CN1541671A - 一种治疗心绞痛的药物及该药物的制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种治疗心绞痛的药物及该药物的制备方法，以及在制备治疗心绞痛、抗动脉粥样硬化及血脂异常症药物中的应用。该药物主要由生蒲黄、法半夏、丹参、陈皮等为原料，按一定的重量配比制备而成。本发明药物具有行气活血，祛瘀止痛的功能，可用于治疗心绞痛、动脉粥样硬化和高血脂症。它可制备成任何一种常用的内服剂型。
Description
技术领域
本发明属于中药领域。特别是一种治疗心绞痛的药物，具体地说是以中草药为原料制备的中成药，本发明还涉及该药物的制备方法及其该药物在制备治疗心绞痛、血脂异常、抗动脉粥样硬化药中的应用。
背景技术
高脂血症、动脉粥样硬化、冠心病及心绞痛是临床常见多发病。流行病学资料证实，我国冠心病(CHD)的发病率、死亡率正逐年升高，发病年龄提前，发病率随着血总胆固醇(TC)水平和血压升高而增高。研究证实：动脉粥样硬化病(ASD)是可致残、致死的全身性疾病，其导致严重后果中的脑卒中、心肌梗死，是威胁人民健康与生命的首要病征。ASD和CHD的多重危险因素(高血压、血脂异常、糖尿病、吸烟、肥胖及代谢综合征等)几乎一致。CHD的心肌梗死(MI)病理基础系ASD的动粥样硬化斑块；同样ASD的发病主要与血脂异常密切相关。贯彻循证医学原则，重视ASD的预防是防治CHD的关键，而防治脂质异常可减少ASD的发生，无疑有益于CHD的防治。
现代医学认为脂质异常(高脂血症)是冠心病、动脉粥样硬化病及心绞痛最重要的危险因素，反映了多基因缺陷和饮食习惯生活方式及环境因素之间相互作用。自脂质异常、动脉粥样硬化发展至累及冠状动脉病程冗长而隐匿，多是病始于幼年而发病于中老年。
硝酸酯类、钙拮抗剂、β-阻断剂及血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)等是直接针对冠心病、心绞痛等病机的有效药物。但近年对硝酸酯类，尤其是对钙拮抗剂的短时和长效的治疗作用争议颇多。除此类药各自的禁忌证外，硝酸酯类不良反应有：体位性低血压，反射性地兴奋交感神经而使心肌收缩力加强、心率加快，心肌耗氧量增加，因而减弱了硝酸甘油降低心肌耗氧量的作用；钙拮抗剂的不良反应多与扩张外周血管作用有关，如头痛、眩晕、颜面潮红和体位性低血压等；β-阻断剂常见的不良反应有窦性心动过缓，诱发心功能不全、低血压及末梢循环障碍等；血管紧张素转化酶抑制剂久用可引起咳嗽，提高了咳嗽反射的敏感性等；另外还需关注：心律失常，传导阻滞、心功能不全甚至促心肌缺血等负面作用；还可产生AS斑块稳定性，脂质异常、糖耐量低下等不良作用。同样抗血小板药效不理想，抗凝血酶药物选择和应用混乱，个体对治疗反应差异很大，继发出血的致命反应，使药量难以维持理想的抗凝强度而影响疗效，凝血酶直接抑制剂的远期益处尚待认可。
而心肌缺血或缺血后再灌注损伤(MRI)过程易致心肌顿抑(stunning)、心肌无复流(no-reflowing)、再灌注心律失常及心肌细胞凋亡(apoptosis)、及心肌细胞坏死等损伤，对后续发生慢性心力衰竭密切相关。资料表明与脂质过氧化造成血管内皮功能损伤，再灌后加重NO/NOS系统的异常，NO释放减少是重要环节。
中医将脂质代谢异常，动脉粥样硬化归属于“痰浊”“瘀血”范畴心绞痛。心肌梗塞属“胸痹”“心痛”，其发生多与饮食不节，情志失调，年老体虚或肌腑虚衰有关。痰瘀产生的基础来自肝、脾、肾功能失调。脾失健运，肝气郁结，则痰湿内盛，渐至痰湿脾阻血脉，痰瘀互结，阻滞脉道，冠状动脉硬化并继续发展为心肌缺血，加重则现“胸痹”“心痈”，遂恶性循环。由此可见，治疗冠状动脉硬化、冠心病及心绞痛药物仅用调脂或单用护心药物均有偏颇之弊，难奏标本兼治之效。
而目前市场上治疗冠心病心绞痛症药物同具调脂、护心功效者甚少。故心血管药物虽众，但疗效不能满意。尤其如长期使用化学药治疗心血管疾病其不良反应亦不容忽视。社会对疗效更好、更安全的心血管疾病防治药物存在迫切的需求。
发明内容
鉴于动脉粥样硬化是痰瘀互结的病理产物，冠心病是痰凝血瘀病，当以通络之法祛痰化瘀为治。即将脂质异常，动脉硬化冠心病统置于“痰瘀同治”的治则，但组成方剂需顾及病变动态的全过程和不同阶段病症各异的多数患者，中药合理组方能充分发挥此多途径、多靶点和调整机体内稳态的功效。
通过检索，至今为止，还没有发现任何有关本发明的药物组合物的报道。本发明人经反复研究并通过动物的反复验证，研究出具有更好效果，更安全的防治高脂血症、动脉粥样硬化、冠心病及其心血瘀阻、气滞血瘀证和痰阻心脉证的心绞痛的中药，从而完成了本发明。
本发明目的之一是提供一种安全性高，无毒副作用可长期服用的，防治高脂血症、动脉粥样硬化、冠心病及其心绞痛的中成药。
本发明的另一个目的是提供该治疗心绞痛的药物的制备方法。
本发明的另一个目的是提供该治疗心绞痛的药物在制备预防、治疗心绞痛药中的应用。
本发明的另一个目的是提供该治疗心绞痛的药物在制备预防、治疗动脉粥样硬化症药中的应用。
本发明的另一个目的是提供该治疗心绞痛的药物在制备预防、治疗血脂异常症药中的应用。
本发明的另一个目的是提供该治疗心绞痛的药物在制备预防、治疗冠心病药中的应用。
本发明的解决方案是：
本发明药物选择蒲黄(生)、法半夏、丹参、陈皮进行组合，将这些药物组合使各药物功效产生协同作用，从而旨够有效防治高脂血症、动脉粥样硬化、冠心病及其心血瘀阻、气滞血瘀证和痰阻心脉证的心绞痛。其中，蒲黄归心肝经，生用能凉血活血，止心腹诸痛，该药“专入血分”以清香之气兼以气分，能导瘀而治气血凝滞痛。丹参为心与包络之血分药，辅蒲黄以养血活血祛瘀、凉血消痛；法半夏入太阴脾经，辛温善燥湿化痰宽胸，俾去湿脾旺痰之由生；陈皮为脾肺气分药，配之理气燥湿化痰，壮脾顺气，四药合用，健脾消痰，祛瘀通络，有效解决痰挟瘀血症的痰瘀互根，相互转化，共同消长问题。祛瘀则“痰”亦治，消痰则瘀亦去，从而防治脂质异常(高脂血症)、动脉粥样硬化、冠心病。
为了取得好的疗效，本发明药物还与制首乌、川芎进行组合。其中制首乌，养血益肝肾和气血，不宽不燥，为培本扶正之良臣。川芎血中气药，辛温引散，佐以气行血调，加强通达气血祛瘀止痛之功效。
为取得更好疗效，本发明药物还与制首乌、川芎、昆布、泽泻、生山楂、决明子、枸杞子组合，其中制首乌，养血益肝肾和气血，不宽不燥，为培本扶正之良臣。川芎血中气药，辛温引散，佐以气行血调，加强通达气血祛瘀止痛之功效。昆布软坚破积、消痰饮。山楂味酸，佐以消食健脾、活血散瘀，有散有收，祛不伤正。枸杞佐补肝肾，加泽泻以淡渗，免有补无泻之虞，佐以除湿。决明子益肝明目、祛痰浊。以上七药助前四味主辅药物，健脾渗湿，补益肝肾，行瘀血消痰浊，使本药物组合物，防治脂质异常、动脉粥样硬化、冠心病作用更为显著。
本发明药物组分的用量是经过发明人进行大量摸索总结得出的，各组分用量为下述重量份范围都具有较好的疗效：
蒲黄3～12份 法半夏2～12份 丹参5～18份 陈皮2～12份
本发明药物的优选组分用量为：蒲黄5～9份 法半夏5～9份 丹参7～12份 陈皮5～8份；
本发明药物的最佳组分用量为：蒲黄6份 法半夏5份 丹参9份 陈皮5.5份；
本发明药物各组分用量还可以是：蒲黄3～12份 法半夏2～12份 丹参5～18份 陈皮2～12份 制首乌4～15份 川芎2～12份
本发明药物的优选组分用量为：蒲黄5～9份 法半夏5～9份 丹参7～12份陈皮5～8份 制首乌6～10份 川芎4～8份；
本发明药物的最佳组分用量为：蒲黄6份 法半夏5份 丹参9份 陈皮5.5份 制首乌7份 川芎6份
本发明药物进一步各组分用量为：蒲黄3～12份 法半夏2～12份 丹参5～18份 陈皮2～12份 制首乌4～15份 川芎2～12份 昆布3～15份 泽泻3～12份枸杞子3～15份 决明子6～18份 生山楂6～15份；
本发明药物的优选组分用量为：蒲黄5～9份 法半夏5～9份 丹参7～12份陈皮5～8份 制首乌6～10份 川芎4～8份 昆布6～10份 泽泻5～8份 枸杞子5～10份 决明子8～12份 生山楂7～10份；
本发明药物的最佳组分用量为：蒲黄6份 法半夏5份 丹参9份 陈皮5.5份 制首乌7份 昆布8份 川芎6份 泽泻6份 枸杞子7份 决明子9份 生山楂8份
本发明药物可以采用中药制剂的常规方法制备成任何常规内服制剂。例如可以将这些原料药研成粉末混合均匀制成散剂冲服；但是为了使该药物的各原料更好的发挥药效，优选对原料药中的蒲黄、丹参进行了特殊提取如乙醇提取，对陈皮或陈皮和川芎进行了水蒸汽蒸馏提取其挥发油，但是这些不能用于限制本发明的保护范围。
本发明药物活性组分的制备方法如下：
a)称取各原料药蒲黄、法半夏、丹参和陈皮，备用；
b)将所述重量配比的蒲黄、丹参二味加50％～90％乙醇回流提取2～3次，合并醇提取液，减压回收乙醇，得浓缩液，备用；
c)将b)的药渣与所述重量配比的法半夏、陈皮加水煎煮三次，每次加水以没过药面为宜，将水煎煮药液滤过，浓缩至相对密度为1.15～1.20(80℃热测)，与蒲黄、丹参醇提浓缩液混匀，得清膏，即本发明药的得有效成分。
如果原料药还与制首乌和川芎组合，其制备方法为：
a)称取各原料药蒲黄、法半夏、丹参、陈皮、制首乌和川芎，备用；
b)将所述重量配比的蒲黄、丹参二味加50％～90％乙醇回流提取2～3次，合并醇提取液，减压回收乙醇，得浓缩液，备用；
c)将b)的药渣与其余四味药材加水煎煮三次，每次加水以没过药面为宜，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为1.15～1.2(80℃热测)，与蒲黄、丹参醇提浓缩液混匀，得清膏，即本发明药物的有效成分。
如果还与昆布、泽泻、枸杞子、决明子和生山楂组合，其制备方法如下：
a)称取各原料药蒲黄、法半夏、丹参、陈皮、制首乌、川芎、昆布、泽泻、枸杞子、决明子和生山楂，备用；
b)将所述重量配比的蒲黄、丹参二味加50％～90％乙醇回流提取2～3次，合并醇提取液，减压回收乙醇，得浓缩液，备用；
c)将b)的药渣与其余九味药材加水煎煮三次，每次加水以没过药面为宜，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为1.15～1.2(80℃热测)，与蒲黄、丹参醇提浓缩液混匀，得清膏，即本发明药物的有效成分。
上述制备方法中，优选步骤c)中药物加水煎煮提取时，第一次加水8倍，第二次加水6倍，第三次加水6倍，每次煎煮1小时。
上述制备方法中，优选步骤c)中药物加水煎煮提取时，水煎煮药液浓缩至相对密度为1.03～1.08(80℃热测)，加入澄清剂澄清，混匀，静置，滤过，取滤液浓缩至相对密度1.14～1.18(80℃热测)，与蒲黄、丹参醇提浓缩液混匀，得清膏，即本发明药物的有效成分。
上述制备方法中，优选步骤b)中将药材加乙醇提取时，第一次加8倍药材量的乙醇提取，第二次加6倍药材量的乙醇提取，各煎煮1小时。
上述制备方法中，还可在步骤c)中将陈皮或陈皮和川芎二味药材先加10～15倍量水蒸馏提取挥发油，收集挥发油和水煎液①备用，药渣再与其余药材一起加水煎煮，滤液与水煎液①合并，浓缩，再与蒲黄、丹参乙醇提浓缩液混匀，得清膏，加入辅料，制成颗粒，并干燥，再加入步骤c)中收集的挥发油，混匀，制成颗粒剂。
本发明的药物的活性组分可以加入制备不同剂型时所需的各种常规辅料以常规的方法制备成任何一种常用口服剂型，如颗粒剂、丸剂、散剂、片剂、胶囊剂等。
本发明药物具有下述优点：
1、可同时治疗心绞痛、抗动脉粥样硬化及血脂异常。无化学甜味剂，对人体无毒无害；
2、有抗心肌缺血作用及保护心肌缺血后再灌注损伤；
3、可抑制血小板聚集，抗血栓生成和改善血液高凝状态；
4、调整异常血脂及一定程度消退动脉粥样硬化斑块、减缓动脉粥样硬化发生；
5、抗氧自由基、干预内源性抗氧化酶的调节，抑制脂质过氧化作用；
6、保护血管内皮细胞功能，可能与改善NO/NOS系统，增加NO释放有关。
本发明的治疗心绞痛的药物可应用于制备预防、治疗心绞痛的药中。
本发明的治疗心绞痛的药物可应用于制备预防、治疗动脉粥样硬化症的药中。
本发明的治疗心绞痛的药物可应用于制备预防、治疗血脂异常症的药中。
本发明的治疗心绞痛的药物可应用于制备预防、治疗冠心病的药中。
本发明具健脾消浊，行气活血，祛瘀通络，滋肾养肝。适用于胸痹之心血瘀阻证，气滞血瘀证和痰阻心脉证，西医称之为冠心病、心绞痛、抗动脉粥样硬化，血脂异常等症。
本发明用法与用量：口服，一日3次。开水冲服，每次6g，
具体实施方式
实施例1：本发明药物的胶囊剂制备
a)称取蒲黄3g、法半夏2g、丹参5g和陈皮2g，备用；
b)将上述重量配比的丹参、蒲黄加55％～65％乙醇回流提取2次，合并醇提取液，减压回收乙醇，得浓缩液，备用；
c)将b)的药渣与法半夏2g、陈皮2g二味药材加水煎煮三次，每次加水以没过药面为宜，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为1.15，与醇提浓缩液混匀，得清膏；
e)加入辅料，制成颗粒，整粒，并干燥，分装于胶囊中，即得。
实施例2：本发明药物的颗粒剂制备
a)称取各原料药蒲黄、法半夏、陈皮各12g，丹参18g，备用；
b)将18g的丹参和12g的蒲黄加70％～90％乙醇回流提取2次，合并醇提取液，减压回收乙醇，得浓缩液，备用；
c)将上述重量的陈皮加150g水蒸馏提取挥发油，收集挥发油备用，药渣再加7倍量水煎煮一次，水煎煮药液与蒸馏后的药液合并为溶液1备用；
d)将步骤b)的药渣与12g法半夏加水煎煮三次，每次加水以没过药面为宜，将水煎煮药液和溶液1合并，浓缩至相对密度为1.18，与醇提浓缩液混匀，得清膏；
e)加入辅料，制成颗粒，并干燥，再加入步骤c)中收集的挥发油，混匀，制成颗粒剂。
实施例3：本发明药物的片剂制备
a)称取蒲黄6g、法半夏5g、丹参9g、陈皮5.5g，备用；
b)将6g蒲黄和9g丹参加70％～90％乙醇回流提取2次，合并醇提取液，减压回收乙醇，得浓缩液，备用；
c)将步骤b)的药渣与5g法半夏和5.5g陈皮加水煎煮三次，每次加水以没过药面为宜，将水煎煮药液浓缩至相对密度为1.2，与醇提浓缩液混匀，得清膏；
d)加入辅料，制成颗粒，并干燥，压制成片剂。
实施例4：本发明药物的颗粒剂制备
a)称取各原料药蒲黄、法半夏、陈皮各5g，丹参7g，备用；
b)将5g蒲黄和7g的丹参加70％～90％乙醇回流提取2次，合并醇提取液，减压回收乙醇，得浓缩液，备用；
c)将5g的陈皮加75g水蒸馏提取挥发油，收集挥发油备用，药渣再加7倍量水煎煮一次，水煎煮药液与蒸馏后的药液合并为溶液1备用；
d)将步骤b)的药渣与5g法半夏加水煎煮三次，每次加水以没过药面为宜，将水煎煮药液和溶液1合并，浓缩至相对密度为1.16，与醇提浓缩液混匀，得清膏；
e)加入辅料，制成颗粒，并干燥，再加入步骤c)中收集的挥发油，混匀，制成颗粒剂。
实施例5：本发明药物的片剂制备
a)称取蒲黄9g、法半夏9g、丹参12g、陈皮8g，备用；
b)将9g蒲黄和12g丹参加70％～90％乙醇回流提取2次，合并醇提取液，减压回收乙醇，得浓缩液，备用；
c)将步骤b)的药渣与9g法半夏和8g陈皮加水煎煮三次，每次加水以没过药面为宜，将水煎煮药液浓缩至相对密度为1.18，与醇提浓缩液混匀，得清膏；
d)加入辅料，制成颗粒，并干燥，压制成片剂。
实施例6：本发明药物的胶囊剂制备
a)称取蒲黄3g、法半夏2g、丹参5g、陈皮2g、制首乌4g和川芎2g，备用；
b)上述重量的蒲黄和丹参加50％～90％乙醇回流提取2～3次，合并醇提取液，减压回收乙醇，得浓缩液，备用；
c)将b)的药渣与上述重量的法半夏、陈皮、制首乌和川芎加水煎煮三次，每次加水以没过药面为宜，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为1.15，与醇提浓缩液混匀，得清膏；
d)加入辅料，制成颗粒，整粒，并干燥，分装于胶囊中，即得。
实施例7：本发明药物的颗粒剂制备
a)称取各原料药蒲黄12g、法半夏12g、丹参18g、陈皮12g、制首乌15g和川芎12g，备用；
b)将上述重量的陈皮加150g水蒸馏提取挥发油，收集挥发油备用，药渣再加7倍量水煎煮一次，水煎煮药液与蒸馏后的药液合并为溶液1备用；
c)将上述重量的蒲黄、丹参加70％～90％乙醇回流提取2次，合并醇提取液，减压回收乙醇，得浓缩液，备用；
d)将步骤c)的药渣与12g法半夏、15g制首乌和12g川芎加水煎煮三次，第一次加水8倍，第二次加水6倍，第三次加水6倍，各煎煮1小时，合并水煎煮液，将水煎煮药液与溶液1合并，浓缩至相对密度为1.05，加入澄清剂澄清，混匀，静置，滤过，取滤液浓缩至相对密度1.15，与醇提浓缩液混匀，得清膏；
e)加入辅料，制成颗粒，并干燥，再加入步骤b)中收集的挥发油，混匀，制成颗粒剂。
实施例8：本发明药物的片剂制备
a)称取蒲黄6g、法半夏5g、丹参9g、陈皮5.5g、制首乌7g和川芎6g，备用；
b)将上述重量的陈皮加66g水蒸馏提取挥发油，收集挥发油备用，药渣再加6倍量水煎煮一次，水煎煮药液与蒸馏后的药液合并为溶液1备用；
c)将上述重量的蒲黄、丹参加70％～90％乙醇回流提取2次，合并醇提取液，减压回收乙醇，得浓缩液，备用；
d)步骤c)的药渣与上述重量的法半夏、制首乌和川芎加水煎煮三次，第一次加水8倍，第二次加水6倍，第三次加水6倍，各煎煮1小时，合并水煎煮液，将水煎煮药液与溶液1合并，浓缩至相对密度为1.07，加入澄清剂澄清，混匀，静置，滤过，取滤液浓缩至相对密度1.16，与醇提浓缩液混匀，得清膏；
e)加入辅料，制成颗粒，并干燥，再加入步骤b)中收集的挥发油，压制成片剂。
实施例9：本发明药物的胶囊剂制备
a)称取蒲黄5g、法半夏5g、丹参7g、陈皮5g、制首乌6g和川芎4g，备用；
b)将上述重量的蒲黄、丹参加50％～90％乙醇回流提取2～3次，合并醇提取液，减压回收乙醇，得浓缩液，备用；
c)将b)的药渣与法半夏5g、陈皮5g、制首乌6g和川芎4g四味药材加水煎煮三次，每次加水以没过药面为宜，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为1.16，与醇提浓缩液混匀，得清膏；
d)加入辅料，制成颗粒，整粒，并干燥，分装于胶囊中，即得。
实施例10：本发明药物的片剂制备
a)称取蒲黄9g、法半夏9g、丹参12g、陈皮8g、制首乌10g和川芎8g，备用；
b)将上述重量的陈皮和川芎加160g水蒸馏提取挥发油，收集挥发油备用，药渣再加6倍量水煎煮一次，水煎煮药液与蒸馏后的药液合并为溶液1备用；
c)将上述重量的蒲黄、丹参加70％～90％乙醇回流提取2次，合并醇提取液，减压回收乙醇，得浓缩液，备用；
d)将步骤c)的药渣与上述重量的法半夏、制首乌和川芎加水煎煮三次，第一次加水8倍，第二次加水6倍，第三次加水6倍，各煎煮1小时，合并水煎煮液，将水煎煮药液与溶液1合并，浓缩至相对密度为1.07，加入澄清剂澄清，混匀，静置，滤过，取滤液浓缩至相对密度1.16，与醇提浓缩液混匀，得清膏；
e)加入辅料，制成颗粒，并干燥，再加入步骤b)中收集的挥发油，压制成片剂。
实施例11：本发明药物的颗粒剂制备
a)称取蒲黄3g、法半夏2g、丹参5g、陈皮2g、制首乌4g、川芎2g、昆布3g、泽泻3g、枸杞子3g、决明子6g、生山楂6g，备用；
b)将上述重量的陈皮加25g水蒸馏提取挥发油，收集挥发油备用，药渣再加6倍量水煎煮一次，水煎煮药液与蒸馏后的药液合并为溶液1备用；
c)将上述重量的蒲黄、丹参加70％～90％乙醇回流提取2次，合并醇提取液，减压回收乙醇，得浓缩液，备用；
d)将步骤c)的药渣与其余药材加水煎煮三次，第一次加水8倍，第二次加水6倍，第三次加水6倍，各煎煮1小时，合并水煎煮液，将水煎煮药液与溶液1合并，浓缩至相对密度为1.05，加入澄清剂澄清，混匀，静置，滤过，取滤液浓缩至相对密度1.15，与醇提浓缩液混匀，得清膏；
e)加入辅料，制成颗粒，整粒，并干燥，再加入步骤b)中收集的挥发油，制成颗粒剂。
实施例12：本发明药物的胶囊剂制备
a)称取蒲黄12g、法半夏12g、丹参18g、陈皮12g、制首乌15g、川芎12g、昆布15g、泽泻12g、枸杞子15g、决明子18g、生山楂15g；备用；
b)将上述重量的陈皮加180g水蒸馏提取挥发油，收集挥发油备用，药渣再加6倍量水煎煮一次，水煎煮药液与蒸馏后的药液合并为溶液1备用；
c)将上述重量的蒲黄、丹参加70％～90％乙醇回流提取2次，合并醇提取液，减压回收乙醇，得浓缩液，备用；
d)步骤c)的药渣与其余药材加水煎煮三次，第一次加水8倍，第二次加水6倍，第三次加水6倍，各煎煮1小时，合并水煎煮液，将水煎煮药液与溶液1合并，浓缩至相对密度为1.06，加入澄清剂澄清，混匀，静置，滤过，取滤液浓缩至相对密度1.18，与醇提浓缩液混匀，得清膏；
e)加入辅料，制成颗粒，干燥，再加入步骤b)中收集的挥发油，制成颗粒，分装于胶囊中，即得。
实施例13：本发明药物的胶囊剂制备
a)称取蒲黄6g、法半夏5g、丹参9g、陈皮5.5g、制首乌7g、川芎6g、昆布8g、泽泻6g、枸杞子7g、决明子9g、生山楂8g，备用；
b)将上述重量的陈皮和川芎加120g水蒸馏提取挥发油，收集挥发油备用，药渣再加6倍量水煎煮一次，水煎煮药液与蒸馏后的药液合并为溶液1备用；
c)将上述重量蒲黄、丹参加70％～90％乙醇回流提取2次，合并醇提取液，减压回收乙醇，得浓缩液，备用；
d)步骤c)的药渣与其余药材加水煎煮三次，第一次加水8倍，第二次加水6倍，第三次加水6倍，各煎煮1小时，合并水煎煮液，将水煎煮药液与溶液1合并，浓缩至相对密度为1.08，加入澄清剂澄清，混匀，静置，滤过，取滤液浓缩至相对密度1.18，与醇提浓缩液混匀，得清膏；
e)加入辅料，制成颗粒，整粒，并干燥，再加入步骤b)中收集的挥发油，压制成片剂。
实施例14：本发明药物的颗粒剂制备
a)称取蒲黄5g、法半夏5g、丹参7g、陈皮5g、制首乌6g、川芎4g、、昆布6g、泽泻6g、枸杞子5g、决明子8g、生山楂7g，备用；
b)上述重量的陈皮和川芎加100g水蒸馏提取挥发油，收集挥发油备用，药渣再加6倍量水煎煮一次，水煎煮药液与蒸馏后的药液合并为溶液1备用；
c)上述重量的蒲黄、丹参加70％～90％乙醇回流提取2次，合并醇提取液，减压回收乙醇，得浓缩液，备用；
d)将步骤c)的药渣与其余药材加水煎煮三次，第一次加水8倍，第二次加水6倍，第三次加水6倍，各煎煮1小时，合并水煎煮液，将水煎煮药液与溶液1合并，浓缩至相对密度为1.05，加入澄清剂澄清，混匀，静置，滤过，取滤液浓缩至相对密度1.15，与醇提浓缩液混匀，得清膏；
e)加入辅料，制成颗粒，整粒，并干燥，再加入步骤b)中收集的挥发油，制成颗粒剂。
实施例15：本发明药物的胶囊剂制备
a)称取蒲黄9g、法半夏9g、丹参12g、陈皮8g、制首乌10g、川芎8g、昆布10g、泽泻8g、枸杞子8g、决明子12g、生山楂10g；备用；
b)将上述重量的陈皮加130g水蒸馏提取挥发油，收集挥发油备用，药渣再加6倍量水煎煮一次，水煎煮药液与蒸馏后的药液合并为溶液1备用；
c)将上述重量的蒲黄、丹参加70％～90％乙醇回流提取2次，合并醇提取液，减压回收乙醇，得浓缩液，备用；
d)将步骤c)的药渣与其余药材加水煎煮三次，第一次加水8倍，第二次加水6倍，第三次加水6倍，各煎煮1小时，合并水煎煮液，将水煎煮药液与溶液1合并，浓缩至相对密度为1.06，加入澄清剂澄清，混匀，静置，滤过，取滤液浓缩至相对密度1.18，与c)、d)醇提浓缩液混匀，得清膏；
e)加入辅料，制成颗粒，干燥，再加入步骤b)中收集的挥发油，制成颗粒，分装于胶囊中，即得。
为证明本发明药物对防治高脂血症、动脉粥样硬化、冠心病、心绞痛(尤其是心血瘀阻、气滞血瘀证和痰阻心脉证的心绞痛)的预防及治疗作用，经大量动物试验，测得的试验数据表明：
(试验例1)本发明药物家兔实验性高脂血症及AS的影响。
试验材料：选本发明药物提取清膏，10g生药/g膏。舒降之(20mg/片)：杭州默沙东制药有限公司生产，批号：010506。胆固醇：北京双旋微生物培养基制品厂生产，批号：010428。花生油：市售。总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)试剂盒：北京中生生物工程高技术公司生产，批号分别为：010601、010617、010403、010504。超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮(NO)试剂盒：南京建成生物工程研究所生产，批号分别为：20010809、20010813、20011215、20011209、20011108。过氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)、脂蛋白a(LP(a))试剂盒：上海荣盛生物技术有限公司生产，批号分别为：010801，010702。
试验方法：
取日本大耳白家兔，雄性，体重2.11±0.17kg，根据血脂、相关生化指标水平及体重，将家兔分为：①正常对照组(8只)，②高脂造模组(40只)。正常对照组家兔仅饲予普通颗粒饲料，高脂造模组家兔则每天上午每只给予75g高脂颗粒饲料(1)(在普通饲料中加2％胆固醇和10％花生油)，然后饲以普通颗粒饲料。喂养至4周末，称体重、普测血脂，然后将高脂造模组40只家兔随机分为5组(每组8只)：(1)高脂对照组，(2)舒降之2mg/kg剂量组，(3)本发明药物2g生药/kg剂量组，(4)本发明药物4g生药/kg剂量组，(5)本发明药物8g生药/kg剂量组。按所述剂量开始给各组家兔灌胃给药，正常对照组和高脂对照组家兔分别灌胃等体积蒸馏水，直至12周末试验结束。给药期间，除正常对照组外，其余各组家兔继续喂饲高脂饲料。试验前、给药前(即高脂4周)、给药4周(即高脂8周)、给药8周(即高脂12周)均测血液中血脂(TC、TG、HDL-C、LDL-C)、NO、ox-LDL、LP(a)、SOD、MDA水平并称体重。试验结束时采用气栓法处死动物，解剖检查主动脉及心脏病变(病理学检查)、分级、并取主动脉及肝脏匀浆，测定组织脂质含量(TC、TG)，肝脏组织还测定MDA、GSH、NO含量和SOD、GSH-Px活性。
试验结果表明：
一.试验期间动物健康状况良好，各组动物进食量基本一致，体重均有所增长。由表1可见，试验前、给药前、给药4周、给药8周，各组间家兔体重均无明显差异(p＞0.05)。
表1.本发明药物对家兔体重的影响(kg，
X±SD，n＝8)
分组 剂量(/kg) 0周 4周 8周 12周
正常对照组 2.15±0.13 2.46±0.12 2.84±0.15 3.25±0.24
高脂对照组 2.14±0.11 2.40±0.20 2.81±0.16 3.15±0.22
舒降之组 2mg 2.16±0.14 2.43±0.17 2.83±0.21 3.21±0.34
本发明药物组 2g生药 2.06±0.16 2.39±0.20 2.75±0.19 3.09±0.25
本发明药物组 4g生药 2.05±0.17 2.38±0.15 2.78±0.23 3.19±0.31
本发明药物组 8g生药 2.09±0.17 2.41±0.19 2.85±0.21 3.13±0.23
二.本发明药物对家兔血清脂质含量的影响
由表2可见，试验前各组间血清脂质各项指标均无明显差异。试验进行至4周末，高脂对照组TC、LDL-C、VLDL-C、TC/HDL-C比值及TG均较正常对照组明显升高，差异非常显著(P＜0.01～0.001)，HDL-C则无明显变化，本发明药物各剂量组及舒降之组前述指标与高脂对照组比较均无明显差异。第5周开始给药，给药4周(即高脂8周)，高脂对照组血清脂质各项指标(HDL-C除外)水平均显著高于正常对照组(P＜0.001)，本发明药物8g生药/kg、4g生药/kg剂量组和舒降之组TC、LDL-C及TC/HDL-C比值均明显低于高脂对照组(P＜0.05～0.01)，舒降之组TG亦明显低于高脂对照组(P＜0.05)，其他指标与高脂对照组比较均无明显差异。给药8周(即高脂12周)，高脂对照组血清脂质各项指标(HDL-C除外)仍显著高于正常对照组(P＜0.001)，HDL-C水平则明显低于正常对照组(P＜0.05)，本发明药物8g生药/kg、4g生药/kg剂量组及舒降之组TC、TG、LDL-C、VLDL-C及TC/HDL-C比值均明显低于高脂对照组(P＜0.05～0.01)，本发明药物2g生药/kg剂量组TG、LDL-C亦明显低于高脂对照组(P＜0.05)。各给药组HDL-C水平与高脂对照组比较均有升高趋势。
表2.本发明药物对家兔血清脂质含量的影响(
X±SD，n＝8)
| 分组 | 剂量(/kg) | TGmmol/L | TCmmol/L | HDL-Cmmol/L | LDL-Cmmol/L | VLDL-Cmmol/L | TC/HDL-C | |
| 试验前 | 正常对照组高脂对照组舒降之组本发明药物组本发明药物组本发明药物组 | 2mg2g生药4g生药8g生药 | 0.58±0.120.65±0.200.72±0.320.61±0.150.65±0.140.69±0.28 | 1.23±0.281.22±0.351.42±0.501.19±0.251.12±0.351.11±0.31 | 0.24±0.160.25±0.080.25±0.060.25±0.070.25±0.070.24±0.07 | 0.72±0.170.71±0.200.84±0.380.66±0.140.63±0.220.59±0.17 | 0.27±0.100.26±0.120.33±0.150.28±0.080.25±0.110.29±0.11 | 5.28±0.675.13±1.195.75±2.264.91±1.184.64±0.784.89±1.51 |
| 给药前 | 正常对照组高脂对照组舒降之组本发明药物组本发明药物组本发明药物组 | 2mg2g生药4g生药8g生药 | 0.56±0.13**3.36±2.383.25±2.063.47±3.023.38±2.533.08±2.11 | 1.44±0.40***10.62±3.8810.69±5.2310.29±5.5011.37±5.7210.75±4.99 | 0.30±0.080.42±0.190.40±0.150.35±0.150.38±0.180.42±0.20 | 0.88±0.24***8.74±3.848.77±5.258.60±5.219.68±5.479.07±4.80 | 0.26±0.10***1.46±0.441.52±0.181.31±0.581.31±0.531.27±0.20 | 4.83±0.57***28.98±14.4629.22±14.8833.10±18.2336.49±20.0127.26±9.53 |
| 给药4周 | 正常对照组高脂对照组 | 0.56±0.19***3.31±1.28 | 1.31±0.34***30.09±5.43 | 0.32±0.150.29±0.14 | 0.74±0.25***27.02±4.91 | 0.24±0.11***2.78±0.97 | 4.68±2.24***129.40±72.34 |
| 舒降之组本发明药物组本发明药物组本发明药物组 | 2mg2g生药4g生药8g生药 | 1.71±0.89*2.82±2.242.09±1.652.35±1.58 | 18.50±7.92**26.64±10.2621.32±9.66*19.90±6.89** | 0.38±0.240.30±0.160.34±0.160.40±0.17 | 15.93±6.97**23.57±10.2918.91±8.48*16.83±6.63** | 2.19±1.502.76±1.982.08±1.542.66±1.51 | 65.77±41.33*116.35±71.7768.01±26.76*64.06±43.68* | |
| 给药8周 | 正常对照组高脂对照组舒降之组本发明药物组本发明药物组本发明药物组 | 2mg2g生药4g生药8g生药 | 0.51±0.09***8.39±3.553.49±1.74**5.06±2.32*4.60±2.66*4.63±3.32* | 1.12±0.29***46.04±12.9028.70±6.89**34.31±8.7931.45±8.26*25.51±9.47** | 0.30±0.08*0.19±0.100.29±0.170.24±0.140.25±0.100.24±0.10 | 0.64±0.21***42.69±12.6426.14±6.95**31.11±7.84*29.33±7.50*23.12±9.18** | 0.18±0.09***3.16±1.002.27±0.47*2.96±1.331.88±1.20*2.16±0.54* | 4.03±1.56***324.69±212.44118.12±44.03*176.09±87.55147.89±69.60*130.70±68.54* |
注：与高脂对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001
三.本发明药物对家兔血清SOD、MDA、LP(a)、NO及血浆ox-LDL的影响
由表3可见，试验前各组间血清SOD活性、MDA、LP(a)、NO及血浆ox-LDL含量均无明显差异。给药前(即高脂4周)，与正常对照组比较，高脂对照组血清MDA、LP(a)含量均明显增加(P＜0.01)，SOD活性明显降低(P＜0.05)，血清NO和血浆ox-LDL含量均无明显变化，各给药组前述指标与高脂对照组比较均无明显差异。给药4周(即高脂8周)，与正常对照组比较，高脂对照组血清MDA、LP(a)含量均显著增加(P＜0.001)，SOD活性明显降低(P＜0.001)，血清NO和血浆ox-LDL含量仍均无明显变化；与高脂对照组比较，舒降之组LP(a)含量明显降低(P＜0.05)，其它指标均无明显变化；本发明药物8g生药/kg剂量组MDA含量明显降低((P＜0.05)，其它指标亦均无明显变化；本发明药物4g生药/kg、2g生药/kg剂量组前述指标与高脂对照组比较均无明显差异。给药8周(即高脂12周)，与正常对照组比较，高脂对照组血清MDA、LP(a)含量均持续增加(P＜0.001)，血清NO含量、SOD活性均明显降低(P＜0.01～0.001)，血浆ox-LDL含量无明显变化。本发明药物8g生药/kg剂量组和舒降之组血清MDA、LP(a)含量均明显低于高脂对照组(P＜0.05)，SOD活性、NO含量均明显高于高脂对照组(P＜0.05～0.01)；本发明药物4g生药/kg剂量组血清MDA、LP(a)含量亦明显低于高脂对照组(P＜0.05)，血浆NO含量明显高于高脂对照组(P＜0.05)；本发明药物2g生药/kg剂量组各项指标与高脂对照组比较均无明显差异；各给药组血浆ox-LDL含量与高脂对照组比较无明显差异。
表3.本发明药物对家兔SOD、MDA、LP(a)、ox-LDL及NO的影响(
X±SD，n＝8)
| 分组 | 剂量(/kg) | SOD(NU/ml) | MDANmol/ml) | LP(a)(mg/ml) | Ox-LDL(ug/ml) | NO(umol/ml) | |
| 试验前 | 正常对照组高脂对照组舒降之组本发明药物组本发明药物组本发明药物组 | 2mg2g生药4g生药8g生药 | 568.20±112.76552.31±107.86586.30±127.20608.10±134.12618.07±140.57593.32±148.42 | 2.94±0.483.04±0.563.27±0.802.96±0.563.31±0.513.19±0.62 | 49.59±16.4355.78±22.9054.04±11.7147.29±9.0060.58±13.4151.72±21.46 | 0.139±0.0250.145±0.0200.158±0.0390.213±0.1070.170±0.050.145±0.029 | 58.7±11.157.9±9.861.5±12.661.9±18.857.3±12.556.9±12.5 |
| 给药前 | 正常对照组高脂对照组舒降之组本发明药物组本发明药物组本发明药物组 | 2mg2g生药4g生药8g生药 | 660.02±125.21*545.21±50.24519.19±46.22521.17±77.88534.46±43.34559.07±77.62 | 2.95±0.69**5.22±1.895.93±2.985.13±1.505.41±1.495.96±2.03 | 48.30±13.67**421.51±347.58425.40±362.88457.61±264.10464.33±363.77387.58±229.04 | 0.174±0.0740.164±0.0580.201±0.0930.176±0.0700.175±0.0580.211±0.082 | 60.9±13.750.3±16.749.6±18.248.9±18.749.2±11.249.6±12.7 |
| 给药4周 | 正常对照组高脂对照组舒降之组本发明药物组本发明药物组 | 2mg2g生药4g生药 | 645.37±52.42***337.89±59.27340.10±44.27329.74±73.06332.60±53.70 | 2.46±0.63***8.84±2.966.44±2.877.27±4.326.74±3.31 | 50.28±11.12***998.50±380.15557.99±402.62*826.16±632.82799.05±640.96 | 0.137±0.0340.163±0.0550.217±0.1020.156±0.0410.139±0.018 | 58.8±10.947.2±19.552.4±26.247.8±9.948.8±8.1 |
| 本发明药物组 | 8g生药 | 347.37±58.45 | 6.10±1.94* | 710.64±416.08 | 0.145±0.049 | 51.8±18.0 | |
| 给药8周 | 正常对照组高脂对照组舒降之组本发明药物组本发明药物组本发明药物组 | 2mg2g生药4g生药8g生药 | 510.64±39.84***329.33±53.72381.65±22.26*330.20±78.40336.39±57.67374.18±23.42* | 2.62±0.37***13.76±5.898.13±3.63*12.05±6.968.65±3.19*7.33±2.99* | 46.01±6.10***2235.16±810.501140.54±679.28*1844.63±849.351288.80±759.67*1319.46±676.63* | 0.124±0.0410.141±0.0480.134±0.0690.164±0.0410.146±0.0200.156±0.051 | 59.4±15.5**37.9±11.756.2±11.8**46.7±12.050.1±11.0*53.2±9.1* |
注：与高脂对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001
四.本发明药物对家兔主动脉病变的影响
主动脉AS面积：大体观察可见，正常对照组家兔主动脉内膜表面光滑，无AS斑块、条纹及脂点出现，高脂对照组家兔主动脉内膜出现弥漫性奶酪样斑块，主动脉弓处及胸主动脉为甚，苏丹III染色呈红色，各给药组家兔主动脉病变类似高脂对照组，但本发明药物8g生药/kg、4g生药/kg剂量组及舒降之组家兔主动脉病变面积百分比均明显小于高脂对照组(P＜0.05)；本发明药物2g生药/kg剂量组家兔主动脉病变面积百分比与高脂对照组比较无明显差异。结果见表4。
表4.本发明药物对家兔主动脉斑块面积、厚度的影响(
X±SD，n＝8)
剂量 斑块面积 厚度
分组
(/kg) AS％ 分级 (μm)
正常对照组 - - -
高脂对照组 34.61±16.47 II 234.5±78.5
舒降之组 2mg 21.10±6.13* I 145.8±74.8*
本发明药物组 2g生药 30.18±8.90 II 203.3±104.8
本发明药物组 4g生药 21.15±5.65* I 160.5±55.5*
本发明药物组 8g生药 19.24±4.28* I 157.3±47.0*
注：与高脂对照组比较*P＜0.05
表5.本发明药物对泡沫细胞形成的影响
泡沫细胞形成等级
组别 剂量(/kg) 动物数(n)
P值
+ ++ +++ ++++
正常对照组 8 - - - -
高脂对照组 8 0 2 3 3
舒降之组 2mg 8 4 2 1 1 ＜0.05
本发明药物组 2g生药 8 1 2 2 3 ＞0.05
本发明药物组 4g生药 8 1 3 3 1 ＞0.05
本发明药物组 8g生药 8 3 3 1 1 ＜0.05
注：1.等级+、++、+++、++++分别表示极轻、轻、中、重度；2.与高脂对照组比较(参比差值法)
组织学观察：光镜下可见，正常对照组家兔主动脉内膜为正常组织结构，高脂对照组家兔主动脉内膜增厚，形成明显的粥样斑块，有大量泡沫细胞聚集；本发明药物8g生药/kg剂量组和舒降之组主动脉斑块厚度及斑块内泡沫细胞生成程度均明显轻于高脂对照组(P＜0.05)；本发明药物4g生药/kg剂量组主动脉斑块厚度亦明显轻于高脂对照组(P＜0.05)，斑块内泡沫细胞生成程度有减轻趋势；本发明药物2g生药/kg剂量组斑块厚度及斑块内泡沫细胞生成程度与高脂对照组比较均无明显差异，见表4～5。
主动脉脂质含量：给药至8周末(即试验结束时)，高脂对照组家兔主动脉TC、TG含量均显著高于正常对照组(P＜0.01～0.001)，本发明药物8g生药/kg剂量组和舒降之组主动脉TC、TG含量均明显低于高脂对照组(P＜0.05～0.001)，本发明药物4g生药/kg剂量组主动脉TC含量明显低于高脂对照组(P＜0.05)。见表6。
表6.本发明药物对家兔主动脉脂质含量的影响(mg/g组织湿重，
X±SD，n＝8)
剂量 主动脉
分组
(/kg) TC TG
正常对照组 1.18±0.71*** 4.55±1.87***
高脂对照组 4.20±0.88 9.57±3.30
舒降之组 2mg 2.34±0.62*** 6.05±1.65*
本发明药物组 2g生药 3.98±1.57 8.71±3.69
本发明药物组 4g生药 3.05±1.18* 8.54±4.54
本发明药物组 8g生药 2.89±1.17* 6.38±1.84*
注：与高脂对照组比较*P＜0.05，***P＜0.001
五.本发明药物对冠状动脉病变的影响
表7.本发明药物对家兔冠状动脉的影响(n＝8)
猪油：市售。总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)试剂盒：北京中生生物工程高技术公司生产，批号分别为：011005、011012、011018、011015。超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒：南京建成生物工程研究所生产，批号分别为：20010928、20011007。内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)试剂盒：北京福瑞生物工程公司生产。批号分别为：011006、011008。
试验方法：
取朝鲜种鹌鹑71只，雄性，体重103.6±8.3g，根据血脂、相关生化指标水平及体重，将鹌鹑分为：①正常对照组(13只)，②高脂造模组(58只)。正常对照组鹌鹑饲予普通鸡饲料，高脂造模组鹌鹑则饲予高脂饲料(1)(在普通鸡饲料中加1％胆固醇和14％猪油)，鹌鹑饲养于40×35×20cm铁丝笼里，室温23±3℃，每日光照14h，进食量每天每只20g，分上下午各1次，每次10g，饮水自由。喂养至12周正常对照组随机解剖3只，高脂造模组随机解剖8只，取主动脉、左右头臂动脉、心脏及肝脏，观察病变情况，确定动脉粥样硬化形成后，换喂普通鸡饲料，并将余下的50只高脂造模组鹌鹑随机分组(每组10只)：(1)模型对照组，(2)舒降之4mg/kg剂量组，(3)本发明药物3g生药/kg剂量组，(4)本发明药物6g生药/kg剂量组，(5)本发明药物12g生药/kg剂量组。按所述剂量开始给各组鹌鹑灌胃给药，正常对照组和高脂对照组鹌鹑分别灌胃等体积蒸馏水，直至24周试验结束。试验前(即试验0周)、给药前(即试验12周)、给药4周(即试验16周)、给药8周(即试验20周)、给药12周(即试验24周)均测血液中血脂(TC、TG、HDL-C、LDL-C)、ET、CGRP水平，给药前每4周称一次体重，给药后每2周称一次体重。试验结束时断颈处死动物，解剖检查主动脉、左右头臂动脉及心脏病变(病理学检查)、分级，并取肝脏匀浆，测定组织脂质含量(TC、TG)、MDA含量及SOD活性。
1、试验12周鹌鹑AS病变检查
正常对照组鹌鹑主动脉及左右头臂动脉内膜表面光滑，无斑块、脂纹及脂点出现；造模组鹌鹑主动脉及左右头臂动脉内膜较粗糙，有脂点、脂纹及斑块，苏丹III染色呈红色，AS面积达22.96±11.65％，斑块厚度为93.8±31.0nm。组织学观察可见，正常对照组鹌鹑主动脉内膜为正常组织结构，造模组鹌鹑主动脉内膜增厚，形成明显的粥样斑块，有泡沫细胞聚集。正常对照组鹌鹑冠状动脉大、中、小支均无病变，无脂质浸润，管壁薄，管腔较大；造模组鹌鹑冠状动脉大、中支无明显病变，小支有脂质浸润，内膜增厚，管腔狭窄，病变率为21.3％。正常对照组鹌鹑肝脏色泽红润，表面光滑；造模组鹌鹑肝脏表面呈乳黄色，欠光滑。前述结果显示，高脂喂养12周，成功诱发了鹌鹑AS病变模型。
试验期间动物健康状况良好，各组动物进食量基本一致，体重均有所增长。试验0周、4周、8周、12周、14周、16周、18周、20周、22周、24周，各组间鹌鹑体重均无明显差异(p＞0.05)。见表9。
表9.本发明药物对鹌鹑体重的影响(g，
X±SD，n＝10)
组 别
试验时间
舒降之 本发明药物 本发明药物 本发明药物
正常对照 模型对照
4mg/kg 3g生药/kg 6g生药/kg 12g生药/kg
0周 103.1±9.8 100.9±4.6 101.4±6.5 101.8±8.8 101.8±5.7 102.4±7.1
4周 117.8±4.6 115.2±4.6 115.2±4.6 114.4±4.6 117.0±4.6 118.8±4.6
8周 124.4±9.6 126.1±6.4 126.6±8.3 127.9±3.4 123.6±8.7 126.3±9.7
12周 127.8±5.7 126.0±6.5 129.4±8.5 128.9±4.6 126.5±9.7 128.5±8.5
14周 127.0±9.1 128.1.±4.5 130.7±9.1 129.0±7.5 127.0±9.1 128.3±9.2
16周 128.6±7.8 127.9±6.0 131.1±6.7 129.9±6.1 126.8±10.2 128.8±9.3
18周 129.7±8.9 128.9±6.4 131.5±7.6 130.4±6.2 128.6±8.0 128.9±8.5
20周 131.6±7.6 130.0±7.2 132.8±6.8 129.9±6.6 130.1±9.1 131.9±7.7
22周 134.6±6.4 132.6±6.3 134.3±8.3 132.9±9.3 134.8±8.6 133.3±7.0
24周 134.2±8.2 134.4±6.8 133.4±8.0 135.0±6.5 132.7±7.8 133.2±7.3
2、本发明药物对鹌鹑血清脂质含量的影响
由表10可见，试验前各组间血清脂质各项指标均无明显差异。试验进行至12周末，模型对照组、本发明药物三个剂量组及舒降之组TC、LDL-C、VLDL-C、TC/HDL-C比值及TG均较正常对照组明显升高，差异非常显著(P＜0.05～0.001)，HDL-C则无明显变化，本发明药物三个剂量组及舒降之组前述指标与模型对照组比较均无明显差异。第13周改喂普通鸡饲料并开始给药，给药4周(即试验16周)，模型组及各给药组HDL-C无明显变化，其它血清脂质指标均下降，各组除TG均降至正常对照组水平外，其它各项血清脂质指标仍高于正常对照组(P＜0.05～0.001)；
本发明药物12g生药/kg、6g生药/kg剂量组及舒降之组TC和LDL-C下降较快，其值均明显低于模型对照组(P＜0.05～0.01)，舒降之组VLDL-C水平亦明显低于模型对照组(P＜0.05)，本发明药物12g生药/kg、6g生药/kg剂量组的VLDL-C有低于模型对照组的趋势；模型组TC/HDL-C比值显著高于正常对照组，本发明药物12g生药/kg、6g生药/kg剂量组及舒降之组TC/HDL-C比值均显著低于模型对照组(P＜0.01～0.001)，本发明药物3g生药/kg血清脂质各项指标及TC/HDL-C比值与
| 组别 | 剂量(/kg/日) | 动脉横断数(条) | 有斑块形成的血管数及分级 | 总分 | 平均得分( X±SD) | 病变率(％) | |||||
| 病变血管数(条) | 0.5级 | 1级 | 2级 | 3级 | 4级 | ||||||
| 高脂对照组舒降之组本发明药物组本发明药物组本发明药物组 | 2mg2g生药4g生药8g生药 | 314284286325298 | 210175185203181 | 1326112929 | 2629223029 | 3021312928 | 2518242921 | 11681978674 | 631.5462.0549.5533.5458.5 | 3.01±1.262.64±1.43**2.97±1.242.63±1.39**2.53±1.41** | 66.961.664.762.460.7 |
注：与高脂对照组比较**P＜0.01
镜下观察可见，正常对照组冠状动脉无病变，无脂质浸润，管壁薄，管腔较大；高脂对照组冠状动脉病变主要是小支，中支次之，大支较轻，病变冠状动脉有脂质浸润，内膜增厚致管腔狭窄；各给药组冠状动脉病变与高脂对照组相似，但本发明药物8g生药/kg、4生药/kg剂量组及舒降之组管腔狭窄程度均明显轻于高脂对照组(见照片8～13)。结果分析显示，本发明药物8g生药/kg、4生药/kg剂量组及舒降之组冠状动脉病变程度的平均得分均明显低于高脂对照组(P＜0.01)，各给药组冠状动脉病变率与高脂对照组比较均无明显差异(见表7)。
六.本发明药物对肝脏脂质含量、相关生化指标及肝系数的影响
给药至8周末(即试验结束时)，正常对照组家兔肝脏色泽红润，表面光滑，高脂对照组家兔肝脏表面呈乳黄色，欠光滑，肉眼观察未见各给药组家兔肝脏色泽与高脂对照组有明显差别(照片14)。脂质含量及相关生化指标结果显示(见表8)，高脂对照组家兔肝脏TC、TG及MDA含量均明显高于正常对照组(P＜0.05～0.001)，SOD活性、GSH含量及NO含量均显著低于正常对照组(P＜0.01～0.001)，GSH-Px活性与正常对照组比较无明显差异；本发明药物8g生药/kg剂量组和舒降之组TC和MDA含量均明显低于高脂对照组(P＜0.05～0.01)，SOD活性、GSH及NO含量均明显高于高脂对照组(P＜0.05～0.01)；本发明药物4g生药/kg剂量组TC、MDA含量均明显低于高脂对照组(P＜0.05)，GSH和NO含量均明显高于高脂对照组(P＜0.05)；本发明药物2g生药/kg剂量组前述指标与高脂对照组比较均无明显差异；各给药组GSH-Px活性及TG含量与高脂对照组比较均无明显差异；高脂对照组肝系数显著高于正常对照组(P＜0.001)，各给药组肝系数与高脂对照组比较均无明显差异。
表8本发明药物对家兔肝脏TC、TG、MDA、GSH、NO含量、SOD、GSH-Px
活性及肝系数的影响(n＝8)
| 分组 | 剂量(/kg) | TC(mg/g组织湿重) | TG(mg/g组织湿重) | 肝系数 | SOD(NU/mgprot) | GSH(mg/mgprot) | MDA(nmol/mgprot) | GSH-Px(U/mgprot) | NO(umol/gprot) |
| 正常对照组高脂对照组舒降之组本发明药物组本发明药物组本发明药物组 | 2mg2g生药4g生药8g生药 | 1.83±0.28***16.80±5.4010.38±3.63*13.98±4.7311.17±4.98*10.67±3.44* | 6.97±1.12*14.92±7.9912.30±3.8213.56±6.7813.44±6.2812.90±6.06 | 3.62±0.59***5.04±0.554.63±0.454.86±0.644.78±0.734.56±0.50 | 401.06±32.41***234.79±15.69256.54±23.41*228.17±16.37247.34±37.69256.01±20.55* | 57.75±6.89**40.06±11.4952.91±7.40*49.20±7.7252.05±9.35*52.02±9.76* | 0.44±0.09**0.76±0.210.47±0.12**0.61±0.200.55±0.15*0.52±0.16* | 108.22±9.59100.58±11.18105.72±7.86105.95±8.44103.64±6.04103.56±8.89 | 0.59±0.28**0.19±0.080.39±0.15**0.15±0.110.31±0.11*0.39±0.23* |
注：与高脂对照组比较*P＜0.05，**P＜0.05，***P＜0.001
上述结果表明：本发明药物明显降低家兔血清TC、TG、LDL-C、VLDL-C浓度及TC/HDL-C比值，明显降低血清MDA、LP(a)含量，明显升高血清SOD活性和NO含量，对肝脏TC和MDA含量有明显降低作用，对肝脏SOD活性、GSH和NO含量有明显升高作用，对家兔主动脉TC、TG含量有降低作用；此外，本发明药物能明显减少主动脉斑块面积、厚度及泡沫细胞形成量，对反映冠状动脉管腔狭窄程度的平均得分有减少作用。提示本发明药物具有调节血脂、清除自由基及抑制脂质过氧化的作用，同时在一定程度上具有防治AS的作用。
(试验例2)本发明药物对鹌鹑动脉粥样硬化影响
试验材料：本发明药物，试验用该药提取清膏，10g生药/g膏。舒降之(20mg/片)：杭州默沙东制药有限公司生产，批号：010506。胆固醇：北京双旋微生物培养基制品厂生产，批号：010428。模型对照组比较均无明显差异。给药8周(即试验20周)，模型对照组及各给药组TG、HDL-C无明显变化，其它各项脂质指标仍在下降，除模型对照组TC、LDL-C、VLDL-C水平仍明显高于正常对照组(P＜0.05～0.01)外，各给药组TC、LDL-C、VLDL-C均接近正常对照组水平，其中本发明药物12g生药/kg、6g生药/kg剂量组及舒降之组TC、VLDL-C水平均明显低于模型对照组(P＜0.05～0.01)；模型对照组TC/HDL-C比值明显高于正常对照组(P＜0.05)，本发明药物三个剂量组及舒降之组TC/HDL-C比值均明显低于模型对照组。给药12周(即试验24周)，各组间TG、HDL-C均无明显差异，模型对照组TC、LDL-C水平仍明显高于正常对照组(P＜0.05)，VLDL-C水平、TC/HDL-C比值有高于正常对照组趋势，各给药组TC、LDL-C、VLDL-C水平及TC/HDL-C均有低于模型对照组的趋势，而与正常对照组比较均无明显差异。
表10.本发明药物对鹌鹑血清脂质含量的影响(
X±SD，n＝10)
| 分组 | 剂量(/kg) | TG(mmol/L) | TC(mmol/L) | HDL-C(mmol/L) | LDL-C(mmol/L) | VLDL-C(mmol/L) | TC/HDL-C | |
| 试验前 | 正常对照模型对照舒降之本发明药物本发明药物本发明药物 | 4mg3g生药6g生药12g生药 | 0.54±0.250.69±0.190.54±0.310.68±0.190.58±0.210.56±0.25 | 4.08±0.864.76±1.094.20±1.094.44±0.644.31±1.024.10±0.76 | 1.18±0.311.39±0.321.23±0.321.22±0.191.26±0.281.17±0.29 | 2.48±0.492.89±0.742.57±0.772.66±0.442.58±0.632.49±0.50 | 0.42±0.130.48±0.140.41±0.070.56±0.180.48±0.170.44±0.11 | 3.55±0.583.46±0.343.45±0.473.66±0.293.44±0.343.59±0.59 |
| 给药前 | 正常对照模型对照舒降之 | 4mg | 0.81±0.111.30±0.49++1.11±0.35+ | 4.98±0.9826.47±10.46+++28.49±10.02+++ | 1.77±0.351.44±0.561.56±0.67 | 2.58±0.5518.99±7.36+++20.48±7.96+++ | 0.62±0.106.04±3.61+++6.10±2.98+++ | 2.81±0.1121.63±11.28+++22.92±14.18+++ |
| 本发明药物本发明药物本发明药物 | 3g生药6g生药12g生药 | 1.24±0.50+1.24±0.60+1.29±0.63+ | 28.88±14.34+++26.76±12.53+++27.38±9.75+++ | 1.71±0.471.45±0.601.48±0.82 | 20.48±10.71+++19.64±9.86+++19.87±7.14+++ | 6.69±4.23+++5.67±3.00+++6.03±2.95+++ | 19.05±11.23+++21.78±12.73+++21.99±10.09+++ | |
| 给药4周 | 正常对照模型对照舒降之本发明药物本发明药物本发明药物 | 4mg3g生药6g生药12g生药 | 0.87±0.200.80±0.290.69±0.160.81±0.220.74±0.250.69±0.13 | 5.37±0.728.83±1.62+++6.68±1.29+**7.13±2.18+6.70±1.83+*7.05±1.44++* | 1.91±0.312.12±0.272.16±0.231.90±0.402.25±0.592.23±0.27 | 2.81±0.335.30±1.67+++3.58±0.87+**4.24±2.08+3.49±1.03**3.59±0.69++** | 0.65±0.131.42±0.54+++0.94±0.38+*0.99±0.37+0.97±0.43+1.23±0.71+ | 2.83±0.214.20±0.71+++3.10±0.54**4.23±3.002.99±0.48***3.18±0.61** |
| 给药8周 | 正常对照模型对照舒降之本发明药物本发明药物本发明药物 | 4mg3g生药6g生药12g生药 | 0.88±0.120.96±0.170.94±0.140.98±0.230.95±0.280.91±0.13 | 5.03±0.776.17±0.64++5.47±0.71*5.65±0.975.58±0.56*5.62±0.52* | 1.77±0.321.93±0.391.93±0.231.99±0.302.04±0.232.05±0.29 | 2.67±0.463.31±0.39++2.99±0.533.02±0.373.01±0.433.06±0.42 | 0.59±0.060.93±0.40+0.54±0.06**0.64±0.380.52±0.09**0.52±0.11** | 2.86±0.183.32±0.63+2.83±0.24*2.83±0.21*2.73±0.15*2.75±0.11* |
| 给药12周 | 正常对照模型对照舒降之本发明药物 | 4mg3g生药 | 1.11±0.131.04±0.200.94±0.131.10±0.10 | 5.40±0.886.27±0.70+5.75±0.575.65±0.75 | 1.89±0.341.95±0.331.88±0.251.95±0.30 | 2.84±0.463.34±0.54+3.18±0.853.03±0.47 | 0.67±0.130.98±0.460.69±0.390.67±0.20 | 2.87±0.133.31±0.783.10±0.442.91±0.19 |
| 本发明药物本发明药物 | 6g生药12g生药 | 1.16±0.351.07±0.17 | 5.76±0.795.62±1.05 | 2.03±0.291.88±0.38 | 3.03±0.453.02±0.62 | 0.70±0.140.73±0.09 | 2.83±0.093.01±0.18 |
注：与模型对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001；与正常对照组比较+P＜0.05，++P＜0.01，+++P＜0.001
3、本发明药物对鹌鹑血浆ET和CGRP含量的影响
由表11可见，试验前各组间ET、CGRP含量及ET/CGRP比值均无明显差异。给药前(即试验12周)模型对照组、本发明药物三个剂量组及舒降之组ET含量和ET/CGRP比值均较正常对照组显著升高(P＜0.001)，CGRP含量均无明显变化；本发明药物三个剂量组及舒降之组ET、CGRP含量及ET/CGRP比值与模型对照组比较均无明显差异。给药4周(即试验16周)，模型对照组、本发明药物三个剂量组及舒降之组ET含量及ET/CGRP比值均下降，其中ET/CGRP比值接近正常对照组水平，而ET含量仍明显高于正常对照组(P＜0.05)，CGRP含量均无明显变化；本发明药物三个剂量组及舒降之组ET、CGRP含量及ET/CGRP比值与模型对照组比较均无明显差异。给药8周(即试验20周)，模型对照组、本发明药物三个剂量组ET含量仍均明显高于正常对照组(P＜0.05)，CGRP含量和ET/CGRP比值均无明显变化；本发明药物三个剂量组ET、CGRP含量及ET/CGRP比值与模型对照组比较均无明显差异；舒降之组ET、CGRP含量及ET/CGRP比值与正常对照组及模型组比较均无明显差异。给药12周(即试验24周)，各组间ET、CGRP含量及ET/CGRP比值均无明显差异。
表11.本发明药物对鹌鹑血浆ET、CGRP及ET/CGRP比值的影响(
X±SD，n＝10)
| 分组 | 剂量(/kg) | ET(pg/ml) | CGRP(pg/ml) | ET/CGRP | |
| 试验前 | 正常对照模型对照舒降之本发明药物本发明药物本发明药物 | 4mg3g生药6g生药12g生药 | 136.707±9.464129.896±9.835132.703±6.245131.365±9.636132.606±16.762129.855±9.365 | 22.150±4.62419.257±1.25520.389±1.43620.124±1.75619.461±2.60220.017±1.568 | 6.292±1.0246.763±0.5686.533±0.4816.583±0.8346.945±1.3376.520±0.650 |
| 给药前 | 正常对照模型对照舒降之本发明药物本发明药物本发明药物 | 4mg3g生药6g生药12g生药 | 141.936±21.200345.554±67.986+++381.833±44.730+++348.659±69.689+++356.926±44.878+++338.798±83.298+++ | 18.000±2.19918.097±3.14619.052±1.50618.373±1.41218.033±1.68019.017±1.951 | 8.090±2.10519.591±4.749+++20.112±2.527+++18.955±3.276+++20.012±3.628+++17.886±4.357+++ |
| 给药4周 | 正常对照模型对照舒降之本发明药物本发明药物本发明药物 | 4mg3g生药6g生药12g生药 | 143.749±18.381160.833±14.321+168.694±8.885+165.658±19.204+165.551±14.446+161.528±17.339+ | 19.323±2.08419.454±1.64420.475±1.78020.199±1.99620.123±1.76219.471±1.541 | 7.508±1.2068.320±1.0328.285±0.7398.241±0.9928.296±1.1048.322±1.335 |
| 给药8周 | 正常对照模型对照舒降之本发明药物本发明药物本发明药物 | 4mg3g生药6g生药12g生药 | 137.861±22.955168.582±30.989+148.030±26.246166.838±24.520+177.101±36.008+169.557±31.908+ | 19.509±0.55319.872±1.64819.882±2.01119.319±1.33618.837±1.84620.226±3.145 | 7.079±2.5238.452±1.1097.496±1.4308.628±1.0559.476±2.7238.585±2.208 |
| 给药12周 | 正常对照模型对照舒降之本发明药物本发明药物本发明药物 | 4mg3g生药6g生药12g生药 | 161.321±34.594164.733±35.242160.518±28.079167.751±24.356172.580±26.494160.920±26.631 | 19.767±1.20118.942±1.67319.600±1.83419.921±1.63719.875±1.71919.541±1.483 | 8.175±1.7448.774±2.0658.271±1.8048.429±1.1048.685±1.1618.274±1.504 |
注：与正常对照组比较+P＜0.05，+++P＜0.001。
4、发明药物对鹌鹑主动脉及左右头臂动脉病变的影响
表12.本发明药物对鹌鹑主动脉斑块面积、厚度的影响(
X±SD，n＝10)
剂量 斑块面积 厚度
分组
(/kg) AS％ 分级 (μm)
正常对照 - - -
模型对照 31.57±17.70 II 106.8±38.3
舒降之 4mg 17.74±7.49* I 71.8±28.5*
本发明药物 3g生药 32.04±15.59 II 103.3±41.5
本发明药物 6g生药 18.66±4.74* I 79.3±31.0
本发明药物 12g生药 17.60±5.90* I 70.8±31.0*
注：与模型对照组比较*P＜0.05
大体观察可见，正常对照组鹌鹑主动脉及左右头臂动脉内膜表面光滑，未见明显异常，模型对照组鹌鹑主动脉及左右头臂动脉内膜较粗糙，有脂点、脂纹及斑块，苏丹III染色呈红色，各给药组鹌鹑主动脉及左右头臂动脉病变类似高脂对照组，但本发明药物12g生药/kg、6g生药/kg剂量组及舒降之组鹌鹑AS面积百分比均明显小于模型对照组(P＜0.05)；本发明药物3g生药/kg剂量组鹌鹑AS面积百分比与模型对照组比较无明显差异(见表12)。
显微镜下可见，正常对照组鹌鹑主动脉内膜为正常组织结构(见照片8)，模型对照组鹌鹑主动脉内膜增厚，形成明显的粥样斑块，有泡沫细胞聚集；本发明药物12g生药/kg剂量组和舒降之组主动脉斑决厚度均明显轻于模型对照组(P＜0.05)，斑块内泡沫细胞生成程度与模型对照组比较均无明显差别，本发明药物6g生药/kg和3g生药/kg剂量组斑块厚度及斑块内泡沫细胞生成程度与模型对照组比较均无明显差异(见表12、13)。
表13.本发明药物对泡沫细胞形成的影响
剂量 动物数 泡沫细胞形成等级
组别
P值
(/kg) (n) + ++ +++ ++++
正常对照 10 - - - -
模型对照 10 2 5 3 0
舒降之 4mg 10 4 5 1 0 ＞0.05
本发明药物 3g生药 10 3 4 3 0 ＞0.05
本发明药物 6g生药 10 3 5 2 0 ＞0.05
本发明药物 12g生药 10 5 3 2 0 ＞0.05
注：1.等级+、++、+++、++++分别表示极轻、轻、中、重度；2.与模型组比较(参比差值法)
5、本发明药物对冠状动脉病变的影响
给药前(即试验12周)成功诱发了鹌鹑AS病变，主要是冠状动脉小支发生病变，冠状动脉大、中支无明显病变，小支由于其组织结构的原因，其斑块容易消退。给药24周(即试验24周)，各组均未观察到有病变的冠状动脉，可能是由于内膜增厚或形成斑块的冠状动脉小支已消退，恢复正常。
6、发明药物对肝脏的影响
表14.本发明药物对鹌鹑肝脏TC、TG、MDA含量、SOD活性及肝系数的影响
(
X±SD，n＝10)
| 分组 | 剂量(/kg) | TC(mg/g组织湿重) | TG(mg/g组织湿重) | SOD(NU/mgprot) | MDA(nmol/mgprot) | 肝系数 |
| 正常对照模型对照舒降之本发明药物本发明药物本发明药物 | 4mg3g生药6g生药12g生药 | 3.02±0.493.45±0.672.88±0.703.41±0.633.38±0.483.37±0.31 | 12.80±5.39*18.54±4.93+13.00±4.25*16.71±4.9013.70±5.13*12.46±3.35** | 422.53±29.50410.20±37.50492.35±66.32*+403.10±73.76423.60±46.11421.15±37.81 | 10.4±0.17*1.31±0.30+0.98±0.31*1.15±0.161.20±0.12+1.09±0.14* | 2.02±0.692.12±0.242.11±0.362.15±0.382.11±0.402.07±0.36 |
注：与模型对照组比较*P＜0.05；与正常对照组比较+P＜0.05
给药12周(即试验24周)，各组鹌鹑肝脏色泽红润，表面光滑，肉眼观察未见各组鹌鹑肝脏色泽有明显差别。脂质含量、MDA含量及SOD活性测定结果显示(见表14)，模型对照组TG和MDA含量均明显高于正常对照组(P＜0.05)，SOD活性与正常对照组比较无明显差异，本发明药物12g生药/kg剂量组和舒降之组TG、MDA含量均明显低于模型对照组(P＜0.05～0.01)，与正常对照组比较均无明显差异；本发明药物6g生药/kg剂量组TG含量明显低于模型对照组(P＜0.05)，与正常对照组比较无明显差异，MDA含量与正常对照组、模型对照组比较均无明显差异；融斑通脉3g生药/kg剂量组TG、MDA含量与正常对照组比较均无明显差异；舒降之组SOD活性明显高于正常对照组和模型对照组(P＜0.05)；融斑通脉三个剂量组SOD活性与正常对照组、模型对照组比较均无明显差异；各组间TC含量和肝系数均无明显差异。
上述结果表明：本发明药物明显加速AS模型鹌鹑血清TC、LDL-C、VLDL-C浓度及TC/HDL-C比值趋于正常，对肝脏TG和MDA含量有明显降低作用，明显减少主动脉斑块面积和厚度。提示本发明药物具有调节血脂、抑制脂质过氧化的作用，同时在一定程度上具有促进动脉粥样硬化斑块消退的作用。
(试验例3)本发明药物对血瘀模型大鼠体外血栓形成及血液粘度的影响。
试验材料：
本发明药物，试验用该药提取清膏，10g生药/g膏，由无锡山禾药业股份有限公司提供，批号：20010801，试验用蒸馏水配成所需浓度。阿司匹林肠溶片(25mg/片)：北京市曙光制药厂生产，批号：010640。盐酸肾上腺素注射液(1mg/ml/支)，北京永康制药厂生产，批号：20010826。
试验方法：
取健康雄性Wistar大鼠60只，体重218.1±7.0g。血瘀模型制备：给大鼠皮下注射0.1％盐酸肾上腺素0.8ml/kg共2次，间隔4h，在两次之间(前后各间隔2h)将大鼠置冰水中浸泡5min，第2次注射后禁食，18h后形成血瘀模型。
动物分组及给药：将大鼠随机分为6组(每组10只)：①正常对照组(蒸馏水，10ml/kg)，②模型组(蒸馏水，10ml/kg)，③阿司匹林50mg/kg剂量组，④本发明药物3g生药/kg剂量组，⑤本发明药物6g生药/kg剂量组，⑥本发明药物12g生药/kg剂量组。各组动物按所述剂量以10ml/kg的体积灌胃给药，正常对照组、模型组灌胃等体积蒸馏水，每日1次，连续给药7日。灌药最后一日，第②～⑥组按前述方法造模，第①组以同法间隔4h注射等量生理盐水两次。造模18h后再灌胃给药一次，末次给药后1h，3.5％水合氯醛(350mg/kg)腹腔注射麻醉，切开腹腔暴露腹主动脉，取血2ml用于体外血栓形成测定，取血3ml(肝素抗凝)用于血液粘度测定。
体外血栓形成测定：用硅化注射器穿刺腹主动脉取血2ml，按照Chandler体外法，立刻将血注入旋转环内，注入的血量充满旋转环1/2以下(1.8ml)，迅速密封，置血栓形成仪上，旋转10min(实验温度为37℃)，倾出血栓，生理盐水洗涤，测量长度，称量湿重，将血栓条置80℃烘箱3h，恒重后称其干重。
血液粘度测定：从3ml血(肝素抗凝)中取0.8ml用于全血粘度测定，余血于650×g离心10min，取上清0.8ml用于血浆粘度测定。
试验结果
1.对体外血栓形成的影响
表15本发明药物对血瘀模型大鼠体外血栓形成的影响(
X±SD)
剂量 鼠数 血栓
组别
(kg) (只) 长度(mm) 湿重(mg) 干重(mg)
正常对照 10 21.1±3.1*** 111.1±29.7*** 20.9±3.2***
10 34.8±5.2 225.5±45.5 42.0±10.4
阿司匹林 50mg 10 27.9±2.2** 191.3±18.4* 31.0±5.0**
本发明药物 3g生药 10 32.3±5.4 220.3±42.8 35.6±8.5
本发明药物 6g生药 10 30.3±3.8* 199.6±47.4 32.8±8.1*
本发明药物 12g生药 10 27.5±3.0** 190.1±25.1* 31.3±7.2*
注：与模型组比较*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001
由表15可见，与正常对照组比较，模型组血栓长度、湿重及干重均显著增加(P＜0.001)，提示动物出现典型的“血瘀”表现。与模型组比较，本发明药物12g生药/kg剂量组的血栓长度显著缩短(P＜0.01)、血栓湿重和干重均明显减轻(P＜0.05)；本发明药物6g生药/kg剂量组血栓长度亦明显缩短(P＜0.05)，血栓干重亦明显减轻(P＜0.05)；本发明药物3g生药/kg剂量组的血栓长度、血栓湿重及干重与对照组比较均无明显差异。与模型组比较，阿司匹林组的血栓长度显著缩短(P＜0.01)，血栓湿重和干重均显著减轻(P＜0.05～0.01)。
2.对血液粘度的影响
表16本发明药物对血瘀模型大鼠血液粘度的影响(n＝10，
X±SD)
组别 剂量 全血粘度(CP) 血浆粘度
(mg/kg) 高切(200S-1) 中切(100S-1) 中切(30S-1) 低切(5S-1) (CP)
正常对照 4.07±0.55*** 4.56±0.61*** 5.84±0.75*** 8.19±1.06** 1.29±0.11
模型组 5.51±0.85 6.72±1.30 10.36±3.22 17.61±8.00 1.93±0.98
阿司匹林 50mg 4.83±0.82 5.51±1.00* 7.33±1.52* 10.75±2.56* 1.70±0.06
本发明药物 3g生药 5.17±0.67 6.11±1.09 8.79±2.79 14.08±6.35 1.89±0.63
本发明药物 6g生药 4.86±0.72 5.70±1.25 7.66±2.17* 11.39±3.92* 2.03±0.86
本发明药物 12g生药 4.90±0.49 5.68±0.76* 7.76±1.65* 11.49±3.04* 1.89±0.60
注：与模型组比较*P＜0.05，**P＜0.01，****P＜0.001。
由表16可见，与正常对照组比较，模型组大鼠的血液粘度在各切变率下均显著增加(P＜0.01～0.001)，提示动物出现典型的“血瘀”表现。与模型组比较，本发明药物12g生药/kg剂量组大鼠的全血粘度在切变率100S-1、30S-1、5S-1下均明显降低(P＜0.05)，在切变率200S-1下有降低趋势；本发明药物6g生药/kg剂量组大鼠的全血粘度在切变率30S-1、5S-1下均明显降低(P＜0.05)，在切变率100S-1、200S-1下有降低趋势；本发明药物3g生药/kg剂量组大鼠的全血粘度在各切变率下与模型组比较均无明显差异。与模型组比较，阿司匹林组大鼠的全血粘度在切变率100S-1、30S-1、5S-1下均明显降低(P＜0.05)。各组间的血浆粘度均无明显差异。
上述结果表明：连续7天灌胃给药，本发明药物明显缩短血瘀模型大鼠的体外血栓长度(P＜0.05～0.01)、明显降低血栓湿重和干重(P＜0.05)；明显降低切变率100S-1、30S-1、5S-1下的全血粘度(P＜0.05～0.01)，对切变率200S-1下的全血粘度有降低趋势。提示本发明药物具有抑制血栓形成、降低血液粘度的作用。
(试验例4)为证明本发明药物具有抑制血小板聚集的作用测得的试验数据表明：
试验材料：本发明药物，试验用该药提取清膏，10g生药/g膏。试验用蒸馏水配成所需浓度。阿司匹林肠溶片(25mg/片)：北京市曙光制药厂生产，批号：010640。二磷酸腺苷(ADP)二钠盐：中国科学院上海生物化学研究所生产，批号：9209258，用生理盐水配制成1.0mM/L的溶液，4℃保存备用。花生四烯酸(AA)：Fluka AG产品，临用时用1.0M/L NaOH配制成钠盐，浓度为5.0g/L。胶原(100μg/ml)：KOKEN公司产品。
试验方法：给药前穿刺耳中动脉取血测定血小板聚集率，根据血小板聚集率水平及体重将40只家兔随机分为5组(每组8只)：①对照组(蒸馏水，2.0ml/kg)，②本发明药物8g生药/kg剂量组，③本发明药物4g生药/kg剂量组，④本发明药物2g生药/kg剂量组，⑤阿司匹林25mg/kg剂量组。给药组按所述剂量灌胃给药，对照组灌胃等体积蒸馏水，每日一次，连续给药7日，末次给药后1h，穿刺耳中动脉取血，测定血小板聚集率。
血小板聚集率测定方法：用硅化注射器穿刺耳中动脉取血，3.8％枸橼酸钠溶液抗凝(血∶抗凝剂＝9∶1)，200×g离心8分钟，取上清部分即富血小板血浆(PRP)，剩余部分2200×g离心10分钟，取上清部分即贫血小板血浆(PPP)。PRP中血小板计数为4.0×105/mm3左右。按照Born氏比浊法，将盛有200ulPRP及1小磁棒的比浊管置于血小板聚集仪中，37℃保温1分钟，经PPP标定后，在搅拌情况下加入诱导剂诱导聚集。所用诱导剂的终浓度为：ADP(47.6μM/L)、AA(782.0μM/L)、胶原(4.8mg/L)。根据仪器自动打印出来的聚集曲线及最大聚集率分析药物对血小板聚集的影响。最大聚集率计算公式如下：
表17本发明药物对家兔血小板聚集率的影响(n＝8)
聚集率(％
X±SD)
诱导剂 组别 剂量(/kg)
药前 药后 差值
对照组 59.63±8.04 59.66±8.15 0.02±6.87
阿司匹林 25mg 60.89±10.34 12.01±16.76 -48.88±15.07***
胶原 本发明药物 2g生药 58.18±6.21 57.08±7.80 -1.11±6.14
本发明药物 4g生药 59.89±7.82 50.39±7.84 -9.49±7.54*
本发明药物 8g生药 62.80±10.45 48.02±10.62 -14.77±7.49**
对照组 62.51±8.15 62.21±9.46 -0.29±8.23
阿司匹林 25mg 63.01±8.75 50.13±6.02 -12.80±6.90**
ADP
本发明药物 2g生药 64.81±8.65 62.65±10.81 -2.17±10.79
本发明药物 4g生药 64.64±9.84 52.84±7.41 -11.81±8.52*
本发明药物 8g生药 62.54±8.57 50.02±12.60 -12.52±9.50*
对照组 64.79±8.76 62.59±11.44 -2.21±6.82
阿司匹林 25mg 64.14±8.64 6.66±15.31 -57.48±10.98***
AA 本发明药物 2g生药 64.02±5.47 63.20±9.97 -0.82±9.31
本发明药物 4g生药 64.85±7.32 58.28±15.22 -6.57±10.37
本发明药物 8g生药 62.78±6.82 53.66±4.86 -9.13±7.85
注：与对照组比较：*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001；差值＝给药后聚集率-给药前聚集率。
由表17可见，①当胶原诱导聚集时，给药前各组间血小板聚集率无明显差异，给药后本发明药物8g生药/kg、4g生药/kg剂量组的血小板聚集率明显低于对照组(P＜0.05～0.01)，阿司匹林组的血小板聚集率显著低于对照组(P＜0.001)。②当ADP诱导聚集时，给药前各组间血小板聚集率无明显差异；给药后本发明药物8g生药/kg、4g生药/kg剂量组的血小板聚集率均明显低于对照组(P＜0.05)，阿司匹林组血小板聚集率与对照组比较显著降低(P＜0.01)。③当AA诱导聚集时，给药前各组间血小板聚集率无明显差异；给药后本发明药物8g生药/kg剂量组的血小板聚集率与对照组比较有降低趋势，阿司匹林组的血小板聚集率显著低于对照组(P＜0.001)。
血小板聚集试验结果表明，家兔连续灌7天胃给药，本发明药物明显降低胶原、二磷酸腺苷(ADP)诱导的家兔血小板聚集率(P＜0.05～0.01)，对花生四烯酸(AA)诱导的家兔血小板聚集率有降低趋势。提示本发明药物具有抑制血小板聚集的作用。
(试验例5)本发明药物对麻醉犬心肌缺血、心肌梗塞及冠脉血流量、心肌耗氧量和血液生化指标的影响
试验材料：本发明药物提取清膏，10g生药/g膏；合心爽(盐酸地尔硫片)，30mg/片，天津田边制药有限公司生产，批号：0010107；0.9％氯化钠注射液，北京双鹤药业股份有限公司生产，批号：011204212；内皮素(ET)放免药盒，北京福瑞生物工程公司，批号：0203；血栓素B2(TXB2)和6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1a)放免药盒，北京福瑞生物工程公司批号：0203。硝基蓝四唑(N-BT)：解放军军事医学科学院药材供应站，批号：971120；肌酸激酶(CK)试剂盒，北京中生生物工程高技术公司提供，批号：020201；乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒，北京中生生物工程高技术公司提供，批号：020201。
试验方法：健康成年犬25只，雌雄兼用，体重13.36±2.28kg。试验共分五组：
(1)空白对照组，生理盐水3ml/kg，n＝5；(2)合心爽组，5mg/kg，n＝5；(3)本发明药物1.5g/kg剂量组，n＝5；(4)本发明药物3.0g/kg剂量组，n＝5；(5)本发明药物6.0g/kg剂量组，n＝5。试验药物用蒸馏水配制成同体积(3ml/kg)，经十二指肠给药。
动物经戊巴比妥钠(30mg/kg)静脉麻醉，气管插管，连接电动呼吸机；左侧第四肋间开胸，暴露心脏，剪开心包，做心包床；分离冠状动脉左旋支，放置电磁流量计探头，测定心脏冠脉血流量(CCBF)；分离冠状动脉前降支中段，穿线以备结扎，造成急性实验性心肌缺血模型；缝置多点固定式心外膜电极，连接多道生理记录仪，描记心外膜电图(EEG)<1>。结扎冠脉15min，进行记录，作为给药前对照值，经十二指肠给予试验药物或生理盐水，于药后15、30、45、60、90、120、180min记录30个标测点心外膜电图，以S-T段升高大于2mv为判断标准，计算心肌缺血程度(S-T段升高总mv数∑-ST)及心肌缺血范围(S-T段升高总点数N-ST)。经颈外静脉插管至冠状静脉窦，于缺血前、缺血15min(药前)、药后、30、60、90、120、180min取血，以血氧仪(AVL912型，瑞士)测定冠状静脉血氧含量；颈总动脉插管，测定动脉血氧含量，与冠脉血流量共同计算心肌耗氧量(MOC)：心肌耗氧量＝(动脉血氧含量-冠状静脉血氧含量)×冠脉血流量/100。按上述时间点取血以全自动生化分析仪(RA-1000型，美国)测定血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)；全自动γ记数仪(FT-630G型，北京)放免法测定血浆内皮素(ET)、血栓素B2(TXB2)和6-酮-前列腺素F1a(6-Keto-PGF1a)。
药后180min记录完毕，立即取下心脏，生理盐水冲洗，称重，心脏结扎线以下，心脏心室部分切片(5片)，置于N-BT染液中，常温染色15min。以多媒体彩色病理图象分析系统(MPIAS-1000型，北京)测量每片心肌双侧的梗塞区(N-BT非染色区)与非梗塞区(N-BT染色区)，计算每片心肌的面积，心室总面积和梗塞区总面积。计算梗塞区占心室及占全心脏的百分比<2>。
试验结果进行统计学处理，以t检验判断其显著性。
试验结果
(一).对犬心肌缺血(心外膜电图标测)的影响
1.对心肌缺血程度(∑-ST)的影响
表18各给药组对犬急性心肌缺血程度(∑-ST)的影响(心外膜电图标测) (
X±SD)
| 组别 | 剂量/kg | 药前值变化率(100％) | 药后(min) | ||||||
| 15 | 30 | 45 | 60 | 90 | 120 | 180 | |||
| 生理盐水(n＝5) | 3ml | 335.20±61.26(100％) | 366.80±119.89107.63±19.89 | 381.40±100.12114.00±19.00 | 388.00±86.05117.21±22.94 | 368.60±73.95110.87±15.42 | 384.60±41.20116.98±19.14 | 384.40±21.94117.52±20.86 | 345.80±43.53105.58±20.41 |
| 组别合心爽(n＝5)本发明药物(n＝5)本发明药物(n＝5)本发明药物(n＝5) | 剂量/kg5mg1.5g3.0g6.0g | 药前值变化率(100％)337.20±89.61(100％)320.80±57.79(100％)327.20±44.08(100％)354.20±93.92(100％) | 药后(min) | ||||||
| 15280.40±62.7285.51±20.55281.60±93.9387.06±18.70273.00±51.5284.85±20.58310.60±62.6989.04±10.80 | 30233.40±54.20#71.32±17.66**292.00±64.4591.08±10.74*252.00±20.7278.11±11.52**268.40±45.5678.39±18.07** | 45215.00±67.68#65.64±19.60**285.40±66.2488.61±9.13*265.80±71.9881.95±23.83*253.20±28.6574.28±15.27** | 60212.00±85.45##63.24±18.04**290.40±74.5589.78±12.05*256.20±63.9678.68±19.86*246.40±42.6672.55±19.74** | 90202.80±72.70##60.26±15.58**278.20±69.52#86.04±10.49*244.60±59.63#75.11±18.33**215.20±54.76#63.46±22.20** | 120178.20±67.58##53.00±16.05***250.80±65.69##77.46±10.53**209.60±43.28##64.31±11.74**178.60±62.29#52.89±23.69** | 180171.60±74.90##50.16±14.87***249.60±48.29#78.08±9.38*179.60±55.65##54.65±14.20**140.00±65.39#41.36±22.98** | |||
注：与药前自身比较：#：P＜0.05 ##：P＜0.01 ###：P＜0.001；与对照组比较：*：P＜0.05**：P＜0.01 ***：P＜0.001
结果见表18。对照组生理盐水药后心肌缺血程度(∑-ST)无明显变化；钙拮抗剂合心爽药后可迅速降低∑-ST，可持续至药后180min。经十二指肠给入本发明药物三个剂量组剂量组均有明显减轻心肌缺血程度(∑-ST)的作用。药后120、180min，本发明药物3.0g生药/kg剂量组动物∑-ST由药前327.20±44.08mv降至209.60±43.28mv及179.60±55.65mv，分别下降了35.69±11.74％及44.35±14.20％，与药前及对照组比较均有显著性差异(P＜0.01)，6.0g生药/kg剂量组动物∑-ST从药后30min开始下降，药物作用随给药时间的延长而增加，180min时，动物∑-ST由药前354.20±93.92mv降至140.00±65.39mv，下降了58.64±22.98％，与药前及与对照组比较差异显著(P＜0.05和0.01)。
2.对心肌缺血范围(N-ST)的影响
表19各给药组对犬急性心肌缺血范围(N-ST)的影响(心外膜电图标测)
(
X±SD)
| 组别 | 剂量/kg | 药前值变化率(100％) | 药后(min) | ||||||
| 15 | 30 | 45 | 60 | 90 | 120 | 180 | |||
| 生理盐水(n＝5)合心爽(n＝5)本发明药物(n＝5)本发明药物(n＝5)本发明药物(n＝5) | 3ml5mg1.5g3.0g6.0g | 30.00±0.00(100％)30.00±0.00(100％)30.00±0.00(100％)30.00±0.00(100％)30.00±0.00(100％) | 30.00±0.00100.00±0.0030.00±0.00100.00±0.0030.00±0.00100.00±0.0030.00±0.00100.00±0.0030.00±0.00100.00±0.00 | 30.00±0.00100.00±0.0030.00±0.00100.00±0.0029.80±0.4599.33±1.4930.00±0.00100.00±0.0029.60±0.8998.67±2.98 | 30.00±0.00100.00±0.0029.80±0.4599.33±1.4929.80±0.4599.33±1.4930.00±0.00100.00±0.0029.60±0.8998.67±2.98 | 30.00±0.00100.00±0.0029.60±0.5598.67±1.8329.80±0.4599.33±1.4929.80±0.4599.33±1.4929.40±0.8998.00±2.98 | 30.00±0.00100.00±0.0029.00±1.0096.67±3.3329.60±0.5598.67±1.8329.00±0.7196.67±2.3629.00±1.0096.67±3.33 | 30.00±0.00100.00±0.0028.40±1.52#94.67±5.06*28.80±1.3096.00±3.8028.60±0.8992.00±7.3028.40±0.89#94.67±2.98* | 29.80±0.4599.33±1.4927.60±2.41#92.00±8.0328.60±1.1495.33±3.8027.60±2.1992.00±7.3026.00±3.00#86.67±10.00 |
注：与药前自身比较：#：P＜0.05；与对照组比较：*：P＜0.05
结果见表19。对照组给入生理盐水后，心肌缺血范围(N-ST)无明显改变。合心爽药后可减小心肌缺血范围(N-ST)，180min作用明显，与对照组比较有显著性差异(P＜0.05)；本发明药物6.0g生药/kg剂量组药后120、180min也有明显降低N-ST的作用。
心外膜电图(EEG)标测的试验结果表明，本发明药物对实验性急性犬心肌缺血有明显的改善作用，可显著减轻心肌缺血程度(∑-ST)，减小心肌缺血范围(N-ST)。
(二)、对犬急性心肌梗塞范围(N-BT)染色法测定)的影响
表20各给药组对犬急性心肌梗塞范围的影响(n＝5(
X±SD))
| 组别 | 剂量/kg | 心脏面积mm2 | 心室面积mm2 | 梗塞区面积mm2 | 梗塞区/心脏 | 梗塞区/心室 |
| 生理盐水 | 3ml | 13165.3±5252.1 | 5124.5±731.1 | 862.70±85.9 | 6.52±1.05 | 17.04±3.02 |
| 合心爽 | 5mg | 12908.3±1579.3 | 4947.5±468.4 | 223.90±54.3*** | 1.91±0.48*** | 4.56±2.60*** |
| 本发明药物 | 1.5g | 9761.6±213.8 | 4552.4±295.5 | 411.60±69.0*** | 4.20±0.74** | 9.07±1.63** |
| 本发明药物 | 3.0g | 14367.7±5115.1 | 5395.4±639.4 | 361.80±56.5*** | 2.65±0.43*** | 6.78±1.24*** |
| 本发明药物 | 6.0g | 12683.8±5154.2 | 5311.0±498.0 | 338.30±68.6*** | 2.88±0.47*** | 6.32±0.81*** |
注：与对照组比较：*P＜0.05，**：P＜0.01，***：P＜0.001。
结果见表20，以定量组织学N-BT染色法显示心肌梗塞范围，生理盐水对照组动物心肌梗塞区分别占心脏及心室的6.52±1.05％和17.04±3.02％；阳性对照药合心爽及本发明药物三个剂量组可明显缩少动物心肌梗塞区面积，其中6.0g生药/kg组心肌梗塞区面积分别占心脏及心室的2.88±0.47％、6.32±0.810％，分别较生理盐水对照组降低了55.82％和62.91％，与对照组比较均有显著性差异(P＜0.001)。
(三)对试验性心肌缺血犬冠脉血流量的影响
表21 各给药组对犬冠脉血流量(ml/100g·min-1)的影响(
X±SD)
| 组别 | 剂量/kg | 缺血前(正常值) | 缺血后(药前值)变化率(100％) | 药后(min) | ||||
| 30 | 60 | 90 | 120 | 180 | ||||
| 组别 | 剂量/kg | 缺血前(正常值) | 缺血后(药前值)变化率(100％) | 药后(min) | ||||
| 30 | 60 | 90 | 120 | 180 | ||||
| 生理盐水(n＝5)合心爽(n＝5)本发明药物(n＝5)本发明药物(n＝5)本发明药物(n＝5) | 3ml5mg1.5g3.0g6.0g | 94.27±9.9498.49±16.2797.89±51.2879.85±38.4986.09±57.44 | 101.50±9.23107.83±3.93105.26±16.72106.98±1.09106.50±57.31109.11±2.0287.62±44.59##109.90±3.4991.21±59.99#109.81±6.94 | 103.64±13.32101.90±5.74117.11±18.43###111.27±2.16**111.72±60.50#105.32±1.4196.48±49.86#109.03±2.77*99.89±64.88##109.81±2.80* | 106.61±12.23104.86±3.09118.54±22.30#112.20±5.60*111.04±58.07105.37±5.39103.79±55.15#114.93±8.93*106.08±67.08###117.48±6.52** | 102.81±10.20101.24±2.69116.68±18.06#110.97±5.47**108.08±57.89102.05±7.3499.21±52.78111.11±9.88104.57±65.25##116.74±5.48** | 100.58±10.7999.06±4.68114.78±14.45##109.50±4.29**104.02±55.1399.00±6.9897.41±51.16108.36±9.56101.44±63.60#114.41±7.13** | 96.72±20.4594.86±14.40107.42±17.29102.05±4.87100.77±52.2095.93±5.6896.74±49.77107.61±6.7796.96±64.46105.18±7.09 |
注：与对照组比较：*：P＜0.05 **：P＜0.01 ***：P＜0.001与药前自身比较：#：P＜0.05##：P＜0.01 ###：P＜0.001
结果见表21，结扎犬冠状动脉形成心肌缺血后，冠脉血流量出现短时代偿性增加，增加幅度10％左右。合心爽和本发明药物三个剂量组药后均有显著增加缺血心脏冠脉血流量的作用，3.0和6.0g生药/kg剂量组药后60～120min冠脉血流量增加，分别增加了17.48±6.52％，16.74±5.48％和14.41±7.13％，与药前及对照组组比较，均有显著性差异(均P＜0.05-0.01)。
(四)、对实验性心肌缺血犬动、静脉血氧含量及心肌耗氧量的影响
表22.各给药组对犬动脉血氧含量(AO2ml％)、静脉血氧含量(VO2ml％)的影响
(
X±SD)
| 指标 | 组别 | 剂量/kg | 缺血前(正常值) | 药前值变化率(100％) | 药后(min) | ||||
| 30 | 60 | 90 | 120 | 180 | |||||
| AO2 | 生理盐水(n＝5)合心爽(n＝5)本发明药物(n＝5)本发明药物(n＝5)本发明药物(n＝5) | 3ml5mg1.5g3.0g6.0g | 14.30±3.5612.24±1.5110.66±4.5911.84±4.7011.60±3.86 | 12.58±4.0586.49±13.1412.12±2.5299.07±18.0510.82±3.61106.44±20.7411.20±4.3794.92±9.7810.84±3.6893.84±6.77 | 14.28±4.26115.87±18.4311.96±2.3299.33±7.7510.60±3.7097.71±2.9311.80±4.23106.39±3.7612.50±2.19121.56±28.45 | 14.82±3.62121.63±16.8311.86±2.9597.32±6.47*11.44±4.17104.82±9.9212.31±5.31108.76±6.9012.20±2.52117.38±20.63 | 14.12±3.43117.19±23.9011.84±3.1297.13±9.7610.70±3.5498.83±4.2712.22±4.28110.70±5.3611.54±1.86112.08±22.82 | 14.40±3.51117.71±12.8411.86±2.0799.14±11.97*11.56±4.39106.14±8.3112.08±5.65105.42±13.6512.08±2.14116.90±22.78 | 14.92±3.82121.99±14.4811.56±2.0696.21±7.64*11.40±3.58106.78±11.2413.14±5.52117.13±18.7211.70±2.40112.19±17.68 |
| VO2 | 生理盐水(n＝5)合心爽(n＝5)本发明药物 | 3ml5mg1.5g | 7.84±2.095.20±3.514.92±1.87 | 7.90±3.4097.70±15.334.32±2.5390.75±32.565.58±2.39 | 8.28±4.80101.89±30.517.94±2.02###220.92±88.51*6.80±2.00 | 8.54±3.87106.92±15.707.02±2.32###188.94±64.53*6.38±2.71 | 8.08±3.27102.68±5.656.94±3.16##176.65±49.13**5.82±2.17 | 8.08±3.87100.74±8.177.00±2.32##189.92±70.91*5.60±3.05 | 7.76±3.0299.44±6.886.44±2.60#173.10±83.585.56±3.25 |
| (n＝5)本发明药物(n＝5)本发明药物(n＝5) | 3.0g6.0g | 6.44±2.436.50±2.70 | 113.37±30.754.80±1.7278.50±21.825.06±1.5182.42±17.76 | 131.26±28.976.98±2.51##145.04±13.21*8.12±2.05##164.10±31.42* | 117.33±16.936.10±2.03#127.20±17.368.64±1.50##178.64±40.49** | 111.24±28.986.38±2.40#133.80±16.85**8.00±1.83#162.98±35.07 | 104.03±35.245.94±1.74127.74±26.538.20±1.96#170.15±49.43*** | 98.83±29.086.42±2.23139.80±47.827.80±1.89#160.12±40.03* |
注：与药前自身比较：#：P＜0.05；与对照组比较：*：P＜0.05，**：P＜0.01
表23.各给药组对犬心肌耗氧量(ml/100g·min-1)的影响 (
X±SD)
| 组别 | 剂量/kg | 缺血前 | 缺血后(药前值) | 药后(min) | ||||
| (正常值) | 变化率(100％) | 30 | 60 | 90 | 120 | 180 | ||
| 生理盐水(n＝5)合心爽(n＝5)本发明药物(n＝5)本发明药物(n＝5)本发明药物 | 3ml5mg1.5g3.0g6.0g | 6.63±3.076.93±4.217.02±4.475.58±2.786.10±3.42 | 4.90±3.6072.07±32.238.03±2.19131.99±43.186.79±3.03106.77±17.456.65±4.33141.74±71.916.24±3.39 | 6.47±4.36157.08±74.514.51±2.4852.84±22.415.33±3.7070.19±25.085.52±4.6178.86±20.885.26±3.04 | 6.93±4.45184.49±120.025.36±3.3061.92±28.586.80±2.90106.24±26.107.65±6.04110.30±26.254.73±3.32 | 6.38±3.57201.48±191.135.46±2.7564.64±19.676.38±3.1995.82±21.946.62±4.7996.61±17.084.67±2.46 | 6.56±4.29170.50±106.685.35±2.2465.58±25.36*7.57±3.53115.87±27.606.96±5.9294.06±33.574.91±2.48 | 7.12±3.47185.25±84.495.29±2.3063.56±13.79*7.03±2.47113.51±35.047.46±4.19115.39±27.104.57±2.10 |
| (n＝5) | 123.60±25.72 | 84.37±11.36 | 71.44±27.72 | 81.35±27.20 | 81.39±29.97 | 78.10±17.76* |
注：与对照组比较：*：P＜0.05 **：P＜0.01
结果见表22、23，对照组生理盐水给药前后动脉、冠状静脉窦血氧含量及心肌耗氧量均无明显改变；合心爽可明显增加静脉窦血氧含量的同时显著降低心肌耗氧量。本发明药物3.0g生药/kg和6.0g生药/kg剂量组药后有明显增加静脉窦血氧含量的作用，增加幅度可达70％，与对照组比较差异显著(P＜0.05-0.01)。本发明药物6.0g/kg在180min时可明显降低动物心肌耗氧量，与对照组相比差异显著(P＜0.05)。
(五)、对实验性心肌缺血犬血液生化学指标的影响
1.对血清肌酸激酶(CK)及乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响
结果见表24，动物心肌缺血前血清CK、LDH含量分别为260.36±101.77u/L和73.64±25.15u/L(n＝25)，结扎冠脉形成急性心肌缺血后，血中CK、LDH含量明显升高，分别为362.32±120.89u/L和84.04±23.97u/L，与缺血前比较CK含量增加了45.30％，LDH含量增加了26.16％；CK、LDH活性随着冠脉结扎时间的延长进一步增加，生理盐水组药后30、60、90、120、180min与药前相比较，CK分别增加183.59％、324.33％、330.49％、428.64％及530.00％；LDH分别增加67.30％、99.10％、104.30％、132.51％及120.23％；阳性药合心爽能明显抑制心肌缺血引起CK、LDH活性升高。本发明药物有部分抑制CK、LDH活性的作用。
表24各给药组对犬血清CK(U/L)、LDH(U/L)的比较 (
X±SD)
| 指标 | 组别 | 剂量/kg | 缺血前(正常值) | 缺血后(药前值)变化率(100％) | 药后(min) | ||||
| 30 | 60 | 90 | 120 | 180 | |||||
| CK | 生理盐水(n＝5) | 3ml | 189.20±39.04 | 332.80±48.24179.05±22.35 | 950.40±430.08283.59±124.84 | 1410.20±685.92424.33±222.12 | 1433.80±462.48430.49±152.57 | 1766.00±677.20528.64±216.76 | 2110.00±796.00630.00±233.12 |
| 合心爽(n＝5)本发明药物(n＝5)本发明药物(n＝5)本发明药物(n＝5) | 5mg1.5g3.0g6.0g | 395.00±136.40172.60±40.32229.20±54.64315.80±121.36 | 551.60±234.72135.51±16.42245.20±19.84151.62±34.53331.00±90.00143.68±12.68351.00±110.40116.63±9.57 | 711.80±297.76132.09±12.79*399.20±42.96162.68±10.71479.60±120.08146.48±9.36*505.80±114.24151.01±15.90* | 911.20±360.24168.11±13.00*542.80±131.76217.75±34.49650.60±145.68201.29±20.84625.80±113.12192.52±36.75 | 1185.60±496.32216.33±22.45*622.80±75.84253.07±15.63765.20±148.64241.32±38.24*807.40±198.32255.51±77.88 | 1484.20±607.76275.47±56.21*789.00±140.80319.60±42.21995.20±146.16316.21±50.111021.40±274.32322.21±86.96 | 1689.40±606.48324.88±74.25*1006.80±168.24409.46±56.561226.20±251.84386.31±66.861415.80±521.84440.65±138.38 | |
| LDH | 生理盐水(n＝5)合心爽(n＝5)本发明药物(n＝5)本发明药物(n＝5)本发明药物(n＝5) | 3ml5mg1.5g3.0g6.0g | 60.50±7.7583.60±22.4857.60±27.9278.75±23.2588.20±40.32 | 76.50±11.00127.77±16.2996.20±30.56113.95±11.8369.20±25.84129.21±26.0994.50±12.00109.14±11.8278.20±25.52121.77±42.91 | 129.00±25.50167.30±9.36102.40±25.68112.78±25.17**89.00±32.40130.97±32.66123.25±10.75127.28±13.61106.00±18.80143.51±17.06* | 149.75±8.38199.10±21.39113.40±30.32122.87±18.30**116.40±46.24171.47±47.92137.50±26.25157.28±48.40120.40±37.52169.44±60.48 | 152.00±10.00204.30±34.05167.20±107.12167.32±80.42127.20±59.84195.11±71.56148.25±44.88166.47±66.77156.80±71.28227.07±121.87 | 174.00±8.00232.51±35.49138.80±48.64144.67±10.11**123.00±59.60183.32±65.26214.50±97.25213.50±86.17166.80±86.48246.97±144.39 | 163.50±8.25220.23±39.37120.20±23.04134.98±28.60**152.40±74.08244.79±101.67151.50±30.75154.61±40.03*176.60±81.76263.82±136.38 |
注：与对照组比较：*：P＜0.05
2.对血浆内皮素(ET)、血栓素(TXB2)及6-酮-前列腺素(6-Keto-PGF1a)活性的影响
表25各给药组对犬血浆ET(pg/ml)、TXB2(pg/ml)的比较 (
X±SD)
| 指标 | 组别 | 剂量/kg | 缺血前(正常值) | 缺血后(药前值)变化率(100％) | 药后(min) | ||||
| 30 | 60 | 90 | 120 | 180 | |||||
| ET | 生理盐水(n＝5)合心爽(n＝5)本发明药物(n＝5)本发明药物(n＝5)本发明药物(n＝5) | 3ml5mg1.5g3.0g6.0g | 38.49±6.2147.10±19.8343.84±12.4248.79±19.6947.06±11.93 | 33.46±1.9388.93±9.7661.01±26.34130.64±9.4041.67±6.57101.41±18.1050.77±19.06117.35±45.4444.68±9.98109.92±28.25 | 33.47±10.54100.51±33.9146.99±23.9974.76±18.8327.77±2.8267.84±9.4644.05±7.04104.45±42.2345.56±16.4593.77±30.72 | 41.44±10.99124.66±32.2844.50±25.2468.48±6.71**31.61±5.9575.71±3.5749.20±16.09104.61±29.0340.52±15.4985.32±37.11 | 38.12±7.37113.56±20.5542.61±26.9365.70±28.38*36.33±10.7584.76±12.2250.46±14.30101.81±16.1938.73±11.2682.72±27.50 | 42.03±6.87126.70±26.2447.24±25.6675.42±24.69*44.01±9.16105.33±9.2054.47±22.41115.89±44.9049.49±13.57100.95±29.55 | 40.07±4.69119.96±12.8041.69±18.2670.28±19.33**51.04±17.16122.11±33.2659.53±21.56126.22±33.9546.21±15.90112.17±22.83 |
| TXB2 | 生理盐水(n＝5)合心爽 | 3ml5mg | 449.7±129.0443.3±92.9 | 451.9±104.2106.62±31.63478.8±134.4 | 437.1±148.5101.74±34.01461.2±217.2 | 688.0±458.2159.66±95.41402.4±143.7 | 514.3±161.7126.09±49.32497.5±153.0 | 765.6±375.8196.08±113.05454.5±82.2 | 519.8±105.0130.86±54.75442.2±72.8* |
| (n＝5)本发明药物(n＝5)本发明药物(n＝5)本发明药物(n＝5) | 1.5g3.0g6.0g | 455.2±145.8770.4±342.4422.7±134.9 | 142.75±24.67509.6±151.9118.16±30.50911.4±381.6124.08±35.64720.2±282.5203.93±108.66 | 69.99±13.71419.1±126.783.35±17.49666.9±171.987.97±34.36438.9±63.776.47±26.21 | 62.82±10.46412.9±189.881.39±25.22595.4±157.672.07±19.52470.0±129.578.45±31.29 | 79.97±21.84442.7±220.583.57±23.35519.3±119.268.37±29.48446.3±80.373.14±23.96 | 78.75±28.15390.6±175.478.42±25.53764.8±442.189.08±43.38507.5±116.781.29±29.96 | 67.76±13.19421.1±162.882.13±19.58803.0±412.286.18±11.94423.8±57.667.69±15.71* |
注：与对照组比较：*：P＜0.05 **：P＜0.01 ***：P＜0.001与药前自身比较：#：P＜0.05##：P＜0.01 ###：P＜0.001
表26各给药组对犬血浆6-Keto-PGF1α(pg/ml)、6-Keto-PGF1α/TXB2的比较
(
X±SD)
| 指标 | 组别 | 剂量/kg | 缺血前(正常值) | 缺血后(药前值)变化率(100％) | 药后(min) | ||||
| 30 | 60 | 90 | 120 | 180 | |||||
| 6-Keto-PGF1α | 生理盐水(n＝5)合心爽 | 3ml5mg | 1735.5±415.32585.1±1233.3 | 1212.8±219.371.36±7.001875.7±463.7 | 1097.6±167.291.00±3.071827.7±381.1 | 1033.9±66.688.44±15.572722.7±801.7 | 1519.4±590.7123.86±33.693037.4±728.3 | 1447.4±382.9118.17±19.193742.5±1122.6 | 1235.1±200.7104.06±20.984302.6±1808.9 |
| 指标 | 组别(n＝5)本发明药物(n＝5)本发明药物(n＝5)本发明药物(n＝5) | 剂量/kg1.5g3.0g6.0g | 缺血前(正常值)3598.1±1647.33152.1±1456.32039.6±1227.1 | 缺血后(药前值)变化率(100％)83.43±15.513058.6±1567.090.84±29.511883.7±487.371.91±24.511223.9±384.975.01±16.15 | 药后(min) | ||||
| 3098.40±8.601801.5±531.666.59±10.041674.0±794.484.27±20.231173.1±261.2100.86±16.25 | 60145.81±27.54**1983.4±406.383.13±29.021858.6±1126.489.99±32.891572.2±542.5131.88±44.19 | 90166.43±28.121950.3±520.082.62±34.001893.9±1077.792.24±32.121948.0±965.6171.04±92.79 | 120209.83±59.33*2152.8±762.787.97±37.402053.0±1136.9101.12±39.751878.8±823.4157.10±51.99 | 180233.95±81.13*2966.6±1368.6114.14±56.362201.3±1282.6106.80±41.282052.8±511.3180.78±50.57* | |||||
| 6-Keto-PGF1α/TXB2 | 生理盐水(n＝5)合心爽(n＝5)本发明药物(n＝5)本发明药物(n＝5)本发明药物(n＝5) | 3ml5mg1.5g3.0g6.0g | 4.213±1.4416.390±3.5708.293±0.0005.941±4.6245.385±2.506 | 2.794±0.49775.72±23.873.224±0.99163.77±29.516.562±3.93178.20±20.212.764±1.40370.30±38.921.846±0.62954.66±29.91 | 2.774±0.595106.80±40.784.549±1.256147.44±23.894.577±1.11984.52±19.382.699±1.257112.8±39.382.833±0.812163.95±62.66 | 2.509±1.177100.98±60.578.525±4.277250.23±79.50*5.709±1.621118.30±47.733.684±2.517123.59±22.393.991±1.979210.47±95.58 | 3.938±2.478160.37±122.706.996±2.636234.08±106.855.400±1.992102.47±38.724.381±3.265162.19±61.185.042±3.200256.34±117.20 | 2.696±1.501110.19±75.788.695±3.041306.77±117.05*5.951±1.585117.95±37.544.292±3.619133.04±54.054.278±2.215214.55±71.08 | 2.475±0.48793.91±30.239.875±4.517349.91±109.88**7.047±3.436131.87±62.443.961±2.898124.34±45.835.149±1.715279.50±53.96** |
注：与药前自身比较#：P＜0.05；与对照组比较*：P＜0.05 **：P＜0.01 ***：P＜0.001
结果见表25、26，持续结扎犬冠状动脉过程中，生理盐水对照组动物血浆内皮素(ET)、血栓素B2(TXB2)含量明显升高；6-酮-前列腺素(6-Keto-PGF1a)及6-酮-前列腺素/血栓素B2比值明显下降。本发明药物对心肌缺血、心肌梗塞引起的血浆血栓素(TXB2)活性亦有明显抑制作用，同时升高6-酮-前列腺素(6-Keto-PGF1a)及与TXB2的比值。
本试验采用心外膜电图标测心肌缺血范围及程度，定量组织学(N-BT染色法)测定心肌梗塞范围，同时测定冠脉血流量、心肌耗氧量及血清CPK、LDH和血浆ET、TXB2、6-Keto-PGF1α活性的变化，研究了本发明药物消化道(十二指肠)给药对实验性犬急性心肌缺血、心肌梗塞及相关指标的影响。
试验结果证实，本发明药物具有明显改善犬急性心肌缺血和心肌梗塞的作用，减轻由心外膜电图标测的心肌缺血程度(∑-ST)，降低心肌缺血范围(N-ST)，减小经N-BT染色所显示的梗塞区。
由不同病因造成局部冠状动脉狭窄或冠状动脉闭塞形成心肌缺血或心肌梗塞时，其它冠状动脉分支代偿性扩张和开放，可使心肌缺血或心肌梗塞得到缓解。当心肌发生大面积缺血和广泛性梗塞、这种代偿能力“得不偿失”时，则造成心肌坏死和不可逆损伤。试验观察到本发明药物可明显增加心肌缺血和心肌梗塞时的冠脉血流量，明显降低心肌耗氧量，表明其可扩张冠脉血管，促进侧支循环的开放，改善缺血心肌的供血供氧。
肌酸激酶(CK)广泛存在于胞浆中，尤以心肌细胞为多。当心肌细胞损伤时CK溢出，使其在血清中活性提高，血清CK活性越高，反映心肌损伤越重<3>。乳酸脱氢酶(LDH)在心肌梗塞时从组织细胞内大量释放于体液中，测定冠状静脉窦血中其活性，亦反映心肌损伤的程度。本试验观察到持续结扎犬冠状动脉CK和LDH活性持续增加。试验观察到本发明药物抑制CK、LDH活性升高的作用。
前列环素(prostacyclin，PGI2)、内皮素(endothelin，ET)、血栓素A2(thromboxaneA2，TXA2)均为内皮细胞分泌的血管活性物质，其中PGI2为舒血管物质，ET和TXA2为缩血管物质。本试验通过测定ET、6-keto-PGF1α(PGI2的终末代谢产物)及TXB2(TXA2的终末代谢产物)等活性物质，观察持续结扎犬冠状动脉形成心肌缺血和心肌梗塞过程中的变化以及观察药物对其影响。结果表明，本发明药物对心肌缺血、心肌梗塞引起的血栓素(TXB2)活性有明显抑制作用，同时可明显升高6-Keto-PGF1a的水平。
上述结果表明，本发明药物可明显改善犬急性心肌缺血和心肌梗塞的病理表现，减轻心肌缺血程度，减小心肌梗塞面积；同时可增加冠脉血流量，降低心肌耗氧量；抑制TXB2的释放；同时可明显升高6-酮-前列腺素(6-Keto-PGF1a)的水平。
(试验例6)本发明药物对对缺血再灌注所致心肌梗塞范围及相关生化指标血清SOD、MDA值的影响
试验材料：本发明药物提取清膏，10g生药/g膏。合心爽片(盐酸地尔硫俋缓释片)，30mg/片，天津田边制药有限公司，批号9804031。超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒，南京建成生物工程研究所提供，批号：20020508。
试验方法：取Wistar种大鼠48只，雄性，体重240～260g，随机分为6组：假手术组(取血清作正常对照)，模型组，合心爽16mg/kg组，本发明药物3.0、6.0、12.0g生药/kg组。药物以生理盐水溶至所需浓度，给药体积为3ml/kg，给药途径为十二指肠。
动物以戊巴比妥钠腹腔麻醉(45mg/kg)，仰位固定，以PlowerLab/8sp生理记录仪监测标准II导联心电图；切开气管，插入气管插管，接呼吸机进行人工呼吸(32次/分，呼吸比值1∶3)；开胸，断3～5肋，打开心包膜，暴露心脏，于冠状动脉左前降支根部穿线(0号缝合线)，备结扎用；分离十二指肠准备给药；穿线后稳定10分钟，将一塑料凹管与血管并列，结扎(无ST段及T波改变者淘汰)，给入受试药物后关腹；40分钟后，沿凹槽剪断结扎线，使前降支实现再灌注；缝合胸壁，恢复自主呼吸。
打开结扎2小时后，腹主动脉取血，比色法测定血清SOD、MDA含量；心脏结扎线以下横切5片，N-BT染色，采用多媒体彩色病理图文分析系统(MPIAS-500)，以固定象距测量总心肌面积及梗塞心肌面积，观察心肌梗塞程度；结果进行统计学处理(t检验)。
1、本发明药物对心肌梗塞程度的影响
表27.本发明药物对心肌梗塞程度的影响(
X±SD)
剂量 心肌总面积mm2 梗塞心肌面积mm2 梗塞区重量 梗塞区占 梗塞区占
分组 n
/kg g 心室％ 心脏％
模型组 8 275.38±16.84 97.35±8.04 0.258±0.029 35.2±1.5 30.2±1.3
合心爽组 8 16.0mg 284.02±21.18 69.99±13.21** 0.184±0.031** 24.7±3.6** 21.1±3.1**
本发明药物组 8 3.0g 283.81±18.59 83.98±12.01* 0.211±0.034* 29.5±3.2** 24.8±2.8**
本发明药物组 8 6.0g 289.37±18.92 70.41±11.81** 0.180±0.036* 24.3±3.9** 20.7±3.4**
本发明药物组 8 12.0g 280.92±25.43 73.31±16.19** 0.191±0.046** 26.2±5.9** 22.2±4.9**
*、**：与模型组比较P＜0.05、P＜0.01.
试验结果见表27，模型组梗塞区占心室及心脏百分比分别为35.2及30.2％；对照药合心爽组心肌梗塞程度明显减轻，梗塞面积减小，梗塞区重量减轻，梗塞区占心室及心脏百分比降低，与模型组比较均有显著性差异(P＜0.01)；本发明药物12.0、6.0、3.0g/kg组有同样作用，梗塞面积减小，梗塞区重量减轻，梗塞区占心室及心脏百分比降低，与模型组比较均有显著性差异(P＜0.05～P＜0.01)。
2、本发明药物对血清SOD活性及MDA含量的影响
试验结果表28证实，模型组SOD值降低，MDA升高，与假手术组比较均有显著性差异(P＜0.05～P＜0.01)；合心爽16mg/kg组及本发明药物12.0g/kg组SOD活性明显升高，本发明药物6.0g/kg组MDA值明显降低，与模型组比较有显著性差异(P＜0.05)。
表28.本发明药物对血清SOD及MDA值的影响(
X±SD)
分组 n 剂量/kg SOD(NU/ml) MDA(nmol/ml)
假手术组 8 360.92±52.93 9.48±1.13
模型组 8 238.55±31.35## 12.34±3.42#
合心爽组 8 16mg 277.63±39.59* 9.90±1.75
本发明药物组 8 3.0g 242.86±73.06 9.46±2.71
本发明药物组 8 6.0g 273.86±49.37 9.40±1.93*
本发明药物组 8 12.0g 290.03±49.21* 10.38±1.86
注：##与正常对照组比较P＜0.01；*、**：与模型组比较P＜0.05、P＜0.01.
试验表明，心肌缺血后再灌注损伤，临床常发生于冠脉搭桥术后及溶栓术治疗心梗后。研究证实，心肌缺血一定时间造成心肌损伤后，再灌注不仅无益于心脏功能的恢复，反而加重已有的心肌损伤，从而导致心肌梗塞的发生或进一步加重。
本试验以大鼠心肌缺血再灌注损伤模型观察药物作用。试验观察到，心肌缺血再灌注导致心肌梗塞发生，N-BT染色后心梗斑块明显，占心室总面积的35.2％；同时SOD活性降低，MDA含量增加，间接反映了氧自由基对再灌性心肌损伤的参与。
本发明药物明显减轻心肌梗塞程度，缩小心梗面积，减轻梗塞区重量，血清SOD活性增加，MDA含量降低，对心肌缺血再灌注损伤有明确的保护作用。
(试验例7)本发明药物对对麻醉开胸犬心脏血流动力学及心肌耗氧量的影响，研究其对心脏功能的药理作用及作用机制
试验材料：本发明药物提取浸膏，10g生药/g膏；合心爽(盐酸地尔硫俋片)，30mg/片，天津田边制药有限公司生产(批号：0010107)；0.9％氯化钠注射液，北京双鹤药业股份有限公司生产(批号：011207122)。
试验方法：健康成年杂种犬25只，体重15.16±0.99kg，雌雄兼用，将试验药物，均在试验前用生理盐水配制成等体积(3ml/kg)，经十二指肠给药。试验动物用戊巴比妥钠(30mg/kg)静脉麻醉，气管插管，连接电动人工呼吸机。施左侧第四肋间开胸术，暴露心脏，剪开心包，做心包床，分离冠状动脉左旋支及主动脉根部，放置电磁流量计探头，分别测量冠脉血流量及心输出量。左心室尖部插管，连接压力换能器，经载波放大器测定左室内压，再经微分器(ED-601G)计算左室内压上升最大速率(dp/dtmax)。颈外静脉插管至冠状静脉窦<1>，颈动脉插管，以血氧仪分别测定冠状静脉窦血氧含量及动脉血氧含量，计算心肌耗氧量。股动脉插管测定动脉血压，以肢体导联观测标准II导心电图计算心率及相关心电图参数。公式计算其它血流动力学指标：心搏出量、耗氧指数、冠脉阻力、总外周阻力及氧利用率等<2>。将上述各项指标同步记录于多道生理记录仪。
施腹部手术，分离十二指肠，插管，以备给予所试药物。
试验共分五组：(1)空白对照组，生理盐水3ml/kg，n＝5；(2)合心爽组，5mg/kg，n＝5；(3)本发明药物1.5g/kg剂量组，n＝5；(4)本发明药物3.0g/kg剂量组，n＝5；(5)本发明药物6.0g/kg剂量组，n＝5。
手术完毕，待所观察指标稳定后，记录药前值，十二肠给入所试药物。并于药后15、30、45、60、90、120分钟进行记录。将各项观测指标及推导参数进行统计学处理，以不同观察时间的实测值进行给药前后自身比较，其变化百分率进行组间比较，以t检验判断其显著性。
1、对犬动脉血压、心率及心电图的影响
表29 各给药组对犬血压(mmHg)的影响
x±SD
| 指标 | 组别 | 剂量/kg | 药前值变化率 | 药后(min) | |||||
| 15 | 30 | 45 | 60 | 90 | 120 | ||||
| 动脉收缩压 | 生理盐水n＝5合心爽n＝5本发明药物n＝5本发明药物n＝5本发明药物n＝5 | 3ml5mg1.5g3.0g6.0g | 151.60±16.82166.20±13.65156.20±10.18171.40±11.17161.60±16.95 | 148.00±12.9097.89±3.95150.60±18.46#90.46±5.39*157.40±12.42100.71±2.55169.60±13.5298.90±3.03162.60±19.82100.54±4.98 | 145.40±12.1296.25±5.23146.80±17.30##88.18±4.08*154.60±10.2999.02±3.60163.40±16.6595.18±4.18165.00±22.56101.94±6.74 | 148.40±14.1298.09±3.53148.80±14.08#89.58±5.48*162.60±8.79104.35±7.34161.40±21.5793.86±6.62161.80±22.9499.99±8.03 | 148.00±16.2597.68±2.85150.00±14.47#90.34±6.54156.60±16.06100.21±7.37158.60±17.17#92.33±4.33*160.80±23.3899.50±10.62 | 148.00±13.5597.87±4.22149.20±14.74##89.77±4.84*156.20±15.2999.97±6.92155.80±16.72#90.75±5.60155.60±26.9195.93±9.85 | 150.40±12.3099.52±4.32151.60±15.96#91.16±4.78*152.80±13.3797.82±5.76153.00±13.11###89.19±3.07**155.60±20.9596.08±4.02 |
| 动脉舒张压 | 生理盐水n＝5合心爽n＝5本发明药物n＝5本发明药物n＝5本发明药物 | 3ml5mg1.5g3.0g6.0g | 101.00±13.40120.20±12.19118.40±10.83133.40±9.99113.60±21.92 | 101.00±10.56100.30±3.43104.40±12.80##86.83±4.95**118.20±12.3099.77±3.06132.60±10.9299.37±1.90114.60±20.29 | 101.60±9.94100.97±4.07101.20±11.54##84.25±5.21***115.40±11.9197.41±2.91126.20±13.14#94.51±4.19*116.20±21.11 | 101.80±8.35101.39±6.7799.00±10.49##82.54±6.08**118.60±13.52100.05±4.29124.20±15.9392.88±5.69113.20±18.62 | 100.80±11.37100.02±3.2398.60±13.13##82.03±6.28***115.20±15.4597.13±7.31123.00±10.51###92.15±1.16***111.00±19.35 | 99.40±8.2998.97±6.0598.80±12.40##82.34±7.65**116.60±13.3598.47±6.45120.80±10.33##90.52±2.74*108.20±19.88 | 101.40±8.91100.92±5.83100.60±14.88#83.77±9.28**113.40±12.8295.83±7.08118.40±7.30##88.85±2.66**109.20±16.30 |
| n＝5 | 101.24±4.14 | 102.66±5.59 | 100.46±8.55 | 98.42±10.17 | 96.03±11.79 | 96.94±6.45 |
注：与对照组比较：*P＜0.05，**P＜0.01，***：P＜0.001；自身药前比较：#P＜0.05，##P＜0.01，###P＜0.001
表30 各给药组对犬标准肢体II导心电图的影响
x±SD
| 指标 | 组别 | 剂量/kg | 药前值变化率 | 药后(min) | |||||
| 15 | 30 | 45 | 60 | 90 | 120 | ||||
| 心率 | 生理盐水n＝5合心爽n＝5本发明药物n＝5本发明药物n＝5本发明药物n＝5 | 3ml5mg1.5g3.0g6.0g | 140.00±20.84184.80±23.77165.80±14.67157.80±24.74193.60±20.51 | 140.40±21.70100.70±2.66168.80±16.05#90.43±2.10***164.80±17.6499.26±2.50162.60±26.42103.06±3.58187.00±23.5695.64±5.06 | 141.40±23.66101.38±2.92162.60±16.73##86.71±2.56***165.20±17.8199.89±2.64163.60±23.04104.27±5.45183.40±26.2493.13±5.70* | 142.40±25.03102.15±3.63153.60±15.04##81.61±5.11***164.80±19.68100.49±.2.94166.00±17.55107.03±11.09183.40±30.5792.43±7.68* | 145.00±28.32104.59±5.73149.20±15.99##78.86±2.78***167.60±16.99101.09±2.44167.00±16.69108.03±14.40182.20±34.5491.48±10.38* | 144.00±28.18103.67±6.63146.80±15.22##77.30±2.56***169.20±15.97101.75±4.66168.80±18.03110.00±17.96182.00±36.7291.03±11.98 | 145.20±28.41104.75±7.20148.40±17.21##78.68±2.25***171.40±16.06102.79±5.71169.80±17.27111.60±18.29179.60±38.3090.14±14.06 |
| T波 | 生理盐水合心爽本发明药物本发明药物本发明药物 | 3ml5mg1.5g3.0g6.0g | 0.030±0.0100.030±0.0070.042±0.0230.036±0.0090.044±0.021 | 0.036±0.0150.034±0.0090.034±0.0050.040±0.0120.038±0.018 | 0.034±0.0110.034±0.0090.032±0.0040.036±0.0090.038±0.013 | 0.032±0.0130.032±0.0080.042±0.0110.036±0.0050.040±0.012 | 0.030±0.0120.030±0.0100.038±0.0040.038±0.0080.034±0.005 | 0.030±0.0100.030±0.0070.040±0.0120.038±0.0080.038±0.004 | 0.034±0.0090.034±0.010.044±0.010.040±0.010.037±0.00 |
注：与对照组比较：*P＜0.05，**P＜0.01，***：P＜0.001；自身药前比较：#P＜0.05，##P＜0.01，###P＜0.001
表31 各给药组对犬标准肢体II导心电图的影响
x±SD
| 指标 | 组别 | 剂量/kg | 药前值变化率 | 药后 | |||||
| 15 | 30 | 45 | 60 | 90 | 120 | ||||
| PR间期 | 生理盐水合心爽本发明药物本发明药物本发明药物 | 3ml5mg1.5g3.0g6.0g | 0.087±0.0060.230±0.3180.084±0.0030.088±0.0050.084±0.005 | 0.088±0.0060.089±0.0110.084±0.0020.088±0.0050.084±0.004 | 0.088±0.0070.095±0.0160.085±0.0050.085±0.0040.084±0.005 | 0.088±0.0070.099±0.0160.087±0.0050.085±0.0040.086±0.007 | 0.089±0.0060.099±0.0150.084±0.0050.231±0.3290.084±0.005 | 0.089±0.0070.098±0.0150.084±0.0050.085±0.0040.084±0.005 | 0.090±0.0060.101±0.010.086±0.010.084±0.000.084±0.00 |
| QRS间期 | 生理盐水合心爽本发明药物本发明药物本发明药物 | 3ml5mg1.5g3.0g6.0g | 0.039±0.0050.036±0.0060.039±0.0040.039±0.0020.040±0.000 | 0.038±0.0050.040±0.0030.042±0.0030.040±0.0030.040±0.000 | 0.038±0.0030.040±0.0020.040±0.0030.039±0.0020.104±0.143 | 0.038±0.0030.039±0.0020.039±0.0020.039±0.0020.039±0.002 | 0.038±0.0040.038±0.0020.041±0.0020.040±0.0010.039±0.002 | 0.037±0.0040.033±0.0040.039±0.0020.040±0.0010.038±0.003 | 0.040±0.0000.038±0.000.040±0.000.039±0.000.038±0.00 |
| QT间期 | 生理盐水合心爽本发明药物本发明药物本发明药物 | 3ml5mg1.5g3.0g6.0g | 0.188±0.0060.185±0.0060.182±0.0070.184±0.0050.184±0.005 | 0.186±0.010#0.186±0.0070.187±0.0230.182±0.0090.187±0.021 | 0.186±0.0080 194±0.0190.185±0.0050.184±0.0060.185±0.006 | 0.186±0.0080.195±0.0200.183±0.0020.184±0.0040.184±0.004 | 0.186±0.0080.195±0.0190.184±0.0050.182±0.0050.184±0.003 | 0.186±0.0090.197±0.0190.185±0.0030.184±0.0060.183±0.004 | 0.186±0.0070.195±0.020.184±0.000.182±0.000.182±0.00 |
结果见表29、30、31。合心爽药后有明显降低血压和减慢心率的作用；本发明药物3.0g/kg组试验犬动脉血压有部分降低，3.0g/kg可减慢动物心率。药后动物标准II心电图PR间期、QRS间期、QT间期及T波等参数均无明显改化。
2、对犬冠脉血流量及冠脉阻力的影响
表32各给药组对犬冠脉流量(ml/100g·min-1)、冠脉阻力(mmHg/ml·100g-1·min-1)
的影响
x±SD
| 指标 | 组别 | 剂量/kg | 药前值变化率 | 药后(min) | |||||
| 15 | 30 | 45 | 60 | 90 | 120 | ||||
| 冠脉血流量 | 生理盐水 | 3ml | 89.34±15.78 | 89.52±18.07 | 89.13±14.09 | 90.52±16.43 | 88.66±16.51 | 85.91±15.89# | 86.85±13.53 |
| n＝5 | 100.83±2.51 | 100.00±5.15 | 100.64±3.21 | 99.90±3.77 | 97.09±3.92 | 97.85±4.76 | |||
| 合心爽 | 5mg | 93.14±6.71 | 100.55±8.27## | 108.65±9.60## | 111.87±8.41## | 116.20±5.91### | 110.04±12.41## | 103.29±12.68# | |
| n＝5 | 108.27±2.40** | 117.58±5.54*** | 121.25±9.33** | 125.58±12.35** | 116.70±13.49* | 109.22±19.14 | |||
| 本发明药物 | 1.5g | 87.07±10.76 | 93.14±13.99# | 96.57±13.34## | 99.09±13.45## | 101.33±15.86## | 96.32±18.16 | 94.28±18.10 | |
| n＝5 | 105.31±2.96* | 109.63±3.37** | 112.47±4.06*** | 113.90±4.56*** | 106.28±3.68** | 104.75±5.32 | |||
| 本发明药物 | 3.0g | 87.49±17.13 | 91.62±15.81# | 93.61±16.53## | 99.87±19.23### | 102.17±18.93## | 97.03±16.56## | 94.75±18.39### | |
| n＝5 | 106.34±2.50** | 107.71±4.90* | 114.05±3.05*** | 116.88±5.99*** | 112.01±5.76** | 108.18±4.08** | |||
| 本发明药物 | 6.0g | 82.20±15.11 | 88.57±16.48## | 94.10±14.61### | 96.84±14.26## | 97.46±16.72## | 93.62±16.09## | 91.90±17.56# | |
| n＝5 | 107.18±1.31** | 115.86±6.22** | 119.17±9.01** | 118.96±8.39** | 114.10±5.03*** | 112.08±9.10* | |||
| 冠脉阻力 | 生理盐水 | 3ml | 1.253±0.346 | 1.271±0.378 | 1.261±0.328 | 1.261±0.331 | 1.274±0.341 | 1.296±0.358 | 1.295±0.339# |
| n＝5 | 100.95±5.29 | 100.95±3.61 | 100.89±6.54 | 101.78±4.91 | 103.44±6.72 | 103.59±3.18 | |||
| 合心爽 | 5mg | 1.785±0.077 | 1.497±0.122### | 1.351±0.096### | 1.330±0.080### | 1.291±0.107### | 1.364±0.144### | 1.477±0.155## | |
| n＝5 | 83.82±4.36*** | 75.75±5.16*** | 74.53±2.73*** | 72.27±3.86*** | 76.32±6.01*** | 82.63±6.26*** | |||
| 本发明药物 | 1.5g | 1.820±0.283 | 1.723±0.301 | 1.626±0.246# | 1.660±0.197# | 1.577±0.288# | 1.670±0.340 | 1.672±0.346# | |
| n＝5 | 94.50±5.16 | 89.47±5.17** | 91.74±5.12* | 86.68±10.29* | 91.27±9.00* | 91.25±6.71** | |||
| 本发明药物 | 3.0g | 2.010±0.354 | 1.897±0.366# | 1.782±0.309# | 1.655±0.328## | 1.589±0.305## | 1.643±0.337### | 1.660±0.331### | |
| n＝5 | 94.19±3.86* | 88.75±5.61** | 82.18±6.44** | 79.00±6.07*** | 81.50±4.67*** | 82.31±2.89*** | |||
| 本发明药物 | 6.0g | 2.011±0.349 | 1.884±0.394# | 1.781±0.317## | 1.695±0.313## | 1.694±0.410## | 1.697±0.382## | 1.726±0.287## | |
| n＝5 | 93.30±3.93* | 88.52±4.79** | 84.17±4.25** | 83.48±6.64** | 83.83±6.38** | 85.96±5.38*** |
注：与对照组比较：*P＜0.05，**P＜0.01，***：P＜0.001；自身药前比较：#P＜0.05，##P＜0.01，###P＜0.001
结果见表32。生理盐水给药前后冠脉血流量、冠脉阻力均无明显变化。本发明药物各给药组药后15min冠脉血流量开始有所增加，45-60min时间段内作用最为明显，6.0g/kg组45和60min时冠脉流量由药前82.20±15.11ml/100g·min-1，分别增加到96.84±14.26和97.46±16.72ml/100g·min-1，增加幅度为19.17±9.01％和18.96±8.39％，与药前及对照组相比有显著性差异(P＜0.01)。同时本发明药物能不同程度的降低冠脉阻力(P＜0.05～0.01)，幅度在20％左右。钙拮抗剂合心爽亦可明显增加冠脉血流量和降低冠脉阻力。
3、对左室收缩力、左室作功的影响
表33各给药组对犬左室收缩力(mm)、左室作功(L·min-1/m2·mmHg)的影响
x±SD
| 指标 | 组别 | 剂量/kg | 药前值变化率 | 药后(min) | |||||
| 15 | 30 | 45 | 60 | 90 | 120 | ||||
| 左室收缩力 | 生理盐水n＝5合心爽n＝5 | 3ml5mg | 22.60±1.5223.00±1.87 | 23.20±2.28102.62±6.8623.80±1.10103.77±5.00 | 22.40±1.5299.24±5.9023.20±1.64101.21±8.00 | 21.60±1.5295.67±5.3623.80±1.92103.61±5.50 | 21.60±1.6795.64±5.3324.20±1.30105.51±5.76 | 21.20±2.1793.67±3.9823.20±2.05100.91±4.71 | 21.60±2.0795.45±3.2223.40±1.67101.97±6.16 |
| 本发明药物n＝5本发明药物n＝5本发明药物n＝5 | 1.5g3.0g6.0g | 22.40±1.1423.20±3.1122.80±3.03 | 22.60±2.07100.88±7.5222.80±2.2898.82±7.9924.40±2.30107.78±9.26 | 22.20±1.3099.25±6.8522.60±1.6798.23±9.3223.60±2.41104.71±14.22 | 23.40±0.89104.55±3.2221.60±2.7093.46±7.9023.80±2.39106.17±18.62 | 22.60±1.67100.91±5.9321.60±2.7093.61±9.8222.80±1.92100.89±9.93 | 21.00±0.7193.91±4.8820.60±1.5289.65±9.8522.80±2.28100.55±7.08 | 20.40±0.8991.14±2.9421.00±2.3590.83±4.8922.00±2.4596.92±6.88 | |
| 左室作功 | 生理盐水n＝5合心爽n＝5本发明药物n＝5本发明药物n＝5本发明药物n＝5 | 3ml5mg1.5g3.0g6.0g | 1.88±0.583.88±1.412.58±0.503.45±0.983.28±0.52 | 1.90±0.57101.26±2.943.78±1.3097.99±7.612.71±0.57104.68±3.413.56±0.91103.79±4.943.52±0.64#107.21±5.26 | 1.89±0.55101.26±7.183.81±1.1899.71±7.212.75±0.55106.49±4.193.55±0.92103.51±4.953.68±0.81111.51±11.52 | 1.89±0.55101.32±9.164.06±1.37105.70±7.882.99±0.65115.92±8.983.65±1.14106.10±13.693.64±0.77110.54±11.69 | 1.87±0.5699.85±6.374.29±1.49111.29±7.172.96±0.54115.19±7.983.55±0.82104.35±9.523.59±0.70109.07±9.75 | 1.79±0.5296.06±6.164.00±1.21104.98±8.002.95±0.56114.51±8.303.36±0.7199.00±9.533.34±0.77101.20±10.93 | 1.83±0.5397.98±5.083.94±1.14104.16±11.562.74±0.50106.63±7.823.21±0.7194.46±6.943.24±0.7398.16±7.34 |
注：与对照组比较：*P＜0.05，**P＜0.01，***：P＜0.001；自身药前比较：#P＜0.05，##P＜0.01，###P＜0.001
结果见表33。各试验组给药后动物左室收缩力和左室作功未见明显变化。
4、对犬左室内压、左室内压最大上升速率的影响
表34 各给药组对犬左室内压(mmHg)、左室压最大上升速率(dp/dtmax)
的影响
x±SD
| 指标 | 组别 | 剂量/kg | 药前值变化率 | 药后(min) | |||||
| 15 | 30 | 45 | 60 | 90 | 120 | ||||
| 左室内压 | 生理盐水 | 3ml | 168.80±12.70 | 163.00±13.96 | 158.00±14.40 | 154.00±15.17 | 155.00±13.11 | 159.00±11.40 | 152.40±8.29 |
| n＝5 | 101.87±12.56 | 95.83±8.85 | 93.28±10.05 | 95.10±12.81 | 97.86±13.47 | 96.19±12.44 | |||
| 合心爽 | 5mg | 168.20±13.39 | 158.00±24.90 | 160.00±20.00 | 165.00±18.03 | 173.00±25.88 | 168.40±23.30 | 167.00±21.73 | |
| n＝5 | 95.24±21.21 | 96.26±18.32 | 98.86±15.23 | 103.94±21.00 | 101.24±20.47 | 100.36±19.55 | |||
| 本发明药物 | 1.5g | 166.40±12.03 | 163.80±12.64 | 161.00±13.42 | 161.00±14.21 | 155.60±16.94 | 151.40±16.73 | 147.00±14.83 | |
| n＝5 | 98.61±6.97 | 96.77±4.06 | 96.84±6.44 | 93.81±11.25 | 91.19±10.14 | 88.61±9.86 | |||
| 本发明药物 | 3.0g | 160.80±11.21 | 163.60±5.90 | 162.00±13.11 | 160.00±15.41 | 152.00±14.40 | 148.60±6.69 | 146.00±5.48 | |
| n＝5 | 101.95±3.95 | 101.22±11.40 | 99.88±11.31 | 94.89±10.53 | 92.82±8.26 | 91.25±8.66 | |||
| 本发明药物 | 6.0g | 154.40±20.90 | 164.40±26.06 | 168.80±29.12 | 164.00±25.35 | 161.00±28.81 | 151.00±31.70 | 148.00±28.64 | |
| n＝5 | 107.10±14.06 | 109.42±11.33 | 106.82±13.63 | 104.76±15.10 | 98.27±17.57 | 96.42±16.36 | |||
| 左室压上升速率 | 生理盐水 | 3ml | 2960.0±151.7 | 2870.0±258.8 | 2850.0±320.2 | 2800.0±308.2 | 2700.0±291.5 | 2700.0±331.7 | 2700.0±244.9 |
| n＝5 | 96.83±4.60 | 96.14±7.50 | 94.42±6.68 | 91.06±6.39 | 91.09±8.39 | 91.21±6.47 | |||
| 合心爽 | 5mg | 2960.0±114.0 | 2960.0±433.6 | 3000.0±524.4 | 3140.0±691.4 | 3260.0±814.2 | 3240.0±743.6 | 3240.0±841.4 | |
| n＝5 | 100.29±17.00 | 101.51±18.48 | 106.05±22.25 | 110.13±26.68 | 109.71±26.23 | 109.69±29.13 | |||
| 本发明药物 | 1.5g | 3020.0±148.3 | 3020.0±286.4 | 2940.0±151.7 | 3040.0±260.8 | 2990.0±368.1 | 2910.0±332.4 | 2860.0±439.3 | |
| n＝5 | 99.89±6.15 | 97.35±1.49 | 100.60±5.84 | 98.82±8.45 | 96.19±7.39 | 94.39±10.66 | |||
| 本发明药物 | 3.0g | 2980.0±44.7 | 3050.0±531.5 | 2940.0±610.7 | 2820.0±507.0 | 2670.0±556.3 | 2500.0±424.3 | 2520.0±460.4 | |
| n＝5 | 102.31±17.39 | 98.62±20.10 | 94.62±16.77 | 89.63±18.71 | 83.93±14.38 | 84.60±15.53 | |||
| 本发明药物 | 6.0g | 2910.0±313.0 | 3020.0±601.7 | 3180.0±597.5 | 3160.0±568.3 | 3080.0±576.2 | 2900.0±519.6 | 2800.0±424.3 | |
| n＝5 | 103.56±14.30 | 109.00±13.66 | 108.50±13.95 | 105.53±12.80 | 99.32±10.30 | 95.89±5.40 |
注：与对照组比较：*P＜0.05，**P＜0.01，***：P＜0.001；自身药前比较：#P＜0.05，##P＜0.01，###＜0.001
结果见表34。本发明药物三个剂量组对左室内压无明显影响。各组动物药后左室内压最大上升速率(dp/dtmax)与对照组比较均无显著性差异。
5、对犬心输出量、心搏出量及总外周阻力的影响
表35 各给药组对犬心输出量(L/min)、心搏出量(ml/beat)及总外周阻力
(mmHg/L·min-1)的影响
x±SD
| 指标 | 组别 | 剂量/kg | 药前值变化率 | 药后(min) | |||||
| 15 | 30 | 45 | 60 | 90 | 120 | ||||
| 心输出量 | 生理盐水n＝5合心爽n＝5本发明药物n＝5本发明药物n＝5本发明药物n＝5 | 3ml5mg1.5g3.0g6.0g | 0.822±0.1741.116±0.4670.798±0.1120.948±0.3071.050±0.127 | 0.824±0.159100.53±1.841.206±0.482#108.68±4.56**0.830±0.121##103.92±1.71*0.992±0.309##104.95±2.29*1.122±0.159#106.67±3.42** | 0.822±0.162100.22±5.321.256±0.493##113.47±3.57**0.858±0.116###107.57±0.79*1.022±0.291##109.03±6.11*1.150±0.185#109.17±6.02* | 0.810±0.14798.99±4.671.302±0.486###118.45±5.80***0.884±0.116###110.91±1.76***1.062±0.314#113.03±8.48*1.164±0.188#110.51±6.88* | 0.810±0.14998.96±3.771.352±0.476###123.92±8.94***0.914±0.094##115.11±5.97***1.058±0.287##113.24±7.95**1.156±0.170#109.88±4.82** | 0.794±0.15596.80±4.021.278±0.440##117.60±10.44**0.912±0.111##114.63±5.03***1.024±0.287#109.39±7.35*1.110±0.140105.75±5.23* | 0.794±0.14397.06±5.251.242±0.418#114.80±13.62*0.868±0.104##109.06±3.22**0.996±0.284#106.27±6.35*1.076±0.163102.27±5.58 |
| 心搏出量 | 生理盐水n＝5合心爽n＝5本发明药物 | 3ml5mg1.5g | 5.865±0.8275.924±1.9824.866±0.952 | 5.871±0.711100.34±3.747.033±2.391##118.64±5.68***5.114±1.110# | 5.826±0.78799.57±7.507.642±2.672##128.68±5.98***5.274±1.112## | 5.703±0.58797.78±7.118.425±2.902##142.09±7.65***5.463±1.194# | 5.623±0.64796.40±8.608.998±2.839##153.00±8.88***5.530±1.026## | 5.535±0.57994.97±8.148.637±2.557###147.35±8.29***5.471±1.142# | 5.500±0.55094.57±10.088.273±2.154###142.56±15.35***5.134±1.025# |
| n＝5本发明药物n＝5本发明药物n＝5 | 3.0g6.0g | 6.090±2.0055.449±0.640 | 104.70±2.506.174±1.904101.99±3.566.037±0.793##110.64±3.50** | 108.15±2.58*6.302±1.762105.03±6.866.312±0.866##115.61±3.91** | 111.95±5.11**6.419±1.865106.88±8.426.409±0.891##117.38±4.02*** | 113.95±4.90**6.337±1.571106.76±12.846.444±0.917#118.18±8.99** | 112.42±5.69**6.056±1.483102.32±14.506.232±1.003114.43±13.18* | 105.57±3.715.841±1.39899.07±16.046.114±0.926112.41±12.96* | |
| 总外周阻力 | 生理盐水n＝5合心爽n＝5本发明药物n＝5本发明药物n＝5本发明药物n＝5 | 3ml5mg1.5g3.0g6.0g | 15162±71013693±514115877±119415741±392112420±1643 | 14692±688397.43±4.8911377±7005#83.34±6.02**15382±695596.93±2.7014811±8169#94.24±2.4611730±596194.38±6.58 | 14504±682796.38±9.0710669±6983##77.71±2.81**14560±7489#92.05±3.3113588±736787.60±7.4811611±587493.46±5.82 | 14959±687799.26±5.7910175±6432#75.79±6.06***14838±756894.09±6.4812974±7359#83.23±5.85**11275±615190.73±9.24 | 14928±707498.79±3.619685±5950#73.38±9.21***13772±836187.36±9.19*12727±7234#81.79±5.91***11309±638390.91±13.07 | 15331±7322101.29±6.8610201±6183#76.95±9.23**13826±8153#87.40±7.93*12994±7459#83.22±7.00**11312±617591.00±11.64 | 15511±7077102.83±8.0310657±633780.39±10.92**14198±7749#89.73±5.29*13129±7425#84.13±5.12**11699±616994.15±6.25 |
注：与对照组比较：*P＜0.05，**P＜0.01，***：P＜0.001；自身药前比较：#P＜0.05，##P＜0.01，###P＜0.001
结果见表35。本发明药物三个剂量组给药后，动物心输出量和心搏出量均有明显增加，同时可降低总外周阻力。
6、对犬动脉血氧含量、静脉血氧含量的影响
表36各给药组对犬动脉血氧含量(g/100ml)、静脉血氧含量(g/100ml)的影响
x±SD
| 指标 | 组别 | 剂量/kg | 药前值变化率 | 药后(min) | ||||
| 15 | 30 | 60 | 90 | 120 | ||||
| 动脉 | 生理盐水 | 3ml | 9.24±3.21 | 9.50±3.45 | 9.00±3.23 | 9.42±2.82 | 9.22±3.21 | 9.30±2.78 |
| 血氧含量 | n＝5合心爽n＝5本发明药物n＝5本发明药物n＝5本发明药物n＝5 | 5mg1.5g3.0g6.0g | 7.68±1.199.34±2.678.28±1.868.10±2.73 | 103.18±17.826.98±1.2590.92±7.949.20±2.53100.30±17.538.54±2.87103.06±24.058.04±2.8299.32±8.93 | 99.58±20.077.82±1.54101.41±4.3610.06±3.90109.94±35.319.26±1.31115.54±28.009.00±2.63#112.23±9.24 | 103.82±10.187.60±1.7098.40±8.239.60±3.97104.15±34.668.72±1.21110.33±34.098.64±2.23108.53±12.02 | 100.01±5.347.36±1.9794.90±11.459.84±3.97106.14±32.919.00±1.17114.47±35.759.06±3.57110.88±11.69 | 102.00±5.127.82±1.44101.64±6.889.65±3.28104.48±25.969.08±1.69116.33±43.248.36±2.26105.57±20.00 |
| 静脉血氧含量 | 生理盐水n＝5合心爽n＝5本发明药物n＝5本发明药物n＝5本发明药物n＝5 | 3ml5mg1.5g3.0g6.0g | 3.92±1.362.74±0.303.74±1.233.76±1.413.14±1.35 | 4.06±1.47103.24±8.223.56±0.59132.59±32.884.08±1.68106.96±22.574.02±1.66107.38±13.214.64±2.27160.29±58.52 | 4.10±1.54103.90±18.493.66±0.62135.37±31.584.16±1.39111.02±18.964.04±1.24110.45±13.235.62±2.99193.81±75.03* | 3.46±1.1890.94±23.494.04±0.86#148.16±31.62*4.18±1.58110.49±16.024.20±0.93119.21±28.605.66±2.18#204.28±85.61* | 3.50±1.3090.88±21.674.08±1.07#149.74±39.92*4.04±1.80104.52±17.864.36±1.02125.24±36.995.32±1.99#192.76±85.13* | 3.64±0.8396.80±19.524.18±1.00155.74±51.55*4.22±1.68111.40±24.294.18±1.31121.90±48.465.18±2.25#182.85±71.42* |
注：与对照组比较：*P＜0.05，**P＜0.01，***：P＜0.001；自身药前比较：#P＜0.05，##P＜0.01，###P＜0.001
结果见表36。本发明药物各动物药后，与药前比较动脉血氧含量无明显变化。合心爽组动物冠状静脉窦血氧含量均明显增加，与生理盐水对照组比较均有明显差异(P＜0.05-0.001)。本发明药物6.0g/kg组动物药后，冠状静脉窦血氧含量明显升高。
7、对犬心肌耗氧量、耗氧指数及氧利用率的影响
表37各给药组对犬心肌耗氧量(ml/100g·min-1)、氧利用率(％)及耗氧指数
(beat/min·mmHg)的影响
x±SD
| 指标 | 组别 | 剂量/kg | 药前值变化率 | 药后(min) | ||||
| 15 | 30 | 60 | 90 | 120 | ||||
| 心肌耗氧量 | 生理盐水n＝5合心爽n＝5本发明药物n＝5本发明药物n＝5本发明药物n＝5 | 3ml5mg1.5g3.0g6.0g | 4.63±1.594.59±1.185.00±2.423.94±1.413.89±1.00 | 4.55±1.8099.93±32.193.44±1.01##74.77±8.444.84±2.3499.10±22.804.29±2.26107.74±43.332.92±0.6179.77±26.43 | 4.29± 2.4395.77±43.774.52±1.3997.93±13.235.56±2.50121.78±57.424.77±1.58125.88±46.763.19±0.8490.70±45.19 | 5.15±1.90111.18±7.974.11±1.9186.91±27.285.34±2.22117.64±51.634.51±1.21126.67±56.912.82±0.7580.53±41.39 | 4.78±2.05101.17±13.003.61±1.65#76.32±19.59*5.54±2.43118.09±49.234.33±1.06123.50±52.163.31±0.7689.20±27.84 | 4.80±1.92102.23±9.933.75±0.6183.60±13.55*5.12±2.50106.03±43.664.34±1.49126.36±64.192.89±1.0484.00±53.67 |
| 氧利用率 | 生理盐水n＝5合心爽n＝5本发明药物n＝5本发明药物 | 3ml5mg1.5g3.0g | 57.09±7.0263.56±6.8958.84±10.8554.90±12.74 | 55.14±14.5995.54±17.0648.61±7.28#76.87±12.2655.09±15.7892.48±11.0652.73±11.73 | 52.10±20.1191.52±32.1552.60±8.11#82.92±11.3557.19±12.6397.56±18.0555.13±16.75 | 62.36±11.75108.67±11.0145.33±15.49#70.60±21.84**55.68±9.2395.52±14.9451.06±11.82 | 60.67±12.96105.46±13.4343.77±12.27##68.33±16.25**58.58±12.1499.85±15.3550.76±13.06 | 59.18±11.37103.10±11.4646.84±4.11#74.62±11.96**55.25±17.3593.48±25.5552.17±17.94 |
| n＝5本发明药物n＝5 | 6.0g | 61.17±14.96 | 97.46±18.0243.75±11.18#73.65±20.34 | 99.55±13.6940.27±13.9869.36±30.82 | 94.85±17.9935.65±12.23#61.98±30.20* | 93.85±20.3441.03±4.89#69.53±15.67** | 96.29±31.1339.29±12.7468.24±32.08 | |
| 耗氧指数 | 生理盐水n＝5合心爽n＝5本发明药物n＝5本发明药物n＝5本发明药物n＝5 | 3ml5mg1.5g3.0g6.0g | 158.93±67.90306.90±43.98259.59±34.81268.64±30.40314.58±59.42 | 159.82±66.74100.99±4.62254.72±42.70###82.86±4.35***259.81±38.5199.97±2.52273.52±32.39101.80±3.39307.14±71.3796.96±5.48 | 161.06±66.65101.80±6.06238.72±36.64##77.89±5.68***255.75±36.5098.54±4.28264.65±20.3998.89±5.23306.95±81.2596.42±9.64 | 166.25±76.03103.84±5.88223.72±30.11###72.97±1.15***262.66±39.46101.24±8.18263.02±18.3399.04±14.36297.14±87.2792.99±12.60 | 161.23±69.89101.46±6.26219.14±31.27###71.49±3.30***264.92±41.46102.19±10.57261.82±30.3198.67±17.56289.66±98.9489.97±16.56 | 165.30±70.08104.18±8.43224.81±32.53###73.31±3.34***262.41±38.43101.34±10.38258.87±25.2797.58±16.44284.86±91.8688.71±14.46 |
注：与对照组比较：*P＜0.05，**P＜0.01，***：P＜0.001；自身药前比较：#P＜0.05，##P＜0.01，###P＜0.001
结果见表37。阳性对照药合心爽经十二指肠给药后，心肌耗氧量、耗氧指数和氧利用率均明显降低；本发明药物6.0g/kg组动物心肌耗氧量有所降低，60-90min过程中可降低氧利用率。
试验结果显示：本发明药物可明显扩张冠脉血管及外周血管，增加冠脉流量和心输出量，降低冠脉阻力和总外周阻力；改善左室作功，调整心脏血管的顺应性，并可改善心肌氧代谢，降低心肌耗氧量及心肌氧利用率，对心血管系统起到调整和改善作用。
(试验例8)本发明药物的毒性
试验材料：提取10g生药/克本发明药物清膏。
一、急性毒性试验
根据中药新药研究的有关规定，对融斑通脉颗粒进行了小鼠急性毒性试验观察，因无法测出LD50，故进行了最大给药量的测定。小鼠灌胃给药，累积剂量为350g生药/kg，是临床用药量的188.5倍。动物未发现不良反应及死亡。
二、长期毒性试验
试验方法：取Wistar种大鼠，雌雄各半，体重87.14±7.89g，随机分为四组，雌雄各半。
本发明药物临床用量130g生药/日/人，按70kg体重计算临床用量为1.857g生药/kg。对照组，灌服同体积常水；本发明药物大剂量组94g生药/kg；中剂量组47g生药/kg；小剂量组23.5g生药/kg(分别为临床用量的50、25、12.5倍)。连续给药26周(于给药12周及26周及停药2周时各处死1/3动物进行观察)。每周称体重并调整药量。每月连续称饲料一周，计算大鼠100g体重每日平均摄食量。
一)检测项目及方法
每日观察动物给药后的反应，包括精神状态、一般行为、运动功能、呼吸状态、毛色、摄食、二便、耳鼻眼等有无异常分泌物等。于给药3个月(12周)时，各组动物取10只，雌雄各半，戊巴比妥钠麻醉，用XQ-2型心电图仪记录标准II导联心电图，定标电压1mv＝15mm，计算PR间期、QRS间期、QT间期、T波波幅、心率等指标。腹主动脉取血，应用6318K型全自动血球计数仪测定血红蛋白(HGB)、红细胞总数(RBC)、白细胞总数(WBC)及分类、血小板(PLT)等血液学指标；测定凝血时间，分离血清，应用RA-1000型全自动生化分析仪测定天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素氮(BUN)、肌酐(Crea)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALb)、血糖(GLU)、总胆红素(T-Bili)、总胆固醇(T-CHO)等十项指标(试剂为中生生物工程高技术公司产品，批号020201)；解剖取心、肝、脾、肺、肾、胃、十二指肠、大肠、脑、垂体、甲状腺、胸腺、胰腺、肾上腺、子宫、卵巢、睾丸、前列腺、胫骨做病理学检查，其中对心、肝、脾、肺、肾、脑、垂体、子宫、卵巢、睾丸称重，计算脏器指数。所获得的实验结果均进行统计学处理(t检验)。各组继续给药至26周，每组取10只同前处理。各组动物，于停药2周后再取10只同前处理，观察药物的毒性反应、可逆程度及可能出现的延迟性毒性反应。
实验结果显示：
1、本发明药物对动物一般状况及体重的影响
动物一般状况：连续给药26周及停药2周后，各组动物活动及精神状态良好，给药期间动物二便正常，毛色白有光泽，未出现中毒性死亡。对体重的影响：给药三个月时大剂量组雄性动物体重与对照组比较有所下降(P＜0.05)，三个月后体重变化与对照组比较无明显差异。中、小剂量组与对照组比较亦无明显差异。
表38 给药前后各组雄性大鼠体重 (
X±SD)
| 给药时间 | n | 组 别 | ||||
| 对照组 | 小剂量组 | 中剂量组 | 大剂量组 | |||
| 药前 | 15 | 88.60±6.71 | 91.13±7.74 | 92.73±9.72 | 90.87±8.48 | |
| 药后 | 1周2周3周4周5周6周7周8周9周10周11周12周13周14周15周16周17周18周19周20周21周22周 | 15151515151515151515151510101010101010101010 | 133.27±8.76174.87±8.37219.73±10.64253.07±17.58279.13±17.06305.40±19.51329.27±25.91347.27±27.97362.93±25.87377.33±26.70388.67±29.39399.07±32.54407.50±33.01416.00±33.43423.00±35.67429.10±37.76432.00±38.48437.00±39.81443.90±39.22451.10±39.89451.30±26.85455.90±23.30 | 136.93±9.88176.07±11.96223.13±11.77253.33±18.40283.80±16.78308.87±16.26338.07±22.20353.53±22.49368.07±22.79382.13±23.88394.80±25.70406.33±27.39419.90±31.13431.10±31.67440.70±31.77450.40±32.38453.70±33.16456.50±34.39461.30±33.94467.00±34.80474.70±35.23483.70±34.32 | 136.80±11.23174.40±15.95226.87±15.53260.87±21.13291.93±22.39316.07±24.21344.00±31.15362.67±36.11369.73±33.98377.53±31.71390.67±33.43403.47±34.31426.50±35.68430.20±28.62437.60±31.45444.50±35.47446.50±33.03449.10±31.37456.80±32.88464.70±35.11470.70±34.24478.20±36.43 | 135.40±10.02172.20±12.50220.67±14.40250.47±20.78281.87±18.77300.53±19.10323.93±24.64340.07±24.22347.07±23.40356.73±27.27367.27±30.33374.73±31.66386.20±32.17399.40±35.35407.70±41.93415.00±45.48418.10±38.71420.80±33.09424.20±40.06427.80±45.39449.70±36.46450.50±36.37 |
| 23周24周25周26周停2周 | 101010105 | 460.90±22.98467.30±23.59470.30±23.39484.20±40.94443.40±30.77 | 485.00±32.88487.00±32.49497.10±33.86506.70±35.58456.60±25.43 | 478.90±35.28480.00±36.31491.10±37.39501.70±38.95475.80±44.68 | 445.90±37.23443.20±38.94456.00±43.62467.50±51.13467.40±25.64 |
表39 给药前后各组雌性大鼠体重 (
X±SD)
| 给药时间 | n | 组 别 | ||||
| 对照组 | 小剂量组 | 中剂量组 | 大剂量组 | |||
| 药前 | 15 | 84.40±8.88 | 84.13±6.24 | 81.60±7.65 | 83.67±7.72 | |
| 药后 | 1周2周3周4周5周6周7周8周9周10周11周12周13周14周15周16周17周18周19周20周 | 1515151515151515151515151010101010101010 | 114.50±9.71135.75±11.01152.19±11.17165.94±12.28177.63±11.90188.44±11.69200.00±12.59209.25±16.24216.69±15.03224.19±14.99228.13±16.19232.00±17.83238.80±18.41242.40±18.33244.90±18.15246.90±19.41250.60±19.71254.60±20.07254.40±21.09255.00±22.25 | 119.67±6.07142.60±6.25162.93±9.48175.80±11.88192.00±15.80201.80±19.41214.20±20.28224.40±20.99229.00±21.75233.47±21.61238.47±22.91244.00±24.35246.90±25.06248.80±25.62254.10±26.81259.30±27.49259.90±28.77262.10±29.04262.80±28.60263.50±28.36 | 117.33±7.72139.87±9.20159.40±8.89173.07±9.37187.87±11.39194.47±11.30202.27±13.06212.73±15.05217.20±16.22222.80±17.52227.07±16.64231.87±14.00231.10±9.80236.30±12.98236.30±10.86236.40±14.28239.50±14.23242.10±15.31243.10±14.70245.40±14.81 | 117.20±7.46138.80±9.26160.20±9.82174.47±11.45188.13±11.96197.00±11.62207.13±13.51213.33±11.75215.00±11.90218.13±13.41221.93±14.10227.20±15.28230.70±16.09235.00±17.68239.10±16.41242.60±15.15244.60±15.25246.70±16.53249.60±17.02252.30±17.96 |
| 21周22周23周24周25周26周停2周 | 1010101010105 | 261.30±19.92267.10±18.53274.50±20.77280.40±23.24278.80±22.23274.50±21.42260.40±19.77 | 270.10±29.12272.60±31.50282.10±34.74287.30±38.16286.30±36.40285.50±34.87270.60±30.63 | 252.20±13.19258.30±12.13260.30±14.17261.60±16.80261.40±17.03261.20±17.69252.80±105.16 | 262.30±18.56264.30±18.25266.80±18.27269.20±18.12269.40±17.80269.70±17.84262.60±19.35 |
表40 给药前后各组雄性大鼠体重差值的比较 (
X±SD)
| 给药时间 | n | 组 别 | ||||
| 对照组 | 小剂量组 | 中剂量组 | 大剂量组 | |||
| 药后 | 1周2周3周4周5周6周7周8周9周10周11周12周13周14周15周16周17周18周19周 | 15151515151515151515151510101010101010 | 44.67±7.4186.27±9.15131.13±9.78164.47±17.70190.53±17.17216.80±20.52240.67±26.42258.67±28.45274.33±26.86288.73±27.27300.07±30.09310.47±33.11319.00±33.15327.50±33.81334.50±35.74340.60±37.85343.50±38.69348.50±40.70355.40±40.15 | 45.80±5.6184.93±7.43132.00±8.98162.20±15.94192.67±14.87217.73±14.29246.93±20.44262.40±20.29276.93±21.71291.00±23.60303.67±25.25315.20±26.63327.50±28.41338.70±29.00348.30±29.24358.00±29.82361.30±30.89364.10±32.01368.90±31.19 | 44.07±16.0481.67±21.05134.13±20.09168.13±24.88189.33±56.48223.33±27.89251.27±34.60269.93±39.23277.00±37.10284.80±35.16297.93±36.79310.73±37.75330.30±34.79334.00±29.34341.40±32.05348.30±35.96350.30±33.63352.90±32.10360.60±33.52 | 44.53±3.5881.33±9.55129.80±8.49159.60±16.27191.00±14.17209.67±15.02233.07±20.51249.20±20.32256.20±20.79*265.87±24.22*276.40±28.13*283.87±29.28*294.40±31.03307.60±34.19315.90±40.82323.20±44.28326.30±37.30329.00±31.27332.40±39.10 |
| 20周21周22周23周24周25周26周停2周 | 101010101010105 | 362.60±41.00362.80±28.06367.40±25.25372.40±24.47378.80±25.15381.80±25.29395.70±42.53352.60±30.19 | 374.60±31.82382.30±31.93391.30±30.99392.60±29.56394.60±29.21404.70±31.84414.30±34.32363.60±17.50 | 368.50±35.96374.50±35.51382.00±37.84382.70±36.39383.80±36.89394.90±38.07405.50±40.01378.00±44.65 | 336.00±44.92357.90±35.45358.70±35.38354.10±36.20351.40±37.94364.20±43.58375.70±51.56372.20±29.71 |
注：差值＝药后体重-药前体重 *：与对照组比较P＜0.05
表41 给药前后各组雌性大鼠体重差值的比较 (
X±SD)
| 给药时间 | n | 组 别 | ||||
| 对照组 | 小剂量组 | 中剂量组 | 大剂量组 | |||
| 药后 | 1周2周3周4周5周6周7周8周9周10周11周12周13周14周15周16周17周18周 | 151515151515151515151515101010101010 | 35.27±4.8856.73±6.0173.33±5.1686.87±7.0498.20±7.51108.80±8.48120.60±11.31129.53±14.29136.93±13.93144.73±13.89148.47±15.82152.27±17.85155.40±20.32159.00±20.12161.50±20.11163.50±21.54167.20±22.08171.20±22.70 | 35.53±5.9358.47±8.1778.80±11.0591.67±13.65107.87±18.24117.67±21.28130.07±22.53140.27±23.66144.87±24.52149.33±24.35154.33±25.50159.87±26.61161.10±28.71163.00±29.30168.30±30.63173.50±31.13174.10±32.33176.30±32.42 | 35.73±4.4658.27±5.6277.80±8.3091.47±9.83106.27±12.10*112.87±11.89120.67±13.04131.13±15.72135.60±16.53141.20±18.01145.47±17.45150.27±15.60147.80±10.92153.00±14.61153.00±10.72153.10±12.73156.20±12.02158.80±12.20 | 33.53±4.8555.13±7.3976.53±9.0490.80±10.97104.47±11.92113.33±12.22123.47±14.33129.67±13.46131.33±14.54134.47±16.22138.27±17.14143.53±18.06146.60±17.47150.90±19.43155.00±18.06158.50±16.66160.50±16.55162.60±17.65 |
| 19周20周21周22周23周24周25周26周停2周 | 10101010101010105 | 171.00±23.72171.60±24.54177.90±22.20183.70±20.46191.10±21.93197.00±24.02195.40±23.30191.10±22.29178.00±17.10 | 177.00±32.08177.70±31.90184.30±32.50190.80±34.56196.30±37.94201.50±41.40200.50±39.59199.70±37.97187.00±36.69 | 159.80±12.23162.10±13.30168.90±12.16175.00±12.38177.00±13.22178.30±15.01*178.10±15.97177.90±16.97169.40±18.47 | 165.50±18.12168.20±18.81178.20±18.02180.20±17.67182.70±17.85185.10±17.82185.30±17.30185.60±17.09180.40±17.44 |
注：差值＝药后体重-药前体重 *与对照组比较P＜0.05
2、本发明药物对动物摄食量的影响
表42给药不同时间各组动物摄食量的比较(n＝36，g/100g体重/天，
X±SD)
分组 性别 给药4周 给药8周 给药12周
雄 9.53±0.47 5.95±0.69 4.47±0.06
对照组
雌 8.83±0.82 6.84±0.73 5.62±0.28
雄 9.15±0.90 6.15±0.62 4.82±0.75
小剂量组
雌 9.22±1.13 6.46±0.32 5.40±0.15
雄 8.01±1.29 5.43±0.42 4.23±0.28
中剂量组
雌 8.67±1.37 7.08±0.49 5.06±0.42
雄 8.51±0.82 5.47±0.81 4.30±0.51
大剂量组
雌 9.15±2.13 5.91±0.70 5.21±0.51
表43.给药不同时间各组动物摄食量的比较(n＝24，g/100g体重/天，
X±SD)
分组 性别 给药16周 给药20周 给药24周
雄 4.55±0.14 4.45±0.05 3.47±0.08
对照组
雌 5.59±0.01 4.62±0.16 4.97±0.06
雄 4.44±0.21 4.38±0.10 3.55±0.14
小剂量组
雌 5.46±0.52 4.77±0.40 4.80±0.59
雄 4.39±0.23 4.32±0.33 3.30±0.10
中剂量组
雌 5.41±0.18 4.50±0.62 4.94±0.21
大剂量组
雄 4.44±0.13 4.53±0.59 3.74±0.60
雌 5.48±0.56 4.26±0.21 4.45±1.07
实验结果表明，在给药4、8、12、16、20、24周，各剂量组摄食量与对照组比较无显著性差异。
3、本发明药物对凝血时间的影响
表44 各组凝血时间的比较 (
X±SD)
| 组别 n 凝血时间(s) | |
| 给药3个月 | 对照组 10 247.10±14.95小剂量组 10 235.20±20.37中剂量组 10 268.30±29.71大剂量组 10 251.60±9.40 |
| 给药6个月 | 对照组 10 222.30±17.04小剂量组 10 227.30±54.46中剂量组 10 215.20±26.19大剂量组 10 216.00±21.16 |
| 停药2周 | 对照组 10 219.00±23.97小剂量组 10 221.00±15.75中剂量组 10 214.60±50.07大剂量组 10 212.30±21.55 |
凝血时间测定结果表明，给药3个月、6个月及停药2周各给药组凝血时间与对照组比较均无明显差异。
4、本发明药物对血液学指标的影响
表45 各组血液学指标的比较(3个月) (n＝10，
X±SD)
RBC HGB PLT WBC 分类(％)
分组
(1012/L) (g/L) (109/L) (109/L) 粒细胞(GR) 淋巴细胞(LY) 单核细胞(MO)
对照组 7.65±0.71 128.20±7.25 905.70±116.37 4.62±1.19 17.17±5.86 81.62±5.94 1.21±0.39
小剂量 7.59±0.46 126.20±5.09 881.10±141.07 4.25±0.72 13.61±3.96 85.43±4.01 0.96±0.28
中剂量 7.95±0.30 127.30±5.46 879.10±91.36 4.75±1.06 17.79±5.58 81.12±5.63 1.09±0.44
大剂量 8.16±0.30 131.22±3.38 879.00±168.97 4.93±1.41 15.90±4.14 83.18±4.31 0.92±0.27
表46 各组血液学指标的比较(6个月) (n＝10，
X±SD)
分组 RBC HGB PLT WBC 分类(％)
(1012/L) (g/L) (109/L) (109/L) 粒细胞(GR) 淋巴细胞(LY) 单核细胞(MO)
对照组 7.72±0.56 129.60±5.38 815.00±69.11 4.02±0.86 18.93±6.57 80.09±6.73 0.98±0.19
小剂量 7.80±0.47 130.30±5.56 846.60±58.89 3.85±0.67 28.74±7.07** 69.82±7.49** 1.44±0.58*
中剂量 7.72±0.62 128.90±6.85 832.30±60.35 4.06±1.12 22.91±7.93 75.81±8.13 1.28±0.28
大剂量 7.44±0.67 128.00±6.16 831.60±79.70 4.14±1.29 20.09±3.79 78.87±3.89 1.04±0.20
*与对照组比较P＜0.05 **P＜0.01
表47 各组血液学指标的比较(停药2周) (n＝10，
X±SD)
RBC HGB PLT WBC 分类(％)
分组
(1012/L) (g/L) (109/L) (109/L) 粒细胞(GR) 淋巴细胞(LY) 单核细胞(MO)
对照组 7.50±0.76 126.50±7.35 766.70±89.79 4.08±1.44 25.26±6.64 73.51±6.84 1.23±0.25
小剂量 7.70±0.32 129.60±3.37 778.10±45.83 3.54±0.72 29.37±6.08 69.47±6.24 1.16±0.24
中剂量 7.53±0.37 127.00±6.16 757.30±73.68 3.68±0.95 30.36±5.30 68.39±5.42 1.25±0.17
大剂量 7.52±0.59 126.60±10.28 798.70±68.41 3.65±0.82 28.95±5.99 69.84±6.05 1.21±0.22
血液指标测定结果表明，给药6个月小剂量组白细胞分类与对照组比较有差异，但总数无显著差异且均在正常范围之内。其他各组各项指标与对照组比较无统计学差异。停药2周后各项指标各组间比较无显著差异。
5、本发明药物对血液生化指标的影响
表48 各组生化指标的比较(3个月) (n＝10，
X±SD)
ALT AST ALP BUN Crea
分组
(IU/L) (IU/L) (IU/L) (mMol/L) (uMol/L)
对照组 36.40±18.22 125.20±31.65 54.40±18.36 6.76±2.50 102.61±11.04
小剂量组 37.70±18.42 131.80±16.54 57.40±25.29 7.53±2.16 106.19±12.38
中剂量组 33.50±13.43 116.30±13.27 66.20±25.55 6.79±2.70 111.70±11.97
大剂量组 35.80±8.11 105.80±21.47 59.20±23.38 7.88±3.86 107.67±10.31
表49 各组生化指标的比较(3个月) (n＝10，
X±SD)
Chol GLU T-Bili TP Alb
分组
(mMol/L) (mMol/L) (uMol/L) (g/L) (g/L)
对照组 1.10±0.12 7.83±1.86 5.84±3.03 55.55±5.12 31.21±3.12
小剂量组 1.25±0.24 8.33±2.29 4.88±1.24 58.85±8.30 33.27±4.93
中剂量组 1.10±0.16 7.79±1.20 4.84±1.88 58.53±5.78 32.23±3.13
大剂量组 1.15±0.15 7.31±1.43 6.26±3.00 54.80±4.48 30.82±2.35
表50 各组生化指标的比较 (6个月) (n＝10，
X±SD)
ALT AST ALP BUN Crea分组
(IU/L) (IU/L) (IU/L) (mMol/L) (uMol/L)
对照组 36.70±9.21 102.30±28.08 38.40±20.53 7.02±1.29 108.79±8.77
小剂量组 67.50±57.39 141.10±70.25 44.70±20.06 6.11±0.76 114.01±17.91
中剂量组 45.40±29.00 131.40±45.59 42.70±20.70 6.44±1.92 120.68±18.74
大剂量组 37.70±8.82 129.50±34.51 46.00±26.47 6.43±1.13 117.36±13.50
表51 各组生化指标的比较(6个月) (n＝10，
X±SD)
Chol GLU T-Bili TP Alb
分组
(mMol/L) (mMol/L) (uMol/L) (g/L) (g/L)
对照组 1.30±0.15 7.92±1.13 6.27±2.74 55.72±6.32 30.16±3.78
小剂量组 1.34±0.34 9.25±1.86 6.82±3.69 59.96±9.20 32.66±5.34
中剂量组 1.44±0.31 9.04±1.94 8.28±4.35 61.58±11.62 33.51±6.50
大剂量组 1.45±0.21 8.98±1.54 6.52±1.82 60.41±7.34 32.85±4.54
表52 各组生化指标的比较 (停药2周) (n＝10，
X±SD)
ALT AST ALP BUN Crea
分组
(IU/L) (IU/L) (IU/L) (mMol/L) (uMol/L)
对照组 47.10±20.42 116.50±24.67 55.90±25.06 6.38±2.07 123.49±11.14
小剂量组 35.50±8.81 100.00±12.81 42.90±20.46 7.95±1.31 117.47±18.53
中剂量组 37.70±13.12 104.10±30.74 40.90±19.32 6.03±1.64 108.71±18.98
大剂量组 43.60±17.14 119.40±33.09 36.20±17.73 6.98±1.93 109.18±38.28
表53 各组生化指标的比较(停药2周) (n＝10，
X±SD)
分组 Chol GLU T-Bili TP Alb
(mMol/L) (mMol/L) (uMol/L) (g/L) (g/L)
对照组 1.45±0.18 9.64±1.68 5.56±2.70 65.39±7.41 34.83±4.53
小剂量组 1.42±0.27 10.73±2.44 6.07±3.41 63.44±8.31 34.25±4.82
中剂量组 1.32±0.25 9.85±1.74 5.22±1.40 59.46±7.80 32.32±4.50
大剂量组 1.23±0.17 8.43±2.24 5.17±2.40 60.96±11.16 32.92±6.71
10项血液生化测定结果表明：各给药组3个月、6 个月及停药2周各项指标与对照组比较均无明显差异。
6、本发明药物对心电图的影响
表54 各组心电图的比较(3个月) (n＝10，
X±SD)
HR PR间期 QRS间期 QT间期 T波
分组
(beat/min) (s) (s) (s) (mv)
对照组 402.00±31.20 0.048±0.008 0.016±0.003 0.067±0.016 0.075±0.026
小剂量组 406.00±14.30 0.048±0.010 0.017±0.003 0.068±0.015 0.062±0.024
中剂量组 406.00±17.76 0.048±0.008 0.016±0.003 0.080±0.020 0.064±0.024
大剂量组 412.00±22.01 0.049±0.010 0.016±0.003 0.071±0.020 0.063±0.024
表55 各组心电图的比较(6个月) (n＝10，
X±SD)
HR PR间期 QRS间期 QT间期 T波
分组
(beat/min) (s) (s) (s) (mv)
对照组 410.00±18.86 0.052±0.010 0.016±0.003 0.073±0.013 0.068±0.026
小剂量组 402.00±18.74 0.049±0.010 0.016±0.002 0.073±0.013 0.070±0.028
中剂量组 402.00±22.01 0.051±0.010 0.016±0.002 0.077±0.014 0.069±0.025
大剂量组 397.00±20.03 0.050±0.011 0.016±0.003 0.070±0.018 0.068±0.026
表56 各组心电图的比较(停药2周) (n＝10，
X±SD)
HR PR间期 QRS间期 QT间期 T波
分组
(beat/min) (s) (s) (s) (mv)
对照组 374.00±47.19 0.048±0.008 0.016±0.003 0.078±0.021 0.080±0.019
小剂量组 381.00±37.25 0.048±0.008 0.016±0.003 0.086±0.020 0.074±0.028
中剂量组 382.00±44.17 0.052±0.008 0.016±0.003 0.076±0.014 0.083±0.026
大剂量组 367.00±34.66 0.052±0.008 0.015±0.003 0.089±0.019 0.062±0.024
本发明药物三个剂量组给药3个月、6个月及停药2周各组标准II导联心电图PR间期、QRS间期、QT间期、T波波幅、心率等指标与对照组比较均无显著性差异。
7、本发明药物对各组动物脏器指数的影响
表57 各组脏器指数的比较(3个月)(g/100g体重，n＝10，
X±SD)
分组 心 肝 脾 肺 肾
对照组 0.272±0.032 2.691±0.289 0.186±0.034 0.506±0.101 0.316±0.039
小剂量组 0.272±0.029 2.578±0.160 0.170±0.021 0.449±0.043 0.331±0.044
中剂量组 0.253±0.017 2.495±0.126 0.172±0.018 0.431±0.056 0.287±0.030
大剂量组 0.260±0.024 2.544±0.158 0.173±0.024 0.449±0.067 0.290±0.038
表58 各组脏器指数的比较(3个月)(g/100g体重，n＝10，
X±SD)
分组 脑 垂体 肾上腺 睾丸 子宫 卵巢
对照组 0.444±0.109 0.002±0.001 0.020±0.006 0.467±0.051 0.256±0.069 0.035±0.007
小剂量组 0.443±0.107 0.003±0.001 0.016±0.006 0.438±0.040 0.193±0.087 0.032±0.008
中剂量组 0.430±0.098 0.003±0.001 0.017±0.007 0.426±0.052 0.194±0.029 0.032±0.008
大剂量组 0.448±0.110 0.003±0.001 0.016±0.005 0.439±0.035 0.182±0.047 0.040±0.008
表59 各组脏器指数的比较(6个月)(g/100g体重，n＝10，
X±SD)
分组 心 肝 脾 肺 肾
对照组 0.273±0.047 2.586±0.320 0.170±0.038 0.423±0.065 0.314±0.048
小剂量组 0.257±0.037 2.456±0.234 0.150±0.021 0.379±0.070 0.276±0.036
中剂量组 0.295±0.049 2.516±0.296 0.183±0.051 0.386±0.136 0.278±0.035
大剂量组 0.282±0.035 2.559±0.325 0.179±0.051 0.401±0.098 0.296±0.046
表60 各组脏器指数的比较(6个月)(g/100g体重，n＝10，
X±SD)
分组 脑 垂体 肾上腺 睾丸 子宫 卵巢
对照组 0.396±0.102 0.003±0.001 0.017±0.009 0.385±0.059 0.203±0.046 0.027±0.010
小剂量组 0.371±0.109 0.002±0.001 0.015±0.008 0.288±0.095 0.159±0.029 0.022±0.014
中剂量组 0.364±0.102 0.004±0.004 0.013±0.008 0.365±0.021 0.208±0.045 0.022±0.006
大剂量组 0.399±0.109 0.003±0.001 0.015±0.007 0.379±0.032 0.197±0.018 0.025±0.006
表61 各组脏器指数的比较(停药2周)(g/100g体重，n＝10，
X±SD)
分组 心 肝 脾 肺 肾
对照组 0.321±0.057 2.784±0.519 0.199±0.039 0.459±0.054 0.319±0.075
小剂量组 0.277±0.038 2.482±0.310 0.174±0.029 0.422±0.048 0.284±0.055
中剂量组 0.279±0.039 2.417±0.224 0.177±0.035 0.418±0.073 0.278±0.048
大剂量组 0.287±0.028 2.455±0.206 0.182±0.057 0.414±0.093 0.279±0.038
表62 各组脏器指数的比较(停药2周)(g/100g体重，n＝10，
X±SD)
分组 脑 垂体 肾上腺 睾丸 子宫 卵巢
对照组 0.461±0.123 0.003±0.001 0.017±0.008 0.347±0.160 0.210±0.034 0.032±0.021
小剂量组 0.378±0.108 0.003±0.001 0.014±0.007 0.351±0.124 0.200±0.034 0.024±0.007
中剂量组 0.409±0.119 0.003±0.001 0.014±0.006 0.324±0.118 0.173±0.024 0.018±0.011
大剂量组 0.400±0.105 0.005±0.005 0.015±0.009 0.391±0.024 0.179±0.029 0.022±0.010
解剖大体观察各组动物脏器未发现异常改变，各给药组脏器指数与对照组比较无显著性差异。
8、大鼠长期毒性实验病理检查
实验动物脏器病理检查报告
实验药物：本发明药物
实验分组：对照组、小剂量组、中剂量组、大剂量组。
组织学制片：10％福尔马林固定，常规取材、脱水、浸蜡、包埋、切片、HE染色。
送检脏器：脑、心、肝、脾、肺、肾、胃、小肠、大肠、垂体、甲状腺、胸腺、胰腺、肾上腺、子宫、卵巢、睾丸、前列腺。3个月、6个月及停药2周三批组织。
大体标本检查：
各组动物以上脏器大体观察，表面光滑，色泽正常，未见异常病灶。
显微镜下检查：
心：灌胃给药3个月、6个月，对照组心脏三层结构清楚，中层肌纤维排列有序，未见变性、坏死及断裂。间质内未见出血及炎性细胞浸润。本发明药物三个剂量组镜下结构同对照组。停药2周后各给药组未见中毒性病理变化。
肝：灌胃给药3个月、6个月，不同剂量的本发明药物组、对照组及停药2周后各给药组，镜下肝小叶结构尚能辩出，肝细胞呈条索状，围绕中央静脉以放射状形式排列，肝窦清楚，肝细胞未见肿胀、变性及坏死，汇管区可见极少的炎性细胞，未见中毒性病理变化。
脾：灌胃给药3个月、6个月，对照组、不同剂量的本发明药物组，镜下被膜完整，内有界限清楚的红、白髓，停药2周后各给药组未见中毒性病变。
肺：灌胃给药3个月、6个月，对照组肺内可见由支气管上皮入肺不断分支，形成支气管树，管腔由粗变细，粘膜上皮完整，个别粘膜下及小血管周围可见少许炎性细胞浸润，部分肺泡壁略有增厚，不同剂量的本发明药物组及停药2周各给药组镜下未见中毒性病变。
肾：灌胃给药3个月、6个月，对照组皮质内可见散在的圆形或卵圆形的肾小球，球内毛细血管丰富，包文氏囊内未见渗出液，肾小管上皮完整，未见肿胀、变性及坏死，管腔内未见不同类型的管型。本发明药物三个剂量组及停药2周后各给药组，镜下同对照组大致相似，未见中毒性病理变化。
脑：灌胃给药3个月、6个月，对照组镜下脑组织灰白质界限清楚，内有丰富的神经细胞及胶质细胞，间质内未见出血及炎性细胞浸润。不同剂量的本发明药物组及停药2周后各给药组镜下结构同对照组相似，未见中毒性病理变化。
胃：灌胃给药3个月、6个月，对照组及不同剂量的本发明药物组，镜下结构基本相似，四层结构明显，粘膜层表面为单层柱状上皮，其下方为排列整齐的单管状腺体，细胞丰富，主细胞、壁细胞可见，粘膜下层较为疏松，肌层肥厚，以内斜中环外纵排列，浆膜层可见，停药2周后各给药组未见中毒性病理性变化。
大肠：灌胃给药3个月、6个月，对照组大肠包括盲肠、升结肠、横结肠、降结肠、乙状结肠和直肠几个部分，肠壁为四层，粘膜层表面为柱状上皮和杯状细胞，肠腺为管状，以杯状细胞居多，固有膜内部分可见淋巴细胞，粘膜下及肌层明显，浆膜层由结缔组织及外被间皮构成，三个剂量组的本发明药物及停药2周后，各给药组镜下同对照组一致，未见异常。
小肠：灌胃给药3个月、6个月，对照组四层结构可见，由十二指肠、空肠、回肠构成，肠粘膜表面为绒毛状，主要为柱状上皮细胞，杯状细胞夹在其中，其下方为密集的肠腺，孤立的淋巴小结可见，肌层由内环外纵的肌纤维构成，浆膜层同大肠，三个剂量组的本发明药物组及停药2周后，各给药组镜下形态同对照组相似，未见特殊病变。
肾上腺：灌胃给药3个月、6个月，对照组、不同剂量的本发明药物及停药2周后各给药组，镜下结构比较一致，皮髓质界限清楚，皮质内球状带、束状带、网状带三个带排列整齐，髓质区血管丰富，未见中毒性病理性变化。
甲状腺：灌胃给药3个月、6个月，对照组甲状腺腺泡密集，大小不等，部分腺泡内含粉染物质，不同剂量的本发明药物及停药2周后各给药组，镜下同对照组相似，未见中毒性病理变化。
胸腺：灌胃给药3个月、6个月，对照组及三个剂量组的本发明药物镜下结构相似，胸腺由分隔不完全的小叶构成，形状多样，胸腺细胞颜色内浅外深，未见出血及坏死，停药2周后各给药组未见中毒性病理变化。
胰腺：灌胃给药3个月、6个月，对照组胰腺小叶内可见丰富的浆液性管状腺泡，内有界限清楚，形状不规则，大小不等的浅色胰岛，不同剂量的本发明药物组及停药2周后各给药组，镜下同对照组相似，未见中毒性病理变化。
垂体：灌胃给药3个月、6个月，不同剂量的本发明药物与对照组及停药2周后各给药组，镜下垂体结节部与神经部间有分隔，结节部三种细胞高倍镜下可辩出，其间血窦丰富，未见中毒性病理变化。
子宫：给药3个月、6个月，对照组子宫内膜可见，腺体清楚，肌层明显，不同剂量的本发明药物组及停药2周后各给药组镜下形态同对照组相似，未见中毒性病理变化。
卵巢：灌胃给药3个月、6个月，对照组卵巢被膜可见，皮质区内可见不同发育阶段、生长良好的卵泡及黄体构成。三个剂量组的融
斑通脉颗粒及停药2周后各给药组，镜下同对照组较为一致，未见中毒性病理变化。
睾丸：灌胃给药3个月、6个月，对照组、不同剂量的本发明药物组及停药2周后各给药组，可见睾丸表面由一层致密的纤维包绕，内有圆形或卵圆形的曲细精管，排列有序，管腔内由一系列生精细胞构成。各组均未见中毒性病理变化。
前列腺：灌胃给药3个月、6个月，对照组、不同剂量的本发明药物组及停药2周后各给药组，可见前列腺腺泡丰富，腺上皮大部分扁平或立方，腔大，部分腔内面为锯齿状，部分腔内含有粉染物质，各组未见中毒性病理变化。
不同剂量的本发明药物连续给大鼠灌胃给药3个月、6个月及停药2周后，各脏器大体及镜下观察，未见中毒性病理反应(病理报告附后)。
结果表明，本发明药物94g生药/kg、47g生药/kg、23.5g生药/kg(临床用量的50、25、12.5倍)组动物连续灌胃给药3个月、6个月及停药2周后各组动物未见严重不良反应，部分数据与对照组有统计学差异，但均在正常范围内。病理检查各脏器均未见该药引起的明显中毒性病理改变。
Claims (20)
1、一种治疗心绞痛的药物，其特征在于它主要由下述重量配比的原料药制成：蒲黄3～12份 法半夏2～12份 丹参5～18份 陈皮2～12份
2、根据权利要求1所述的治疗心绞痛的药物，其特征在于它主要由下述重量配比的原料药制成：蒲黄5～9份 法半夏5～9份 丹参7～12份 陈皮5～8份
3、根据权利要求2所述的治疗心绞痛的药物，其特征在于它主要由下述重量配比的原料药制成：蒲黄6份 法半夏5份 丹参9份 陈皮5.5份
4、根据权利要求1至3中任一权利要求所述的治疗心绞痛的药物的制备方法，包括以下步骤：
a)称取各原料药蒲黄、法半夏、丹参和陈皮，备用；
b)将所述重量配比的蒲黄、丹参二味加50％～90％乙醇回流提取2～3次，合并醇提取液，减压回收乙醇，得浓缩液，备用；
c)将b)的药渣与所述重量配比的法半夏、陈皮加水煎煮三次，每次加水以没过药面为宜，将水煎煮药液滤过，浓缩至相对密度为1.15～1.2(80℃热测)，与蒲黄、丹参醇提浓缩液混匀，得清膏，即本发明药物的有效成分。
5、根据权利要求1所述的治疗心绞痛的药物，其中原料药还有：制首乌4～15份 川芎2～12份
6、根据权利要求5所述的治疗心绞痛的药物，其特征在于它主要由下述重量配比的原料药制成：蒲黄5～9份 法半夏5～9份 丹参7～12份 陈皮5～8份 制首乌6～10份 川芎4～8份
7、根据权利要求6所述的治疗心绞痛的药物，其特征在于它主要由下述重量配比的原料药制成：蒲黄6份 法半夏5份 丹参9份 陈皮5.5份 制首乌7份 川芎6份
8、根据权利要求5至7中任一权利要求所述的治疗心绞痛的药物的制备方法，包括以下步骤：
a)称取各原料药蒲黄、法半夏、丹参、陈皮、制首乌和川芎，备用；
b)将所述重量配比的蒲黄、丹参二味加50％～90％乙醇回流提取2～3次，合并醇提取液，减压回收乙醇，得浓缩液，备用；
c)将b)的药渣与其余四味药材加水煎煮三次，每次加水以没过药面为宜，将水煎煮药液滤过，浓缩至相对密度为1.15～1.2(80℃热测)，与蒲黄、丹参醇提浓缩液混匀，得清膏，即本发明药物的有效成分。
9、根据权利要求5所述的治疗心绞痛的药物，其中原料药还有：昆布3～15份泽泻3～12份 枸杞子3～15份 决明子6～18份 生山楂6～15份
10、根据权利要求9所述的治疗心绞痛的药物，其特征在于它主要由下述重量配比的原料药制成：蒲黄5～9份 法半夏5～9份 丹参7～12份 陈皮5～8份 制首乌6～10份 川芎4～8份 昆布6～10份 泽泻5～8份 枸杞子5～8份 决明子8～12份 生山楂7～10份
11、根据权利要求10所述的治疗心绞痛的药物，其特征在于它主要由下述重量配比的原料药制成：蒲黄6份 法半夏5份 丹参9份 陈皮5.5份 制首乌7份 昆布8份 川芎6份 泽泻6份 枸杞子7份 决明子9份 生山楂8份
12、根据权利要求9至11中任一权利要求所述的治疗心绞痛的药物的制备方法，包括以下步骤：
a)取各原料药蒲黄、法半夏、丹参、陈皮、制首乌、川芎、昆布、泽泻、枸杞子、决明子和生山楂，备用；
b)将所述重量配比的蒲黄、丹参二味加50％～90％乙醇回流提取2～3次，合并醇提取液，减压回收乙醇，得浓缩液，备用；
c)将b)的药渣与其余九味药材加水煎煮三次，每次加水以没过药面为宜，滤过，合并滤液，浓缩后与蒲黄、丹参醇提浓缩液混匀，得清膏，即本发明药物的有效成分。
13、根据权利要求4、8或12所述的治疗心绞痛的药物的制备方法，其中步骤c)中药物加水煎煮提取时，第一次加水8倍，第二次加水6倍，第三次加水6倍，每次煎煮1小时。
14、根据权利要求4、8或12所述的治疗心绞痛的药物的制备方法，其中步骤c)中药物加水煎煮提取时，水煎煮药液，浓缩至相对密度为1.03～1.08，加入澄清剂澄清，混匀，静置，滤过，取滤液浓缩至相对密度1.15～1.20，与蒲黄、丹参醇提浓缩液混匀，得清膏，即本发明药物的有效成分。
15、根据权利要求4、8、12所述的治疗心绞痛的药物的制备方法，其中在步骤b)中将药材加乙醇提取时，第一次加8倍药材量的乙醇提取，第二次加6倍药材量的乙醇提取，各煎煮1小时。
16、据权利要求4、8或12所述的治疗心绞痛的药物的制备方法，步骤c)中还可将陈皮或陈皮和川芎二味药材先加10～15倍量水蒸馏提取挥发油，收集挥发油和水煎液①备用，药渣再与其余药材一起加水煎煮，滤液与水煎液①合并，浓缩，再与蒲黄、丹参乙醇提浓缩液混匀，得清膏，加入辅料，制成颗粒，并干燥，再加入步骤c)中收集的挥发油，混匀，制成颗粒剂。
17、根据权利要求1、2、3、5、6、7、9、10或11权利所述的治疗心绞痛的药物在制备预防、治疗心绞痛药中的应用。
18、根据权利要求1、2、3、5、6、7、9、10或11权利所述的治疗心绞痛的药物在制备预防、治疗血脂异常药中的应用。
19、根据权利要求1、2、3、5、6、7、9、10或11权利所述的治疗心绞痛的药物在制备预防、治疗动脉粥样硬化药中的应用。
20、根据权利要求1、2、3、5、6、7、9、10或11权利所述的治疗心绞痛的药物在制备预防、治疗冠心病药中的应用。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |