CN1467216A - 保护化2'-脱氧胞苷类的精制法 - Google Patents

保护化2'-脱氧胞苷类的精制法 Download PDF

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Abstract

本发明的课题是：提供一种现有技术难以有效精制的保护化2’－脱氧胞苷类的有效精制方法。本发明的技术解决方案是：制作与水形成复合体的结晶，通过结晶化除去杂质，从而高纯度地精制保护化2’－脱氧胞苷类。至此，可以仅用柱色谱法容易地合成高纯度的保护化2’－脱氧胞苷类，使大规模生产成为可能。

Description

保护化2’-脱氧胞苷类的精制法
技术领域
本发明涉及保护化2’-脱氧胞苷类及其与水形成复合体的结晶。更详细地说，本发明涉及5’位保护化2’-脱氧胞苷类的制造方法、精制方法。
5’位保护化2’-脱氧胞苷类是近年来正在开发的作为反义DNA等的原料有用的化合物。
背景技术
近年，随着基因组创药的发展，反义DNA医药等被急速开发。随之，构成原料的DNA低聚物、以及构成低聚物原料的保护化脱氧核苷类的需要日趋增大。另一方面，在医药品的用途中，为了极力抑制由含有的杂质生成的副生成物，有必要使用非常高纯度的中间体制品。
至今，按照特开昭58-180500号公报、特开昭63-179889号公报和特表平6-507883号公报等示例表明那样，用柱色谱法精制5’位保护化脱氧核苷类。在该方法中，除去极性和构造差别大的杂质的精制是比较容易的，但除去有类似构造的杂质是困难的。例如，由二甲氧基三苯甲基那样的三苯甲基衍生物保护5’，3’位二者的羟基的杂质，和由二甲氧基三苯甲基那样的三苯甲基衍生物保护不是必要的5’位而是3’位的羟基的杂质等就特别难以除去，另外，这些杂质是医药品制造上对下步工序以后影响大的杂质，其混入带来非常大的问题。此外，柱色谱法在工业化中需要庞大的精制装置，而且从需要大量的溶剂出发，对于将来的大量生产、大量供给来说不能不说存在非常大的问题。
另外，至今也正在进行不用柱色谱法除去杂质的研究。具体地说，关于用再沉淀法的精制，在特开昭60-152495号公报和PCT申请WO200075154公报及WO0039138公报中已被公开。所谓再沉淀法，是预先将粗化合物先在可溶性溶剂中溶解后，添加不溶性溶剂或滴入不溶性溶剂，强制地再析出的方法。因此，基本的精制能力低，除去上述所示的杂质是困难的。另外，在工业上适当地调整可溶性溶剂和不溶性溶剂量的比是困难的，量比错误时容易油化，或者发生具有粘性的沉淀，精制容易失败。实际上，按照特开昭60-152495公报的方法，有时发生得到粘稠的软粘糖状的情况，在工业上存在问题。虽然至今已公开了用再沉淀的非结晶化方法，但却未知有通过结晶化得到结晶的方法。
发明内容
鉴于历来所存在问题，本发明提供一种有效且无需特别设备的非常高纯度的保护化2’-脱氧胞苷类的制造方法。
本发明人对上述课题进行了锐意研究，结果在由含保护化2’-脱氧胞苷类及水的溶液，实现与水形成复合体的保护化2’-脱氧胞苷类的结晶化方面获得成功。由此发现，可以用现有技术中认为是困难的结晶化或再结晶的精制法进行精制，从而完成了本发明。即：
本发明是：
[1]保护化2’-脱氧胞苷类的与水形成复合体的结晶，其特征在于，用一般式(1)表示。
(式中，m及n分别独立地表示任意的整数，R1表示4-甲氧基三苯甲基、4，4’-二甲氧基三苯甲基或三苯甲基，B1表示保护氨基的胞嘧啶基)
[2][1]中所述的与水形成复合体的结晶，其特征在于，一般式(1)表示的化合物用一般式(2)表示。
Figure A0313798700052
(式中，m及n与上述同义)
[3][2]中所述的与水形成复合体的结晶，其特征在于，N4-苯酰-3’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的含量为0.1％以下。
[4]保护化2’-脱氧胞苷类的精制方法，其特征在于，由含有一般式(3)(式中，R1及B1与上述同义)表示的化合物和水的溶液，使一般式(3)表示的保护化2’-脱氧胞苷类作为与水形成复合体的结晶析出，并将其回收。
[5][4]中所述的保护化2’-脱氧胞苷类的精制方法，其特征在于，溶液中所含水的量相对于一般式(3)为0.5当量以上。
[6][4]或[5]中所述的保护化2’-脱氧胞苷类的精制方法，其特征在于，一般式(3)表示的化合物是式(4)。
[7][6]中所述的保护化2’-脱氧胞苷类的精制方法，其特征在于，所得的结晶中N4-苯酰-3’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的含量为0.1％以下。
[8]一般式(3)或一般式(4)表示的保护化2’-脱氧胞苷类的精制方法，其特征在于，将一般式(1)或一般式(2)表示的保护化2’-脱氧胞苷类的与水形成复合体的结晶在大气压以下的压力下干燥，使其不与水形成复合体。
具体实施方式
以下详细地说明本发明。
在本发明的一般式(1)或一般式(3)的B1中，作为保护氨基的胞嘧啶基的保护基，可以举出烷基、烷基酰基或者可被取代的苯酰基。
此时，烷基不管是直链状还是分支都可以，也可以再结合其它的官能团(取代基)。作为该取代基例如可以举出甲基、乙基、正丙基、2-丙基、正丁基、i-丁基等。
烷基酰基不管是直链状还是分支都可以，也可以形成环，也可以再结合其它的官能团(取代基)。作为该取代基例如可以举出乙酰基、丙酰基、正丁酰基、i-丁酰基、特戊酰基、戊酰基、异戊酰基、环丙基、苯乙酰基、苯氧基乙酰基、(异丙基苯氧基)乙酰基等。
苯酰基不管是无取代还是取代都可以，另外，也可以在苯基的2位、3位、4位的任一位置上有取代基。另外，也可以在多个位置上有取代基。作为取代基例如可以举出甲基、乙基、2-丙基、正丁基、叔丁基等烷基，羟基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、2-丙氧基、正丁氧等烷氧基，硝基，氟基、氯基、溴基、碘基等卤素基，氨基，甲胺基、乙胺基、正丙胺基、二甲胺基、二乙胺基、二异丙胺基等烷胺基，乙酰基、丙酰基、苯酰基等酰基，苯基，吡啶基等。
具体地说，可以举出苯酰基、2-氯苯酰基、3-氯苯酰基、4-氯苯酰基、2-溴苯酰基、3-溴苯酰基、4-溴苯酰基、2-氟苯酰基、3-氟苯酰基、4-氟苯酰基、2-甲氧基苯酰基、3-甲氧基苯酰基、4-甲氧基苯酰基、2-硝基苯酰基、3-硝基苯酰基、4-硝基苯酰基、2-氨基苯酰基、3-氨基苯酰基、4-氨基苯酰基、2-甲基氨基苯酰基、3-甲基氨基苯酰基、4-甲基氨基苯酰基、2-二甲基氨基苯酰基、3-二甲基氨基苯酰基、4-二甲基氨基苯酰基、4-苯基苯酰基、4-乙酰基苯酰基等。
含有保护化2’-脱氧胞苷类和水的溶液，在含有该2种成分的范围内可以含有溶剂。此时的溶剂只要是能使保护化2’-脱氧胞苷类作为与水形成复合体的结晶析出的溶剂，就不作特别的限定，例如可以举出甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、戊醇、环己醇等醇类，二乙醚、四氢呋喃、二噁烷等醚类，丙酮、甲乙酮、甲基异丁基酮等酮类，戊烷、己烷、甲基戊烷、环己烷、庚烷、壬烷、癸烷等饱和烃类，苯、甲苯、异丙基苯、二甲苯、均三甲基苯、二异丙基苯、三异丙基苯等芳香族烃类，二氯甲烷、三氯甲烷、二氯乙烷等卤化烃类，吡啶、二甲基吡啶、喹啉等吡啶类，三乙胺、三丁胺等3级胺类、乙腈、二甲替甲酰胺、二甲基咪唑啉酮、二甲亚砜等极性溶剂等。这些溶剂可以单一或数种类混合使用。
所谓与水形成复合体的结晶，是指为形成结晶构造，水起辅助作用的状态，包括使水以进入晶格中的形态形成结晶，或者通过与水的弱的相互作用形成复合体等任一种情况。对于与水的复合体的形态和结晶构造不作特别的限制。
在保护化2’-脱氧胞苷类的与水形成复合体的结晶中，也可以在不阻碍结晶化的范围内含微量溶剂，该溶剂来自结晶化时使用的含保护化2’-脱氧胞苷类和水的溶液。
结晶化时的水量相对于保护化2’-脱氧胞苷类，可以有0.5当量以上，但优选为1当量以上。
作为与水形成复合体的方法不作特别的限定，例如可以向含有保护化2’-脱氧胞苷类的溶液中添加水，或者也可以将保护化2’-脱氧胞苷类加到含水的溶剂中。
结晶化时的保护化2’-脱氧胞苷类的浓度，只要是能够结晶化的浓度就不作特别的限定，但通常为1％至50％、优选为5％至40％的范围内进行。
结晶化时的温度不作特别的规定，但优选为-10℃至溶剂的沸点的范围内。另外，通常用1次结晶化就可以充分精制，但重复进行再结晶可以得到更高纯度。另外，再结晶时也可以使接种晶种。
这样得到的保护化2’-脱氧胞苷类的与水形成复合体的结晶，根据需要，通过在大气压以下的压力、优选0.1mmHg至100mmHg下进行干燥，可以得到水分含量降低的保护化2’-脱氧胞苷类的与水形成复合体的结晶、不与水形成复合体的保护化2’-脱氧胞苷类的粉末，或者保护化2’-脱氧胞苷类的粉末。
作为干燥时的温度，只要能除去水就不作特别的限定，但通常在室温至200℃的范围内进行。另外，干燥操作时，一边使氮气等不含水分的气体流过，一边进行干燥，或者也可以用硅胶、五氧化二磷等脱水剂脱水。
由本发明的精制法除去的杂质，可以举出N4-苯酰-3’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷、N4-苯酰-3’，5’-O-双(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷等，这些杂质中N4-苯酰-3’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷在保护化2’-脱氧胞苷类中的含量和与水是否形成复合体无关，为0.1％以下，优选0.01％以下，N4-苯酰-3’，5’-O-双(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷在保护化2’-脱氧胞苷类中的含量和与水是否形成复合体无关，为0.3％以下，优选0.1％以下(此时，％表示用液相色谱分离法测定试样时记录纸的面积比，表示Area％)。
按照以上本发明，能够有效地精制保护化2’-脱氧胞苷类。
【实施例】
以下举出实施例具体说明本发明，但本发明不受其限定。
实施例和比较例的HPLC(高效液相色谱)条件-1(N4-苯酰-2’-脱氧胞苷、N4-苯酰-3’，5’-O-双(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的分析条件)
柱：Develosil TMS-UG-5
     150mm×直径4.6mm
流速：0.6mL/min
柱温度：35℃
检测波长：254nm
移动相：梯度条件
        时间(min)    B液(％)
          0            20
          30           100
          35           100
          37           20
          50           停止[A液]
将NaH2PO4·2水合物(1.92g)、Na2HPO4(2.43g)溶解在水(2940ml)中后，加入MeOH(60ml)，进行混合、脱气。[B液]
将NaH2PO4·2水合物(196mg)、Na2HPO4(248mg)溶解在水(300ml)中后，加入MeOH(2700ml)，进行混合、脱气。
实施例和比较例的HPLC(高效液相色谱)条件-2(N4-苯酰-3’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的分析条件)
柱：YMC-Pack CN A-512
    150mm×直径6.0mm
流速：1.0mL/min.
柱温度：35℃
检测波长：235nm
测定时间：80min.
注入量：10μL
移动相：梯度条件
时间(min.)    B液(％)
0             14
25            50
60            100
80            100
82            14
102           停止[A液]
将NH4H2PO4(1.15g)、(NH4)2HPO4(0.92g)溶解在水(2000ml)中后，进行脱气。[B液]
将乙腈(1200mL)和A液(400ml)混合后，进行脱气。
实施例和比较例的XRD(X射线衍射)测定条件
机器：RAD-1A((株)リガク)
X线靶：Cu 30kV 15mA
测定速度：2°/min.
实施例和比较例的DSC(差式扫描式量热法)分析条件
机器：DSC821e(METTLER TOLEDO)
容器材质：铝制
温度上升速度：5℃/min.
在氮气气流下测定
参考例1
N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的制造
将119.0g的N4-苯酰-2’-脱氧胞苷溶解在1.5L的吡啶中。在室温下用2小时添加113.5g的4，4’-二甲氧基三苯甲基氯化物后，在室温下搅拌4小时。加入33.8g的碳酸氢钠后，再搅拌2小时，然后浓缩反应液。在残留物中加入乙酸乙酯1.2L、水300mL并搅拌。加入少量的饱和盐水而分液，同样再次水洗有机层后，用无水硫酸镁干燥。过滤、馏出溶剂后，用乙酸乙酯溶剂以硅胶柱色谱法精制。一边激烈搅拌，一边将含有目的物的分馏部分滴到2.0L二异丙醚中，然后在室温下搅拌2小时。将过滤所得到的固体在50℃下减压干燥，得到N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的游离体153.3g。用XRD测定该游离体，为非晶态。另外，在该游离体中，作为原料的N4-苯酰-2’-脱氧胞苷、作为副产物的N4-苯酰-3’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷及N4-苯酰-3’，5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷分别含1.0Area％、0.15Area％、2.2Area％。
实施例1N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的与水形成复合体的结晶的合成
将参考例1中合成的N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的游离体(2.0g)，溶解于1，2-二氯乙烷(5mmL)中，加水(0.1g)，在-24℃下析晶1日。滤取所得的结晶后，在50℃下减压干燥，得到N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的与水形成复合体的结晶(0.8g)。用卡尔·费希尔分析，水分值是2.7％。另外，在XRD测定中该结晶有明确的结晶性峰，特别是在5.6°、7°10.3°有急速的吸收。另外，由DSC测定，在109℃下伴随结晶熔化有吸热峰。
这种复合体中含有的N4-苯酰-2’-脱氧胞苷、N4-苯酰-3’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷以及N4-苯酰-3’，5’-O-双(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷分别含0.05Area％、检测界限(0.01％)以下、0.05Area％。NMR(CDCl3)δ8.7(s，1H)、8.3(d，1H)、7.9(d，2H)、7.2-7.6(m，13H)、6.8-6.9(m，4H)、6.3(m，1H)、4.5(m，1H)、4.2(m，1H)、3.8(s，6H)、3.4-3.5(m，2H)、2.7-2.9(m，2H)、2.3(m，1H)
实施例2N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的与水形成复合体的结晶的合成
将参考例1中合成的N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的游离体(2.0g)溶解于乙酸丁酯(5mmL)中，滴下己烷(0.5ml)后，加入水(0.1g)和实施例1中所得到的N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的与水形成复合体的结晶(10mg)，在冰冷化下析晶一日。滤取所得的结晶后，在50℃下减压干燥，得到N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的与水形成复合体的结晶(1.3g)。用卡尔·费希尔分析水分值是2.2％。另外，在XRD测定中该结晶有明确的结晶性峰，特别是在5.6°、7°、10.3°有急速的吸收。另外，由DSC测定，在112℃下伴随结晶熔化有吸热峰。
该复合体中含有的N4-苯酰-2’-脱氧胞苷、N4-苯酰-3’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷以及N4-苯酰-3’，5’-O-双(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷分别含0.12Area％、检测界限(0.01％)以下、0.07Area％。
实施例3N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的与水形成复合体的结晶的合成
将参考例1中合成的N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的游离体(2.0g)溶解于乙腈(5mL)中，滴下水(7ml)后，加入实施例1中所得到的N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的与水形成复合体的结晶(10mg)，在冰冷化下析晶5小时。滤取所得的结晶后，在50℃下减压干燥，得到N4-苯酰5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的与水形成复合体的结晶(1.3g)。另外，该结晶由DSC测定，在112℃下伴随结晶熔化有吸热峰。
该复合体中含有的N4-苯酰-2’-脱氧胞苷、N4-苯酰-3’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷以及N4-苯酰-3’，5’-O-双(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷分别含0.1Area％、检测界限(0.01％)以下、0.04Area％。
实施例4N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的与水形成复合体的结晶的合成
将参考例1中合成的N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的游离体(2.0g)溶解于丙酮(5mL)中，滴下水(8ml)后，加入实施例1中所得到的N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的与水形成复合体的结晶(10mg)，在冰冷化下析晶5小时。滤取所得的结晶后，在50℃下减压干燥，得到N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的与水形成复合体的结晶(1.4g)。另外，该结晶由DSC测定，在114℃下伴随结晶熔化有吸热峰。
该复合体中含有的N4-苯酰-2’-脱氧胞苷、N4-苯酰-3’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷以及N4-苯酰-3’，5’-O-双(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷分别含0.07Area％、检测界限(0.01％)以下、0.1Area％。
实施例5N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的与水形成复合体的结晶的合成
将N4-苯酰-2’-脱氧胞苷(40.3g)悬浮在吡啶(302.4g)中，冷却至10℃。在相同温度下添加4，4’-二甲氧基三苯甲基氯化物(47.5g)后，在10℃下搅拌4小时。反应终了后，加入碳酸氢钠(12.9g)，然后在室温下搅拌2小时后，浓缩反应液。在残留物中加入乙酸乙酯(473g)，在室温下搅拌1小时后，过滤不溶物。在室温下将己烷(140g)滴入得到的有机层中，然后，加入水(3.3g)和实施例1中所得到的N4-苯酰-5’-O-(，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的与水形成复合体的结晶(0.1g)，在室温下析晶一日后，再次滴入己烷(93g)，在室温下析晶5小时。
滤取所得的结晶后，在50℃下减压干燥，得到N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的与水形成复合体的结晶(63.7g)。另外，该结晶由DSC测定，在110℃下伴随结晶熔化有吸热峰。
另外，在该复合体中，作为原料的N4-苯酰-2’-脱氧胞苷、作为副产物的N4-苯酰-3’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷及N4-苯酰-3’，5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷分别含0.05Area％、检测界限(0.01％)以下、0.15Area％。
实施例6N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的与水形成复合体的结晶的精制
将由实施例5所得的N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的与水形成复合体的结晶(60g)、活性炭(3g)加入到乙腈(300g)中，在55℃下进行1小时处理。过滤不溶物后，滴下水(240g)，加入N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的与水形成复合体的结晶(0.1g)，在室温下析晶2小时后，再次滴下水(240g)，在室温下析晶2小时。滤取所得到的结晶后，在50℃下减压干燥，得到N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的与水形成复合体的结晶(55.8g)。用卡尔·费希尔分析水分值是2.3％。
另外，该结晶由DSC测定，在114℃下伴随结晶熔化有吸热峰。
另外，在该复合体中，作为原料的N4-苯酰-2’-脱氧胞苷、作为副产物的N4-苯酰-3’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷以及N4-苯酰-3’，5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷分别含检测界限(0.01％)以下、检测界限(0.01％)以下、0.05Area％。
实施例7N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的合成
用塔板式干燥机，在65℃减压下(10mmHg)一边使氮气流过，一边使N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的与水形成复合体的结晶干燥40小时。干燥后得到目的物N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷(39.1g)的白色粉末。另外，在所得的粉末中所含的水分值是0.1％。在XRD测定中，没有观察到该粉末有明确的结晶性峰，确认已非晶化。在DSC测定中，伴随结晶熔化的吸热峰也消失。
比较例1
参考WO 00/75154。即，将2.00g的N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的游离体[N4-苯酰-2’-脱氧胞苷、N4-苯酰-3’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷以及N4-苯酰-3’，5’-O-双(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷分别含1.0Area％、0.15Area％、2.2Area％。]溶解在2.3mL的乙腈中。一边激烈搅拌一边将该溶液滴入41mL的水中，然后搅拌1小时。滤取析出的白色固体，用水洗涤2次。在50℃下进行减压干燥，得到1.82g的N4-苯酰-5’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷。另外，该固体在XRD及DSC测定中，伴随结晶没有吸收峰或吸热峰，判明没有结晶化。另外，在该复合体中含有的N4-苯酰-2’-脱氧胞苷、N4-苯酰-3’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷以及N4-苯酰-3’，5’-O-双(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷分别是0.9Area％、0.13Area％、1.8Area％，用本方法几乎不能确认精制效果。
根据本发明，可以采用大量制造的方法，能够比现有技术的方法更有效地制造高纯度的保护化2’-脱氧胞苷类。

Claims (8)

1.保护化2’-脱氧胞苷类的与水形成复合体的结晶，其特征在于，用一般式(1)表示。(式中，m及n分别独立地表示任意的整数，R1表示4-甲氧基三苯甲基、4，4’-二甲氧基三苯甲基或三苯甲基，B1表示保护氨基的胞嘧啶基)
2.权利要求1所述的与水形成复合体的结晶，其特征在于，一般式(1)表示的化合物用一般式(2)表示。(式中，m及n与上述同义)
3.权利要求2所述的与水形成复合体的结晶，其特征在于，N4-苯酰-3’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的含量为0.1％以下。
4.保护化2’-脱氧胞苷类的精制方法，其特征在于，由含有一般式(3)(式中，R1及B1与上述同义)表示的化合物和水的溶液，使一般式(3)表示的保护化2’-脱氧胞苷类作为与水形成复合体的结晶析出，并将其回收。
Figure A0313798700031
5.权利要求4所述的保护化2’-脱氧胞苷类的精制方法，其特征在于，溶液中所含水的量相对于一般式(3)为0.5当量以上。
6.权利要求4或5所述的保护化2’-脱氧胞苷类的精制方法，其特征在于，一般式(3)表示的化合物是式(4)。
Figure A0313798700032
7.根据权利要求6所述的保护化2’-脱氧胞苷类的精制方法，其特征在于，所得的结晶中N4-苯酰-3’-O-(4，4’-二甲氧基三苯甲基)-2’-脱氧胞苷的含量为0.1％以下。
8.一般式(3)或一般式(4)表示的保护化2’-脱氧胞苷类的精制方法，其特征在于，将一般式(1)或一般式(2)表示的保护化2’-脱氧胞苷类的与水形成复合体的结晶在大气压以下的压力下干燥，使其不与水形成复合体。
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