CN1270168A - 厚朴酚系列化合物及其合成方法和以该化合物为活性成分的药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了厚朴酚系列化合物的结构、合成方法及其活性,其中结构式为两大系列如式Ⅰ与式Ⅱ所示(见右式),R₃可选用卤素、氢基、甲基氧基、乙基氧基、丙基氧基、NO₂、n值为自然数0、1、2、3。本发明还揭示该化合物的合成方法和以该化合物为活性成分的药物组合物,以及本发明的化合物和药物组合物在治疗降血压、抗氧化活性、抗自由基活性中的应用。

Description

厚朴酚系列化合物及其合成方法和 以该化合物为活性成分的药物组合物

本发明涉及厚朴酚系列化合物的结构式及其合成方法，和以该化合物为活性成份的药物组合物，以及它们在降血压、抗氧化活性、抗自由基活性的药物组合物的应用。

厚朴属木兰科植物，产于四川、贵州、湘北、陕西、福建等地，神农本草经载：[厚朴主治中风、伤寒头痛、热寒、惊悸、气血痹、死肌、去三虫]。梁陶宏景名医别录称[厚朴温中益气、消痰下气、疗霍乱及腹痛胀满，胃中冷逆，胸中呕不止、泄痢淋露]。

厚朴酚(magnolol)是在1930年，由日本学者杉井善雄氏用中国四川厚朴的药用部位树皮抽提出的，中药材厚朴所含的厚朴酚含量很高，约占干重的十分之一。在传统的民间用药中，厚朴用于治疗焦虑、神经及心血管疾病。1990年Teng，C.M等人于Life Sci第47期第1153～1161页指出其主要成分厚朴酚的作用机制为抑制胞内钙离子流动、血管平滑肌放松、抗血小板凝集及抑制血清素分泌等。

1994年Fujita，S.等人于Biol.Med.第17期第273～277页揭示厚朴另含有少量如附图3所示的异厚朴酚(honokiol)，其结构也属双酚结构，与厚朴酚之关系为同分异构体，异厚朴酚经1994年LO，Y.C.证明也具有强力抗脂质过氧化能力，但其活性略逊于厚朴酚。在1976年Feringa B.等人于J.Org.Chem第98期第3372～3373页报导一系列以对丙烯茴香醚(p-allylanisole)为起始原料如附图4所示的厚朴酚合成方法；另外1978年Kupchan S.M.等人于J.Org.Chem第43期第4076～4080页也揭示一系列以对丙烯茴香醚(p-allylanisole)为起始原料如附图5所示的厚朴酚合成方法；在1985年由何东英等人于台湾科学第40期第31～35页揭示如附图6所示的两方向合成方法；在1995年Agharahimi，M.R.等人于J.Org.Chem第60期第1856～1863页揭示如附图7所示的合成方法，此方法比何东英等人的合成方法生产率更高可达到40％，且较无副产物产生，故纯化较易，从上述可以清楚明确的证明厚朴酚可以制造，其基本结构是两个酚环联结而成，属于双酚(biphenol)化合物。1994年文献报导厚朴酚的抗脂质过氧化能力为维生素E的1000倍，厚朴酚的结构比起许多已知的抗氧化剂实为简单，因此，本研究将此高效及简易结构的厚朴酚作为结构修饰的先导化合物。厚朴酚的抗氧化能力从过去的研究，经由测量“消除者”的方法，显示厚朴酚的抗氧化能力远逊于维生素E。但是若用测量“连锁反应中断者(chain breaker)”的方法，  显示厚朴酚具备强力的抗氧化作用，比维生素E强1000倍。由于细胞的氧化伤害，涉及自由基在细胞体外膜的一连串反应，所以厚朴酚应是一种[连锁反应中断者]型的抗氧化剂，由附图8、附图9、附图10可知，厚朴酚的抗脂质过氧化能力明显的比维生素E强，为强力的连锁反应中断者，厚朴酚在附图10、附图11、附图12中所扮演的角色为清除者，由附图可清楚看出其阶段的抗氧化能力远逊于维生素E。

氧化压力(oxidative stress)是一个复杂的名词，简单而言是指在氧化与抗氧化的平衡系统下，氧化的程度胜于抗氧化。这是因为多数细胞均需要氧才得以生存，而活性氧正是导致氧化的原因。虽然人体内有许多生理自卫性的抗氧化剂，包括许多酵素及非酵素的抗氧化成分，由于工业的发达，对人类生活环境的污染日益严重，因而促使氧化作用的几率也日益增加，当生理自卫性的抗氧化系统无法对抗时，氧化所造成的伤害即会在体内累积。根据HalliwellB.于1991年AM.J.Med第91期第14S～23S页报导，目前已有超过50种以上的疾病，其病因是因为氧化所造成的伤害，因此，进一步寻找与研究此类抗氧化物质，包括合成或天然的抗氧化剂，是目前亟待解决的问题。

本发明的目的在于提供一类新的具有药用价值的厚朴酚系列化合物及其该化合物的合成方法；本发明的另一目的是提一种具有降低血压、抗氧化活性、抗自由基活性的药物组合物。

本发明的技术构思：

依据本发明的目的，提供厚朴酚两大系列化合物及其合成方法，从而进一步的提供以该化合物为活性成分的多种具有降低血压、抗氧化活性、抗自由基活性的药物组合物。

厚朴酚的合成方法在1976年Feringa B.等人于J.Org.Chem.第98期第3372～3373页报导一系列以对丙烯茴香醚(p-allylanisole)为起始原料如附图4所示的厚朴酚合成方法，其是将对丙烯茴香醚(p-allylanisole)与三溴化硼甲基硫化物(boron tribromide-methylsulfide complex)进行去除甲基反应，生成对丙烯酚(p-allylphenol；chavicol)；在碱性环境下，再与铁氰化钾(potassium ferricyanide；K₃Fe(CN)₆)进行氧化还原反应，生成2-[2-羟基-5-(2-丙烯基)苯基]-4-(2-丙烯基)酚(2-[2-hydroxy-5-(2-propenyl)phenyl]-4-(2-propenyl)phenol；magnolol)；在1978年Kupchan S.M等人于J.Org.Chem.第43期第4076～4080页揭示一系列以对丙烯茴香醚(p-allylanisole)为起始原料如附图5所示的厚朴酚合成方法，其是将二氯甲烷为溶剂，加入三氟醋酸(trifluororacetic acid；TFA)及三氟醋酐(trifluororacetic acid anhydride；TFAA)，在氧氟化钒(vanadium oxytrifluoride；VOF₃)的氧化还原反应下，生成1-甲氧基-2-[2-甲氧基-5-(2-丙烯基)苯基]-4-(2-丙烯基)苯(1-methoxy-2-[2-methoxy-5-(2-propenyl)phenyl]-4-(2-propenyl)benzene)；再与三溴化硼甲基硫化物(boron tribromide-methyl sulfide complex)进行去除甲基反应，生成2-[2-羟基-5-(2-丙烯基)苯基]-4-(2-丙烯基)酚(2-[2-hydroxy-5-(2-propenyl)phenyl]-4-(2-propenyl)phenol；magnolol)；在1985年何东英等人在台湾科学第40期第31～35页揭示如附图6所示的两方向合成方法，本方法的优点为合成途径短，试药较便宜；缺点是生产率太低(0.25％)，终产物与副产物的物化性质过于类似，造成分离纯化困难，无法大量生产；在1995年Agharahimi，M.R等人于J.Org.Chem第60期第1856～1863页揭示如附图7所示的合成方法，本方法优点为较何东英等人的合成方法的生产率更高，可达到40％，且较无副产物产生，纯化较易，但制造流程长，所用试药昂贵，且反应条件均需在无水、避氧及低温条件下进行，因此无工业利用价值；本发明综合上述优缺点，详细分析厚朴酚的逆合成得知，可从两方向着手合成厚朴酚，一是先合成对丙烯酚，再将其联合起来；二是在双酚的对位上导入丙烯基。本发明所合成二系列厚朴酚为骨架的化合物，选用两种方法：一是取厚朴酚(magnolol)与甲醛，加入第二胺衍生物在酸性条件下加热搅拌充分反应后，减压浓缩，再进行纯化及再结晶；可获得有玛梨齐(Mannich)盐基，如式I的2-[3-取代甲基-2-羟基-5-(2-丙烯基)苯基]-4-(2-丙烯基)酚(2-[3-substitutedmethyl-2-hydroxy-5-(2-propenyl)phenyl]-4-(2-propenyl)Phenols)；另一系列的合成方法是将厚朴酚溶于四氢呋喃，在碱性条件下，将氯甲基甲基醚加入反应；均匀搅拌地加入预蒸馏的1-氯-2，3-环氧丙烷，加热回流；分别加入六氢吡肼衍生物加热回流，减压浓缩，进行纯化及再结晶，得各中间产物；以硅胶柱层析法纯化，可获得式II的2-[2-(3-取代2-羟基丙氧基)-5-(2-丙烯基)苯基]-4-(2-丙烯基)酚(2-[2-(3-substituted-2-hydroxypropoxy)-5-(2-propenyl)phenyl-4-(2-propenyl)-phenols])；多数的活性氧为氧自由基，但也有例外的，如单态氧分子(Singlet oxygen；¹O₂)及过氧化氢(H₂O₂)，不同的氧均有不同的半生期，其中羟基自由基(·OH)是活性最高且半生期最短的自由基，故它对人体的伤害也最严重，过氧自由基(RO₂·)的半生期最长，这是造成过氧自由基可扩散至其他地方的原因，其生成是由于别的自由基攻击不饱和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acids；PUFAs)而形成，当过氧自由基诞生时，就是脂质过氧化作用的开始；脂质过氧化作用是氧自由基对人体造成伤害的主要机制，故在病理学上占有很重要的角色，如在中枢神经系统方面，脂质过氧化可使大脑及脊髓遭受损害，而导致退化性疾病的产生，如中风(stroke)、帕金森氏症(Parkinson’s disease)等。在心血管方面，可破坏内皮细胞(endothelial cell)，使血管的功能受损，而产生许多心血管疾病，如高血压。血管梗塞引起心肌缺血(ischemia)及再灌流(reperfusion)所造成的伤害，也与脂质过氧化有关；在血液方面，可使血球的胞膜破裂，产生溶血的现象，诸多严重疾病的病因皆为脂质过氧化作用；当组织细胞受到损伤，例如：外伤、发炎等，会造成细胞死亡。当胞膜破裂，过渡金属离子(transition metal ions)即从细胞中释放出来，这些过渡金属离子具氧化还原能力，可导致自由基的产生，进而引发脂质过氧化作用。此外这些损伤也会活化环氧化酶(cyclooxygenase)及脂氧化酶(lipoxygenase)，而这两个酵素会作用在不饱和脂肪酸上，产生自由基，也可引发脂质过氧化作用；当血管硬化、梗塞或血管不正常极度收缩，使得血液无法正常灌流(Perfusion)，造成心肌缺血(myocardial ischemia)，心肌缺血会引起致命的心律不齐而导致死亡，许多研究结果认为是由于氧自由基(oxygen free radical)造成的细胞过氧化伤害(peroxidation damage)，当心肌缺血时，三磷酸腺甘(ATP)会降解成亚黄嘌呤(hypoxanthine)及嘌呤(purine)，经由黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase)的作用，则产生超氧阴离子(superoxide anion)，再经过过渡金属的氧化还原能力而产生羟基自由基(hydroxyl radical)，这两个自由基均会攻击胞膜，进而产生脂质过氧化作用，扩大组织细胞的伤害范围，当血液无法正常灌流时，通常给予的药物不外乎是血管扩张剂，血栓溶解剂或是给予外科手术，使之再灌流，虽然再灌流可使缺氧的细胞获得氧气，但如附图1所示大量氧气进入却使得脂质过氧化作用更严重，由于自由基可直接或间接的攻击胞膜的磷脂，产生脂质过氧化作用，尤其容易攻击C_20∶4及C_22∶6的不饱和脂肪酸，改变胞膜的结构，进而瓦解细胞的功能，由附图2中可看出，脂质过氧化作用为连锁反应，若无法适时阻止反应的发生，则造成的伤害也是连锁的，当自由基攻击不饱和脂肪酸，脂质分子即会发生重排，而形成共轭双烯(conjugated diene)的结构，再经过两个不同的代谢途径形成两种脂质过氧化物，一是环状结构内过氧化物(endoperoxide)及氢过氧化物(hydroperoxide)，最后脂质过氧化作用的终产物为丙二醯二醛(malondialdehyde，MDA)，故计算丙二醯二醛(MDA)的含量是一般用来评估脂质过氧化程度的指标；在1995年Uko，E.A.等人于Brain Res第671期第159～163页指出，在心血管疾病患者，包括所患疾病的并发症为心血管病变者，其血浆及血管组织中均可测出大量的丙二醯二醛(MDA)，如糖尿病、高血压及动脉硬化患者，在老化细胞中丙二醯二醛(MDA)的含量也比一般细胞高，研究发现丙二醯二醛可与体内一些重要的分子产生反应，如胺基酸、蛋白质及核酸等，对人体造成伤害，本发明化合物良好的抗氧化活性、抗自由基活性使其具有降低血压的效果，可发展为心血管药物，对上述疾病具有治疗作用。

结合附图及图表说明本发明的内容及实施例：

图1为大量氧气的进入却使脂质过氧化作用更严重。

图2为脂质过氧化作用。

图3为厚朴酚(magnolol)及异厚朴酚(honokiol)的结构。

图4为Feringa B.等人合成厚朴酚的方法。

图5为Kupchan S.M.等人合成厚朴酚的方法。

图6为何东英等人合成厚朴酚的方法。

图7为Agharahimi，M.R.等人合成厚朴酚的方法。

图8为厚朴酚(magnolol，●)与维生素E(α-Tocopherol，▲)抑

制心肌粒线体耗氧量的能力(n＝6)。

图9为厚朴酚(magnolol，●)与维生素E(α-Tocopherol，▲)抑

制心肌粒线体产生丙二醯二醛(MDA)的能力(n＝6)。

图10为厚朴酚(magnolol，●)与维生素E(α-Tocopherol，▲)抑

制心肌粒线体产生共轭双烯的能力(n＝3)。

图11为厚朴酚(magnolol，●)与维生素E(α-Tocopherol，▲)与

二苯硝基肼(DPPH)反应90分钟后，清除二苯硝基肼自由基

的能力(n＝3)。

图12为厚朴酚(magnolol，●)与维生素E(α-Tocopherol，▲)清

除二苯硝基肼自由基的能力，测试化合物的浓度为200μM，

(n＝3)。

图13为本发明化合物清除二苯硝基肼自由基的能力(n＝3)。

图14为本发明化合物清除二苯硝基肼自由基的能力(n＝3)。

图15为本发明化合物产生丙二醯二醛(MDA)的能力(n＝3)。

表1为2-[3-取代甲基-2-羟基-5-(2-丙烯基)苯基]-4-(2-丙烯基)

酚系列化合物的物性、化性数据。

表2为2-[2-(3-取代2-羟基丙氧基)-5-(2-丙烯基)苯基]-4-(2-

丙烯基)酚系列化合物的物性、化性数据。

表3为二苯硝基肼(DPPH)试验清除自由基的抗氧化能力。

表4为降血压活性。

本发明的主要内容可分为三部分说明，其一为厚朴酚新的合成方法；其二为厚朴酚两大系列化合物；其三为新的合成方法制备的厚朴酚两大系列化合物，具有的良好抗氧化活性，抗自由基活性，降低血压的效果并可以该化合物为活性成分的药物组合物的应用。

厚朴酚新的合成方法一是先合成对丙烯酚，再将其联结起来；二是在双酚的对位上导入丙烯基，根据1992年Singh，B等人于J.Med.Chem.第35期第4858～4865页报导，合成一系列含玛梨齐(Mannich)盐基的酚衍生物，其中氢氯化1-(1-吡咯啶甲基-萘酚)((1-pyrrolidine-1-yl)-methyl-2-naphthol·HCl)有强力β型降压的活性。将所合成的厚朴酚为骨架的化合物，导入一系列可能具有降血压等活性的玛梨齐(Mannich)盐基，期待该化合物除具有良好的抗氧化活性，更兼具降血压等心血管活性。

本发明所合成二系列厚朴酚为骨架的化合物，是选用两方法，一是取厚朴酚(magnolol)与甲醛，加入第二胺衍生物在酸性条件下加热搅拌充分反应后，减压浓缩，再进行纯化及再结晶；可获得有玛梨齐(Mannich)盐基，如式1的2-[3-取代甲基-2-羟基-5-(2-丙烯基)苯基]-4-(2-丙烯基)酚(2-[3-substituted methyl-2-hydroxy-5-(2-propenyl)phenyl]-4-(2-propenyl)phenols)；另一系列的合成方法是将厚朴酚溶于四氢呋喃，于碱性条件下，将氯甲基甲基醚加入反应；均匀搅拌地加入预蒸馏的1-氯-2，3-环氧丙烷，加热回流；分别加入六氢吡肼衍生物加热回流，减压浓缩，进行纯化及再结晶，得各中间产物；以硅胶柱层析法纯化，可获得式II的2-[2-(3-取代2-羟基丙氧基)-5-(2-丙烯基)苯基]-4-(2-丙烯基)酚(2-[2-(3-Substituted-2-hydroxypropoxy)-5-(2-propenyl)phenyl-4-(2-propenyl)phenols])。

本发明所合成的式I与式II厚朴酚两大系列化合物的结构如下所示：

上述R是指下列基团

而其中R₁可选用：-(-CH₂-)n-C-CH₂-R₂，

而其中R₂可选用：

而其中R₃可选用：卤素、氢基、甲基氧基、乙基氧基、丙基氧基、NO₂，n值是自然数为0、1、2、3。

因此R尚可代表下列基团：

本发明所制备的化合物，经纯化方法或结晶后分别测定熔点(mp)、元素分析、质谱(MS)、红外线光谱(IR)、核磁共振光谱(¹H-NMR，¹³CH-NMR)、紫外线吸收(UV)等物理化学资料。

本发明所合成的式I与式II厚朴酚两大系列化合物，经实施例24、25、26药理活性测试，其结果如附图13、附图14、附图15及表3所示化合物EC-2的抗自由基活性良好，远胜于厚朴酚，也比临床药物塔罗斯(Trolox)及普罗河(Probucol)更强。

本发明的化合物添加各种赋形剂，如硬脂酸镁、玉米粉、淀粉、乳糖、羟酸甲基纤维素纳、乙醇、甘油等，或稀释剂(diluents)、润滑剂(lubricants)、矫味剂、崩散剂(disintegrants)、粘合剂(binders)、或着色剂、甜味剂制成锭剂或其他固形制剂，而用磷酸盐类缓冲液调整酸碱度(PH)值可制成注射剂或其他液剂及各种剂型，其中固体剂型是包括片剂、锭剂、粉末、胶囊、舌下片、颗粒等剂型。本发明的药学可容许酸加成盐，以及该药学可容许酸加成盐的药学制品，除供口服给药、直肠投与之固体剂型外，也可制备为有效量的注射剂型、液体剂型或非经肠道使用的注射剂型，或直接涂敷患处的软膏剂型。一般投药剂量可随症状需要加以调配，通常为每人每次50mg到300mg，每天3次。

本发明的实施例如下：

实施例1为厚朴酚(magnolol)的合成

取18.6g(0.100mol)2，2’-联酚置于500ml反应瓶中，加入24.2g(0.200mol)丙烯溴及0.20g(1.500mmol)氯化铜(II)，再加30ml水，并充氮气，加热回流10小时后，再加入饱和碳酸氢钠水溶液，中和反应所产生的溴酸，以醋酸乙酯及水抽提，减压浓缩至干，以硅胶柱层析法(乙醚∶己烷＝1∶2)纯化得白色结晶产物，称重得5.3g(28.5％)。本产品厚朴酚熔点与物化性质与天然来源的纯品相同。

实施例2至8为：

EC-2、EC-3、EC-4、EC-5、EC-9、EC-10、EC-11

2-[3-取代甲基-2-羟基-5-(2-丙烯基)苯基]-4-(2-丙烯基)酚(2-[3-substituted methyl-2-hydroxy-5-(2-propenyl)phenyl]-4-(2-propenyl)phenols)的一般合成法。

取0.200g(0.752mmol)厚朴酚溶于乙醇10ml中，分别加入0.83mmol第二胺衍生物，加热搅拌5小时，减压浓缩，进行纯化及再结晶得各产物EC-2、EC-4、EC-5、EC-9、EC-10、EC-11，各产物的分析数据详见表1。

实施例9为：

2-[2-甲氧基甲氧基-5-(2-丙烯基)苯基]-4-(2-丙烯基)酚(2-[2-methoxymethoxy-5-(2-propenyl)phenyl-4-(2-Propenyl)phenol，EC-7)。

取0.200g(0.752mmol)厚朴酚溶于10ml四氢呋喃，置于反应瓶中，取0.020g(0.830mmol)氢化钠溶于1ml四氢呋喃，将此溶液缓缓加入反应瓶中，在室温下搅拌15分钟，静置5分钟，再搅拌1小时，最后缓缓加入60.5mg(0.752mmol)氯甲基甲基醚，室温下搅拌12小时，减压浓缩至干，干燥后以硅胶柱层析法(EA∶Hexane＝1∶5)纯化，称重得产物0.162g产率81％。

分析数据如下：

UV(EtOH)λmax：290，214nm.

MS(EI，70eV)：m/z(％)＝310[M⁺](100％)

IR(KBr)：3320，3210，2924，1644，1589，1504，1410，1200，1010，

912，820cm^-1。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ：3.42(3H，s，CH₃OCH₂)，3.45(4H，d，J＝

       5.2Hz，2×CH₂CH＝CH₂)，5.12(4H，m，2×CH₂CH＝CH₂)，

       5.16(2H，s，OCH₂O)，6.05(2H，m，2×CH₂CH＝CH₂)，6.20(1H，

       s，OH)，7.00-7.23(6H，m，6×Ar-H)

¹³C-NMR(75MHz，CDCl₃)δ：40.5，57.0，96.6，116.1，116.6，117.2，

       117.8，126.6，129.0，130.0，131.8，132.9，135.8，137.90，152.5。

Rf(EA∶Hexane＝1∶5)＝0.50

元素分析：分子式C₂₀H₂₂O₃

理论值C，77.39；H，7.14

实际值C，77.11；H，7.19。

实施例10为：

1-(环氧乙烷-2-基甲氧基)-2-[(2-甲氧基甲氧基-5-(2-丙烯基)苯基]-4-(2-丙烯基)苯(1-(oxiran-2-ylmethoxy)-2-[2-methoxy methoxy-5-(2-propenyl)phenyl]-4-(2-propenyl)benzene，EC-8)。

取0.200g(0.64mmol)实施例9产物EC-7溶于10ml乙醇，置于反应瓶中，加入预蒸馏的476.5mg(5.1mmol)1-氯-2，3-环氧丙烷，搅拌均匀，加热回流2小时，静置，减压浓缩至干，以硅胶柱层析法(EA∶Hexane＝1∶5)纯化产物，称重得产物0.21g产率100％。

分析数据如下：

UV(EtOH)λmax：285，217nm.

MS(EI，70eV)：m/z(％)＝366[M⁺](100％)

IR(KBr)：3289，3081，2950，1640，1504，1410，1350，1270，1010，

912，840，820cm^-1。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ：2.76(2H，d，J＝2.8Hz，CH₂OCH)，3.36

      (3H，s，CH₃OCH₂)，3.39(4H，d，J＝8.7Hz，2×CH₂CH＝CH₂)，

      5.05(4H，m，2×CH₂CH＝CH₂)，5.07(2H，s，OCH₂O)，6.01

      (2H，m，2×CH₂CH＝CH₂)，6.91-7.15(6H，m，6×Ar-H)

¹³C-NMR(75MHz，CDCl₃)δ：40.0，50.8，56.4，69.9，96.2，113.7，

      116.1，116.3，129.3，129.0，132.4，133.2，138.3，154.0，

      154.99。

Rf(EA∶Hexane＝1∶5)＝0.40

元素分析：分子式C₂₃H₂₆O₄

理论值C，75.38；H，7.15

实际值C，75.39；H，7.28。

实施例11至23为：

2-[2-(3-取代2-羟基丙氧基)-5-(2-丙烯基)苯基]-4-(2-丙烯基)酚[2-[2-(3-substituted 2-hydroxypropoxy)-5-(2-propenyl)phenyl]-4-(2-propenyl)phenols，EC-130～EC-250)。

取1.2g(3.28mmol)实施例10产物EC-8溶于50ml甲醇中，分别加入6.56mmol六氢吡肼衍生物(若为氢氯化衍生物，则需加入等量的碳酸氢钠，以除去盐酸)，加热回流5小时，减压浓缩，进行纯化及再结晶，得各中间产物，本中间产物末经结构鉴定，直接进行下步骤反应：

分别取3.10mmol上述中间产物，溶于THF∶i-PrOH＝1∶1的溶剂中，加入1.2ml浓盐酸(37％)，在室温下搅拌18小时后，加入饱和碳酸氢钠溶液中和后，分配于水及醋酸乙酯中，有机层减压浓缩，以硅胶柱层析法纯化，即得下列的第二系列产物EC-130、EC-140、EC-150、EC-160、EC-170、EC-180、EC-190、EC-200、EC-210、EC-220、EC-230、EC-240、EC-250，分析数据详见表2。

实施例24为二苯硝基肼(DPPH)试验抗氧化活性：

依照1966年Mellors，A.等人于J.Biol.Chem，第241期第4353页揭示方法，将二苯硝基肼(DPPH)溶于乙醇，配置成100μM。将待测检体溶乙醇，分别配置成100μM、50μM、20μM及10μM，将待测检体加入二苯硝基肼(1，1-diphenyl-2-picryhydrazyl.DPPH)中，均匀搅拌，静置30分钟，在波长517nm下测其吸光值，由测出的吸光值，即可估计清除自由基的活性，分析数据详见表3。

实施例25为抗脂质过氧化活性。

依照1966年Teng.C.M等人于Eur.J.Pharmarco.第303期第129-139页揭示的方法，取周龄8周SD鼠的全脑组织，去除小脑，用冰冷的Krebs缓冲液冲洗，并用道氏均质机(Dounce homogenizer)将之均质化，低温下低速离心10分钟，加入100μM欲测试活性的化合物，静置反应10分钟，加入200μM亚铁离子，并在37℃下反应30分钟，以诱发脂质过氧化作用，加入10μM的冰冷三氯醋酸溶液及200μM的硫巴比妥酸(thiobarbituric acid)做呈色剂，于沸水下反应15分钟后取出，等其冷却，再加入1ml的正丁醇，离心5分钟，取出有机层，在波长532nm下测其吸光值，即可估计其抗脂质过氧化活性，其结果显示化合物EC-5、EC-6、EC-9、EC-10、EC-170及EC-250的抗脂质过氧化活性比厚朴酚强，而EC-150与厚朴酚相当，其血压、心跳的变化如表4所示。

实施例26为周边给药降血压试验：

依照1993年Tao，P.L.等人于Eur.J.Pharmarco.第243期第135页揭示的方法，取周龄10周，体重约250-300g的雄性先天高血压的大白鼠，经腹腔注射50mg/kg本他巴比塔(pentobarbital)麻醉后，分别作股动脉及股静脉插管，将充有100μg/ml肝素(heparin)的聚乙烯(polyethylene)导管(PE-50)插入股动脉，并连接于压力转换器(Gould statham P23ID)以侦测血压，而心跳则利用血压博动连接于心跳监测器(Tachometer，Grass Co)测得，再经由高式(GrassModel)7D生理多项描记器记录其变化，另将充有生理食盐水的导管插入股静脉，做给药及补充体液之用，做气管插管(PE-240)，防止气管被痰阻塞及供给氧气之用。手术完成后，待动物的血压、心跳稳定达30分钟，开始给药，经由静脉插管打入0.4mg/200g的待测药物，同时以01ml生理食盐水冲洗导管管壁所残留的药物，记录其心跳及血压的变化。

平均血压(mean blood pressure；MBP)的计算法：

[(收缩压-舒张压)/3]+舒张压。

表1

表2

表3Compound                          Concentration(μM).atΔA＝2Magnolol                          65.450±10.542Probucol                          4.796±0.309Trolox                            3.04±1.022EC-2                              0.690±0.140表4

化合物    Δ平均血压    Δ心跳速率    作用时间

            (mmHg)        (bpm)       (分)

Magnolol    -             -            -

EC-2        -             -            -

EC-3        -66.6±17.5   45±8        2

EC-4        -             -            -

EC-5        -             -            -

EC-6        -23.3±10     -8           2

EC-9        -             -            -

EC-10       -             -            -

EC-130      -49.2±17.5   4±5.3       35±5

EC-140      -31.7±5      -24±8       35±15

EC-150      -             -            -

EC-160      -75.0±17.5   8            1±0.3

EC-170      -48.3         60±4        6

EC-180      -             -            -

EC-190      -30           -24±8       12±3

EC-200      -             -            -

EC-210      -             -            -

EC-220      -             -            -

EC-230      -20±5        -24±6       0.5

EC-240      -             -            -

EC-250      +68.4±5      +75±5       12.5±2.5

Carvedilol  -83.4         -24          70±10

-表示无作用

Claims (9)

1、一种厚朴酚系列化合物，其结构如式I和式I

其中R是指下列基团：

R₁可选用：-(-CH₂-)n-C-CH₂-R₂，

而其中R₂可选用：

而其中R₃可选用卤素、氢基、甲基氧基、乙基氧基、丙基氧其、NO₂、n为自然数0、1、2、3。

2、一种合成式I所示厚朴酚系列化合物的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：a)取厚朴酚(magnolol)与甲醛，加入第二胺衍生物在酸性条件下加热搅拌充分反应后；b)减压浓缩；c)再进行纯化及再结晶；d)可获得有玛梨齐(Mannich)盐基式I的2-[3-取代甲基-2-羟基-5-(2-丙烯基)苯基]-4-(2-丙烯基)酚(2-[3-substitutedmethyl-2-hydroxy-5-(2-propenyl)phenyl]-4-(2-propenyl)phenols)。

3、一种合成式II所示的厚朴酚系列化合物的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：a)将厚朴酚溶于四氢呋喃，在碱性条件下，将氯甲基甲基醚加入反应；b)均匀搅拌并加入预蒸馏的1-氯-2，3-环氧丙烷，加热回流；c)分别加入六氢吡肼衍生物再加热回流；d)减压浓缩；e)进行纯化及再结晶，得各中间产物；f)以硅胶柱层析法纯化，可获得式II的2-[2-(3-取代2-羟基丙氧基)-5-(2-丙烯基)苯基]-4-(2-丙烯基)酚(2-[2-(3-substituted-2-hydroxypropoxy)-5-(2-propenyl)phenyl-4-(2-propenyl)phenols)。

4、一种具有降低血压的药物组合物，其特征在于以权利要求1中式I结构的厚朴酚系列化合物为主要成份，随各种剂型的需要添加各种赋形剂。

5、一种具有降低血压的药物组合物，其特征在于以权利要求1中式II结构的厚朴酚系列化合物为主要成份，随各种剂型的需要添加各种赋形剂。

6、一种具有抗氧化活性的药物组合物，其特征在于以权利要求1中式I结构的厚朴酚系列化合物为主要成份，随各种剂型的需要添加各种赋形剂。

7、一种具有抗氧化活性的药物组合物，其特征在于以权利要求1中式II结构的厚朴酚系列化合物为主要成份，随各种剂型的需要添加各种赋形剂。

8、一种具有抗自由基活性的药物组合物，其特征在于以权利要求1中式I结构的厚朴酚系列化合物为主要成份，随各种剂型的需要添加各种赋形剂。

9、一种具有抗自由基活性的药物组合物，其特征在于以权利要求1中式II结构的厚朴酚系列化合物为主要成份，随各种剂型的需要添加各种赋形剂。

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