CN1557313A - 一种治疗白血病和骨髓瘤的植物提取物及天然化合物单体 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了治疗白血病和多发性骨髓瘤的植物提取物及其天然化合物单体。天然化合物单体包括石蒜碱、高石蒜碱、水仙克拉辛、多花水仙碱、前多花水仙碱、石蒜伦碱、伪石蒜碱，主要用于治疗白血病和多发性骨髓瘤。上述植物提取物、化合物单体及其衍生物，与其他药物搭配使用，用于治疗白血病和多发性骨髓瘤，毒、副作用低，疗效更好的复合药物。本发明的所述植物提取物及其天然化合物单体通过抑制细胞蛋白质合成，抑制细胞增殖和促进细胞凋亡而达到治疗白血病和多发性骨髓瘤的目的；由于石蒜科植物在我国资源丰富，易于采集，石蒜碱提取工艺成熟，具有巨大的社会效益和经济效益。
Description
技术领域
本发明涉及药物，进一步是指植物提取物及其天然化合物单体。
背景技术
白血病和多发性骨髓瘤是常见的血液系统恶性肿瘤，其发病率很高，我国白血病患者约为3～4人/10万人口，西方发达国家的发病率普遍高于我国，如美国发病率为6.8～9.3人/10万人口；而我国多发性骨髓瘤约为1人/10万人口，西方发达国家为4人/10万人口。治疗白血病和多发性骨髓瘤的药物种类很多，疗效各异，绝大多数为化学合成药物，这些药物的副作用大，而且不能根治。近年来国外相继开发出一些针对性强、疗效较好、副作用相对较小的新型化疗药，但价格昂贵。因此，寻找具有自主知识产权的新的抗肿瘤天然药物，具有重大的经济效益和社会效益。迄今为止，从天然植物中已找到了一系列结构新颖和作用独特的化合物。已发现的从植物中提取的抗癌新药包括：紫杉醇类抗癌药、喜树碱类抗癌药、鬼臼毒素类衍生物、雷公藤内酯醇类化合物、青蒿琥酯、沙尔威辛、茶多酚，以及人参皂甙、揽香烯、薏苡仁油、大蒜中的抗癌成分、抗前列腺癌植物药PC-SPES等中药抗癌药等。
但是，进一步研制、开发抗肿瘤天然药物，仍然是人们努力的方向。
发明内容
本发明要解决的技术问题是，针对现有技术存在的不足，提出治疗白血病和多发性骨髓瘤的植物提取物及其天然化合物单体，对所述病症有明显疗效，且社会效益和经济效益巨大。
本发明对技术解决方案之一是，所述治疗白血病和多发性骨髓瘤的植物提取物采用如下原料和工艺步骤制得：
(1)榨取石蒜科(Amaryllidaceae family)植物水仙(Chinese NarcissusBulb，Narcessus tazetta L.)茎、叶的汁；
(2)将所述汁经过12000-20000rpm高速离心处理8-12分钟，去掉不溶性沉淀物；
(3)用氯仿、乙醚抽提后，真空干燥；
(4)干燥物重新溶解于去离子双蒸水中；
(5)所得溶液用0.22-0.45μm微孔滤器除菌，制得含有石蒜碱和其他有效成分的水仙提取物。
本发明中，使用水仙提取物以静脉、腹腔、口服等方式给药，用于治疗白血病和多发性骨髓瘤。
本发明的技术解决方案之二是，所述治疗白血病和多发性骨髓瘤的天然化合物石蒜碱(又名水仙碱，lycorine)单体，系从石蒜科植物中制得，其分子式为C16H17NO4，化学结构式为：
盐酸石蒜碱(lycorine hydrochloride) 的分子质量为323.77；熔点为210～212℃。化学性质为碱性，呈棱柱状结晶。微溶于乙醇，不溶于水和氯仿，可溶于DMSO。
本发明中，使用石蒜碱以静脉、腹腔、口服等方式给药，用于治疗白血病和多发性骨髓瘤。
本发明的技术解决方案之三是，所述治疗白血病和多发性骨髓瘤的天然化合物单体，系从石蒜科植物中制得，包括以下任意一种或一种以上：
(1)高石蒜碱(Homolycorine)，化学结构式如下：
高石蒜碱可以和盐酸形成盐类并与两分子水结合，形成水合物，可溶于水。
(2)水仙克拉辛(Narciclasine)，化学结构式如下：
(3)多花水仙碱(Tazettine)，化学结构式如下：
(4)前多花水仙碱(Pretazettine)，化学结构式如下：
(5)石蒜伦碱(Lycorenine)(9，10-dimethoxy-1-methyllycorenan-7α)，化学结构式如下：
(6)伪石蒜碱(Pseudolycorine)，其化学结构有待鉴定。
本发明中，应用所述高石蒜碱(Homolycorine)、水仙克拉辛(Narciclasine)、多花水仙碱(Tazettine)、前多花水仙碱(Pretazettine)、石蒜伦碱(Lycorenine)、伪石蒜碱(Pseudolycorine)，以静脉、腹腔、口服等方式给药，用于治疗白血病和多发性骨髓瘤。
以下对本发明做出进一步说明。
本发明研制者经过几年的努力，证实我国石蒜科(Amaryllidaceaefamily)植物水仙(Chinese Narcissus Bulb，Narcessus tazetta L.)制成的一种植物提取物(水仙提取物)对白血病和多发性骨髓瘤细胞有明显抑制作用，并从水仙提取物和其他石蒜科植物中找到对白血病和多发性骨髓瘤细胞有明显抑制作用的天然化合物单体。通过一系列实验，发现石蒜碱(又名水仙碱，lycorine)单体的作用是通过抑制细胞内蛋白质合成、抑制细胞增殖、促进细胞凋亡来实现的。通过建立小鼠白血病和多发性骨髓瘤模型，用石蒜碱进行治疗，发现石蒜碱可以显著降低小鼠白血病和多发性骨髓瘤模型的血液中未分化粒、单核细胞百分率，改善白血病和多发性骨髓瘤小鼠的血像，使白血病和多发性骨髓瘤小鼠的生存期延长，死亡率降低，是一种治疗白血病和多发性骨髓瘤的有效新药。石蒜碱的作用明显优于阿糖胞苷(Ara-C)和美法仑(Melphalan)。
同时石蒜碱可以与其他治疗白血病和多发性骨髓瘤的药物搭配使用，形成复合药物。以降低这些药物的使用量，从而降低毒、副作用，提高疗效。实验发现，石蒜碱的安全性高于其他常见治疗白血病和多发性骨髓瘤的药物。目前国内外尚未见到该药用于白血病和多发性骨髓瘤治疗的报道和相关研究。本发明的实验包括：
1.细胞增殖抑制试验
将水仙提取物加入到多种白血病细胞株、多发性骨髓瘤细胞株以及其他恶性肿瘤细胞株中培养，对这些细胞有非常明显的抑制作用。如对多发性骨髓瘤细胞株ARH-77的增殖抑制率可以达到90％以上。用流式细胞检测技术，荧光检测技术等，进一步证实水仙提取物对这些细胞的抑制作用是通过促进细胞凋亡实现的。对水仙提取物进行分析鉴定，确定了石蒜碱是水仙提取物的有效成分之一，分析了石蒜碱的结构和化学性质。将石蒜碱加入到多种白血病细胞株、多发性骨髓瘤细胞株和其他恶性肿瘤细胞株中培养，同样对这些细胞有非常明显的抑制作用，其作用是通过抑制蛋白质合成、抑制细胞增殖、促进细胞凋亡来实现的。
用石蒜碱分别处理白血病、和多发性骨髓瘤细胞株，发现细胞体积变小，细胞稀少，细胞增殖速度受到明显抑制(图1A、1B、1C)。
2.软琼脂集落形成实验
将不同剂量的水仙提取物和石蒜碱分别加入到白血病和多发性骨髓瘤细胞株的软琼脂培养体系中，证实水仙提取物和石蒜碱均能抑制白血病和多发性骨髓瘤细胞株的软琼脂集落形成数目，有效降低白血病和多发性骨髓瘤细胞株的恶性程度。同时我们以小白鼠骨髓细胞作为正常细胞进行原代培养，加入水仙提取物和石蒜碱后，观察小鼠成纤维细胞集落形成单位(CFU-F)数目。实验证实，治疗剂量的水仙提取物和石蒜碱能特异性抑制白血病和多发性骨髓瘤细胞株的生长，而对正常细胞的毒性很小。图2和表1为HL-60细胞的软琼脂集落形成实验结果。
表1 石蒜碱对细胞克隆形成的影响
组别 石蒜碱浓度(μg/ml) 克隆数(per 1.5×103cell)
HL-60 0 179±27
0.1 96±17
0.2 25±9
0.4 3±2
K562 0 207±18
0.1 44±13
0.2 8±3
0.4 2±2
3.抗癌药物敏感性试验
用MTT方法检测细胞存活状况，结果发现，低浓度的水仙提取物和石蒜碱就能降低肿瘤细胞的存活率，与对照组比较，呈现剂量依赖型效应。此结果证实水仙提取物和石蒜碱具有很强的抗癌敏感性。
4.促进肿瘤细胞凋亡试验
①将水仙提取物和石蒜碱与白血病和多发性骨髓瘤细胞株一起培养，用荧光显微镜观察，发现对照组细胞几乎全呈绿色，染色均匀，细胞核结构正常(图3A)。实验组中有大量细胞体积缩小，核浓缩，核呈浓集的绿色或桔黄色荧光，为早期凋亡细胞(图3B)。小部分细胞具有核碎裂及凋亡小体等现象，为晚期凋亡细胞(图3C)。水仙提取物和石蒜碱作用白血病细胞株1天后，用流式细胞仪定量检测，发现水仙提取物和石蒜碱有促进白血病细胞的凋亡作用(表2)。
表2 水仙提取物和和石蒜碱对HL-60、K562细胞凋亡的影响结果(
X±s)(n＝3)
| 细胞株 | 组别 | 凋亡百分率 |
| HL-60 | 对照 | 4.17±3.85 |
| 水仙提取物 | 29.33±6.16 | |
| 石蒜碱 | 30.53±5.85 | |
| K562 | 对照 | 13.1±2.79 |
| 水仙提取物 | 26.67±2.81 | |
| 石蒜碱 | 25.63±8.37 |
②经水仙提取物和石蒜碱诱导HL-60细胞后，提取细胞DNA，进行琼脂糖凝胶电泳，发现DNA梯状带形成，显示石蒜碱可诱导肿瘤细胞凋亡(图4)。
③经石蒜碱诱导使肿瘤细胞周期分布明显改变
用1.6μg/ml石蒜碱诱导HL-60细胞1d后，流式细胞仪检测细胞周期中各期细胞的百分率，发现HL-60细胞实验组G2/M期细胞的百分率明显上调(图5A、5B)，提示石蒜碱诱导阻断HL-60细胞周期在G2/M期(表2)。K562细胞实验组S期细胞的百分率明显上调(图5C、5D)，提示石蒜碱阻断K562细胞周期在S期(表2)，从而抑制细胞增殖。
表3 实验组与对照组细胞周期分布比较(
X±s)(n＝3)
组 别 G0/G1细胞(％) S细胞(％) G2/M细胞(％)
HL-60 对照组 51.00±9.19 44.6±4.95 4.4±4.24
实验组 52.30±11.30 36.05±7.00 11.70±3.96
K562 对照组 42.20±2.4 47.47±1.90 10.30±2.26
实验组 40.83±5.24 55.20±2.69 3.96±3.91
④石蒜碱对白血病细胞系(HL-60、K562)和多发性骨髓瘤细胞系中促凋亡相关基因的表达有明显上调作用。
5.石蒜碱对HL-60细胞的半数抑制率(IC50)为0.46μg/ml。
6.石蒜碱的小鼠致死试验
石蒜碱对小鼠的半数致死量分别为180mg/kg(口服)和97mg/kg(腹腔)。
7.动物模型试验
将培养的白血病和多发性骨髓瘤细胞株注射入SCID小鼠腹腔，建立SCID小鼠白血病和多发性骨髓瘤模型，用水仙提取物和石蒜碱进行治疗，发现水仙提取物和石蒜碱均能显著降低小鼠白血病和多发性骨髓瘤模型的血液中未分化粒、单核细胞百分率，改善白血病和多发性骨髓瘤小鼠的血像，使白血病和多发性骨髓瘤小鼠的生存期延长，死亡率降低，其作用明显优于阿糖胞苷(Ara-C)和美法仑(Melphalan)。从而证实水仙提取物和石蒜碱是一种治疗白血病和多发性骨髓瘤的有效新药。
将体外培养增殖的HL-60细胞经腹腔注射入SCID小鼠体内，细胞数为每只SCID小鼠107个。实验组于接种细胞后的第二天开始给予水仙提取物和石蒜碱治疗(6.7mg.kg1.d1、20mg.kg1.d1，i.p.)，同时设生理盐水(N.S.)阴性对照组(NC)和阿糖胞苷(Ara-c)阳性对照组。分别于接种前及接种后第7、14、21、28天经尾静脉取SCID小鼠外周血进行白细胞计数及分类。结果发现在各时期对照组的外周血白细胞中未成熟粒、单核细胞百分率均高于实验组，P＜0.05(见表4、表5、图6、图7)。且石蒜碱的高、低治疗组之间疗效有一定的差异(见表4)。
表4 各组小鼠接种HL-60细胞后外周血中未成熟的粒、单核细胞百分率(n＝6，
X±s)
| 分组 | 第7天 | P值 | 第14天 | P值 | 第21天 | P值 | 第28天 | P值 |
| 对照组 | 40.60±10.14 | 34.80±7.46 | 36.20±8.04 | 31.80±10.45 | ||||
| 水仙提取物(20mg.kg1.d1) | 23.60±2.70 | 0.007 | 24.67±0.82 | 0.009 | 25.17±7.65 | 0.045 | 18.33±9.05 | 0.047 |
| 石蒜碱(6.7mg.kg1.d1) | 29.83±5.19 | 0.048 | 25.33±6.10 | 0.044 | 22.00±5.44 | 0.007 | 18.00±8.60 | 0.039 |
| 石蒜碱(20mg.kg1.d1) | 21.80±6.30 | 0.008 | 18.20±2.78 | 0.002 | 19.17±8.21 | 0.007 | 14.67±3.14 | 0.004 |
| Ara-c(20mg.kg1.d1) | 33.60±5.68 | 0.215 | 33.60±3.58 | 0.754 | 27.20±6.099 | 0.081 | 18.00±6.29 | 0.035 |
注：各P值为同一时期内不同实验组与对照组进行比较
表5不同浓度的石蒜碱治疗组外周血中未成熟的粒、单核细胞百分率(n＝6，
X±s)
组别 第7天 第14天 第21天 第28天
石蒜碱(6.7mg.kg1.d1) 29.83±5.19 25.33±6.10 22.00±5.44 18.00±8.60
石蒜碱(20mg.kg1.d1) 21.80±6.30 18.20±2.78 19.17±8.21 14.67±3.14
t值 2.323 2.438 0.705 0.892
P值 0.045 0.037 0.497 0.394
8.石蒜碱不但可以单独使用，还可以与其他治疗白血病和多发性骨髓瘤的药物搭配使用，形成复合药物，以降低这些药物的使用量，达到降低毒、副作用，提高疗效的目的。实验证实，石蒜碱的安全性高于其他常见治疗白血病和多发性骨髓瘤的药物。
9.高石蒜碱、水仙克拉辛、多花水仙碱、前多花水仙碱、石蒜伦碱、伪石蒜碱单体，以静脉、腹腔、口服等方式给药，用于治疗白血病和多发性骨髓瘤。
10.高石蒜碱、水仙克拉辛、多花水仙碱、前多花水仙碱、石蒜伦碱、伪石蒜碱单体，与其他药物搭配使用，以静脉、腹腔、口服等方式给药，形成用于治疗白血病和多发性骨髓瘤，毒、副作用低，疗效更好的复合药物。
11.对石蒜碱、高石蒜碱、水仙克拉辛、多花水仙碱、前多花水仙碱、石蒜伦碱、伪石蒜碱单体进行化学修饰，烷基化、氧化、羧基化和羟基化后形成的衍生物，以静脉、腹腔、口服等方式给药，用于治疗白血病和多发性骨髓瘤。
12.对石蒜碱、高石蒜碱、水仙克拉辛、多花水仙碱、前多花水仙碱、石蒜伦碱、伪石蒜碱单体进行化学修饰，烷基化、氧化、羧基化和羟基化后形成的衍生物，这些衍生物与其他药物搭配使用，以静脉、腹腔、口服等方式给药，用于治疗白血病和多发性骨髓瘤。
本发明药物的用途有：
1.使用水仙提取物通过静脉、腹腔、口服等方式给药，用于对白血病和多发性骨髓瘤的治疗。
2.使用石蒜碱单体通过静脉、腹腔、口服等方式给药，用于对白血病和多发性骨髓瘤的治疗。
3.使用石蒜碱衍生物，通过静脉、腹腔、口服等方式给药，用于对白血病和多发性骨髓瘤的治疗。
4.使用石蒜碱单体与其他药物配伍，通过静脉、腹腔、口服等方式给药，用于对白血病和多发性骨髓瘤的治疗。
5.使用石蒜碱衍生物与其他药物配伍，通过静脉、腹腔、口服等方式给药，用于对白血病和多发性骨髓瘤的治疗。
6.使用高石蒜碱(Homolycorine)、水仙克拉辛(Narciclasine)、多花水仙碱(Tazettine)、前多花水仙碱(Pretazettine)、石蒜伦碱(Lycorenine)、伪石蒜碱(Pseudolycorine)，以静脉、腹腔、口服等方式给药，用于治疗白血病和多发性骨髓瘤。
7.高石蒜碱、水仙克拉辛、多花水仙碱、前多花水仙碱、石蒜伦碱、伪石蒜碱单体，与其他药物搭配使用，以静脉、腹腔、口服等方式给药，形成用于治疗白血病和多发性骨髓瘤，毒、副作用低，疗效更好的复合药物。
8.对高石蒜碱、水仙克拉辛、多花水仙碱、前多花水仙碱、石蒜伦碱、伪石蒜碱单体进行化学修饰，烷基化、氧化、羧基化和羟基化后形成的衍生物，以静脉、腹腔、口服等方式给药，用于治疗白血病和多发性骨髓瘤。
9.高石蒜碱、水仙克拉辛、多花水仙碱、前多花水仙碱、石蒜伦碱、伪石蒜碱单体进行化学修饰，烷基化、氧化、羧基化和羟基化后形成的衍生物，这些衍生物与其他药物搭配使用，以静脉、腹腔、口服等方式给药，用于治疗白血病和多发性骨髓瘤。
由以上可知，本发明为治疗白血病和多发性骨髓瘤的植物提取物及天然化合物单体，对白血病和多发性骨髓瘤细胞株及其动物模型均有明显疗效；实验证实：石蒜碱系通过抑制细胞蛋白质合成，抑制细胞增殖和促进细胞凋亡而达到治疗目的。由于石蒜科植物在我国普遍存在、资源丰富、易于采集，石蒜碱提取工艺成熟，具有巨大的社会效益和经济效益。
附图说明
图1中：A为石蒜碱对HL-60细胞的生长抑制作用曲线；B为A为石蒜碱对K562细胞的生长抑制作用曲线；C为石蒜碱对ARH-77细胞的生长抑制作用曲线；
图2是HL-60细胞的克隆形成图，其中A为对照组，B为实验组(水仙提取物：1.25μg/ml)，C为实验组(石蒜碱：0.4μg/ml)；
图3是荧光显微镜下OA+EB染色后的对照组和实验组ARH-77细胞，图中显示出石蒜碱导致的白血病和多发性骨髓瘤细胞凋亡，图中：A为对照组(250×)；B为实验组(水仙提取物：2.5μg/ml)(250×)；C为实验组(水仙提取物：2.5μg/ml)(250×)；
图4中：A是经石蒜碱作用的HL-60细胞DNA电泳图(其中1：Marker；2：对照；3：石蒜碱(1.6μg/ml))；B是经水仙提取物作用的HL-60细胞DNA电泳图(其中：1：Marker；2：对照；3：水仙提取物(2.5μg/ml))；
图5是流式细胞仪检测石蒜碱对HL-60、K562细胞周期的影响，图中：A为HL-60对照组；B为HL-60实验组(石蒜碱1.6μg/ml)；C为K562对照组；D为K562实验组(石蒜碱1.6μg/ml)；
图6是SCID小鼠接种HL-60细胞后外周血中未成熟粒、单核细胞百分率变化曲线；
图7是小鼠接种HL-60细胞后外周血涂片(d28)，其中A为未治疗组(1500×)，B为水仙提取物(1500×)，C为石蒜碱组(1500×)。
具体实施方式
1.将水仙提取物加入到多种白血病细胞株、多发性骨髓瘤细胞株以及其他恶性肿瘤细胞株中一起培养，对这些细胞的生长有非常明显的抑制作用。如对多发性骨髓瘤细胞株ARH-77的增殖抑制率可以达到90％以上。用流式细胞检测技术、荧光照相技术、电镜技术、基因体外扩增技术、凝胶电泳技术等，进一步证实水仙提取物对这些细胞的抑制作用是通过抑制蛋白质合成、抑制细胞增殖、促进细胞凋亡来实现的。
2.石蒜碱处理白血病和多发性骨髓瘤细胞株，发现细胞体积变小，细胞稀少，细胞增殖速度受到明显抑制。用流式细胞检测技术、荧光照相技术、电镜技术、基因体外扩增技术、凝胶电泳技术等，进一步证实石蒜碱对这些细胞的抑制作用是通过抑制蛋白质合成、抑制细胞增殖、促进细胞凋亡来实现的。
3.将不同浓度的水仙提取物和石蒜碱分别加入到白血病和多发性骨髓瘤细胞株的软琼脂培养体系中，证实水仙提取物和石蒜碱能抑制白血病和多发性骨髓瘤细胞株的软琼脂集落形成数目，有效降低白血病和多发性骨髓瘤细胞株的恶性程度。同时我们以小白鼠骨髓细胞作为正常细胞进行原代培养，加入石蒜碱后，观察小鼠成纤维细胞集落形成单位(CFU-F)数目。结果发现石蒜碱对正常细胞的毒性明显小于对白血病和多发性骨髓瘤细胞株的毒性作用。从而证实石蒜碱能特异性抑制白血病和多发性骨髓瘤细胞株的生长，而对正常细胞的毒性很小。
4.抗癌药物敏感性试验：用MTT方法检测细胞存活状况，对石蒜碱的作用机制进行了进一步研究。结果发现，低浓度的石蒜碱就能降低细胞的存活率，与对照组比较，呈现石蒜碱剂量依赖型效应。此结果证实石蒜碱具有很强的抗癌敏感性。
5.促进肿瘤细胞凋亡试验
将水仙提取物和石蒜碱分别与白血病和多发性骨髓瘤细胞株一起培养，用荧光显微镜观察，发现对照组细胞几乎全呈绿色，染色均匀，细胞核结构正常；实验组中大量细胞体积缩小，核浓缩；核呈浓集的绿色或桔黄色荧光，为早期凋亡细胞；小部分细胞具有核碎裂及凋亡小体等现象，为晚期凋亡细胞。1.6μg/ml的石蒜碱作用白血病细胞株1天后，用流式细胞仪定量检测，发现石蒜碱有促进白血病和多发性骨髓瘤细胞的凋亡作用。
经水仙提取物和石蒜碱诱导白血病和多发性骨髓瘤细胞后，RT-PCR检测到这些细胞中促凋亡相关基因的表达明显上调。流式细胞仪检测到凋亡细胞增加。同时提取细胞DNA，进行琼脂糖凝胶电泳，结果进一步显示水仙提取物和石蒜碱可诱导肿瘤细胞凋亡。
6.石蒜碱使肿瘤细胞周期分布明显改变
用石蒜碱作用白血病和多发性骨髓瘤细胞1天后，流式细胞仪检测细胞周期中各期细胞的百分率，发现HL-60细胞实验组G2/M期细胞的百分率明显上调，提示石蒜碱阻断HL-60细胞周期在G2/M期。K562细胞实验组S期细胞的百分率明显上调，提示石蒜碱阻断K562细胞周期在S期，从而抑制细胞增殖。
7.石蒜碱对K562细胞的半数抑制率(IC50)为0.46μg/ml。
8.石蒜碱的小鼠致死试验：石蒜碱对小鼠的半数致死量分别为180mg/kg(口服)和97mg/kg(腹腔)。
9.动物模型试验：将培养的白血病和多发性骨髓瘤细胞株注射入SCID小鼠腹腔，建立SCID小鼠白血病和多发性骨髓瘤模型，用水仙提取物和石蒜碱进行治疗，发现水仙提取物和石蒜碱可以显著降低小鼠白血病和多发性骨髓瘤模型的血液中未分化粒、单核细胞百分率，改善白血病和多发性骨髓瘤小鼠的血像，使白血病和多发性骨髓瘤小鼠的生存期延长，死亡率降低，其作用明显优于阿糖胞苷(Ara-C)和美法仑(Melphalan)。从而证实水仙提取物和石蒜碱是治疗白血病和多发性骨髓瘤的有效新药。
10.水仙提取物或石蒜碱、高石蒜碱、水仙克拉辛、多花水仙碱、前多花水仙碱、石蒜伦碱、伪石蒜碱单体，与其他药物搭配使用，以静脉、腹腔、口服等方式给药，形成用于治疗白血病和多发性骨髓瘤，毒、副作用低，疗效更好的复合药物。
11.石蒜碱、高石蒜碱、水仙克拉辛、多花水仙碱、前多花水仙碱、石蒜伦碱、伪石蒜碱单体进行化学修饰，烷基化、氧化、羧基化和羟基化后形成的衍生物，以静脉、腹腔、口服等方式给药，用于治疗白血病和多发性骨髓瘤。
12.对石蒜碱、高石蒜碱、水仙克拉辛、多花水仙碱、前多花水仙碱、石蒜伦碱、伪石蒜碱单体进行化学修饰，烷基化、氧化、羧基化和羟基化后形成的衍生物，这些衍生物与其他药物搭配使用，以静脉、腹腔、口服等方式给药，用于治疗白血病和多发性骨髓瘤。
Claims (10)
1.一种治疗白血病和多发性骨髓瘤的植物提取物，可以通过静脉、腹腔、口服等方式给药，用于治疗白血病和多发性骨髓瘤。
系采用如下工艺步骤制得：
(1)榨取石蒜科植物水仙茎、叶的汁；
(2)将所述汁经过12000-20000rpm高速离心处理8-12分钟，去掉不溶性沉淀物；
(3)用氯仿、乙醚抽提后，真空干燥；
(4)干燥物重新溶解于去离子双蒸水中；
(5)所得溶液用0.22-0.45μm微孔滤器除菌，制得含有石蒜碱和其他有效成分的水仙提取物。
2.一种治疗白血病和多发性骨髓瘤的天然化合物石蒜碱(lycorine)单体，可以通过静脉、腹腔、口服等方式给药，用于治疗白血病和多发性骨髓瘤。石蒜碱系从石蒜科植物中制得，其分子式为C16H17NO4，化学结构式为：
盐酸石蒜碱的分子质量为323.77；熔点为210～212℃。化学性质为碱性，呈棱柱状结晶。微溶于乙醇，不溶于水和氯仿，可溶于DMSO。
3.来自石蒜科植物的用于治疗白血病和多发性骨髓瘤的天然化合物单体，可以通过静脉、腹腔、口服等方式给药，用于治疗白血病和多发性骨髓瘤。为以下任意一种或一种以上合用：
(1)高石蒜碱(Homolycorine)，化学结构式如下：
高石蒜碱可以和盐酸形成盐类并与两分子水结合，形成水合物，可溶于水。
(2)水仙克拉辛(Narciclasine)，化学结构式如下：
(3)多花水仙碱(Tazettine)，化学结构式如下：
(4)前多花水仙碱(Pretazettine)，化学结构式如下：
(5)石蒜伦碱(Lycorenine)，化学结构式如下：
(6)伪石蒜碱(Pseudolycorine)，其化学结构有待鉴定。
4.根据权利要求1所述的水仙提取物，与其他药物搭配使用，以静脉、腹腔、口服等方式给药，形成毒、副作用低，疗效更好的复合药物，用于治疗白血病和多发性骨髓瘤。
5.根据权利要求2所述的石蒜碱单体，与其他药物搭配使用，以静脉、腹腔、口服等方式给药，形成毒、副作用低，疗效更好的复合药物，用于治疗白血病和多发性骨髓瘤。
6.根据权利要求3所述的高石蒜碱、水仙克拉辛、多花水仙碱、前多花水仙碱、石蒜伦碱、伪石蒜碱单体，与其他药物搭配使用，以静脉、腹腔、口服等方式给药，形成毒、副作用低，疗效更好的复合药物，用于治疗白血病和多发性骨髓瘤。
7.根据权利要求2所述的石蒜碱单体，对其进行化学修饰，烷基化、氧化、羧基化和羟基化后形成的衍生物，以静脉、腹腔、口服等方式给药，用于治疗白血病和多发性骨髓瘤。
8.根据权利要求3所述的高石蒜碱、水仙克拉辛、多花水仙碱、前多花水仙碱、石蒜伦碱、伪石蒜碱单体，对其进行化学修饰，烷基化、氧化、羧基化和羟基化后形成的衍生物，以静脉、腹腔、口服等方式给药，用于治疗白血病和多发性骨髓瘤。
9.根据权利要求7所述的石蒜碱单体衍生物与其他药物搭配使用，以静脉、腹腔、口服等方式给药，用于治疗白血病和多发性骨髓瘤。
10.根据权利要求8所述的高石蒜碱、水仙克拉辛、多花水仙碱、前多花水仙碱、石蒜伦碱、伪石蒜碱单体衍生物与其他药物搭配使用，以静脉、腹腔、口服等方式给药，用于治疗白血病和多发性骨髓瘤。
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