CN1559568A - 注射用生脉药物制剂及其有效药物成分的制备方法 - Google Patents

Abstract

注射用生脉药物制剂及其中五味子有效药物成分的制备方法。药物以红参、五味子和麦冬的提取物为有效药物成分，与在注射药物中可以接受的辅助成分共同组成。其有效药物成分由按常规方式由红参得到的乙醇提取物浓缩成分和由麦冬得到的水提醇沉浓缩物成分，与由五味子得到的挥发油成分和其提取挥发油后残渣的水提醇沉浓缩物成分共同组成，其中的五味子挥发油成分为以环糊精包合的挥发油形式，五味子残渣的水提醇沉浓缩物成分是由对其水煎提取液经最终达到乙醇体积含量≥85％沉淀处理后的溶液中得到的浓缩物。该药物制剂可涉及目前的粉针和等渗输液等制剂，不仅能完全克服使用吐温作为助溶剂的弊端，解决并提高了制剂的稳定性问题，而且还有利于提高药效。

Description

注射用生脉药物制剂 及其有效药物成分的制备方法

技术领域

本发明涉及的是注射用生脉药物制剂，特别是用于抗心血管疾病的注射型药物，及对其中有效药物成分五味子提取物成分的制备方法。

背景技术

生脉水针剂已是目前的一种常用药物，可具有抗心血管疾病作用，如抗血栓作用、改善血液循环及改善血液流变学作用、增强血管舒张反应、保护心肌缺血缺氧、抗氧化损伤、镇静和增强学习记忆等方面的作用。在临床治疗心绞痛、脑血管意外等心脑血管疾病方面占有非常重要的地位。如，赵新先编著的《中药注射剂》(人民卫生出版社，1998年2月第1版)中规定了一种“生脉针剂”的组成及其制备方法。其以人参、麦冬和五味子为有效药物成分，其中人参用的是由70％乙醇浸泡所得到的醇提取物浓缩成分，五味子采用的是其蒸馏的挥发油部分和对残渣的水提醇沉浓缩物成分，麦冬采用的是其水提醇沉浓缩物成分，将各成分混合后，以吐温-80作为助溶剂，与其它辅助成分共同混合而成。

《中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂第十五册》(中华人民共和国卫生部药典委员会编，1997年)中的“生脉注射液”，其有效药物成分为红参、麦冬和五味子，其中对红参成分的是采用乙醇回流的方法提取，其余各有效药物成分的制备方式与上述文献基本一致，但在配置时为明确规定对吐温类助溶剂成分的使用。

实践情况表明，由于上述生脉注射液中的主要有效成分人参皂苷易水解，使其水溶液不稳定，加之由五味子的挥发油成分在水中溶解度也较差，为提高这些成分的溶解性能，保证和提高药物的稳定性，目前采取的措施通常是使吐温-80等表面活性成分作助溶剂。但是在使用吐温类物质进行增溶的同时，也带来了相应的不利因素。王贵田等在“中药注射剂引起不良反应因素的分析”(《China Pharmacist》2001，4(5)，384)中曾报导在中药注射剂中加入吐温-80虽是为助溶和提高稳定性所必需的，但其也具有一定的溶血作用及改变生物膜结构的作用，能溶蚀生物膜的类脂屏障，使生物膜分子排列不定向，从而使生物膜通透性增加。在《药物流行病学杂志》1996，5(4)，245中也对吐温-80所致的局部炎性反应作了报导。因此，在注射制剂，特别是在中药注射制剂中使用吐温类物质，可造成人体心脑血管等系统的毒性反应。因此1984年国家卫生部曾明确下达文件通知，规定在心血管用注射药物中不得加入吐温类附加剂。而不使用吐温助溶剂，生脉水针剂等中药注射制剂的稳定性又难于保证，例如其在室温存放至多30天即会产生沉淀。此外，目前所用的水针制剂中的有效药物浓度低，临床用药量大(每次用量20～60ml)。特别是在以静脉滴注给药时，将其混合入等渗的输液后，不仅造成使用上的不方便，而且由于药品的用量较大，还会原本与人体血液系统内的渗透压保持一致的经脉滴注输液被稀释，妨碍治疗效果，甚至导致或发生其他不利反应。

发明内容

针对上述情况，本发明将在不改变药典对现有生脉注射药物制剂有效成分组成的前提下，提供一种新形式的包括粉针、等渗输液等多种注射用生脉药物制剂，不仅能满意地解决不使用吐温类物质增容剂同样保证甚至提高该药物的稳定性，而且还能提高药物的疗效，同时也理想地解决了在静脉滴注输液药物中使用的方便性和对输液药物渗透压造成影响的问题。在此基础上，本发明还将提供对作为所说该注射药物制剂中有效药物成分之一的五味子的有效成分的制备方法。

如上述，本发明注射用生脉药物制剂，并不改变目前药典对该注射药物有效药物成分的组成及其含量(相当于生药量)比例，即仍以红参(人参)、五味子和麦冬的提取物为有效药物成分，与在注射药物中可以接受的辅助成分共同组成。其中，所说的有效药物成分是由按常规方式由红参得到的乙醇提取物浓缩成分和由麦冬得到的水提醇沉浓缩物成分，与由五味子得到的挥发油成分和其提取挥发油后残渣的水提醇沉浓缩物成分共同组成，其中的五味子挥发油成分为以环糊精包合的挥发油形式，五味子残渣的水提醇沉浓缩物成分是由对其水煎提取液经最终达乙醇的体积含量≥85％的沉淀处理后的溶液中得到的浓缩物。

其中所说的制备红参的乙醇提取物有效药物成分，麦冬的水提醇沉浓缩物成分、以及五味子的挥发油成分和其水提醇沉成分时，可以参照上述《中药注射剂》中关于“生脉针剂”，或《中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂第十五册》中“生脉注射液”中对各相应生药原料成分制备和处理的同样方法进行。

本发明上述形式有效药物成分在制药应用上的一个显著优点，是可以制备成为目前尚未见有报导使用过的冻干粉针形式的生脉药物制剂。该冻干粉针制剂在临床使用中的最大特点是使用方便，特别是在与静脉滴注输液配合使用时，基本不会对等渗形式大输液的渗透压造成任何影响，从而将其配合使用可能对渗透压的影响降至最低。

试验结果表明，本发明药物中对五味子挥发油部分的有效成分采用环糊精包合后再与其它有效成分混合，用于冻干粉针或等渗注射液中，能满意地解决生脉注射液中脂溶性成份的水溶性问题和提取物中不稳定成分的溶解问题，有效地提高了药物的稳定性和药效。

在上述的药物中，作为与有效药物成分配合使用的辅助成分，根据不同的具体注射制剂，建议选用甘露醇、葡萄糖、水解明胶或氯化钠中的至少一种。例如，对于注射用的冻干粉针药物，可以选用甘露醇、葡萄糖、水解明胶中的至少一种作为辅助的支持剂成分，与所说的有效药物成分共同组成；其中尤以采用甘露醇作为辅助成分为优选。对于可供直接使用的等渗输液制剂形式的药物，则可以选用甘露醇、葡萄糖、氯化钠中的至少一种作为辅助的等渗剂成分，与所说的有效药物成分共同组成；其中尤以采用葡萄糖作为辅助成分为优选。为进一步提高药物成分的溶解性和药物的稳定性，在等渗注射液制剂中还可以同时再加入0.1％～3％重量的环糊精成分，其中优选的为加入～1％重量的环糊精成分。

由于本发明注射药物并未改变其中的有效药物成分及其相当于生药量的含量，改变的主要是其中有效药物成分，即对五味子有效药物成分提取物的处理。本发明药物使用的五味子有效成分提取物虽然同样也包括了其挥发油部分和残渣的水提醇沉浓缩物部分，但制备时采用的处理方法是：先以常规水蒸汽蒸馏方式收集五味子生药原料的挥发油成分，然后以用其重量0.1～20倍的环糊精进行包合形成为复合物作为供配药用的五味子挥发油有效成分部分。其中，包合时优选的环糊精用量，是被包合五味子挥发油成分重量的5～7倍。此处所说的环糊精，可以在包括常用的α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精，以及如羟乙基-β-环糊精、羟丙基-β-环糊精、β-环糊精甲基化衍生物、支链环糊精、环糊精聚合物等多种改性形式的环糊精中选用。

包合时可以通过目前已有报导的方法实现。例如，可供参考的具体操作方法之一，是将由水蒸汽蒸馏收集的五味子挥发油成分溶解于乙醇、含水乙醇或丙酮中的任一溶剂，然后再加入所说量的环糊精并搅拌使其充分溶解，然后除去溶剂并干燥，即得到所说的可供配药用的五味子挥发油有效成分部分。由于五味子挥发油成分在乙醇、丙酮等溶剂中有很好的溶解性，因此溶解五味子挥发油时所用含水乙醇的乙醇含量，以及乙醇、含水乙醇或丙酮溶剂的用量等并无过多要求，以使五味子挥发油能被完全溶解即可。

可供参考的另一种具体操作方法，是先将所说量的环糊精制成其饱和水溶液，然后将由水蒸汽蒸馏收集的五味子挥发油成分加入并使其混合溶解，再以常规冷冻方式或喷雾方式干燥后，即得到所说的可供配药用的五味子挥发油有效成分部分。

提取挥发油后，将剩余残渣继续以常规方式水煎煮并收集水煎提取液，再加入乙醇含量依次增大的乙醇水溶液进行沉淀，再用加入乙醇并逐次增大被处理溶液中乙醇体积含量至≥85％的方式进行沉淀，例如可按上述文献中已有报导分别使被处理溶液的含醇量依次为60％、70％、80％至85％以上的方式进行沉淀处理并过滤，最后将滤除沉淀后的溶液除去乙醇——一般常采用回收乙醇的方式——并使其浓缩，即得到供配药用的五味子水提醇沉有效成分部分。

以下再通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应就此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。在不脱离本发明上述技术思想情况下，根据本领域普通技术知识和惯用手段做出的各种替换或变更的修改，均包括在本发明的范围内。

具体实施方式

原料选取符合药典规定要求的生药红参(总苷含量≥2％)100g、麦冬(麦冬总苷含量≥0.3％)312g和五味子156g。

(1)红参乙醇提取物成分的制备

将红参粉碎后，按上述文献方式用乙醇回流提取3～6次，每次1～3小时，用薄层层析法控制提取终点，合并提取液，冷藏，滤过，滤液浓缩至稠膏状，加入注射用水至200～600ml，搅匀，冷藏，滤过备用。

(2)麦冬水提醇沉提取物成分的制备

将麦冬按上述文献方式加水煎煮三次，每次40分钟，合并煎液，滤过，滤液浓缩至稠膏状，加入乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，回收乙醇并浓缩至稠膏状，加入注射用水至100～300ml，搅匀，冷藏，滤过，滤液备用。

(3)五味子要用成分的制备

将五味子先按上述文献方式以水蒸汽蒸馏法提取和收集五味子挥发油成分。

提取挥发油成分后的五味子残渣再加水煎煮三次，每次40分钟，合并煎液，滤过，滤液浓缩至稠膏状，加入乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，回收乙醇并浓缩至稠膏状，加入注射用水至100～200ml，搅匀，冷藏，滤过，滤液加适量活性炭煮沸30分钟，稍冷，过滤，滤液备用。

(4)用环糊精包合五味子油

方法1：将上述收集的五味子挥发油溶解于乙醇或丙酮有机溶剂中，加入其重量0.1～20倍，最佳为6倍量的羟丙基-β-环糊精，充分搅拌溶解，然后回收溶剂，得干燥品备用。

方法2：先将相当于挥发油成分重量0.1～20倍，最佳为6倍量的羟丙基-β-环糊精制成饱和水溶液，然后加入五味子挥发油蒸馏液搅拌时期混合溶解，然后经常规方式冷冻干燥或喷雾干燥，备用。

上述包合时所用的环糊精，除所说的羟丙基-β-环糊精外，还可以使用如α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精，或是羟乙基-β-环糊精、β-环糊精甲基化衍生物、支链环糊精、环糊精聚合物等改性的环糊精。

实施例1注射用冻干粉针制剂的制备

将上述备用的红参提取物、麦冬提取物、五味子水提醇沉提取物和环糊精包合的五味子挥发油同溶于注射用水中，加入甘露醇、水解明胶或葡萄糖，并以甘露醇为优选作为赋形剂辅料，待完全溶解后，活性炭或超滤脱热源、分装于2ml安瓿中，冷冻干燥、密封后即得。

冷冻干燥时，可将上述分装后的安瓿未封口放入与冻干箱尺寸相应的金属盘内，对冻干箱进行灭菌处理，并将其搁板的温度降至-30℃～-40℃，迅速将装有制剂的金属盘放入冻干箱内，维持1～2小时，然后对冻干箱进行真空处理，使箱内的真空度为0.2～0.4Pa，再将搁板升温，并严格控制在共熔点-2℃以下，保持12小时，最后升温至40℃，并保持一定时间，使制剂温度与搁板温度重合，放入无菌的过滤气体，控制制剂的含水量在1～5％，一般为2％，迅速封口即可。

实施例2等渗注射液的制备

将上述备用的红参提取物、麦冬水提醇沉提取物、五味子水提醇沉提取物和环糊精包合的五味子挥发油同溶于2000ml水中，加入甘露醇、葡萄糖、氯化钠，其中优选用葡萄糖作为等渗试剂，完全溶解后，活性炭或超滤脱热源，加水至12500ml，再加入0.1～3.0％的羟丙基-β环糊精，其中优选为1.0％重量的的羟丙基-β环糊精充分溶解均匀，过滤，分装，灭菌，即得。

对上述的冻干粉针制剂和等渗注射液的稳定性试验的方法及结果如下：

一、试验方法

将本发明的上述的生脉冻干粉针、生脉等渗注射液和按现有技术制备的相应水针制剂同置于温度40℃，相对湿度75％条件下，另同置于冰箱(约4℃)中保存。每隔一个月抽样检查一次(水针每天检查澄明度)，共存放六个月，检查项目如下：

(1)外观检查：水针和等渗注射液：一般观察颜色是否变深；

粉针：是否变形萎缩，颜色是否变深。

(2)澄明度检查：水针和等渗注射液：灯检是否有沉淀物析出；

粉针：取一瓶加5ml蒸馏水，观察溶解时间，20秒内溶解为速溶，视为合格。灯检是否有沉淀物析出。

(3)药液pH值检查：水针和等渗注射液：用25型酸度计测定药液pH值；

粉针；取一瓶加5ml蒸馏水溶解后，用25型酸度计测定药液pH值。

(4)主要成分定性鉴别：水针和等渗注射液：采用指纹图谱检测标准检测共有峰个数，计算相对保留时间、相对峰面积，考察稳定性；

粉针：取一瓶加5ml蒸馏水溶解后，采用指纹图谱检测标准检测共有峰个数，计算相对保留时间、相对峰面积，考察稳定性。

(5)粉针含水量测定按照中国药典2000年版附录所列五氧化二磷干燥法测定。

(6)人参皂苷含量测定：采用高效液相色谱法测定人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re和人参皂苷Rb₁。

本发明的上述冻干粉针与水针的加速稳定性对比试验的结果(温度40℃，相对湿度75％)如表1所示。试验结果表明：1、粉针各项指标经加速试验6月均稳定。2、水针经加速试验6月，其颜色加深，pH逐渐降低，含量测定中由于沉淀的析出而含量发生改变，指纹图谱鉴别中由于沉淀的析出而共有峰面积发生改变。

冻干粉针与水针的加速稳定性对比试验的结果(温度4℃)如表2所示。试验结果表明：1、粉针各项指标经加速试验6月均稳定。2、水针经加速试验6月，其颜色加深，pH逐渐降低，含量测定中由于沉淀的析出而含量发生改变，指纹图谱鉴别中由于沉淀的析出而共有峰面积发生改变。且水针在低温条件下稳定性更差。

本发明的上述等渗注射液与常规水针加速稳定性对比试验的结果(温度40℃，相对湿度75％)如表3所示。试验结果表明：1、等渗注射液各项指标经加速试验6月均稳定。2、水针经加速试验6月，其颜色加深，pH逐渐降低，含量测定中由于沉淀的析出而含量发生改变，指纹图谱鉴别中由于沉淀的析出而共有峰面积发生改变。

等渗注射液与常规水针加速稳定性对比试验的结果(温度4℃)如表4所示。试验结果表明：1、等渗注射液各项指标经加速试验6月均稳定。2、水针经加速试验6月，其颜色加深，pH逐渐降低，含量测定中由于沉淀的析出而含量发生改变，指纹图谱鉴别中由于沉淀的析出而共有峰面积发生改变。且水针在低温条件下稳定性更差。

表1 生脉水针、生脉冻干粉针加速稳定性的试验结果(温度40℃，相对湿度75％)

制剂	批号	0月							1月							2月							3月
																														外观色泽	澄明度	鉴别	PH	溶解性	水分	含量	外观色泽	澄明度	鉴别	pH	溶解性	水分	含量	外观色泽	澄明度	鉴别	pH	溶解性	水分	含量	外观色泽	澄明度	鉴别	pH	溶解性	水分	含量
		水针剂	A	淡黄	澄明	阳性	6.5	-	-	合格	淡黄	澄明	阳性	6.5	-	-	合格	淡黄	澄明	阳性	6.4	-	-	合格	淡黄	澄明	阳性	6.6	-																													-	合格
B	淡黄																													澄明	阳性	6.4	-	-	合格	淡黄	澄明	阳性	6.5	-	-	合格	淡黄	澄明	阳性	6.4	-	-	合格	淡黄	澄明	阳性	6.3	-	-	合格
			C	淡黄	澄明	阳性	6.2	-	-	合格	淡黄	澄明	阳性	6.3	-	-	合格	淡黄	澄明	阳性	6.3	-	-	合格	淡黄	澄明	阳性	6.3	-																												-	合格
粉针剂	A																													淡黄	澄明	阳性	6.6	易溶	1.8	合格	淡黄	澄明	阳性	6.4	易溶	1.7	合格	淡黄	澄明	阳性	6.5	易溶	1.9	合格	淡黄	澄明	阳性	6.5	易溶	1.9			合格
		B	淡黄	澄明	阳性	6.5	易溶	1.9	合格	淡黄	澄明	阳性	6.5	易溶	1.8	合格	淡黄	澄明	阳性	6.5	易溶	1.6	合格	淡黄	澄明	阳性	6.4	易溶	1.8																												合格
	C																													淡黄	澄明	阳性	6.5	易溶	1.7	合格	淡黄	澄明	阳性	6.6	易溶	1.7	合格	淡黄	澄明	阳性	6.4	易溶	1.8	合格	淡黄	澄明	阳性	6.6	易溶	1.6		合格

制剂	批号	4月							5月							6月
																							外观色泽	澄明度	鉴别	pH	溶解性	水分	含量	外观色泽	澄明度	鉴别	pH	溶解性	水分	含量	外观色泽	澄明度	鉴别	pH	溶解性	水分	含量
		水针剂	A	淡黄	澄明	阳性	6.2	-	-	合格	变深	澄明	阳性	6.0	-	-	合格	黄色	少许沉淀	阴性	5.7	-																						-	不合格
B	淡黄																						澄明	阳性	6.0	-	-	合格	黄色	少许沉淀	阴性	5.8	-	-	不合格	黄棕色	沉淀较多	阴性	5.6	-	-	不合格
			C	淡黄	澄明	阳性	5.9	-	-	合格	变深	浑浊	阳性	5.6	-	-	合格	黄色	沉淀	阴性	5.4	-																					-	不合格
粉针剂	A																						淡黄	澄明	阳性	6.5	易溶	1.9	合格	淡黄	澄明	阳性	6.4	易溶	1.8	合格	淡黄	澄明	阳性	6.6	易溶	1.9			合格
		B	变深	澄明	阳性	6.5	易溶	1.8	合格	变深	澄明	阳性	6.6	易溶	1.8	合格	变深	澄明	阳性	6.4	易溶	1.8																					合格
	C																						淡黄	澄明	阳性	6.6	易溶	1.8	合格	淡黄	澄明	阳性	6.5	易溶	1.6	合格	淡黄	澄明	阳性	6.5	易溶	1.7		合格

注：鉴别采用指纹图谱鉴别；含量测定总皂苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1

表2生脉水针、生脉冻干粉针加速稳定性的对比试验结果(温度4℃)

制剂	批号	0月							1月							2月							3月
																														外观色泽	澄明度	鉴别	pH	溶解性	水分	含量	外观色泽	澄明度	鉴别	pH	溶解性	水分	含量	外观色泽	澄明度	鉴别	pH	溶解性	水分	含量	外观色泽	澄明度	鉴别	pH	溶解性	水分	含量
		水针剂	A	淡黄	澄明	阳性	6.5	-	-	合格	淡黄	澄明	阳性	6.5	-	-	合格	淡黄	澄明	阳性	6.4	-	-	合格	淡黄	澄明	阳性	6.6	-																													-	合格
B	淡黄																													澄明	阳性	6.4	-	-	合格	淡黄	澄明	阳性	6.5	-	-	合格	淡黄	澄明	阳性	6.4	-	-	合格	淡黄	澄明	阳性	6.3	-	-	合格
			C	淡黄	澄明	阳性	6.2	-	-	合格	淡黄	澄明	阳性	6.3	-	-	合格	淡黄	澄明	阳性	6.3	-	-	合格	淡黄	澄明	阳性	6.3	-																												-	合格
粉针剂	A																													淡黄	澄明	阳性	6.6	易溶	1.8	合格	淡黄	澄明	阳性	6.4	易溶	1.7	合格	淡黄	澄明	阳性	6.5	易溶	1.9	合格	淡黄	澄明	阳性	6.5	易溶	1.9			合格
		B	淡黄	澄明	阳性	6.5	易溶	1.9	合格	淡黄	澄明	阳性	6.5	易溶	1.8	合格	淡黄	澄明	阳性	6.5	易溶	1.6	合格	淡黄	澄明	阳性	6.4	易溶	1.8																												合格
	C																													淡黄	澄明	阳性	6.5	易溶	1.7	合格	淡黄	澄明	阳性	6.6	易溶	1.7	合格	淡黄	澄明	阳性	6.4	易溶	1.8	合格	淡黄	澄明	阳性	6.6	易溶	1.6		合格

制剂	批号	4月							5月							6月
																							外观色泽	澄明度	鉴别	pH	溶解性	水分	含量	外观色泽	澄明度	鉴别	pH	溶解性	水分	含量	外观色泽	澄明度	鉴别	pH	溶解性	水分	含量
		水针剂	A	淡黄	浑浊	阳性	6.2	-	-	合格	变深	少许沉淀	阴性	6.0	-	-	不合格	黄色	沉淀	阴性	5.7	-																						-	不合格
B	变深																						浑浊	阳性	6.0	-	-	合格	黄色	沉淀	阴性	5.8	-	-	不合格	黄棕色	沉淀较多	阴性	5.6	-	-	不合格
			C	变深	少许沉淀	阴性	5.9	-	-	不合格	黄色	沉淀	阴性	5.6	-	-	不合格	黄棕色	沉淀较多	阴性	5.4	-																					-	不合格
粉针剂	A																						淡黄	澄明	阳性	6.5	易溶	1.9	合格	淡黄	澄明	阳性	6.4	易溶	1.8	合格	淡黄	澄明	阳性	6.6	易溶	1.9			合格
		B	淡黄	澄明	阳性	6.5	易溶	1.8	合格	淡黄	澄明	阳性	6.6	易溶	1.8	合格	淡黄	澄明	阳性	6.4	易溶	1.8																					合格
	C																						淡黄	澄明	阳性	6.6	易溶	1.8	合格	淡黄	澄明	阳性	6.5	易溶	1.6	合格	淡黄	澄明	阳性	6.5	易溶	1.7		合格

注：鉴别采用指纹图谱鉴别；含量测定总皂苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb

表3 生脉水针、生脉等渗注射液加速稳定性的对比试验结果(温度40℃，相对湿度75％)

制剂	批号	0月					1月					2月					3月
																						外观色泽	澄明度	鉴别	pH	含量	外观色泽	澄明度	鉴别	pH	含量	外观色泽	澄明度	鉴别	pH	含量	外观色泽	澄明度	鉴别	pH	含量
		水针剂	A	淡黄	澄明	阳性	6.5	合格	淡黄	澄明	阳性	6.5	合格	淡黄	澄明	阳性	6.4	合格	淡黄	澄明	阳性																					6.6	合格
B	淡黄																					澄明	阳性	6.4	合格	淡黄	澄明	阳性	6.5	合格	淡黄	澄明	阳性	6.4	合格	淡黄	澄明	阳性	6.3	合格
			C	淡黄	澄明	阳性	6.2	合格	淡黄	澄明	阳性	6.3	合格	淡黄	澄明	阳性	6.3	合格	淡黄	澄明	阳性																				6.3	合格
等渗液	A																					淡黄	澄明	阳性	6.0	合格	淡黄	澄明	阳性	5.8	合格	淡黄	澄明	阳性	5.9	合格	淡黄	澄明	阳性	5.9			合格
		B	淡黄	澄明	阳性	5.8	合格	淡黄	澄明	阳性	5.9	合格	淡黄	澄明	阳性	6.0	合格	淡黄	澄明	阳性	5.9																				合格
	C																					淡黄	澄明	阳性	5.9	合格	淡黄	澄明	阳性	5.8	合格	淡黄	澄明	阳性	5.8	合格	淡黄	澄明	阳性	6.0		合格

制剂	批号	4月					5月					6月
																	外观色泽	澄明度	鉴别	pH	含量	外观色泽	澄明度	鉴别	pH	含量	外观色泽	澄明度	鉴别	pH	含量
		水针剂	A	淡黄	澄明	阳性	6.2	合格	变深	澄明	阳性	6.0	合格	黄色	少许沉淀	阴性																5.7	不合格
B	淡黄																澄明	阳性	6.0	合格	黄色	少许沉淀	阴性	5.8	不合格	黄棕色	沉淀较多	阴性	5.6	不合格
			C	淡黄	澄明	阳性	5.9	合格	变深	浑浊	阳性	5.6	合格	黄色	沉淀	阴性															5.4	不合格
等渗液	A																淡黄	澄明	阳性	5.9	合格	淡黄	澄明	阳性	6.1	合格	淡黄	澄明	阳性	6.1			合格
		B	淡黄	澄明	阳性	5.7	合格	淡黄	澄明	阳性	5.9	合格	淡黄	澄明	阳性	5.9															合格
	C																淡黄	澄明	阳性	5.8	合格	淡黄	澄明	阳性	5.7	合格	淡黄	澄明	阳性	5.7		合格

注：鉴别采用指纹图谱鉴别；含量测定总皂苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1

表4  生脉水针、生脉等渗注射液加速稳定性的对比试验结果(温度4℃)

制剂	批号	0月					1月					2月					3月
																						外观色泽	澄明度	鉴别	pH	含量	外观色泽	澄明度	鉴别	pH	含量	外观色泽	澄明度	鉴别	pH	含量	外观色泽	澄明度	鉴别	pH	含量
		水针剂	A	淡黄	澄明	阳性	6.5	合格	淡黄	澄明	阳性	6.5	合格	淡黄	澄明	阳性	6.4	合格	淡黄	澄明	阳性																					6.6	合格
B	淡黄																					澄明	阳性	6.4	合格	淡黄	澄明	阳性	6.5	合格	淡黄	澄明	阳性	6.4	合格	淡黄	澄明	阳性	6.3	合格
			C	淡黄	澄明	阳性	6.2	合格	淡黄	澄明	阳性	6.3	合格	淡黄	澄明	阳性	6.3	合格	淡黄	澄明	阳性																				6.3	合格
等渗液	A																					淡黄	澄明	阳性	6.0	合格	淡黄	澄明	阳性	6.1	合格	淡黄	澄明	阳性	5.9	合格	淡黄	澄明	阳性	6.0			合格
		B	淡黄	澄明	阳性	5.8	合格	淡黄	澄明	阳性	5.9	合格	淡黄	澄明	阳性	5.8	合格	淡黄	澄明	阳性	6.0																				合格
	C																					淡黄	澄明	阳性	5.9	合格	淡黄	澄明	阳性	6.0	合格	淡黄	澄明	阳性	6.0	合格	淡黄	澄明	阳性	5.9		合格

制剂	批号	4月					5月					6月
																	外观色泽	澄明度	鉴别	pH	含量	外观色泽	澄明度	鉴别	pH	含量	外观色泽	澄明度	鉴别	pH	含量
		水针剂	A	淡黄	浑浊	阳性	6.2	合格	变深	少许沉淀	阴性	6.0	不合格	黄色	沉淀	阴性																5.7	不合格
B	变深																浑浊	阳性	6.0	合格	黄色	沉淀	阴性	5.8	不合格	黄棕色	沉淀较多	阴性	5.6	不合格
			C	变深	少许沉淀	阴性	5.9	不合格	黄色	沉淀	阴性	5.6	不合格	黄棕色	沉淀较多	阴性															5.4	不合格
等渗液	A																淡黄	澄明	阳性	5.9	合格	淡黄	澄明	阳性	6.1	合格	淡黄	澄明	阳性	6.1			合格
		B	淡黄	澄明	阳性	6.0	合格	淡黄	澄明	阳性	5.9	合格	淡黄	澄明	阳性	5.7															合格
	C																淡黄	澄明	阳性	5.8	合格	淡黄	澄明	阳性	6.0	合格	淡黄	澄明	阳性	5.8		合格

注：鉴别采用指纹图谱鉴别；含量测定总皂苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1

对本发明的上述冻干粉针制剂和等渗注射液制剂形式的生脉药物，按常规试验方法进行的相关药效学试验结果包括：

(1)对小鼠单核-巨噬细胞系统(MPS)吞噬功能的影响试验，结果如表5所示。表5的试验结果显示，生脉冻干粉针及等渗注射液均能显著提高小鼠的吞噬指数K，说明两者对小鼠的MPS吞噬功能均有显著的激活作用，从而增强机体的非特异性免疫功能；从激活MPS吞噬功能的作用上比较，两者与10mg/kg左旋咪唑的强度无显著性差异。

表5  生脉粉针及等渗注射液对小鼠MPS吞噬功能的影响

               组别及剂量      动物数(只)     吞噬指数K( x±s)

生理盐水组  10ml/kg·di.v.×5     20           0.0266±0.092

生脉粉针组  10ml/kg·di.v.×5     20           0.0609±0.0052^#※

生脉等渗液组10ml/kg·di.v.×5     20           0.0601±0.0039^#※

左旋咪唑组  10ml/kg·di.v.×5     20           0.0634±0.0048^#

注：与生理盐水组比较，#P＜0.01；与左旋咪唑组比较，※P＞0.05

(2)对大鼠急性失血性心脏停搏的影响试验，结果如表6所示。表6的试验结果显示，生脉冻干粉针及等渗注射液均能显著延长大鼠急性失血性心脏停搏时间，提示两者均具有抗失血性休克和增强心肌对缺氧的耐受能力。

表6生脉粉针及等渗注射液对大鼠急性失血性心脏停搏的影响

              组别及剂量      动物数(只)  失血后心脏停搏时间( x±s)

生理盐水组  20ml/kg·di.p.       10          12.4±4.2

生脉粉针组  20ml/kg·di.p.       10          46.9±10.2^#

生脉等渗液组20ml/kg·di.p.       10          45.6±10.9^#

注：与生理盐水组比较，#P＜0.01

(3)对大鼠角叉莱胶炎症模型的影响试验，结果如表7所示。表7的结果显示，生脉冻干粉针及等渗注射液对大鼠角叉莱胶炎症模型有显著的抗炎作用，其抗炎强度与25mg/kg的氢化可的松无显著性差异，且抗炎作用的持续时间长。

表7生脉粉针及等渗注射液对大鼠角叉莱胶炎症的影响

             组别及剂量    动物数     致炎后1h与正常值之差(mm)  致炎后72h与正常值之差(mm)

                            (只)

                                        x±s       P       P^*     x±s      P       P^*

生理盐水组  20ml/kg·d×5    5       1.28±0.35                   4.82±0.95

生脉粉针组  20ml/kg·d×5    5       0.28±0.18   ＜0.01  ＜0.05  3.57±0.51  ＜0.05  ＜0.05

生脉等渗液组20ml/kg·d×5    5       0.32±0.40   ＜0.01  ＜0.05  3.28±0.68  ＜0.05  ＜0.05

氢化可的松组20ml/kg·d×5    5       0.35±0.23   ＜0.01          3.48±0.80  ＜0.05

注：P与生理盐水组比较：P^#与氢化可的松组比较

(4)对大鼠血浆皮质酮水平的影响比较试验，结果如表8所示。表8的结果显示，生脉粉针及等渗注射液均能使大鼠血浆皮质酮含量有显著增加。

表8生脉粉针及等渗注射液对大鼠血浆皮质酮水平的影响

             组别及剂量    动物数(只)  血浆皮质酮含量(μg/100ml)

生理盐水组   10ml/kg·d×5    15          32.5±2.02

生脉粉针组   10ml/kg·d×5    15          41.0±5.06^#

生脉等渗液组 10ml/kg·d×5    15          40.2±5.30^#

注：与生理盐水组比较，#P＜0.01

(5)减轻新生大鼠窒息脑水肿作用的试验，结果如表9所示。从表9结果可见，生脉冻干粉针及等渗注射液对大鼠窒息后复氧24小时时，大脑皮层组织的含水量、过氧化脂质(LPO)含量及白细胞数等各项指标较窒息组明显降低，与对照组相比无明显差异。

表9生脉粉针及等渗注射液对大鼠窒息后脑水肿的影响( x±s)

           组别及剂量    动物数(只)  含水量(％)      LPO(nmol/kg)    白细胞数(个)

  对照组    10ml/kg         10      84.25±1.64      24.40±2.81      5.75±1.25

  窒息组    10ml/kg         10      92.02±1.43^※      42.50±10.43^※   10.33±2.13^※

生脉粉针组  10ml/kg         10      82.00±3.74^※※    33.67±4.39^※※  4.75±0.83^※※

  生脉等渗液组

                            10      81.33±7.32^※※   33.67±5.09^※※   6.17±1.17^※※

    10ml/kg

注：※与对照组、生脉粉针组、生脉等渗组相比，P均＜0.05或P＜0.01；

    ※※与对照组比，P＞0.05

上述本发明生脉冻干粉针和等渗注射液的相关药效学试验研究结果表明，其在对抗心血管疾病及症状方面是具有稳定可靠的治疗作用的。

Claims (10)

1.注射用生脉药物制剂，以红参、五味子和麦冬的提取物为有效药物成分，与在注射药物中可以接受的辅助成分共同组成，其特征是有效药物成分由按常规方式由红参得到的乙醇提取物浓缩成分和由麦冬得到的水提醇沉浓缩物成分，与由五味子得到的挥发油成分和其提取挥发油后残渣的水提醇沉浓缩物成分共同组成，其中的五味子挥发油成分为以环糊精包合的挥发油形式，五味子残渣的水提醇沉浓缩物成分是由对其水煎提取液经最终达乙醇的体积含量≥85％的沉淀处理后的溶液中得到的浓缩物。

2.如权利要求1所述的注射用生脉药物制剂，其特征是由所说的有效药物成分与甘露醇、葡萄糖、水解明胶或氯化钠中的至少一种作为辅助成分共同组成。

3.如权利要求1或2所述的注射用生脉药物制剂，其特征是所说的药物为冻干粉针型注射制剂，由所说的有效药物成分与甘露醇、葡萄糖、水解明胶中的至少一种作为辅助成分共同组成。

4.如权利要求3所述的注射用生脉药物制剂，其特征是所说的冻干粉针型注射制剂中的辅助成分为甘露醇。

5.如权利要求1或2所述的注射用生脉药物制剂，其特征是所说的药物为等渗输液制剂，由所说的有效药物成分与甘露醇、葡萄糖、氯化钠中的至少一种作为辅助成分共同组成，在注射液制剂中同时还含有0.1％～3％重量的环糊精成分。

6.如权利要求5所述的注射用生脉药物制剂，其特征是所说的等渗输液制剂中的辅助成分为葡萄糖，并还含有1％重量的环糊精成分。

7.制备权利要求1所述注射用生脉药物制剂中有效药物成分五味子提取物的方法，其特征是先以常规水蒸汽蒸馏方式收集五味子生药原料的挥发油成分，并将收集的挥发油成分用重量0.1～20倍的环糊精进行包合后，作为供配药用的五味子挥发油有效成分部分；提取挥发油后，将剩余残渣继续以常规方式水煎煮并收集水煎提取液，再用加入乙醇并逐次增大被处理溶液中乙醇体积含量至≥85％的方式进行沉淀，将除去沉淀后的溶液除去乙醇并浓缩，得到供配药用的五味子水提醇沉有效成分部分。

8.如权利要求7所述的制备方法，其特征是所说的以环糊精包合五味子挥发油时所用环糊精的量为被包合挥发油成分重量的5～7倍。

9.如权利要求7或8所述的制备方法，其特征是所说的以环糊精包合五味子挥发油时，先将由水蒸汽蒸馏收集的五味子挥发油成分溶解于乙醇、含水乙醇或丙酮中的任一溶剂，然后再加入所说量的环糊精并搅拌使其充分溶解，然后除去溶剂并干燥，即得到所说的可供配药用的五味子挥发油有效成分部分。

10.如权利要求7或8所述的制备方法，其特征是所说的以环糊精包合五味子挥发油时，先将所说量的环糊精制成其饱和水溶液，然后将由水蒸汽蒸馏收集的五味子挥发油成分加入并使混合溶解，再以常规冷冻方式或喷雾方式干燥后，即得到所说的可供配药用的五味子挥发油有效成分部分。