CN114621323B - 一类具有皮肤修复作用的多肽化合物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一类具有皮肤修复作用的多肽化合物及其制备方法和应用。具体地，所述多肽化合物衍生物具有如SEQ ID NO.1所示的序列，且该序列的C端或N端修饰有双分子透明质酸或α‑生育酚：本发明还公开了多肽化合物衍生物在制备化妆品或外用药品中的用途；所述化合物中或外用药品为用于促进伤口愈合、降低伤口疤痕面积和疤痕程度、用于提高胶原蛋白的形成、减少皮肤褶皱面积或褶皱程度以及用于减少烫伤损伤、减轻痤疮凹洞以及减少凸起疤痕。

Description

一类具有皮肤修复作用的多肽化合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及生物医药领域和医美化妆品领域，主要用于人类皮肤修复领域所涉及的化合物及产品领域。
背景技术
皮肤是覆盖人体表面最大的器官，是人体与外界环境之间的屏障，也是人体免于脱水、损伤、感染的第一道防线。同时，皮肤也是最容易受到创伤的器官，炎症、溃疡、皮肤病、外界创伤、烧伤、烫伤、手术等均可能造成皮肤永久性的缺损和留下疤痕。这些缺损和疤痕不仅影响肌肤的美观，还会导致一系列的机体内外环境失调，引起免疫系统的紊乱。除此之外，人体衰老往往也是最先从皮肤开始，色泽变深、斑纹、皱纹等都会影响人们的日常生活。
皮肤保养和创伤皮肤的修复是目前人类生活中非常关注的一个问题。目前主要的方法一些药物的使用和一些化妆品的保养。
皮肤由表皮、真皮和皮下组织构成。目前的皮肤创伤药物治疗，通常是采用一些化学渗透增强剂来试图打开皮肤屏障，从皮下组织完成对皮肤的修复，但是大多数效果并不理想。
在化妆品领域，目前用于皮肤保养的化妆品主要为两类，一类为化学原料为主的化妆品，这些化妆品一些含有激素、果酸以及大量的化学物质和化学物质本身含有的杂质，这些物质长期使用会对人体皮肤造成较大的伤害，最终只能通过一些覆盖性的化妆品来掩盖皮肤本身的创伤和老化，并不能从根本上解决皮肤的问题。还一类化妆品为植物提取原料的化妆品，这类化妆品相对来说比较安全，但是主要从皮肤表层补水和补充营养物质，但是这些水分和营养物质很难深入皮肤的皮下组织，起效缓慢，效果并不明显。
多肽作为一种与蛋白质具有相同结构的分子，参与人体多种的生理活动，生物活性极高，小剂量多肽即可对多种细胞生理功能和代谢活动发挥生物调节作用。近年来，一些序列短小、合成简单的促进皮肤修复和抗衰老的多肽受到人们的广泛关注，被大众认为是最为安全的修复皮肤的活性原料之一。
但是，无法否认的是，目前在化妆品领域得到广泛应用的多肽，因为多肽本身的结构特点，普遍存在这皮肤吸收困难，见效缓慢并且效果不明显的局限性。
在前期研究中(CN1879888A)公开了一种短肽，其具有促进透皮吸收的作用，其序列为ACSSSPSKHCG(TD1)，其可以增加活性成分透过皮肤。还公开了将其与0到多种皮肤养护的有效成分共同制成美容制剂。
现有技术中虽然有一些关于TD1的应用和报道，但是并未公开其促进透皮吸收的机理，且有报道认为其存在一定的剂量依赖性。
基于上述多肽化妆品存在的问题，开发一些能够修复皮肤创伤，抑制皮肤衰老，同时还能够穿过皮肤表层，达到真皮层和皮下组织利于皮肤吸收的多肽分子，成为了人们一种迫切的愿望。
发明内容
本发明提供一些具有皮肤修复和抗衰老活性的多肽化合物，具有良好的皮肤修复和抗衰老效果，在医药、化妆品中均具有很大的开发前景。
本发明提供的技术方案如下：
本发明一个方面提供了一种多肽化合物衍生物或其药学上可接受的盐，所述多肽化合物衍生物具有如SEQ ID NO.1所示的序列，且该序列的C端或N端修饰有双分子透明质酸或α-生育酚：
所述SEQ ID NO.1为NH2-Ala-Cys-Ser-Ser-Ser-Pro-Ser-Lys-His-Cys-Gly-OH。
进一步地，所述多肽化合物衍生物选自在C端修饰有α-生育酚的多肽化合物衍生物，其具有如式I所示的结构式：
Figure BDA0003580597900000021
进一步地，所述多肽化合物衍生物选自在N端修饰有双分子透明质酸的多肽化合物衍生物，其具有如式II所示的结构式：
Figure BDA0003580597900000031
本发明另一个方面提供了上述多肽化合物衍生物的制备方法，所述制备方法包含以下步骤：
制备或获得SEQ ID NO.1序列多肽；在SEQ ID NO.1的C端或N端偶联双分子透明质酸或α-生育酚并纯化。
进一步地，制备在C端修饰有α-生育酚的多肽化合物衍生物时，包括以下步骤：
S11)采用固相合成的方法制备侧链全保护的SEQ ID NO.1序列多肽；
S12)在侧链全保护的SEQ ID NO.1的C端偶联α-生育酚，与生育酚上的酚基形成酯键；
S13)裂解SEQ ID NO.1侧链保护基，并纯化，获得C端修饰有α-生育酚的多肽化合物衍生物。
进一步地，制备在N端修饰有双分子透明质酸的多肽化合物衍生物时，包括以下步骤：
S21)采用固相合成的方法制备侧链全保护的SEQ ID NO.1序列多肽-固相合成树脂的肽树脂化合物；
S22)在肽树脂化合物的N端偶联双分子透明质酸，与双分子透明质酸的羧基形成酰胺键；
S23)裂解偶联双分子透明质酸的肽树脂，并纯化，获得N端修饰有双分子透明质酸的多肽化合物衍生物。
本发明再一个方面提供了上述多肽化合物衍生物在制备化妆品或外用药品中的用途。
进一步地，所述化合物中或外用药品为用于促进伤口愈合，降低伤口疤痕面积和疤痕程度。
进一步地，所述化合物中或外用药品为用于提高胶原蛋白的形成、减少皮肤褶皱面积或褶皱程度。
进一步地，所述化合物中或外用药品为用于减少烫伤损伤、减轻痤疮凹洞以及减少凸起疤痕。
本发明再一个方面提供了一种化妆品或外用药品，其包含本发明所述多肽化合物衍生物和或其药学上可接受的盐。
进一步地，所述化妆品还包括其他辅料，所述外用药物还包含可药用辅料。
进一步地，所述化妆品中还包含除本发明所述多肽化合物衍生物和或其药学上可接受的盐以外的其他活性成分。
进一步地，所述化妆品选自凝胶、乳液、精华液、眼霜、面膜、面霜、冻干粉、柔肤水。
进一步地，所述外用药品选自药膏、药水、药用凝胶、药用乳膏、药用乳液、敷贴药剂。
本发明再一个方面提供了一种皮肤外用水凝胶，所述皮肤外用水凝胶包含作为活性成分的本发明所述的多肽化合物衍生物或其药学上可接受的盐。
进一步地，所述皮肤外用水凝胶还包含水凝胶基质。
本发明再一个方面提供了一种皮肤外用精华液，所述皮肤外用精华液包含作为活性成分的本发明所述的多肽化合物衍生物或其药学上可接受的盐。
本发明再一个方面提供了一种皮肤外用乳液，所述皮肤外用乳液包含作为活性成分的本发明所述的多肽化合物衍生物或其药学上可接受的盐。
本发明的主要优点：
1、本发明通过多肽与双分子的透明质酸或者维生素E进行偶联，得到一种新的化合物，该化合物结构新颖，具有较好的，合成制备简单，具有很好的适用性。
2、本发明选择的多肽为透皮多肽序列，然后偶联单分子的透明质酸或者维生素E。并首次证明了可以通过透皮多肽本身的作用，把透明质酸和维生素E带进皮肤的皮下组织，然后在皮下组织中多肽受体液环境的影响分解成相应的氨基酸或者短肽，释放出游离的透明质酸或者维生素E，这样不仅可以解决透明质酸通过需要注射的缺点，还可以从皮肤深层对受损的皮肤组织进行修复，或者填充因为衰老导致的皮肤沟壑，还能够深层次的对皮肤进行补水保湿，保护皮肤不受环境侵害，抑制皮肤的老化，具有明显的修复皮肤创伤、防皱和抗衰老作用。
3、经过对比实验，令人意外的是，本发明的偶联化合物相对于将多肽与双分子的透明质酸或者维生素E进行混合的混合物，产生了更优异的皮肤修复、抗皱和抗衰老的作用。
附图说明
图1为化合物1纯品的MS分析图。
图2为化合物1纯品的HPLC分析图(纯度＞98％)。
图3为化合物2粗品的HPLC分析图。
图4为化合物2纯品的MS分析图。
图5为化合物2纯品的MS分析图。
图6为化合物3纯品的MS分析图。
图7为化合物3纯品的MS分析图。
具体实施方式
为了使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面对本发明的具体实施方式做详细的说明，但不能理解为对本发明的可实施范围的限定。
实施例1多肽序列与α-生育酚(维生素E)的偶联
使用Fmoc固相多肽合成技术，选择2-CTC Resin(Sub＝0.4mmol/g)为起始树脂，按照Fmoc固相多肽合成的标准偶联方法(氨基酸投料倍数3倍，偶联体系为HOBt/DIC)，按照多肽的序列顺序，依次偶联Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-His(Trt)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Pro-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH、Boc-Ala-OH，偶联完成后，用DCM清洗树脂，然后加入含有1％TFA的DCM，反应30分钟，抽滤，收集滤液，旋干溶剂，得到Boc-Ala-Cys(Trt)-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Pro-Ser(tBu)-Lys(Boc)-His(Trt)-Cys(Trt)-Gly-OH全保护肽片段。
上述得到的全保护肽片段，在DMF中加入HOSu(1.2eq)，冰水浴下加入DCC(1.2eq)，室温反应8小时，停止反应，然后用DCM和水萃取出DMF溶剂，收集DCM有机相，用饱和碳酸氢钠洗3遍，纯水2遍，再用无水碳酸钠干燥，旋干，得到全保护的活性OSu酯：Boc-Ala-Cys(Trt)-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Pro-Ser(tBu)-Lys(Boc)-His(Trt)-Cys(Trt)-Gly-OSu。
上述全保护的活性OSu酯溶解于DMF中，加入DMAP(0.5eq)，加入DIEA(1.5eq)，升高温度到80℃，然后逐滴加入α-生育酚(维生素E)的DMF(1.0eq)，反应8小时。然后用DCM和水萃取出DMF溶剂，收集DCM有机相，用饱和碳酸氢钠洗3遍，纯水2遍，再用无水碳酸钠干燥，旋干，得到油状的全保护肽偶联维生素E的中间体，备用。
α-生育酚(维生素E)，结构如下：
Figure BDA0003580597900000061
上述油状物中加入TFA：TIS：EDT：PhOH：H2O＝90:3:3:2:2(体积比)的裂解液，室温反应1.5小时，然后倒入无水乙醚中析出白色固体，离心，无水乙醚洗涤固体，真空干燥得到白色固体的多肽偶联α-生育酚(维生素E)的粗品：H-Ala-Cys-Ser-Ser-Ser-Pro-Ser-Lys-His-Cys-Gly-X2(X2代表维生素E)，标记为化合物1(分子量：1475.88)，结构如下：
Figure BDA0003580597900000062
对上述得到的化合物1，采用HPLC通用的多肽纯化方法纯化，得到纯度＞98％的纯品，对上述纯品进行MS和HPLC分析，结果见图1和图2。
实施例2多肽序列与双分子透明质酸的偶联
使用Fmoc固相多肽合成技术，选择2-CTC Resin(Sub＝0.4mmol/g)为起始树脂，按照Fmoc固相多肽合成的标准偶联方法(氨基酸投料倍数3倍，偶联体系为HOBt/DIC)，按照多肽的序列顺序，依次偶联Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-His(Trt)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Pro-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-Ala-OH，偶联完成后，加入5eq的双分子透明质酸和5eq的HOAt，6eq的DIC，室温下偶联反应4小时，得到X1-Ala-Cys(Trt)-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Pro-Ser(tBu)-Lys(Boc)-His(Trt)-Cys(Trt)-Gly-2-CTC Resin(X1代表双分子透明质酸)肽树脂。
得到的上述肽树脂，加入TFA：TIS：EDT：PhOH：H2O＝90:3:3:2:2(体积比)的裂解液，室温裂解反应1.5小时，然后倒入无水乙醚中析出白色固体，离心，无水乙醚洗涤固体，真空干燥得到白色固体的多肽偶联双分子透明质酸的粗品：X1-Ala-Cys-Ser-Ser-Ser-Pro-Ser-Lys-His-Cys-Gly-OH；(X1代表双分子透明质酸)，标记为化合物2(分子量：4045.17)。对上述粗品进行HPLC分析，分析谱图见图3。
双分子的透明质酸(即透明质酸聚合单体数量为2，CAS：9004-61-9)，具体结构如下：
Figure BDA0003580597900000071
对于得到化合物粗品，HPLC结果显示存在两个较大的主峰(出峰时间分别为31.832分钟和34.239分钟)，考虑到双分子透明质酸分子中存在两个羧基，都有可能与肽序中的氨基进行反应，因此我们对上述两个主峰分别取样进行MS分析，结果显示两个峰均与目标分子量相同(MW：4045.17)。
考虑到上述峰1(峰面积87.32％)的纯度远远高于峰2(峰面积8.64％)，因此采用HPLC方法，仅仅对峰1进行纯化操作，得到纯度大于99.5％的化合物2纯品，纯品的HPLC分析谱图见图4。
对化合物2的纯品进行MS分析，结果见图5。
对上述得到的化合物2纯品采用核磁共振等分析手段进行结构解析，结果分析后确认化合物2纯品的分子结构如下：
Figure BDA0003580597900000072
Figure BDA0003580597900000081
实施例3多肽本身的合成
使用Fmoc固相多肽合成技术，选择2-CTC Resin(Sub＝0.4mmol/g)为起始树脂，按照Fmoc固相多肽合成的标准偶联方法(氨基酸投料倍数3倍，偶联体系为HOBt/DIC)，按照多肽的序列顺序，依次偶联Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-His(Trt)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Pro-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-Ala-OH，偶联完成后，得到H-Ala-Cys(Trt)-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Pro-Ser(tBu)-Lys(Boc)-His(Trt)-Cys(Trt)-Gly-2-CTCResin肽树脂。
得到的上述肽树脂，加入TFA：TIS：EDT：PhOH：H2O＝90:3:3:2:2(体积比)的裂解液，室温裂解反应1.5小时，然后倒入无水乙醚中析出白色固体，离心，无水乙醚洗涤固体，真空干燥得到白色固体的多肽粗品：H-Ala-Cys-Ser-Ser-Ser-Pro-Ser-Lys-His-Cys-Gly-OH；标记为化合物3(分子量：1063.20)。
对上述粗品进行HPLC制备，得到纯度大于98％的化合物3的纯品，HPLC分析谱图见图6，MS分析谱图见图7。
实施例4多肽化合物口服液的制备
分别称取上述多肽化合物1和多肽化合物2的纯品1g，加入注射用水溶解，然后加入三氯蔗糖0.05g，加入柠檬味香精0.02g，加入纯化配成100ml的溶液，混匀，分装，湿热灭菌得到相应的多肽口服液。多肽化合物1和多肽化合物2的两种口服液分别命名口服液1、口服液2。
实施例5多肽化合物口服液的毒性实验
实施例3制备的口服液1和口服液2，按照《食品安全性毒理评价程序》的相关要求，进行了急性毒性试验，遗传毒性试验，Ames试验、小鼠精子畸形试验、小鼠睾丸染色体畸变试验，小鼠30天喂养试验。针对上述试验，我们按照相关指导原则以及通用的一些试验方法，对准备的6中口服液均进行了相应的试验，具体的试验结果如下：
急性毒性试验：2种口服液给药后连续观察一周，120只小鼠均无明显的不良反应及死亡。
上述2种口服液，对小鼠灌胃的耐受量分别见表1：
表1：2种口服液对小鼠的灌胃耐受量统计表
口服液 灌胃耐受量(g/kg) 相当于临床倍数
口服液1 230 2300
口服液2 140 1400
从上述结果分析，根据急性毒性分设标准，本发明所有的化合物口服液属无毒物质。
Ames等试验结果：通过通用方法的试验研究，本发明化合物口服液Ames试验、小鼠精子畸形试验、小鼠睾丸染色体畸变试验的遗传毒性试验结果均显示为阴性，说明本品无遗传毒性。
大鼠喂养30天试验结果：不同剂量的本发明化合物口服液对大鼠进行分组喂养试验，试验期间实验组动物的生长发育均显示良好，体重、摄食、血常规、血生化、脏器系数等指标均在正常范围内，病理组织学检查未见异常，说明本品无毒性作用。
长期毒性试验结果：不同剂量的本发明化合物口服液对大鼠进行连续3个月灌胃给药，试验期间实验组动物均无不良反应，各项检查指标均在正常范围内，病理检查主要脏器未见毒性病理改变，说明本品无长期毒性。
实施例6多肽化合物水凝胶的制备
为了验证后面的实验，本次配制多肽化合物水凝胶的同时，同时配制空白水凝胶溶液，维生素E的水凝胶溶液，双分子透明质酸的水溶液溶液，具体的多肽化合物水凝胶的配方见下面表2：
表2：水凝胶的配方表
Figure BDA0003580597900000091
制备工艺：按照表2的配方，把所有组分加在一起形成混合溶液，然后充分搅拌得到粘稠的水凝胶。
实施例7皮肤创伤修复试验
动物模型准备：随机选取6-8周大(20g左右)的昆明小鼠，2％戊巴比妥钠溶液腹腔注射(0.1ml/只)麻醉，剪除背部毛发并刮干净。然后酒精消毒后，用装有95℃热水的薄瓶，放置于小鼠裸露背部，放置15秒，形成烫伤。然后碘伏消毒止血。然后将小鼠放置于室温下分开饲养，自由进食。72小时候观察伤口情况。
皮肤修复试验：上述经过72小时创伤后的样本小鼠，测量创伤面积。然后根据不同的组别，分别用实施例6制备的1-8号水凝胶进行涂抹。每24小时涂抹一次，直至皮层融合表面全部光滑痊愈，测量未恢复创口面积。计算各个组别小鼠的伤口愈合率。
愈合率＝(原始创口面积-未恢复创口面积)÷原始创口面积×100％
实验结果见表3。
表3：皮肤修复试验结果
Figure BDA0003580597900000101
从表3的数据看，多肽化合物1和化合物2的水凝胶，对于烫伤小鼠的创口愈合有非常好的效果，并且对于已经痊愈的创口(16天)，继续涂抹后回继续有效。特别是多肽化合物2，涂抹27天后，伤口已经接近于痊愈(98％)。而维生素E、双分子透明质酸、以及维生素E+多肽、双透明质酸+多肽也有一定的伤口愈合效果，但是并不是非常明显，并且在伤口愈合后(16日)，后续效果不明显。而单纯的多肽分析(水凝胶6)，基本对皮肤的愈合没有作用，与1号生理盐水的愈合情况基本一致。
从上述结果看，应该说后期的治疗效果，主要还是透皮肽的作用，因为透皮肽把相应分子带入了皮肤内部，使得的有疤痕的伤口继续愈合修复。因此，本发明专利的多肽化合物1和多肽化合物2均有很好的创伤修复作用。
实施例8多肽化合物精华液的制备
多肽化合物精华液的配方见下面表4：
表4：多肽化合物精华液配方表
Figure BDA0003580597900000111
表4中活性物质成分和对应的精华液编号见表5：
表5：精华液配方中活性物质成分及对应的编号
精华液 活性物质
精华液-1 空白
精华液-2 多肽化合物1
精华液-3 多肽化合物2
精华液-4 多肽(化合物3)
精华液-5 维生素E
精华液-6 双分子透明质酸
精华液-7 维生素E+多肽(化合物3)，各5％
精华液-8 双分子透明质酸+多肽(化合物3)，各5％
制备工艺：按照表4的配方，将组分B全部加入乳化锅中，加热至80℃，保温搅拌15分钟，然后均质10分钟，搅拌降温至40℃，按照表中的顺序，依次加入A组分，搅拌冷却至35℃，过滤出料，得到相应的精华液。
实施例9对胶原蛋白形成的影响实验
通过羟脯氨酸试剂盒，检测皮肤中的羟脯氨酸含量来测定多肽化合物对胶原蛋白形成影响。
实验方法：随机选取8周大(20g左右)的裸鼠，分为8组，每组10只。然后分别在每组裸鼠右侧耳背涂抹生理盐水(对照组)、实施例8制备的精华液-1、精华液-2、精华液-3、精华液-4、精华液-5、精华液-6、精华液-7、精华液-8，每天早晚各涂抹一次，每次1mL。然后按照日常喂养条件正常喂养，30天后，处死所有裸鼠，取用药部位的皮肤作为测试组织。
称取各类测试的50mg皮肤组织放入对应的样品试管，加入羟脯氨酸测定试剂盒中的水解溶液，110℃烘箱中水解30分钟。冷却后加1滴试剂盒中的指示剂，摇匀。再加入试剂盒中精华液1mL，摇匀。然后往各个样本试管中逐滴加入调pH值的乙液，直到各试管中的溶液变为黄绿色。加入10mL蒸馏水，混匀后取5mL，加入活性炭50mg，低速离心10分钟，取上清液1mL。
另外取试管中加入标准溶液作为标准管。往各管中加入试剂1后静置5分钟，再加入试剂2静置5分钟，然后取每个试管的上清液，在550nm波长条件下，测定吸光值。
实验结果分析：羟脯氨酸(HYP)是机体胶原蛋白的主要成分之一，因此HYP含量是反映胶原组织代谢和纤维化程度的一项重要指标。实验中采用分光光度法测定HYP含量，然后根据检测的平均数据，以胶原蛋白含有14％的HYP作为标准，换算成小鼠皮肤中胶原蛋白的含量。具体结果见表6。
表6：多肽化合物对裸鼠皮肤生成胶原蛋白影响数据表
分组 皮肤胶原蛋白含量(％)，喂养30天
精华液-1 13.14
精华液-2 20.87
精华液-3 22.49
精华液-4 13.29
精华液-5 16.18％
精华液-6 16.91％
精华液-7 16.24％
精华液-8 16.89％
从表6的数据可以看出，多肽化合物配制的精华液-2和精华液-3，连续给药30天后，相对于对照组，皮肤组织的胶原蛋白含量明显增加，这说明多肽化合物具有很好的效果，促进皮肤胶原蛋白的生成。而单独加入的多肽的精华液-4，与空白对照组精华液-1对于胶原蛋白的增加基本没有任何影响。单独加入维生素E的精华液-5、单独加入双分子透明质酸的精华液-6、加入维生素和多肽混合物的精华液-7、加入双分子透明质酸和多肽混合物的精华液-8，对于皮肤组织胶原蛋白含量增加也有一定的作用，但是作用不是很大，明显不如多肽化合物的效果好。
从上述实验结果可以说明，多肽化合物1和多肽化合物2具有明显的促进皮肤胶原蛋白生产的作用，这样将具有抗皱、修复皮肤、抑制皮肤衰老的作用。
实施例10多肽化合物乳液的制备
多肽化合物乳液的配方见下面表7：
表7：多肽化合物乳液配方表
Figure BDA0003580597900000131
表7中活性物质成分和对应的精华液编号见表8：
表8：乳液配方中活性物质成分及对应的编号
Figure BDA0003580597900000132
Figure BDA0003580597900000141
制备工艺：按照表7的配方，将组分D全部加入乳化锅中，加热至80℃，保温搅拌15分钟。
将组分C加入油相锅，加热至85℃，保温搅拌15分钟。然后将组分C缓慢转入乳化锅中，均质5分钟，搅拌降温到65℃时，加入组分B，均质5分钟。
缓慢搅拌降温至40℃，加入A组分，搅拌冷却至35℃，过滤出料，得到相应的乳液。实施例11多肽化合物乳液对皮肤疤痕的修复实验
本实验选择96名志愿者，其中所有的志愿者皮肤表层有明显的烫伤或痤疮凹洞或手术创口凸起等特征。把所有志愿者按照皮肤疤痕类型随机分为八组，每组各12名，其中包括4名烫伤疤痕、4名痤疮凹洞、4名手术凸起的志愿者。上述8组志愿者分别采用实施例10制备的8种乳液进行涂抹。使用前拍照确认疤痕外观并测量志愿者的疤痕面积。志愿者每天早晚洗脸后各用一次实施例10制备的乳液，连续使用60天，第31天和第61天分别拍照确认疤痕外观并测量疤痕面积，判断疤痕的变化。
具体结果见表9。
表9：不同乳液对疤痕影响实验结果
Figure BDA0003580597900000142
Figure BDA0003580597900000151
从上述实验结果可以看出，作为对照的空白乳液-1以及加入多肽分子的乳液-4，基本上对于疤痕的修复没有任何作用。
单独加入维生素E的乳液-5、单独加入双分子透明质酸的乳液-6、加入维生素和多肽混合物的乳液-7、加入双分子透明质酸和多肽混合物的乳液-8，对于皮肤组织胶原蛋白含量增加也有一定的作用，但是作用不是很大，明显不如多肽化合物的效果好。
使用多肽化合物的乳液-2和乳液-3，可以明显消除疤痕的褶皱、修复疤痕的凹洞和手术创口的凸起，使得受损皮肤得到明显修复。并且，从表中的数据可以看出，使用60天的结果要明显好于使用30天的结果，说明这个多肽化合物如下的修复效果是长期的，使用越久效果越好。
以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明的内容进行一些稍微的变更，或直接或间接运用在相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。
SEQUENCE LISTING
<110> 深圳深创生物药业有限公司
<120> 一类具有皮肤修复作用的多肽化合物及其制备方法和应用
<130> CP122010157C
<160> 1
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<400> 1
Ala Cys Ser Ser Ser Pro Ser Lys His Cys Gly
1 5 10

Claims (17)

1.一种多肽化合物衍生物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述多肽化合物衍生物具有如SEQ ID NO.1所示的序列，且该序列的C端或N端修饰有双分子透明质酸或α-生育酚：
所述SEQ ID NO.1为NH2-Ala-Cys-Ser-Ser-Ser-Pro-Ser-Lys-His-Cys-Gly-OH；
所述多肽化合物衍生物选自在C端修饰有α-生育酚的多肽化合物衍生物，其结构式如式I所示：
Figure FDA0003891077450000011
2.一种多肽化合物衍生物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述多肽化合物衍生物具有如SEQ ID NO.1所示的序列，且该序列的C端或N端修饰有双分子透明质酸或α-生育酚：
所述SEQ ID NO.1为NH2-Ala-Cys-Ser-Ser-Ser-Pro-Ser-Lys-His-Cys-Gly-OH；
所述多肽化合物衍生物选自在N端修饰有双分子透明质酸的多肽化合物衍生物，其结构式如式II所示：
Figure FDA0003891077450000012
3.权利要求1-2任一项多肽化合物衍生物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包含以下步骤：
制备或获得SEQ ID NO.1序列多肽；在SEQ ID NO.1的C端或N端偶联双分子透明质酸或α-生育酚并纯化。
4.权利要求3所述的制备方法，其特征在于，制备在C端修饰有α-生育酚的多肽化合物衍生物时，包括以下步骤：
S11)采用固相合成的方法制备侧链全保护的SEQ ID NO.1序列多肽；
S12)在侧链全保护的SEQ ID NO.1的C端偶联α-生育酚，与生育酚上的酚基形成酯键；
S13)裂解SEQ ID NO.1侧链保护基，并纯化，获得C端修饰有α-生育酚的多肽化合物衍生物。
5.权利要求3所述的制备方法，其特征在于，制备在N端修饰有双分子透明质酸的多肽化合物衍生物时，包括以下步骤：
S21)采用固相合成的方法制备侧链全保护的SEQ ID NO.1序列多肽-固相合成树脂的肽树脂化合物；
S22)在肽树脂化合物的N端偶联双分子透明质酸，与双分子透明质酸的羧基形成酰胺键；
S23)裂解偶联双分子透明质酸的肽树脂，并纯化，获得N端修饰有双分子透明质酸的多肽化合物衍生物。
6.权利要求1-2任一项所述的多肽化合物衍生物在制备化妆品或外用药品中的用途，所述化妆品或外用药品为用于促进伤口愈合、降低伤口疤痕面积和疤痕程度。
7.权利要求1-2任一项所述的多肽化合物衍生物在制备化妆品或外用药品中的用途，所述化妆品或外用药品为用于提高胶原蛋白的形成、减少皮肤褶皱面积或褶皱程度。
8.权利要求1-2任一项所述的多肽化合物衍生物在制备化妆品或外用药品中的用途，所述化妆品或外用药品为用于减少烫伤损伤、减轻痤疮凹洞以及减少凸起疤痕。
9.一种化妆品，其特征在于，其包含权利要求1-2任一项所述多肽化合物衍生物和/或其药学上可接受的盐。
10.根据权利要求9所述的化妆品，其特征在于，所述化妆品还包含可药用辅料。
11.根据权利要求10所述的化妆品，其特征在于，所述化妆品中还包含除权利要求1或2所述多肽化合物衍生物和/或其药学上可接受的盐以外的其他活性成分。
12.根据权利要求10所述的化妆品，其特征在于，所述化妆品选自凝胶、乳液、精华液、眼霜、面膜、面霜、冻干粉、柔肤水。
13.一种外用药品，其特征在于，其包含权利要求1或2所述多肽化合物衍生物和/或其药学上可接受的盐。
14.权利要求13所述的外用药品，其特征在于，所述外用药品 还包含可药用辅料。
15.权利要求13所述的外用药品，其特征在于，所述外用药品中还包含除权利要求1或2所述多肽化合物衍生物和/或其药学上可接受的盐以外的其他活性成分。
16.权利要求13所述的外用药品，其特征在于，所述外用药品选自药膏、药水、药用凝胶、药用乳液、敷贴药剂。
17.权利要求13所述的外用药品，其特征在于，所述外用药品选自药用乳膏。
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