CN1230891A - 凝集素组合物及其用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及凝集素在制备用于控制粘膜细胞增殖、减轻和/或治疗因细胞－损伤剂引起的损伤以及减轻和/或治疗代谢性疾病之药物中的用途,本发明还涉及含凝集素的组合物和食物,其在医药和非医药领域的用途以及大豆废弃产物,特别是大豆乳清成分在制备上述药物和组合物中的用途。

Description

凝集素组合物及其用途
本发明涉及凝集素在制备用于控制粘膜细胞增殖、减轻和/或治疗因细胞损伤剂引起的损伤以及减轻和/或治疗代谢性疾病之药物中的用途，本发明还涉及含凝集素的组合物和食物，其在医药和非医药领域的用途以及大豆废弃物，特别是大豆乳清成分在制备上述药物和组合物中的用途。
凝集素通常是识别并粘附于特异性糖结合物结构的来源于植物，甚至微生物或动物的蛋白质或糖蛋白。口服的凝集素如菜豆(Phaseolusvulgaris)凝集素、植物凝集素(PHA)对于大鼠肠是很有效的外源生长因子，可诱导完全可逆的多胺依赖性小肠增生(Bardocz等，1992)。凝集素迅速与刷状缘结合并部分被胞转到循环中(Pusztai等，1991)。在特定的剂量下，凝集素如PHA会损伤肠壁，引起肠腔中大肠菌的过度生长(Pusztai等，1993)，提高了脂动员速率和葡萄糖的氧化作用(Grant等，1987)并显著降低了骨骼肌中蛋白质合成的分级速率(fractionalrate)(Palmer等，1987；Bardocz等，1992)。因此，通常认为凝集素如PHA是营养毒素，因为在高口服剂量下，它们可诱导严重的体脂、糖原和肌肉蛋白损失(Pusztai等，1991)并可导致死亡。
在人和其他动物中，对口服凝集素的安全无毒阈值是未知的。
粘膜细胞是组成任何粘膜(衬在许多管状结构中的湿膜)的细胞。许多是在外环境与动物内部器官之间提供保护层的细胞。粘膜细胞的例子包括皮肤的上皮细胞，消化道内层，覆盖眼睛的组织以及肺和鼻的内层。粘膜细胞的许多疾病都是已知的，包括细胞分裂加速、减速的疾病，粘膜细胞受到损伤或失去保护性外层例如粘膜的疾病。与粘膜细胞增殖失控有关的疾病包括皮肤癌，牛皮癣，肠激惹综合征，炎性肠疾病和粘膜炎。粘膜炎是一种痛苦的消耗性疾病，在该疾病中迅速生长的上皮和粘膜细胞受到损伤，外层粘膜层被除去和/或不能被迅速取代。粘膜炎可导致微生物感染，所述微生物存在于例如口腔或肠道中。这种情况被认为是癌症治疗的主要副作用。粘膜炎的发生率和严重程度可随癌症治疗轮次的增加而增加，并最终影响患者治疗的依从性和存活率。
可损伤粘膜(或其他)细胞并可造成粘膜炎的试剂包括化疗剂、放疗、化学物质(有机或无机的)、毒素、酸、碱、任何放射源和自由基。化疗和放疗，单独使用、同时使用或与外科手术结合使用是治疗癌症的主要方法。化疗可使用可直接损伤靶细胞DNA的细胞毒性试剂。如果向靶组织即肿瘤施用了足够剂量的细胞毒性试剂，DNA的错误修复可导致DNA突变、损伤和染色体畸变的积累并最终导致细胞死亡。放疗使用辐射，该辐射或者可直接损伤靶细胞DNA，或者利用离子化辐射以产生可裂解DNA链之自由基的潜能(Steel,1996)。
癌症化疗的原理是施用细胞毒性药物以抑制细胞分裂，并最终导致细胞死亡。由于癌细胞通常比正常组织生长迅速，所以预期细胞毒性药物将杀死更多的癌细胞。但是与放疗不同，以使细胞毒性药物在全身发生作用的方式施用所述药物。严重的副作用，例如对重要组织包括骨髓的毒性会限制被施用的细胞毒性药物剂量以免杀死患者。与此相似，用辐射治疗癌症不会区别癌组织与正常组织。因此，放疗的使用是通过导向辐射而对癌细胞诱导最大损伤，同时避免不可修复地损害正常组织之间的一种妥协。
已经开发了许多细胞毒性药物并对癌症的治疗进行了评估。这些药物作用的主要原理是它们在细胞分裂途径中干扰或抑制关键步骤。主要的靶标是DNA复制、DNA修复；染色体分离或胞质分裂。绝大部分细胞毒性药物干扰DNA的合成和复制。在这类药物中，5-氟尿嘧啶(5-FU)是最常用的细胞毒性药物。通过加入还原叶酸如亚叶酸钙还可调节5-FU的活性(Isacoff等，1994)。抑制DNA合成和复制的其他细胞毒性药物是已知的，所述药物导向合成DNA所用的不同脱氧核苷酸，例如阿糖胞苷。含阿糖胞苷的DNA链直接抑制DNA聚合酶的活性(Archimund&Thomas,1994)。
第二种主要的细胞毒性药物是直接诱导DNA链断裂的药物，或者抑制DNA断裂之修复的药物。环磷酰胺是一种直接裂解DNA链的药物(Sparano&Wiernik,1994)。第三种主要的药物是实际上破坏微管蛋白装配和解装配，由此直接抑制有丝分裂和细胞分裂的药物。紫杉烷类化合物如紫杉醇和docetaxel是可将微管蛋白聚合成稳定的微管束的药物。合成的长春花生物碱例如长春瑞宾是纺锤体毒素，该毒素通过抑制微管蛋白组装成微管来发挥其抗肿瘤作用(Dieras&Pouillart,1995)。
目前的放疗实践使用各种辐射源以治疗癌症。最常用的辐射源是X射线、γ射线、质子或中子源或α或β发射体。实践中，在数天内连续低剂量的放疗可最佳地区分正常组织和癌组织。但是，该技术限于使用目前仅对几种肿瘤例如甲状腺癌有效的放射性同位素。在临床中，大多数放疗技术使用高剂量辐射，所述辐射在癌组织集中成一束。通过铅屏蔽的使用或转动患者，尽可能地减少正常组织的接触，以便使正常组织接受比癌细胞低的剂量。尽管这种方法可能是有效的，但是，其使用受限于正常组织与辐射的累积性接触和许多肿瘤对高剂量辐射有抗性。
本领域熟知单一的细胞毒性药物或辐射源可能更适用于某种特定的癌症。例如顺铂被广泛地用于睾丸癌，紫杉烷类化合物更适用于乳腺癌，5-FU被广泛用于结肠癌。但是单一的药物治疗很少能够完全治愈癌症，而且存活率仍低。在多种药物方案的使用方面已经进行了一些改进(Au等，1996)。
本领域已经对许多化合物使癌症细胞对辐射和化疗作用敏感(以便不损伤正常组织)的能力进行了评估。但是，放射致敏剂如维生素K模拟剂磷钠甲萘醌(Synkavit)和甲萘醌(Menadione)以及保护剂如含巯基化合物半胱氨酸、半胱胺和Ethyol是非常令人失望的(Denekamp,1996)。
尽管化疗和放疗是用于癌症的最广泛的治疗方法，但是存活率受许多因素的限制。关键因素是细胞毒性药物或辐射不能区分正常组织和癌症组织。在大多数情况下，不可能提供足够剂量的细胞毒性药物或辐射以可靠地杀死所有癌组织，因为所述剂量对于患者也是致死性的。现有治疗方案共有的副作用包括头发脱落、骨髓抑制、恶心、呕吐和腹泻(Paulsen等，1996)。另外，在将放疗用于特别是骨盆区的情况下，还会导致胃肠功能发生改变(Yeoh等，1993)，并会对肠造成长期损伤，从而需要进行外科手术(van Halteren等，1993)。
在过去10年里，利用造血生长因子已取得了重要的突破。现在可以施用较高剂量的细胞毒性药物和辐射，然后通过施用重组生长因子例如粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子拯救组织例如骨髓和白细胞(Erkisis等，1996)。所述方法改善预后和期望达到的存活率。尽管表皮特异性生长因子例如表皮生长因子是已知的，但是肠生长调节的复杂性使得很难开发有效的肠“拯救”方法(Podolsky,1993)。由于目前没有用于肠的所述生长因子，因细胞毒性药物和辐射给胃肠道造成的损伤现在已成为剂量限制。
本发明利用低剂量凝集素的组织保护性和代谢效应以便保护和修复因放疗和/或化疗损伤的生物材料。在治疗如放疗和/或化疗前，由于凝集素组合物的显著预防作用(阳性生长因子)，所以本发明是特别有利的。
代谢性疾病包括与身体代谢有关的疾病和/或是代谢结果的疾病，具体地说是肥胖和与肥胖有关疾病如高血糖(Ⅱ型糖尿病)、心血管疾病、中风、胃肠和胃肠相关的疾病。代谢性疾病需要控制粘膜细胞的增殖，或者粘膜细胞增殖的控制也可能与代谢性疾病无关。
本领域已知高剂量凝集素对动物的代谢是有害的。例如高剂量凝集素会干扰甲状腺，引起胰腺肥大，大肠菌过度生长会导致营养和生长不良。本发明首次描述了口服低剂量凝集素的有益代谢效果。令人惊奇的是，已发现施用低剂量凝集素可减少身体的脂肪含量，因此可将其用于治疗肥胖和非医学性的减肥。
大豆在人类食物中的使用正逐渐增加，大豆蛋白通常在动物营养中提供大量的饮食蛋白。不幸的是，由于大豆含有许多抗营养物(antinutrient)，主要是凝集素和胰蛋白酶抑制剂，因此含大豆产品之食物的营养利用效率低于从化学组成所预期的效率(Gupta,1987)，特别是当长期食用(Rackis等，1986)以及与含有大部分大豆抗营养物的大豆乳清一起食用时(Grant等，1986)。通常所持的观点是如果可以降低大豆产品的抗营养作用就可在人和动物饮食中更广泛地使用大豆产品。
通过以各种热处理方法为基础的加工方法，通常可除去大部分大豆产品中的抗营养物(Liener,1994)。但是，大部分方法很昂贵并可能导致必需氨基酸的损失和有毒副产品的产生。尽管最终可能会开发出更便宜且更有效的热加工方法，但是降低大豆产品之抗营养作用的其他方法还包括饮食调配(diet manipulation)和新喂养方式的设计。提供无抗营养物主要副作用的大豆产品，特别是几乎未被利用的乳清成分可给饲料工业和动物生产者带来显著的经济效益。
本发明提供了使凝集素的有益代谢作用达到最大的食物和饮食策略。具体地说，由于降低了抗营养成分的副作用而可以利用这些大豆成分。此外，可将低剂量凝集素的有益作用用于提高低营养之大豆成分的食物转化。
因此，本发明的第一个方面是提供凝集素在制备用于控制粘膜细胞增殖之药物中的用途。控制粘膜细胞增殖包括减轻和/或治疗对粘膜细胞和/或组织的任何损伤。在本文中，“减轻”指减轻任何损伤或医学疾病至任何程度的任何效果，包括预防。在本文中，“治疗”指失调、疾病、综合征、疾病、疼痛或其两种或多种组合情况的任何缓解。
具体地说，本发明的第一个方面涉及在减轻和/或治疗粘膜炎和/或肠损伤中对粘膜细胞增殖的控制。
粘膜细胞增殖的控制在减轻和/或治疗因细胞损伤剂引起的损伤中是特别有用的。本发明所有方面的典型细胞损伤剂包括放疗、化疗或其组合。在本申请中，术语“辐射”和“放疗”具有相同的含义，它可以是可用于或不用作治疗技术的辐射源。
在放疗、化疗或其组合治疗前、过程中或之后，本发明所述第一个方面在粘膜细胞增殖的控制中是特别有效的。本发明是由于凝集素的保护和修复能力而达到目的的。
粘膜细胞是组成任何粘膜(衬在许多管状结构和腔中的湿膜)的细胞。它们中的许多在动物的外界环境和内部器官之间提供一个保护层。粘膜细胞/组织包括鼻窦、呼吸道、皮肤、胃肠道以及胆和胰系统。口腔的表面也有一层粘膜。粘膜构成上皮的表层，该上皮含有分泌粘液的腺体和下面的结缔组织层和形成粘膜内界的粘膜肌层。
就胃肠道细胞而言，凝集素用于控制粘膜细胞增殖的用途是特别有用的。所述控制可以是为了胃肠道的功能和/或长度的提高或为了控制胃肠细胞表达的表面糖蛋白的性质和/或密度。在控制粘膜细胞增殖方面的其他用途包括减轻和/或治疗肠疾病如炎性肠疾病和肠激惹综合征以及减轻和/或治疗肠损伤，及在放疗、化疗或其两种或多种组合治疗前、过程中或之后修复和替换粘膜细胞。
这些控制特征的应用包括：
(a)肠细胞增殖导致功能肠面积和长度增加，这对于例如因外科手术或事故引起的肠功能损伤是一种有用的治疗，和/或
(b)控制肠细胞更新率，这样可以控制被表达的表面糖结合物的性质和密度，因为这些会随着细胞老化而逐渐变得更复杂。由于糖结合物影响特定的肠特性，例如细菌附着的倾向，因此，可将凝集素施用看作对这些特性的治疗或预防性控制。
具体地说，可将细胞增殖的控制用于使小肠营养能力提高和/或控制肠细胞的糖结合物表达。所述作用不必是对疾病，除了令人满意的医学方面外，可以仅仅是在美容性或功能性方面。
根据本发明的第二方面，提供了凝集素在制备用于减轻和/或治疗因细胞损伤剂引起的损伤的药物中的用途。细胞损伤剂包括放疗、化疗或其组合应用。具体地说损伤包括肠损伤和/或粘膜炎。
对于本发明的第一和第二方面，放疗源包括，但不限于X-射线、γ射线、质子或中子源，α或β放射体或其两种或多种组合。可将放疗与使用细胞毒性剂如氨甲蝶呤、顺铂和/或5-氟尿嘧啶的化疗联用，并且也可在外科手术过程中使用。
对于本发明的第一和第二方面，化疗剂包括任何细胞毒性剂，包括但不限于如5-氟尿嘧啶、顺铂、阿霉素、氨甲蝶呤、紫杉醇或其两种或多种试剂的组合。如上所述，可将一种或多种化疗剂与放疗联用和/或在外科手术过程中使用。
本发明特别用于减轻和/或治疗对哺乳动物组织，特别是人组织的损伤。本发明对于人组织是特别重要的，因为在治疗癌症的过程中需要相当多的放疗和/或化疗。但是本发明也适用于兽医工业，包括饲养的动物和宠物。
本发明的第一个方面涉及所有粘膜细胞和/或组织，包括整个体内的粘膜细胞和组织以及整个体外粘膜细胞和组织，包括分离的粘膜细胞和组织。本发明的第二个方面涉及所有生物学材料，包括整个身体和其部分，包括分离的器官和分离的组织，包括粘膜细胞和组织。本发明还涉及故意的或非故意的接触过任何细胞损伤剂的材料。
本发明特别用于对细胞损伤剂如放疗和/或化疗剂特别敏感的生物学材料。本发明第一个方面的生物学材料包括肠、口腔、鼻、食管、胃、肺、小肠、大肠(包括结肠和直肠)、上皮组织(如覆盖眼睛的)的粘膜层以及任何其他粘膜细胞和/或组织。
本发明第二方面的所述生物学材料包括上述所有粘膜细胞和组织，以及骨髓、脾，所有造血细胞，血液组织，胸腺、生发组织、眼组织和睾丸/前列腺组织。肠对细胞损伤剂的敏感性与其代谢状态有关。在施用细胞损伤剂之前和施用过程中，凝集素的生长因子作用、特别是对肠(特别是小肠)的作用被认为是对预防和/治疗效果非常重要的。
可将凝集素分成“毒性”或“无毒的”。毒性凝集素包括或可将其归类为2型核糖体失活蛋白(RIP)。它们是含有毒性(A)亚单位和凝集素亚单位(B)的杂合分子，所述毒性亚单位在进入细胞后不可逆地抑制蛋白质合成，所述凝集素亚单位促进RIP进入到细胞中。2型RIP如蓖麻毒蛋白是已知的对人最有毒性的物质，潜在LD50值低至0.1g/kg体重。在长期施用后，它们可以不可逆地损伤哺乳动物，最终导致哺乳动物死亡。
凝集素与细胞的结合有很大的差异。一些结合弱，而其他的一些结合很强。强结合是指当将10mg凝集素口服给予大鼠时，与肠的结合超过75％(最高达100％)。菜豆凝集素是一种强结合的凝集素。在某些情况下，强结合可能产生毒性，因此，将这些凝集素称为是有毒的。
本发明凝集素包括在天然组合物中的或从中纯化(至任何程度)的凝集素，化学合成的凝集素、修饰的凝集素或其衍生物(天然或合成的)。凝集素衍生物包括多-亚单位凝集素中的一个或多个亚单位。用于生产凝集素的方法是本领域已知的，所述生产方法包括从天然来源中纯化凝集素(Pusztai and Palmer,1977；Carvalho,1993)以及如在美国专利4889842中描述的用生物技术生产凝集素。
根据本发明的第一个方面，可以使用任何凝集素。许多凝集素是已知的。一种广泛使用的用于表征凝集素的方法是其糖结合特性。糖结合特异性基团包括：N-乙酰-D-半乳糖胺，N-乙酰-D-甘露糖，N-乙酰-L-岩藻糖，β-乳糖，半乳糖基-β-(1-3)-N-乙酰-D-半乳糖胺，D-葡萄糖，N-乙酰-葡糖胺，N-乙酰-神经氨酸。某些凝集素含有一个以上的糖结合特异性基团。对于本发明特别有用的是来自菜豆、大豆、刀豆、小麦胚芽、莲花种子、洋葱、兵豆、番茄、马铃薯以及其两种或多种组合的凝集素。
由于凝集素是蛋白质，根据许多参数例如热、酸、碱等，明显地可将其进行去稳定/变性。一些凝集素比其他凝集素对这些影响有更强的抗性。由于凝集素在本发明(整个)中的用途需要其蛋白质特性，因此在凝集素使用前或使用过程中(例如在胃的强酸条件和下段小肠的温和碱性条件下)，所述凝集素不会被完全破坏或变性是很重要的。因此，首先需就用于本发明的凝集素在加工和/或施用过程中如何受到影响来表征所述凝集素。所述表征是标准技术，而且本领域技术人员可以很容易完成。如果本发明任何方面所需的凝集素已经经任何方法被变性或去稳定，则所述凝集素的浓度就会发生变化。
本文已提供的凝集素的浓度是以其通过变性或去稳定不会有效降低其活性的天然特性为基础。因此，所提供的凝集素的浓度不是绝对的，但反映了凝集素的活性。因此，其凝集素活性降低了一半但浓度加倍了的组合物与凝集素的量降低了一半但凝集素活性未改变的组合物是相同的。此外，例如通过在重组生产中的修饰和/或通过生产活性已提高的截短突变体，可以提高任何凝集素的活性。有关凝集素浓度对活性的考虑也同样适用于活性提高了的凝集素。所有修饰的凝集素均被本发明所覆盖，包括活性提高或降低的凝集素，还包括例如具有全部或修饰活性的截短凝集素单体。
本发明的凝集素是组织保护剂。
本发明的第一个方面和第二方面涉及药物的制备，由临床医生最终确定并考虑下列因素的具体剂量方案，例如所使用的凝集素、动物类型、年龄、体重、症状严重程度和/或正在或将施用的治疗方法的严重性等因素，组合物的给药方法，不利反应和/或其它禁忌证。具体确定的剂量范围可根据完全被监测之患者的疾病发展和恢复情况，通过标准设计的临床试验来确定。所述试验可使用逐步升高的剂量方案，所述方案以动物中最大耐受剂量的低百分数作为人中的开始剂量。可以从在本文试验部分给出的结果并通过已经外推至人的下列范围得出有关剂量范围的初步指导。
适宜的上限可以是高达约0.3g/kg体重的凝集素浓度。0.3g/kg体重/天的浓度会使患者发生胃肠道不适，但对于所述患者从疾病例如癌症中存活下来的机会提高来说，这些症状是可接受的。适宜的低限可以是0.0001mg(0.1μg)/kg体重/天左右的凝集素。优选的中间剂量浓度包括存在高达约0.2g,0.15g和0.05g/kg体重/天的凝集素，此后，存在约1mg,0.5mg,0.1mg,0.01mg和0.005mg/kg体重/天的凝集素。可将这些给定浓度中的任何浓度用作上限和/或下限，从而提供各种有用的浓度范围。就用于给药的凝集素浓度来说，当不用于治疗或预防作用时，可将凝集素的剂量稍微提高。
在每天的一次或多次“摄取”(“摄取”包括任何形式的给药)中，可将本发明所有方面的药物用于提供所需的凝集素浓度。本发明的某些方面适于一次摄入高浓度凝集素，而其他方面适于在同一时期内以均匀的或不均匀的间隔多次摄入，但是每次摄入较低的凝集素浓度或等分剂量。
可将用于制备本发明任何药物的凝集素与适宜的药物载体和/或赋形剂结合。所述载体和赋形剂是本领域熟知的(例如药物赋形剂手册(Handbook of Pharmaceutical Excipients)(1994)第二版，A.Wade/P.J.Weller编，The Pharmaceutical Press,American PharmaceuticalAssociation)。根据本发明，特别有用的是使用结肠药物传递系统或胶囊配制的组合物和/或药物。
本发明的第一和第二方面还包括凝集素与细胞保护剂联用的用途。所述细胞保护剂优选是放射致敏剂，化学保护剂(包括自由基清除剂)，生长因子或其两种或多种物质的组合。在上述细胞保护剂目录中，下列物质是优选的：放射致敏剂-维生素K模拟剂例如磷钠甲萘醌或甲萘醌，texaphyrin钆配合物或碘苄胍(([[3-碘-13311)苯基]甲基]胍)；化学保护剂-Sulcraphate，半胱氨酸，巯基乙胺，Ethyol,balazipone或多司马酯；自由基清除剂-WR3689(磷酸二氢2-[[3-甲基氨基)丙基]氨基]乙二醇酯，AD20(2-[[2-甲氧基苯基)乙酰]氨基]-2-丙烯酸或硝基氧抗氧化剂；生长因子-粒细胞集落刺激因子(G-CSF)，粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)，促红细胞生成素(EPO)，表皮生长因子(EGF)，角质细胞生长因子(KGF)，转化生长因子(TGFα和β)，任何种类的白细胞介素包括IL-11和IL-15，胰岛素样生长因子(IGF)，神经生长因子(NGF)，血小板衍生的生长因子(PDGR)，铃蟾肽，松弛素，降钙素，初乳衍生的生长因子(CDGF)，氨氯地平或amoxanox，protegrin，盐酸匹鲁卡品，干细胞因子(STF)，血小板生成素，青灰因子(SF)，任何一种干扰素，包括干扰素α，或任何一种细胞因子。
除细胞保护剂外，所述药物可含有一种或多种其他药物化合物/试剂。具体地讲，可包括抗微生物剂。可包含所述试剂以抵抗感染，例如与粘膜炎、炎性肠疾病、肠激惹综合征等有关的二级感染。
尽管也可以将药物通过胃肠外途径给药，但优选将根据本发明任何方面制备的药物通过口或直肠给药(对于消化道的一个或多个部分方便的途径)。
本发明第三方面提供了凝集素在制备用于减轻和/或治疗代谢性疾病之药物中的用途。本发明的第三个方面还包括凝集素在制备用于减轻体重之药物中的用途。所述体重减轻不必与疾病(例如代谢性疾病)有关，而可以纯粹是美容目的的体重减轻。所述凝集素可以是本发明的任何凝集素，所述凝集素最好是来自大豆或菜豆。
代谢性疾病包括与身体代谢有关的和/或是身体代谢结果的任何疾病，具体地讲是肥胖症和与肥胖症有关的疾病例如高血糖(Ⅱ型糖尿病)，心血管疾病、中风、胃肠疾病和胃肠相关疾病。代谢性疾病可能需要控制粘膜细胞增殖，或粘膜细胞增殖的控制可能与代谢性疾病无关。
本发明第一和第二方面的所有相关特征均适用于本发明的第三方面。
凝集素的浓度越高，就可以更快地预防或治疗代谢性疾病。但是，正如本文所讨论的，各种因素都可能影响凝集素剂量的优选浓度。
根据本发明的第四个方面，提供了含有凝集素的组合物，所述组合物用于控制粘膜细胞增殖，减轻和/或治疗因细胞损伤剂引起的损伤，减轻和/或治疗代谢性疾病，或其两种或多种情况的组合。本发明该方面是应用特别是以前未知具有医用用途的凝集素。本发明第一、第二和第三的有关特征也与本发明的第四个方面有关。
根据本发明的第五方面，提供了含有凝集素和细胞保护剂的组合物。本发明的所述方面可能与本发明的第一和/或第二方面有关，因为该方面可以是根据本发明第一或第二方面制备之药物的一个实施方案。因此，上述本发明第一和第二方面的有关特征也适用于本发明的第五个方面。特别优选的组合物是其中凝集素至少被部分纯化或分离的组合物。
对于给药来说，本发明第五方面的组合物可以是一种混合制品，或为同时、分开或依次使用(或给药)的组合制品。在组合制品中，可以首先施用所述组合物的凝集素或细胞保护剂部分。
本发明的第五个方面特别适用于减少或治疗因细胞损伤剂特别是辐射和/或化疗引起的损伤。因此，可以在所述组合物中适宜地包含本发明第一和第二方面所述的可药用赋形剂和/或载体。如在本发明第一和第二方面已描述的，所述组合物对于对细胞损伤剂特别是辐射和化疗最敏感的生物学材料最有效。
本发明一至四方面的所有相关特征均适用于所述第五方面。
本发明第六方面涉及制备本发明第五方面之组合物的方法。所述方法包括将凝集素与细胞保护剂混合，任选地与一种或多种成分例如其他细胞保护剂、抗微生物剂和/或可药用赋形剂和/或载体混合。或者，对于含有同时、分开或依次给药的不同成分的组合物来说，可将单个组分与其他成分包括可药用赋形剂和/或载体分别加以制备。
本发明的第七个方面提供了根据本发明第一方面控制粘膜细胞增殖的方法，根据本发明第二方面减轻和/或治疗因细胞损伤剂引起的损伤的方法以及根据本发明第三方面减轻和/或治疗代谢性疾病(包括相关特征)的方法。一至六方面的相关特征也适用于本发明的第七个方面。该方法包括摄入的凝集素的总食物浓度高达0.3g/kg体重/天，优选0.2/kg体重/天。代谢性疾病可以是上述任何疾病。损伤凝集素可以是上述任何凝集素，优选衍生于大豆或菜豆的凝集素(PHA)。
对于本发明的所有治疗(单独)方面(即在任何治疗、接触细胞损伤剂等后仅使用凝集素)，优选的凝集素剂量低于0.2/kg体重/天。
根据本发明的第八个方面，提供了含用于2至5天或不确定(长期)期间之凝集素的食物。本发明一至七方面的相关特征也适用于第八方面。所述凝集素可以是上述本发明第一方面所述的任何凝集素，最佳为衍生于大豆或大豆乳清的凝集素。
本发明第八方面的食物优选含有总量达0.3g/kg体重/天，优选0.2g/kg体重/天的凝集素。还提供了食物补充物，所述补充物使凝集素的总食物摄入量达到0.3g/kg体重/天，优选0.2g/kg体重/天的浓度。所述凝集素可以是上述本发明第一方面所述的任何一种凝集素，或两种或多种凝集素的组合。食物凝集素优选衍生于大豆和/或菜豆(PHA)。所述食物和/或食物补充物可用于控制本发明第一方面的粘膜细胞增殖，用于本发明第二方面减轻和/或治疗因细胞损伤剂引起的损伤，用于本发明第三方面减轻和/或治疗代谢性疾病或上述两种或多种情况的组合。所述食物和/或食物补充物也可用于非医用目的的体重减轻。
所述食物和/或食物补充物适用于任何动物，包括人。
在接着供给一段时期的高质量食物时，本发明第八方面的食物是特别有用的。根据本发明，可将高质量食物定义为可提供动物正常生长所需的所有必需蛋白质、脂肪、碳水化合物、矿物质和维生素的食物。高质量食物的必需成分优选是最佳比例的。该质量食物不应含有会延缓或抑制动物生长发育的任何成分。高质量食物的优选特征是被摄入的食物可完全转化成身体重量。
在本发明第八方面的凝集素食物后，优选立即或相隔很短的时间(达2天)就继续供给所述高质量食物。所述高质量食物对于达7天的期间来说是最有用的，对于达5天的期间也是有利的。所述食物还可用于长期(一个月以上，优选一年以上)治疗代谢性疾病和美容目的的体重减轻。
当与细胞损伤剂联用时(尽管不需同时给药)，最好将饮食中供给凝集素的部分限于5天的时间，因为48-72小时通常足以完成一个完整的肠更新循环并由此可在所述循环的控制供食部分产生较高的营养吸收和利用率。最好将所述循环的高质量供食部分限于约5天的时间以便对食物转化效率产生最大的提高。
优选将包括供给凝集素时期、然后是供给高质量食物时期的饮食重复至少两次以形成周期性的饮食。可将所述饮食期重复达20次，优选达10次，最佳达6次。
所述周期性的饮食提供了由凝集素施用介导的暂时的营养摄入效率增加。因此，含凝集素和不含凝集素食物的周期性供给，可控制营养依赖性状态的提高。例如，通过适宜食物的定时供给，运动员可优化主要项目的运动能力。
在用辐射和/或化疗进行治疗前或之后，本发明第八方面的食物是特别有用的。在这种情形中，当与细胞保护剂，例如本发明第一和第二方面所述的那些联用时，所述食物甚至更有效。
本发明第九方面，提供了大豆废物的用途，所述废物包括本发明任何方面或相关方面的大豆乳清成分。所述大豆废物的使用减少了在大豆产品被用作食物前从所述大豆产品中除去凝集素的需求，并有效地利用了低值大豆废物。
现在通过大量非限制性实施例来说明本发明。所述实施例涉及附图，其中：
图1表示用含不同量的植物血球凝集素的食物饲喂10天后，大鼠的干重(实验1a,b,c)。图1a为干重对mg PHA/天，图1b为相对干重对log10(mg PHA/天)。(o，实验1a;□实验1b;Δ实验1c)。
图2表示在重复周期中用大豆白蛋白食物，然后用乳白蛋白食物饲喂大鼠的生长情况与在整个实验中用对照食物饲喂大鼠时的生长情况进行比较。还标明了大鼠转换到不同食物的时间和食物摄入情况。
图3表示施用5-FU和PHA对鲜重的影响。
图4表示施用5-FU和PHA对每日食物摄入的影响。
图5表示在接受6.75 Gy剂量的辐射后，含凝集素食物在30天后对动物存活的影响。
实施例材料和方法PHA的纯化
对于肥胖症和化疗实施例，用Pusztai&Palmer(1977)的方法，稍加改进(Carvalho,1993)，在Sepharose 4B-胎球蛋白上，通过亲和色谱纯化PHA。将菜豆用0.05M硼酸钠缓冲液(pH8.0)提取，并通过对0.033M乙酸钠缓冲液(pH5.0)透析将其分离成球蛋白和白蛋白。将E-型PHA(红细胞凝集)馏分吸附到pH7.6(0.05M Tris-HCl)的Sepharose4B-胎球蛋白上，用含0.5MNaCl的0.05M甘氨酸-HCl缓冲液，pH3.0解吸，然后透析并冻干。对于L-型(淋巴细胞凝集)PHA的纯化，在通过Sepharose 4B-胎球蛋白从白蛋白中除去少量E-型PHA后，将未吸附的馏分在含0.1MNaCl的0.005M乙酸钠-乙酸缓冲液，pH3.8中的磺基丙基阳离子交换HPLC柱(TSK SP-5PW,21.5mm×150mm；Anachem GB Ltd)上分级分离，用程序化的递增离子强度梯度(0.1-0.5M NaCl)洗脱。最后，通过在Sephadex G-100上色谱除去低分子量杂质，透析和冻干后，回收纯的L型PHA。回收率：每100g菜豆粉分别为0.32g和0.61gE型和L型PHA。
对于放疗实施例，如下分离PHA：用带有孔大小为1mm的筛的磨磨碎50克菜豆。加入500ml含0.1g抗坏血酸的0.02M乙酸并在室温下搅拌30分钟。用1M氢氧化钠将pH调到5.0并将溶液在室温再搅拌2小时。4℃将所述溶液放置过夜，然后以9000rpm离心15分钟。将0.075g CaCl2加到上清液中，用1M氢氧化钠将pH调到9.0。4℃，将上清液再放置过夜，然后将样品以3000rpm离心10分钟。在于胎球蛋白-Sepharose4B亲和柱上纯化前，将样品用Tris(pH7.6)透析。用0.05M甘氨酸缓冲液洗脱PHA峰，然后在冻干前将PHA馏分用水透析。胰岛素试验
用双抗体沉淀技术(MacRae等，1991)和大鼠胰岛素标准物(Incstar Corporation,Stillwater,Min.USA)测量免疫反应性血浆胰岛素浓度。5μCi/0.1μg的125I-标记的牛胰岛素(ref.IM38)是由Amersham International plc(Amersham Bucks)提供的，由MilesScientific(Stoke Poges,Slough)提供用豚鼠产生的抗猪胰岛素的抗血清。抗-豚鼠猪IgG血清和正常豚鼠猪血清均来自Scottish AntibodyProduction Unit(Law Hospital,Carluke,Lanarkshire)。血浆葡萄糖
用Trinder的自动分析仪方法(1967)测定血浆样品中葡萄糖的浓缩。抗体生产
按照以前描述的(Hajos等，1995)Harboe-Inglid方法(1973)，用兔生产KTI,BBI,LA抗体。抗SBA抗体从Sigma Chemical Co(英国公司)获得。竞争性间接ELISA
将间接ELISA试验用于定量确定肠样品中的SBA(Hajos等，1995)。但是，用LA涂覆ELISA平板，用兔抗-LA IgG-型抗体形成免疫复合物。将结果表示为胃内饲喂剂量的回收物质百分比。肠样品中抗营养物的电泳分离
按以前所述(Hajos等，1995)，进行SDS凝胶电泳，然后转印到硝酸纤维素膜上，并用抗营养物的抗原-特异性抗体进行免疫染色。实验食物的组成
       表1用于肥胖症和化疗实施例之食物的组成
          乳白蛋白       菜豆       KB白蛋白
           (LA)          (KB)        (KBA)玉米淀粉       373           177          372马铃薯淀粉     100           100          100葡萄糖         150           150          150玉米油         150           150          150维生素混合物    50            50           50矿物质混合物    50            50           50乳白蛋白       127            63          102菜豆粉          -            260           -菜豆白蛋白      -             -            26L-甲硫氨酸      -            2.1          0.9L-色氨酸        -           0.25         0.13硅酸           0.4           0.4          0.4
所有组分均以克/kg食物给出。有关维生素和矿物质混合物的组成参见Carvalho(1993)。
       表2用于大豆抗营养物实施例之食物的组成食物            1.对照              2.大豆白蛋白
                                   (SBALB)乳白蛋白        120                      0大豆白蛋白      0                        110玉米淀粉        380                      390马铃薯淀粉      100                      100葡萄糖          150                      150玉米油          150                      150维生素          50                       50矿物质          50                       50L-色氨酸        0                        0.3L-甲硫氨酸      0                        1.2L-苯丙氨酸      0                        1.0L-亮氨酸        0                        2.3L-异亮氨酸      0                        2.6L-缬氨酸        0                        2.6硅酸            0.4                      0.4
所有组分均以克/kg食物给出。有关维生素和矿物质混合物的组成参见Grant等(1993)。
            表3放疗实施例之食物的组成食物            10％乳白蛋白           PHA(豆蛋白)乳白蛋白        120                   90菜豆            0                     127.5玉米淀粉        379.6                 280.9马铃薯淀粉             100             100葡萄糖                 150             150玉米油                 150             150维生素                 50              50矿物质                 50              50L-色氨酸               0               0.14L-甲硫氨酸             0               1.07硅酸                   0.40            0.40
所有食物组分均g/kg食物给出。菜豆的PHA含量为2.6％。因此，限制每日食物摄入为6克时，PHA/小鼠的输入为20mg。维生素混合物的组成：硫胺素1000毫克；维生素B6 1000毫克；核黄素100毫克；对氨基苯甲酸，1000毫克；烟酸3000毫克；泛酸钙2000毫克；叶酸500毫克；生物素550毫克；肌醇40,000毫克；α生育酚25克；乙酸视黄酯，1150毫克；麦角钙化醇(D3),1500毫克；维生素B12，2.5毫克；亚硫酸氢钠甲萘醌，500毫克；氯化胆硷,100g；玉米淀粉，5000克。施用5-FU
将300毫克5-氟尿嘧啶在14毫升蒸馏水中搅拌。缓慢加入1M氢氧化钠直到5-FU溶解。将溶液配成20毫升的终体积。所述溶液的最终pH为8.3。通过腹膜内注射，将150mg/kg体重的剂量施用给动物。注射后，立即给大鼠提供15克的对照食物，在实验的其余时间内将食物不受限制地供给动物。辐射源
钴60Co枪；共6.75Gy，完全的身体接触；剂量率：0.3Gy/分。实施例1
对相同的设计，完成三组不同的试验(1a,b,c)。将在19天断奶的大鼠以贮备食物保持11天，然后用LA-食物饲喂3天(表1)达到82-84克的起始体重。然后，根据体重，将大鼠选择性地分成每5只大鼠一组，在每组中，将大鼠随机分配进行处理。每天早晨，将每组中的大鼠饲喂6克对照食物、LA-食物或包含不同水平PHA的LA-食物，以便其每天的PHA摄入在0.65-42mg/大鼠(0.007和0.45g/kg体重)之间。10天后，早晨给大鼠饲喂2克相应的食物，并准确地在2小时后将其杀死。将腓肠肌切出并漂洗，将尸体和肌肉冻干并称重。在试验1c中，将尸体磨成粉末并用氯仿-甲醇(2∶1;v/v)提取以进行脂确定。
在试验1a,b,c中，对照组的平均体重非常接近，在23.2-24g之间。用含0-42mg/大鼠/天(0-0.45g/kg体重)PHA的食物饲喂大鼠，以二相性方式减轻了其体重(图1a,b；表4,5)。甚至在低水平PHA，体重也有很小的减轻(例如4％，以3.5mg/大鼠/天；0.04g/kg体重)，此后，凝集素剂量相对大量的增加(至约0.32g/kg)仅使体重产生了进一步的中度减轻。因此，在低于10毫克PHA/天(0.12g/kg体重)的剂量，平均所有的试验，与对照相比，平均体重减轻1.14(标准误差0.25)g(对照体重的4.9％)。在每日10-27毫克(0.12至0.32g/kg体重)的PHA剂量，有0.64(标准误差0.21)g(对照体重的2.7％)的进一步减轻。但是，在较高的剂量(0.20-0.45g/kg体重)，所述减轻变得更明显。从三次独立的饲喂试验(实验1a,b,c)求出相对干体重(作为零剂量对照的比例)RBDW与PHA剂量(以mg/天表示)之间的关系，当PHA剂量低于27毫克/天时，所述关系为：RBDW=0.918(标准误差0.008)-0.0334(标准误差0.0062)×log10(剂量PHA/27)高于该PHA剂量时，方程为：RBDW=0.918(标准误差0.008)-0.5138(标准误差0.0876)×log10(剂量PHA/27)
腓肠(骨骼)肌干重的变化与不断增加的凝集素输入有相似的趋势(表4,5)。与对照大鼠相比，肌肉重量损失的比例是体重当量损失的1.5-2.0倍，但是，在每日的剂量低于10毫克PHA(0.12g/kg体重)时，身体与肌肉重量比例损失之间的差异不显著(p＞0.05)。
与身体和肌肉重量的减轻相似，大鼠身体脂含量也随食物中PHA剂量的增加而减少(表5；试验1c)。但是，从比例上讲，脂损失超过了身体或骨骼肌的损失，尽管对于所有剂量，所述损失大致保持稳定。表4用含不同水平PHA的食物饲喂10天后，大鼠的体重和腓肠肌重量PHA剂量                干体重(BDW)            腓肠肌干重mg/大鼠/天             g(与对照相比的损失％)  g(与对照相比的损失％)试验1a0                      24.0      -            0.184     -2.6                    23.5      2.2          0.183     0.75.2                    21.9      8.7          0.166     9.710.5                   22.0      8.5          0.155     15.521.0                   22.4      7.0          0.153     16.542.0                   20.4      15.2         0.129     29.8SED                    0.61                   0.0074试验1b0                      23.2      -            0.178     -0.6                    22.7      2.3          0.174     2.11.3                    21.8      6.0          0.161     9.415.0                   21.2      8.4          0.151     15.330.0                   20.9      10.0         0.143     19.9SED                    0.35                   0.0039每组用5只大鼠测定所有剂量。表5用含不同水平PHA的食物饲喂10天的大鼠的身体组成(试验1c)PHA剂量mg/大鼠/天         0       3.5      7      14      21     30     42    SED干体重(g)                 23.2    22.2     22     22.4    21     20.6   18.4  0.47(与对照相比的损失％)      -       4.3      5.2    3.4     9.5    11.2   20.7腓肠肌干重(克)            0.196   0.188    0.184  0.185   0.167  0.154  0.134 0.0061(与对照相比的损失％)      -       4.1      6.1    5.6     14.8   21.4   31.6脂重量(克)                4.18    3.9      3.86   3.56    3.39   2.82   2.25  0.17(与对照相比的损失％)      -       6.7      7.7    14.8    18.9   32.5   46.1总肌肉干重※(克)         9.27    8.89     8.7    8.75    7.9    7.28   6.39其他干重※※(克)          9.75    10.39    9.46   10.14   9.69   10.46  9.75腓肠肌损失％与脂损失％    -       0.61     0.79   0.38    0.79   0.66   0.69的比率表5的脚注。所有的组每组均有5只大鼠。※TMDW是以假设(ⅰ)腓肠肌干重/TMDW对于所有处理均是相同的和(ⅱ)对于对照组，TMDW/BDW=0.4为基础而评估的。※※OW是从总重量中减去LW和TMSW的和而计算的。
因为大鼠仅仅用含高水平PHA(0.8-1.0g/kg体重)菜豆蛋白食物饲喂会在数天内死亡，因此，普遍认为PHA是营养毒素。但是由于PHA对无细菌大鼠无害，其对带有常规微生物群的大鼠的毒性作用可能是大量大肠杆菌在小肠腔中过度生长的结果，这在低于0.2g/kg时是可忽略不计的，但随PHA水平在食物中的增加而明显提高并与PHA水平在食物中的增加成正比(Pusztai等，1993)。实施例1表明在没有细菌过度生长的所述低浓度(低于0.2g/kg)下，在含常规微生物群的大鼠中，PHA的作用很小，因为在与凝集素接触10天后，大鼠体重的减轻极小。此外，与在高剂量(0.45g/kg和0.45g/kg以上)观察到的肌肉萎缩相反，在低于0.10g/kg体重的PHA剂量下，骨骼肌重量的减轻很少并与最终体重的损失成正比(表4,5)。但是，相对于对照，脂的比率损失大于肌肉的比率损失，尽管它们之间的比率大致保持稳定(表4,5)。因此，凝集素的第一作用是刺激身体脂的分解代谢，因此，低剂量的凝集素可适用于治疗代谢性疾病如肥胖症。实施例2
在实施例2-5中，检测大鼠对PHA的胰岛素反应。在实施例2中，给大鼠饲喂含42mg PHA/天的食物，然后，分别在9和10天，测量血液胰岛素水平。将在19天断奶的逐个单独安置的雄性Hooded Listerspf(无特异性病原体)大鼠不受限制地用储备食物(Special Diet Services,Maner,Cambridgeshire)喂养约14天，然后用对照食物乳白蛋白食物(LA；表1)限制喂养(8g/大鼠/天)5天。每天喂养大鼠三次；09.00am 2.5g；13.00pm 1.0g和18.00pm 4.5g。在第五天，在9.00-9.30之间给大鼠1.5g LA食物，2小时后，从尾静脉收集试验前血样。用肝素化试管(含26USP单位/试管的25μl肝素溶液)收集血液并在+1℃，用台式离心机离心15分钟。使用塑料颗粒以帮助将血浆与红细胞分开；将其分成100μl等份，并于-20℃贮存直到检测。然后将大鼠随机分成每组13只动物组成的两个组并单独安置。将组1仅用含菜豆的食物(KB-食物；表1)喂养10天(8g食物/大鼠/天；分成3餐，09.00am 2.5g；13.00pm 1g和18.00pm 4.5g)，而将对照组在相同的条件下用LA食物喂养。在第9天，在早晨喂养1.5g KB食物后整2小时收集血样，并在第10天(最后一次)重复该操作。然后在乙醚麻醉下杀死大鼠，切开腹部，从心脏收集其余血液。取出胃肠道和胰腺，用冰冷水迅速漂洗后，将其在液氮中冷冻。将对照大鼠用相同的方式处理，不同之处是在取血样前，给大鼠饲喂1.5g LA食物。将血浆冷冻直到用于检测胰岛素。
将胰腺样品(约25-50毫克干重)用10毫升酸化乙醇(乙醇∶水∶浓硫酸=96∶18∶2.5；v/v/v)在冷房间中过夜匀浆，然后在冷的条件下，以1500g离心10分钟，由此从胰腺(每组6只随机选择的大鼠)中提取胰岛素。用胰岛素检测缓冲液将清澈的上清液稀释至约1∶200(v/v)，然后将其放在胰岛素放射免疫检测器中。
用含42mg PHA/大鼠/天(0.45g/kg体重)的KB喂养了10天的大鼠，其血浆胰岛素浓度从试验前的2.97(sd0.84)ng/ml显著地降到该试验第9天的0.36(sd0.05)ng/ml(表6)。在接触PHA的过程中，这种下降一直保持着，因为在第10天取的血样也相似地降低，为0.23(sd0.06)ng胰岛素/ml。相反，在对照组中，血浆胰岛素的水平一直高，在喂养的第9和第10天，分别为3.31(sd0.30)和1.55(sd0.21)ng/ml。表6用含菜豆或乳白蛋白(对照)的食物喂养了10天的大鼠之胰腺的重
                  量和胰岛素含量
       胰腺干重               胰岛素
   (mg)   (mg/100g体重)     μg/胰腺 μg/g蛋白质
KB  162±20※    982±122※   22.38±7.63※   182±80※
LA  138±16     05±63   40.60±12.71   354±152
KB=菜豆食物LA=乳白蛋白食物
数值是每组6只动物的平均值±SD。※与乳白蛋白喂养的对照动物有显著差异(p＞0.01)。
与相应喂养的对照动物相比，以最高PHA剂量，用KB食物喂养了10天的大鼠胰腺的绝对和相对于重均有显著增加(表6)。相反，用μg/胰腺或μg/g蛋白质表示的胰腺胰岛素含量显著降低。尽管胰岛素水平有高显著性的降低，但是，用KB喂养的动物的血浆葡萄糖浓度没有显著改变，对于处理组和对照组大鼠，总平均值为1.7(sd0.1)mg葡萄糖/ml。
以前认为的高剂量PHA对身体脂、碳水化合物和蛋白质代谢的强分解代谢作用与其降低血浆胰岛素水平之间的关系现已得到证实(Pusztai,1991)。事实上，不仅在给大鼠口服PHA10天的过程中血液循环中的胰岛素水平下降，而且在这些动物中，胰腺的胰岛素含量也显著降低。实施例3
使大鼠在19天断奶，将其分成8-10只大鼠的组并用储备食物饲喂12天。然后将其随机分成两组(每组13只大鼠)，在实验的其余时间内单独安置，并再用储备食物喂养8天。在禁食过夜后，在早晨供给大鼠2克储备食物，2小时后收集血样(试验前样品)。此后，将大鼠用1毫升KB提取物(50毫克；5-7毫克PHA)胃内饲喂，同时给对照施用0.01M磷酸缓冲的盐水(0.9％NaCl；w/v；PBS)。在培养15、60和120分钟后，从每只动物取血样。单剂量的可溶性KB蛋白质样品使血浆胰岛素逐渐下降。从试验前的1.78(sd0.22)ng胰岛素/ml血浆降至120分钟后的1.05(sd0.22)ng/ml，即初值的大约59％(表7)。在对照大鼠中，在所有时间点，胰岛素水平在试验误差内大致保持恒定[1.76(sd0.42)ng/ml]。表7与菜豆蛋白质或纯化的E型或L型凝集素急性胃内接触后，大鼠
         中的相对胰岛素水平(表示为对照的％)
   时间      对照   菜豆蛋白质       E型       L型
    15     109(36)     82(34)     76(27)※     98(32)
    60     97(36)     65(21)※     58(23)※     86(34)
   120     89(28)     59(15)※     80(39)     81(32)
所述结果是平均值±SD,※表示平均值有显著差异100(p＜0.05)。实施例4
用与实施例3相同的方法完成实施例4，不同之处是用5毫克E型或L型凝集素的1毫升溶液管饲试验动物。将这些凝集素样品中的一部分用125I标记(总量为2.5-3百万cpm)。对照大鼠接受PBS。按前述在0、15、60和120分钟时取血样。为了测量传递至十二指肠的实际PHA量，在管饲1或2小时后杀死的一些大鼠中，测量胃和小肠洗液的放射性。
在用纯E型PHA培养的大鼠中，与用KB蛋白质管饲的动物中发现的相似(表7)，在前60分钟，试验前的血浆胰岛素水平也下降到1.03(sd0.22)ng/ml。但是，在接下来的60分钟内有轻微的回升，这使得在120分钟的胰岛素水平与试验前的值没有显著差异(p＞0.05)。单剂量的L型PHA也会使血浆胰岛素逐渐降低，但在120分钟试验过程中的任何时间点，所述变化均不显著(在120分钟为1.39 sd0.35ng/ml)。凝集素灌胃大鼠的胃排空率减慢，对于所述两种PHA来说，没有显著差异(p＞0.05)。用E型，120分钟后，初剂量的约52％到达了小肠，而用L型PHA，所述比率稍微高些，约63％。在与PHA和/或KB白蛋白急性接触后，血浆葡萄糖水平有轻微的下降，从1.6(sd0.2)下降至1.4(sd0.2)ng/ml，但所述下降不显著(p＞0.05)。
正如用含菜豆蛋白质的食物所证明的，含纯E或L型PHA的食物能够降低血清胰岛素。因此，降低血清胰岛素的作用是由于PHA的直接作用，而不是由于豆蛋白质的营养质量差。实施例5
将16只大鼠在19天断奶并单独安置，在试验过程中，用储备食物喂养15天，然后用LA食物(8克食物/大鼠/天)喂养5天。将12只随机选出的大鼠再用含菜豆白蛋白的食物(KBA-食物；表1)喂养3天，使每日的摄入量为约30毫克PHA/大鼠，而4只对照大鼠继续用LA-食物喂养。在第3天的晚上，不用晚餐，用含25毫克PHA的100毫克KBA样品的1毫升溶液胃内管饲饲喂KBA-食物的大鼠，而给对照大鼠饲喂其LA食物的晚餐部分。此后，不再喂养所述动物，直到第二天早晨，给所有动物饲喂2克LA-食物以提高其血浆胰岛素水平。整2小时后，取大鼠血样(试验前样品)，将用KBA预喂养的动物随机选出，分成4组，用20毫克KBA或5毫克E型PHA或5毫克L型PHA凝集素的1毫升溶液管饲所述大鼠，其中所述凝集素中的一部分是125I标记的。将4只对照大鼠用KBA管饲(40毫克；4-6毫克PHA)作为对照。在120分钟，取大鼠血样，将其杀死，取出胰腺并冷冻用于胰岛素检测。
用含KB白蛋白的食物或对照食物预饲喂的大鼠用单剂量纯化PHA同工凝集素胃内管饲或用插管施用PHA3天都显著降低了循环中的血浆胰岛素浓度。对于E型和L型凝集素来说，试验前[0.59(sd0.05)ng.ml]和120分钟值[(0.15(sd 0.09)ng/ml]之间的胰岛素水平差异是显著的(p＞0.05)。预饲喂也可以加速胃内所施用的E型凝集素的胃排空速率，在前60分钟内，80％的剂量到达十二指肠。相反，L型凝集素到达十二指肠仍然很慢，而且在前60后，初始量约50％的PHA仍留在胃中。尽管在用KBA食物(低)预饲喂的大鼠和用对照食物(中高)保持的大鼠之间的绝对胰岛素浓度方面有差异，但用KB白蛋白管饲后，在这两组大鼠中，血浆胰岛素降低比例相似。在用KBA食物预饲喂3天后，胰腺胰岛素含量有一点降低，但不显著，从对照的58.3(sd10.8)降到42.5(sd8.3)(g胰岛素/胰腺)。但是，试验前血浆葡萄糖水平没有显著变化，为约1.6(sd0.2)mg/ml，尽管该值在试验过程中稍有下降。与PHA接触3天后，身体和肌肉重量没有显著变化。实施例6在大鼠与高凝集素含量的大豆乳清短时间接触后，通过研究食物转换效率的提高而用于克服大豆抗营养作用的饮食策略
将雄性Hooded-Lister大鼠在19天断奶，在7天内使其自由摄取储备食物(Labsure,Manea,U.K.)，此后将大鼠用LA对照食物(100g乳清蛋白/kg；表2)不限量地供给3天，然后饲喂6g相同食物/大鼠/天，喂养5天。在所有时间，水都是可自由得到的。然后将大鼠分成2组，每组5只。试验组的食物含有100g/kg基于SBALB的蛋白质(表2)。在整个试验中，给对照组大鼠饲喂LA食物，并将LA食物量限于试验大鼠的志愿摄入量。试验设计如下(图2)，开始给大豆组饲喂大鼠食物7天，换成LA食物饲喂8天，然后分别用大豆食物饲喂7天和用LA食物饲喂7天。接着，用大豆食物饲喂6天后，用LA食物饲喂20天，最后使大鼠摄取大豆食物5天。在第二天早晨即联合饲喂试验第61天，给所有大鼠饲喂2克LA食物，此后，给大豆组胃内插管饲喂溶解于2毫升盐水中的280毫克SBALB，而对照只接受盐水。整90分钟后，用过量氟烷杀死大鼠并彻底解剖。将胃和小肠取出，并将后者切成10厘米长的段。将每个组织的腔用2毫升冰冷蒸馏水清洗，冻干，然后用蒸馏水重溶(1mg干物质/100μl)并用于ELISA。将2厘米清洗过的肠段(来自幽门第5-7厘米)用于组织检查。将所有组织冻干并称重。将大鼠躯体也冻干并用于确定蛋白质和脂含量。将胃和小肠段用0.1MD-半乳糖溶液(5ml/干样品)匀浆(3次)并将这些提取物用于ELISA。在整个试验中，每天收集粪便并用于氮的测定。
在对照试验中，重复第一循环的转换试验，但这次，除SBALB组外，第二组试验大鼠首先用含LD-SBALB代替SBALB的食物饲喂7天，然后用LA食物饲喂8天，同时整个15天的试验中，给对照大鼠饲喂LA食物。在该循环的两个不同部分中将两组的重量增长、消化性和食物转换效率与对照组的值进行比较。
ELISA表明，在饲喂试验中所用的制品含38.7g SBA/kg。LD-SBALB含不到4g SBA/kg。在每个大豆饲喂期末，包括最后一个，用大豆和LA食物轮流饲喂之大鼠的重量显著低于相应对照大鼠的重量(表8&9)。但是，在大豆饲喂后的LA食物期，试验组的大鼠的生长总是快于完全用LA食物保持的对照大鼠(图2；表9)。此外，在LA期，试验组的食物转化效率总是显著高于对照组的效率(表9)。表8大鼠体重(BW)和组成食物                        对照              试验(SBALB)初始BW(g)                  88.8±3.5a        86.5±2.1a最终BW(g)                  283.5±7.5a       263.6±7.2b干重(g)                    111.5±3.0a       104.6±3.2b脂(g)                      54.1±4.5a        51.8±5.5a蛋白质(g)                  45.7±1.5a        44.2±2.1a脂(g/kg干BW)               485.2±33.3a      493.8±36a蛋白质(g/kg干BW)           410.7±19.9a      402.1±25.5a结果以每组5只大鼠的平均值±SD给出。水平栏中带有不同上标的数值有显著性差异(p≤0.05)。表9试验和对照期内，大鼠的重量变化和食物转换效率处理                   初始体重(g)       最终体重      食物转化(g/g摄入)试验期大豆或LA食物转换1 1-7天对照                   88.8±3.5a       92.2±1.0a   0.08±0.02a试验                   86.6±2.1a       81.7±3.2b   负值b转换2 16-22天对照                   133±3.0a        137±2.8a    0.06±0.04a试验                   129±3.0a        120±3.9b    负值b转换3 30-35天对照                   168.5±3.7a      174±4.0a    0.11±0.08a试验                   163.5±3.7a      153±5b      负值b转换4 56-61天对照                   282.5±6a        283.5±6a    0.01±0.08a试验                   281.6±5.1a      263.6±7.2b  负值b对照期(LA食物)8-15天对照                   92.2±1a         133±3a      0.43±0.03a试验                   81.7±3.2b       129±3a      0.49±0.03b23-29天对照                   137±2.8a        168.5±3.7a  0.38±0.04a试验                   120±3.9b        163.5±3.7a  0.52±0.04b36-55天对照                   174±4a          282.5±7.5a  0.36±0.02a试验                   153±5b          281.6±5.1a  0.43±0.02b对于各期间，水平栏中带有不同上标的数值有显著性差异(p≤0.05)。
在大豆饲喂期，试验组粪便的重量和氮含量显著高于对照大鼠。但是，在LA期，试验组和对照组大鼠之间的这些粪便值没有显著差异。此外，两组的脂和蛋白质含量以及其在大鼠身体中的浓度都没有显著差异(表8)。
在试验期用LD-SBALB饲喂的大鼠比用SBALB饲喂的大鼠在重量上增加更多，而且食物转化效率更高，但其行为表现仍不如用LA食物饲喂的大鼠(表10)。但是，在对照期，从LD-SBALB转用LA食物饲喂的大鼠与在循环周期的LA食物喂养部分用SBALB喂养的大鼠相比，食物的转化效率没有明显提高(表10)。表10凝集素消耗对增重和食物转化的影响处理                  初重(g)       最终重量(g)      食物转化(g/g摄入)试验期，大豆或LA食物对照                  80.8±1.5a   86.8±2.0a       0.14±0.03aSBALB                 80.6±1.1a   78.7±0.7b       负值bLD-SBALB              80.1±1.1a   83±1.1c         0.07±0.03c对照期(LA食物)对照                  86.8±2a     126.8±2.5a      0.42±0.03aSBALB                 78.7±0.7b   126.7±2.7a      0.50±0.03bLD-SBALB              83.0±1.1c   124.2±2.6a      0.43±0.03a对于各期间，水平栏中带有不同上标的数值有显著性差异(p≤0.05)。
对体内器官的影响。用大豆和LA食物交替喂养大鼠61天，对胃、小肠和大肠、脾、肾、胸腺、肺、心和腓肠肌肌肉的重量没有影响。但是，与对照相比，试验组的胰腺重量显著高，而肝的重量较低。
可以得出结论，用含大豆或乳白蛋白的食物于短周期中交替饲喂大鼠的食物转换表明，可以利用SBA或其他凝集素诱导的增生以在饲喂高质量食物时，提高高质量营养物质的吸收和利用。在这种新方法中加工大豆或其他含凝集素食物是不必要的，而且还可以利用含大量凝集素的大豆废产物或其他含凝集素食物(具体包括在除去用于许多工业用途的大豆球蛋白后剩余的乳清成分)。实施例7
研究了口服消化的PHA保护大鼠耐受高剂量化疗的能力，特别是其对肠的组织保护作用。
将每组由5只大鼠组成的4个组以精确的食物方案保持7天(表11)。表11化疗食物方案处理                食物方案1                   整个试验中均用LA食物，不用5-FU2                   LA3天，注射5-FU,LA4天3                   PHA3天，注射5-FU,LA4天4                   PHA3天，注射5-FU,PHA3天，LA1天关键词LA=乳白蛋白PHA=菜豆凝集素5-FU=5-氟尿嘧啶
给预施用PHA的大鼠(约100克)提供10克含10％乳白蛋白的对照食物(表1)。通过管饲法给予每只动物在0.9％盐水中的20毫克PHA。在1000&1700小时，给大鼠提供两次对照食物。将所给所食物量严格限于PHA预施用动物所吃的食物量。如果对动物立即后施用PHA，在注射5-FU两小时后，通过管饲法施用凝集素。给未预施用或后施用PHA的动物通过管饲法提供1毫升0.9％盐水。3天后，给3组中的动物施用150mg/kg体重的5-FU。每天记录每只动物的体重，然后计算平均体重。
图3(另参见下文图3数据)说明在施用5-FU后，食物对动物体重的影响。在整个试验中，未处理对照组中的动物以稳定的速度生长(数据未给出)。在开始失重前，接受5-FU食物后，用乳白蛋白保持的动物继续生长2天。由于该组与用PHA预施用的组(其摄入因PHA在食物中的存在而减少)配对饲喂，因此，将食物再次不限重地供应时，在5-FU全部发挥细胞毒性作用前，对于其食物摄入有一种补偿性增加。在接受5-FU前预施用3天PHA并用含乳白蛋白的前述食物饲喂的动物在接下来的4天中均能保持稳定的体重并表现正常。在剩下的处理组中，在施用5-FU后4天，动物有5-10％的失重。
每天记录每只动物的食物摄入量，并计算平均食物摄入量(下文图4和图4数据)。在预施用PHA的所有处理组中，在注射5-FU前，动物的食物摄入量稳定增加。未处理对照组的动物每天的食物摄入量保持稳定增加(数据未给出)。在接受5-FU给药后，仅用乳白蛋白食物饲喂的动物其食物摄入量减少大约持续了一天。在接受5-FU后，预施用PHA3天的动物其约7g/天的稳定食物摄入量保持了4天。剩余处理组在施用5-FU后，食物摄入量大幅度减少持续了4天。
在试验结束时，将动物杀死并进行解剖。记录每只动物之主要器官的干重并计算平均重量。将每种处理组的胃肠道主要器官的平均干重列于表12中。附图数据附录图3 5-FU和PHA施用对鲜体重(g)的影响
处理组号
1  nd  nd  nd  nd  nd  nd  nd  96.2
2  102.5  99.9  98.8  101.9  108  110.2  107.9  106.2
3  103.5  106.4  102.8  103.2  103.6  103.3  100.3  100.7
4  101.9  104  101  101  102.76  99.5  97.4  91.2
图4 5-FU和PHA施用对每日食物摄入量(g)的影响
    天 1 2 3 4 5 6 7
 1 nd nd nd nd nd nd nd
 2 4.8 6.22 9.22 11.3 10.4 6.8 5.9
 3 4.8 6.3 9.2 7.7 8.5 7.7 8.3
 4 4.42 6.4 8.3 5.7 2.28 2.14 4.4
表12．7天后，胃肠道主要器官的平均干重(g)处理       胃       小肠       空肠       回肠      盲肠      结肠1        141±6    887±28    185±1    151±8    124±4    147±62        140±7    509±55    90±8     94±11    99±11    130±113        136±13   840±253   189±37   109±24   114±29   143±244        125±6    759±318   168±70   91±24    93±18    117±21关键词处理，参见表11
结果表明在施用5-FU之前或之后，施用PHA对胃的干重没有什么影响。但是，PHA施用确实对小肠干重有影响。如果在食物中仅含有乳白蛋白，小肠会被5-FU损伤并且使干重降低几乎50％。但是，在施用5-FU之前(处理组3)或者施用5-FU之前和之后(处理组4)各施用3天PHA，凝集素能够保护小肠免受5-FU的损伤，而且小肠的干重与对照相似。
在小肠内，空肠和回肠组织对5-FU引起的损伤最敏感(表12)。但是，如果在5-FU注射之前或者之前和之后施用PHA，凝集素特别是对空肠能够发挥显著的组织保护作用。在施用5-FU前，给动物施用3天PHA也对整个小肠有显著的保护作用(表12)。在施用5-FU之前(处理组3)或者施用5-FU之前和之后(处理组4)施用PHA可以产生最佳的组织保护作用。该结果表明，施用的PHA剂量能够刺激小肠活细胞的生长和修复并提供抵御5-FU细胞毒作用的保护作用。
7天后，从动物中收集血液并对关键分子和细胞组分进行分析。结果列于表13。
表13对照组和处理组动物之关键分子和细胞组分的分析处理     WBC        RBC       HGB      HCT      MCV    MCH   MCHC     PLT
     no/mm3    no/mm3   g/100ml  g/100ml    μm3  pg    g/100ml  no/mm31        5.5×103   6×103    12.1     34.2     57.5   20.4  35.4     552×1032        3×103     7.4×103  12.7     37.1     50.4   17.3  34.3     274×1033        2.4×103   7.1×103  13       34.7     48.7   18.2  37.4     296×1034        4×103     7.4×103  13       35.1     47.8   17.7  37.1     321×103注释处理同表3WBC          白细胞RBC          红细胞HGB          血红蛋白HCT          血细胞比容MCV          红细胞平均容量MCH          红细胞平均血红蛋白量MCHC         红细胞平均血红蛋白浓度PLT          血小板
给饲喂含乳白蛋白之食物的大鼠施用5-FU后，从白细胞和血小板数可观察到预期的细胞毒性。与未处理对照组相比，没有一个处理组对红细胞计数、血红蛋白和血细胞比容含量、红细胞平均容量或血红蛋白浓度有任何显著影响。与仅用乳白蛋白处理的组(处理组2)相比，在施用5-FU前施用PHA(处理组3)，对测量的参数没有什么影响。相对于乳白蛋白对照而言，在施用5-FU之前和之后施用PHA(处理组4)增加了产生的白细胞数。
上述结果表明，施用口服剂量的凝集素相对于细胞毒性药物的时间可影响所述药物的血液毒性。实施例8
鉴定预施用PHA可保护胃肠道免受5-FU损伤的剂量范围
将3组大鼠(每组5只)喂以标准食物(表1)并每天用200、100和50mg/kg/天PHA管饲，饲喂3天。每天记录每只大鼠的食物摄入量。将第二大组的3组对照大鼠(每组5只)喂以标准食物，并每天用1毫升盐水管饲，饲喂3天。将对照组的每只动物与PHA施用组的每只动物对应饲喂。在第4天的早晨，给每只动物注射150mg/kg体重5-FU，然后用标准食物饲喂6天。将2只大鼠以标准食物不限量地供给9天。在第9天早晨，将大鼠杀死并解剖动物。在用液氮冷冻后，记录湿组织的重量。
表14在施用150mg/kg/BW5-FU后，用200、100和50mg/kg/天PHA管饲，饲喂3天对空肠和回肠湿重(mg)的影响处理                         空肠(mg)       回肠(mg)未注射                        1006           909PHA200mg/kg/天                1031           778对应的对照200mg/kg/天         848            753PHA100mg/kg/天                984            800对应的对照100mg/kg/天         783            747PHA50mg/kg/天                 989            757对应的对照50mg/kg/天          761            722
在注射5-FU前预施用200mg/kg/天PHA，与未注射的处理组和对应的对照组相比，在空肠观察到显著的保护作用(表14)。将PHA的剂量降至100或50mg/kg/天，与未注射的处理组和对应的对照组相比，在空肠组织观察到显著的保护作用。用回肠组织，当与未注射的对照相比时，在所检测的剂量，PHA没有如此完全的组织保护作用。但在每种情况下，用预施用PHA的动物比相应的配对饲喂对照有较大的回肠组织。
上述实施例表明，化疗可严重损害动物的生长和生存力。食物措施，特别是施用细胞毒性药物之前或之后加入凝集素可赋予抵御化疗的保护作用。具体地说，该保护作用涉及胃肠组织的生存力和生长。在施用细胞毒性药物后的这种保护作用在200mg/kg/天至50mg/kg/天的凝集素剂量范围内均可观察到。实施例9
对口服消化的PHA保护小鼠抵抗致死量辐射的能力，特别其对肠组织保护作用进行了研究。
每次用6.75Gy的辐射剂量(0.3Gy/分)照射每组由12只白化雄性小鼠组成的8组小鼠。将每组小鼠以精确的食物方案保持30天(表15)。
表15所用8组小鼠的食物方案小鼠组号                      食物方案辐射处理组1    SD2天LA3天SD11天         *ir*LA14天2    SD2天LA3天               *ir*PHA7天LA7天SD11天3    SD2天LA1.5天FT1.5天      *ir*PHA7天LA7天SD11天4    SD2天LA2天PHA1天         *ir*PHA7天LA7天SD11天5    SD2天PHA3天              *ir*PHA7天LA7天SD11天对照6    SD2天LA3天               LA14天SD11天7    SD2天LA2天               PHA1天PHA7天LA7天SD11天8    SD2天PHA3天              PHA7天LA7天SD11天表15关键词SD标准市售食物(Charles River Ltd.,Bioplan Ltd,Esaszeg,Hungary)。LA乳白蛋白食物。用表1中已知组分在实验室中配制的半合成食物(无凝集素)。乳白蛋白得自Sigma(Poole,Dorset)。PHA菜豆食物。用表1中已知组分在实验室中配制的食物(含菜豆凝集素PHA)。菜豆源自栽培的‘Processor’(任何其他含PHA的菜豆也同样适用)。FT禁食(无食物)*ir*辐射时间
记录30天后存活的小鼠数和其平均体重。
图5说明对动物30天后存活的影响。非辐射对照处理组6、7和8组中的动物表明施用标准食物、乳白蛋白食物和菜豆食物对存活没有影响。未观察到死亡。相反，在辐射后用标准市售食物、乳白蛋白食物和PHA食物饲喂的辐射处理组1,2和3中的动物有显著的死亡率(处理组3包括禁食期)。在处理组1-3中，共仅有2只动物存活。
若在将进行辐射前，给动物饲以含PHA的食物(处理组4和5)，动物的存活有显著的提高。存活的动物数与在辐射前用PHA食物饲喂动物的时间长短很相关。
表16 30天后的动物平均体重
  小鼠组号         平均体重(g±标准偏差)
     1                    29.9
     2                    29.6
     3                    -
     4                    23.0±5.63
     5                    30.12±1.83
     6                    31.88±2.02
     7                    31.18±1.46
     8                    31.03±2.11
30天后，对照处理组6-8中动物的重量为30-32克(表16)。处理组1-3中的动物有很高的死亡率。但是在处理组4和5中的动物，其体重的增加与辐射前用含PHA食物饲喂的时间成正比。在处理组5中(在辐射前用含PHA的食物饲喂3天)，平均体重与对照处理组相似。以所研究的剂量将PHA加到食物中没有有害作用。若在辐射前施用凝集素，可观察到PHA的显著保护作用。
在辐射动物后，对每个处理组测定小肠、脾和睾丸的平均湿重(表17)。未测定处理组7的平均重量。
表17存活小鼠的小肠、脾和睾丸重量(mg±标准偏差)小鼠组号          小肠             脾            睾丸1                 999.8            72.5          49.42                 1335.2           176.5         62.03                 -                -             -4                 1032.0±266.7    105.2±25.7   53.6±1.65                 1312.3±258.4    111.4±37.4   62.8±8.96                 1477.3±111.1    117.8±13.5   208.0±36.57                 nd               nd            nd8                 1522.2±159.3    107.8±15.4   194.5±18.8表17的注释
-表示由于没有小鼠存活，所以没有数据
nd表示未记录数据
这些结果表明睾丸组织对辐射的作用最敏感。在辐射前或后施用PHA对睾丸的生长作用不大。
处理组1-3在辐射后有很低的存活率。处理组4和5的结果表明小肠重量有剂量依赖性增加，所述增加与辐射前用含PHA食物饲喂动物的时间成正比。处理组4和5的脾组织的平均重量与对照组相似。
该实施例表明辐射严重损害了动物的生存力，而通过饮食可改善辐射损害存活率的程度。辐射前禁食不能赋予对抗辐射的保护作用，反而可能是有害的。就重量的减少而言，食物中的PHA对测量参数没有不利影响(组7和8的数据与组6相比)，而所研究的睾丸组织对辐射损伤最敏感。在所述实施例中，预先施用PHA可赋予抵御辐射损伤的保护作用，而保护作用的程度取决于施用PHA的时间长短。
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Claims (36)

1．凝集素在制备用于控制粘膜细胞增殖的药物中的用途。
2．根据权利要求1的用途，其中所述控制是针对肠损伤和/或粘膜炎。
3．根据权利要求1或2的用途，其中所述控制是指对细胞损伤剂引起之损伤的控制。
4．根据权利要求1至3中任一项的用途，是为了控制受到损伤的哺乳动物细胞和/或组织，特别是受到损伤的人细胞和/或组织。
5．根据权利要求1至4中任一项的用途，其中所述细胞和/或组织是肠、口腔、鼻通道、食管、胃、肺、小肠、大肠(包括结肠)、上皮组织(如覆盖眼睛的)的粘膜层和其他粘膜细胞和组织。
6．凝集素在制备用于减轻和/或治疗因细胞损伤剂引起之损伤的药物中用途。
7．根据权利要求6的用途，是为了减轻和/或治疗受到损伤的哺乳动物细胞和/或组织，特别是受损伤的人细胞和/或组织。
8．根据权利要求6或7的用途，其中所述细胞和/或组织是肠、口腔、鼻通道、食管、胃、肺、小肠、大肠(包括结肠)、上皮组织(如覆盖眼睛的)的粘膜层和其他粘膜细胞和组织，骨髓、脾，所有造血细胞，血液组织，胸腺，生发组织，眼组织和睾丸/前列腺组织。
9．根据权利要求1至8中任一项的用途，其中所述细胞损伤剂是放疗、化疗剂或其组合。
10．根据权利要求9的用途，所述放疗包括X-射线，γ射线，质子源，中子源，α-发射体，β-发射体或其两种或多种情况的组合。
11．根据权利要求9或10中的用途，其中所述化疗剂包括5-氟尿嘧啶，顺铂，阿霉素，氨甲喋呤，紫杉醇或其两种或多种物质的组合。
12．根据权利要求1至11中任一项的凝集素的用途，其中所述凝集素来自菜豆、大豆、刀豆、小麦胚芽、莲花种子、洋葱、兵豆、番茄、马铃薯或来自其两种或多种组合的凝集素。
13．根据权利要求1至12中任一项的凝集素的用途，其与细胞保护剂联用。
14．根据权利要求13的凝集素的用途，其中所述细胞保护剂是放射致敏剂、化学保护剂，生长因子或其两种或多种物质的组合。
15．根据权利要求14的凝集素的用途，其中所述放射致敏剂是维生素K模拟剂，texaphyrin钆配合物，碘苄胍或其两种或多中物质的组合。
16．根据权利要求14或15的凝集素的用途，其中所述化学保护剂是Sulcraphate、半胱氨酸、巯基乙胺、Ethyol、balazipone，多司马酯，WR3689(磷酸二氢2-[[3-甲基氨基)丙基]氨基]乙二醇酯，AD20(2-[[2-甲氧基苯基)乙酰]氨基]2-丙烯酸或硝基氧抗氧化剂或其两种或多种物质的组合。
17．根据权利要求14至16中任一项的凝集素的用途，其中所述生长因子是粒细胞集落刺激因子，粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子，促红细胞生成素，表皮生长因子，角质细胞生长因子，转化生长因子，白细胞介素，胰岛素样生长因子，神经生长因子，血小板衍生的生长因子，铃蟾肽，松弛素，降钙素，初乳衍生的生长因子(CDGF)，氨氯地平或amoxanox,protegrin，盐酸匹鲁卡品，干细胞因子，血小板生成素，青灰因子，任何一种干扰素，包括干扰素α，任何一种细胞因子或其两种或多种物质的组合。
18．凝集素在制备用于减轻和/或治疗代谢性糖尿病之药物中的用途。
19．根据权利要求18的凝集素的用途，其中所述代谢性疾病是肥胖症或与肥胖症相关的疾病，心血管、中风、胃肠道或相关疾病，粘膜细胞增殖的控制或其两种或多种情况的组合。
20．根据权利要求1至19中任一项的凝集素的用途，其中所述药物施用的凝集素浓度为0.3g-0.1μg/kg体重/天。
21．根据权利要求1至19中任一项的凝集素的用途，其中所述药物施用的凝集素浓度为1mg-0.15μg/kg体重/天。
22．含有凝集素的组合物，所述组合物用于控制粘膜细胞增殖，减轻和/或治疗因细胞损伤剂引起的损伤，减轻和/或治疗代谢性疾病，或其两种或多种情况组合。
23．含凝集素和细胞保护剂的组合物。
24．权利要求22或23的组合物，同时、分开或相继使用、用于预防或治疗因细胞损伤剂引起的损伤。
25．根据权利要求22至24中任一项的组合物，其中所述凝集素是纯化的或分离的。
26．根据权利要求22至25中的任一组合物，其中所述凝集素来自菜豆、大豆(或乳清)、刀豆、小麦胚芽、莲花种子、洋葱、兵豆、番茄、马铃薯或来自其两种或多种组合的凝集素。
27．根据权利要求22至26中任一项的组合物，其中所述细胞保护剂是放射致敏剂或化学保护剂，生长因子或其两种或多种物质的组合。
28．根据权利要求22至27中任一项的组合物，其中含有的凝集素浓度为0.3g-0.1μg/kg体重/天，优选1mg-0.15μg/kg体重/天。
29．减轻和/或治疗因放疗和/或化疗引起的损伤，减轻和/或治疗代谢性疾病、控制粘膜细胞增殖或其两种或多种情况的方法，该方法包括总的食物凝集素摄入量为0.3g-0.1μg/kg体重/天。
30．可供消费2-5天的含凝集素的食物。
31．根据权利要求23的食物，接着是为期达7天的高质量食物。
32．周期性食物，含有至少两个周期的权利要求31中的食物。
33．根据权利要求30-32中任一项的食物，其中所述食物含有的凝集素剂量为0.2g-0.05g/kg体重/天。
34．权利要求30-32中任一项食物，其与放疗和/或化疗结合使用。
35．权利要求30-32中任一项食物，在进行放疗和/或化疗前、过程中或之后施用。
36．任选包括大豆乳清成分的大豆废产物在制备权利要求1至21中任一项的药物的用途。
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