CN1889976A - 抗疱疹药物组合物、生产基于其的剂型的方法及其使用方法 - Google Patents

Abstract

本发明的抗疱疹组合物包含病毒体药物，该药物含有通过福尔马林或γ－辐射灭活的血清1型和2型单纯疱疹病毒。所述组合物还包含高技术免疫调节剂Polyoxidone、缬氨酸和赖氨酸氨基酸，以及包含选自组：苯丙氨酸、亮氨酸、丙氨酸、苏氨酸、组氨酸、精氨酸、蛋氨酸的至少两种氨基酸的组合，并且可以包含能在细胞水平刺激抗疱疹肽形成的异亮氨酸。该组合物可以被包含在不同的药物制剂中，并且其特性使得使用所述组合物用于急性和慢性疱疹病变成为可能。

Description

抗疱疹药物组合物、生产基于其的剂型的方法及其使用方法

                        技术领域

本发明涉及免疫学领域，尤其涉及提供新的抗疱疹药物组合物，生产基于其的剂型，以及其使用方法。

                        发明背景

现在，下面的化学制剂通常用于对抗疱疹病毒：无环鸟苷、利巴韦林、磷甲酸、阿糖腺苷等[1]。相应的疫苗具有关于疱疹病毒特定的活性。在俄罗斯和其它国家，已经开发了许多抗疱疹疫苗，包括基于灭活的病毒体的那些。它们在，例如俄联邦专利No.2014084，1994，No.2085582，1997，No.2085583，1997，美国专利No.4816250，1989，No.5215745，1993，No.5602023，1997中进行了描述。

在最近几年，已开发了抗疱疹疫苗制剂，其中考虑到了疱疹病毒的基因结构，并且它包含DNA片段和一些其它成分。

这样的疫苗是，例如包含DNA片段以及其编码的肽的重组疱疹病毒疫苗(2002年5月14日的美国专利No.6387376)。该疫苗可以用于腹膜感染。包含单纯疱疹病毒以及糖蛋白(gp)D和脱酰脂质A-单磷酸的复合疱疹病毒疫苗(塞浦路斯申请，引自相同的2002年10月10日的美国申请No.2002147167)。

包含灭活疱疹病毒的疫苗主要定位于动脉粥样硬化斑。这是一种多价疫苗，它包含与药学上可接受的载体或稀释剂结合的HSV-1，HSV-2，HSV-6，人巨细胞病毒，EB病毒(2002年10月29日的美国专利6471965)，编码疱疹病毒糖蛋白：gp50，gpII，gpIII，gpI，HSV gD，牛疱疹病毒gI，HV gB，EB VgB，gH，人巨细胞病毒gB的重组DNA(2003年10月1日的荷兰专利9900034)。

一种包含糖蛋白D2t，对抗单纯疱疹病毒的疫苗，该疫苗还包含佐剂TH-1，3-DMPL或铝盐(已公开的2003年4月29日的申请EP1109574)。同样已知的是一种对抗单纯疱疹病毒的疫苗，它包含HSV的肽表位特征(已公开的2003年11月27日的申请WO03099860)。最近的进展之一是基于突变疱疹病毒的活疫苗，它在38.5℃或更高温度下在机体中起作用。它适于在动物中使用(2004年4月22日的美国专利2004076642)。

从上面所述中可知，如在我们以前的创造性开发中所推荐的，在综合治疗中包括免疫活性物质，例如干扰素和抗氧化剂是有利的(见，例如俄联邦专利No.2142816，1999)，其中也显示了便于患者的剂型之一(以栓剂的形式)。我们把此创造性的开发当作与本发明接近的类似物。

化学治疗剂不总是十分有效，因为它们不仅仅对疱疹病毒具有特异作用，原则上是多活性的并且可以用于其它病毒疾病中。

上面引用的疫苗制剂，虽然是特异的并且已在经灭活和减毒的疱疹病毒株的基础上被制备，但不全部适于治疗人。为了成功地抗击在高度组织的机体，特别是在人类机体中的病毒，必需考虑体液和细胞因素、免疫系统状态、病毒感染的严重程度、疾病的阶段(潜在性感染，病情恶化等等)。

在早先的时候，用α-疱疹病毒亚科HSV-1的实验已经揭示了其免疫抑制活性。T细胞增殖的抑制可以与对异种抗原的体液应答的缺陷结合。宿主对柯萨奇B病毒感染的敏感性、对保存的绵羊红细胞正常应答增强的这一事实证明了血清2型单纯疱疹病毒(HSV-2)与小鼠免疫系统相互作用的复杂特征。肺泡或腹膜巨噬细胞的感染导致它们执行抗体依赖的细胞毒性效应物功能的能力的抑制。在施用后不同时间段，病毒抑制了小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性。在感染早期，检测到肺泡巨噬细胞中的吞噬活性暂时增强，接着该功能被抑制。病毒的免疫抑制活性是通过在人血的外周单核细胞培养物中模拟该作用进行研究的。在感染及适当孵育后，分离自然杀伤细胞(NK)并评价它们的细胞毒性。在与描述的系统作用的过程中，确定了只有当单核细胞存在于外周血单核细胞培养物中时，病毒才抑制NK的细胞毒功能。单核细胞从系统中去除取消了病毒诱导的抑制的发生；在引入单核细胞后，免疫缺陷重新形成。也确定了通过疱疹病毒调节的一种类型抑制的发生是通过单核细胞来实现的。也有关于疱疹病毒对调节T细胞的直接作用的数据，它导致合成以及与白细胞介素-2相互作用能力的损害[2]。

因此，所描述的疱疹病毒对免疫活性细胞和免疫状态作为一个整体的作用机制提示，将抗病毒化合物包含到那些药物中是必需的，所述药物特异地影响免疫系统以及在由单纯疱疹病毒引起的机体病变时，使细胞代谢正常，特别是在迟缓的、复发的及对药物治疗很不敏感的疾病的情况下，该疾病倾向于变为慢性疾病，慢性病毒感染也属于这一类别。

虽然上面引用的疫苗制剂有相当大的优势，但在所述制剂中没有考虑被疱疹病毒感染的患者机体状态的某些重要方面。在患有疱疹(特别是以其慢性形式)的患者中，观察到细胞及体液免疫异常，出现糖皮质激素分泌增强，以及观察到病毒感染的细胞和组织的代谢的急性损伤。

研究显示，在患者中免疫调节药物及其使用方案的选择是由免疫学家根据主要疾病的严重程度和类型、伴发的病理学以及显示的(有时是隐藏的)免疫缺陷而确定的。

在单核细胞-巨噬细胞系统的细胞病变时，使用Polyoxidonium，Licopid。在单核细胞-巨噬细胞系统中最严重形式的病变情况下，使用粒细胞-巨噬细胞集落-刺激因子的制剂，莫拉司亭(生白能)、非格司亭(优保津)。

在细胞介导的免疫的缺陷情况下，使用下列药物之一：Polyoxidonium，Tactivinum，Thymoptinum，Thymogenum，胸腺素(Thymalinum)。在由B淋巴细胞引起的抗体合成障碍中，使用Myelopidum，Polyoxidonium。

在具有免疫调节特性的制剂中，可以辨别三个主要的组，它们用于实际卫生保健：微生物来源的制剂(Pyrogernalum、Proidigiosanum、Ribomunyl、核酸钠(Sodium nucleate)及其它)，内源性制剂：胸腺制剂(Tactivinum、胸腺素、Thymoptinum、Thymactidum、胸腺刺激素及其它)，骨髓来源的制剂(Myelopidum)、细胞因子(莫拉司亭)、Reaferonum及其它)，化学纯合成的制剂：具有显示的免疫调节特性的治疗制剂(例如Diuciphonum及其它)、内源性来源的物质的类似物(Licopid、Thymogenum及其它)、真正合成的制剂(Polyoxidonium及其它)[3]。

已知在高等动物中，对于对抗感染性疾病，即最简单的活病原体：细菌、微生物、真菌、病毒等等，免疫系统是必需的。在无脊椎动物，例如在昆虫中存在免疫力吗？寻找对该问题的答案导致了一类新的独特物质的发现。

昆虫不拥有与哺乳动物具有的类似的免疫系统。在昆虫中，产生的物质能阻断进入它们机体的外来蛋白质。然而，很久就知道昆虫能抗击致病微生物。在1980年，以斯德哥尔摩大学(瑞典)的Hans Boman为首的一组研究人员成功地确定了以下内容：将细菌感染的溶液注入到惜古比天蚕(Hyalophora cecropia)蛾的幼虫中，然后收集由感染的幼虫分泌的物质并进行分析。结果，科学家们获得了两个新的化合物—由35到39个氨基酸组成的肽分子。它们被命名为杀菌肽。杀菌肽的抗微生物活性证明是非常高的[4]。

原则上，很久就已经知道包含由24到40个氨基酸组成的短分子的抗微生物物质。半个多世纪以前，分离了抗微生物肽类短杆菌肽和乳链菌肽，它们被广泛地用于制药及食品工业。植物抗菌肽类和来自蜜蜂毒液的肽类在很久以前就被描述过。然而，Boman的发现还是激起了兴趣。一方面，分离的肽类初看起来与包含于蜜蜂毒液中熟悉的物质峰毒肽非常类似，但有一个小的区别：与峰毒肽不同的是，杀菌肽仅杀死大肠杆菌类型的细菌(所谓的革兰氏阴性细菌)细胞，并不作用于其它微生物或高等生物的细胞。

研究者中占主要的意见是，抗微生物肽是由没有发育的免疫系统的低等动物的分泌器官产生的。据显示，哺乳动物—兔、母牛以及甚至人类—也能分泌类似的物质。这主要发生于肠、呼吸道和输尿管的区域。持续不断地产生肽，甚至在机体的静止状态，而当器官感染或损伤时，这些肽的合成发生突然发作。

抗微生物肽类，虽然它们在效能上稍微差于抗生素，但起作用快得多，并且，这是最重要的，消灭对已知抗生素耐受的细菌。然而，只有那些不引起哺乳动物细胞溶血作用的肽，可以作为抗生素和抗真菌剂用于临床[5]。

上述肽类可以不同的方式“去除”病毒。首先，它们中的一些只是直接与病毒相互作用，阻断其活性。以这种方式，它们灭活病毒，例如，口炎病毒和甚至HIV。其次，在感染的机体中肽类可以阻断HIV病毒体的增殖。杀菌肽和蜂毒肽以这种方式作用。

                         发明内容

本发明的技术问题是提供一种新的、更加有效的和进步的复合制剂，其不仅特异地直接作用于单纯疱疹病毒，并且也确保对作为一个整体的机体的加强的免疫调节作用，动员所有机体潜能在细胞和体液水平来抗击病毒。

所提出的问题通过以下方案得以解决：一种抗疱疹的病毒体制剂，该制剂包含经福尔马林或γ-辐射灭活的血清1型或2型的单纯疱疹病毒，并进一步含有高技术免疫调节剂Polyoxidonium，氨基酸缬氨酸和赖氨酸，以及至少2种氨基酸的组合，该氨基酸选自组：苯丙氨酸、亮氨酸、苏氨酸、组氨酸、精氨酸、蛋氨酸中。药物组合物具有下列成分的比例：

抗疱疹制剂-10⁶到10⁷噬斑-形成单位/毫升悬液

Polyoxidonium                     0.03-0.06克

缬氨酸                            0.18-0.25克

赖氨酸                            0.15-0.30克

2种代谢性氨基酸的组合             0.12-0.27克

生理液体介质               到100毫升

因为使用的生理介质可以用，例如Eagle’s培养基来制造，用于疫苗制剂。

该组合物可以进一步包含数量为每100毫升0.22到0.24克的人白蛋白作为稳定剂，以及在组合物的制剂中总量为0.05到3.5％的2-3种水溶性和脂溶性维生素的组合，该维生素选自组：硫胺素、核黄素、烟酰胺、吡哆醇、抗坏血酸、视黄醇、生育酚或它们的混合物。

在将异亮氨酸掺入到组合物中时，治疗疱疹感染的有效性增加到相当的程度，与对照比较增加了10-28％。异亮氨酸可以每100毫升组合物0.11-0.22克的量包含于制剂的剂型中。

这样的制剂适于治疗1和2型单纯疱疹感染。为了这个目的，选择对应于每一类型疱疹的氨基酸与维生素的组合，根据患者的状况选择剂量和给药方案。

本发明的主题是包含下列成分的抗疱疹组合物：

病毒体疫苗抗疱疹制剂-10⁶-10⁷噬斑-形成单位/毫升悬液，通过福尔马林或γ-辐射灭活，Polyoxidonium、还有氨基酸缬氨酸和赖氨酸，以及至少2种氨基酸的组合，该氨基酸选自下列组：苯丙氨酸、亮氨酸、苏氨酸、组氨酸、精氨酸、蛋氨酸。新成分的详细描述和它们对于我们组合物的重要性在下文中介绍。

最新一代国内的免疫调节剂-Polyoxidonium(PO)-是一种非常有效的免疫活性剂。PO是1，4-亚乙基-哌嗪N-氧化物和(N-羧乙基)-1，4-亚乙基-piperasinium溴化物的共聚物。它是一种冷冻干燥的多孔物质，带浅黄色、易溶于水、分子量为60000到100000。除了免疫刺激作用，PO还产生显著的解毒、抗氧化和膜稳定作用。

最近，我们使用PO进行了许多实验，同时使用抗疱疹疫苗，它们通过胃肠外施用联合应用。在实验动物的感染(兔角膜炎、豚鼠生殖器疱疹、小鼠脑膜脑炎)模型上，这些实验得出了阳性结果。这些实验的结果显示于表1中。

表1

编号	使用的疱疹病毒疫苗	滴定测试病毒结果，lgTCD50/毫升	Polyoxidonium的单次注射剂量，毫克	病毒中和抗体的浓度，中和指数
					1	抗1型单纯疱疹病毒的灭活疫苗	6.5	-0.10.2	2.33.75**3.3*
2	抗1型单纯疱疹病毒的灭活疫苗	5.5	-0.10.2	2.03.0*2.5
					3	抗人巨细胞病毒的灭活疫苗	5.0	-0.10.2	2.03.0**2.5

注：在接种疫苗的动物中，没有使用Polyoxidonium与使用其的病毒中和抗体浓度的差异显著性^**P≤0.01；^*P≤0.05。

我们的研究显示，对于带有不同形式疱疹病毒的试验个体的最佳作用是由高技术合成药物Polyoxidonium(PO)产生的。

在体内，PO对免疫系统产生更复杂和多方面作用。因为任何免疫反应的发生开始于单核细胞-巨噬细胞系统的细胞，并且因为由单核细胞/巨噬细胞产生的细胞因子具有多效性作用，在PO作用下它们功能活性的增强导致细胞及体液免疫性二者的激活。所以，特别地，在引入PO连同低剂量的抗原时，相对于对照针对该抗原的抗体合成发生了5到10倍的增强。重要的是注意到，这种增强可以在对所给定抗原有遗传决定的弱反应的动物中观察到。因此，PO具有调动机体的所有因素来保护机体免受抗原特性外部因子破坏的能力，并且只要它发生于机体免疫反应的发生中，该调动就以自然方式延长。这些观察使我们能够在过多的现代免疫刺激剂之中仅选择Polyoxidonium，因为其成功用于复合抗疱疹药物组合物的制剂中。

我们成功地根据经验确定，必需氨基酸缬氨酸和赖氨酸，以及还有由我们从许多已知氨基酸中选择的一些其它氨基酸是组合物制剂中非常有效的成分。

我们使用的氨基酸除了通常已知的特性之外，还具有以下特性：

组氨酸：是肌肽和鹅肌肽的一部分，在血红蛋白形成中起重要作用，对红细胞的生成是必需的。它有助于控制血液中糖水平并产生能量。

亮氨酸：对骨、肌肉的生长和愈合是必需的。在亮氨酸代谢中，释放能量，它有助于稳定血液中糖水平。研究发现在某些情况下，亮氨酸缺乏可引起低血糖、生长迟缓、体重减轻、肾和甲状腺变化。

赖氨酸：增强免疫系统，有助于骨的生长和胶原的形成，改善注意力，具有直接的抗疱疹活性。膳食中缺乏赖氨酸导致血液循环障碍(红细胞数量减少，红细胞中血红蛋白含量减少)。缺乏可以导致肌肉消瘦、骨钙化障碍、肝脏和肺脏中的变化、特别是在衰老及老年患者中。

蛋氨酸：用于胆碱合成，因为它减少作为一个整体肝脏和机体中的脂肪贮存，并降低胆固醇的量，所以被称为“抗脂肪肝剂”。建造新的骨组织、抑制onchypathies、保护肾脏并且是重金属的天然螯合剂。蛋氨酸对于肾上腺功能和肾上腺素的合成非常重要，它对于病毒感染细胞中的代谢控制至关重要。

苯丙氨酸：与甲状腺和肾上腺的功能有关，参与甲状腺的主要激素甲状腺素合成的核心的形成，参与肾上腺素的形成。在机体中，苯丙氨酸可以转化为thyrosine，其用于合成两个主要的神经递质，多巴胺和肾上腺素，在神经体液水平控制细胞代谢。苯丙氨酸在控制痛和痒感觉方面是有效的。此外，由于缩胆囊素的分泌，苯丙氨酸具有抑制食欲作用。

缬氨酸：缬氨酸缺乏可能导致神经纤维的髓磷脂包被的损伤并导致机体的负氢平衡的产生，这对病毒感染的患者是非常危险的。

丙氨酸：增强免疫系统，参与葡糖糖代谢。

精氨酸：精氨酸缺乏可引起毛发脱落、便秘、hepathopathies、并减缓伤口愈合，包括由病毒毒素损伤引起的那些。

异亮氨酸具有独特的性质，其首次用于配制抗病毒疫苗—仅从外面(食物)中接受的该氨基酸在人机体中(主要在肠部位)刺激产生抗微生物肽，该肽与能消灭疱疹病毒的杀菌肽相似。

这样的组合物(特别是补充有增强对施用药剂免疫反应的微量元素)，也允许使用其来更有效地抗击由血清1或2型疱疹病毒引起的病毒损伤以及该病的一些慢性形式。

通过对受疱疹病毒侵袭的生物施用抗疱疹药物组合物，来使用该抗疱疹药物组合物的方法是本发明的另一个主题，其中上面表征的组合物以有效剂量，以适当的剂型，以选自组：经口、舌下、鼻内、直肠、阴道、胃肠外、结膜下的适当方式或以可咀嚼形式对生物施用。

在疱疹病例中微量元素在免疫系统中的作用，通过使用含有我们组合物的栓剂进行了详细研究。

下列微量元素(MEs)的作用机理存在于免疫系统中：

1.对特定受体的作用

对定位于细胞质膜上的受体：HLA-系统、MHC-系统(Ni，Cr，Hg)。

粘附素：选择蛋白和整联蛋白(Mn，Hg)。

转铁蛋白的受体(Al，Ga)

参与NK-介导的细胞溶解的受体(Zn)。

细胞因子受体(Zn)。

T细胞受体(Zn，Hg)。

钙和镁离子的受体(Zn，Mn，Be，Cd，Hg及其它)。

免疫球蛋白受体(Zn)。

定位于细胞内区室的受体：线粒体(Fe，Zn)、细胞骨架LIM-蛋白质(Zn，Se，Li)。

线粒体、内质网上的钙的细胞内受体(Cd，Zn)。

2.对酶活性的作用

许多必需的MEs是许多酶的催化位点的成分。例如，Mn是免疫细胞过氧化物歧化酶(SOD)的必需部分，Se形成谷胱甘肽过氧化物酶(同工酶VI)催化位点的部分，Zn是控制其它细胞内蛋白质转录水平的众多Zn-指蛋白的最重要部分。MEs对酶活性的作用途径同样存在，它存在于金属酶的竞争性抑制作用或变构激活作用中。例如，Zn是Ca⁺²⁺，Mg²⁺-依赖的核酸内切酶的竞争性抑制剂。Zn的这种作用决定了其在免疫系统中作为抗-细胞程序死亡因子的主导作用。

3.对激素活性的作用

-MEs作为激素的组成部分。

Zn是胸腺素的关键成分，胸腺素是一种实现胸腺对免疫系统T-细胞分支的作用的激素。

MEs和激素的储存

Zn，Cr参与胰岛素分子的储存和稳定，胰岛素对机体所有胰岛素依赖性细胞产生多种调节作用，免疫细胞也属此类。锌提供神经垂体激素的细胞内储存和稳定。

参与激素降解和消除

已知血管紧张素转化酶是Zn依赖性的。

参与激素作用的机理。

4.对载体蛋白质的作用

白蛋白。

金属硫蛋白，其在机体的网状内皮系统的单核细胞内合成。

应激蛋白，作为普通的蛋白质在细胞内合成，对应激作用(热休克、饥饿、UV照射、重金属作用、慢性感染)有反应。

5.MEs对免疫细胞膜的物理化学作用

已发现，例如，硒能产生抗氧化作用，起谷胱甘肽过氧化物酶的辅因子的作用，其提供游离氧物种的失活，其在免疫系统中的产生确保了既毁灭或消除外来因子(寄生虫或细菌)，又在过多产生单线态O₂。、H₂O₂、。OH的情况下，引起免疫细胞本身的膜装置的损伤。O₂。、H₂O₂、。OH的产生与在过渡金属(Cu，Zn，Mn，Fe)的影响下，诱导Haber-Weiss和Fenton反应有关。

因此，MEs能通过脂质过氧化作用(LPO)的酶和非酶机制的作用，以及通过抗氧化机制的激活，控制细胞膜的物理-化学特性，包括关于不同生物学底物(抗原、感染因子等)的半渗透性的特性。

6.对抗原的呈现、细胞内加工和降解的作用(见第1项)。

7.对免疫记忆的形成的作用，以及还可能，在长期存在记忆细胞中，涉及抗-细胞程序死亡MEs(Zn、Se及其它)。

8.对免疫球蛋白的产生的作用(Zn、Be)。

9.对趋化性、粘附和吞噬作用过程的作用[6，7]。

对实验动物的许多试验使得选择最有效的微量元素成为可能，将微量元素掺入我们开发的剂型制剂(栓剂)中：从组：锌、铬、硒和镍中选择的2-3种微量元素。所述微量元素在剂型制剂中的存在增强了我们选择的免疫调节剂的作用，相对于对照(没有MEs)增强了25-30％。

下面显示的是表2，它显示了在补充组合物的制剂之前和之后，在被疱疹病毒感染的实验动物中免疫指数的水平，所述组合物含有氨基酸(包括异亮氨酸)和Polyoxidonium。

表2

指数	补充Polyoxidonium前	补充Polyoxidonium后
			白细胞(abs)	7.6±0.2	7.5±0.1p＞0.05
淋巴细胞％	31.1±1.9	31.8±2.3p＞0.05
			CD 3+％	58.5±2.2	72.1±1.3p＜0.005
CD 4+％	30.5±1.1	41.4±1.32p＜0.005
			CD 8+％	18.0±0.5	22.8±0.7p＜0.005
CD 16％	8.7±1.3	11.5±1.2p＜0.05
			Ig A mg％	250±6.5	265.2±6.2p＞0.05
Ig G mg％	1502.1±31.3	1575.2±30.5p＞0.05

Ig M mg％	175.7±9.6	182.1±7.8p＞0.05
			嗜中性白细胞吞噬作用％	52.1±2.3	67.3±6.1p＜0.005

从表中看到PO对免疫指数的作用，其中细胞免疫性和免疫活性蛋白质的水平显著增加。应该注意到，在我们提出的所有组合中，根据病毒的类型，将氨基酸(缬氨酸和赖氨酸、还有异亮氨酸和另外由选自组：苯丙氨酸、亮氨酸、丙氨酸、苏氨酸、组氨酸、精氨酸、蛋氨酸的至少2种氨基酸组成的组合)掺入组合物中，加速了损伤组织的上皮再形成(相对于原型为15％到36％，见上面)。将Polyoxidonium与氨基酸共同掺入组合物中不仅活化了免疫性，其使得显著延长缓解期，加速皮肤的上皮再形成和愈合过程，并且在一些情况下基本上成功地治愈个体动物中的一些慢性形式的疾病(12％的所有试验个体)成为可能。

上面表征的组合物可以具体化为其中可以将固体、软的或液体物质用作载体的剂型。

使用固体载体的组合物的最终形式包含片剂、糖锭剂、颗粒剂、小药囊或放于胶囊中的粉末。

使用液体载体由所述组合物制备的最终产物包含溶液、凝胶剂、乳剂、混悬剂、合剂、糖浆剂或搽剂。

使用软载体的组合物包含软膏、霜剂、糊剂、栓剂、植入物或咀嚼片或软锭剂。

上述药物形式使用常规步骤和在这种情况下通常采用的辅助物质生产。

使用常规栓剂制造技术制备基于上述药物组合物的栓剂的方法是本发明的另一个主题，其中将上面描述的药物组合物的活性成分和选自组：锌、铬、硒和镍中的2-3种微量元素，通过下面常规技术进一步引入基于可可油的栓剂物质中。将可溶性螯合物形式的一组微量元素引入栓剂制剂，其量为基于总重量的0.01到0.08％。

因此产生于一组76只实验动物的检测栓剂的结果显示，使用新制剂不仅激活免疫性，并且使相当地延长缓解期、加速皮肤和粘膜组织的上皮再形成和愈合、并且在一些情况下在特别个体中基本上成功地治愈疾病(患有慢性形式疾病的所有检测受试者的12％)成为可能。

我们认为，向栓剂制剂中掺入在所有水平上控制，也就是PO、缬氨酸和赖氨酸、异亮氨酸的代谢过程、刺激肠道细胞产生病毒阻断性肽(杀菌肽类型的)的非常重要的成分，所有组的维生素，以及MEs：锌、铬、硒和镍，在该结果中起重要的作用。

本发明得到了特别的动物试验支持。

主要的性能标准(相对于接近的类似物)：达到表面恢复(完全的上皮再形成)的时间减少15-36％，缓解的持续时间平均增加到6-7个月，在98.7％的病例中，涂片中没有病毒(PCR诊断)的情况下，抗病毒免疫性的激活，12％的跟踪动物基本上完全治愈。

在试验的动物中(兔的疱疹性角膜炎、豚鼠的生殖器疱疹)，52个个体感染有急性形式的血清1型和2型单纯疱疹病毒，并且24个个体感染有慢性形式的单纯疱疹。将患有急性形式单纯疱疹的动物分为三组：在第一组中，用以原型描述的疱疹疫苗进行治疗；在第二组中，用新的药物组合物；在对照组中，动物接受含有已知抗疱疹制剂的软膏和溶液形式的化学疗法。患有慢性形式单纯疱疹的动物组接受有一组完整的氨基酸、维生素和微量元素的新栓剂。

结果：在第一组中，完全上皮再形成平均发生于治疗的第6天，并且注意到在第二组中完全上皮再形成平均发生在治疗的第4-5天。在对照组中，平均从治疗开始的第7-10天显示了完全表面恢复。在对照的涂片中，在95.2％的第一组、在97.8％的第二组和在92.5％的对照组中没有检测到病毒。观察到在第一组在92％的病例中缓解持续时间直到4个月，在第二组在85％的病例中直到6-7个月。同时，在对照组中，仅在28％的病例中观察到缓解持续时间直到4个月。在第一组中在92.1％的病例中记录到高度增强的免疫反应，而在第二组中在98.6％的病例中记录到该反应，具有明显的显著性(p＜0.01)。因此，在治疗后注意到在两组试验动物的血清中自然杀伤细胞、CD8+表型的T-淋巴细胞的百分比及绝对计数增加的趋势(在第二组更高11-18％)，以及揭示了病毒诱导的干扰素-α和促分裂原诱导的干扰素-γ产生的增加。

将获得的以20毫升的量服用的药物悬液与0.01-0.03毫升的2-3种MEs盐的每种溶液和可可油混合，得到总重量100克，通过常规方法由所得到的物质制备栓剂，每个栓剂重0.15-0.20克。这种栓剂包含≤400微克/克蛋白质，具有≤2.2％的残余湿度和生理学pH值7.3±0.2，是无毒的并能诱导大鼠中病毒中和性抗体的合成，关于HSV-1中和指数等于3.0lg TCD₅₀/毫升，关于HSV-2中和指数等于2.0lg TCD₅₀/毫升，其中TCD₅₀表示在50％的被病毒感染的细胞单层的试管中产生细胞病作用的剂量。

由于新的高度免疫原性组合物的开发，保持了所述制剂特异活性的抗原性和稳定性，增强了细胞水平的个体器官的抗疱疹特性，不但在急性疱疹感染中而且在慢性疱疹感染中提高并且延长了机体抵抗力。

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7.Khaitov R.M.et al.，″Ekologicheskaya Immunologiya″，Moscow，1995.

Claims (11)

1.抗疱疹药物组合物，它包含抗疱疹病毒体疫苗制剂，该制剂含有通过福尔马林或γ-辐射灭活的血清1型或2型单纯疱疹病毒和免疫活性物质，其特征在于它包含Polyoxidonium、缬氨酸、赖氨酸和由选自组：苯丙氨酸、亮氨酸、丙氨酸、苏氨酸、组氨酸、精氨酸、蛋氨酸的至少两种代谢性氨基酸组成的组合，具有下列成分的比例：

抗疱疹制剂-10⁶到10⁷噬斑形成单位/毫升悬液

Polyoxidonium                     0.03-0.06克

缬氨酸                            0.18-0.25克

赖氨酸                            0.15-0.30克

代谢性氨基酸的组合                0.12-0.27克

生理液体介质                      到100毫升

2.根据权利要求1的组合物，特征在于它以每100毫升组合物0.11-0.22克的量进一步包含氨基酸异亮氨酸。

3.根据权利要求2的组合物，特征在于它以每100毫升0.22-0.24克的量进一步包含人白蛋白。

4.根据权利要求3的组合物，特征在于在组合物的制剂中以0.05到3.5％的总量进一步包含选自组：硫胺素、核黄素、烟酰胺、吡哆醇、抗坏血酸、视黄醇、生育酚或它们的混合物的一种或多种水溶性维生素和脂溶性维生素。

5.根据权利要求4的组合物，特征在于它可以被配制为其中使用固体、软的或液体物质作为载体的剂型。

6.根据权利要求5的组合物，特征在于使用固体载体的最终形式是片剂、糖锭剂、颗粒剂、小药袋或置于胶囊中的粉末。

7.根据权利要求5的组合物，特征在于使用液体载体的终产物是溶液、凝胶剂、乳剂、混悬剂、合剂、糖浆剂或搽剂。

8.根据权利要求5的组合物，特征在于使用软载体的终产物为软膏剂、霜剂、糊剂、栓剂、植入物或咀嚼片或软锭剂。

9.制备基于权利要求1-4中表征的药物组合物的栓剂的方法，该方法包括通过按照常规技术，将活性成分和作为载体的可可油混合，特征在于引入权利要求1-4中表征的组合物和一种或多种选自组：锌、铬、硒和镍的微量元素(MEs)作为活性成分。

10.根据权利要求9的方法，特征在于以基于组合物总重量的0.01-0.08％的量引入可溶性螯合物形式的MEs。

11.通过对被疱疹病毒侵袭的生物给予抗疱疹药物组合物而使用该抗疱疹药物组合物的方法，特征在于以有效剂量、适合的剂型、适合的途径对所述生物给予权利要求1-8中表征的组合物，所述途径选自组：经口、舌下、鼻内、直肠、阴道、胃肠外、结膜下或以可咀嚼形式。