CN1292376A - 合成制备高效止血药三七素的方法 - Google Patents

Abstract

本发明为一种止血药物的合成制备方法,包括以下步骤:将L－天冬素与苯磺基卤化物进行反应,再作霍夫曼重排得到(见右式)，然后将此化合物加上草酰基,再用苯酚+25～42%氢溴酸/醋酸水解得到目的物三七素。产品纯度可达90%以上,药理、药效与天然提取物完全一致,能够有效缩短出血时间和增加血小板数量。化学合成比提取相对简单,反应条件温和,操作简便,且原料易得,使得成本低廉,有利于工业生产。

Description

合成制备高效止血药三七素的方法

本发明为一种止血药物的合成制备方法。

三七，又名田七，为五加科人参属植物三七的干燥根，具有止血散瘀、消肿定痛、舒经活络等作用，其中尤以止血功能称著。《本草纲目》称三七为“止血之神药”；《本草拾遗》称“三七止血活血，止血不伤新”。历版《中华人民共和国药典》对三七的主治功能均界定其“止血散瘀，活血生肌”的特点。数百年来，历代医家将三七广泛用于跌打损伤、内伤出血等内外出血症。现代科学研究更是对其活血化瘀成份作了深入的探索，对其多种有效成份作了详细的阐述。但其止血活性成份和止血机理则很少报道。

本发明专利申请人据此对三七作了进一步的研究，发现了其中所含止血活性物质为单体化合物β-N-乙酰基-L-α，β二氨基丙酸。而且根据实验结果已知这种物质在大量使用的情况下，将显示神经毒作用，但在少量使用时，则不显示神经毒的作用而显示出强力的止血及血小板增加作用，用1-2mg即可充分显示治疗效果。

β-N-乙二酰基-L-α，β二氨基丙酸，在现代科学(印度)第32卷153页(1963年)、生物化学第3卷第三期432页(1964年)及生物化学第11卷第22期4053页(1972年)等文献中是作为山黎豆属sativus种子中的神经毒而报道的。1980年日本学者小营卓夫首先从三七中分离出β-N-乙二酰基-L-α，β二氨基丙酸，正式命名为三七素(dencichine)。

本发明的目的是提供止血药三七素的合成制备方法。

三七素的化学结构式为：

本发明制备三七素β-N-乙酰基-L-α，β二氨基丙酸的方法是按以下步骤进行的：将L-天冬素与苯磺基卤化物进行反应，再作霍夫曼重排得到

然后将此化合物加上草酰基，再用苯酚+25～42％氢溴酸／醋酸水解得到目的物三七素。

上述所说的“苯磺基卤化物”最好为P-甲苯磺酰氯。所说的“将此化合物加上草酰基”最好为将此化合物与草酰氯进行反应。所说的“用苯酚+25～42％氢溴酸／醋酸水解”最好为用占此化合物加上草酰基后所得物重量的0．5-1．5倍的苯酚、再加上28～34％氢溴酸／醋酸水解。所说的“醋酸”最好为冰醋酸。

本发明的积极效果是：根据β-N-乙二酰基-L-α，β二氨基丙酸这种化合物的结构，采用化学合成方法合成了该化合物，产品纯度可达90％以上。该化合物药理、药效与天然提取物完全一致，而且化学合成比提取相对性简单，反应条件温和，操作简便，且原料易得，使得成本更加低廉，有利于工业生产；不像提取须用Sephadex LH-20凝胶树脂和CM Sephadex C-25离子交换树脂分离，价格较为昂贵，限制了大规模生产，不利于工业化生产。

下面用实施例来对本发明做进一步的说明。

实施例：

步骤：把40g L-天冬素溶解于800ml蒸馏水中，加入40g氧化镁，冰浴冷却至0℃，在激烈搅拌下加入76g P-甲苯磺酰氯，反应3小时，室温搅拌过夜。滴加浓HCl调节PH为2～3，过滤沉淀，甲醇重结晶得49g N-(P-Ts)-L-天冬素晶体。

取NaOH 38g，溶解于288ml蒸馏水中，冰浴冷却至0℃，滴加10ml Br₂；将38．2g N-(P-Ts)-L-天冬素溶解于112ml 10％ NaOH溶液，滴加到上述溶液中，反应15分钟，迅速升温至75℃，反应2小时，冷至室温，加浓HCl调节PH为7，过滤得22g白色沉淀，用10％水合乙酸重结晶得15．7g白色晶体，为α-N-(P-Ts)-L-α，β二氨基丙酸。

把草酰氯20ml溶于干燥二氧六环250ml中，在此溶液中加入15g α-N-(P-Ts)-L-α，β二氨基丙酸，室温反应6小时后，在反应液中投入少量冰块，终止反应，浓缩反应液至油状液，加入二氯甲烷，析出晶体，过滤得13g β-N-乙二酰基-α-N-(P-Ts)-L-α，β二氨基丙酸。

取5g β-N-乙酰基-α-N-(P-Ts)-L-α，β二氨基丙酸、5．2g苯酚、溶解100ml 32％ HBr／HAc中，85℃反应8小时，冷至室温，加入600ml乙醚中，过滤沉淀物，用少量乙醚洗涤，将此沉淀溶于少量蒸馏水中，注入二乙胺乙基葡聚糖凝胶柱上，用1000ml蒸馏水冲洗，再用2．5％甲酸洗脱，收集洗脱液呈茚三酮阳性反应部分，浓缩，低温放置，析出结晶，过滤，干燥，得到1．38g目的产物β-N-乙二酰基-L-α，β二氨基丙酸。

m．p．206℃(分解)

[α]²⁴ _D：-17°(c=2，4NHCl)

元素分析值(设定C₅H₈N₂O₅·H₂O)

      C       N       H理论值：30．93    14．43    5．19实际值：30．88    14．3g    5．15

以下内容是测定由以上实施例得到的β-N-乙二酰基-L-α，β二氨基丙酸的止血作用及增加血小板数量作用。

1．止血作用

将生理盐水注入体重18-22g小鼠腹腔内，30分钟后断尾取血，分别采用玻片法和毛细管法，每隔15秒钟，观察有无凝血，测量凝血时间，作为对照组的止血时间。

将β-N-乙酰基-L-α，β二氨基丙酸溶于蒸馏水中，注入小鼠腹腔内，与对照组一样，测量凝血时间。

与对照组的凝血时间的差，即为出血缩短时间。结果如下：实验用化合物／生理      对照组    试验组    缩短出血时间盐水(mg／ml)1mg／ml                 6′30″   1′09″   5′24″

                    6′21″   1′03″   5′18″0．5mg／ml              6′10″   2′48″   3′22″

                    6′19″   2′54″   3′25″0．25mg／ml             6′13″   3′28″   2′45″

                    6′25″   3′34″   2′51″

2．血小板增加作用

将本发明的化合物β-N-乙二酰基-L-α，β二氨基丙酸1mg溶解于0．5ml生理盐水中，注入体重为18-22g小鼠腹腔中，30分钟后摘除一侧眼球并采血，然后用直接法测量血小板数量。

对照组以0．5ml生理盐水腹腔注射。结果如下：

    血小板增加数目(万个／ml)对照组        54．6±3．52试验组        68．5±7．61

试验组血小板约比对照组增加30％。

通过实验证明，本发明方法制得的化合物能够有效缩短出血时间和增加血小板数量。

以上实施例仅为了对本发明作进一步的说明，而本发明的范围不受所举实施例的局限。

Claims (5)

1、一种合成制备高效止血药三七素的方法，其特征是按以下步骤进行：将L-天冬素与苯磺基卤化物进行反应，再作霍夫曼重排得到

然后将此化合物加上草酰基，再用苯酚+25～42％氢溴酸／醋酸水解得到目的物三七素。

2、如权利要求1所说的合成制备高效止血药三七素的方法，其特征是所说的苯磺基卤化物为P-甲苯磺酰氯。

3、如权利要求1所说的合成制备高效止血药三七素的方法，其特征是所说的“将此化合物加上草酰基”为将此化合物与草酰氯进行反应。

4、如权利要求1所说的合成制备高效止血药三七索的方法，其特征是所说的“用苯酚+25～42％氢溴酸／醋酸水解”为用占此化合物加上草酰基后所得物重量的0．5-1．5倍的苯酚、再加上28～34％氢溴酸／醋酸水解。

5、如权利要求1所说的合成制备高效止血药三七素的方法，其特征是所说的醋酸为冰醋酸。