CN1556194A - 大规模液体深层发酵生产桦褐孔菌水提取物及多糖工艺 - Google Patents

大规模液体深层发酵生产桦褐孔菌水提取物及多糖工艺 Download PDF

Info

Publication number
CN1556194A
CN1556194A CNA2004100138681A CN200410013868A CN1556194A CN 1556194 A CN1556194 A CN 1556194A CN A2004100138681 A CNA2004100138681 A CN A2004100138681A CN 200410013868 A CN200410013868 A CN 200410013868A CN 1556194 A CN1556194 A CN 1556194A
Authority
CN
China
Prior art keywords
liquid
polysaccharide
phaeopoms obliquus
culture
technology
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CNA2004100138681A
Other languages
English (en)
Other versions
CN1281734C (zh
Inventor
敖宗华
符慧子
邹锡良
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to CN 200410013868 priority Critical patent/CN1281734C/zh
Publication of CN1556194A publication Critical patent/CN1556194A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN1281734C publication Critical patent/CN1281734C/zh
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Landscapes

  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

大规模液体深层发酵生产桦褐孔菌水提取物及多糖工艺。本发明以大规模液体深层发酵生产桦褐孔菌水提取物及多糖为目标，以山东金乡真菌研究所的桦褐孔菌真菌为出发菌株，采用斜面菌种进行液体摇瓶培养、液体摇瓶扩大培养、一级种子培养和发酵培养，最终发酵罐体积达1000－5000L。发酵结束后，将终了发酵液温度加热到60－100℃，搅拌速度为150－250rpm/min，维持2－4小时，用泵将发酵液输送到贮罐中，经板框压滤，清液浓缩，喷雾干燥得到桦褐孔菌水提取物，如将清液浓缩后用适量乙醇沉淀，取沉淀物加适量水溶解，喷雾干燥可得桦褐孔菌多糖。

Description

大规模液体深层发酵生产桦褐孔菌水提取物及多糖工艺
技术领域
本发明涉及一种大规模液体深层发酵生产桦褐孔菌水提取物及多糖工艺。
技术背景
桦褐孔菌(Fuscoporia obliqua)又名白桦茸，在俄罗斯和东欧民间叫Chaga，属担子菌亚门、层菌纲、非褐菌目、多孔菌科、褐卧孔菌属，生于白桦树、银桦、榆树、赤杨等的树皮下或活立木的树皮下或砍伐后树木的枯干上。
16-17世纪以来，俄罗斯、波兰、芬兰等民间就广泛利用其野生子实体来防治各种疑难杂症，如各种癌症(胃癌、肝癌、肠癌等各种消化器官癌症)以及心脏病和糖尿病等。波兰自1961年以来就广泛使用桦褐孔菌来治疗癌症。日本的研究人员高度评价俄国这种民间的药物，并认为这是上帝赐给苦难人类的一种奇特的礼物，可用来防治肝癌、爱滋病和O-157大肠杆菌中毒。据报道，俄罗斯的堪索莫乐斯基(Komsomlski)制药公司生产的桦褐孔菌精粉对糖尿病的治愈率达93％。桦褐孔菌的水煎煮物具有显著的抗肿瘤活性。桦褐孔菌的糖浆剂早已用于治疗癌症。由于来源稀少，其野生子实体的价格是桑黄(Phellinus igniarius)的7-8倍。
发明内容
本发明的目的是以生产桦褐孔菌水提取物及多糖为目标，发明一种廉价高效的桦褐孔菌水提取物及多糖的大规模液体深层发酵工艺，为今后的产业化应用打下基础。
实现本发明的技术方案：以桦褐孔菌真菌为出发菌株，采用斜面菌种进行液体摇瓶培养、液体摇瓶扩大培养、一级种子培养和发酵培养。在发酵结束后，将终了发酵液继续加热到一定温度，搅拌维持一定时间，搅拌停止后，将发酵液喷雾干燥得发酵菌粉。如将发酵液经板框压滤，清液浓缩，喷雾干燥得到桦褐孔菌水提取物，如将清液浓缩后用适量乙醇沉淀，取沉淀物加适量水溶解，喷雾干燥可得桦褐孔菌多糖。
本菌株购自山东金乡真菌研究所。
实现本发明的具体步骤如下：
(1)取出斜面菌种接入配制的新鲜斜面培养基中，培养温度25-33℃，培养150-250小时。
(2)将步骤1中的斜面菌种转接入装有摇瓶培养基的摇瓶中，25-33℃培养，转速120-180rpm/min，培养70-120小时后进行摇瓶的扩大培养。
(3)将步骤2中的摇瓶菌种转接入装有摇瓶扩大培养基的摇瓶再进行扩大培养，25-33℃培养，转速120-180rpm/min，培养35-60小时后接入一级种子罐进行培养。
(4)将步骤3中的摇瓶菌种转接入一个装有种子培养基的一级种子罐中，接种量为4-10％，保持罐温25-33℃，罐压0.5-0.9kPa，搅拌速率80-150rpm/min，通气量1∶0.3-0.5v/v.m，发酵35-60小时，然后转接入发酵罐发酵。
(5)将一级种子罐中的菌种转接入一个装有发酵培养基的发酵罐中，接种量为4-10％，保持罐温25-33℃，罐压0.5-0.9kPa，搅拌速率80-150rpm/min，通气量1∶0.3-0.5v/v.m，发酵90-150小时。发酵液还原糖含量降低到1.0-2.0％左右时为发酵终了，放罐。
本发明中斜面培养基的配方是(g/100m1)：马铃薯15-25，葡萄糖1-3，琼脂1.5-2.5，加水定容至所需体积，pH值自然。
本发明中摇瓶培养基的配方是(g/100ml)：葡萄糖2-4，蛋白胨0.05-0.5，麸皮汁1.0-2.5，KH2PO4 0.1-0.5，MgSO4 0.01-0.2，加水定容至所需体积，pH值为4.5-5.5。
本发明中摇瓶扩大培养基的配方是(g/100ml)：葡萄糖2-4，蛋白胨0.05-0.7，玉米粉0.5-2，麸皮汁1.0-2.5，KH2PO4 0.1-0.5，MgSO4 0.01-0.2，加水定容至所需体积，pH值为4.5-5.5。
本发明中一级种子培养和发酵培养的培养基配方是(g/100ml)：葡萄糖2-4，蛋白胨0.05-0.7，玉米粉0.5-2，黄豆粉0.5-2，麸皮汁1-3，KH2PO4 0.1-0.5，MgSO40.01-0.2，加水定容至所需体积，pH值为4.5-5.5。
本发明步骤2和3中摇瓶培养基与摇瓶容积比为1∶5。
本发明步骤4中一级种子罐的容积为100-300L，在该一级种子罐中装有的一级种子培养基相应为50-180L；步骤5中发酵罐的容积为1000-5000L，在该发酵罐中装有的发酵培养基相应为500-3500L。
本发明的放罐标准是发酵液开始变得粘稠，还原糖含量降低到1.0-2.0％左右，镜检发现菌丝体开始衰老。
如需获取其水提取物及多糖，则在本发明所述的发酵终止后，将发酵终了液温度加热到60-100℃，搅拌速度为150-250rpm/min，维持2-4小时，搅拌停止后，将发酵液喷雾干燥得发酵菌粉。如需获取桦褐孔菌水提取物，用泵将发酵液输送到贮罐中，经板框压滤，得清液。滤液经浓缩，使最后体积为原液的1/4-1/10，取浓缩液喷雾干燥得到桦褐孔菌水提取物。如加入适量乙醇使乙醇浓度达75％，醇析20-30小时，取沉淀用去离子水溶解，喷雾干燥即得到桦褐孔菌多糖。
本发明的有益效果：本发明适用于大规模液体深层发酵生产桦褐孔菌水提取物及多糖，对于今后的工业化生产和相关的应用产业的发展具有重要意义。本发明所得桦褐孔菌水提取物和多糖颜色为褐色。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步的详细说明。
实施例1：
在斜面培养基中接种购自山东金乡真菌研究所的桦褐孔菌菌丝体，培养温度28℃，培养时间180小时。将新鲜的斜面菌种接入装有100ml培养基的500ml三角瓶中，28℃摇床培养96小时，摇床转速150rpm/min。然后将所得摇瓶菌种转接入装有100ml培养基的500ml三角摇瓶中进行扩大培养，28℃摇床培养45小时，摇床转速150rpm/min。然后将三角瓶扩大的菌种2200ml转接入装有50L种子培养基的100L一级种子罐中，保持罐温28℃，罐压0.7kPa，搅拌速率100rpm/min，通气量1∶0.5v/v.m，发酵时间45小时。将一级种子罐菌种转接入装有800L发酵培养基的1500L发酵罐中，保持罐温28℃，罐压0.7kPa，搅拌速率100rpm/min，通气量1∶0.5v/v.m，发酵时间120小时，发酵菌粉以干重计为3.5％，多糖含量为22％。
本实施例1中斜面培养基组成是(g/100ml)：马铃薯20，葡萄糖2，琼脂2，加水定容至所需体积，pH值为自然。
本实施例1中摇瓶培养基组成是(g/100ml)：葡萄糖3，蛋白胨0.2，麸皮汁2，KH2PO4 0.2，MgSO4 0.1，加水定容至所需体积，pH值为5.0。
本实施例1中摇瓶扩大培养基组成是(g/100ml)：葡萄糖3，蛋白胨0.2，玉米粉1，麸皮汁2，KH2PO4 0.2，MgSO4 0.1，加水定容至所需体积，pH值为5.0。
本实施例1中100L一级种子罐的培养基组成是(g/100ml)：葡萄糖3，蛋白胨0.2，玉米粉1.5，黄豆粉1，麸皮汁2，KH2PO4 0.2，MgSO4 0.1，加水定容至50L，pH值为5.0。
本实施例1中1500L发酵罐的培养基配方是(g/100ml)：葡萄糖3，蛋白胨0.5，玉米粉1.5，黄豆粉1.0，麸皮汁2，KH2PO4 0.2，MgSO4 0.1，加水定容至800L，pH值为5.0。
本实施例1中发酵结束标准是：发酵液开始变得粘稠，还原糖含量降低到1.5％，镜检发现菌丝体开始衰老。
获取桦褐孔菌发酵菌粉、水提取物及多糖的方法是：在本发明所述的发酵终止后，将温度加热到90℃，搅拌速度为220rpm/min，维持3小时，搅拌停止后，将发酵液喷雾干燥得发酵菌粉。或用泵将发酵液输送到贮罐中，经板框压滤，滤液经浓缩，使最后体积为原液的1/5，取浓缩液喷雾干燥得到桦褐孔菌水提取物。如需获取多糖，则将浓缩液加入适量乙醇使乙醇浓度达75％，醇析24小时，取沉淀用去离子水溶解，喷雾干燥得到桦褐孔菌多糖。

Claims (9)

1、一种液体深层发酵生产桦褐孔菌水提取物及多糖的工艺，其特征是以桦褐孔菌真菌(Fuscoporia obliqua)为出发菌株，采用斜面菌种进行液体摇瓶培养、液体摇瓶扩大培养、一级种子培养和发酵培养得桦褐孔菌菌丝体发酵液，在发酵结束后，将发酵液喷雾干燥得发酵菌粉，或将终了发酵液继续加热到一定温度，搅拌维持一定时间，发酵液经板框压滤，清液浓缩，喷雾干燥得到桦褐孔菌水提取物，或将清液浓缩后用适量乙醇沉淀，取沉淀物加适量水溶解，喷雾干燥可得桦褐孔菌多糖。
2、根据权利要求1所述的液体深层发酵生产桦褐孔菌水提取物及多糖的工艺，其特征是以购自山东金乡真菌研究所的桦褐孔菌真菌为出发菌株。
3、根据权利要求1所述的液体深层发酵生产桦褐孔菌水提取物及多糖的工艺，其特征是所述的斜面菌种培养，培养基组成是(g/100ml)：马铃薯15-25，葡萄糖1-3，琼脂1.5-2.5，加水定容至所需体积，pH值为自然，斜面菌种培养温度25-33℃，培养150-250小时。
4、根据权利要求1所述的液体深层发酵生产桦褐孔菌水提取物及多糖的工艺，其特征是所述的摇瓶培养，培养基组成是(g/100ml)：葡萄糖2-4，蛋白胨0.05-0.5，麸皮汁1.0-2.5，KH2PO4 0.1-0.5，MgSO4 0.01-0.2，加水定容至所需体积，pH值为4.5-5.5，培养条件是：培养温度25-33℃，转速120-180rpm/min，培养70-120小时，然后转接入摇瓶进行扩大培养。
5、根据权利要求1所述的液体深层发酵生产桦褐孔菌水提取物及多糖的工艺，其特征是所述的摇瓶扩大培养，培养基组成是(g/100ml)：葡萄糖2-4，蛋白胨0.05-0.7，玉米粉0.5-2，麸皮汁1.0-2.5，KH2PO4 0.1-0.5，MgSO4 0.01-0.2，加水定容至所需体积，pH值为4.5-5.5，培养条件是：培养温度25-33℃，转速120-180rpm/min，培养35-60小时，然后转接入一级种子培养。
6、根据权利要求1所述的液体深层发酵生产桦褐孔菌水提取物及多糖的工艺，其特征是所述的一级种子培养，培养基组成是(g/100ml)：葡萄糖2-4，蛋白胨0.05-0.7，玉米粉0.5-2，黄豆粉0.5-2，麸皮汁1-3，KH2PO4 0.1-0.5，MgSO40.01-0.2，加水定容至所需体积，pH值为4.5-5.5，接种量为4-10％，培养条件是：培养温度25-33℃，罐压0.5-0.9kPa，搅拌速率80-150rpm/min，通气量1∶0.3-0.5v/v.m，发酵35-60小时，然后转接入发酵罐发酵。
7、根据权利要求1所述的液体深层发酵生产桦褐孔菌水提取物及多糖的工艺，其特征是所述的发酵培养，发酵培养基组成是(g/100ml)：葡萄糖2-4，蛋白胨0.05-0.7，玉米粉0.5-2，黄豆粉0.5-2，麸皮汁1-3，KH2PO4 0.1-0.5，MgSO40.01-0.2，加水定容至所需体积，pH值为4.5-5.5，接种量为4-10％，培养条件是：培养温度25-33℃，罐压0.5-0.9kPa，搅拌速率80-150rpm/min，通气量1∶0.3-0.5v/v.m，发酵90-150小时，当发酵液还原糖含量降到1.0-2.0％时，为发酵终了。
8、根据权利要求1所述的液体深层发酵生产桦褐孔菌水提取物及多糖的工艺，其特征是所述的发酵培养，可选择1000-5000L的发酵罐进行发酵培养。
9、根据权利要求1所述的液体深层发酵生产桦褐孔菌水提取物及多糖的工艺，其特征是将终了发酵液温度加热到60-100℃，搅拌速度为150-250rpm/min，维持2-4小时，搅拌结束后，将发酵液用喷雾干燥可得桦褐孔菌发酵菌粉；或用泵将发酵液输送到贮罐中，经板框压滤得到清液，清液浓缩至体积为原体积的1/4-1/10，喷雾干燥得到桦褐孔菌水提取物；或将清液浓缩后用适量乙醇沉淀，醇析液乙醇浓度为75％，醇析20-30小时，取沉淀物加适量水溶解，喷雾干燥可得桦褐孔菌多糖。
CN 200410013868 2004-01-07 2004-01-07 大规模液体深层发酵生产桦褐孔菌发酵菌粉、水提取物及多糖的工艺 Expired - Fee Related CN1281734C (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN 200410013868 CN1281734C (zh) 2004-01-07 2004-01-07 大规模液体深层发酵生产桦褐孔菌发酵菌粉、水提取物及多糖的工艺

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN 200410013868 CN1281734C (zh) 2004-01-07 2004-01-07 大规模液体深层发酵生产桦褐孔菌发酵菌粉、水提取物及多糖的工艺

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1556194A true CN1556194A (zh) 2004-12-22
CN1281734C CN1281734C (zh) 2006-10-25

Family

ID=34351138

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN 200410013868 Expired - Fee Related CN1281734C (zh) 2004-01-07 2004-01-07 大规模液体深层发酵生产桦褐孔菌发酵菌粉、水提取物及多糖的工艺

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN1281734C (zh)

Cited By (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102108371A (zh) * 2009-12-23 2011-06-29 徐向群 一种利用木质纤维素类农林废弃物液体深层发酵生产白腐真菌抗氧化活性物质的工艺
CN101748159B (zh) * 2008-12-02 2012-09-05 徐州师范大学 一种发酵培养桦褐孔菌的方法
CN103146775A (zh) * 2011-12-07 2013-06-12 徐向群 一种表没食子儿茶素没食子酸酯和表儿茶素没食子酸酯液体深层发酵制备的方法
CN103156052A (zh) * 2013-02-21 2013-06-19 徐向群 液体深层发酵生产桦褐孔菌免疫增强活性物质的工艺
CN103833863A (zh) * 2012-11-20 2014-06-04 中国科学院兰州化学物理研究所 从浒苔中提取粗多糖的制备工艺
CN104956925A (zh) * 2015-07-24 2015-10-07 刘随记 桦褐孔菌连续深层发酵液和发酵粉的生产方法
CN105349439A (zh) * 2015-12-16 2016-02-24 黑龙江众生生物工程有限公司 桦褐孔菌的培养发酵方法及其水溶性多糖的制备方法
CN105794955A (zh) * 2016-03-21 2016-07-27 东北农业大学 一种桦褐孔菌硒化多糖制剂及其在树莓保鲜中的用途
CN106579293A (zh) * 2016-11-22 2017-04-26 汪逸凡 一种促消化复合饲料甜味剂的制备方法
CN107916229A (zh) * 2017-10-23 2018-04-17 山东省农业科学院畜牧兽医研究所 一株桦褐孔菌及其应用
WO2019080454A1 (zh) * 2017-10-23 2019-05-02 山东省农业科学院畜牧兽医研究所 一株桦褐孔菌及其应用
CN109965268A (zh) * 2019-04-12 2019-07-05 天津农学院 一种食用菌果冻及其制备方法
WO2021017449A1 (zh) * 2019-07-29 2021-02-04 浙江养生堂天然药物研究所有限公司 发酵的桦树汁及其生产方法及其在皮肤外用组合物中的用途

Cited By (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101748159B (zh) * 2008-12-02 2012-09-05 徐州师范大学 一种发酵培养桦褐孔菌的方法
CN102108371A (zh) * 2009-12-23 2011-06-29 徐向群 一种利用木质纤维素类农林废弃物液体深层发酵生产白腐真菌抗氧化活性物质的工艺
CN103146775A (zh) * 2011-12-07 2013-06-12 徐向群 一种表没食子儿茶素没食子酸酯和表儿茶素没食子酸酯液体深层发酵制备的方法
CN103833863A (zh) * 2012-11-20 2014-06-04 中国科学院兰州化学物理研究所 从浒苔中提取粗多糖的制备工艺
CN103156052A (zh) * 2013-02-21 2013-06-19 徐向群 液体深层发酵生产桦褐孔菌免疫增强活性物质的工艺
CN104956925A (zh) * 2015-07-24 2015-10-07 刘随记 桦褐孔菌连续深层发酵液和发酵粉的生产方法
CN105349439A (zh) * 2015-12-16 2016-02-24 黑龙江众生生物工程有限公司 桦褐孔菌的培养发酵方法及其水溶性多糖的制备方法
CN105794955A (zh) * 2016-03-21 2016-07-27 东北农业大学 一种桦褐孔菌硒化多糖制剂及其在树莓保鲜中的用途
CN106579293A (zh) * 2016-11-22 2017-04-26 汪逸凡 一种促消化复合饲料甜味剂的制备方法
CN107916229A (zh) * 2017-10-23 2018-04-17 山东省农业科学院畜牧兽医研究所 一株桦褐孔菌及其应用
WO2019080454A1 (zh) * 2017-10-23 2019-05-02 山东省农业科学院畜牧兽医研究所 一株桦褐孔菌及其应用
CN107916229B (zh) * 2017-10-23 2019-11-08 山东省农业科学院畜牧兽医研究所 一株桦褐孔菌及其应用
CN109965268A (zh) * 2019-04-12 2019-07-05 天津农学院 一种食用菌果冻及其制备方法
WO2021017449A1 (zh) * 2019-07-29 2021-02-04 浙江养生堂天然药物研究所有限公司 发酵的桦树汁及其生产方法及其在皮肤外用组合物中的用途

Also Published As

Publication number Publication date
CN1281734C (zh) 2006-10-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1281734C (zh) 大规模液体深层发酵生产桦褐孔菌发酵菌粉、水提取物及多糖的工艺
CN1259423C (zh) 大规模液体深层发酵生产桑黄水提取物及多糖的方法
CN105695543B (zh) 一种生物表面活性素的生产方法
CN100390271C (zh) 一种生产木糖醇的方法及其专用菌株
CN112195215B (zh) 一种榆黄菇松蕈菌丝体联合发酵生产麦角硫因的方法
CN102080113B (zh) 使用米糠麸皮复合原料和灰树花诱变菌株生产多糖的方法
CN102108371A (zh) 一种利用木质纤维素类农林废弃物液体深层发酵生产白腐真菌抗氧化活性物质的工艺
CN1807573A (zh) 一种云芝菌种以及采用该菌种生产云芝胞内糖肽的方法
CN103087893B (zh) 一种复合杂粮红曲的制备方法
CN109906876B (zh) 富硒猴头菇菌丝体，制备方法及其应用
CN1385519A (zh) 里氏木霉菌株及其用途
CN1807574A (zh) 一种冬虫夏草的培养方法及其专用培养基
CN1273010C (zh) 大规模液体深层发酵生产松口蘑及其多糖的方法
CN109504725A (zh) 一种发酵猴头菌制备高纯度猴头菌多糖的方法和发酵培养基
CN1699585A (zh) 一种生物抗菌剂的制备方法
CN105624232A (zh) 提高猴头菌发酵多糖的方法
CN1709917A (zh) 发酵法提取枸杞多糖
CN1303905C (zh) 一种微生物发酵块茎类农副产品残渣生产膳食纤维的方法
CN103865803B (zh) β-葡萄糖苷酶高产菌及其在转化制备京尼平和白藜芦醇中的应用
Berovic et al. Engineering aspects in production of various medicinal mushrooms biomass in submerged bioreactors
Mani et al. Evaluation of Mycelial and Exo-polysaccharide production from Cordyceps militaris
Kim et al. Effects of dissolved oxygen control on cell growth and exopolysaccharides production in batch culture of Agaricus blazei
CN1596585A (zh) 大规模液体深层发酵生产亮菌菌丝体菌粉及其多糖工艺
CN101575627A (zh) 一种利用木质纤维素生产甲壳素/壳聚糖的方法
CN109575150A (zh) 一种虫草多糖的提取工艺

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C19 Lapse of patent right due to non-payment of the annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee