CN1562157A

CN1562157A - 具有抗炎免疫作用的溪黄草流浸膏的制备方法

Info

Publication number: CN1562157A
Application number: CN 200410017689
Authority: CN
Inventors: 刘建文; 贾伟; 邱明丰; 徐朝晖; 赵爱华
Original assignee: Shanghai Jiaotong University
Current assignee: Shanghai Jiaotong University
Priority date: 2004-04-15
Filing date: 2004-04-15
Publication date: 2005-01-12

Abstract

一种用于中药制备技术领域的具有抗炎免疫作用的溪黄草流浸膏的制备方法。取溪黄草药材，粉碎成粗粉，水或60－95％乙醇5～10倍量，70℃～100℃提取2～3次，每次1～3h，过滤，合并滤液，活性炭脱色，浓缩至相对密度1.00～1.15，即得浓度为每ml相当于溪黄草药材1g的流浸膏。该提取物具有显著抗炎免疫作用，无毒副作用，成本低廉，可用于治疗类风湿性关节炎相关药物的制造，具有广阔的应用前景。

Description

具有抗炎免疫作用的溪黄草流浸膏的制备方法

技术领域

本发明涉及一种用于中药制备技术领域的溪黄草流浸膏的制备方法。

背景技术

溪黄草系唇形科香茶菜属植物溪黄草Isodon serra(Maxim.)Kudo的全草。原为民间草药，现已作为中药广泛使用。有较长的使用历史，1962年编印的《揭阳县民间习用草药简编》即开始收载。具有清热利湿，活血散瘀之功，用于治疗急性肝炎，急性胆囊炎，痢疾，肠炎，癃闭，跌打阏肿等。

类风湿性关节炎是一种常见病，在各年龄组人群中皆可发病，发病率随年龄增长而增高，55岁以上人群的患病率达2.9％，据WHO提供的数字显示，全球有1％以上的人患有风湿及类风湿性关节炎，治疗此类药物的医疗费用支出的年增长率为7％。我国目前仅类风湿性关节类的患病率就达0.5％左右。全国抗关节炎药物市场规模约13-15亿元，年增长率6％左右，到2006年将达到18亿元，其中零售市场占有相当的市场份额。

类风湿性关节炎属中医痹症，与古医籍的历节、顽痹、鹤膝风等极为相似。现代医学治疗类风湿性关节炎主要使用非甾体类抗炎药、肾上腺皮质激素、抗虐药、金制剂、细胞毒药物、生物制剂等，主张早期联合用药。西医治疗药物虽起效迅速，但仅改善症状，并没有从根本上纠正免疫异常，仅仅是一种非特异性免疫抑制疗法，不能有效地从根本上控制疾病的发生、发展，且毒性反应使病人难以长期接受，停药或减量后易复发；中药雷公藤及其制剂、清风藤及其流浸膏清藤碱疗效肯定但也存在毒副作用问题，尚缺少综合疗效满意的药品。

经研究证明，溪黄草具有显著抗炎免疫作用，与雷公藤多苷作用相近，而无明显的毒副作用，高效低毒为其显著特色。经对现有技术文献的检索，尚未发现有溪黄草或溪黄草流浸膏抗炎免疫作用的应用和研究的文献报道。

发明内容

本发明的目的是针对现有的类风湿性关节炎治疗药品的局限性，提供一种具有显著抗炎免疫作用的溪黄草流浸膏的制备方法。使其制备的溪黄草流浸膏具有显著抗炎免疫作用，且效果好、无毒副作用、成本低等优点。

本发明是通过以下技术方案实现的，本发明取溪黄草药材，粉碎成粗粉，水或60-95％乙醇5～10倍量，70℃～100℃提取2～3次，每次1～3h，过滤，合并滤液，活性炭脱色，浓缩至相对密度1.00～1.15(60℃测定)，即得溪黄草流浸膏。

本发明的优选条件为：取溪黄草药材，粉碎成粗粉，水或70-90％乙醇7～10倍量，80℃～100℃提取2～3次，每次1～2h，过滤，合并滤液，活性炭脱色，浓缩至相对密度1.08～1.15(60℃测定)，即得溪黄草流浸膏。其浓度为每ml相当于溪黄草药材1g。优选后条件制备的流浸膏相对密度高达1.08～1.15(60℃测定)，干浸膏提取率从5％～25％提高至15％～25％，相关药理实验的有效性也证明该条件的优越性。

按优选条件制备的水提流浸膏相对密度高达1.10～1.15(60℃测定)，干浸膏提取率从20％～25％，醇提流浸膏相对密度高达1.08～1.10(60℃测定)，干浸膏提取率从15％～20％。经药理实验证明，本发明制备的溪黄草流浸膏具有显著抗炎免疫作用，无毒副作用，可用于具有以下功效的、治疗类风湿性关节炎相关药物的制造。

(1)抗炎作用

(2)免疫抑制作用

本发明具有抗炎免疫作用、源于天然、毒副作用小、可长期服用、防治并用等优点。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明进行详细说明。

实施例一：

本发明所述流浸膏制备方法为取溪黄草药材，粉碎成粗粉，60％乙醇10倍量，70℃提取3次，每次3h，过滤，合并滤液，活性炭脱色，浓缩至相对密度1.08(60℃测定)，即得溪黄草流浸膏。

实施效果为制得味微苦、深棕黑色、具有流动性、干浸膏提取率从13％、每ml相当于溪黄草药材1g的溪黄草流浸膏。

实施例二：

本发明所述流浸膏制备方法为取溪黄草药材，粉碎成粗粉，80％乙醇8倍量，85℃提取2次，每次2h，过滤，合并滤液，活性炭脱色，浓缩至相对密度1.10(60℃测定)，即得溪黄草流浸膏。

实施效果为制得味微苦、深棕黑色、具有流动性、干浸膏提取率从16％、每ml相当于溪黄草药材1g的溪黄草流浸膏。在醇提流浸膏制备中，该方法提取次数和用醇量相对较少，干浸膏提取率较高，在保证有效物质提出的同时降低了成本。

实施例三：

本发明所述流浸膏制备方法为取溪黄草药材，粉碎成粗粉，95％乙醇5倍量，70℃提取2次，每次1h，过滤，合并滤液，活性炭脱色，浓缩至相对密度1.00(60℃测定)即得。

实施效果为制得味微苦、深棕黑色、具有流动性、干浸膏提取率从12％、每ml相当于溪黄草药材1g的溪黄草流浸膏。

实施例四：

本发明所述流浸膏制备方法为取溪黄草药材，粉碎成粗粉，水10倍量，100℃提取2次，每次2h，过滤，合并滤液，活性炭脱色，浓缩至相对密度1.15(60℃测定)，即得。

实施效果为制得味微苦、深棕黑色、具有流动性、干浸膏提取率从20％、每ml相当于溪黄草药材1g的溪黄草流浸膏。在水提流浸膏制备中，该方法提取次数相对较少，干浸膏提取率较高，既保证了效物质的提出，同时又降低了成本。

实施例五：

本发明所述流浸膏制备方法为取溪黄草药材，粉碎成粗粉，水7倍量，100℃提取2次，每次3h，过滤，合并滤液，活性炭脱色，浓缩至相对密度1.10(60℃测定)，即得。

实施效果为制得味微苦、深棕黑色、具有流动性、干浸膏提取率从18％、每ml相当于溪黄草药材1g的溪黄草流浸膏。

最佳实施例为实施例二、实施例四。

本发明所述溪黄草流浸膏制备方法优选条件为取溪黄草药材，粉碎成粗粉，水或70-90％乙醇7～10倍量，80℃～100℃提取2～3次，每次1～2h，过滤，合并滤液，活性炭脱色，浓缩至相对密度1.08～1.15，(60℃测定)，即得每ml相当于溪黄草药材1g的溪黄草流浸膏。

实施例六：

按本发明所述溪黄草流浸膏制备方法的优选条件，制备溪黄草水提流浸膏、溪黄草醇提流浸膏，进行抗炎免疫实验。本发明所述溪黄草流浸膏经抗炎免疫实验证明，不仅具有显著抗炎免疫作用，而且未见毒副作用。

一、抗炎作用

1.材料和方法

1.1药物：溪黄草水提流浸膏、溪黄草醇提流浸膏。

1.2动物：小鼠，雌雄各半。

1.3为了观察并比较溪黄草水提流浸膏与醇提流浸膏的抗炎作用，通过二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的实验，比较了溪黄草水提流浸膏的高(10g/kg)、中(5g/kg)、低(2.5g/kg)剂量与醇提流浸膏的高(10g/kg)、中(5g/kg)剂量对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的抑制作用。

2结果：见表1。

表1对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响(n＝5)

组别剂量(g/kg) 肿胀度(g) 肿胀率(％) 肿胀抑制率(％)

空白对照组 0.013±0.003 1.539±0.499

消炎痛 0.005 0.008±0.004^* 1.064±0.688 30.9

水提XHC高剂量组 10g/kg 0.004±0.002^** 0.371±0.201^** 75.9

水提XHC中剂量组 5g/kg 0.005±0.003^** 0.520±0.256^** 66.2

水提XHC低剂量组 2.5g/kg 0.007±0.003^* 0.877±0.416 43.0

醇提XHC高剂量组 10g/kg 0.006±0.001^** 0.764±0.191^* 28.9

醇提XHC中剂量组 5g/kg 0.008±0.002^* 0.825±0.171^* 46.4

醇提XHC低剂量组 2.5g/kg 0.009±0.003 1.108±0.356 38.0

注：XHC代表溪黄草流浸膏

3.结论

表1实验结果显示溪黄草水提流浸膏的高(10g/kg)、中(5g/kg)、低(2.5g/kg)剂量与醇提流浸膏的高(10g/kg)、中(5g/kg)剂量对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀均有显著的抑制作用。另外，通过观察溪黄草水提流浸膏与醇提流浸膏对大鼠佐剂性关节炎的影响，初步结果显示溪黄草醇提流浸膏有一定作用趋势。

二、免疫抑制作用

(一)溪黄草不同提取部分对2，4-二硝基氟苯(DNFB)所致小鼠迟发型超敏反应的影响

1.材料和方法

1.1药物：溪黄草水提流浸膏、溪黄草醇提流浸膏。

1.2动物：小鼠，雌雄各半。

1.3选择了体内检测细胞免疫功能2，4-二硝基氟苯致小鼠迟发型超敏反应的动物模型，观察了溪黄草水提流浸膏与醇提流浸膏的作用。

2结果：见表2。

表2对2，4-二硝基氟苯(DNFB)所致小鼠迟发型超敏反应的影响

组别剂量动物数肿胀度肿胀率肿胀抑制率

(g/kg) (只) (g) (％) (％)

空白对照组 11 0.019±0.004 1.896±0.440

醋酸地塞米松 0.005 11 0.012±0.003^** 1.639±0.424 13.6

水提XHC高剂量组 10g/kg 11 0.009±0.004^** 0.945±0.495^** 50.2

水提XHC中剂量组 5g/kg 11 0.008±0.004^** 0.802±0.402^** 57.9

水提XHC低剂量组 2.5g/kg 10 0.009±0.004^* 0.878±0.373^** 53.7

醇提XHC高剂量组 10g/kg 11 0.008±0.002^** 0.724±0.293^** 26.0

醇提XHC中剂量组 5g/kg 10 0.009±0.003^** 0.980±0.327^** 50.4

醇提XHC低剂量组 2.5g/kg 10 0.012±0.004^** 1.387±0.538^* 46.9

注：XHC代表溪黄草流浸膏

3.结论

表2实验结果显示溪黄草水提流浸膏与醇提流浸膏均能显著抑制2，4-二硝基氟苯所致的小鼠迟发型超敏反应，即对细胞免疫有抑制作用。

(二)对ConA诱导脾淋巴细胞增殖的影响

1.材料和方法

1.1药物：溪黄草水提流浸膏、溪黄草醇提流浸膏、雷公藤多甙。

1.2细胞：BALB/c小鼠脾脏淋巴细胞。

1.3以BALB/c小鼠脾脏淋巴细胞为研究对象，用有丝分裂原刀豆蛋白A(ConA)活化淋巴细胞，采用噻唑盐(MTT)实验方法，体外检测受试药物对淋巴细胞增殖反应的影响。

2结果：见表3。

表3对ConA诱导脾淋巴细胞增殖的影响

组别浓度 OD值

ConA单纯刺激组 0.238±0.008

空白血清 1∶10 0.218±0.016

1∶20 0.216±0.019

1∶40 0.201±0.019*

雷公藤多甙 100mg/L 0.186±0.010**

50mg/L 0.155±0.036*

25mg/L 0.206±0.003**

水提XHC含药血清 1∶10 0.177±0.012▲

1∶20 0.183±0.027

1∶40 0.171±0.027

醇提XHC含药血清 1∶10 0.197±0.032

1∶20 0.159±0.017△

1∶40 0.180±0.025

雷公藤多甙含药血清 1∶10 0.186±0.020

1∶20 0.152±0.023△

1∶40 0.182±0.018

注：**表示与ConA单纯刺激组比较，P＜0.01；*表示与ConA单纯刺激组比较，P＜0.05。

▲表示与空白血清(1∶10)比较，P＜0.05；△表示与空白血清(1∶20)比较，P＜0.05。

XHC代表溪黄草流浸膏。

3.结论

表3结果显示，溪黄草水提流浸膏及醇提流浸膏的含药血清与雷公藤多甙含药血清及雷公藤多甙均能抑制淋巴细胞增殖，具有免疫抑制作用。

Claims

1、一种具有抗炎免疫作用的溪黄草流浸膏的制备方法，其特征在于，取溪黄草药材，粉碎成粗粉，水或60-95％乙醇5～10倍量，70℃～100℃提取2～3次，每次1～3h，过滤，合并滤液，活性炭脱色，浓缩至相对密度1.00～1.15，即得溪黄草流浸膏。

2、根据权利要求1所述的具有抗炎免疫作用的溪黄草流浸膏的制备方法，其特征是，其优选条件为：水或70-90％乙醇7～10倍量，80℃～100℃提取2～3次，每次1～2h，浓缩至相对密度1.08～1.15。

3、根据权利要求1或2所述的具有抗炎免疫作用的溪黄草流浸膏的制备方法，其特征是，制得的溪黄草流浸膏浓度为每ml相当于溪黄草药材1g。