CN111662261A

CN111662261A - 一类a环具有葡萄糖的醌式二氢查尔酮双碳苷化合物，制法与神经保护活性

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Publication number: CN111662261A
Application number: CN201910165010.3A
Authority: CN
Inventors: 张培成; 彭英; 高万; 杨桠楠; 姜建双; 冯子明; 周昱君
Original assignee: Institute of Materia Medica of CAMS
Current assignee: Institute of Materia Medica of CAMS
Priority date: 2019-03-05
Filing date: 2019-03-05
Publication date: 2020-09-15
Anticipated expiration: 2039-03-05
Also published as: CN111662261B

Abstract

本发明公开了一类A环具有葡萄糖的醌式二氢查尔酮碳苷类化合物及其制备方法与抗脑缺血损伤活性。本发明的化合物具有通式(Ⅰ)所示的结构，其制备方法包括以下步骤：(1)合成2,4,6‑三羟基二氢查尔酮类化合物；(2)合成2,4,6‑三羟基‑3,5‑二葡萄糖基二氢查尔酮碳苷类化合物；(6)合成一类A环具有葡萄糖的醌式二氢查尔酮碳苷类化合物。本发明的化合物制备方法简单并且具有显著的抗脑缺血损伤的作用。

Description

一类A环具有葡萄糖的醌式二氢查尔酮双碳苷化合物，制法与神经保护活性

技术领域

本发明涉及医药领域，一类A环具有葡萄糖的醌式查尔酮双碳苷结构的化合物，制备方法，及含它们的药物组合物及其在缺血性脑卒中中的应用。

背景技术

缺血性脑卒中是一种严重威胁人类健康和社会发展的重大疾病。研究表明，中国每年有150万死于脑卒中，幸存者中有四分之三患有不同程度的残疾。随着医学科学技术的迅速发展，脑血管病的诊治水平虽然在不断提高，但该疾病至今仍具有发病率高、复发率高、致残率高和病死率高的特点。因此，进一步研究缺血性脑血管病的发病机制并研制有效的治疗药物越来越迫切。对此类疾病目前临床尚无十分有效的治疗方法。研制高效低毒的多靶点多环节的抗脑缺血损伤药物是近几年国内外研究的热点问题。目前，临床上用于抗脑缺血性疾病的药物相对较少，因此，从丰富的天然药物中寻找高效低毒的治疗心脑梗塞性疾病药物的研究已成为当前国际医药界的研究热点。

传统中药用药历史悠久，疗效确切，蕴藏着丰富的化学多样性信息，是创新药物的重要来源。红花是传统的活血化瘀中药，其在治疗脑血管疾病方面显示出独特的功效，红花注射液在临床上已用于中风的治疗，已有研究表明醌式查尔酮碳苷类化合物羟基红花黄色素A(HSYA)是红花治疗中风的有效成分，HSYA通过抗氧化，抗炎，降低低氧状态对血管内皮细胞的损伤，促进血管生成等途径对抗缺血/缺血再灌注损伤，可以改善症状区的血液循环，逆转或减轻自主神经功能障碍，减少血小板粘附，抑制血栓形成，降低血管阻塞风险。因此HSYA是具有良好开发前景的抗脑缺血药物。HSYA在1993年就被Meselhy等人从红花中分离得到，国内外很多课题组尝试了对其的全合成，遗憾的是都没有取得成功。

为寻找治疗缺血性脑卒中活性更好、更易制备的药物，我们合成了羟基红花黄色素A(HSYA)类似物，一类A环具有葡萄糖的醌式二氢查尔酮双碳苷化合物，并对其抗脑缺血损伤活性进行了评价。

发明内容

本发明的目的是提供一类A环具有葡萄糖的醌式二氢查尔酮双碳苷化合物。

本发明的另一目的在于提供该类化合物的制备方法。

本发明的再一目的在于提供一种药物组合物，其包括有效剂量的一类A环具有葡萄糖的醌式二氢查尔酮双碳苷化合物及药用载体和/或赋形剂。

本发明的又一目的在于提供一类A环具有葡萄糖的醌式二氢查尔酮双碳苷化合物在制备用于治疗和/或预防缺血性脑卒中的药物中的应用。

本发明提供如下技术方案：

本发明第一方面提供一类A环具有葡萄糖的醌式二氢查尔酮双碳苷化合物，其特征在于，

具有通式(Ⅰ)所示的结构。

R为苯环上1，2，3个任意的取代基，

所述一个取代基的位置为：

所述二个取代基的位置为：

所述三个取代基的位置为：

其中R选自：氢，C1-5烷基，羟基，巯基，甲氧基，氨基，硝基，卤素，及羧基。

所述化合物中，R优选自：氢，羟基，甲氧基，甲基，氯，氟。

所述化合物，优选自如下化合物：

本发明第二方面提供了具有通式(Ⅰ)结构化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)2,4,6-三羟基二氢查尔酮类化合物(Ⅲ)的合成

取同等摩尔量的间苯三酚，R取代基的苯丙酸类化合物，加到含五倍间苯三酚摩尔量的路易斯酸的乙醚溶液中，氮气保护下，85℃搅拌反应4h，反应液降至室温，倒入10％的乙酸钠水溶液中，静置4h，乙酸乙酯萃取3次，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩有机相，粗品硅胶柱纯化，流动相为石油醚/乙酸乙酯混合溶剂，得2,4,6-三羟基二氢查尔酮类化合物；

(2)2,4,6-三羟基-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮双碳苷类化合物(Ⅳ)的合成

取2,4,6-三羟基二氢查尔酮类化合物与葡萄糖以摩尔比1：3混合，加入乙醇和水作为溶剂，再加入0.4倍氢化肉桂酰基化间苯三酚类化合物摩尔量的三氟甲烷磺酸炕，氮气保护下，85℃搅拌反应12h，加水稀释反应液，倒入MCI GEL CHP20P柱中，水洗除去未反应的葡萄糖和催化剂三氟甲烷磺酸炕，甲醇洗得产物粗品，浓缩甲醇洗液，硅胶柱纯化，流动相为丙酮:乙酸乙酯：水：乙酸，得2,4,6-三羟基-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮双碳苷类化合物；

(3)一类A环具有葡萄糖的醌式二氢查尔酮双碳苷类化合物(Ⅰ)的合成

取2,4,6-三羟基-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮双碳苷类化合物，加入到-氯化铵-氨水缓冲盐中，室温敞口搅拌反应24h，反应液倒入MCI GEL CHP20P柱中，水洗除去氯化铵和氨水，甲醇洗得目标化合物粗品，YMC Rp-C18柱纯化，甲醇-水为流动相，得A环具有葡萄糖的醌式二氢查尔酮双碳苷类化合物；

其中，制备方法中所指的R和上述限定相同，优选自氢，C 1-5烷基，羟基，巯基，甲氧基，氨基，硝基，卤素，及羧基；更优选自氢，羟基，甲氧基，甲基，氯，氟。

本发明第三方面涉及一种含有药物有效剂量的如通式(Ⅰ)各情况所述的化合物和药学上可接受的载体的药物组合物。

本发明还涉及含有作为活性成份的本发明化合物和常规药物赋形剂或辅剂的药物组合物。通常本发明药物组合物含有0.1～95％重量的本发明化合物。在单元剂型中本发明化合物一般含量为0.1～100mg，优选的单元剂型含有4～50mg。

本发明化合物的药物组合物可根据本领域公知的方法制备。用于此目的时，如果需要，可将本发明化合物与一种或多种固体或液体药物赋形剂和/或辅剂结合，制成可作为人药或兽药使用的适当的施用形式或剂量形式。

本发明化合物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘膜、皮肤、腹膜或直肠等。

本发明化合物或含有它的药物组合物的给药途径可为注射给药。注射包括静脉注射、肌肉注射、皮下注射、皮内注射和穴位注射等。

给药剂型可以是液体剂型、固体剂型。如液体剂型可以是真溶液类、胶体类、微粒剂型、乳剂剂型、混悬剂型。其他剂型例如片剂、胶囊、滴丸、气雾剂、丸剂、粉剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、栓剂、冻干粉针剂等。

本发明化合物可以制成普通制剂、也可以是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。

例如为了将单位给药剂型制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是，例如稀释剂与吸收剂，如淀粉、糊精、硫酸钙、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、碳酸钙、白陶土、微晶纤维素、硅酸铝等；湿润剂与粘合剂，如水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、紫胶、甲基纤维素、磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解剂，例如干燥淀粉、海藻酸盐、琼脂粉、褐藻淀粉、碳酸氢钠与枸橼酸、碳酸钙、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等；崩解抑制剂，例如蔗糖、三硬脂酸甘油酯、可可脂、氢化油等；吸收促进剂，例如季铵盐、十二烷基硫酸钠等；润滑剂，例如滑石粉、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸盐、硼酸、液体石蜡、聚乙二醇等。还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片。

例如为了将给药单元制成丸剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是，例如稀释剂与吸收剂，如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氢化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、单硬脂酸甘油脂、高岭土、滑石粉等；粘合剂，如阿拉伯胶、黄蓍胶、明胶、乙醇、蜂蜜、液糖、米糊或面糊等；崩解剂，如琼脂粉、干燥淀粉、海藻酸盐、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等。

例如为了将给药单元制成胶囊，将有效成分本发明化合物与上述的各种载体混合，并将由此得到的混合物置于硬的明胶胶囊或软胶囊中。也可将有效成分本发明化合物制成微囊剂，混悬于水性介质中形成混悬剂，亦可装入硬胶囊中或制成注射剂应用。

例如，将本发明化合物制成注射用制剂，如溶液剂、混悬剂溶液剂、乳剂、冻干粉针剂，这种制剂可以是含水或非水的，可含一种和/或多种药效学上可接受的载体、稀释剂、粘合剂、润滑剂、防腐剂、表面活性剂或分散剂。如稀释剂可选自水、乙醇、聚乙二醇、1，3-丙二醇、乙氧基化的异硬脂醇、多氧化的异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇脂、肪酸酯等。另外，为了制备等渗注射液，可以向注射用制剂中添加适量的氯化钠、葡萄糖或甘油，此外，还可以添加常规的助溶剂、缓冲剂、pH调节剂等。这些辅料是本领域常用的。

此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂、甜味剂或其它材料。

为达到用药目的，增强治疗效果，本发明的药物或药物组合物可用任何公知的给药方法给药。

本发明化合物药物组合物的给药剂量取决于许多因素，例如所要预防或治疗疾病的性质和严重程度，患者或动物的性别、年龄、体重、性格及个体反应，给药途径、给药次数、治疗目的，因此本发明的治疗剂量可以有大范围的变化。一般来讲，本发明中药学成分的使用剂量是本领域技术人员公知的。可以根据本发明化合物组合物中最后的制剂中所含有的实际药物数量，加以适当的调整，以达到其治疗有效量的要求，完成本发明的预防或治疗目的。本发明化合物的每天的合适剂量范围：本发明的化合物的用量为0.001～100mg/Kg体重，优选为0.1～60mg/Kg体重，更优选为1～30mg/Kg体重，最优选为2～15mg/Kg体重。成人患者服用的本发明化合物每日为10～500mg，优选为20～100mg，可一次服用或分2～3次服用；儿童服用的剂量按照每kg体重5～30mg，优选为10～20mg/kg体重。上述剂量可以单一剂量形式或分成几个，例如二、三或四个剂量形式给药，这受限于给药医生的临床经验以及治疗手段的给药方案。本发明的化合物或组合物可单独服用，或与其他治疗药物或对症药物合并使用。

本发明第四方面涉及一类A环具有葡萄糖基的醌式二氢查尔酮碳苷类化合物在预防和/或治疗缺血性脑卒中药物中的应用。

实验证明本发明的A环具有葡萄糖基的醌式二氢查尔酮碳苷类化合物在评价抗脑缺血性药物疗效的模型，谷氨酸诱导的神经保护模型上显示出明显的神经保护活性。

有效技术效果

1.本发明的一类A环具有葡萄糖基的醌式二氢查尔酮碳苷类化合物结构新颖，均未见文献报道，具有进一步开发成治疗脑卒中新药的潜力。

2.本发明的一类A环具有葡萄糖基的醌式二氢查尔酮碳苷类化合物制备方法路线新颖，分离简便，产率可观。

3.本发明的一类A环具有葡萄糖基的醌式二氢查尔酮碳苷类化合物具有较好的神经细胞保护活性，在浓度为1×10^-5mol/L时，所述化合物有明显的提高神经细胞存活率的作用，该类化合物的神经保护作用目前没有相关报道。

具体实施方式

下面的实施例及药理活性实验用于进一步说明，但这并不意味着对本发明的任何限制。

1.一类A环具有葡萄糖基的醌式二氢查尔酮双碳苷类化合物1～7的制备方法

实施例1

化合物1的合成方法，包括以下步骤：

(1)2,4,6-三羟基二氢查尔酮的合成

取间苯三酚(5.0g,40mmol)和苯丙酸(6.0g,40mmol)于100mL双颈瓶中，加入三氟化硼的乙醚溶液(26mL,200mmol)，氮气保护下，85℃条件下搅拌反应4h，降至室温，反应液倒入10％乙酸钠水溶液(200mL)，静置4h，乙酸乙酯萃取三次，每次200mL，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，滤除干燥剂，减压浓缩得粗品，硅胶柱层析，洗脱剂为石油醚/乙酸乙酯＝5：1，得2,4,6-三羟基二氢查尔酮5.36g,产率为52％；该过程发生如下反应：

产物的结构表征数据为：¹H NMR(500MHz,CD₃OD)δ7.24(2H,m,H-11,15),7.20(2H,m,H-12,14),7.13(1H,m,H-13),5.77(2H,s,H-3,5),3.25(2H,m,H-8),2.84(2H,m,H-9).ESI-MS m/z:[M-H]^-calcd for C₁₅H₁₃O₄ 257.2,found 257.0.

(2)2,4,6-三羟基-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮的合成

取2,4,6-三羟基二氢查尔酮(2.58g,10mmol),葡萄糖(5.40g,30mmol)和三氟甲烷磺酸炕(1.97g,4mmol)于100mL双颈瓶中，加入乙醇(20mL)和水(10mL)作为溶剂，氮气保护条件下，回流反应18h，减压浓缩反应液除乙醇，经大孔树脂(MCI GEL CHP20P)纯化，水洗回收未反应的葡萄糖和催化剂三氟甲烷磺酸炕，30％甲醇水溶洗得产物粗品，硅胶柱层析，洗脱剂为丙酮/乙酸乙酯/水/乙酸＝20：20：3：1，得2,4,6-三羟基-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮2.91g,产率为50％；该过程发生如下反应：

¹H NMR(500MHz,CD₃OD)δ7.24(4H,m,H-11,12,14,15),7.16(1H,m,H-13),4.94(2H,d,J＝9.6,H-1′,1″),3.83(4H,m,H-6′,6″),3.62(2H,m,H-5′,5″),3.43(2H,m,H-2′,2″),3.42(2H,m,H-4′,4″),3.37(2H,m,H-3′,3″),3.52(2H,t,J＝7.2,H-8),2.96(2H,t,J＝7.2,H-9).¹³C NMR(125MHz,CD₃OD)δ206.8(C-7),163.1(C-2,6),162.2(C-4),143.1(C-10),129.5(C-11,15),129.3(C-12,14),106.1(C-1),104.4(C-3,5),82.9(C-5′,5″),79.1(C-3′,3″),76.7(C-1′,1″),74.1(C-2′,2″),71.0(C-4′,4″),61.8(C-6′,6″),47.5(C-8),31.8(C-9)；ESI-MS m/z:[M-H]^-calcd for C₂₇H₃₃O₁₄581.5,found 581.2.

(3)3,5,6-三羟基-3,5-二葡萄糖基醌式二氢查尔酮的合成

取2,4,6-三羟基-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮(580mg,1mmol)于50mL反应瓶中，加入20mL氯化铵-氨水缓冲溶液(pH＝8.0),室温敞口反应24h，反应液倒入MCI GEL CHP20P柱中，水洗除去氯化铵和氨水，甲醇洗得目标化合物粗品，YMC Rp-C18柱纯化，甲醇-水(30:70)为流动相，得3,5,6-三羟基-3,5-二葡萄糖基醌式二氢查尔酮430mg,产率为72％；该过程发生如下反应：

实施例2

化合物2的合成方法，包括以下步骤：

(1)2,4,6,13-四羟基二氢查尔酮的合成

取间苯三酚(5.0g,40mmol)和对羟基苯丙酸(6.24g,40mmol)于100mL双颈瓶中，加入三氟化硼的乙醚溶液(26mL,200mmol)，气保护下，85℃条件下搅拌反应4h，降至室温，反应液倒入10％乙酸钠水溶液(200mL)，静置4h，乙酸乙酯萃取三次，每次200mL，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，滤除干燥剂，减压浓缩得粗品，硅胶柱层析，洗脱剂为石油醚/乙酸乙酯＝3：1，得2,4,6,13-四羟基二氢查尔酮6.58g,产率为60％；该过程发生如下反应：

产物的结构表征数据为：¹H NMR(500MHz,CD₃OD)δ7.05(2H,d,J＝8.4,H-11,15),6.71(2H,d,J＝8.4,H-12,14),5.82(2H,s,H-3,5),3.28(2H,m,H-8),2.86(2H,m,H-9).ESI-MS m/z:[M-H]^-calcd for C₁₅H₁₃O₅ 273.2,found 273.0.

(2)2,4,6,13-四羟基-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮碳苷的合成

取2,4,6,13-四羟基二氢查尔酮(2.74g,10mmol),葡萄糖(5.40g,30mmol)和三氟甲烷磺酸炕(1.97g,4mmol)于100mL双颈瓶中，加入乙醇(20mL)和水(10mL)作为溶剂，氮气保护条件下，回流反应18h，减压浓缩反应液除乙醇，经大孔树脂(MCI GEL CHP20P)纯化，水洗回收未反应的葡萄糖和催化剂三氟甲烷磺酸炕，30％甲醇水溶洗得产物粗品，硅胶柱层析，洗脱剂为丙酮/乙酸乙酯/水/乙酸＝20：20：3：1，得2,4,6,13-四羟基-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮2.87g,产率为48％；该过程发生如下反应：

产物的结构表征数据为：¹H NMR(500MHz,CD₃OD)δ7.02(2H,d,J＝8.5,H-11,15),6.67(2H,d,J＝8.5,H-12,14),4.94(2H,d,J＝9.8,H-1′,1″),3.83(4H,m,H-6′,6″),3.60(2H,m,H-5′,5″),3.51(2H,m,H-4′,4″),3.49(2H,m,H-3′,3″),3.43(2H,m,H-8),3.34(2H,m,H-2′,2″),2.85(2H,m,H-9).¹³C NMR(125MHz,CD₃OD)δ207.1(C-7),163.1(C-4),162.4(C-13),156.2(C-2,6),133.8(C-10),130.4(C-12,14),130.1(C-11,15),106.2(C-1),104.4(C-3,5),82.7(C-5′,5″),79.1(C-3′,3″),76.7(C-1′,1″),74.1(C-2′,2″),71.1(C-4′,4″),61.8(C-6′,6″),47.8(C-8),31.0(C-9)；ESI-MS m/z:[M-H]^-calcd for C₂₇H₃₃O₁₅597.5,found 597.2.

(3)3,5,6,13-四羟基-3,5-二葡萄糖基醌式二氢查尔酮碳苷的合成

取2,4,6,13-四羟基-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮(597mg,1mmol)于50mL反应瓶中，加入20mL氯化铵-氨水缓冲溶液(pH＝8.0),室温敞口反应24h，反应液倒入MCI GELCHP20P柱中，水洗除去氯化铵和氨水，甲醇洗得目标化合物粗品，YMC Rp-C18柱纯化，甲醇-水(28:72)为流动相，得3,5,6,13-四羟基-3,5-二葡萄糖基醌式二氢查尔酮580mg,产率为85％；该过程发生如下反应：

产物的结构表征数据为：¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ17.70(1H,s,6-OH),9.06(1H,brs,4-OH),7.00(2H,d,H-10,J＝8.4,H-11,15),6.63(2H,d,J＝8.4,H-12,14),4.12(2H,d,J＝10.0,H-1″),4.10(2H,m,H-2′,2″),3.58(1H,m,H₁-6′),3.56(1H,m,H₁-6″),3.52(1H,d,J＝9.4,H-1′),3.48(1H,m,H₂-6′),3.37(1H,m,H₂-6″),3.37(2H,m,H-8),3.15(1H,m,H-3″),3.08(1H,m,H-4″),3.08(1H,m,H-3′),3.00(1H,m,H-4′),2.99(1H,m,H-5″),2.90(1H,m,H-5′),2.90(1H,m,H₁-9),2.70(1H,m,H₂-9).¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆)δ195.3(C-2),193.5(C-7)190.2(C-4),182.3(C-6),155.6(C-13),132.8(C-10),129.5(C-11,15),115.3(C-12,14),103.9(C-1),98.3(C-5),85.7(C-1′),85.1(C-3),81.2(C-5′),81.2(C-5″),79.6(C-3″),78.6(C-3′),74.2(1″),71.4(C-4′),70.5(C-4″),69.0(C-2′),62.1(C-6′),62.1(6″),49.1(C-8),31.3(C-9)；ESI-MS m/z:[M-H]^-calcd for C₂₇H₃₃O₁₆ 613.5,found 613.2；HR-ESI-MS m/z:[M+Na]⁺calcd for C₂₇H₃₄NaO₁₆ 637.1731,found637.1739.

实施例3

化合物3的合成方法，包括以下步骤：

(1)2,4,6-三羟基-13-甲氧基二氢查尔酮的合成

取间苯三酚(5.0g,40mmol)和对甲氧基苯丙酸(7.2g,40mmol)于100mL双颈瓶中，加入三氟化硼的乙醚溶液(26mL,200mmol),氮气保护下，85℃条件下搅拌反应4h，降至室温，反应液倒入10％乙酸钠水溶液(200mL)，静置4h，乙酸乙酯萃取三次，每次200mL，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，滤除干燥剂，减压浓缩得粗品，硅胶柱层析，洗脱剂为石油醚/乙酸乙酯＝4：1，得2,4,6,13-四羟基二氢查尔酮7.49g,产率为65％；该过程发生如下反应：

产物的结构表征数据为：¹H NMR(500MHz,CD₃OD)δ7.13(2H,d,J＝8.6,H-11,15),6.81(2H,d,J＝8.6,H-12,14),5.80(2H,s,H-3,5),3.74(3H,s,OCH₃),3.27(2H,m,H-8),2.87(2H,m,H-9).ESI-MS m/z:[M-H]^-calcd for C₁₆H₁₅O₅ 287.3,found 287.0.

(2)2,4,6-三羟基-13-甲氧基-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮的合成

取2,4,6-三羟基-13-甲氧基二氢查尔酮(2.88g,10mmol),葡萄糖(5.40g,30mmol)和三氟甲烷磺酸炕(1.97g,4mmol)于100mL双颈瓶中，加入乙醇(20mL)和水(10mL)作为溶剂，氮气保护条件下，回流反应18h，减压浓缩反应液除乙醇，经大孔树脂(MCI GEL CHP20P)纯化，水洗回收未反应的葡萄糖和催化剂三氟甲烷磺酸炕，30％甲醇水溶洗得产物粗品，硅胶柱层析，洗脱剂为丙酮/乙酸乙酯/水/乙酸＝20：20：3：1，得2,4,6-三羟基-13-甲氧基-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮3.18g,产率为52％；该过程发生如下反应：

产物的结构表征数据为：¹H NMR(500MHz,CD₃OD)δ7.11(2H,d,J＝8.6,H-11,15),6.80(2H,d,J＝8.6,H-12,14),4.94(2H,d,J＝9.8,H-1′,1″),3.83(4H,m,H-6′,6″),3.62(2H,m,H-5′,5″),3.51(2H,m,H-4′,4″),3.49(2H,m,H-3′,3″),3.42(2H,m,H-8),3.34(2H,m,H-2′,2″),2.89(2H,m,H-9).¹³C NMR(125MHz,CD₃OD)δ207.0(C-7),162.2(C-13),159.3(C-2,6),135.0(C-10),130.4(C-11,15),114.8(C-12,14),106.1(C-1),104.3(C-3,5),82.6(C-5′,5″),79.0(C-3′,3″),76.7(C-1′,1″),74.1(C-2′,2″),71.1(C-4′,4″),61.8(C-6′,6″),55.6(OCH₃),47.4(C-8),30.9(C-9)；ESI-MS m/z:[M-H]^-calcd for C₂₈H₃₅O₁₅611.6,found 611.2.

(3)3,4,6-三羟基-13-甲氧基-3,5-二葡萄糖基醌式二氢查尔酮的合成

取2,4,6-三羟基-13-甲氧基-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮(612mg,1mmol)于50mL反应瓶中，加入20mL氯化铵-氨水缓冲溶液(pH＝8.0),室温敞口反应24h，反应液倒入MCIGEL CHP20P柱中，水洗除去氯化铵和氨水，甲醇洗得目标化合物粗品，YMC Rp-C18柱纯化，甲醇-水(30:70)为流动相，得3,4,6-三羟基-13-甲氧基-3,5-二葡萄糖基醌式二氢查尔酮540mg,产率为86％；该过程发生如下反应：

产物的结构表征数据为：¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ17.73(1H,s,6-OH),7.15(2H,d,J＝8.6,H-11,15),6.81(2H,d,J＝8.6,H-12,14),4.12(1H,d,J＝9.4,H-1″),4.13(1H,m,H-2″),3.71(3H,s,OCH₃),3.60(1H,m,H₁-6″),3.60(1H,m,H₁-6′),3.52(1H,d,J＝9.4,H-1′),3.32(1H,m,H₂-6′),3.32(1H,m,H₂-6″),3.26(1H,m,H-2′),3.09(1H,m,H-3″),3.09(1H,m,H-3′),3.00(3H,m,H-4″,5′,5″),2.93(1H,m,H-4′),2.77(2H,m,H-8),2.67(2H,m,H-9).¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆)δ195.8(C-2),193.5(C-7),190.4(C-4),182.6(C-6),157.9(C-13),134.8(C-10),129.8(C-11,15),114.2(C-12,14),104.3(C-1),98.6(C-5),85.8(C-1′),85.3(C-3),81.4(C-5″),81.0(C-5′),79.8(C-3″),78.8(C-3′),74.4(1″),71.7(C-4′),70.8(C-4″),70.6(C-2″),69.1(C-2′),62.3(6″),61.9(C-6′),49.2(C-8),31.4(C-9)；ESI-MS m/z:[M-H]^-calcd for C₂₈H₃₅O₁₆ 627.5,found 627.2；HR-ESI-MS m/z:[M+Na]⁺calcd for C₂₈H₃₆NaO₁₆ 651.1872,found 651.1873.

实施例4

化合物4的合成方法，包括以下步骤：

(1)2,4,6-三羟基-13-甲基二氢查尔酮的合成

取间苯三酚(5.0g,40mmol)和对甲基苯丙酸(6.48g,40mmol)于100mL双颈瓶中，加入三氟化硼的乙醚溶液(26mL,200mmol),氮气保护下，85℃条件下搅拌反应4h，降至室温，反应液倒入10％乙酸钠水溶液(200mL)，静置4h，乙酸乙酯萃取三次，每次200mL，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，滤除干燥剂，减压浓缩得粗品，硅胶柱层析，洗脱剂为石油醚/乙酸乙酯＝4：1，得2,4,6-三羟基-13-甲基二氢查尔酮6.31g,产率为58％；该过程发生如下反应：

产物的结构表征数据为：¹H NMR(500MHz,CD₃OD)δ7.12(2H,d,J＝8.1,H-11,15),7.07(2H,d,J＝8.1,H-12,14),5.83(2H,s,H-3,5),3.32(2H,m,H-8),2.91(2H,m,H-9).ESI-MS m/z:[M-H]^-calcd for C₁₆H₁₅O₄ 271.3,found 271.0.

(2)2,4,6-三羟基-13-甲基-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮的合成

取2,4,6-三羟基-13-甲基二氢查尔酮(2.72g,10mmol),葡萄糖(5.40g,30mmol)和三氟甲烷磺酸炕(1.97g,4mmol)于100mL双颈瓶中，加入乙醇(20mL)和水(10mL)作为溶剂，氮气保护条件下，回流反应18h，减压浓缩反应液除乙醇，经大孔树脂(MCI GEL CHP20P)纯化，水洗回收未反应的葡萄糖和催化剂三氟甲烷磺酸炕，30％甲醇水溶洗得产物粗品，硅胶柱层析，洗脱剂为丙酮/乙酸乙酯/水/乙酸＝20：20：3：1，得2,4,6-三羟基-13-甲基-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮2.74g,产率为46％；该过程发生如下反应：

产物的结构表征数据为：¹H NMR(500MHz,CD₃OD)δ7.08(2H,m,H-11,15),7.05(2H,m,H-12,14),4.94(2H,d,J＝9.8,H-1′,1″),3.83(4H,m,H-6′,6″),3.50(2H,m,H-5′,5″),3.50(2H,m,H-4′,4″),3.49(2H,m,H-3′,3″),3.37(2H,m,H-2′,2″),3.42(2H,m,H-8),2.91(2H,m,H-9).¹³C NMR(125MHz,CD₃OD)δ206.9(C-7),163.1(C-4),162.2(C-2,6),139.9(C-10),129.9(C-11,15),129.3(C-12,14),106.1(C-1),104.3(C-3,5),82.7(C-5′,5″),79.0(C-3′,3″),76.7(C-1′,1″),74.1(C-2′,2″),71.0(C-4′,4″),61.8(C-6′,6″),47.5(C-8),31.3(C-9),21.0(CH₃)；ESI-MS m/z:[M-H]^-calcd for C₂₈H₃₅O₁₄ 595.5,found 595.2.

(3)3,4,6-三羟基-13-甲基-3,5-二葡萄糖基醌式二氢查尔酮的合成

取2,4,6-三羟基-13-甲基-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮(596mg,1mmol)于50mL反应瓶中，加入20mL氯化铵-氨水缓冲溶液(pH＝8.0),室温敞口反应24h，反应液倒入MCI GELCHP20P柱中，水洗除去氯化铵和氨水，甲醇洗得目标化合物粗品，YMC Rp-C18柱纯化，甲醇-水(30:70)为流动相，得3,4,6-三羟基-13-甲基-3,5-二葡萄糖基醌式二氢查尔酮495mg,产率为81％；该过程发生如下反应：

产物的结构表征数据为：¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ17.67(1H,s,6-OH),7.10(2H,d,J＝7.5,H-11,15),7.04(2H,d,J＝7.5,H-12,14),4.18(1H,d,J＝9.9,H-1″),4.12(1H,m,H-2″),3.58(1H,m,H₁-6″),3.58(1H,m,H₁-6′),3.49(1H,d,J＝9.4,H-1′),3.43(1H,m,H₂-6′),3.43(1H,m,H₂-6″),3.32(1H,m,H-2′),3.09(2H,m,H-3′,3″),3.08(1H,m,5″),3.00(2H,m,H-5′,4″),2.93(1H,m,H-4′),2.88(2H,m,H-8),2.68(2H,m,H-9),2.23(3H,s,CH₃).¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆)δ195.5(C-2),194.9(C-7),193.4(C-4),182.5(C-6),139.4(C-10),134.8(C-13),129.2(C-12,14),128.6(C-11,15),104.4(C-1),100.4(C-5),85.7(C-3),81.2(C-1′),80.8(C-5′),79.6(C-5″),78.6(C-3″),75.0(C-3′),74.4(C-1″),71.7(C-4′),70.8(C-4″),70.3(C-2″),69.1(C-2′),62.3(C-6″),62.2(C-6′),49.0(C-8),31.6(C-9),31.1(CH₃)；ESI-MS m/z:[M-H]^-calcd for C₂₈H₃₅O₁₅611.5,found 611.2；HR-ESI-MS m/z:[M+Na]⁺calcd for C₂₈H₃₆NaO₁₅ 635.1946,found 635.1950.

实施例5

化合物5的合成方法，包括以下步骤：

(1)2,4,6-三羟基-13-氟二氢查尔酮的合成

取间苯三酚(5.0g,40mmol)和对氟苯丙酸(6.72g,40mmol)于100mL双颈瓶中，加入三氟化硼的乙醚溶液(26mL,200mmol),氮气保护下，85℃条件下搅拌反应4h，降至室温，反应液倒入10％乙酸钠水溶液(200mL)，静置4h，乙酸乙酯萃取三次，每次200mL，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，滤除干燥剂，减压浓缩得粗品，硅胶柱层析，洗脱剂为石油醚/乙酸乙酯＝4：1，得2,4,6-三羟基-13-氟二氢查尔酮6.31g,产率为58％；该过程发生如下反应：

产物的结构表征数据为：¹H NMR(500MHz,CD₃OD)δ7.23(2H,dd,J＝8.3,5.6,H-11,15),6.81(2H,t,J＝8.8,H-12,14),5.80(2H,s,H-3,5),3.32(2H,m,H-8),2.93(2H,m,H-9).ESI-MS m/z:[M-H]^-calcd for C₁₅H₁₂FO₄ 275.2,found 275.0.

(2)2,4,6-三羟基-13-氟-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮的合成

取2,4,6-三羟基-13-氟二氢查尔酮(2.76g,10mmol),葡萄糖(5.40g,30mmol)和三氟甲烷磺酸炕(1.97g,4mmol)于100mL双颈瓶中，加入乙醇(20mL)和水(10mL)作为溶剂，氮气保护条件下，回流反应18h，减压浓缩反应液除乙醇，经大孔树脂(MCI GEL CHP20P)纯化，水洗回收未反应的葡萄糖和催化剂三氟甲烷磺酸炕，30％甲醇水溶洗得产物粗品，硅胶柱层析，洗脱剂为丙酮/乙酸乙酯/水/乙酸＝20：20：3：1，得2,4,6-三羟基-13-氟-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮3.48g,产率为58％；该过程发生如下反应：

产物的结构表征数据为：¹H NMR(500MHz,CD₃OD)δ7.23(2H,dd,J＝8.5,5.5,H-11,15),6.96(2H,dd,J＝8.5,5.5,H-12,14),4.94(2H,d,J＝9.8,H-1′,1″),3.83(4H,m,H-6′,6″),3.60(2H,m,H-5′,5″),3.51(2H,m,H-4′,4″),3.49(2H,m,H-3′,3″),3.43(2H,m,H-8),3.34(2H,m,H-2′,2″),2.93(2H,m,H-9).¹³C NMR(125MHz,CD₃OD)δ206.6(C-7),175.2(C-13),163.5(C-4),162.2(C-2,6)138.9(C-10),131.1(C-11,15),115.9(C-12,14),106.1(C-1),104.3(C-3,5),82.6(C-5′,5″),79.0(C-3′,3″),76.7(C-1′,1″),74.1(C-2′,2″),71.0(C-4′,4″),61.7(C-6′,6″),47.4(C-8),30.9(C-9)；ESI-MS m/z:[M-H]^-calcd forC₂₇H₃₂FO₁₄ 599.5,found 599.2.

(3)3,4,6-三羟基-13-氟-3,5-二葡萄糖基醌式二氢查尔酮的合成

取2,4,6-三羟基-13-氟-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮(600mg,1mmol)于50mL反应瓶中，加入20mL氯化铵-氨水缓冲溶液(pH＝8.0),室温敞口反应24h，反应液倒入MCI GELCHP20P柱中，水洗除去氯化铵和氨水，甲醇洗得目标化合物粗品，YMC Rp-C18柱纯化，甲醇-水(30:70)为流动相，得3,4,6-三羟基-13-氟-3,5-二葡萄糖基醌式二氢查尔酮490mg,产率为80％；该过程发生如下反应：

产物的结构表征数据为：¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ17.65(1H,s,6-OH),7.28(2H,m,H-12,14),7.07(2H,m,H-11,15),4.32(1H,d,J＝9.4,H-1″),4.12(1H,m,H-2″),3.60(2H,m,H₁-6′,6″),3.55(1H,d,J＝9.4,H-1′),3.32(2H,m,H₂-6′,6″),3.32(1H,m,H-2′),,3.09(2H,m,H-3′,3″),3.08(1H,m,5″),3.00(1H,m,H-5′),3.00(1H,m,H-4″),2.93(1H,m,H-4′),2.84(2H,m,H-8),2.75(2H,m,H-9).¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆)δ195.5(C-2),193.0(C-7),190.4(C-4),182.0(C-6),138.8(C-13),130.4(C-11,15),115.2(C-12,14),104.0(C-1),98.3(C-5),85.7(C-1′),85.2(C-3),81.2(C-5″),80.8(C-5′),79.6(C-3″),78.6(C-3′),74.1(C-1″),71.5(C-4′),70.6(C-4″),70.4(C-2″),69.0(C-2′),62.1(C-6″),61.7(C-6′),49.0(C-8),31.2(C-9)；ESI-MS m/z:[M-H]^-calcd for C₂₇H₃₂FO₁₅615.5,found 615.2；HR-ESI-MS m/z:[M+Na]⁺calcd for C₂₇H₃₃NaFO₁₅639.1718,found 639.1721.

实施例6

化合物6的合成方法，包括以下步骤：

(1)2,4,6-三羟基-12-氯二氢查尔酮的合成

取间苯三酚(5.0g,40mmol)和3-氯苯丙酸(7.36g,40mmol)于100mL双颈瓶中，加入三氟化硼的乙醚溶液(26mL,200mmol),氮气保护下，85℃条件下搅拌反应4h，降至室温，反应液倒入10％乙酸钠水溶液(200mL)，静置4h，乙酸乙酯萃取三次，每次200mL，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，滤除干燥剂，减压浓缩得粗品，硅胶柱层析，洗脱剂为石油醚/乙酸乙酯＝4：1，得2,4,6-三羟基-12-氯二氢查尔酮6.31g,产率为54％；该过程发生如下反应：

产物的结构表征数据为：¹H NMR(500MHz,CD₃OD)δ7.26(1H,m,H-11),7.24(1H,m,H-13),7.19(2H,m,H-14,15),5.83(2H,s,H-3,5),3.34(2H,m,H-8),2.96(2H,t,J＝7.8,H-9).ESI-MS m/z:[M-H]^-calcd for C₁₅H₁₂ClO₄291.7,found 290.9.

(2)2,4,6-三羟基-12-氯-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮的合成

取2,4,6-三羟基-12-氯二氢查尔酮(2.92g,10mmol),葡萄糖(5.40g,30mmol)和三氟甲烷磺酸炕(1.97g,4mmol)于100mL双颈瓶中，加入乙醇(20mL)和水(10mL)作为溶剂，氮气保护条件下，回流反应18h，减压浓缩反应液除乙醇，经大孔树脂(MCI GEL CHP20P)纯化，水洗回收未反应的葡萄糖和催化剂三氟甲烷磺酸炕，30％甲醇水溶洗得产物粗品，硅胶柱层析，洗脱剂为丙酮/乙酸乙酯/水/乙酸＝20：20：3：1，得2,4,6-三羟基-12-氯-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮2.96g,产率为48％；该过程发生如下反应：

产物的结构表征数据为：¹H NMR(500MHz,CD₃OD)δ7.25(1H,m,H-11),7.22(1H,m,H-13),7.16(2H,m,H-14,15),4.93(2H,d,J＝9.8,H-1′,1″),3.83(4H,m,H-6′,6″),3.60(2H,m,H-5′,5″),3.50(2H,m,H-4′,4″),3.50(2H,m,H-3′,3″),3.43(2H,m,H-2′,2″),3.40(2H,m,H-8),2.96(2H,m,H-9).¹³C NMR(125MHz,CD₃OD)δ206.2(C-7),163.1(C-4),162.2(C-2,6),145.5(C-12),135.0(C-10),130.8(C-11),129.5(C-13),128.0(C-15),126.9(C-14),106.0(C-1),104.3(C-3,5),82.6(C-5′,5″),79.0(C-3′,3″),76.7(C-1′,1″),74.1(C-2′,2″),71.0(C-4′,4″),61.8(C-6′,6″),46.9(C-8),31.2(C-9)；ESI-MS m/z:[M-H]^-calcdfor C₂₇H₃₂ClO₁₄ 615.0,found 615.2.

(3)3,4,6-三羟基-12-氯-3,5-二葡萄糖基醌式二氢查尔酮的合成

取2,4,6-三羟基-12-氯-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮(616mg,1mmol)于50mL反应瓶中，加入20mL氯化铵-氨水缓冲溶液(pH＝8.0),室温敞口反应24h，反应液倒入MCI GELCHP20P柱中，水洗除去氯化铵和氨水，甲醇洗得目标化合物粗品，YMC Rp-C18柱纯化，甲醇-水(30:70)为流动相，得3,5,6,13-四羟基-3,5-二葡萄糖基醌式二氢查尔酮410mg,产率为65％；该过程发生如下反应：

产物的结构表征数据为：¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ17.57(1H,s,6-OH),7.29(2H,m,H-11,13),7.20(2H,m,H-14,15),4.31(1H,d,J＝9.4,H-1″),4.11(1H,m,H-2″),3.60(2H,m,H₁-6′,6″),3.52(1H,d,J＝9.4,H-1′),3.26(2H,m,H₂-6′,6″),3.15(2H,m,H-3′,3″),3.15(1H,m,H-2′),3.08(1H,m,H-4″),3.06(1H,m,H-4′),2.98(2H,m,H-5′,5″),2.86(2H,m,H-8),2.75(2H,m,H-9).¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆)δ195.7(C-2),192.9(C-7),190.6(C-4),182.1(C-6),145.6(C-12),130.6(C-10),128.7(C-15),127.7(C-14),126.2(C-13),120.1(C-11),104.3(C-1),98.4(C-5),85.9(C-3),85.4(C-1′),81.4(C-5″),81.0(C-5′),79.8(C-3″),78.8(C-3′),74.3(C-1″),70.7(C-4′),70.5(C-4″),70.7(C-2″),70.6(C-4′),69.1(C-2′),62.3(C-6′),61.9(C-6″),49.2(C-8),31.8(C-9)；ESI-MS m/z:[M-H]^-calcd forC₂₇H₃₂ClO₁₅ 631.0,found 631.2；HR-ESI-MS m/z:[M+Na]⁺calcd for C₂₇H₃₃NaClO₁₅655.1414,found 655.1410.

实施例7

化合物7的合成方法，包括以下步骤：

(1)2,4,6-三羟基-12-甲氧基二氢查尔酮的合成

取间苯三酚(5.0g,40mmol)和3-甲氧基苯丙酸(7.32g,40mmol)于100mL双颈瓶中，加入三氟化硼的乙醚溶液(26mL,200mmol),氮气保护下，85℃条件下搅拌反应4h，降至室温，反应液倒入10％乙酸钠水溶液(200mL)，静置4h，乙酸乙酯萃取三次，每次200mL，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，滤除干燥剂，减压浓缩得粗品，硅胶柱层析，洗脱剂为石油醚/乙酸乙酯＝4：1，得2,4,6-三羟基-12-甲氧基二氢查尔酮6.45g,产率为56％；该过程发生如下反应：

产物的结构表征数据为：¹H NMR(500MHz,CD₃OD)δ7.15(1H,t,J＝7.8,H-11),6.80(2H,m,H-13,14),6.72(1H,dd,J＝8.1,2.1,15),5.81(2H,s,H-3,5),3.32(2H,m,H-8),2.91(2H,m,H-9).ESI-MS m/z:[M-H]^-calcd for C₁₆H₁₅O₅ 287.3,found 287.0.

(2)2,4,6-三羟基-12-甲氧基-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮的合成

取2,4,6-三羟基-12-甲氧基二氢查尔酮(2.88g,10mmol),葡萄糖(5.40g,30mmol)和三氟甲烷磺酸炕(1.97g,4mmol)于100mL双颈瓶中，加入乙醇(20mL)和水(10mL)作为溶剂，氮气保护条件下，回流反应18h，减压浓缩反应液除乙醇，经大孔树脂(MCI GEL CHP20P)纯化，水洗回收未反应的葡萄糖和催化剂三氟甲烷磺酸炕，30％甲醇水溶洗得产物粗品，硅胶柱层析，洗脱剂为丙酮/乙酸乙酯/水/乙酸＝20：20：3：1，得2,4,6-三羟基-12-甲氧基-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮2.75g,产率为45％；该过程发生如下反应：

产物的结构表征数据为：¹H NMR(500MHz,CD₃OD)δ7.15(1H,t,J＝7.8,H-15),6.80(2H,m,H-11,13),6.70(1H,m,H-14),4.93(2H,d,J＝9.8,H-1′,1″),3.83(4H,m,H-6′,6″),3.62(2H,m,H-5′,5″),3.51(2H,m,H-4′,4″),3.49(2H,m,H-3′,3″),3.42(2H,m,H-8),3.34(2H,m,H-2′,2″),2.93(2H,m,H-9).¹³C NMR(125MHz,CD₃OD)δ206.8(C-7),163.1(C-4),162.2(C-2,6),144.6(C-10),130.3(C-14),121.8(C-15),115.1(C-13),112.3(C-11),106.1(C-1),104.3(C-3,5),82.6(C-5′,5″),79.0(C-3′,3″),76.7(C-1′,1″),74.1(C-2′,2″),71.0(C-4′,4″),61.8(C-6′,6″),47.3(C-8),31.8(C-9)；ESI-MS m/z:[M-H]^-calcdfor C₂₈H₃₅O₁₅ 611.6,found 611.2.

(3)3,4,6-三羟基-12-甲氧基-3,5-二葡萄糖基醌式二氢查尔酮的合成

取2,4,6-三羟基-12-甲氧基-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮(612mg,1mmol)于50mL反应瓶中，加入20mL氯化铵-氨水缓冲溶液(pH＝8.0),室温敞口反应24h，反应液倒入MCIGEL CHP20P柱中，水洗除去氯化铵和氨水，甲醇洗得目标化合物粗品，YMC Rp-C18柱纯化，甲醇-水(30:70)为流动相，得3,4,6-三羟基-12-甲氧基-3,5-二葡萄糖基醌式二氢查尔酮425mg,产率为68％；该过程发生如下反应：

产物的结构表征数据为：¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ17.71(1H,s,6-OH),7.17(1H,m,H-14),6.81(2H,m,H-11,13),6.72(1H,m,H-15),4.19(1H,d,J＝9.8,H-1″),4.12(1H,m,H-2″),3.73(3H,s,OCH3),3.60(2H,m,H₁-6′,6″),3.54(1H,d,J＝9.4,H-1′),3.32(2H,m,H₂-6′,6″),3.32(1H,m,H-2′),3.09(2H,m,H-3′,3″),3.08(1H,m,H-5″),3.00(1H,m,H-4″),3.00(1H,m,H-5′),2.93(1H,m,H-4′),2.85(2H,m,H-8),2.73(2H,m,H-9).¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆)δ195.8(C-2),194.9(C-7),193.3(C-4),182.9(C-6),159.8(C-12),144.5(C-14),129.8(C-10),121.2(C-15),111.5(C-11),111.4(C-13),104.3(C-1),98.5(C-5),85.9(C-1′),85.4(C-3),81.6(C-5″),81.0(C-5′),79.8(C-3″),78.8(C-3′),74.4(C-1″),71.6(C-4′),71.2(C-4″),70.6(C-2″),69.1(C-2′),62.3(C-6′),61.9(C-6″),55.5(OCH₃),49.2(C-8),32.2(C-9)；ESI-MS m/z:[M-H]^-calcd for C₂₈H₃₅O₁₆ 627.5,found 627.2；HR-ESI-MSm/z:[M+Na]⁺calcd for C₂₈H₃₆NaO₁₆ 651.1874,found 651.1875.

2.一类A环具有葡萄糖的醌式二氢查尔酮双碳苷类化合物的药理学活性实验

通过药理学实验发现上述化合物具有明显的抗谷氨酸诱导损伤的神经元保护作用。

实验方法：

以神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株建立了谷氨酸诱导损伤的细胞筛选模型，通过测定细胞存活率的变化来筛选有效的神经元保护剂。SK-N-SH细胞株培养于含10％胎牛血清、100kU·L^-1的青霉素和100mg·L^-1的链霉素的DMEM培养基中。细胞在37℃，5％CO2培养箱中生长。SK-N-SH细胞株以密度为1×10⁵/ml接种于96孔板中，每孔100μl细胞悬液。当细胞融合60-70％左右时，加入新鲜配置的待测化合物至所需终浓度，预孵育4h，再加入30mM谷氨酸孵育4h后，每孔加入MTT(5mg/ml)10μl，37℃孵育4小时后，吸净培养基，每孔加入DMSO150μl，震荡15min，使代谢物充分溶解，用酶标仪570nm处测定每孔OD值，计算每组细胞生存率。每组3个复孔。实验重复3次。细胞存活率＝(实验组光密度值/对照组光密度值)×100％。

实验结果：

体外实验结果表明，化合物1～7对谷氨酸诱导的神经元损伤有明显的保护作用，其终浓度为10μM时，提升细胞存活率为8.5～22.6％。

表1一类A环具有葡萄糖的醌式二氢查尔酮碳苷类化合物对谷氨酸诱导的神经元损伤的保护作用

Claims

1.一类A环具有葡萄糖的醌式二氢查尔酮双碳苷化合物，其特征在于，具有通式(Ⅰ)所示的结构：

R为苯环上1，2，3个任意的取代基，

所述一个取代基的位置为：

所述二个取代基的位置为：

所述三个取代基的位置为：

其中R₁,R₂,R₃各自独立的选自：氢，C1-5烷基，羟基，巯基，甲氧基，氨基，硝基，卤素，及羧基。

2.根据权利要求1的化合物，其特征在于，R选自：氢，羟基，甲氧基，甲基，氯，氟。

3.根据权利要求1-2任一所述的化合物，其特征在于，所述的化合物选自如下化合物：

4.权利要求1-3任一所述化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)2,4,6-三羟基二氢查尔酮类化合物(Ⅲ)的合成

取同等摩尔量的间苯三酚，R取代的苯丙酸类化合物，加到含五倍间苯三酚摩尔量的路易斯酸的乙醚溶液中，氮气保护下，85℃搅拌反应4h，反应液降至室温，倒入10％的乙酸钠水溶液中，静置4h，乙酸乙酯萃取3次，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩有机相，粗品硅胶柱纯化，流动相为石油醚/乙酸乙酯混合溶剂，得2,4,6-三羟基二氢查尔酮类化合物；

取R取代的2,4,6-三羟基二氢查尔酮类化合物与葡萄糖以摩尔比1：3混合，加入乙醇和水作为溶剂，再加入0.4倍氢化肉桂酰基化间苯三酚类化合物摩尔量的三氟甲烷磺酸炕，氮气保护下，85℃搅拌反应12h，加水稀释反应液，倒入MCI GEL CHP20P柱中，水洗回收未反应的葡萄糖和催化剂三氟甲烷磺酸炕，甲醇洗得产物粗品，浓缩甲醇洗液，硅胶柱纯化，流动相为丙酮:乙酸乙酯：水：乙酸，得2,4,6-三羟基-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮双碳苷类化合物；

取2,4,6-三羟基-3,5-二葡萄糖基二氢查尔酮双碳苷类化合物，加入氯化铵-氨水缓冲盐中，室温敞口搅拌反应24h，反应液倒入倒入MCI GEL CHP20P柱中，水洗除去氯化铵和氨水，甲醇洗得目标化合物粗品，YMC Rp-C18柱纯化，甲醇-水为流动相，得A环具有葡萄糖的醌式二氢查尔酮双碳苷类化合物；

其中R的定义和权利要求与1-3中任一项相同。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)所述的路易斯酸选自三氟化硼；步骤(1)所述的石油醚/乙酸乙酯混合溶剂中，石油醚与乙酸乙酯的体积比为5：1。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：步骤(2)所述溶剂为乙醇-水体积比为2：1；催化剂为三氟甲烷磺酸钪，用量为0.4倍摩尔量的氢化肉桂酰基化间苯三酚类化合物；步骤(2)所述的流动相丙酮:乙酸乙酯：水：乙酸，体积比为20：20：3：1。

7.根据权力要求4所述的制备方法，其特征在于：步骤(3)所述的氯化铵-氨水缓冲盐的pH为7.5-9.0。

8.一种药物组合物，其特征在于，含有有效剂量的权利要求1-3任一项所述的化合物和药学上可接受的载体。

9.根据权利要求8的药物组合物，其特征在于，所述组合物的剂型选自片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、口服液和混悬剂。

10.权利要求1-3任一项所述的化合物在制备治疗缺血性脑卒药物中的应用。