CN1281613C - 一种抗癌镇痛的中药钩吻总生物碱和含它的药物组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种抗癌镇痛的中药钩吻总生物碱和含它的药物组合物及其制备方法，其中钩吻总生物碱是以中药钩吻为原料提取得到的，并将中药钩吻总生物碱与任意药剂学上可接受的载体或赋形剂制成药物组合物，其剂型可以是口服制剂，也可以是注射制剂，更具体为片剂、胶囊剂、软胶囊剂、口服液、注射液、输液剂、粉针剂和冻干粉针剂。该药物组合物具有良好的抗癌作用和优异的镇痛功能，其镇痛强度仅次于吗啡而优于临床应用的其他镇痛药，且无成瘾性。

Description

一种抗癌镇痛的中药钩吻总生物碱和含它的药物组合物及其制备方法

所属技术领域

本发明涉及到一种用于抗癌镇痛的中药钩吻总生物碱、和含它的药物组合物及其制备方法，其中的钩吻总生物碱是以中药钩吻为原料提取得到的。

技术背景：

钩吻为马钱科植物胡蔓藤的全草，是世界著名的剧毒植物。性温，味辛、苦，有剧毒。钩吻在国内外的研究十分广泛。从20世纪30年代我国学者开始分离钩吻素至今，已分离出了钩吻素甲、乙、丙、丁、戊、子、丑、寅、卯、辰等生物碱；20世纪70年代已开始了钩吻素子的全合成，并对几种钩吻素的药理作用及临床应用进行了研究。其药理作用表现在以下几个方面：

1抗肿瘤作用

实验观察到钩吻注射液对肿瘤细胞的增殖能力有一定的抑制作用，其机理与钩吻影响细胞膜流动性而改变肿瘤细胞的活动及其内外平衡，致使其损伤及至死亡有关。另外，钩吻能提高肿瘤细胞对⁶⁰Co射线的辐射敏感性，提示可作为辐射增敏剂与放疗合用于肿瘤的治疗。有实验表明钩吻素子在体内外对兔血小板的聚集均有较强的抑制作用，认为这可能是钩吻能抑制肿瘤生长和转移的机制之一。研究还表明钩吻生物碱对增殖中的细胞仅仅是普遍的细胞毒性作用而无选择性，对正常细胞亦有作用，但敏感性低于肿瘤细胞。

2对免疫系统的影响

动物实验表明，钩吻总碱能显著提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能和吞噬指数。促进大鼠红细胞生成，保护白细胞、红细胞的抗辐射损伤作用。研究表明钩吻碱对免疫功能的影响是间接的而非直接影响，可能是通过保护骨髓造血功能而发挥作用的；由于钩吻素能迅速恢复骨髓造血功能受抑动物的造血功能，免疫细胞得到恢复而发挥免疫增强作用。

3镇痛作用

长期以来，福建、广东、广西等省民间就有用钩吻治疗神经痛、坐骨神经痛、外伤性疼痛的习惯。20世纪60年代就有用钩吻碱配制成“止痛灵”注射液治疗疼痛的院内用药。以后的实验证明钩吻碱有显著的镇痛作用，其痛阈提高百分率仅低于吗啡，而高于其他生物碱。钩吻碱不仅能提高痛阈值，而且能增强戊巴必妥钠与水合氯醛的催眠作用，且镇痛作用不会产生药物依赖性，也无明显解热作用。钩吻生物碱镇痛作用的优点在于：

(1)钩吻生物碱无明显耐药性和成瘾性；这与目前应用的吗啡、度冷丁等药物具有耐药性和成瘾性的药物相比具有较强的优势。

(2)镇痛有效剂量小，直接进行痛点注射或患处擦拭即可收到止痛效果。

(3)钩吻碱口服或注射对消化功能不仅没有抑制作用反而能增进食欲，使体重增加。

(4)钩吻碱不影响胃中食物排空时间、肠蠕动以及排便反射，对肝癌或肝硬化性水肿产生较强的利尿消水作用。

(5)钩吻碱在治疗剂量时对瞳孔无影响。

综上所述，钩吻生物碱有良好的抗癌和镇痛的作用。

经检索国内专利，将钩吻应用于医药的专利申请有2件，其中，CN1079252C一种治疗癌肿的药物，主药为钩吻炭，剂量(6-15)g/d，辅药为中药汤剂。该专利涉及到治疗癌肿，未涉及到镇痛作用；同时该专利中对钩吻的使用方法是“将钩吻煅烧成炭，以去毒存性”。从有机物角度看，在煅烧成炭过程中，钩吻生物碱势必受到破坏，其中起作用的成分未予明确。CN1076628愈尔膏，系由20味中药材组成的外用药膏，其制备方法为将20味中药按适宜剂量捣磨成极细粉末混匀，调入粘性基质拌匀涂于裱褙材料即成。尽管其“生产成本低、生产工艺简单”，但其作用机制不明，效果未见报道，且长期(一个疗程为3个月)敷贴此类膏药给患者带来的痛苦和不便是难以忍受的。从组方上看，20味中药中属剧毒、大毒的药物太多，特别是马钱子、钩吻，其生物碱类似，且有效剂量与中毒剂量比较接近，合用之后容易达到中毒剂量，是否会给患者带来毒副作用无法确定。

综合上述国内关于钩吻应用的专利申请情况来看，还属于比较粗放的阶段，与国内外关于钩吻的研究有相当大差距。

发明内容

针对国内临床中同时具有抗癌镇痛的药物、特别是中药制剂较少的情况及钩吻开发应用较少的情况，本发明利用钩吻总生物碱的药理作用研发出以钩吻总生物碱为活性成分的抗癌镇痛药物，同时涉及到钩吻总生物碱的制备方法和抗癌镇痛药物的制备方法。

本发明所述的钩吻总生物碱制备方法包括以下步骤

A将钩吻药材粉碎成粗粉，加入溶剂抽提，过滤得滤液，滤液重复抽提1-2次，合并抽提液；

B减压浓缩，回收溶剂，至相对密度为1.10-1.15，得浓缩液；

C向浓缩液加入等量极性溶剂溶解，调溶液PH为2.0-3.0，得钩吻总生物碱盐溶液；

D向钩吻总生物碱盐溶液中加入等量(以溶液体积计)非极性溶剂，用40％的碱溶液调混合溶液PH为10.0，剧烈振荡15-20min，静置20-30min，分出有机相；重复有机溶剂萃取步骤1-2次，合并有机相；

E余液再用等量的另一种非极性溶剂萃取2次，合并萃取液；

F分别减压回收非极性溶剂至尽，得粗提物；

G将粗提物悬浮于20倍量(以粗提物总量计)水中，调混悬液PH为2.0，40-50℃加热溶解，得钩吻总生物碱水溶液；

H小心调节水溶液PH至6.0-7.0，将溶液经离子交换树脂柱吸附，用1∶1的氯仿/甲醇溶液和乙酸乙醋分别洗脱，得解吸液；

I解吸液经减压浓缩、真空干燥得精制钩吻总生物碱。

用于钩吻抽提和萃取的溶剂可以是酸性水溶液、酸性甲醇，也可以是中性或碱性有机溶剂，如乙醇、氯仿、石油醚、乙酸乙酯、丙酮。用于调节溶液PH的酸溶液可以是HCL、H₂SO₄、柠檬酸、乙酸中的一种或二种的混合溶液；用于调节溶液的碱溶液可以是NaOH、Na₂CO₃、KOH、氨水中的一种或两种的混合溶液。用于钩吻萃取的极性溶剂为水、乙醇、甲醇中的一种或两种的混合溶剂；用于萃取的非极性溶剂是氯仿、乙酸乙酯、石油醚、溶剂油中的一种或两种的混合溶剂。用于钩吻生物碱溶液吸附的离子交换树脂可以是非极性树脂，也可以是阳离子交换树脂。

所述一种抗癌镇痛药物可以是片剂、胶囊剂、口服液、注射剂、输液剂、粉针剂、冻干粉针剂和软胶囊剂。其中片剂、胶囊剂、口服液是采用常规制药工艺，加入药用辅料或无菌水制备的，片剂每片含钩吻总生物碱1mg；胶囊剂每粒含钩吻总生物碱1mg；口服液每支5ml，含钩吻总生物碱1mg。

所述一种抗癌镇痛的药物的注射剂、输液剂、粉针剂的制备方法包括以下步骤：

A在100级以下车间，取钩吻总生物碱，加入20-50倍量注射用水，调PH至3.0-4.0，40-50℃下加热溶解，加入注射液用水溶性药用辅料，充分溶解后，调溶液PH至3.0-4.0，经0.2μm微孔滤膜超滤，得澄明溶液，按剂量补充注射用水至规定量，分装于安瓿，每安瓿装量2ml，含钩吻总生物碱2mg；熔封，经检验合格后，包装即得本发明的一种抗癌镇痛药物的注射剂。

B将步骤A所得澄明溶液按剂量补充注射用水至规定量，每1ml含钩吻总生物碱10μg，分别分装于输液瓶中，每瓶装液量为100ml、150ml、200ml，轧盖，经检验合格，包装即得本发明的一种抗癌镇痛药物的不同规格的输液剂。

C将步骤A所得澄明溶液经喷雾干燥，分装于西林瓶中，每瓶含钩吻总生物碱1mg或2mg，轧盖，经检验合格，包装即得本发明的一种抗癌镇痛药物的两种规格的粉针剂。

D将步骤A所得澄明溶液按计量补充注射用水至规定量，使溶液每ml含钩吻总生物碱为2mg，分装于安瓿中，每安瓿为0.5ml、1ml，经冷冻干燥，熔封，经检验合格后，包装即得本发明的一种抗癌镇痛药物的两种规格的冻干粉针剂。

所述注射液用水溶性药用辅料为氨基酸、葡萄糖、丙三醇、低分子右旋糖酐、磷酸盐、或亚硫酸氢钠等。辅料用量(以钩吻总生物碱量计)为0.5％-50％。

所述一种抗癌镇痛药物的软胶囊剂制备方法包括以下步骤：

A取钩吻总生物碱，加入适量食用大豆油溶解，并加入药用辅料，充分溶解后得钩吻总生物碱的溶液。

B按常规软胶囊制备工艺压注软胶囊，每颗含钩吻总生物碱1mg，冷却、检验合格，包装即得本发明的一种具有抗癌镇痛药物的软胶囊剂。

下面通过一种抗癌镇痛药物的药效学试验对本发明作进一步说明

一  抗癌试验

1细胞培养和制备

用常规方法复苏胃癌SGC7901细胞后，用含10％胎牛血清的DMEM培养基培养，培养条件为5％CO₂、37℃。每2天换液一次，当细胞生长到80％覆盖面时，用0.25％胰酶消化传代。小鼠S180肉瘤细胞、小鼠SRS-82细胞用含10％胎牛血清的RPMI-1640培养基悬浮培养，培养条件为5％CO₂、37℃，每2天更换一次培养液。将生长至对数的胃癌细胞培养液弃掉，用3ml 0.25％预热的胰酶消化约2-5min(在显微镜观察下进行，直到细胞形态开始变圆，彼此粘附消失)，弃掉消化液，加含10％FCS的DMEM培养液10ml，用毛吸管吹打瓶壁收集细胞，并反复吹打，直到细胞分散后移入10ml的离心管中，1000r/min离心5min，弃上清，加6ml培养液重新悬浮细胞，计数细胞后再离心收集细胞，用预热37℃的生理盐水1000r/min离心3min洗涤1次，再用生理盐水重新悬浮细胞，将各管细胞收集到一起，调整细胞数1.0*10⁷/ml，立即皮下接种裸鼠。

小鼠肉瘤细胞及腹水瘤细胞体外培养至对数生长期后收集细胞，用预热的生理盐水洗涤2次，重新悬浮在生理盐水中，调整细胞数1.0*10⁷/ml，每只小白鼠腹腔接种0.2ml，培养8天后，自腹水瘤小鼠腹腔中抽取腹水约5ml，用生理盐水稀释成细胞数为1.0*10⁷/ml，用于小鼠的腹股沟皮下或腹腔接种。

2钩吻总生物碱注射液(GBJ)对荷瘤裸鼠实体瘤的抑瘤试验

裸鼠40只分为模型组(生理盐水)、GBJ高剂量组(3.0mg/kg)、GBJ中剂量组(2.0mg/kg)、GBJ低剂量组(1.0mg/kg)、5-Fu组(5.0mg/kg)，每组8只动物。把培养的胃癌细胞SGC7901A用生理盐水稀释成细胞数为1.0*10⁷/ml，每只小鼠左腹股沟皮下注射0.2ml(2.0*10⁶/只)。试验组裸鼠腹腔注射给药0.2ml，于接种肿瘤后的第2天开始给药，1次/天，共10天。于接种后的第12天，断颈处死各组小鼠，剥离肿瘤块，称取肿瘤重量，并按以下公式计算抑瘤率：

抑瘤率＝(模型组肿瘤重量-该组的平均肿瘤重量)/模型组肿瘤重量*100％

试验结果显示，GBJ对荷人SGC7901胃癌裸鼠具有明显的抑制作用，3.0mg/kg抑制率为75.9％、低剂量组0.5mg/kg抑瘤率为27.6％，见表1。

表1：GBJ对人SGC7901胃癌的抑制作用

组别	剂量(mg/kg)	平均肿瘤重量(g)	抑瘤率(％)
				模型	-	1.45±0.34	-
5-Fu	5.0	0.47±0.17	67.6
				GBJ(低)	0.5	1.05±0.40	27.6
GBJ(中)	1.0	0.64±0.21	55.9
				GBJ(高)	2.0	0.35±0.11	75.9

3钩吻总生物碱注射液(GBJ)对荷SRS-82肉瘤昆明小鼠肿瘤的抑瘤试验

小鼠分组同前，每组小鼠20只。把培养的SRS-82肉瘤细胞接种昆明小鼠第8天，自腹水瘤小鼠腹腔中抽取腹水约5ml，用生理盐水稀释成细胞数为1.0*10⁷/ml，每只小鼠左腹股沟皮下注射0.2ml(2.0*10⁶/只)。腹腔注射给药，均于接种肿瘤后的第二天开始给药，1次/天，共10天。于接种后的第12天，断颈处死各组小鼠，剥离肿瘤块，称取肿瘤重量，并按以下公式计算抑瘤率：

抑瘤率＝(模型组肿瘤重量-该组的平均肿瘤重量)/模型组肿瘤重量*100％

GBJ对荷SRS-82瘤小鼠的表现出现明显的抑瘤作用，高、中、低三个剂量组抑瘤率分别为61.4％、40.9％、19.7％，阳性对照组药物5Fu也表现出明显的抗肿瘤作用，抑瘤率48.0％，见表2。

表2钩吻总生物碱注射液对荷SRS-82肉瘤小鼠肿瘤的抑制作用

组别	剂量(mg/kg)	平均肿瘤重量(g)	抑瘤率(％)
				模型	-	1.27±0.65	-
5-Fu	5.0	0.66±0.33	48.0
				GBJ(低)	0.5	1.02±0.41	19.7
GBJ(中)	1.0	0.75±0.32	40.9
				GBJ(高)	2.0	0.45±0.25	61.4

4钩吻总生物碱注射液(GBJ)对荷瘤昆明小鼠腹水瘤的抑瘤试验

小鼠分组同前，每组小鼠20只。把培养的S180细胞接种昆明小鼠后第8天，自S180腹水瘤小鼠腹腔中抽取腹水约7ml，用生理盐水稀释成细胞数为1.0*10⁷/ml，每只小鼠腹腔注射0.2ml(2.0*10⁶/只)。高、低剂量组小鼠分别口服给药0.3ml，于接种肿瘤后的第二天开始给药，1/天，共10天。每天记录死亡小鼠数量，并按以下公式计算小鼠存活时间延长比例：

小鼠存活时间延长率＝(该组小鼠平均存活时间-模型组小鼠平均存活时间)/模型组平均存活时间*100％

试验结果表明GBJ对S180腹水瘤小鼠存活时间呈现明显的延长作用，高、中、低三个剂量组小鼠的延长率分别是71.7％、47.8％、22.8％，阳性药物组5-Fu生命延长率为57.6％，见表3。

表3钩吻总生物碱注射液对S180腹水瘤小鼠存活时间的影响

组别	剂量(mg/kg)	存活时间(天)	延长率(％)
				模型	-	9.2±2.3	-
5-Fu	5.0	14.5±3.6	57.6
				GBJ(低)	1.0	11.3±2.7	22.8
GBJ(中)	2.0	13.6±3.9	47.8
				GBJ(高)	3.0	15.8±3.1	71.7

二  一种抗癌镇痛药物镇痛试验

1热板法

取19-21g瑞士种♀性健康小鼠，用热板测痛仪，使温度保持于55℃，将小鼠放于铜板上，用秒表记录自小鼠投入热板至出现舔后足的反应时间(潜伏期)，作为痛阈的指标，给药前挑选痛反应潜伏期8-20S者供实验用，过敏、迟钝或喜跳者均剔除不用。按痛反应不同时间随机分为钩吻总碱2个剂量组、吗啡、阿斯匹林、生理盐水对照等共5组，每组14只小鼠，分别在左腿im给药后30min、60min、90min时逐个置温度56±0.5℃的超级恒温水浴内的紫铜圆筒内，并记录小鼠舔足的时间，即痛反应时间，结果如下表：

组别	剂量(mg/kg)	药前	痛觉反应时间(S)和延长率(％)
									药后
			30min		60min		90min
									生理盐水	10ml	16±4	13±5		16±5		14±5
吗啡	10	17±4	54±6	315％	53±11	231％	51±13	264％
									阿司匹林	100	17±4	18±5	38％	20±5	25％	19±6	36％
GBJ(低)	1.8	16±3	28±16	115％	22±6	37％	21±8	50％
									GBJ(高)	2.7	17±4	36±17	176％	27±9	69％	25±9	78％

2扭体法

各组小鼠分别从左后腿im钩吻总生物碱、吗啡、生理盐水、阿司匹林ig药后0.5h，每只小鼠腹腔注射0.6％醋酸10ml/kg，观察15min内小鼠的扭体次数，结果显示钩吻总碱二个剂量组均能显著抑制醋酸引起的小鼠扭体反应，其镇痛作用呈明显的量效关系。实验结果见下表。

组别-	n	剂量(mg/kg)	扭体次数(X±S)	抑制率(％)	P(与生理盐水组比较)
						生理盐水	7	10ml	52±8

吗啡	7	10	0	100	＜0.01
						阿司匹林	7	600	8±7	85	＜0.01
GBJ(低)	7	1.8	12±15	77	＜0.01
						GBJ(高)	7	2.7	1±2	98	＜0.01

下面结合实施例介绍钩吻总生物碱的提取及以钩吻总生物碱为活性成分的药物的制备方法：

实施例1

钩吻药材粉碎成粗粉，加入8-10倍量(以原料重量计)乙醇抽提，过滤得滤液，滤渣重复抽提1-2次，合并抽提液；减压浓缩，回收乙醇，至相对密度为1.10-1.15，得浓缩液；向浓缩液中加入等量水，调溶液PH为2.0-3.0，得钩吻总生物碱盐溶液；向钩吻总生物碱盐溶液中加入等量(以溶液体积计)氯仿，用40％的碱溶液调混合溶液PH为10.0，剧烈振荡15-20min，静置20-30min，分出氯仿相；重复氯仿萃取步骤1-2次，合并氯仿相；余液再用等量的乙酸乙酯萃取2次，合并萃取液；分别减压回收溶剂至尽，得粗提物；将粗提物悬浮于20倍量(以粗提物总量计)水中，调混悬液PH为2.0-3.0，40-50℃加热溶解，得钩吻总生物碱水溶液；小心调节水溶液PH至6.0-7.0，将溶液经离子交换树脂柱吸附，用1∶1的氯仿/甲醇溶液和乙酸乙酯分别洗脱，得解吸液；解吸液经减压浓缩、真空干燥得精制钩吻总生物碱。

将所得钩吻总生物碱按计量溶于酸性(PH3.0-4.0)水溶液中，加入计量的药用辅料，充分混合均匀，50-60℃下干燥，以常规制药工艺压片，造粒、灌装胶囊；片剂每片含钩吻总生物碱1mg，胶囊剂中每粒含钩吻总生物碱1mg。经检验合格、包装即得本发明的一种抗癌镇痛药物的片剂、胶囊剂。

将所得钩吻总生物碱按计量溶于酸性(PH3.0-4.0)水溶液中，加入计量的药用辅料，加热至40-50℃充分溶解后，补充注射用水至规定量，装瓶，每支5ml，含钩吻总生物碱1mg，压盖、灭菌，经检验合格，包装即得发明的一种抗癌镇痛药物的口服液剂。

在100级以下的车间，将所得钩吻总生物碱溶解于20-50倍量的酸性水溶液中，加入计量的注射用水溶性药用辅料，于40-50℃下加热溶解，调溶液PH3.0-4.0，微孔(0.2um)滤膜超滤，得澄明溶液，补充注射用水至规定量，使溶液中钩吻总生物碱含量为1mg/ml，灌装于安瓿瓶中，每支2ml，熔封，经检验合格后，即得发明的一种抗癌镇痛药物的注射剂。将超滤后的澄明溶液，补充注射用水至每ml含钩吻总生物碱10ug，无菌分装于输液瓶中，每瓶灌装量为100ml、150ml、250ml，扎盖，经检验合格，即得本发明的一种抗癌镇痛药物的输液剂的三个规格产品。

在100级以下的车间，将所得钩吻总生物碱溶解于酸性水溶液中，加入计量的注射用水溶性药用辅料，于40-50℃下加热溶解，调溶液PH3.0-4.0，微孔(0.2um)滤膜超滤，得澄明溶液，喷雾干燥或低温真空干燥，得钩吻总生物碱粉针剂，分装于西林瓶中，每瓶含钩吻总生物碱1mg、2mg两种规格，扎盖，经检验合格，即得发明的一种抗癌镇痛药物的两种规格的粉针剂。

将超滤后的澄明溶液，补充注射用水至规定量，使溶液每ml含钩吻总生物碱2mg，分装于安瓿瓶或西林瓶中，每瓶0.5ml、1ml两种规格，经冷冻干燥后熔封或扎盖，经检验合格后即得发明的一种抗癌镇痛药物的冻干粉针剂两种规格产品。

将所得钩吻总生物碱按计量溶于大豆油中，加入适量的药用辅料，充分溶解后，按常规软胶囊制备工艺压注软胶囊，每颗中含钩吻总生物碱1mg，冷却、剔除不合格的软胶囊，检验合格后，即得本发明的一种抗癌镇痛药物的软胶囊剂。

实施例2

将钩吻药材粉碎，加入原料量10倍的酸性(PH2.0)水溶液浸泡24h，不时搅动，渗滤，补充渗滤出溶液量的酸性水溶液至滤渣中，浸泡12h后，压滤，合并两次滤液，加入浓度为40％的碱液，调PH至10，静置过夜，使生物碱沉淀。过滤，得钩吻生物碱沉淀。将沉淀悬浮于10倍量酸性水溶液中(PH2.0)，使溶解，得钩吻总生物碱溶液。向溶液中加入等量(体积比)氯仿，并调混合溶液PH9-10，振荡、静置，分出氯仿相，重复氯仿萃取一次，合并两次氯仿溶液；水相用等量乙酸乙酯萃取2次，合并乙酸乙酯溶液。在减压条件下，分别回收氯仿、乙酸乙酯至原体积1/4尽，得钩吻总生物碱浸膏；将两种浸膏分别用酸性水溶液溶解，得钩吻总生物碱水溶液，小心调整水溶液PH至6.0-7.0，上阳离子交换柱，分别用氯仿∶甲醇＝1∶1的溶液和乙酸乙酯洗脱，在减压条件下回收有机溶剂至尽，得到钩吻总生物碱。

制备本发明的一种抗癌镇痛药物的方法同实施例1。

实施例3

将钩吻药材粉碎，加入原料量1-1.5倍碱液(PH＝10)润湿，密闭24小时后晾干，加入原料量6-8倍氯仿浸泡12h，渗滤，滤渣补充氯仿(以滤出氯仿量计)继续浸泡8h，压滤，合并两次滤液，减压回收氯仿至原体积1/2；向浓缩氯仿溶液中加入等量水，用40％的盐酸溶液调混合溶液PH至2.0，充分振荡15min后静置30min，分出水相；重复水萃取步骤一次，合并水萃取液，小心调整水溶液PH为6.0-7.0，加入原药材量1/8(重量份)的非极性吸附树脂，室温下缓慢搅动吸附过夜，过滤得树脂，水洗至流出液无酸性反应，将树脂装柱，用氯仿∶甲醇＝1∶1(体积比)洗脱，至无生物碱反应为止，收集液减压回收溶剂至尽，得到钩吻总生物碱。

制备本发明的一种抗癌镇痛药物的方法同实施例1。

Claims (13)

1.一种抗癌镇痛的中药钩吻总生物碱，其特征在于它是按以下方法提取得到的：

A将钩吻药材粉碎成粗粉，加入溶剂抽提，过滤得滤液，滤液重复抽提1-2次，合并抽提液；

B减压浓缩，回收溶剂，至相对密度为1.10-1.15，得浓缩液；

C向浓缩液加入等量极性溶剂溶解，调溶液pH为2.0-3.0，得钩吻总生物碱盐溶液；

D向钩吻总生物碱盐溶液中加入以溶液体积计等量的非极性溶剂，用40％的碱溶液调混合溶液pH为10.0，剧烈振荡15-20min，静置20-30min，分出有机相；重复有机溶剂萃取步骤1-2次，合并有机相；

E余液再用等量的另一种非极性溶剂萃取2次，合并萃取液；

F减压回收非极性溶剂至尽，得粗提物；

G将粗提物悬浮于以粗提物总量计20倍量的水中，调混悬液pH为2.0，40-50℃加热溶解，得钩吻总生物碱水溶液；

H调节水溶液pH至6.0-7.0，将溶液经离子交换树脂柱吸附，用1∶1的氯仿/甲醇溶液和乙酸乙醋分别洗脱，得解吸液；

I将解吸液经减压浓缩、真空干燥得精制钩吻总生物碱；

其中用于钩吻抽提的溶剂为酸性水溶液、中性或碱性有机溶剂；用于钩吻萃取的极性溶剂为水、乙醇、甲醇中的一种或两种的混合溶剂；非极性溶剂为氯仿、乙酸乙酯、石油醚、溶剂油中的一种或二种的混合溶剂。

2.根据权利要求1所述的钩吻总生物碱，其中用于钩吻抽提的溶剂为酸性水溶液、乙醇、酸性甲醇、氯仿、石油醚、乙酸乙酯或丙酮。

3.根据权利要求1所述的钩吻总生物碱，其中用于调节溶液pH的酸溶液是HCl、H₂SO₄、柠檬酸或乙酸；用于调节溶液的碱溶液为NaOH、Na₂CO₃或KOH。

4.根据权利要求1所述的钩吻总生物碱，其中用于钩吻生物碱溶液吸附的离子交换树脂为非极性树脂。

5.根据权利要求1所述的钩吻总生物碱，其中用于钩吻生物碱溶液吸附的离子交换树脂为阳离子交换树脂。

6.一种抗癌镇痛的药物组合物，其特征在于它是由权利要求1-5任一项所述的钩吻总生物碱和任意药剂学上可接受的载体或赋形剂制成的。

7.根据权利要求6所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物为口服制剂或注射制剂。

8.根据权利要求6所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物为片剂、胶囊剂、软胶囊剂、口服液、注射剂、输液剂、粉针剂或冻干粉针剂。

9.根据权利要求8所述的药物组合物，其中注射剂的制备方法包括下述步骤：在100级以下车间，取钩吻总生物碱，加入20-50倍量注射用水，调pH至3.0-4.0，40-50℃下加热溶解，加入注射液用水溶性药用辅料，充分溶解后，调溶液pH至3.0-4.0，经0.2μm微孔滤膜超滤，得澄明溶液，按剂量补充注射用水，分装于安瓶，每安瓶装量2ml，含钩吻总生物碱2mg；熔封即得。

10.根据权利要求8所述的药物组合物，其中粉针剂的制备方法包括下述步骤：将权利要求9中所得到的澄明溶液经喷雾干燥，分装，轧盖，每瓶含钩吻总生物碱1mg或2mg。

11.根据权利要求8所述的药物组合物，其中冻干粉针剂的制备方法包括下述步骤：将权利要求9所得的澄明溶液按剂量补充注射用水，使溶液每ml含钩吻总生物碱为2mg，分装于安瓶中，经冷冻干燥，熔封即得。

12.根据权利要求8所述的药物组合物，其中软胶囊剂的制备方包括以下步骤：

A取钩吻总生物碱，加入适量食用大豆油溶解，并加入辅料，充分溶解，得油溶液；

B按常规软胶囊制备工艺压注软胶囊，冷却，包装，即得。

13.根据权利要求9所述的药物组合物，其特征在于：其中所述的注射液用水溶性药用辅料为氨基酸、葡萄糖、丙三醇、低分子右旋糖酐、磷酸盐或亚硫酸氢钠，其用量以钩吻总生物碱量计为0.5％-50％。