CN1429824A

CN1429824A - 一种从红花中分离出的新化合物及其制备方法和医药用途

Info

Publication number: CN1429824A
Application number: CN 02159074
Authority: CN
Inventors: 郭洪祝; 果德安; 程辉; 彭建华
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2002-12-31
Filing date: 2002-12-31
Publication date: 2003-07-16

Abstract

本发明涉及从红花中提取分离出的一种新的化合物。本发明还涉及该化合物在制备药物，尤其是在制备治疗缺血性心脑血管病的药物中的用途。本发明还涉及以该化合物为主要组分的药物组合物。

Description

一种从红花中分离出的新化合物及其制备方法和医药用途

技术领域

背景技术

红花是菊科植物红花Carthamus tinctorius的干燥管状花，属于常用中药，具有活血化瘀，通经止痛的功效，临床上常用于治疗心脑血管疾病及妇科疾病。对于红花活血化瘀有效成分的研究，主要针对其中的水溶性成分进行研究，其中以黄酮类成分为主要组成的黄色素类化合物是主要研究对象。较早期的药效学研究结果表明，此类水溶性成分具有较好的抗实验动物血栓形成的作用。水溶性黄色素类成分的研究自20世纪八十年代已有报道，先后有safflomin A，Safflor yellow A，safflomin B，safflomin C以及Hydroxy safflor yellow A等结构的化合物被分离鉴定，我们在针对红花的活血化瘀的有效成分研究中，分离鉴定了一个新的水溶性化合物，命名为红花苷A(saffloside A)。药效学研究结果表明以该化合物为主要组成的制剂具有良好的抗实验动物血栓形成的作用，针对该化合物经过试验，确定了合理的制备技术，利用该技术制备的药物可以使该化合物的含量高于50％(重量)。

发明内容

本发明的目的是提供一种从红花中分离出的通式(I)的新化合物(红花苷A)及其衍生物：

(I)

本发明的另一个目的是提供上述化合物的制备方法，本发明的制备方法可以使该化合物在药物中的含量高于50％(重量)，包括以下步骤：

1、将红花用水或水溶液提取一次或多次，过滤，收集滤液，再减压浓缩；

2、将上述1的产物离心，取上清液，经大孔吸附树脂吸附，再用有机溶剂洗脱，收集洗脱液，真空浓缩；

3、将浓缩液进行色谱分离(例如上葡聚糖凝胶Sephadex G-25)，以水洗脱，收集对应的色带，真空浓缩，将浓缩液干燥(例如喷雾干燥或冷冻干燥)，即得到含有红花苷A的提取物。

上述方法获得的提取物中红花苷A的含量大于90％。

本发明的方法优选包括：

1、将红花药材加水浸泡2小时，煮沸后80℃保温2小时，提取2次，提取液滤过，合并滤液，减压浓缩至浸膏密度1.05-1.10，冷置。

2、将冷置后的浸膏离心，取上清液，经大孔吸附树脂吸附，先以2倍柱床体积的水洗脱，再以5倍柱床体积的5％乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，50℃以下真空浓缩；

3、将浓缩液上葡聚糖凝胶Sephadex G-25，以水洗脱，收集对应的色带，50℃以下真空浓缩，将浓缩液喷雾干燥或冷冻干燥，即得到含有红花苷A的提取物。

上述制备方法只是一种非限定性举例，本发明包括任何使红花苷A含量大于50％的提取和制备方法。

本发明的另一个目的是提供通式(I)的化合物及其衍生物在制备治疗心脑血管病的药物中的用途。

本发明还有一个目的是提供含有治疗有效量的通式(I)的化合物及其衍生物的药物组合物。本发明提供的以红花苷A为主要组成的提取物可以作为有效成分与多种医用辅料(赋型剂，稀释剂，香味剂、甜味剂，润滑剂等)配合，制成多种剂型的药物使用，如冻干粉针，注射液，大输液，片剂，胶囊，颗粒剂以及口服液等。

附图简述

图1是二维核磁共振谱的异核远程相关谱HMBC谱图。

以下通过实施例和试验例对本发明作进一步说明，但是本发明并不受限于这些实施例。实施例1

红花药材，加10-14倍量水80℃提取二次，每次1.5小时，合并提取液，离心分取上清液，浓缩至相对密度1.10～1.14(50℃)，4℃冷置24小时，离心分取上清液，注入已处理过的大孔吸附树脂柱中(药材与树脂的比例为1∶50 )，流速10ml/min，使其通过大孔吸附树脂柱吸附，分别以3倍柱床体积的水(流速20ml/min)、5倍量5％乙醇溶液洗脱(流速20ml/min)，收集5％乙醇洗脱溶液，浓缩至相对密度1.20(50℃)，滤过，滤液注入葡聚糖凝胶Sephadex G-25柱上(流速10ml/min)，以水洗脱(流速10ml/min)，收集黄色色带，经过两次层析，减压浓缩至干，干燥物中红花苷A的含量大于90％。

实施例2

红花药材，加12倍量水80℃提取三次，每次1.5小时，合并提取液，离心分取上清液，浓缩至相对密度1.10～1.14(50℃)，静置24小时，离心分取上清液，注入已处理过的大孔吸附树脂柱中(药材与树脂的比例为1∶20)，流速10ml/min，使其通过树脂柱吸附，分别以3倍柱床体积的水(流速20ml/min)、5倍量10％乙醇溶液洗脱(流速20ml/min)，收集10％乙醇洗脱溶液，浓缩至相对密度1.10(50℃)，滤过，滤液注入葡聚糖凝胶柱上(流速10ml/min)，以水洗脱(流速10ml/min)，收集黄色色带，浓缩至干，以无菌注射用水溶解，超滤，分装，冷冻干燥，干燥物中红花苷A的含量大于70％。红花苷A的理化数据为：

分子组成：C₂₇H₃₂O₁₆分子量：612；高分辨质谱HR SI MS(negative)：m/z 611.1634[M-H]⁺(calcd.for C₂₇H₃₁O₁₆：611.1612)；比旋光度：[α]_D ²⁰+62.5°(c0.64，H₂O)；紫外光谱UV：λ_maxnm(logε)：400.1(4.20)nm；红外光谱IR：v_max cm^-1：3401，1619，1601，1509，1441；核磁共振氢谱¹H NMR(in DMSO-d_s)：δppm 18.7(1H，s，5-OH) ，9.81(1H，s，13-OH)，7.43(1H，d，15.2，H-8) ，7.31 (1H，d，5.5，H-9)，7.42(2H，d，9.0，H-11，15) ，6.77(2H，d，9.0，H-12，14) ，4.21(1H，d，9.5，H-1”)，4.12(1H，m，H-2”)，3.66 (1H，d，9.5，H-1’)，3.39(1H，m，H-2’)，3.10(1H，m，H-3”)，3.06(1H，m，H-5’)，3.05(1H，m，H-4”)，3.04(1H，m，H-3’)，2.95(1H，m，H-4’)，3.55(2H，m，H-6a’，6a”)，3.35(2H，m，H-6b’，6b”)；核磁共振碳谱¹³C NMR(in DMSO-d_s)：δppm 194.80(s，C-1)，85.2(s，C-2)，183.45(s，C-3)，99.53(s，C-4)，189.25(s，C-5)，105.92(s，C-6)，179.45(s，C-7)，122.96(d，C-8)，136.16(d，C-9)，127.21(s，C-10)，129.48(d，C-11)，115.64(d，C-12)，158.56(s，C-13)，85.59(d，C-1’)，69.46(d，C-2’)，78.32(d，C-3’)，69.46(d，C-4’)，79.98(d，C-5’)，60.61(t，C-6’)，73.76(d，C-1”)，68.79(d，C-2”)，79.29(d，C-3”)， 70.94(d，C-4”)，80.86(d，C-5”)，61.66(t，C-6”)。

参看图1，依据上述理化数据，结合在二维核磁共振谱的异核远程相关谱HMBC谱中，可以清楚地观察到结合在本化合物中的葡萄糖的端基氢H-1”与结构中的C-3，C-4，C-5有相关信号，而与羰基碳C-1没有相关信号，确证本化合物的结构如下：

药效学试验：对大鼠动静脉旁路血栓形成的影响

试验动物：Wistar大鼠50只，体重250-300克，雌雄兼用，随机分为5组，每组10只。

试验药品：注射用生理氯化钠溶液(空白对照)，复方丹参注射液(阳性对照)，实施例2所述冻干粉针(含70％红花苷A)。

试验方法：大鼠以3％戊巴比妥钠30mg/kg腹腔注射麻醉，仰位固定于大鼠手术台上，切开颈部皮肤，钝性剥离分离右颈总动脉及左颈外静脉，将事先充满肝素生理氯化钠溶液(50u/ml)的聚乙烯管(分三段连接，中段放入长6cm的4号手术线)的一端插入左颈外静脉后，从聚乙烯管注入肝素50u/kg，夹住管壁，将右颈总动脉近心端以止血夹阻断血流，剪口，插入聚乙烯管的另一端，结扎，立即舌下静脉注射试验药物，10分钟后打开止血夹开放血流，15分钟后中断血流，迅速取下聚乙烯管，取出手术线，称重，以总重量减去线重即得血栓湿重，结果见下表：

剂量组别动物数血栓湿重(mg)

(mg/kg)生理氯化钠溶液 10 1.5ml 62.89±20.41复方丹参注射液 10 0.36ml 33.59±13.30^*实施例2所述冻干粉针 10 14.4 30.30±13.18^*

注：与生理氯化钠溶液组比较，^*P＜0.01

统计结果分析表明，本发明提供的含有红花苷A的药物具有明显的抑制大鼠体内血栓形成的作用，作用强度优于复方丹参注射液。

Claims

1、一种通式(I)的新化合物，其化学结构式如下：

2、权利要求1的化合物的制备方法，包括以下步骤：

A、将红花用水或水溶液提取一次或多次，过滤，收集滤液，再减压浓缩；

B、将上述1的产物离心，取上清液，经大孔吸附树脂吸附，再用有机溶剂洗脱，收集洗脱液，真空浓缩；

C、将浓缩液进行色谱分离(例如上葡聚糖凝胶Sephadex G-25)，以水洗脱，收集对应的色带，真空浓缩，将浓缩液干燥(例如喷雾干燥或冷冻干燥)，即得到含有红花苷A的提取物。

3、通式(I)的化合物或其衍生物在制备治疗心脑血管病的药物中的用途。

4、含有治疗有效量的通式(I)的化合物或其衍生物的药物组合物。

5、根据权利要求4的药物组合物，其中通式(I)的化合物和/或其衍生物的含量大于50％以上，尤其90％以上。