10)

组别              剂量(g/kg)    K值                   a值

正常对照组        -             0.021±0.011          5.07±0.72

抗衣支胶囊        1.5           0.037±0.013^*        6.44±0.86^**

抗衣支胶囊        3.0           0.037±0.022^*        6.74±0.90^**

抗衣支胶囊        4.5           0.044±0.019^**       6.54±0.79^**

30％人参组        3             0.045±0.017^**       7.60±0.91^**

三、讨论

非淋菌性尿道炎(NGU)是临床上常见的感染性疾病，以脾肾亏虚为本，湿热下注膀胱为标，在治疗上重在清热利湿。抗衣支胶囊具有清热、利湿、抗炎及扶正作用。实验结果显示：抗衣支胶囊体外抗UU和CT的MIC浓度分别为7.81mg/ml和3.91mg/ml，体内抑菌试验结果显示其有明显减轻CT所致的小鼠泌尿道炎症作用；抗衣支胶囊各剂量组均有不同程度的利尿作用，给药后2-4小时较明显，与对照组比较有显著性差异(P＜0.05)；抗衣支胶囊对H⁺所致小鼠腹腔毛细血管通透性增加的急性炎症和棉球肉芽肿性大鼠的慢性炎症均有明显的促进作用；抗衣支胶囊还有促进小鼠胸腺、脾脏生长及增加小鼠碳粒廓清率的作用。

用本发明中药组合物进行急性毒性试验：

经一日2次灌胃给药，所有动物存活，测得小鼠对抗衣支胶囊的最大给药量为232g_(生药)/kg，相当于临床一日实际用量的774倍。

用本发明中药组合物进行大鼠长期毒性试验：

分别以25.9g(生药)/kg(体重)，10.8g(生药)/kg(体重)，4.5g(生药)/kg(体重)对大鼠进行灌胃给药，对照组给予等体积蒸馏水，连续13周，每日观察一般状况，每星期测量体重1次。给药13周后，每组处死10只动物进行病理、血液学检查、血液生化检查。剩余动物(每组10只)停药后继续观察3周，再次进行血液学、病理学及血液生化检查。结果：大鼠活动正常，未出现明显异常或死亡；血液学检查、血液生化学检查、尿常规检查、病理学检查等结果表明：抗衣支胶囊连续给药13周后，给药组脾指数与对照组相比明显增高(P＜0.01)，中、大剂量组胸腺指数均增加(P＜0.01)；停药3周后，各组动物血液学、血液生化学检查、病理学检查指标与对照组相比均无显著性差异(P＞0.05)。未发现与药物毒性有关的病理变化，说明本发明中药组合物安全无毒。

本发明中药组合物充分保留了各药物的有效成份，且配伍合理，以中医理论为指导，结合了现代提取、分析技术，使制剂有效成份可控，质量稳定，疗效确切。

具体实施方式：

实施例1、

处方

          黄芩            200g

          黄柏            200g

          白花蛇舌草      200g

          金银花          200g

          苦参            140g

          白头翁          200g

          制成            1000粒

制法

黄芩、白头翁及白花蛇舌草用6倍量70％乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过，合并滤液备用，药渣与黄柏、金银花、苦参一起加8倍量水煎煮二次，每次2小时，滤过，得滤液，合并两次的滤液，回收乙醇，浓缩成稠浸膏，60℃减压干燥，粉碎，加入淀粉适量，制成1000粒胶囊，即得，每粒胶囊含黄芩苷8mg。

实施例2、

处方

          黄芩          120g

          黄柏          240g

          白花蛇舌草    160g

          金银花        200g

          苦参          140g

          白头翁        140g

          制成          1000片

制法

黄芩、白头翁及白花蛇舌草用8倍量55％乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过，合并滤液备用，药渣与黄柏、金银花、苦参一起加7倍量水煎煮二次，每次2小时，滤过，得滤液，合并两次的滤液，回收乙醇，浓缩成稠浸膏，减压干燥，粉碎，加入淀粉适量，制粒，干燥，整粒，压片，包衣，制成1000粒片剂，即得。

实施例3、

处方

          黄芩            112g

          黄柏            72g

          白花蛇舌草      60g

          金银花          40g

          苦参            36g

          白头翁          80g

          制成            1000ml

制法

黄芩、白头翁及白花蛇舌草用5倍量67％乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过，合并滤液备用，药渣与黄柏、金银花、苦参一起加6倍量水煎煮二次，每次2小时，滤过，得滤液，合并两次的滤液，回收乙醇，浓缩成稠浸膏，加入蔗糖200g，苯甲酸纳3g，搅匀，再加蒸馏水配成1000ml，冷藏24小时，过滤，灌封，灭菌即得。

实施例4、含量测定

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2)为流动相，检测波长为280nm，理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500。

对照品溶液的制备精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含60μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取实施例1胶囊剂10粒，精密称定，研细，取细粉0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇25ml，称定重量，超声提取60分钟，放置至室温，再称定重量，补足减失的重量，滤过，取续滤液经0.45微孔滤膜即得供试品溶液。

测定法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每粒含黄芩苷(C₂₁H₁₈O₁₁)8mg。

实施例5、加速稳定性试验

样品：实施例1制得的胶囊

时间(实验日期)标准规定项目       结果		0个月	1个月	2个月	3个月
						性状	(棕色颗粒，味苦微甜)	符合标准	符合标准	符合标准	符合标准
鉴别	(1)斑点一致(黄芩苷)(2)斑点一致(绿原酸)(3)斑点一致(熊果酸)(4)斑点一致(苦参碱)	斑点一致斑点一致斑点一致斑点一致	斑点一致斑点一致斑点一致斑点一致	斑点一致斑点一致斑点一致斑点一致	斑点一致斑点一致斑点一致斑点一致
						检查	(1)水分(％)5.0％以内(2)崩解时限30分钟以内	5.8符合规定	6.0符合规定	6.1符合规定	5.9符合规定
含量测定	每粒含黄芩苷不得少于8.0mg	10.2mg	10.4mg	10.1mg	10.3mg
						卫生学检查	细菌＜1000个/g霉菌＜100个/g致病菌不得检出活螨不得检出	20030未检出未检出	12040未检出未检出	18030未检出未检出	14020未检出未检出

结论：根据对样品稳定性试验观察结果，表明本发明胶囊肿瘤稳定。

Claims (7)

1、一种具有抗菌作用的中药组合物，其特征在于该组合物是由黄芩、黄柏、苦参、银花、白头翁和白花蛇舌草的活性成份提取物与药用辅料组成的口服制剂。

2、根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于其中所述的活性成份提取物的生药重量百分比配方为10-30％黄芩、10-30％黄柏、8-15％苦参、10-30％金银花、10-30％白头翁和10-30％白花蛇舌草。

3、根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于其中所述的口服制剂为医学上可接受的各种制剂形成包括颗粒剂、胶囊剂、片剂及口服液。

4、根据权利要求1所述的中药组合物的制备方法，其特征在于所述的中药组合物的制备包括下列步骤：

(1)活性成份提取物制备

按配方量将黄芩、白头翁及白花蛇舌草用4-8倍量50-80％乙醇回流提取2次，合并滤液备用，药渣与黄柏、金银花、苦参一起加6-10倍量水煎煮二次，得滤液，合并两次的滤液，回收乙醇，浓缩成稠浸膏；

(2)制剂制备

取上述活性成份提取物，按常规方法制成各种口服制剂。

5、根据权利要求4所述的中药组合物的制备方法，其特征在于所述的口服制剂采用薄层色谱法鉴别黄芩苷、绿原酸、熊果酸和苦参碱，用高压液相法测定黄芩苷的含量。

6、根据权利要求1所述的中药组合物在制备治疗由支原体、衣原体感染所引起的生殖、泌尿系统疾病药物中的应用。

7、根据权利要求6所述的中药组合物的应用，其特征在于其中所述的生殖、泌尿系统疾病是指解脲脲原体和沙眼衣原体引起的非淋菌性尿道炎。