CN1502353A - 复方芎归总提取物及其制剂和用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种复方芎归总提取物及其制备方法和用途,本发明还涉及含有该总提取物的药物组合物。本发明使用二氧化碳超临界萃取的方法制备得到复方芎归总提取物,并将该总提取物制成滴丸剂和软胶囊剂;本发明的总提取物可以用于制备治疗头痛、风湿痹痛及妇科痛经、月经不调等症的中药复方药物的用途。
Description
本发明属于中药技术领域,具体而言,本发明涉及一种用于制备治疗妇科疾病以及头痛、痹痛等疾病的药物的中药传统复方芎归总提取物及其制备方法和制剂。
复方芎归散由川芎、当归组成,又名佛手散,出自《普济本事方》,主治妊娠伤胎,难产,胞衣不下等妇科疾病,《医宗金鉴》对其治病机理作了较详尽的辨证分析:“命名曰佛手者,谓妇人经前、产后诸症,如佛手之神妙也。川芎、当归为血分之主药,性温而味甘、辛,以温能和血,甘能补血,辛散血出也。”在以后的临床应用中该方剂被广泛的应用于与之辨证相关连的病症,如月经不调,经行腹痛,妇人难产,产后瘀血腹痛;疮疡肿痛;风湿痹痛;血虚、血瘀头痛等症。已公开的川芎当归提取方法包括:乙醚提取和乙醇渗滤后乙醚提取等,而这些方法存在着工艺周期长、大量使用有机溶剂等缺陷。例如,乙醇渗滤需要12小时左右;大量使用有机溶剂,操作上容易出危险,工业化生产有一定难度;提取过程中有机溶剂有可能清除不净,药品中有残留物;使用试剂量大,成本较高;工艺过程长,可变因素多,不利于产品的监测等缺陷。
因此,本发明的目的是提供一种复方芎归总提取物;
本发明的另一目的是提供一种制备本发明复方芎归总提取物的方法;
本发明的另一目的是提供含有本发明复方芎归总提取物的药物制剂;
本发明的另一目的是提供了本发明复方芎归总提取物用于制备治疗头痛、风湿痹痛及妇科痛经、月经不调等症的中药复方药物的用途。
本发明人经过多年潜心研究,采用现代科技手段的超临界二氧化碳萃取技术,对中药植物川芎和当归的有效成分进行提取。具体方法包括如下步骤:
a.分别将当归和川芎粉碎,过20目筛;
b.将重量比为20-80%,优选30-70%,更优选40-60%的当归和重量比为20-80%,优选30-70%,更优选40-60%的川芎粉末置超临界CO2萃取仪萃取,萃取条件是:
压力:20-50Mpa,
温度:室温-80℃
萃取物分离条件:
第一分离釜压力:8-15Mpa,温度:20-80℃,
第二分离釜压力:4-6Mpa,温度:20-80℃;
c.收取第二分离釜萃取物,过滤、离心、取油层得总提取物。
本发明人对萃取得到的总提取物进行了进一步研究,将提取物制成各种药物组合物,如滴丸剂和胶囊剂等。具体制备工艺如下:
滴丸制备工艺如下:
a.取上述芎归总提取物,与常规重量比例的聚乙二醇等辅料加热熔融,加热温度为60-90℃,其中聚乙二醇可以使用聚乙二醇4000至聚乙二醇20000系列中的一种或它们的混合物;
b.置滴丸机中,60-90℃恒温,控制流速,滴入二甲基硅油冷凝液中,
滴制条件:
滴口直径:2mm-5mm
滴距:2-5cm
滴速:30-60滴/分钟
冷凝液温度:0℃-30℃
冷凝液高度:30-60cm;
c.取滴丸,拭去表面冷凝液,即得滴丸。
软胶囊制备工艺如下:
a.胶液的配置:
按常规比例称取明胶、甘油、水,置于胶桶中,40-80℃水浴化胶,呈熔融态后,搅拌下加入遮光剂二氧化钛,调色剂可可棕等,混合均匀;
b.将处理好的胶液抽真空除气泡;
c.将处理好的胶液与本发明的总提取物分别加入胶囊机胶桶与料斗中,压制。胶丸放至高燥室中干燥24小时,取合格胶丸即得。
本发明方法得到的总提取物以苯酞类成分及不饱和脂肪酸类成分为主要活性成分,其中苯酞类成分含量可达10-90%,其中苯酞类成分中蒿本内酯含量为10-90%;不饱和脂肪酸成分可达1-40%,优选5-40%,其中不饱和脂肪酸包括亚油酸.油酸.亚麻酸等。
本发明的提取工艺可以使芎归总提取物中苯酞类成分和不饱和脂肪酸类成分保持一定的比例关系,而这两者的比例关系对总提取物的药用效果是至关重要的。这是因为:1.苯酞类成分具有明显的活血化瘀.抗炎镇痛的功效,但也有较明显的副作用,可能对胃肠道.肾以及中枢神经有一定的损害,因此应注意适当降低该类成分在药物中的比例,以及进行配伍降低毒性;2.不饱和脂肪酸具有一定的细胞保护作用,特别是在胃肠道中,可以预防或减少其它类成分引起的不良反应,另外不饱和脂肪酸也有一定的抗炎和改善血流变的作用。因此,我们通过长期研究,摸索出上述制备总提取物的工艺将以上两类成分结合在一起,起到增效、减毒的作用,这一特点在我们所进行的试验中得到了进一步的证明。
我们进行了以下相关试验:对大鼠和家兔在体子宫的影响试验.对抗缩宫素的影响试验.抗凝血作用试验.抗血小板聚集作用试验.抗炎试验.镇痛试验.大鼠和犬的长毒试验.大鼠和小鼠的急毒试验.小鼠和犬的一般药理试验等。从以上试验中发现芎归总提取具有解痉.镇痛.活血.抗炎等药理活性作用,对正常生理指标无影响,毒性低,安全性高等特点,具备开发成为中药新药的条件。将总提取物制成滴丸剂及软胶囊,该剂型有利于该有效成分在人体内完全、快速的吸收,充分发挥其药效作用,临床上可用于治疗头痛、风湿痹痛及妇科痛经、月经不调等症。
本发明合并该复方中川芎、当归的有效成分,在所进行的有关痛经药理试验中证明合并提取物的药效作用优于当归的单独提取,具体表现在对家兔在体子宫影响比较试验、大鼠在体子宫的影响试验中:通过比较芎归总提取物和当归提取物的药效作用,发现芎归总提取物起效时间较快,药效作用强,有效剂量小;在抗凝血实验中发现当归提取物凝血速率和强度虽有一定药效作用,但并不明显,而芎归总提取物有明显的抗凝血作用;在抗血小板聚集实验中:芎归总提取物有明显的抗血小板聚集作用,当归提取物未表现出这一作用。
与现有技术相比,本发明的总提取物及其制备方法具有诸多优点:
1.工艺技术先进,生产成本低,适合现代化工业生产;
2.得到的总提取物及其制剂起效迅速,疗效好,无明显毒副作用;
3.使用超临界CO2萃取技术提取药物,不使用乙醚及乙醇等有机溶剂,产品安全、天然;
4.本发明的萃取技术速度快,一个工作日内可完成一批次产品,大大缩短生产周期;
5.由于川芎、当归中的活性成分蒿本内酯高温下易发生反应,而超临界CO2萃取技术萃取温度低,适于对该活性成分的萃取,经检测蒿本内酯最高时含量可达60%以上;
6.超临界CO2萃取技术得率高,萃取介质可循环使用,可降低生产成本和药材用量。
下面通过实施例进一步说明本发明。应该理解的是,本发明的实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护的范围。除非另有说明,本发明中的百分数是重量百分数。
实施例1 芎归总提取物(1)的制备
将占药材重量30%的川芎和占药材重量70%当归药材或饮片粉碎,过20目筛,置于超临界CO2萃取仪中萃取;
萃取条件:压力:20Mpa,温度:40℃(±3℃);
分离条件:第一分离釜分离条件:压力:10Mpa,温度:40℃左右;
第二分离釜条件:压力:5Mpa,温度:40℃(±3℃);
收取第二萃取釜萃取物,抽滤、离心、取油层即得总提取物(1)。
实验结果:样品得率2.87%,苯酞类含量38.4%,藁本内酯含量16.9%,亚油酸含量3.21%。
实施例2 芎归总提取物(2)的制备
将占药材重量60%的川芎和占药材重量40%当归药材或饮片粉碎,过20目筛,置于超临界CO2萃取仪中萃取;
萃取条件:压力:30Mpa,温度:60℃(±3℃);
分离条件:第一分离釜分离条件:压力:12Mpa,温度:40℃左右;
第二分离釜条件:压力:5Mpa,温度:40℃(±3℃);
收取第二萃取釜萃取物,抽滤、离心、取油层即得总提取物(2)。
实验结果:样品得率:3.10%,苯酞类含量43.6%,藁本内酯含量21.7%,亚油酸含量7.54%。
实施例3 芎归总提取物(3)的制备
将占药材重量50%的川芎和占药材重量50%当归药材或饮片粉碎,过20目筛,置于超临界CO2萃取仪中萃取;
萃取条件:压力:40Mpa,温度:40℃(±3℃);
分离条件:第一分离釜分离条件:压力:12Mpa,温度:40℃左右;
第二分离釜条件:压力:5Mpa,温度:40℃(±3℃);
收取第二萃取釜萃取物,抽滤、离心、取油层即得总提取物(3)。
实验结果:样品得率3.57%,藁本内酯含量29.6%,亚油酸含量6.75%。
实施例4 芎归总提取物(4)的制备
将占药材重量40%的川芎和占药材重量60%当归药材或饮片粉碎,过20目筛,置于超临界CO2萃取仪中萃取;
萃取条件:压力:30Mpa,温度:40℃(±3℃);
分离条件:第一分离釜分离条件:压力:12Mpa,温度:40℃左右,
第二分离釜条件:压力:5Mpa,温度:40℃(±3℃);
收取第二萃取釜萃取物,抽滤、离心、取油层即得总提取物(4)。
实验结果:样品得率3.46%,苯酞类含量49.5%,藁本内酯含量27.8%,亚油酸含量7.82%。
结果表明:此条件下挥发油提取较完全,藁本内酯、亚油酸含量高,药效结果好。
实施例5 芎归总提取物滴丸的制备
取实施例4的总提取物,与常规重量比例的聚乙二醇4000至聚乙二醇6000或者它们的混合物等辅料加热熔融,混合比例搅拌均匀,倾入滴丸机中,80℃恒温下滴入5℃二甲基硅油等冷凝液中,滴速35滴/分钟,滴距5cm,滤出滴丸,擦净冷凝液,分装制成滴丸即得。
结果表明:滴丸圆整、工业易操作,理化指标合格。
实施例6 芎归总提取物软胶囊的制备
按常规重量比例称取明胶、甘油、水等置化胶罐中,40-80℃水浴化胶,呈熔融态后,搅拌下加入二氧化钛等遮光剂,可可棕等调色剂。待混合均匀后,抽真空除气泡。将处理好的胶液与实施例4的总提取物分别加入胶囊机胶桶与料斗中,压制。胶丸放至高燥室中干燥24小时,取合格胶丸即得。
实施例7.不同提取工艺的芎归提取物对大鼠肉芽肿的生长影响的试验
在大鼠肉芽肿动物模型上,观察比较水对照组、阿司匹林阳性对照组、实施例4芎归总提取物组、芎归水提酒沉法组、芎归渗漉法组和芎归水蒸馏法组的抗炎作用。结果如下表1,各给药组或阳性药组均与模型组比较,进行组间t检验,P<0.05被认为有显著性差异,*为P<0.05.**为P<0.01。
表1.不同工艺芎归提取物对大鼠肉芽肿的生长影响(X±S)
组别 剂量(mg/kg) 棉球肉芽肿重量(mg) 抑制率%
水对照 113.54±16.65
阿斯匹林 100.0 80.31±15.14** 29.26
实施例4 60.00 87.74±16.80* 22.72
实施例4 30.00 91.55±18.73* 19.36
水提酒沉法 60.00 102.10±20.77 10.01
渗漉法 60.00 95.58±14.63 15.81
水蒸馏法 60.00 100.40±15.32 11.57
实验表明阳性药、超临界工艺下的芎归总提取物60和30mg/kg对大鼠肉芽肿抑制有显著作用(P<0.05),其作用均优于水提酒沉、渗漉、水蒸馏其它各种提取方法。其中:水提酒沉法、乙醇渗漉法、水蒸汽蒸馏法物料是根据与实施例4相同的原料比例分别参照曹春林主编《中药药剂学》上海科学技术出版社出版1995年10月各章项下方法制备得到(以下同)。
实施例8.不同提取工艺的芎归提取物对小鼠镇痛作用的研究
通过对小鼠的镇痛(热板法)实验研究,观察比较不同工艺芎归提取物的镇痛作用。结果如下表2,各给药组或阳性药组均与模型组比较,进行组间t检验,P<0.05被认为有显著性差异,*为P<0.05.**为P<0.01。
表2.不同工艺芎归提取物对小鼠的镇痛作用 热板法(n=10)
剂量 给药后痛阈值
组别
基础阈值
mg/kg 20分 40分 60分
水对照 20.3±4.57 22.7±5.60 16.2±4.24 19.6±2.91
阿斯匹林 100.0 19.6±2.91 22.4±4.53 24.5±9.46* 17.1±4.98
实施例4 60.00 20.5±3.92 31.0±9.12* 25.4±6.72** 17.5±3.50*
实施例4 30.00 20.4±3.75 27.8±5.63 23.1±6.72* 17.1±6.49
水提酒沉 60.00 21.0±4.78 24.5±5.72 21.9±8.66 15.8±5.85
渗漉 60.00 20.8±4.26 22.6±5.28 21.4±7.11 15.2±5.33
水蒸馏 60.00 20.2±4.69 25.4±6.79 24.0±7.44* 16.5±4.58
实验表明阳性药、超临界工艺下的芎归总提取物60mg/kg和30mg/kg对小鼠痛阈有显著的提高作用(P<0.05),其作用均优于水提酒沉.渗漉.水蒸馏其它各种提取方法。
实施例9.芎归提取物和当归提取物对大鼠在体子宫影响比较试验
通过对大鼠在体子宫的实验研究,观察比较本发明芎归提取物和用与实施例4相同的超临界萃取方法单独提取当归得到的提取物的药理作用。结果如下表3,各给药组或阳性药(月月舒)组均与模型组比较,进行组间t检验,P<0.05被认为有显著性差异,*为P<0.05.**为P<0.01。
表3 二药对大鼠在体子宫收缩力的影响(单位:克)
剂量 例 注射缩宫素 注射缩宫素注射液后(分钟)
组别
mg/kg 数 注射液前 5~10 15~20 25~30 35~40 45~50
- 10 1.16± 1.10± 1.15± 1.18± 1.16±
对照组 0.91±0.31
0.30 0.22 0.20 0.36 0.39
1.67g 10 0.85± 0.77± 0.74± 0.74± 0.75±
月月舒 0.73±0.20
0.18 0.21** 0.23** 0.28** 0.34*
实施例 30 10 0.75± 0.75± 0.78± 0.78± 0.79±
0.67±0.38
4 0.26** 0.33* 0.31** 0.28* 0.33*
实施例 15 10 0.66± 0.68± 0.73± 0.76± 0.71±
0.76±0.38
4 0.37** 0.40* 0.35** 0.33* 0.27**
实施例 7.5 10 0.86± 0.95± 0.98± 0.82± 0.71±
0.70±0.27
4 0.34 0.44 0.54 0.38 0.47*
当归提 30 10 0.87± 0.73± 0.67± 0.69± 0.74±
0.72±0.20
取物 0.28 0.27** 0.22** 0.27** 0.25*
当归提 15 10 0.84± 0.89± 0.83± 0.86± 0.85±
0.78±0.27
取物 0.33 0.31 0.28* 0.29* 0.31
当归提 7.5 10 0.88± 0.95± 0.95± 0.89± 0.73±
0.84±0.37
取物 0.43 0.41 0.37 0.31 0.20**
实验表明肌肉注射缩宫素后,芎归总提取物30、15mg/kg,在各时间段均可使大鼠在体子宫平滑肌的收缩力、活动度减少,7.5mg/kg在注射缩宫素后35~40、45~50时间段均可使子宫平滑肌的活动度减少;当归提取物30mg/kg在25~40时间段可使子宫活动度减少,15、7.5mg/kg在注射缩宫素后45~50时间段均可使子宫平滑肌的活动度减少,比较两药,芎归总提取物起效时间较快,作用强度也较优于当归提取物。
实施例10.芎归总提取物与当归提取物对家兔在体子宫影响比较试验
通过观察芎归提取物、当归提取物对家兔在体子宫的影响作用,比较二者的药效作用及作用特点。结果如下表4,各给药组或阳性药组均与模型组比较,进行组间t检验,P<0.05被认为有显著性差异,*为P<0.05.**为P<0.01。
表4 两药对家兔在体子宫收缩频率的影响 (n=6)
剂量 收缩振幅(mmHg)
组别 给药前
mg/kg 0 15分钟 30分钟 45分钟
对照 - 10.17± 18.33± 17.17± 16.17± 12.33±
2.86 3.78 4.46 3.43 3.08
月月舒 1.67g 9.17± 18.00± 17.67± 13.33± 11.33±
1.94 3.79 3.67 1.63 2.50
实施例4 30 11.00± 16.33± 11.33± 10.83± 10.00±
2.27 4.71 4.18* 4.07* 2.83
实施例4 15 11.50± 17.83± 13.16± 11.50± 11.17±
2.59 5.12 3.92 2.66* 2.31
当归提取物 30 10.83± 16.17± 15.17± 12.17± 12.00±
2.93 4.83 2.86 2.32* 3.34
当归提取物 15 11.17± 18.17± 17.33± 13.83± 12.17±
2.79 4.75 3.61 4.07 3.31
实验结果表明,芎归总提取物30mg/kg可在药后15、30分钟使子宫收缩频率明显下降,芎归总提取物15mg/kg在药后30分钟使子宫收缩频率明显下降;当归提取物30mg/kg可在药后30分钟使子宫收缩频率明显下降,两药相比较,芎归总提取物起效较快,药效作用强,小剂量组即可产生较好的药效作用。
实施例11.芎归总提取物和当归提取物抗凝血作用研究
观察芎归提取物对大鼠的抗凝血作用,以及比较复方芎归提取物和单味当归提取物二者的药效作用。结果如下表5,各给药组或阳性药组均与模型组比较,进行组间t检验,P<0.05被认为有显著性差异,*为P<0.05.**为P<0.01。
表5.二药对大鼠血小板聚集的作用研究
动物 剂量 Tr Dτ/dt Tm
组别
只 mg/kg (分钟) (pa/分钟) (pa)
空白对照 10 0.921±0.106 735.9±91.99 104.47±25.20
月月舒 10 2g 0.973±0.127 662.1±188.68 110.39±17.76
实施例4 10 36 1.027±0.086* 563.3±183.90* 82.60±17.58*
实施例4 10 18 1.056±0.150* 573.7±193.76* 90.57±21.81
实施例4 10 9 0.986±0.106 687.7±147.70 101.39±22.31
当归提取物 10 36 1.035±0.129* 633.3±189.22 98.75±15.59
当归提取物 10 18 0.996±0.091 704.2±200.68 106.80±19.40
实验结果表明,芎归总提取物大、中剂组对于凝血时间、速率两方面指标都表现出明显的抑制作用,大剂量组同时还对凝血强度也有明显降低作用,中剂量组虽使平均值下降,但未达到显著限。当归提取物大剂量组对凝血时间有明显的抑制作用,对速率和强度并不明显。芎归总提取物有明显的抗凝血作用,并优于当归单独使用。
实施例12.芎归总提取物抗血小板聚集作用研究
观察芎归总提取物。当归提取物二药对大鼠血小板聚集及全血粘度、血浆粘度的影响作用,比较芎归提取物和当提取物的药效作用,结果如下表6,各给药组或阳性药组均与模型组比较,进行组间t检验,P<0.05被认为有显著性差异,*为P<0.05.**为P<0.01。
表6.二药对大鼠血小板聚集的作用研究
剂量 血小板聚集 压积 全血粘度(mpa.·.s) 血浆粘度
组别
Mg/kg (%) 10s-1 100s-1 200s-1 (mpa.·.s)
49.32±16.76 38.55± 11.66± 5.83± 5.34±
空白对照 1.09±0.024
1.73 2.78 1.10 0.86
39.48±23.36 38.58± 10.70± 5.70± 5.14±
月月舒 2g 1.08±0.027
1.90 2.69 1.18 0.92
29.29±17.53* 38.20± 11.41± 6.12± 5.53±
实施例4 36 1.09±0.017
1.64 3.16 1.23 1.03
31.27±15.02* 39.57± 10.03± 5.89± 5.39±
实施例4 18 1.10±0.048
1.32 1.69 1.01 0.71
35.00±17.28 39.13v± 10.37± 5.81± 5.29±
实施例4 9 1.08±0.039
2.29 2.56 0.86 0.65
42.96±22.37 38.39± 11.81± 6.27± 5.55±
当归提取物 36 1.08±0.036
2.30 2.33 0.96 0.72
实验以上结果表明,三个剂量组的芎归总提取物、阳性对照药以及当归提取物5天给药对正常大鼠的血液流变学指标均没有影响,即对于正常血流变参数不产生干扰,使之继续保持正常。大、中剂量组的芎归总提取物对于血小板聚集均表现出明显的抑制作用,聚集平均值降低在20%左右,从降幅而言其抑制作用比较温和;阳性对照药和当归提取物未表现出抗血小板聚集的作用,表明就抗血小板聚集芎归复方药效要略强于当归单味药。
Claims (12)
1.一种当归和川芎的总提取物,其由下列步骤制备:
a.分别将当归和川芎粉碎,过20目筛;
b.将占药材重量20-80%的川芎和占药材重量20-80%的当归粉末置于超临界CO2萃取仪萃取,萃取条件是:
压力:20-50Mpa,
温度:室温-80℃
萃取物分离条件:
第一分离釜压力:8-15Mpa,温度:20-80℃,
第二分离釜压力:4-6Mpa,温度:20-80℃;
c.收取第二分离釜萃取物,过滤、离心、取油层得总提取物。
2.根据权利要求1的总提取物,其中,步骤b中将占药材重量30-70%的川芎和占药材重量30-70%的当归粉末置于超临界CO2萃取仪萃取。
3.根据权利要求1的总提取物,其中,步骤b中将占药材重量40-60%的川芎和占药材重量40-60%的当归粉末置于超临界CO2萃取仪萃取。
4.根据权利要求1-3之一的总提取物,其含苯酞类成分10-90%,含不饱和脂肪酸成分5-40%。
5.根据权利要求4的总提取物,其中苯酞类成分中蒿本内酯含量为10-90%。
6.根据权利要求4的总提取物,其中不饱和脂肪酸成分是亚油酸,油酸或亚麻酸等。
7.一种药物组合物,其含有权利要求1-6之一的总提取物和可药用载体。
8.根据权利要求7的组合物,其是滴丸剂。
9.根据权利要求7的组合物,其是软胶囊剂。
10.权利要求8的滴丸剂的制备方法,包括如下步骤:
a.取权利要求1-6之一的总提取物,与常规重量比例的聚乙二醇4000至聚乙二醇6000或者它们的混合物等辅料加热熔融,加热温度为60-90℃;
b.将上述物料置滴丸机,在60-90℃恒温,控制流速,滴入二甲基硅油冷凝液中;
c.取滴丸,拭去表面冷凝液,即得滴丸。
11.权利要求9的软胶囊剂的制备方法,包括如下步骤:
a.配置胶液:
按常规重量比例称取明胶、甘油、水,置于胶桶中,40-80℃水浴化胶,呈熔融态后,搅拌下加入遮光剂二氧化钛,调色剂可可棕等,混合均匀;
b.将处理好的胶液抽真空除气泡;
c.将处理好的胶液与常规重量比例的权利要求1-6的总提取物分别加入胶囊机胶桶与料斗中,压制。胶丸放至高燥室中干燥24小时,取合格胶丸即得。
12.权利要求1-6的总提取物用于制备治疗头痛、风湿痹痛、妇科痛经、月经不调等症的药物的用途。
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