CN1317968C - 益生菌发酵液在制备饲料添加剂中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种绿色饲料添加剂，采用如下方法制成：益生菌菌株发酵，产生β-甘露聚糖酶，所述的β-甘露聚糖酶分解被分解后能产生甘露低聚糖和甘露糖的多聚碳水化合物生成甘露低聚糖和甘露糖，最后生成含有β-甘露聚糖酶、甘露低聚糖、甘露糖及益生菌的混合物用作饲料添加剂。本发明制做工艺简单，通过一步发酵可生产含有益生菌，甘露糖及甘露低聚糖，和β-甘露聚糖酶的全价微生态制剂；不需要提纯，精制；成本大大降低，省工省时，饲料转化率高；原材料来源广泛，适合大批量工业化生产。

Description

益生菌发酵液在制备饲料添加剂中的应用

一、技术领域

本发明涉及一种饲料添加剂，尤其是含有低聚糖，益生菌的饲料添加剂及制备生产这种饲料添加剂的方法。

二、背景技术

人们现在已经认识到在饲料中长期滥用抗生素，不仅造成了饲养动物抗病能力的减弱，肉蛋产品质量和肉味的下降，而且大幅度地提高了病原菌中携带抗药因子的机率。因此，开发不含抗生素的饲料添加剂势在必行。微生态制剂作为最有可能代替抗生素的绿色饲料添加剂，受到人们的关注。一般认为微生态制剂包括益生菌和益生元两类。常用畜禽类用益生菌包括，芽胞杆菌属，乳酸杆菌属，双岐杆菌属，链球菌属和光合细胞中的部份菌株。饲料中添加益生菌能够竞争性地抑制病原菌在动物肠道内的繁殖，并产生维生素消化酶等有益物质，被动物吸收和利用。

益生元是指不被动物体所消化的一系列碳水化合物。通常由2-10个相同或不相同的单位组成。能选择性地促进肠内有益菌群的活性和生长繁殖，从而达到增进寄主健康和促生长的作用。畜禽类用的益生元包括低聚果糖，低聚甘露糖，低聚异麦芽糖等多种类型。其中低聚甘露糖及其单糖分子甘露糖以其独特的生理活性受到人们的重视，成为最有可能代替抗生素的新型饲料添加剂。甘露糖和低聚甘露糖的作用机理包括：①能竞争性地和病原菌，例如大肠杆菌，沙门氏菌待细菌表面的受体结合，从而阻止病原菌和肠壁表面的受体结合，加快细菌从肠道排出体外的速度，减少细菌的繁殖。所以在鸡饲料中添加甘露糖可以有效地减少鸡肠道内沙门氏菌的感染(US6080442，US6374220)。②可以刺激和促进动物的免疫机能。(《中国饲料》2001，6，20)。在母猪饲料中添加低聚甘露糖或甘露糖可以提高母猪和仔猪的生产性能(《饲料广角》，2001，20，23)和免疫功能(《中国兽医学报》，2000，20，257)。③可以作为双歧杆菌因子促进双歧杆菌的生长(《天津微生物》1996，2，1)。

赵国琦等在《中国饲料》5，14中报道：在蛋鸡中添加适当水平的β-甘露聚糖酶可以有效地提高产蛋能力和饲料转化率，β-甘露聚糖酶即β-葡甘聚糖酶。Pettey等人在《动物科学杂志，Journal of AnimalScience》80，1012中报道在仔猪饲料中添加β-甘露聚糖酶可以有效地增进仔猪的肉料比。而且进一步在育肥阶段添加不仅可以改善日增重，还可以增加瘦肉比。  中国专利公开说明书CN1264547A公开了一种微生物饲料添加剂，是以正常菌群为主要成分再加入赋形剂，使之加工成粉状微生物饲料添加剂。这种饲料添加剂含益生菌且使用方便，但效果单一，价格昂贵。

中国专利公开说明书CN1262880A公开了一种复合益生素饲料添加剂，由益生素和低聚糖组成，这里的益生素即上面所说的益生菌，是在益生菌的基础上添加有低聚糖。它虽然使益生菌功能更为有效强大，但由于所加入的低聚糖本身为提取物，成本较高，使该饲料添加剂的成本也很高。同时这种益生素饲料添加剂不含β-甘露聚糖酶，对提高饲料转化率没有帮助，其效果单一。

美国专利公开说明书US 5429828和US 6162473公开了在饲料中添加β-甘露聚糖酶的方法。并强调尤其是在玉米豆粕饲料中添加β-甘露聚糖酶可以有效地提高饲料转化率，分解饲料豆粕中含有的β-甘露聚糖酶，提高饲料的营养价值。但由于所加入的β-甘露聚糖酶本身为纯化后的酶粉，成本较高，限制了该饲料添加剂的使用。

另外美国专利公开说明书US 6374220公开了一种用酶法部分分解椰子粕中的β-甘露聚糖得到甘露糖并作为饲料添加剂的方法，发现在饲料中加入含有甘露糖的酶解椰子粕可以有效地降低鸡肠道内沙门氏菌的含量。但是这种在饲料中直接加入酶或甘露糖和低聚甘露糖的方法所生产出的产品价格比较贵，而且做为饲料添加剂不含益生菌，其效果单一。

三、发明 内容

本发明要解决的技术问题是提供一种能促进畜禽类健康生长的绿色饲料添加剂及生产制备这种绿色饲料添加剂的方法，以解决现有技术中生产绿色饲料添加剂成本高价格昂贵、费工费时的缺点。为此，本发明采取以下技术方案：

一种饲料添加剂，采用如下方法制成：益生菌菌株发酵，产生β-甘露聚糖酶，所述的β-甘露聚糖酶分解被分解后能产生甘露低聚糖和甘露糖的多聚碳水化合物生成甘露低聚糖和甘露糖，最后生成含有β-甘露聚糖酶、甘露低聚糖，甘露糖及益生菌的混合物用作饲料添加剂；该方法包括下述步骤：

(1)分别选择益生菌、适合所选益生菌生长的氮源混合，再加入被分解后能产生甘露低聚糖和甘露糖的多聚碳水化合物混合发酵，所述多聚碳水化合物加量为1g/L-20g/L，所述发酵液中所述益生菌的接种量量控制在1％-10％之间；

(2)用酸或碱将发酵液pH调至5.5-7.5，温度控制在25℃-42℃，开始发酵反应；

(3)发酵终止时间以多聚碳水化合物被分解成低聚糖为止，时间为8-72小时；

(4)发酵终止时，发酵液即为最终产品。

所述的饲料添加剂，所述益生菌至少含有下式之一：①芽孢杆菌；②曲霉。

所述芽孢杆菌可以是下式之一①枯草芽孢杆菌②地衣芽孢杆菌③迟缓芽孢杆菌。

所述曲霉可以是下式之一①黑曲霉②米曲霉。

所述多聚碳水化合物至少含有下式之一：①魔芋粉；②角豆胶；③瓜胶。

进一步，所述的饲料添加剂，其优选多聚碳水化合物为魔芋粉，最终产物含甘露糖和甘露低聚糖、β-甘露聚糖酶。

再进一步，所述的饲料添加剂，其优选益生菌为枯草芽孢杆菌，所述的多聚碳水化合物为魔芋粉，即枯草芽孢杆菌菌株发酵产生β-甘露聚糖酶分解魔芋粉，最终产物含甘露糖和甘露低聚糖、β-甘露聚糖酶及枯草芽孢杆菌。

所述的饲料添加剂，在发酵过程中加食品级消泡剂。

所述的饲料添加剂，可将发酵液直接加入到动物的饮用水中饮用，也可将发酵终止时的发酵液适当浓缩，加入饲料用赋形剂，用干燥法制成小颗粒或粉状。所述赋形剂可以是动物饲料的某一组分或食品添加剂中的某一组分。

所述的饲料添加剂的使用方法：可以加入动物的饮用水中饮用，亦可拌入饲料中饲用。

本发明所述的饲料添加剂含有如下特点：

第一，本发明中的饲料添加剂同时含有饲用益生菌和甘露糖、甘露低聚糖、β-甘露聚糖酶。

第二，本发明中的饲料添加剂含有的甘露糖、甘露低聚糖由益生菌分解多聚碳水化合物而制成。

第三，本发明中的益生菌发酵可以产生β-甘露聚糖酶来分解，所以本发明中的饲料添加剂含有高活性的β-甘露聚糖酶。

本发明中所指的益生菌是特指美国FDA批准用作直接饲喂的微生物和中国农业部1999年6月批准可直接饲喂动物的饲料级微生物添加剂收载范围内，凡可以产生β-甘露聚糖酶分解生成甘露糖、甘露低聚糖的益生菌都在使用范围之内，如芽孢杆菌中的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和迟缓芽孢杆菌。再如曲霉中的黑曲霉和米曲霉。本发明优先使用的菌株是枯草芽胞杆菌。

本发明中所使用的多聚碳水化合物优选魔芋粉，魔芋粉是特指魔芋球茎(Amorpliorli allus Konjac)干燥后制成的白色或灰白色颗粒状粉末，对魔芋粉的质量没有特别要求。发酵液中磨芋粉的加量，从1g/L到20g/L都可以，只要益生菌能够快速生长，分泌足够能量的β-甘露聚糖酶，分解磨芋粉中的葡甘聚糖。其它可以促进可分解甘露糖和甘露低聚糖的益生菌生长的多聚碳水化合物都在使用范围之内，如角豆胶、瓜胶。角豆胶或瓜胶是从Sigma(Sigma Co.Ltd)得到的白色粉末，对角豆胶或瓜胶的质量没有特别要求。本发明中所选用的氮源是指能促进可分解甘露糖及甘露低聚糖的益生菌生长的培养基的组份，包括：①玉米浆；②蛋白胨；③酵母膏；④微量元素；⑤磷酸缓冲液；⑥维生素；⑦氨基酸；⑧牛肉膏等，可根据不同益生菌生长和分解多聚碳水化合物的要求增添和重新组合。在发酵过程中根据生长要求可使用食品级消泡剂。

发酵过程中PH值可根据不同益生菌株的要求用酸和碱调整到合适的水平。通常控制在5.5-7.5。

发酵过程中的温度控制可根据不同益生菌菌株的要求调整。一般在25℃～42℃之间。发酵终止时间以碳源分解成甘露糖、甘露低聚糖为止，一般为8-72小时。

发酵液中益生菌的含量根据不同菌株有所区别，但益生菌的接种量可控制有1％-10％之间，一般β-甘露聚糖酶含量达到70单位/毫升。

发酵终止时的发酵液即为最终产品。也可根据需要进行适当浓缩。并可混入适当赋形剂，用干燥的方法制成小颗粒状或粉状。赋形剂可选用动物饲料中所添加的各种组份或食品添加剂中的组分，也可以是干燥时所添加的包埋剂。

本发明中所涉及的含有甘露糖、甘露低聚糖和益生菌的微生态制剂可以以液体形式加入到蛋鸡，肉鸡，鸽，鸭，鹅，猪，牛，羊的饮水中，或给动物灌服或拌入饲料中饲用。也可以以干燥后的颗粒或粉状形式，添加到预混饲料，全价饲料中。

本发明还提供饲料添加剂的制备方法：益生菌菌株发酵，产生β-甘露聚糖酶，所述的β-甘露聚糖酶分解被分解后能产生甘露低聚糖和甘露糖的多聚碳水化合物生成甘露低聚糖和甘露糖，最后生成含有β-甘露聚糖酶、甘露低聚糖，甘露糖及益生菌的混合物用作饲料添加剂；该方法包括下述步骤：

①分别选择益生菌、适合所选益生菌生长的氮源混合，再加入被分解后能产生甘露低聚糖和甘露糖的多聚碳水化合物混合发酵，所述多聚碳水化合物加量为1g/L-20g/L，所述发酵液中所述益生菌的接种量控制在1％-10％之间；

②用酸或碱将发酵液pH调至5.5-7.5，温度控制在25℃-42℃，开始发酵反应；

③发酵终止时间以多聚碳水化合物被分解成低聚糖为止，时间为8-72小时；

④发酵终止时，发酵液即为最终产品。

本发明的实际效果是以发酵终止液所产生的还原糖含量来评价的，如用3，5-2硝基水杨酸比色法测定发酵终止液中甘露糖及甘露低聚糖的总还原糖含量，并计算β-甘露聚糖酶活性，用高效液相法测定发酵终止液中甘露糖含量或测定甘露糖，另外用紫外分光光度法在波长600毫米处测量益生菌的生长情况。

本发明相对于现有的微生态制剂具有以下优点：

1、制做工艺简单，通过一步发酵可生产含有益生菌，甘露糖及甘露低聚糖，和β-甘露聚糖酶的全价微生态制剂。不需要提纯，精制。

2、成本大大降低，原材料来源广泛，适合大批量工业化生产。

3、省工省时，饲料转化率高。

四、附图说明

图1是本发明中枯草芽胞杆菌在含有0.1％魔芋粉培养基中的生长曲线。

五、具体实施方式

实施例1

多聚碳水化合物选用魔芋粉，益生菌选用枯草芽胞杆菌，氮源选用蛋白胨及牛肉膏。通过发酵方法利用枯草芽胞杆菌自身所产生的β-甘露聚糖酶分解魔芋粉产生甘露糖，甘露低聚糖而制成。最终产品中含有甘露糖，甘露低聚糖，β-甘露聚糖酶和枯草芽胞杆菌。本实施例使用的魔芋粉是含有80％以上β-葡甘聚糖的魔芋精粉，其中淀粉的含量占2.4％。

制备方法：5％枯草芽胞杆菌XL13菌种接种于含有0.1％磨芋粉(含量：1g/L)的培养其中。培养基选用：牛肉膏3g/L，蛋白胨10g/L，氯化钠5g/L。PH值7.0～7.2；37℃摇床培养24小时。用紫外分光光度计在波长600毫米处测量生长，枯草芽胞杆菌XL13在磨芋培养基中的生长曲线如图1所示。发酵终止液用HPLC检测甘露糖、甘露低聚糖含量，HPLC的分析条件：SHODEX KS-801糖柱，长度300mm×8mm，700℃柱温，1ul/min流速，示差检测器(RID，350C)。24小时发酵终止液中甘露糖含量达到0.17mg/ml.

实施例2

益生菌、多聚碳水化合物、氮源选择如实施例1，制备方法如下：5％枯草芽胞杆菌XL13，接种在含有2.0％磨芋粉(含量：20g/L)的培养基中。培养基组份如实施例1中所述。在0小时、8小时、27小时、62小时、72小时取样，用3，5-2硝基水杨酸比色法测定发酵液中还原糖含量(AppliedMicrobiology and Biotechnology 26，323)。酶活性定义为每分钟释放1μmol相当于D-甘露糖的还原糖所需的酶量为1个酶活力单位。结果见表1。酶活力最高达到162IU/ml.

表1：

菌株	发酵时间(小时)	生长(OD600)	还原糖含量(mg/ml)	酶活力(IU/ml)
					5％枯草芽包杆菌XL13	0	0.14	0.43	-
8	0.62	4.57	-
				23		1.34	7.12	162.0
62	1.23	3.27	67.3
				72		1.28	3.16	-

实施例3

益生菌、多聚碳水化合物、碳源选择如实施例1，制备方法如下：5％地衣芽胞杆菌XL42，接种在含有2.0％磨芋粉的培养基中。培养基组份如实施例一中所述。在0小时、8小时、27小时、62小时、72小时取样，用3，5-2硝基水杨酸比色法测定发酵液中还原糖含量(AppliedMicrobiology and Biotechnology 26，323)。酶活性定义为每分钟释放1μmol相当于D-甘露糖的还原糖所需的酶量为1个酶活力单位。结果见表2。酶活力最高达到38IU/ml。

表2：

菌株

发酵时间(小时)

生长(OD600)

还原糖含量(mg/ml)

酶活力(IU/ml)

5％地衣芽包杆菌XL42	0	0.15	0.43	-
					8	0.84	0.66	-
	23	1.50	5.61	38.0
					62	1.75	3.66	20.7
	72	1.73	3.36	-

实施例4

益生菌、多聚碳水化合物、碳源选择如实施例1，制备方法如下：5％迟缓芽胞杆菌XL12，接种在含有2.0％磨芋粉的培养基中。培养基组份如例一中所述。在0小时、8小时、27小时、62小时、72小时取样，用3，5-2硝基水杨酸比色法测定发酵液中还原糖含量(AppliedMicrobiology and Biotechnology 26，323)。酶活性定义为每分钟释放1μmol相当于D-甘露糖的还原糖所需的酶量为1个酶活力单位。结果见表1。酶活力最高达到83.3IU/ml。

表3：

菌株	发酵时间(小时)	生长(OD600)	还原糖含量(mg/ml)	酶活力(IU/ml)
					迟缓芽包杆菌XL12	0	0.14	0.43	-
8	0.67	0.60	-
				23		1.24	6.21	83.3
62	1.62	3.80	77.6
				72		1.652	3.86	-

实施例5

多聚碳水化合物选用魔芋粉，益生菌选用地衣芽孢杆菌，氮源如实施例1，地衣芽孢杆菌XL42接种在含有1.0％磨芋粉(10g/L)培养基中。培养基组份如例1中所述。23小时发酵液样品进一步用HPLC分析甘露糖，甘露低聚糖含量。HPLC的分析条件：SHODEX KS-801糖柱，长度300mm×8mm，700C柱温，1ul/min流速，示差检测器(RID，350C)。23小时样品中甘露糖含量达到0.95mg/ml.

实施例6

多聚碳水化合物选用角豆胶，益生菌选用枯草芽胞杆菌，氮源如实施例1。本实施例使用的角豆胶是从Sigma(Sigma Co.Ltd)得到的含有95％以上纯度的白色粉末。通过发酵方法利用枯草芽胞杆菌自身所产生的β-甘露聚糖酶分解底物生成含有甘露低聚糖β-甘露聚糖酶和枯草芽胞杆菌的最终产品。制备方法：以1％的角豆胶(含量：10g/L)做为多聚碳水化合物，发酵培养基中的其它组份如实施例1中所述；5％的枯草芽胞杆菌XL13菌种接种于含有角豆胶的培养其中，经过在37℃摇床上培养24小时，测量菌体的生长和还原糖含量。同时取其发酵0小时、8小时、24小时、72小时发酵液测量菌体的生长和还原糖含量。结果见表4。枯草芽胞杆菌可以利用角豆胶作为多聚碳水化合物生长，产生B-甘露聚糖酶分解底物生成含有甘露糖、甘露低聚糖的产品

表4

菌株

多聚碳水

发酵时间

生长(OD600)

还原糖含量

	化合物	(小时)		(mg/ml)
					5％的枯草芽胞杆菌XL13	1％的角豆胶	0	0.02	0.07
8	0.56	2.04
			24	1.34			5.21
72	1.40	3.01

实施例7

多聚碳水化合物选用瓜胶，益生菌选用枯草芽胞杆菌，氮源如实施例1。本实施例使用的瓜胶是从Sigma(Sigma Co.Ltd)得到的含有95％以上纯度的白色粉末。通过发酵方法利用枯草芽胞杆菌自身所产生的β-甘露聚糖酶分解底物生成含有甘露低聚糖、β-甘露聚糖酶和枯草芽胞杆菌最终产品。制备方法：以1％的瓜胶(含量：1g/L)做为多聚碳水化合物，发酵培养基中的其它组份如实施例1中所述；5％的枯草芽胞杆菌XL13菌种接种于含有瓜胶的培养其中，经过在37℃摇床上培养24小时，测量菌体的生长和还原糖含量。同时取其发酵0小时、8小时、24小时、72小时发酵液测量菌体的生长和还原糖含量。结果见表4。枯草芽胞杆菌可以利用瓜胶做为多聚碳水化合物生长，产生β-甘露聚糖酶分解底物生成含有甘露糖、甘露低聚糖的产品。

表5

菌株	多聚碳水化合物	发酵时间(小时)	生长(OD600)	还原糖含量(mg/ml)
					5％的枯草芽胞杆菌XL13	1％的瓜胶	0	0.03	0.05
8	0.57	0.23
			24	1.45			1.39
72	1.56	2.67

实施例8

多聚碳水化合物选用魔芋粉，益生菌选用黑曲霉，氮源选用酵母膏、蛋白胨。制备方法：5％的黑曲霉XLn-1种液接种于含有1％魔芋粉(含量：10g/L)的培养基中。培养基中的其它组份包括(克/立升)：酵母膏5，蛋白胨5。在37℃培养72小时之后，取上清液测量还原糖含量。结果见表6。

实施例9

多聚碳水化合物选用角豆胶，益生菌选用黑曲霉，氮源氮源选用酵母膏、蛋白胨。制备方法：5％的黑曲霉XLn-1种液接种于含有1％角豆胶(含量：10g/L)的培养基中。培养基中的其它组份包括(克/立升)：酵母膏5，蛋白胨5。在37℃培养72小时之后，取上清液测量还原糖含量。结果见表6。

实施例10

多聚碳水化合物选用瓜胶，益生菌选用黑曲霉，氮源氮源选用酵母膏、蛋白胨。制备方法：5％的黑曲霉XLn-1种液接种于含有1％瓜胶(含量：10g/L)的培养基中。培养基中的其它组份包括(克/立升)：酵母膏5，蛋白胨5。在37℃培养72小时之后，取上清液测量还原糖含量。结果见表6。

实施例11

多聚碳水化合物选用魔芋粉，益生菌选用米曲霉，氮源选用酵母膏、蛋白胨。制备方法：5％的米曲霉XLn-1种液接种于含有1％魔芋粉(含量：10g/L)的培养基中。培养基中的其它组份包括(克/立升)：酵母膏5，蛋白胨5。在37℃培养72小时之后，取上清液测量还原糖含量。结果见表6。

实施例12

多聚碳水化合物选用角豆胶，益生菌选用米曲霉，氮源氮源选用酵母膏、蛋白胨。制备方法：5％的米曲霉XLn-1种液接种于含有1％角豆胶(含量：10g/L)的培养基中。培养基中的其它组份包括(克/立升)：酵母膏5，蛋白胨5。在37℃培养72小时之后，取上清液测量还原糖含量。结果见表6。

实施例13

多聚碳水化合物选用瓜胶，益生菌选用米曲霉，氮源氮源选用酵母膏、蛋白胨。制备方法：5％的米曲霉XLn-1种液接种于含有1％瓜胶(含量：10g/L)的培养基中。培养基中的其它组份包括(克/立升)：酵母膏5，蛋白胨5。在37℃培养72小时之后，取上清液测量还原糖含量。结果见表6。

表6

实施例	益生菌菌株	多聚碳水化合物	还原糖含量(mg/ml)
				实施例8	黑曲霉XLn-1	1％魔芋粉	2.13
实施例9	黑曲霉XLn-1	1％角豆胶	4.10
				实施例10	黑曲霉XLn-1	1％瓜胶	1.24
实施例11	米曲霉Xla-2	1％魔芋粉	3.67
				实施例12	米曲霉Xla-2	1％角豆胶	2.34
实施例13	米曲霉Xla-2	1％瓜胶	1.07

Claims (11)

1、益生菌发酵液在制备饲料添加剂中的应用，其特征在于所述饲料添加剂采用如下方法制成：益生菌菌株发酵，产生β-甘露聚糖酶，所述的β-甘露聚糖酶分解被分解后能产生甘露低聚糖和甘露糖的多聚碳水化合物生成甘露低聚糖和甘露糖，最后生成含有β-甘露聚糖酶、甘露低聚糖、甘露糖及益生菌的混合物用作饲料添加剂；该方法包括下述步骤：

(1)分别选择益生菌、适合所选益生菌生长的氮源混合，再加入被分解后能产生甘露低聚糖和甘露糖的多聚碳水化合物混合发酵，所述多聚碳水化合物加量为1g/L-20g/L，上述发酵液中所述益生菌的接种量控制在1％-10％之间；

(2)用酸或碱将发酵液pH调至5.5-7.5，温度控制在25℃-42℃，开始发酵；

(3)发酵终止时间以多聚碳水化合物被分解成低聚糖为止，时间为8-72小时；

(4)发酵终止时，发酵液即为最终产品。

2、如权利要求1所述的益生菌发酵液在制备饲料添加剂中的应用，其特征在于所述益生菌至少含有下式之一：①芽孢杆菌②曲霉。

3、如权利要求2所述的益生菌发酵液在制备饲料添加剂中的应用，其特征在于所述芽孢杆菌为下式之一：①枯草芽孢杆菌②地衣芽孢杆菌③迟缓芽孢杆菌。

4、如权利要求2所述的益生菌发酵液在制备饲料添加剂中的应用，其特征在于所述曲霉为下式之一：①黑曲霉②米曲霉。

5、如权利要求1所述的益生菌发酵液在制备饲料添加剂中的应用，其特征在于所述多聚碳水化合物至少含有下式之一：①魔芋粉②角豆胶③瓜胶。

6、如权利要求2所述的益生菌发酵液在制备饲料添加剂中的应用，其特征在于所述多聚碳水化合物至少含有下式之一：①魔芋粉②角豆胶③瓜胶。

7、如权利要求3所述的益生菌发酵液在制备饲料添加剂中的应用，其特征在于所述多聚碳水化合物至少含有下式之一：①魔芋粉②角豆胶③瓜胶。

8、如权利要求4所述的益生菌发酵液在制备饲料添加剂中的应用，其特征在于所述多聚碳水化合物至少含有下式之一：①魔芋粉②角豆胶③瓜胶。

9、如权利要求1所述的益生菌菌株发酵液在制备饲料添加剂中的应用，其特征在于所述的多聚碳水化合物为魔芋粉，最终产物含甘露糖和甘露低聚糖、β-甘露聚糖酶。

10、如权利要求1所述的益生菌发酵液在制备饲料添加剂中的应用，其特征在于所述益生菌为枯草芽孢杆菌，所述的多聚碳水化合物为魔芋粉，即枯草芽孢杆菌菌株发酵产生β-甘露聚糖酶分解魔芋粉，最终产品含甘露糖和甘露低聚糖、β-甘露聚糖酶及枯草芽孢杆菌。

11、如权利要求1-10所述的益生菌发酵液在制备饲料添加剂中的应用，其特征在于在发酵过程中加食品级消泡剂。