CN1253072C - 虎奶菇菌种的生产方法及其液体培养基 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及虎奶菇菌种的生产方法以及液体培养基混合物。其生产方法主要包括:配制液体培养基、液体培养基消毒、选取母种菌核、母种菌核消毒、制作菌核组织和组织培养等工艺。主要特征在于:直接将菌核组织置于液体培养基中在摇床上进行培养,其积极效果在于既获得工厂化生产所需的大量菌种,又大大缩短了菌种的培养时间,从菌核组织至获取菌种仅需5天左右的时间。本发明所述的液体培养基的配料包括:黄豆粉、人参粉、葡萄糖、纤维素、VB1、氯化钙、硫酸镁、磷酸二氢钾、蛋白胨和水。
Description
技术领域:
本发明涉及虎奶菇菌种的生产方法及其液体培养基混合物。
背景技术:
虎奶菇菌核为热带食用菌,主产于非洲,在亚洲热带地区以及澳大利亚也有分布。在一些国家和地区有食用的传统,在民间也可入药:用于治疗胃痛、便秘、发烧、感冒、水肿、胸痛、神经系统疾病、天花、哮喘、及高血压、糖尿病等疾病,并能促进胎儿发育,提高早产儿成活率。随着人们生活水平的日益提高以及医药上的广泛应用,对虎奶菇菌核的需求量将越来越大,仅靠野生的虎奶菇菌核远远满足不了人们的需求。近年来,已有人工栽培虎奶菇菌核的报道。
现有技术的虎奶菇菌核的生产方法是通过菌核或子实体的组织分离获得菌种,用固定培养基培养,普遍存在菌种培养时间长、菌种栽培收成率低、生长期长、菌核体小、产量低等问题,且由于所用的组织体不同,易造成菌核的生长规模、性能各异,长期使用将导致生产性状的退化。因此,现有技术难于形成规模化生产能力。
发明内容:
本发明的目的在于克服现有技术生产虎奶菇菌种的不足之处,提供一种能规模化生产虎奶菇菌种的方法以及培养基混合物。
本发明所述的虎奶菇菌种的生产方法,主要步骤包括:
A、配制液体营养基:其配方重量比组份为:黄豆粉3-8%;人参粉0.1-2%;葡萄糖3-8%;纤维素5-10%;VB10.1-2%;氯化钙1-3%;硫酸镁1-3%;磷酸二氢钾1-3%;蛋白胨20-30%;水余量。
B、液体培养基消毒:将步骤A得到的液体营养基,装入三角瓶中,用纱布棉垫封口,包扎牛皮纸,在灭菌高压锅中蒸煮消毒1小时,冷却后移入超净工作台内紫外线灯照射30-40分钟;
C、选取母种菌核:取鲜活的虎奶菇菌核用水冲洗干净后待用;
D、母种菌核消毒:将洗净的母种菌核在超净工作台上,用常规无菌操作方法置于75%酒精浸泡8-12分钟,再用0.1%升汞溶液浸泡10-15分钟,用无菌水冲洗4-5次,并用滤纸吸干其表面水分;
E、制作菌核组织:将消毒后的虎奶菇菌核用小刀去除外皮,然后切成约1cm的方块状菌核组织,一般取20-30块;
F、组织培养:将在超净工作台制作好的菌核组织用镊子装送入三角瓶内,纱布棉垫封口,包扎牛皮纸,置于旋转摇床上,转速为1000转/分,28±2℃室内培养4-6天,当三角瓶内液体培养基布满白色菌球或菌丝体液体成粘稠状时,可获得虎奶菇液体菌种。
本发明,其积极效果在于:
1、直接将菌核组织置于液体培养基中在摇床上进行培养,既获得工厂化生产所需的大量菌种,又大大缩短了菌种的培养时间。本发明从菌核组织至获取菌种仅需5天左右的时间,而采用固体培养基等传统方法获取菌种为23-25天。
2、母种菌核消毒采用“乙醇+升汞+无菌水冲洗”方法,其培养成功率在95%以上,而采用“乙醇+次氯酸钠溶液+无菌水冲洗”方法,其培养成功率一般在70%以下。
3、本发明培养基所用原料价格低廉,随处可得,而且栽培方法简单,投入少,见效快,适合在山区推广应用,大规模工厂化栽培生产。
具体实施方式:
实施例1、用于制取虎奶菇菌种的液体培养基。
液体培养基的配方重量比组份为:黄豆粉4%;人参粉1%;葡萄糖5%;纤维素8%;VB10.5%;氯化钙2%;硫酸镁2%;磷酸二氢钾2%;蛋白胨22%;水余量。
实施例2、虎奶菇菌种制作方法。
主要步骤包括:
A、配制液体培养基:将实施例1所得液体培养基作为虎奶菇菌种的培养基。
B、液体培养基消毒:将实施例1所得的液体营养基装入5000ml三角瓶中,用纱布棉垫封口,包扎牛皮纸,在灭菌高压锅中(121℃)蒸煮消毒1小时,冷却后移入超净工作台内紫外线灯照射35分钟。
C、选取母种菌核:取实体圆润、结实、鲜活的虎奶菇菌核用水冲洗干净后待用。
D、母种菌核消毒:将洗净的母种菌核在超净工作台上,用常规无菌操作方法置于75%酒精浸泡10分钟,再用0.1%升汞溶液浸泡15分钟,用无菌水冲洗5次,并用滤纸吸干其表面水分。
E、制作菌核组织:将消毒后的虎奶菇菌核用小刀去除外皮,然后切成约1cm的方块状菌核组织,选取30块。
F、组织培养:将在超净工作台制作好的菌核组织用镊子送装入三角瓶内,纱布棉垫封口,包扎牛皮纸,置于旋转摇床上,转速为1000转/分,28±2℃室内培养5天,当三角瓶内液体培养基布满白色菌球或菌丝体液体成粘稠状时,可获得虎奶菇液体菌种。
Claims (2)
1、一种用于制取虎奶菇菌种的液体培养基,其配方重量比组份为:黄豆粉3-8%;人参粉0.1-2%;葡萄糖3-8%;纤维素5-10%;VB1 0.1-2%;氯化钙1-3%;硫酸镁1-3%;磷酸二氢钾1-3%;蛋白胨20-30%;水余量。
2、一种虎奶菇菌种的生产方法,主要步骤包括:
A、配制液体营养基,其配方重量比组份为:黄豆粉3-8%;人参粉0.1-2%;葡萄糖3-8%;纤维素5-10%;VB1 0.1-2%;氯化钙1-3%;硫酸镁1-3%;磷酸二氢钾1-3%;蛋白胨20-30%;水余量;
B、液体培养基消毒:将步骤A得到的液体营养基,装入三角瓶中,用纱布棉垫封口,包扎牛皮纸,在灭菌高压锅中蒸煮消毒1小时,冷却后移入超净工作台内紫外线灯照射30-40分钟;
C、选取母种菌核:取鲜活的虎奶菇菌核用水冲洗干净后待用;
D、母种菌核消毒:将洗净的母种菌核在超净工作台上,用常规无菌操作方法置于75%酒精浸泡8-12分钟,再用0.1%升汞溶液浸泡10-15分钟,用无菌水冲洗4-5次,并用滤纸吸干其表面水分;
E、制作菌核组织:将消毒后的虎奶菇菌核用小刀去除外皮,然后切成1cm的方块状菌核组织,20-30块;
F、组织培养:将在超净工作台制作好的菌核组织用镊子装送入三角瓶内,纱布棉垫封口,包扎牛皮纸,置于旋转摇床上,转速为1000转/分,28±2℃室内培养4-6天,当三角瓶内液体培养基布满白色菌球或菌丝体液体成粘稠状时,可获得虎奶菇液体菌种。
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