CN1498108A - 用于治疗炎性疾病的烟碱性受体激动剂 - Google Patents

Abstract

本发明涉及烟碱性受体激动剂用于治疗炎性疾病，包括多种肺部疾病的用途。这些激动剂比其他的抗炎药物如类固醇有着更少的副作用。另外，这些激动剂能单独或与其他抗炎药物联合使用以减轻肺病。

Description

用于治疗炎性疾病的烟碱性受体激动剂

发明领域

本发明涉及通过使用或给予烟碱性受体激动剂治疗炎性疾病，包括多种肺部疾病。

发明背景

尽管我们每小时呼吸超过一立方米的空气，但是我们的肺部防御机制通常能对付吸入空气中存在的大量的颗粒，抗原，感染性病原体以及毒气与烟雾。这些颗粒与免疫系统以及其他肺部防御机制相互作用的结果是产生了受控制的炎症反应，它通常是保护性的和有益的。通常，这个过程可以自我调节以保证气道与发生气体交换的肺泡上皮表面的完整性。然而在一些情况下却不能调节炎症反应，组织损伤的可能性增加。取决于环境暴露的类型，遗传易感性以及多种不甚明确的因素，异常大量的炎症细胞会聚集在呼吸系统的不同部位，造成病态或疾病。

对吸入的或内在的刺激的炎症反应的特征为血管通透性非特异性增加以及炎症和趋化介质包括组胺、类花生酸、前列腺素、细胞因子和趋化因子的释放。这些介质调节白细胞-内皮细胞粘附分子的表达和接合，从而使血液中存在的炎症细胞发生募集。

更特异的炎症反应包括对吸入抗原的识别以及启动强化的特异性的免疫应答。这个反应参与哮喘、过敏性肺炎(HP)和可能结节病的发生。肺损伤后继发的修复机制失调可促成哮喘、肺纤维化、慢性阻塞性肺病(COPD)以及慢性HP中的纤维化和功能丧失。

先前报道当前吸烟者中HP的发生率要明显低于非吸烟者(1-4)。吸烟者中结节病的发生率也低于非吸烟者。吸烟对HP和其他炎性疾病发生的有益作用的潜在机制仍不清楚，但是这可能与烟碱的免疫调节作用有关。有戒烟后哮喘复发或恶化的临床观察。这方面的证据很难取到，并且烟碱在预防或治疗哮喘中的任何保护性作用都可能被有上千种成分的烟草吸入的负面作用所掩盖。

吸烟的保护性作用在其他疾病中也有报道，研究最多的是溃疡性结肠炎，它是一种炎性肠病(7，8)。烟碱已经被成功地用于该疾病的治疗(9，10)。其他的研究已经关注到烟碱在治疗阿尔兹海默氏病和帕金森病中可能的治疗价值(11，12)。

烟碱性受体是由5个多肽亚基构成的五聚体，它作用为配体门控的离子通道。当配体结合于受体时，多肽发生构象改变，打开中央通道以允许钠离子从细胞外液进入细胞质。已经确定了四种类型的亚基：α、β、γ和δ。受体可以由这四种类型亚基的任意组合构成(13)。最近的研究表明肺泡巨噬细胞(AM)能表达α-7亚基(14)，而支气管上皮细胞表达α-3，α-5和α-7亚基(15)，以及淋巴细胞表达α-2、α-5、α-7、β-2与β-4亚基(14)。成纤维细胞与气道平滑肌细胞(17)也表达这些受体。因此，原住的肺部细胞(AM，树突细胞，上皮细胞，成纤维细胞等)与那些在炎性疾病中募集的细胞(淋巴细胞，多形核细胞)都表达烟碱性受体。

淋巴细胞中烟碱性受体的激活影响细胞内信号作用，导致细胞的不完全活化。事实上，烟碱处理上调了蛋白激酶的活性，这接着上调了磷脂酶A2(PLA2)的活性。PLA2负责将磷酸肌醇-2-磷酸(PIP2)切割为肌醇-3-磷酸(IP3)和二酰甘油(DAG)(18，19)。细胞内IP3的持续存在会造成钙储备的脱敏，导致其耗尽(19)。这个发现可解释这一事实，即用烟碱处理的淋巴细胞不释放足够多的钙离子到细胞质中以激活转录因子如NFκ-B(20)。

烟碱，香烟中的主要药理学成分，是最为人熟知的烟碱性受体激动剂之一(21)。这种天然物质有着明确的抗炎和免疫抑制特性(22)，以及可能有着抗纤维化特性(23)。令动物暴露于含高水平烟碱的香烟烟雾比低烟碱香烟免疫抑制更强(24)。另外，用烟碱处理大鼠抑制了对抗原的特异性抗体应答并诱发了T细胞无反应性(25)。尽管吸烟者的AM数目有所增多，但是这些AM显示出对内毒素起反应分泌炎症细胞因子的能力减弱((20，25，26))并且烟碱似乎是这种抑制的效应成分(26)。一项研究还显示吸烟者的外周血淋巴细胞表达更高水平的FAS配体(FASL)以及烟碱增加非吸烟者淋巴细胞上的FASL的表达，这提示烟碱可能影响细胞凋亡(27)。烟碱也显示出在体外对人牙龈成纤维细胞的增殖以及产生细胞外基质有抑制作用(23)。有意思的是，烟碱处理似乎上调烟碱性受体的表达(28)。

烟碱性激动剂可下调T细胞活化，实际上，烟碱显示出影响T细胞表达共刺激分子CD28和CTLA4(29)。

B7/CD28/CTLA4共刺激途径在T细胞活化和体内稳态方面发挥关键性的调节作用(30，31)。其中涉及两个信号途径。正信号包括B7(CD80/CD86)分子与T细胞CD28受体的结合，造成T细胞反应(增殖、活化、细胞因子表达、和存活)的强化。负信号包括B7与活化的T细胞上的CTLA4的相互作用，造成T细胞反应的下调(33，34)。CD28和CTLA4衍生的信号间的平衡可以改变T细胞活化的结果。

在HP中，先前已经报导活动性HP患者(35)和鼠HP(36)中AM上的B7分子表达上调。还显示阻断小鼠的B7-CD28共刺激途径抑制了肺部炎症(36)。这些结果也证实吸烟者AM上B7分子的表达要低于非吸烟者，以及体外流感病毒感染能上调正常人AM中的B7表达却不能上调吸烟者AM表达B7，是否这能归结于香烟烟雾中存在的烟碱或其他物质还不清楚(35)。哮喘(37，38)和结节病(39)中也报道有B7分子的上调。

地棘蛙素(epibatidine)是至今为止知道的最强的烟碱性激动剂(40)。它有着抗炎和止痛特性。事实上，它的止痛潜能是吗啡的200倍(40)。也已知这个分子可在体外抑制淋巴细胞的增殖(41)。地棘蛙素与受体的结合是非特异性的(42)。然而，地棘蛙素主要在心血管和中枢神经系统具有严重的毒副作用，使得它不适合用作治疗肺部疾病的抗炎药物(40)。

二甲基苯基哌嗪鎓(DMPP)是一种非特异性的合成烟碱性激动剂(13)。它对受体的效力大约等同于烟碱，取决于刺激中涉及的细胞类型(43)。它相对于烟碱和其他烟碱性激动剂的优点是它的化学构型阻止它通过血脑屏障，因此不会引起成瘾或其他中枢神经效应(13)。DMPP的抗炎特性未得到很好地描述。然而，已经显示长期体内治疗能减少白细胞数目，减少脾细胞生成细胞因子以及降低天然杀伤细胞的活性(44)。DMPP对气道平滑肌细胞的作用也已经被测试。当细胞与该激动剂接触更长一段时间时，DMPP最初有着短暂的收缩作用，紧接着是舒张作用(45)。这种支气管扩张作用本身不会使DMPP成为用于哮喘的潜在有效治疗，因为目前在市场上可以得到更有效的支气管扩张剂(B2激动剂)。然而，该烟碱性受体激动剂的所述特性是重要的，因为该药物因其抗炎特性可以被安全地用于哮喘和COPD患者。另外，没有证据表明DMPP对主要器官如心脏、脑、肝脏或肺有任何毒作用。

尽管在炎性疾病，包括肺部炎性疾病的治疗上取得了进展，但是应用目前可得到的药物或药剂进行的治疗通常都会产生不希望的副作用。例如，COPD的炎症显然对皮质类固醇耐药，因而已经意识到需要开发新的抗炎药物用于治疗这种疾病(46)。

同样地，尽管皮质类固醇和其他的免疫抑制药物已经被常规地用于治疗肺纤维化，但是它们证实仅有微弱效力(47)。

因此，需要治疗炎性疾病，包括肺部炎性疾病的新的和可靠的方法，其作用方式能减轻症状而不引起副作用。

发明概述

根据本发明，提供了一种治疗炎性疾病的新方法。特别地，本发明描述了通过使用或给予烟碱性受体激动剂治疗肺部炎性疾病的新方法。

将烟碱或其他烟碱性受体激动剂用于治疗炎性肺病的想法是全新的。尽管烟碱和其他烟碱性受体激动剂有着令人印象深刻的抗炎和免疫抑制特性，但它们可用于治疗过敏性和其他炎性肺部疾病的用途以前没有公开过。烟碱本身是一种安全的物质，它似乎不具有任何长期的副作用(48，49)。与吸烟相关的肺部、心脏和动脉疾病不是由烟碱引起的，而是吸入烟雾中存在的数千计其他化学物质造成的。主要的问题是烟碱能通过血脑屏障而诱导成瘾。这是先前对烟碱性激动剂治疗肺部疾病缺乏兴趣的主要原因。吸烟的危害是显而易见的。尽管烟碱不引起吸烟的毒性作用(49)，但是关联仍存在。

因此本发明提出将烟碱性受体激动剂如DMPP用于治疗炎性肺病，如哮喘、COPD、间质性肺纤维化(IPF)、结节病、HP、以及阻塞性细支气管炎伴机化性肺炎(BOOP)。药物可口服给予，或优选与不同的优选的载体气雾化通过靶向递送直接输送到肺部以使任何全身作用降到最低限度。

烟碱性受体激动剂的抗炎和免疫抑制特性以及最小的副作用使得这些药物非常适合于在治疗大量不同的肺病中的医学用途，这些肺病的特征是支气管或间质炎症，包括如哮喘、COPD、IPF、结节病、HP和BOOP。

在阅读下面非限制性的仅作为举例而给出的优选实施方案的描述并参照附图后，本发明的其他目的、优点和特征将变得更明显。

附图简要说明

图1：BAL细胞的总细胞计数和细胞分类计数。烟碱处理的小鼠中总细胞计数受到明显的抑制，这主要归结于淋巴细胞群减少。

图2：分离的肺单核的细胞中的IFN-γmRNA表达。观察到IFN-γmRNA的显著抑制。

图3：24小时LPS刺激诱导TNF-αmRNA的表达。结果用表达％来表示，100％设定为单用LPS组。通过将TNF-α条带的强度除以β-肌动蛋白的条带强度以得到条带的强度。用不同剂量(40-160μM烟碱与DMPP)处理受刺激的细胞引起TNF-αmRNA表达下降。在40μM烟碱浓度获得了最大的效果(表达减少了98％)，而所有剂量的DMPP引起表达减少60-50％。

图4：24小时SR刺激诱导TNF-αmRNA的表达。结果按图5所述的表示。用不同剂量(80和160μM烟碱以及40到160μM DMPP)处理受刺激的细胞引起TNF-αmRNA表达下调。仅160μM剂量的烟碱对mRNA表达有作用，而40和80μM剂量的DMPP诱导了TNF-αmRNA表达减少高达60％。

图5：24小时LPS刺激诱导IL-10mRNA的表达。结果按图5所描述的表示。用不同剂量(40到160μM烟碱与DMPP)处理受刺激的细胞下调了IL-10mRNA的表达。最大的表达降低(降低87％)发生在40μM的烟碱浓度，所有三个剂量的DMPP造成了表达减少55-40％。

图6：24小时SR刺激诱导IL-10mRNA的表达。用不同剂量(80和160μM烟碱以及40到80μM DMPP)处理受刺激的细胞引起IL-10mRNA表达下调。对于烟碱处理，最大的mRNA表达降低发生在160μM(表达降低60％)，对于DMPP处理为80μM(表达降低90％)。

图7：24小时LPS刺激诱导RAW264.7细胞中IFN-γmRNA表达。结果按图5所描述的表示。用不同剂量的DMPP处理受刺激的细胞造成IFN-γmRNA表达的减少。最大的表达下降(减少80％)发生在40μM DMPP。

图8：a)用LPS(38％)或SR抗原(35％)诱导CD80的表达。烟碱处理(40μM，48小时)将LPS刺激细胞中的表达减少到20％，SR刺激细胞中的表达降到26％。b)用LPS(38％)或SR抗原(35％)诱导CD80的表达。DMPP处理(40μM，48小时)将LPS刺激细胞中的表达减少到17％，SR刺激细胞中的表达降到20％。

图9：从对HP患者进行的BAL中分离到的T淋巴细胞中的IFN-γmRNA表达。DMPP处理减少了这些细胞中的IFN-γmRNA表达。

图10：来自对正常患者进行的BAL的全部细胞中的CD86表达。用DMPP处理的细胞表达的CD86比未处理的细胞少50％。

图11：来自DMPP、烟碱和地棘蛙素处理小鼠的BAL细胞。24小时后烟碱和地棘蛙素处理对SR诱导的炎症有着明显的抑制作用。

图12：当我们增加动物数目后，发现DMPP对肺部炎症的显著抑制作用。

图13：来自DMP-处理小鼠的BAL液中的TNF水平。DMPP明显降低BALF TNF水平。

图14：用增加剂量的DMPP进行腹腔内处理对哮喘小鼠的BAL中总细胞聚集的影响。细胞数目在OVA攻击的未处理的小鼠中高度增加。0.5和2.0mg/kg剂量的DMPP处理明显地减少了细胞计数。

图15：剂量反应的细胞分类计数。OVA攻击的小鼠(OVA OVA)的BAL中有着比对照组(Sal Sal)更多的嗜酸性粒细胞和淋巴细胞。DMPP处理显著地减少了所有组BAL中的嗜酸性粒细胞和淋巴细胞(n＝8；p＜0.05)。

图16：DMPP IP处理对哮喘小鼠BAL中的总细胞聚集的影响的第二剂量反应。细胞数目在OVA攻击的未处理小鼠中高度增加。0.1和0.5mg/kg剂量的DMPP处理明显地减少了总细胞数。

图17：第二剂量反应的分类计数。0.1和0.5mg/kg剂量的DMPP处理明显地减少了嗜酸性粒细胞和淋巴细胞计数，0.5mg/kg是DMPP抗炎作用的最有效剂量。

图18：对照、哮喘和处理小鼠的BAL中的IL-5水平。OVA攻击增加了BAL中的IL-5水平，而在0.5mg/kg处理组的小鼠中DMPP处理对IL-5水平有着显著的抑制作用。

图19：正常、哮喘以及鼻内给予0.5mg/kg DMPP处理的哮喘小鼠在醋甲胆碱攻击后的肺阻力。与哮喘小鼠相比，DMPP似乎减少了肺阻力增大的百分比。

图20：计算肺阻力增大200％的激发攻击剂量(PC200)。与哮喘小鼠相比，DMPP显著地减少了处理小鼠的PC200(p＝0.04，n＝6)。

图21：24小时LPS刺激诱导IL-4mRNA表达。结果按图5所描述的表示。用不同剂量(40到160μM烟碱与DMPP)处理细胞。烟碱处理引起IIL-4mRNA表达减少(在40μM组表达减少高达90％)。所有剂量的DMPP处理完全阻断了LPS刺激细胞中的IL-4mRNA表达。

图22：DMPP对血嗜酸性粒细胞迁移的影响。DMPP诱导了对嗜酸性粒细胞迁移通过人工基底膜的剂量相关性抑制。

图23：美加明，一种烟碱性拮抗剂，对DMPP对血嗜酸性粒细胞迁移的抑制作用的影响。美加明逆转了DMPP的作用，提示烟碱性受体的激活对于DMPP的抑制作用是必需的。

图24：其他烟碱性激动剂对血嗜酸性粒细胞迁移的影响。烟碱、地棘蛙素和胞嘧啶都减少了血嗜酸性粒细胞的迁移。

图25：DMPP对正常人肺成纤维细胞表达胶原1A mRNA的影响。DMPP以剂量依赖性方式抑制胶原1A mRNA表达。

图26：烟碱对人肺成纤维细胞表达胶原1A mRNA的影响。1和10μM的烟碱抑制胶原1A mRNA表达，而更高剂量没有抑制作用。

图27：地棘蛙素，另一种烟碱性激动剂，对人肺成纤维细胞表达胶原1A mRNA的影响。地棘蛙素对胶原1A mRNA表达也有抑制作用。

优选实施方案的描述

先前已描述了在炎症和肺部细胞上存在着烟碱性受体。但是，本发明的新颖性在于观察到烟碱性受体激动剂表现出可用于炎性肺部疾病的治疗，以及对烟碱性激动剂的抗炎和免疫抑制特性的相关发现，这些作用特异性地针对参与诸如哮喘、HP、结节病、BOOP、IPF和COPD这样的炎性肺部疾病发病的机制。一个例子就是吸烟对B7共刺激分子表达的影响。

将两种动物模型用于研究烟碱性拮抗剂在炎性肺部疾病中的作用：HP模型和哮喘模型。采用这两种模型，研究了烟碱性受体激动剂(选择性及非选择性)对肺生理和炎症的作用。利用来自动物研究或患者的分离的炎症细胞以及购得的细胞系进行体外研究以试图了解烟碱性激动剂下调炎症的机制。

最初，利用非特异性激动剂，也就是结合所有烟碱性受体亚基的激动剂(烟碱，二甲基苯基哌嗪鎓(DMPP)和地棘蛙素)进行实验(13，42)。对一种β4亚基特异性激动剂野靛碱(42)也进行测试以检验是否特异性的刺激也能有抗炎作用。

对于本发明的目的而言，术语“动物”指的是人，灵长类动物，家畜(如马，牛，猪，山羊，绵羊，猫，狗，豚鼠，小鼠等)以及其他的哺乳动物。通常，该术语用于表示有着高度发育的血管系统的生物。

对于本发明的目的而言，激动剂或药剂是结合并调节烟碱性受体功能的分子或化合物。优选的药剂是受体特异性的并且不通过血脑屏障，如DMPP。尽管它们通常是有机化合物，优选小的有机化合物，可以在无数的化学物质类别中发现有用的药剂。小的有机化合物有着大于150但小于约4,500的分子量，优选的是小于约1500，更优选的是小于约500。示例性的种类包括肽，糖，类固醇，杂环，多环，取代的芳香族化合物，以及诸如此类。

可对挑选的药剂进行修饰以增加效力，稳定性，药物兼容性以及类似性能。对药剂结构的鉴定可以用于鉴定、产生或筛选另外的药剂。例如，若鉴定出多肽药剂，可以将它们按上面描述的多种方法进行修饰，如增强它们的蛋白水解稳定性。其他稳定方法可包括包封，如包封入脂质体等。按本领域技术人员熟知的任何便利方法制备目标结合药剂。

为了治疗用途，可以将影响烟碱性受体功能的药剂以任何便利的方式给药。小的有机物优选口服给药；其他组合物和药剂优选胃肠外给药，便利地处于药学或生理可接受的载体中，如磷酸缓冲盐水，或类似物。典型的是将组合物加入到滞留的生理液如血液或滑膜液中。

例如，许多这些治疗药物适合于直接注射或输注，局部、气管内/鼻内给药如通过气雾剂，眼内，或在植入物内/上(如胶原，渗透泵，含有适当转化细胞的移植物等，含有治疗性多肽。通常，给药量是经验性决定的，典型的是在约10-1000μg/kg的受体范围内。对于肽药物，浓度通常是在给予剂量中约50-500μg/ml的范围内。可以包括其它添加剂如稳定剂，杀菌剂等。这些添加剂将以常规量存在。

烟碱性激动剂将不会取代目前用于治疗炎性肺部疾病以及常与这些疾病相关的气道阻塞的所有药物。支气管扩张剂对于即刻缓解支气管痉挛仍是有用的。然而，支气管扩张剂对潜在的病因或炎症没有作用。

皮质类固醇是有效的抗炎药物。它们的全身使用造成严重的副作用以致只要有可能就会排除它们的长期使用。吸入的吸收差的皮质类固醇对于治疗气道炎症是有效的。这些药物在低剂量副作用极少或没有副作用。然而，更高的剂量增加了口腔念珠菌病，声带麻痹，白内障和骨质疏松的危险。吸入的类固醇对肺间质没有作用，并且没有抗纤维化的特性(57)。

更新的药物，如抗白三烯药物，对于一些哮喘是有用的(58)，但是对COPD和其他肺部疾病无效。这些药物的抗炎特性局限于由白三烯引起的炎症成分(59)。间质性肺病如IPF、结节病、HP以及BOOP的治疗基本上依赖于全身使用皮质类固醇。这种治疗在控制部分炎症上是有效的，但是不幸的是会诱发严重的副作用以及不能逆转潜在的纤维化改变。有时候将免疫抑制剂如环磷酰胺和硫唑嘌呤试用于严重的IPF，但是它们的治疗价值未得到证实并且最多是非常局限的(60)。本质上，肺纤维化通常是进展性的和不可治疗的，大多数IPF患者死于这种疾病(61)。

烟碱性激动剂可用作为类固醇的备用或替代药物。通过将它们靶向地运送到肺巨噬细胞，这些药物可有助于控制气道和间质炎症。除了具有更少的副作用外，烟碱性激动剂较皮质类固醇的一个主要优点是这些激动剂对于成纤维细胞有着直接的作用，因此能预防或逆转气道和肺的纤维化，而皮质类固醇却不能做到这些。间质纤维化是IPF的标记，是HP和结节病的主要结局，而气道纤维化是慢性哮喘中最常见的发现(57)。

其他物质正处于积极研究，作为炎性肺病的潜在新疗法。特异性地瞄准了很多细胞因子(如IL-5，IL-13，IL-16.....)(62)。相信因为炎症中涉及途径的复杂性，任何一种特异的细胞因子或其他炎症介质都不可能对治疗这些肺病有显著的影响。烟碱性受体激动剂，不象皮质类固醇，有着针对广泛炎症反应的优点。这是它们用于治疗炎性肺病的潜能所在。

实施例

I-过敏样炎症

烟碱性激动剂对小鼠中长期诱导的过敏性肺炎的影响。

实施例1：体内HP研究

假定用烟碱刺激烟碱性受体通过抑制炎症细胞因子以及抑制特异性抗原介导的细胞活化而下调对HP抗原的免疫应签。

选择这个模型是因为，如前面提及的，吸烟者中的HP发生率要低于非吸烟者(50)，以及因为这个模型已经被很好地描述。通过给予直逗号糖多孢菌(Saccharopolyspora rectivirgula)(SR)抗原诱导HP，该抗原是农民肺的致病原，农民肺是HP的一种形式。以范围从0.5到2mg/kg剂量1天两次经腹膜内(IP)给予烟碱同时处理小鼠。烟碱的给予显著地减少了这些小鼠的支气管肺泡灌洗液(BAL)中的总细胞数目。受烟碱处理影响最大的细胞群是淋巴细胞(图1)。分离肺巨噬细胞和淋巴细胞，并用抗CD3+重组IL-2刺激。测定这些细胞的IFN-γmRNA产生，这是一种已知参与HP和其他肺部炎性疾病发生的细胞因子(52)。来自烟碱处理动物的细胞显示出显著低于来自未处理动物的细胞的IFN-γmRNA表达(图2)。

实施例2：体外研究显示烟碱性激动剂对细胞因子表达的影响

为了进一步阐明烟碱在体内模型中抑制作用所涉及的机理，使用肺泡巨噬细胞细胞系。

利用RT-PCR检测烟碱或DMPP处理AMJ2-C11细胞对TNF-α，IL-10mRNA表达的影响。这些细胞因子参与肺部炎性疾病如HP、哮喘和结节病的发生(52-55)。烟碱和DMPP处理表现出TNF-αmRNA表达的大幅下降(在LPS刺激和40μM烟碱处理组表达减少高达98％)，但不是以剂量依赖性方式(图3)。在SR刺激的细胞中观察到相似的结果(图4)。由于培养基中大量的激动剂造成烟碱性受体脱敏可以解释这种非剂量依赖性反应。IL-10mRNA表达也受到烟碱和DMPP处理的削弱。最佳的下调发生在40μM烟碱剂量(LPS刺激的；mRNA表达减少88％；图5)于80μMDMPP剂量(SR刺激的；mRNA表达减少87％，图6)，再一次，这种作用是非剂量依赖性的。

用另一种巨噬细胞细胞系(RAW264.7，ATCC)通过RT-PCR检测DMPP对IFN-γ表达的影响，因为AMJ2-C11细胞似乎不表达IFN-γmRNA(数据没有显示)。将细胞用50μg/ml的SR抗原进行刺激并与剂量从40到160μM的DMPP一起温育。40μM剂量的DMPP处理减少了这些细胞中IFN-γ表达多至75％(图7)。又一次，这种作用似乎不是剂量依赖性的。

实施例3：烟碱性激动剂对共刺激分子表达的体外作用

在体外测定烟碱和DMPP对B7(CD80)分子表达的影响。将AMJ2-C11细胞(小鼠肺泡巨噬细胞，来自ATCC)与40μM烟碱或DMPP一起培养并用LPS(0.1μg/ml)或SR(50μg/ml)刺激48小时。在处理细胞中CD80表达的百分比约为在LPS和SR刺激的未处理细胞中发现的表达的一半(图8(a)和(b))。

实施例4：对人BAL细胞的研究(AM和淋巴细胞)

因为一个目的是用DMPP或相似的药物治疗患者，因此验证了这种药物对来自HP患者的淋巴细胞的影响。对HP患者进行BAL。将淋巴细胞与其他BAL细胞分离，并用PHA刺激以及与DMPP一起温育。测定DMPP对细胞因子IFN-γmRNA产生的剂量效应(通过RT-PCR)(图9)。

对正常人进行支气管肺泡灌洗，并分离肺泡巨噬细胞。SR刺激的以及烟碱或DMPP处理的细胞再次显示出只有非处理细胞一半的CD86表达。(图10)。

实施例5：其他烟碱性激动剂对短期SR诱导的急性炎症的作用的研究

向小鼠鼻内滴注农民肺的致病原直逗号糖多孢菌(SR)抗原，诱导肺中显著的炎症反应。中性粒细胞是最先募集在炎症部位的炎症细胞。用DMPP(0.5mg/kg)、烟碱(0.5mg/kg)和地棘蛙素(2μg/kg)处理小鼠对SR诱导的炎症有着显著的抑制作用(图11)。将烟碱性激动剂以50μl体积每6小时鼻内给予，并在SR滴注后24小时将小鼠处死。

对烟碱和地棘蛙素观察到了显著的抑制作用，但对DMPP却没有观察到。然而，将用DMPP处理或不用DMPP处理的小鼠数目增加到15只后，我们确实观察到了相对于未处理组的显著抑制作用(图12)。

DMPP处理小鼠的支气管肺泡灌洗液中TNF(一种促炎症细胞因子)水平较低(图13)，这表明炎症的下调可能是由较低的TNF浓度所致。

II-哮喘样炎症

实施例6：体内哮喘模型

在卵白蛋白致敏的小鼠上进行类似试验。假设DMPP减弱针对吸入的过敏原和醋甲胆碱的炎症反应与过高反应性。

将20μg乳化于含2mg氢氧化铝的PBS中的OVA蛋白(鸡蛋白蛋白，Sigma-Aldrich)腹腔内注射以致敏Bal/c小鼠组。4周后，将1.5％/50μlOVA攻击剂量经鼻内给予。每天进行一次攻击连续3天，然后在末次接触气雾剂后24小时评估小鼠肺部的过敏性炎症。在攻击期间，用多种浓度的DMPP处理各组小鼠。进行支气管肺泡灌洗(BAL)，并将该液体于400g离心以从液体中分离出细胞(图14，15，16和17)。

将上清液用于测定肺IL-5水平。评价BAL细胞总数和分类细胞计数(图18)。

用最合适的DMPP剂量重复本试验以评估气道反应性。

AHR的测定

利用计算机控制的通气机(FlexiVENT)测定麻醉的气管切开的通气的小鼠对醋甲胆碱的气道高反应性(AHR)。

通过颈静脉给予增加剂量的醋甲胆碱(0mg/kg-32.5mg/kg)(图19，20)。

实施例7：激动剂处理对IL-4 mRNA表达的影响

激动剂处理对IL-4mRNA表达的影响也被测定(53)，已经知道该细胞因子参与哮喘的发生。40μM的烟碱减少IL-4mRNA表达多达92％(图9)。DMPP完全阻断了IL-4 mRNA表达(图21)。如先前所证实的，当用SR抗原刺激细胞时，无IL-4 mRNA表达(数据没有显示)。

实施例8：各种激动剂对嗜酸性粒细胞迁移的作用

为了进一步研究烟碱性激动剂哮喘中炎症下调的作用，我们测定了各种激动剂对嗜酸性粒细胞迁移的作用。

嗜酸性粒细胞和其他炎症细胞对肺部组织的浸润是哮喘的重要特征和气道炎症及高反应性的原因。炎症细胞从循环到肺包括迁移通过血管内皮，基底膜和胞外基质成分。炎症细胞通过产生蛋白酶而穿过基底膜。在这些初步的体外实验中，我们研究了不同烟碱性激动剂对纯化的血嗜酸性粒细胞迁移通过人造基底膜(Matrigel包被的趋化室)的影响。DMPP诱导了对嗜酸性粒细胞迁移的剂量相关性抑制(图22)，然而这一作用被拮抗剂美家明(MEC)逆转(图23)。其他的烟碱性激动剂包括烟碱，地棘蛙素和胞嘧啶进一步确认了这种抑制作用(图24)。结果用与无激动剂的对照条件相比的抑制百分比(激动剂处理的细胞)来表示。

这些结果说明烟碱性激动剂下调降解基底膜成分的蛋白酶的合成或活化，从而抑制嗜酸性粒细胞迁移到肺粘膜中。

实施例9：烟碱性激动剂对胶原产生的影响

哮喘的特征为气道结构改变，包括上皮下胶原沉积，这可能是该疾病慢性的原因。成纤维细胞的胶原合成与其降解之间的失衡可能参与这个过程(56)。在预实验中，我们研究了烟碱性激动剂对原代正常成纤维细胞合成胶原A1的影响。通过RT-PCR评估胶原A1基因的表达。

结果表示为激动剂处理细胞与未处理细胞相比的基因表达百分比。

DMPP以剂量依赖性方式抑制胶原A1基因表达(图25)。1和10μM烟碱有着轻微的抑制作用，而更高浓度却没有作用(图26)，这可能是因为受体的脱敏。实现抑制可能需要更低的剂量，这将被测试。对地棘蛙素也观察到了抑制作用(图27)。

尽管本发明已如上通过优选实施方案的方式进行了描述，但是可以在不偏离于所附的权利要求书中限定的本发明的精神和本质的情况下加以修改。

参考文献

1.Cormier，Y.，J.Belanger，和P.Durand.1985.魁北克乳牛农场农夫中影响针对农民肺抗原的血清沉淀素产生的因素“Factorsinfluencing the development of serum precipitins to farmer′s lungantigen in Quebec dairy farmers.”Thorax 40(2)：138-42.

2.Cormier，Y.，L.Gagnon，F.Berube-Genest，和M.Fournier.1988.试验性外源性过敏性肺泡炎的序贯支气管肺泡灌洗，吸烟的影响。“Sequential  bronchoalveolar lavage in experimental extrinsicallergic alveolitis.The influence of cigarette smoking.”Am RevRespir Dis 137(5)：1104-9.

3.Cormier，Y.，E.IsraeI-Assayag，G.Bedard，和C.Duchaine.泥煤苔加工厂工人中的过敏性肺炎“Hypersensitivity pneumonitis inpeat moss processing plant workers.”Am J Respir Cdt Care Med158(2)：412-7.

4.Gariepy，L.，Y.Cormier，M.Laviolette，和A.Tardif.1989.无症状的乳牛场农夫中支气管肺泡灌洗细胞和血清沉淀素的预测价值.“redictive value of bronchoalveolar lavage cells and serumprecipitins in asymptomatic dairy tarmers.”Am Rev Respir Dis140(5)：1386-9.

5.Lawrence，E.C.，T.B.Fox，R.B.Teague，K.Bloom，和R.K.Wilson.1986.吸烟与结节病患者中的支气管肺泡T细胞群“Cigarettesmoking and bronchoalveolar T cell populations in sarcoidosis.”AnnN Y Acad Sci 465：657-64.

6.Valeyre，D.，P.Soler，C.Clerici，J.Pre，J.P.Battesti，R.Georges，和A.J.Hance.1988.吸烟和肺结节病：吸烟对该疾病的流行，临床表现，肺泡炎以及演变的影响“Smoking and pulmonarysarcoidosis：effect of cigarette smoking on prevalence，clinicalmanifestations，alveolitis，and evolution of the disease.”Thorax43(7)：516-24.

7.Rubin，D.T.，和S.B.Hanauer. 2000.吸烟和炎性肠病“Smoking and inflammatory bowel disease.”Eur J GastroenterolHepatol 12(8)：855-62.

8.Thomas，G.A.，J.Rhodes，J.T.Green，和C.Richardson.2000.吸烟在炎性肠病中的作用：对治疗的提示“Role of smoking ininflammatory bowel disease：implications for therapy.”Postgrad MedJ 76(895)：273-9.

9.Guslandi，M.1999.溃疡性结肠炎的烟碱治疗“Nicotinetreatment for ulcerative colitis.”Br J Clin Pharmacol 48(4)：481-4.

10.Guslandi，M.1999.单疗程烟碱治疗在急性溃疡性结肠炎中的长期效果：在12个月随诊研究中缓解持续“Long-term effects of asingle course of nicotine treatment in acute ulcerative colitis：remission maintenance in a 12-month follow-up study.”Int JColorectal Dis 14(4-5)：261-2.

11.Rezvani，A.H.，和E.D.Levin.2001.烟碱的认知作用“Cognitive effects of nicotine.”Biol Psychiatry 49(3)：258-67.

12.Kelton，M.C.，H.J.Kahn，C.L.Conrath，和P.A.Newhouse.2000.烟碱对帕金森病的作用 “The effects of nicotine onParkinson′s disease.”Brain Cogn43(1-3)：274-82.

13.Bertram，K.G.1998.基础和临床药理学“Basic and clinicalpharmacology.”Editions Appelton和Lange.Stanford，Connecticut.

14.Sekhon，H.S.，Y.Jia，R.Raab，A.Kuryatov，J.F.Pankow，J.A.Whitsett，J.Lindstrom，和E.R.Spindel.1999.出生前的烟碱在猴中增加了肺alpha7烟碱性受体表达以及改变了胎肺的发育“Prenatalnicotine increases pulmonary alpha7 nicotinic receptor expression andalters fetal lung development in monkeys.”J Clin Invest103(5)：637-47.

15.Maus，A.D.，E.F.Pereira，P.I.Karachunski，R.M.Horton，D.Navaneetham，K.Macklin，W.S.Cortes，E.X.Albuquerque，和B.M.Conti-Fine.1998.人和啮齿动物支气管上皮细胞表达功能性的烟碱乙酰胆碱性受体“Human and rodent bronchial epithelial cellsexpress functional nicotinic acetylcholine receptors.”Mol Pharmacol54(5)：779-88.

16.Shriver，S.P.，H.A.Bourdeau，C.T.Gubish，D.L.Tirpak，A.L.Davis，J.D.Luketich，和J.M.Siegfried.2000.胃泌素释放肽受体的性别特异性表达：与吸烟史和肺癌危险性的关系“Sex-specificexpression of gastrin-releasing peptide receptor：relationship tosmoking history and risk of lung cancer.”J Natl Cancer lnst92(1)：24-33.

17.Ferguson，D.G.，M.A.Haxhiu，A.J.To，B.Erokwu，和I.A.Dreshaj.2000.孤束核的气道相关神经元中表达烟碱乙酰胆碱性受体alpha3亚型，但这对于雪貂的反射性支气管收缩不是必需的。“Thealpha3 subtype of the nicotinic acetylcholine receptor is expressed inairway-related neurons of the nucleus tractus solitarius，but is notessential for reflex bronchoconstriction in ferrets.”Neurosci Lett287(2)：141-5.

18.Singh，S.P.，R.Kalra，P.Puttfarcken，A.Kozak，J.Tesfaigzi，和M.L.Sopori.2000.急性和慢性烟碱暴露通过不同的途径调节免疫系统“A cute and chronic nicotine exposures modulate the immunesystem through different pathways.”Toxicol Appl Pharmaco1164(1)：65-72.

19.Kalra，R.，S.P.Singh，S.M.Savage，G.L.Finch，和M.L.Sopori.2000.吸烟对免疫应答的影响：慢性烟草暴露削弱T细胞中抗原介导的信号作用并耗尽IP3敏感性钙离子储备“Effects of cigarettesmoke on immune response：chronic exposure to cigarette smokeimpairs antigen-mediated signaling in T cells and depletesIP3-sensitive Ca(2+)stores.”J Pharmacol Exp Ther 293(1)：166-71.

20.Sugano，N.，K.Shimada，K.Ito，和S.Mural.1998.烟碱通过调节核因子kappaB活化而抑制U937细胞中炎症介质的产生。“Nicotine inhibits the production of inflammatory mediators in U937cells through modulation of nuclear factor-kappaB activation.”Biochem Biophys Res Commun 252(1)：25-8.

21.Yates，S.L.，M.Bencherif，E.N.Fluhler，和P.M.Lippiello.1995.大鼠慢性暴露于主流烟草后烟碱乙酰胆碱性受体上调以及烟碱的alpha4beta2受体“Up-regulation of nicotinic acetylcholine receptorsfollowing chronieexposure of rats to mainstream cigarette smoke oralpha 4 beta 2 receptors to nicotine.”Biochem Pharmacol50(12)：2001-8.

22.Sopori，M.L.，和W.Kozak.1998.吸烟的免疫调节作用“Immunomodulatory effects of cigarette smoke.”J Neuroimmunol83(1-2)：148-56.

23.Lahmouzi，J.，F.Simain-Sato，M.P.Defresne，M.C.De Pauw，E.Heinen，T.Grisar，J.J.Legros，和R.Legrand.2000.“体外烟碱对兔牙龈成纤维细胞的作用Effect of nicotine on rat gingival fibroblastsin vitro.”Connect Tissue Res 41(1)：69-80.

24.Geng，Y.，S.M.Savage，S.Razanai-Boroujerdi，和M.L.Sopori.1996.烟碱对免疫应答的作用.iI.慢性烟碱处理诱导T细胞无反应性“Effects of nicotine on the immune response.II.Chronicnicotine treatment induces T cell anergy.”J Immunol 156(7)：2384-90.

25.McCrea，K.A.，J.E.Ensor，K.Nail，E.R.Bleecker，和J.D.Hasday.1994.吸烟者肺中改变的细胞因子调节“Altered cytokineregulation in the lungs of cigarette smokers.”Am J Respir Crit CareMed 150(3)：696-703.

26.Ohta，T.，N.Yamashita，M.Maruyama，E.Sugiyama，和M.Kobayashi.1998.吸烟减少人肺泡巨噬细胞分泌白介素8“Cigarettesmoking decreases interleukin-8 secretion by human alveolarmacrophages.”Respir Med 92(7)：922-7.

27.Suzuki，N.，S.Wakisaka，Y.Takeba，S.Mihara，和T.Sakane.1999.吸烟对人淋巴细胞Fas/Fas配体表达的作用“Effects ofcigarette smoking on Fas/Fas ligand expression of humanlvmphocytes.”Cell Immunol 192(.1)：48-53.

28.Zia，S.，A.Ndoye，V.T.Nguyen，和S.A.Grando.1997.烟碱增强调节钙离子代谢与调节呼吸上皮细胞粘附及运动的alpha3，alpha4，alpha5与alpha7烟碱性受体的表达“Nicotine enhancesexpression of the alpha 3，alpha 4，alpha 5，and alpha 7 nicotinicreceptors modulating Calcium metabolism and regulating adhesionand motility of respiratory epithelial cells.”Res Commun Mol PatholPharmacol 97(3)：243-62.

29.Zhang，S.，和T.M.Petro.1996.烟碱对小鼠CD4 T细胞反应的作用“The effect of nicotine on murine CD4 T cell responses.Int JImmunopharmacol 18(8-9)：467-78.

30.Bugeon，L.，和M.J.Dallman.2000.T细胞的共刺激“Costimulation of T cells.“Am J Respir Crit Care Med 162(4 Pt2)：S164-8.

31.Green，J.M.2000.B/7/CD28/CTLA4 T细胞活化途径，对炎性肺部疾病的提示“The B7/CD28/CTLA4 T-cell activation pathway.Implications for inflammatory lung disease.“Am J Respir Cell MolBiol 22(3)：261-4.

32.Lenschow，D.J.，L.Walunas，和J.A.Bluestone.1996.T细胞共刺激的CD28/B7系统“CD28/B7 system of T cell costimulation.”Annu Rev Immunol 14：233-58.

33.Walunas，T.L.，和J.A.Bluestone.1998.CTLA-4在体内调节耐受诱导及T细胞分化“CTLA-4 regulates tolerance induction andT cell differentiation in vivo.”J Immunol 160(8)：3855-60.

34.Walunas，T.L.，D.J.Lenschow，C.Y.Bakker，P.S.Linsley，G.J Freeman，J.M.Green，C.B.Thompson，和J.A.Bluestone.1994CTLA-4能作用为T细胞活化的负性调节物“CTLA-4 can function asa negative regulator of T cell activation”Immunity 1(5)：405-13.

35.IsraeI-Assayag，E.，A.Dakhama，S.Lavigne，M.Laviolette，和Y.Cormier.1999.过敏性肺炎中肺泡巨噬细胞上共刺激分子的表达“Expression of costimulatory molecules on alveolar macrophages inhypersensitivity pneumonitis.”Am J Respir Cdt Care Med159(6)：1830-4.

36.IsraeI-Assayag，E.，M.Fournier，和Y.Cormier.1999.CTLA4-Ig对T细胞共刺激的阻断抑制了小鼠过敏性肺炎中的肺部炎症“Blockade of T cell costimulation by CTLA4-Ig inhibits lunginflammation in murine hypersensitivity pneumonitis.”J Immunol163(12)：6794-9.

37.Larche，M.，S.J.Till，B.M.Haselden，J.North，J.Barkans，C.J.Corrigan，A.B.Kay，和D.S.Robinson.1998.在特应性哮喘中通过CD86的共刺激参与气道抗原呈递细胞及T细胞对过敏原的反应“Costimulation through CD86 is involved in airwayantigen-presenting cell and T cell responses to allergen in atopicasthmatics.”J Immunol 161(11)：6375-82.

38.Mathur，M.，K.Herrmann，Y.Qin，F.Gulmen，X.Li，R.Krimins，J.Weinstock，D.Elliott，J.A.Bluestone，和P.Padrid.1999.CD28与CD80或CD86的相互作用足以诱导小鼠的过敏性气道炎症“CD28 interactions with either CD80 or CD86 are sufficient toinduce allergic airway inflammation in mice.”A m J Respir Cell MolBiol 21(4)：498-509.

39.Nicod，L.P.，和P.Isler.1997.结节病中肺泡巨噬细胞共表达高水平的CD86(B7.2)、CD40及CD30L“Alveolar macrophages insarcoidosis coexpress high levels of CD86(B7.2)，CD40，and CD30L.”Am J Respir Cell Mol Biol 17(1)：91-6.

40.Kesingland，A.C.，C.T.Gentry，M.S.Panesar，M.A.Bowes，J.M.Vernier，R.Cube，K.Walker，和L.Urban.2000.烟碱乙酰胆碱性受体激动剂(+)-地棘蛙素及ABT-594在持续性炎性和神经病性疼痛模型中的止痛特性“A nalgesic profile of the nicotinic acetylcholinereceptor agonists，(+)- epibatidine and ABT-594 in models ofpersistent inflammatory and neuropathic pain.”Pain 86(1-2)：113-8.

41.Mellon，R.D.，和B.M.Bayer.1999.吗啡、烟碱和地棘蛙素对淋巴细胞活性及下丘脑-垂体-肾上腺轴反应的作用“The effects ofmorphine，nicotine and epibatidine on lymphocyte activity andhypothalamic-pituitary-adrenal axis responses.”J PharmacolExp Ther 288(2)：635-42.

42.Yokotani，K.，M.Wang，S.Okada，Y.Murakami，和M.Hirata.2000.烟碱乙酰胆碱性受体介导的分离的大鼠胃释放去甲肾上腺素的表征“Characterization of nicotinic acetylcholinereceptor-mediated noradrenaline release from the isolated ratstomach.”Eur J Pharmaco1402(3)：223-9.

43.Yost，C.S.，和B.D.Winegar.1997.激动剂和竞争性拮抗剂对成人与胎儿型烟碱乙酰胆碱性受体的效力“Potency of agonists andcompetitive antagonists on adult- and fetal- type nicotinicacetylcholine receptors.”Cell Mol Neurobiol 17(1)：35-50.

44.Fecho，K.，K.A.Maslonek，L.A.Dykstra，和D.T.Lysle.1993.交感神经系统诱导的免疫状态的改变：DMPP单独和联合吗啡的免疫调节作用“Alterations of immune status induced bv thesympathetic nervous system：immunomodulatory effects of DMPPalone and in combination with morphine.”Brain Behav Immun7(3)：253-70.

45.Thompson，D.C.，R.J.Altiere，和L.Diamond.1990.烟碱性激动剂对猫的支气管舒缩紧张性的调节“Nicotinic agonistmodulation of feline bronchomotor tone.”Clin Exp PharmacolPhysiol 17(2)：83-97.

46.Barnes PJ.2001.COPD治疗的未来进展“Future Advancesin COPD Therapy”Respiration 68(5)：441-8.

47.Lasky JA和Ortiz，LA.2001.抗纤维化治疗用于治疗肺纤维化“Antifibrotic therapy for the treatment of pulmonary fibrosis.”Am J Med Sci 322(4)：213-21.

48.Baron，J.A.1996.烟碱和吸烟的有益作用：真实的，可能的以及假的。“Beneficial effects of nicotine and cigarette smoking：thereal，the possible and the spurious.”Br Med Bull 52(1)：58-73.

49.Waldum，H.L.，O.G.Nilsen，T.Nilsen，H.Rorvik，v.Syversen，A.K.Sanvik，O.A.Haugen，S.H.Torp，和E.Brenna.1996.吸入烟碱的长期作用“Long-term effects of inhaled nicotine.”Life Sci58(16)：1339-46.

50.Warren，C.P.1977.外源性过敏性肺泡炎：一种在非吸烟者中更常见的疾病“Extrinsic allergic alveolitis：a disease commoner innon-smokers.”Thorax 32(5)：567-9.

51.Cormier，Y.，G.M.Tremblay，M.Fournier，和E.Israel-Assayag.1994.长期病毒强化肺对Saccharopolysporarectivirgula的反应“Long-term viral enhancement of lung response toSaccharopolyspora rectivirgula.”Am J Respir Cdt Care Med 149(2Pt1)：490-4.

52.Gudmundsson，G.，和G.W.Hunninghake.1997.干扰素-γ对于过敏性肺炎发生是必要的“Interferon-gamma is necessary for theexpression of hypersensitivity pneumonitis.”J Clin Invest99(10)：2386-90.

53.Denis，M.，M.Bedard，M.Laviolette，和Y.Cormier.1993.关于农民肺患者支气管肺泡灌洗液中单核因子释放及天然杀伤细胞活性的研究“A study of monokine release and natural killer activityin the bronchoalveolar lavage of subjects with farmer′s lung.”AmRev Respir Dis 147(4)：934-9.

54.Wahlstrom，J.，K.Katchar，H.Wigzell，O.Olerup，A.Eklund，和J.Grunewald.2001.对结节病中肺部和血液CD4(+)及CD8(+)T细胞中细胞内细胞因子的分析“Analysis of intracellular cytokines incd4(+)and cd8(+)lung and blood t cells in sarcoidosis.”Am J RespirCdt Care Med 163(1)：115-21.

55.Cohn，L.，C.Herrick，N.Niu，R.Homer，和K.Bottomly.2001.IL-4通过抑制IFN-gamma产生而促进气道嗜酸性粒细胞增多：说明了IFN-gamma在调节过敏性气道炎症中的新作用“IL-4 promotesairway eosinophilia by suppressing IFN-gamma production：defininga novel role for IFN-gamma in the regulation of allergic airwayinflammation.”J Immunol 166(4)：2760-7.

56.Laliberte R.，Rouabhia M，Bosse M，Chakir J.2001哮喘支气管成纤维细胞降解胶原的能力减弱“Decreased capacity of asthmaticbronchial fibroblasts to degrade collagen.”Matrix BiolJan；19(8)：743-53.

57.Boulet，L.P.，H.Turcotte，M.Laviolette，F.Naud，M.C.Bernier，S.Martel，和J.Chakir.2000.新诊断哮喘相对长期轻度哮喘中的气道过高反应性，炎症及上皮下胶原沉积，吸入皮质类固醇的影响“Airway hyperresponsiveness，inflammation，and subepithelialcollagen deposition in recently diagnosed versus long-standing mildasthma.Influence of inhaled corticosteroids.”A m J Respir Crit CareMed 162(4 Pt 1)：1308-13.

58.Dempsey，O.J.2000.白三烯受体拮抗剂治疗“Leukotrienereceptor antagonist therapy.”Postgrad Med J 76(902)：767-73.

59.Busse，W.W.1998.白三烯与炎症“Leukotrienes andinflammation.”Am J Respir Crit Care Med 157(6 Pt 2)：S210-3；discussion S247-8.

60.Zisman，D.A.，.J.P.Lynch，G.B.Toews，E.A.Kazerooni，A.Flint，和F.J.Martinez.2000.环磷酰胺治疗特发性肺纤维化：在对皮质类固醇无反应患者中的前瞻性研究“Cyclophosphamide in thetreatment of idiopathic pulmonary fibrosis：a prospective study inpatients who failed to respond to corticosteroids.”Chest117(6)：1619-26.

61.Redington，A.E.2000.纤维化和气道重建“Fibrosis andairway remodelling.”Clin Exp Allergy 30 Suppl1：42-5.

62.Frew，A.J.，和Plummeridge MJ.2001.哮喘的可选择药物“Alternative agents in asthma.”J Allergy Clin Immunol 108(1)：3-10.

Claims (13)

1.减轻或预防动物炎症的方法，包括向所述动物施用结合并调节烟碱性受体功能的药剂。

2.权利要求1的方法，其中所述的药剂引起烟碱性受体功能的上调。

3.权利要求1或2的方法，其中所述的炎症是肺部炎性疾病的结果。

4.权利要求3的方法，其中所述的肺部炎性疾病选自如哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、肺间质纤维化(IPF)、结节病、过敏性肺炎(HP)、慢性HP以及闭塞性细支气管炎伴机化性肺炎(BOOP)。

5.权利要求3或4的方法，其中所述的药剂是二甲基苯基哌嗪鎓(DMPP)。

6.结合并调节烟碱性受体功能的药剂用于制备减轻或预防动物炎性疾病的药物的用途。

7.权利要求6的用途，其中所述的炎性疾病是肺部炎性疾病。

8.权利要求6或7的用途，进一步包括其他能够减轻或预防炎性疾病的药剂。

9.权利要求6到8中任何一项的用途，其中所述药物是口服、舌下、腹腔内、静脉内、吸入或鼻用的形式。

10.权利要求7的用途，其中所述的肺部炎性疾病选自如哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、肺间质纤维化(IPF)、结节病、过敏性肺炎(HP)、慢性HP以及闭塞性细支气管炎伴机化性肺炎(BOOP)。

11.权利要求10的用途，其中所述疾病是哮喘。

12.权利要求11的用途，其中所述药剂通过靶向于参与与哮喘相关的炎症、支气管高反应或支气管(纤维化)重建的烟碱性受体而减轻或预防哮喘。

13.权利要求6到12中任何一项的用途，其中所述药剂是二甲基苯基哌嗪鎓(DMPP)。

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