CN1389212A - 一种抗流感病毒的柴胡黄酮组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

一种抗流感病毒的柴胡黄酮组合物,由中药柴胡地上部分提取分离的柴胡总黄酮组成,柴胡总黄酮含量50～70%,槲皮甙含量25～40%;其制备方法为取柴胡水提取液,调pH2－5、过大孔树脂柱、含水醇洗脱、正丁醇萃取、浓缩;柴胡总黄酮抗流感病毒活性提高,副作用减少,吸湿性降低,并可制成各类剂型;其制备工艺重现性好,适合工业化生产。

Description

一种抗流感病毒的柴胡黄酮组合物及其制备方法

技术领域

本发明属于中药柴胡地上部分中的抗流感病毒有效部位组合物及其制备方法，具体涉及中药柴胡地上部分中的抗流感病毒的黄酮组合物及其制备方法。

背景技术

柴胡是中国药典收载的常见中药，具有和解退热、疏肝解郁的功效，其药用部位一般为柴胡的根，是治疗感冒的良药。而部颁标准中收载的柴酮片为中药柴胡的地上部分通过简单水煎煮、浓缩得到的总黄酮所压成的片剂，用于治疗外感风寒、小儿呼吸道感染等。其制备方法简单，原料中的总黄酮的含量不到1％，杂质多，易吸潮，且没有明确的质量指标成分，每日口服剂量更是高达9～16片。

我国柴胡属植物种类较多，供药用的约20种。其地上部分含多种黄酮类成分：一般均含槲皮素、异鼠李素、芸香甙、异鼠李素3-β-D-芸香糖甙以及水仙甙等。亦有柴胡如金黄柴胡地上部分尚含核糖醇、二十九酮、二十六醇、α-菠菜甾醇、皂甙、生物碱、抗坏血酸以及胡萝卜素等(参见《中草药学》中册，第759页，江苏人民出版社，1976年)。众所周知，抗坏血酸极易吸湿，而皂甙、生物碱等具有较强的与黄酮类不同的药理活性。

已视撤的中国发明专利申请“由柴胡制备中成药柴酮粉制剂及针剂”CN95111097.7中，仅含糊提及通过“吸附柱”分离以及反复重结晶、冷冻干燥等方法，制得柴酮粉制剂。

发明内容

本发明要解决的技术问题是研制一种抗流感病毒有效部位黄酮含量高的组合物，以减少杂质，提高疗效。有效部位黄酮含量大提高，有利于减少临床使用的药量。杂质减少不但可改善中成药常有的吸潮性，而且使药效显著，不会产生有些杂质所导致的副作用。

本发明要解决的技术问题还涉及研制一种抗流感有效部位黄酮含量高的组合物的制备工艺，该方法要能够提高活性成分含量，去除大量非黄酮类杂质，同时要重复性、稳定性好，并且原料的得率高，以适合工业化生产。

为解决上述技术问题，本发明研究制定了如下技术方案。

一种抗流感病毒的柴胡黄酮组合物，由中药柴胡地上部分提取分离的柴胡总黄酮组成，其特征在于：该组合物中，柴胡总黄酮含量为50～70％，槲皮甙含量为25～40％。

根据上述柴胡黄酮组合物，其特征在于：含有上述柴胡总黄酮的片剂、胶囊、滴丸、软胶囊、粉针或大、小针剂。

一种抗流感病毒的柴胡黄酮组合物制备方法，其特征在于：

取柴胡水提取液，加入盐酸液调PH至2～5；取酸性滤液过大孔吸附树脂柱，先用水洗至流入液中性；再用加入40～95％浓度的乙醇洗柱；收集洗脱液并浓缩；浓缩物水液用正丁醇萃取；浓缩正丁醇萃取溶液，得柴胡黄酮粉末。

根据上述抗流感病毒的柴胡黄酮组合物制备方法，其特征在于：取柴胡水提取液，加入盐酸液调PH至3～4；所用大孔吸附树脂型号是D-1300、AB-8、D-3520或NKA-9；上大孔吸附树脂后，洗脱乙醇的浓度为50～85％。

所述柴胡黄酮组合物制备方法，其特征在于：所柴胡黄酮粉末中，柴胡总黄酮含量为50～70％，槲皮甙含量为25～40％。

所述柴胡黄酮组合物制备方法，其特征在于：所柴胡黄酮粉末，可以与药学上可接受载体混合。

本发明制得的柴胡黄酮组合物，由于采用了中药现代化技术中的大孔树脂吸附技术，不但使其中的活性成分的含量提高，从而提高了药效，而且去除了大量非黄酮类杂质，既解决了中成药常有的吸潮性大的问题，又减小了副作用。

采用本发明制得的柴胡黄酮组合物中，总黄酮的含量为50～70％，符合中华人民共和国《药品管理法》规定的中药二类的原料标准，明确了其主要成分为抗流感病毒活性成分槲皮甙，通过高效液相法测定，槲皮甙的含量占柴胡黄酮组合物的25～40％。

本发明制得的柴胡黄酮组合物的抗流感病毒实验证明，其有良好的抗流感病毒A及流感病毒B的活性。实验表明：该柴胡黄酮组合物对甲型流感病毒90-15株半数有效剂量(IC50)为：0.492±0.07mg/ml，选择指数(SI)为4.93±0.71；对乙型流感病毒济防97-13半数有效剂量(IC50)为：0.458±0.054mg/ml，选择指数(SI)为5.28±0.62；对乙型流感病毒四川B/2000-3-8半数有效剂量(IC50)为：0.46mg/ml，选择指数(SI)为5.22。以上实验证明：由本发明制得的柴胡黄酮组合物具有良好的抗甲型流感病毒及乙型流感病毒的活性。由以上结果推算，用其制成的片剂每日口服剂量仅仅只需1～3片，比原来的每日口服剂量9～16片大大减少，有利于临床给药。

此外，本发明克服了中药传统工艺的缺陷，运用中药现代化技术中的大孔树脂吸附技术，提供了一种含量高、成分明确、质量可控、药效确切、副作用小的柴胡黄酮组合物及其制备方法，为一种高效低毒的二类中药感冒药。本发明的制备工艺已经通过多批生产验证，证明其重复性、稳定性都好，原料的得率高，适合工业化生产。

具体实施方式

实施例中，所用的提取用水为自来水，所用乙醇为药用级，盐酸和正丁醇为工业级。柴胡地上部分药材产地为江苏盐城；大孔树脂购自南开大学化工厂；测定总黄酮含量的对照品芦丁由国家药品生物制品检定所提供；测定槲皮甙含量的对照品槲皮甙购自SIGMA公司。

测定原料中总黄酮含量的方法，依照中国药典2000版一部附录VB中的比色法。

测定原料中槲皮甙含量的方法，依照中国药典2000版一部附录VID中的高效液相色谱法。色谱条件为：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水(20∶80，磷酸调pH为2.5)为流动相；检测波长为254nm；理论板数按槲皮甙计算应不低于2000。

实施例一：

取柴胡的地上部分100kg，粉碎成粗粉，放入提取罐中；分别加入水600L回流提取3次，每次2小时；提取液加入盐酸液调PH至3.0后，静置，滤除沉淀；滤液过D-1300大孔吸附树脂柱，加去离子水洗脱至流出液澄清且为中性；加入50％的乙醇洗柱，收集洗脱液并浓缩，再加水80L溶解，过滤；滤液分别加入50L正丁醇萃取3次，合并醇溶液；按常规真空减压浓缩醇溶液至干，干燥，得到棕黄色柴胡黄酮原料1.6kg。

经高效液相色谱法测定：上述实验所得柴胡黄酮原料中总黄酮含量为61％，其原料中抗流感病毒主要成分槲皮甙含量为36％。

实施例二：

取柴胡的地上部分150kg，粉碎成2～3cm的段，放入提取罐中；分别加入水900L回流提取3次，每次2小时；提取液加入盐酸液调PH至3.5后，静置，滤除沉淀；滤液过AB-8大孔吸附树脂柱，加去离子水洗脱至流出液澄清且为中性；加入75％的乙醇洗柱，收集洗脱液并浓缩，在加水75L溶解，过滤。滤液分别加入75L正丁醇萃取3次，合并醇溶液。减压浓缩醇溶液至干，干燥，得到棕黄色柴胡黄酮粉末2.2kg。

经高效液相色谱法测定：该柴胡黄酮粉末原料中总黄酮含量为55％，其原料中抗流感病毒主要成分槲皮甙含量为33％。

实施例三：

取柴胡的地上部分120kg，粉碎成2～3cm的段，放入提取罐中；分别加入水720L回流提取3次，每次2小时；提取液加入盐酸液调PH至4.5后，静置，滤除沉淀；滤液过AB-8大孔吸附树脂柱，加去离子水洗脱至流出液澄清且为中性。加入95％的乙醇洗柱，收集洗脱液并浓缩，在加水60L溶解，过滤。滤液分别加入60L正丁醇萃取3次，合并醇溶液。减压浓缩醇溶液至干，干燥，得到棕黄色柴胡黄酮粉末1.9kg。

经高效液相色谱法测定：该原料中总黄酮含量为70％，其原料中抗流感病毒主要成分槲皮甙含量为39％。

Claims (8)

1、一种抗流感病毒的柴胡黄酮组合物，由中药柴胡地上部分提取分离的柴胡总黄酮组成，其特征在于：该组合物中，柴胡总黄酮含量为50～70％，槲皮甙含量为25～40％。

2、根据权利要求1所述柴胡黄酮组合物，其特征在于：含有上述柴胡总黄酮的片剂、胶囊、滴丸、软胶囊、粉针或大、小针剂。

3、一种抗流感病毒的柴胡黄酮组合物制备方法，其特征在于：

取柴胡水提取液，加入盐酸液调PH至2～5；

取酸性滤液过大孔吸附树脂柱，先用水洗至流入液中性；

再用加入40～95％浓度的乙醇洗柱；

收集洗脱液并浓缩；

浓缩物水液用正丁醇萃取；

浓缩正丁醇萃取溶液，得柴胡黄酮粉末。

4、根据权利要求2所述抗流感病毒的柴胡黄酮组合物制备方法，其特征在于：取柴胡水提取液，加入盐酸液调PH至3～4。

5、根据权利要求2所述抗流感病毒的柴胡黄酮组合物制备方法，其特征在于：所用大孔吸附树脂型号是D-1300、AB-8、D-3520或NKA-9。

6、根据权利要求2所述抗流感病毒的柴胡黄酮组合物制备方法，其特征在于：上大孔吸附树脂后，洗脱乙醇的浓度为50～85％。

7、根据权利要求3至6之一所述柴胡黄酮组合物制备方法，其特征在于：所柴胡黄酮粉末中，柴胡总黄酮含量为50～70％，槲皮甙含量为25～40％。

8、根据权利要求3至6之一所述柴胡黄酮组合物制备方法，其特征在于：所柴胡黄酮粉末，可以与药学上可接受载体混合。