CN1535717A - 中药丁香及其提取物在制备减肥药物中的用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供中药丁香及其提取物在制备减肥药物和制备脂肪酶抑制剂药物中的新用途。用单味丁香，或丁香水提取物、或丁香有机溶剂提取物、或丁香油提取物制备成药品，以及用丁香和丁香提取物制备成复方制剂。具有减肥疗效显著、价格低廉、使用安全方便等特点。

Description

中药丁香及其提取物在制备减肥药物中的用途

                      技术领域

本发明涉及一种中药的新用途，具体地说，本发明涉及中药丁香及其提取物在制备减肥药物中的用途。

                      背景技术

据《中华本草》记载(上海科技出版社，1999年9月第1版，第五卷：647-652)：丁香是桃金娘科植物丁香Eugeniacaryophyllata Thumb的干燥花蕾，又称公丁香。原产马来群岛及非洲，我国广东、海南、广西、云南等地有栽培。定植5-6年后，花蕾香辣，有麻舌感。丁香为常用传统中药，为具有温中降逆、温肾助阳的功能，主治胃寒呃逆，脘腹冷痛，食少吐泻，肾虚阳，腰膝酸冷，阴疽等症。

现代药化研究表明【王浴生，等。中药药理与应用，人民卫生出版社，1983，9，第1版，4-10；北京医学，1994，30(4)：9；实用中医药杂志，2002；18(6)：54；陕西中医，1995，16(9)：419-422】，丁香花蕾中主要含挥发油(丁香油)15-20％，丁香油中主要含丁香酚64％-85％，乙酸丁香酚，β-丁香烯等。花蕾中还含有齐墩果酸、没食子酸、黄酮、山萘酚及其甙，槲皮素及其苷，鼠李素等其他化学成分。药理研究表明，丁香水提物、丁香乙醚、丁香油具有极为广泛的药理活性，主要包括：抗氧化作用；抑制花生四烯酸代谢作用；解热、镇痛、抗炎作用；抗血小板聚集、抗凝和抗血栓作用；抗突变作用；抗缺氧作用；麻醉作用；抗细菌、病毒、霉菌、杀寄生虫作用；抗胃溃疡，促进胃酸和胃蛋白的酶分泌，解除肠痉挛、抗腹泻和利胆作用。此外，丁香还具有抑制脑内胆碱酯酸活性，降低血压，促进透皮吸收等其它药理活性。以上有关丁香的现代药理研究，均未涉及丁香及丁香提取物减肥药理活性研究报道。

肥胖症是一组常见的代谢异常症群，随着人们物质生活的日益提高，肥胖症已经成为严重危及人类生命的疾病，在我国发病率为10％-20％，目前对于肥胖症有很多疗法，如饮食疗法、运动疗法、行为疗法、药物治疗等。在药物治疗方面，中西药物治疗肥胖症已有较为广泛的研究和临床应用。现代减肥西药主要按作用机制分为食欲抑制药(如去甲肾上腺素、多巴胺及5-羟色胺等)、增加能量消耗的药物(如麻黄碱、茶碱等)、抑制肠道消化吸收的药物及其他治疗肥胖的药物(如肥胖基因产品、胰岛素增敏剂等)四类。西布曲明(Sibutramine)和奥利司他(orlistat)是迄今为止美国FDA和中国国家药品监督管理局批准的两种减肥药。罗氏公司的赛尼可(奥利司他)是第一个、也是唯一的非中枢神经作用的减肥药物，是一种作用于肠道的脂肪酶抑制剂，在推向中国大陆市场之前，赛尼可已经占据了国际减肥药市场80％的市场份额。曲美(西布曲明)是一种中枢神经抑制剂，它通过抑制食欲，增加饱胀感达到减少进食进而减轻体重的目的。

有关中药减肥的研究也不断深入，从有减肥作用的中药、中成药研究，到中药减肥活性成分研究，都有了较为明显的进展。已有研究表明【中医药减肥疗法概况，中药材，2002，25(7)：534-537】，单味中药中，麻黄、山楂、大黄、虎杖、苍术、泽泻、茵陈、草决明、半夏、番泻叶、元葱、大蒜、蚕肾、槐米、金银花、姜黄、白茅根、荷叶、薏苡仁、茺蔚子、丹参、赤子、益母草、三七、五灵脂、香、三棱、莪术、鸡血藤、牛膝、当归、川芎、旱莲草、女贞子、何首乌、生地、山茱萸、枸杞子、菊花、桑寄生、灵芝均有不同程度的减肥作用。有关减肥中药有效成分的研究主要涉及大黄蒽醌、枸杞多糖、茶叶多糖、灵芝多糖、人参皂甙、绞股蓝总皂甙、三七叶总皂甙、刺五加叶总皂甙、柴胡皂甙、大豆皂甙、大豆磷脂、葛根素、甘草甜素、山楂黄酮、橙皮甙、黄芩甙、白藜芦醇、植物固醇、泽泻萜醇、银杏苦内酯、茶多酚、决明子大黄酚、荷叶生物碱、川芎嗪、姜黄素、大蒜素、阿魏酸、亚麻酸、α-生育酚等。此外，尚有不少中药减肥复方的研究应用报告，如乌龙强力减肥茶(铁鸡音、山楂、决明、金银花)，减肥降脂茶(枸杞子、何首乌、草决明、山楂、丹参)等。有关中药减肥降脂的机理研究尚未进行全面深入研究，其作用机理比较复杂，可能涉及减少外缘性脂质的吸收、减少内缘性脂质的合成、促进脂质的转运和排泄、调节脂肪代谢等多方面。已有研究报道，乌龙茶水提物具有抑制胰脂肪酶活性的作用，乌龙茶中分离得到的活性物质咖啡因具有增强去甲肾上腺素诱导脂肪分解的作用，乌龙茶减肥作用可能是通过抑制小肠对食物的吸收和促进脂肪分解作用而实现的【乌龙茶减肥作用机制的研究，营养科学学报，200，23(4)：342-343】。但以上有关中药减肥及减肥机理的研究，均未涉及中药丁香及丁香提取物。

                      发明内容

本发明目的是提供丁香的新用途，具体地说，提供丁香在制备减肥药物中的用途。

进一步地，本发明的目的是提供丁香及丁香提取物在制备脂肪酶抑制剂药物中的用途。

本发明的技术方案是：使用中药丁香制备减肥药物，特别是制备脂肪酶抑制剂药物，使用丁香制备上述药物时可以用中药丁香Eugenia caryophyllata Thumb的原生药粉，也可以用中药丁香Eugenia caryophyllata Thumb提取物为活性成分。所述的丁香提取物为丁香水提取物，或者为丁香油提取物，其中更进一步地，丁香油提取物为丁香重油(其比重大于1)提取物。

本发明还提供一种具有减肥作用的药物组合物，它含有上文所述的丁香原生药或提取物，再加上药学上可接受的载体或辅助性成分可制成药剂。所述的药剂是口服制剂，如胶囊、软胶囊、颗粒剂、片剂、滴丸、口服乳剂。

在使用丁香制备减肥药物时，可以是将丁香原生药直接加工成药物，也可以是对丁香原生药进行化学分离提取，将各种提取物(包括丁香水提取物、丁香有机溶剂提取物、丁香油、丁香重油)制备成药品。也可以是将丁香原生药或其各种提取物与其它药物或中药配合制成复方制剂。

用丁香为原料，直接加工制备成药品。可以是将上述原生药净制后粉碎，过80-120目筛，制成细粉，再将细粉装胶囊，或制备成胶囊、片剂、丸剂、颗粒剂、散剂。

用丁香原生药为原料，进行初步提取后制备成药品。可以采用现代技术中的各种常规提取方法进行提取。例如，用丁香原生药为原料，以水或有机溶剂提取，其有机溶剂可以是乙醇、甲醇、乙酸乙酯、丙酮、乙醚、石油醚等有机溶剂。优选以水或10～95％乙醇为溶剂提取丁香水溶性或醇溶性成分制备成药品，可以采用以下常规分离提取方法：将原药材经过净制后粉碎为粗粉，用水直接加热提取1～3小时，重复1～3次，水煎液减压浓缩，制备水提浸膏；用水，或10～95％乙醇，回流加热提取1～3小时，可重复提取1～3次，然后滤去药渣，滤液在常压或减压下浓缩，得浓缩水浸膏或醇浸膏，经真空或冷冻干燥成干粉。用丁香原生药为原料，可采用冷浸法或渗滤法或热回流法提取，即得丁香挥发油，即丁香油。

用丁香为原料，配伍其它中药，如大黄、山楂、泽泻、枸杞子、丹参等，亦可制备成具有减肥作用的中药复方。

以上丁香或丁香各种提取物，或以丁香为主要原料组成的中药复方，加上药学上可接受的载体，如淀粉、乳糖、蔗糖、饴糖、糊精、纤维素类、琼脂、硬脂酸镁、滑石、植物油、阿拉伯胶，明胶等，可以制成胶囊剂、软胶囊剂、片剂、丸剂、滴丸剂、散剂、颗粒剂、口服液或注射液等多种剂型。如①片剂的制备：包括普通片、薄膜片、肠溶片等。用上述丁香水提取物，加入适量稀释剂如淀粉、糊精、甘露醇、微晶纤维等，适量的粘合剂如水、乙醇、淀粉浆、明胶、纤维素等，适量的崩解剂如干淀粉、羧甲基淀粉钠、羟丙基纤维素、海藻酸钠等，以及适量的润滑剂如硬脂酸镁、滑石粉、聚乙二醇等，按常规湿法制粒，干燥后整粒或干法制粒后压片。如是包薄膜衣片，可用成膜材料如纤维素类、聚乙二醇类等，按常规包衣，分装入密闭瓶或铝塑板中。②胶囊剂的制备：将上述丁香水提取物加入适量辅料如淀粉、碳酸钙、甘露醇、氧化镁、微粉硅胶等，适量润滑剂如滑石粉、硬脂酸镁、乙二醇酯，聚硅酮类等，以及适量的黏合剂如矿物油、食油等，混合成干粉或制成颗粒，填充入胶囊，分装如密闭铝塑包装中。以上各剂型可加入适量甜味剂，如D-木糖，木糖醇、麦芽糖醇、甜叶菊素、天冬甜母等。③口服液的制备：口服液制备过程中，用上述丁香水提取物加入药用添加剂，如悬浮剂(如山梨醇糖浆、纤维素衍生物、葡萄糖/蔗糖糖浆、明胶、硬脂酸铝胶或氢化食用脂肪)；乳化剂(例如卵磷脂、阿拉伯胶或失水山梨醇-油酸酯)；非水载体(例如杏仁油、油状酯、乙醇或精炼植物油)；以及防腐剂(例如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或山梨酸)。根据需要，液体制剂还可以含有已知的缓冲剂、矫味剂和芳香成分、染料和甜味剂。

丁香原生药，或其水提物，或其有机溶剂提取物、或其挥发油即丁香油提取物、或其中药复方制备的药物及其制剂具有显著的减肥药理作用，对肥胖动物的体重、脂肪重量及李氏指数均有明显抑制作用。

丁香原生药，或其水提物，或其有机溶剂提取物、或其挥发油即丁香油提取物、或其中药复方制备的药物及其制剂具有显著的减肥药理活性，即对胰脂肪酶活性具有明显抑制作用。

由丁香原生药，或丁香水提取物，或丁香有机溶剂提取物，或丁香油提取物，或丁香重油提取物，或其药物复方制备的药物及其制剂，具有显著的减肥作用，可将其制成胶囊、软胶囊、片剂、颗粒剂、丸剂、滴丸剂、口服液、注射液等多种剂型，适用于肥胖症的治疗，具有疗效显著、价格低廉、使用安全方便等优势特点。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

                      具体实施方式

实施例1：丁香原生药药品的制备

以丁香植物花蕾为原料，净制后按常规方法粉碎，过筛，制成粒度小于60目的丁香细粉8.5g，细粉装入胶囊，灭菌，分装即成。

实施例2：丁香水提取物及丁香重油提取物制备

取丁香原生药4kg，粉碎后加入10倍量水，采用水蒸馏法加热提取8小时，收集芳香水，滤渣再加10倍量水，加热回流提取2小时，过滤。合并两次滤液，浓缩得丁香水提取物495g，真空干燥为干粉(以下称DX-1)，为棕褐色粉末。将收集的芳香水静置分层，并收集分离其中下层液体，得丁香重油提取物480ml(以下称DX-2)，以丁香酚为对照品，采用气相色普法测定其中含丁香酚为84％。实施例3丁香水提取物、丁香重油提取物对肥胖大鼠的减肥作用试验

实验材料：

供试药品：DX-1、DX-2为实施例2所得丁香水提取物和丁香重油提取物，阳性药物为西药赛尼可(上海罗氏制药有限公司生产)，药物浓度根据需要配制。试验动物：刚断奶的SD健康大白鼠，体重50-60g，为I级合格鼠，合格证号为：川实动管质(99)第32号，由四川抗菌素工业研究所提供。饲料：分基础饲料和营养饲料两种，基础饲料为：25％的麦粉、22％共同豆粉、1％酵母粉、5％骨粉、20％玉米粉、16％大米粉、10％鱼粉、1％食盐，营养饲料为在基础饲料中按100g饲料加奶粉10g、猪油10g、鸡蛋1枚、鱼肝油0.3g、豆芽250g(切碎后拌入饲料中，每天饲料分2次喂给动物，以吃完为止，自由饮水。饲料喂养量，每天以相同量的饲料分给各鼠，在第1、2周内，每天喂13g(只.d)^-1；第3周14g(只.d)^-1；第4周16g(只.d)^-1；第5周18g(只.d)^-1；第6周20g(只.d)^-1，每天以吃完为止，不再添食。

方法与结果：

取断奶大鼠72只，分性别按体重随机均分为5组，除1组只喂基础饲料外，其余4组均按上述喂量喂以基础饲料加营养饲料，各组均在喂饲料的前后分别灌胃DA-1、DX-2、DX-3赛尼可。观察指标，重点观察体重、脂肪垫重、李氏指数，体重观察以给药前、给药后1、2、3、4周，各称体重1次，第4周称体重后，ip戊巴比妥麻醉后取生殖器周围的脂肪垫称重，并量体长(从鼻尖至肛门)，按公式计算李氏指数(Lees’)Lees’＝体重^1/3×10³÷身长，结果如表1、表2。

                                  表1  丁香水提取物DX-1、丁香重油提取物

                                       DX-2对肥胖大鼠体重的影响

         剂量          给药前                            给药后(体重.g.x±s)

组别     g(ml).(kg     (0d)               7d               14d               21d               28d

         .d)^-1

正常                   ♀55.21±5.45    91.3±2.47       113.96±8.39      118.58±11.77     131.36±18.9

组                     ♂55.7±3.82     87.27±6.00      110.94±12.73     113.6±13.25      138.65±18.4

肥胖     ig等量        ♀55.27±4.14    97.87±11.45     139.25±11.71     168.03±5.68      180.43±10.24

组       0.5％cmc      ♂55.34±4.56    100.93±12.17    136.2±13.05      173.19±25.29     191.33±13.52

赛尼                   ♀55.56±5.02    89.93±10.74     120.0±12.89      128.46±15.05     147.41±17.49**

         0.06

可                     ♂55.63±3.53    97.6±11.76      132.89±19.93     155.69±11.4      175.86±19.76*

                       ♀55.5±5.04     91.23±16.18     127.7±20.38      148.82±22.0      156.89±21.09**

DX-1     0.9

                       ♂54.96±2.83    90.46±6.89      127.73±13.78     124.56±17.86     149.66±29.42*

         0.25          ♀54.97±4.3     80.97±14.38     104.59±22.16     128.96±34.35     159.97±18.8*

DX-2

         (ml)          ♂55.04±4.31    85.47±7.80      124.39±22.60     161.42±36.36     167.8±27.11*

与肥胖组比*P＜0.05  **P＜0.01

从表1可见：灌胃一周后，各给药组的体重比肥胖组减轻，当灌胃至28天后，DX-1组、DX-2组对雌鼠和雄鼠的体重均较肥胖组显著减轻，其中以DX-1的作用最强，赛尼可组对雌鼠的体重均较肥胖组有显著减轻作用，但赛尼可对雄鼠的减肥作用不明显，减肥速度较慢。试验结果表明，DX-1减肥速度比赛尼可快，且无副反应，无性别差异，且动物皮毛光滑洁净。

                  表2  丁香水提取物DX-1、丁香重油提取物DX-2

                       对雌性大鼠的脂重、尾长及李氏指数的影响

        剂量        脂肪(g.x±s)     尾长(g.x±s)       Lees’(g.x±s)

组别    g(ml).(kg   雌       雄      雌         雄       雌       雄

        .d)^-1

正常组  -           1.5±         1.71±      11.62±          12.43±      293.5±     273.5±

                    0.15     0.05    0.83       0.64     13.3     12.4

肥胖组  Ig等量      2.18±        2.39±     16.5±            17.3±        306.7±     307.5±

        0.5％cmc    0.18     0.07    1.13       0.82     18.8     17.3

赛尼可  0.06        1.8±          2.19±     13.2±            15.5±        265.1±     274.7±

                    0.22     0.07    0.96       0.18     8.95**   13.2**

DX-1    0.9         1.87±        1.77±     14.5±1.3  13.3±        264.4±      260.5±

                    0.11     0.11*              0.62     12.3**   14.1**

DX-2    0.25(ml)    1.82±        1.83±     14.3±            15.1±        278.2±      282.96±

                    0.11     0.14    1.07       0.74     11.5     0.82

与肥胖组比*P＜0.05  **P＜0.01

从表2可见，DX-1不仅对肥胖大鼠体重作用有明显抑制作用，同时对大鼠生殖器周围的脂肪垫重及李氏指数均有显著的抑制作用，表明DX-1对肥胖鼠的相关指标亦表现出良好的作用，而DX-2亦有一定的抑制肥胖鼠的脂肪垫重及李氏指数作用，但作用不如DX-1，且与赛尼可有相似的副作用，即有一过性腹泻作用。

实施例4  丁香水提取物、丁香重油提取物对肥胖小鼠体重的影响

取16-18g小鼠55只，分性别按体重随机均分为5组，每雌6、雄5只，各组的基础饲料与第1组相同，但在饲料中另加致肥营养饲料比例同实施例3，各组每天每只鼠的进食量基本相似(不要在进食体积上产生差别)，各组分别于餐前和餐后各给药1次，7天称体重1次，结果如表3。

          表3  丁香水提取物DX-1、丁香重油提取物DX-2

                      对致肥小鼠体重的影响

           剂量                            给药后(体重.g.x±S)

组别       g(ml).(kg.    致肥前(g.x±s)    7d               14d

           d)^-1

正常组     -             16.9±0.85        25.32±3.46      26.22±4.97

                         18.4±1.44        25.02±2.36      29.56±5.75

肥胖组     Ig等量        17.62±1.01       27.18±2.91      32.5±3.32

           0.5％cmc      18.64±0.8        29.82±1.95      39.14±3.12

赛尼可     ig1.2         16.73±1.13       24.92±1.68      31.27±3.39

                         18.82±0.92       25.18±1.03      37.12±3.44

DX-1       ig1.2         16.93±1.25       23.9±4.22*      28.85±2.57*

                         1.81±1.08        28.3±2.93       34.8±6.46

DX-2       ig0.5(ml)     17.38±0.99       23.02±3.68*     25.38±3.64**

                         18.4±0.67        24.7±2.14**     25.66±4.5**

与肥胖组比*P＜0.05  **P＜0.01

表3可见，灌胃给药后7天和14天，DX-2组、DX-1组对肥胖小鼠的体重均有不同程度的抑制作用，即丁香水提取物和丁香重油提取物能明显减轻肥胖小鼠的体重，阳性药赛尼可组在给药14天内作用不明显。

实施例5  丁香水提取物DX-1、丁香重油提取物DX-2对胰脂肪酶活性影响试验

胰脂肪酶是一种脂肪水解酶，它作用于甘油三酯的乳化颗粒，使甘油三酯转化为游离脂肪酸和2-甘油-酯。本实验通过抑制胰脂肪酶对甘油三酯的水解作用，建立了胰脂肪酶抑制剂的筛选方法，脂肪酶抑制剂赛尼可作为本实验的阳性对照，并以IC₅₀评价供试样品的抑制效率。试验方法：分别取10ug/10ul，50ug/10ul，100ug/10ul不同浓度的丁香水提取物DX-1、丁香重油提取物DX-2、赛尼可阳性样品各20μl，加入微量反应管，再加入40μl酶试剂，其中胰脂肪酶含量0.2U，甘油激酶0.024U，甘油-3-磷酸氧化酶0.15U，过氧化物酶0.2U，腺苷三磷酸2.8μM，4氨基安替比林2μM；将样品与酶试剂混匀后放置37℃5分钟，最后加入160μl显色试剂(含4-氯酚14μM)，充分混匀，37℃放置10分钟，用酶标仪测定490nm波长下各反应管吸光度值，并计算各样品IC₅₀值。试验结果见表4。

表4  丁香水提取物DX-1、丁香重油提取物DX-2对胰脂肪酶活性的抑制效率

          样品编号                  IC₅₀(ug/ml)

          DX-1                      6.5

          DX-2                      7.2

          赛尼可                    0.15

结果表明，丁香水提取物DX-1、丁香重油提取物DX-2及阳性药物赛尼可对胰脂肪酶活性有显著抑制作用，其IC₅₀值分别为6.5ug/ml，7.2ug/ml，0.15ug/ml。

Claims (10)

1.中药丁香在制备减肥药物中的用途。

2.权利要求1所述的丁香在制备脂肪酶抑制剂药物中的用途。

3.权利要求1或2所述的丁香的用途，其特征在于所述的药物为中药丁香Eugenia caryophyllata Thumb的原生药粉。

4.权利要求1至3所述的丁香的用途，其特征在于所述的药物是以中药丁香Eugenia caryophyllata Thumb提取物为活性成分。

5.根据权利要求4所述的丁香的用途，其特征在于所述的提取物为丁香水提取物。

6.根据权利要求4所述的丁香的用途，其特征在于所述的提取物为丁香油提取物。

7.根据权利要求6所述的丁香的用途，其特征在于所述的丁香油提取物为丁香重油提取物。

8.一种具有减肥作用的药物组合物，它含有权利要求3至7所述的丁香原生药或提取物。

9.根据权利要求8所述的药物组合物，其特征是：含有如权利要求4或5所述的丁香原生药或提取物作为活性成份，加上药学上可接受的载体或辅助性成分制成的药剂。

10.根据权利要求9所述的药物组合物，其特征在于所述的药剂是口服制剂：胶囊、软胶囊、颗粒剂、片剂、滴丸、口服乳剂。