CN1220163A - 治疗经前期紧张症的药物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治疗经前期紧张症的药物。它由柴胡、枳壳、合欢皮、郁金、香附、青皮、路路通、橘核、当归、白芍、川芎、茯苓、大腹皮、甘草十四味中药按一定比例组成。本发明具有舒肝理气、活血通络之功效,为治疗行经妇女经前期紧张症的理想药物。

Description

治疗经前期紧张症的药物

本发明涉及一种治疗经前期紧张症的药物。

经前期紧张症，约有50％的行经妇女患有此症，为多发病、常见病，对生产、工作和生活均有较大影响，且由于患者易怒、抑郁、强迫性行为、性欲改变，常给家庭造成悲剧。现在市场上尚未有专门治疗经前期紧张症的理想药物，常用中成药“逍遥丸”来代替。经前期紧张症，中医辩证87％为实证(肝郁气滞型)，“逍遥丸”虽能疏肝解郁，健脾和营，但用来替代治疗经前期紧张症则无活血通络的作用，且其舒肝理气的药力尚感不足。

本发明的目的在于提供一种舒肝理气、活血通络的治疗经前期紧张症的药物。

本发明的组成成分及各成分的组份为：

柴胡8～12  枳壳8～12  合欢皮6～10  郁金6～10

香附6～10  青皮4～8   路路通4～8   橘核4～8

当归6～10  白芍6～10  川芎4～8     茯苓4～8

大腹皮4～8 甘草2～6

下面结合实施例对本发明作详细描述。

取柴胡10kg、枳壳10kg、郁金8kg、香附8kg、当归8kg、川芎6kg、青皮6kg、七味中药提取挥发油，挥发油用β-环糊精制成包合物，备用；上述药渣与合欢皮8kg、路路通6kg、橘核6kg、白芍8kg、茯苓6kg、大腹皮6kg、甘草3kg、七味中药加水共同煎煮1～3次，每次加8～13倍量水煎煮1～3小时，合并煎液，滤过，减压浓缩至相对密度为1.10～1.30(75～80℃测)的稠膏，放冷，加入乙醇，使含醇量为50～75％，静置24小时，取上清液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.05～1.30(75～80℃测)的清膏，喷雾干燥，加入挥发油β-环糊精包合物，混匀，制粒，干燥，加辅量适量，混匀，压制成片，包薄膜衣，即得。

本发明不限于上述所述的一个实施例。

下面为本发明(商品名称为经前安片)药效学的实验研究。

图1为本发明对小鼠甩尾法镇痛能力影响的药效时间曲线图。

图2为本发明对小鼠热板法镇痛能力影响的药效时间曲线图。

横坐标轴(min)表示末次给药后的测定时间，纵坐标轴(S)表示甩尾反应时间。“●--●”表示空白对照组，“○--○”表示小剂量组，“×--×”表示中剂量组，“Δ--Δ”表示大剂量组，“*--*”表示卡马西平组，“Δ--Δ”表示逍遥丸组。

本发明(经前安片)药效学的实验研究。

药物及动物

一、药物

经前安片由柴胡、枳壳、合欢皮、郁金、香附、橘核、路路通、青皮、当归、白芍、川芎、茯苓等组成，东莞市中亚制药厂提供，药粉呈深棕褐色，含量为16.88g生药/g药粉，0.24g药粉/片，批号970721。经前安片具有舒肝理气，活血通络的作用，临床上用于妇女经前期紧张综合症。

逍遥丸，广东华天宝药厂。批号970603。逍遥丸具有疏肝健脾，养血调经的作用，临床上用于肝气不舒，胸胁胀痛，头晕目眩，食欲减退，月经不调。

卡马西平片，北京市双桥制药厂。批号960301。卡马西平系镇痛抗痉挛药，用于抗癫痫和三叉神经痛。

呋塞米(速尿)片，江苏省金坛市制药厂。批号9606122。呋塞米系利尿药，用于多种类型水肿及急性肺水肿。

戊巴比妥钠，北京化工厂。批号930619。

生理盐水，广安门医院药剂室配制。批号970226。

二、动物

雌性昆明种小白鼠，购自中国医学科学院实验动物研究所繁育场，级别为二级，经检疫，动物健康无病，动物合格证书为医动字第01-3001号。

雌性Wistar种大白鼠，购自中国医学科学院实验动物研究所繁育场，级别为二极，经检疫，动物健康无病，动物合格证书为医动字第01-3008号。

分别将实验动物于我院二级动物室中饲养观察，动物室合格证书为京动管准字(1996)第009号。

方法和结果

一、经前安片对动物镇痛能力的影响

1．甩尾试验

取体重范围为20±2g的雌性小鼠60只，按体重随机分成6组，每组10只，分别为空白对照组、经前安片小、中、大三个剂量组、逍遥丸组和卡马西平组。空白对照组的10只小鼠每天灌胃同体积自来水，经前安片小、中、大三个剂量组的各10只小鼠分别灌胃经前安片0.24、0.48、0.96g药/kg(分别相当于推荐临床用量0.048g药/kg的各5、10、20倍)，逍遥丸组的10只小鼠灌胃逍遥丸2.00g药/kg(相当于推荐临床用量0.20g药/kg的10倍)。除卡马西平组外的各试验组小鼠每日灌胃一次，每次0.5ml，连续给药7天。卡马西平组的10只小鼠在其它组给药的第7天灌胃卡马西平0.067g药/kg(相当于推荐临床用量0.0067g药/kg的10倍)。各试验组用药均以水稀释成相应浓度。各组在第7天最后一次给药30、90、150分钟后，分别将各组小鼠尾部浸入水温为48±1℃的恒温水槽中，浸入长度为5cm。将小鼠因受热刺激而将尾部甩出水面的时间作为痛阈值，观察各组小鼠在给药30、90和150分钟时的甩尾时间。结果见表1。

表1．经前安片对小鼠甩尾法镇痛能力的影响           甩尾时间：秒组别     例数 剂量(g药/kg)   给药30分钟     给药90分钟       给药150分钟空白对照组  10    0            13.65±4.11    12.82±4.53      12.62±4.46小剂量组    10   0.24          23.55±9.77    18.82±6.03      15.06±4.76中剂量组    10   0.48          27.52±13.27^* 21.65±.9.16^*   19.31±8.74大剂量组    10   0.96          31.12±19.21^**24.18±12.64^**  22.27±8.11^**逍遥丸组    10   2.00          20.89±7.84    17.12±5.05      15.04±4.50卡马西平组  10   0.067         26.18±7.71^*  18.11 ±5.38     16.27±5.81

与空白对照组比较：方差分析结果^*P＜0.05,^**P＜0.01

从表1可见，经前安片具有明显提高小鼠因尾部受热引起锐痛的镇痛能力，表现为明显延缓疼痛反应的出现，延长因疼痛引起的甩尾时间，即显著提高小鼠的痛阈值。经前安片随着剂量的增加，其镇痛作用显著提高，且药效较卡马西平持久。结果见图1。

2．热板试验

取体重范围为20±2g的雌性小鼠60只，按体重随机分成6组，每组10只，分别为空白对照组、经前安片小、中、大三个剂量组、逍遥丸组和卡马西平组。各组的给药剂量及时间均同前。各组在第7天最后一次给药30、60、90、150分钟后，分别将各组小鼠值于水温为55±1℃恒温水槽中预热的不锈钢桶中，将小鼠因受热刺激而舔后足的时间作为痛阈值，观察于末次给药30、60、90和150分钟时的舔足时间。结果见表2。

表2．经前安片对小鼠热板法镇痛能力的影响    甩尾时间：秒

组别   例数 剂量(g/药kg)  给药30分钟    给药60分钟    给药90分钟  给药150分钟空白对照组  10      0          14.0±5.0    14.3±2.9    14.4±3.3     14.3±3.1小剂量组    10     0.24        14.9±2.0    16.8±6.0    18.8±4.8     16.8±5.2中剂量组    10     0.48        18.4±5.9    19.1±4.0    21.1±6.5^*   19.8±4.7#大剂量组    10     0.96        22.1±9.0^** 25.4±8.4^** 24.8±9.1^**  22.8±8.4^**逍遥丸组    10     2.00        15.2±2.4    16 4±4.1    17.8±3.6     15.0±4.1卡马西平组  10     0.067       20.3±5.7^*  22.4±7.2^** 23.6±7.4^**  22.5±4.6

与空白对照组比较：方差分析结果^*P＜0.05 ^**P＜0.01

与逍遥丸组比较：t-检验结果 #P＜0.05

从表2可见，经前安片具有明显提高小鼠因足部受热引起锐痛的镇痛能力，表现为明显延缓疼痛反应的出现，延长因疼痛而引的舔后足时间，即显著提高小鼠的痛阈值。经前安片随着剂量的增加，其镇痛作用显著提高。中剂量组经前安片的镇痛能力明显优于同为中剂量的逍遥丸组(P＜0.05)。结果见图2。

3．扭体试验

取体重范围为20±2g的雌性小鼠60只，按体重随机分成6组，每组10只，分别为空白对照组、经前安片小、中、大三个剂量组、逍遥丸组和卡马西平组。各组的给药剂量及时间均同前。各组在最后一次给药30分钟后，分别对各组小鼠腹腔注射5％乙酸溶液(0.3ml/30g)。记录各组小鼠在腹腔注射乙酸后至出现第1次扭体时的疼痛反应时间及15分钟内的扭体次数。15分钟内没有出现扭体者，第1次出现扭体次数的疼痛反应时间以15分钟计算，扭体次数以0计算。结果见表3。

表3．经前安片对小鼠扭体法镇痛能力的影响组别      例数 剂量(g/药kg)  疼痛反应时间(分)  扭体数(次)空白对照组 10      0           9.57±3.90       7.7±4.3小剂量组   10     0.24         11.97±2.83      3.7±2.3^*中剂量组   10     0.48         12.09±3.88      3.0±3.2^**大剂量组   10     0.96         13.14±2.75^*    2.2±3.0^**逍遥丸组   10     2.00         14.15±1.54^**   1.1±1.5^**卡马西平组 10     0.067        14.63±1.19^**   0.6±1.9^**

与空白对照组比较：方差分析结果^*P＜0.05 ^**P＜0.01

从表3可见，经前安片具有显著地提高小鼠因乙酸引起腹腔钝痛的镇痛能力，表现为明显延缓疼痛反应的出现，显著降低因疼痛引起的扭体次数，即显著提高小鼠的痛阈值。经前安片随着剂量的增加，其镇痛作用显著提高。

二、经前安片对小鼠镇静能力的影响

取体重范围为20±2g的雌性小鼠60只，按体重随机分成6组，每组10只，分别为空白对照组、经前安片小、中、大三个剂量组、逍遥丸组和卡马西平组。各组的给药剂量及时间均同前。各组在最后一次给药30分钟后，分别对各组小鼠腹腔注射戊巴比妥钠50mg/kg。以翻转反射消失及恢复为睡眠指标，记录小鼠注射戊巴比妥钠后的睡眠时间。结果见表4。

表4．经前安片对小鼠镇静能力的影响组别        例数 剂量(g/药kg)    睡眠时间(分)空白对照组  10      0              59.4±17.4小剂量组    10      0.24           75.1±23.4中剂量组    10      0.48           101.3±35.8^**大剂量组    10      0.96           119.1±42.1^**逍遥丸组    10      2.00           80.7±30.6卡马西平组  10      0.067          70.4±26.9

与空白对照组比较：方差分析结果^**P＜0.01

从表4可见，同空白对照组相比，经前安片具有显著地增强小鼠的镇静能力。表现为明显地延长小鼠的睡眠时间，即对小鼠戊巴比妥钠催眠镇静有明显的协同作用。经前安片随着剂量的增加，其镇静作用显著提高。

三、经前安片对大鼠利尿能力的影响

将大鼠置于代谢笼中，按2.5ml/100g体重的剂量预先灌胃37℃温水，2小时内收集的尿量达到所灌入量40％以上的动物可用于利尿试验，选取合格大鼠60只。取体重范围为210±10g的雌性大鼠60只，按体重随机分成6组，每组10只，分别为空白对照组、经前安片小、中、大三个剂量组、逍遥丸组和呋塞米组。空白对照的10只小鼠每天灌胃同体积自来水，经前安片小、中、大三个剂量组的各10只大鼠分别灌胃经前安片0.24、0.48、0.96g药/kg(分别相当于推荐临床用量0.048g药/kg的各5、10、20倍)，逍遥丸组的10只大鼠灌胃逍遥丸2.00g药/kg(相当于推荐临床用量0.20g药/kg的10倍)。除呋塞米组外的各试验组大鼠每日灌胃一次，每次2.0ml，连续给药14天。在给药第13天时，分别将各组大鼠预先放入代谢笼中生活1日，以使大鼠能适应代笼中的生活环境。在给药第14天的下午开始对所有大鼠禁食不禁水18小时。次日晨分别对各组大鼠按2.5ml/100g体重的剂量灌胃37℃生理盐水。1小时后，各剂量组按2.5ml/100g体重的剂量灌胃37℃生理盐水。配制的经前安和逍遥丸，空白对照组灌胃同体积的生理盐水，呋塞米组的10只大鼠此时按2.5ml/100g体重的剂量灌胃37℃生理盐水配制的呋塞米0.02g药/kg(相当于推荐临床用量0.002g药/kg的10倍)。给药后分别轻压大鼠下腹部，排尽膀胱中余尿，然后分别置于代谢笼中(每笼1只)收集4小时尿液，每小时记录一次排尿量，最后用同法压迫下腹部，使尿液排入代谢笼漏斗中。比较各组的排尿量，测定尿液中的pH值，用美国CIBA·CORNING公司产644型Na⁺、K⁺、CI^-分析仪测定尿液中的Na⁺、K⁺、CI^-含量。结果见表5-7。

               表5．经前安片对大鼠排尿量的影响组别       例数  剂量(g/药kg) 给药1小时(ml)   给药4小时总量(ml)空白对照组  10       0        1.284±0.633    3.568±0.772小剂量组    10      0.24      1.729±0.843    3.993±1.532中剂量组    10      0.48      1.825±0.990    4.332±1.483大剂量组    10      0.96      1.900±0.779    4.115±0.867呋塞米组    10      0.02      8.950.±0.737^**11.199±1.226^**逍遥丸组    10      2.00      3.260±1.663^**  5.947±2.525

与空白对照组比较：方差分析结果^**P＜0.01

从表5可见，同空白对照组相比，经前安片具有提高大鼠排尿量的作用趋势。

     表6-1．经前安片对大鼠给药1小时尿液中Na⁺、K⁺、CI^-含量的影响组别       例数  剂量(g/药kg)   Na⁺(mol/L)       K⁺(mol/L)       CI^-(mol/L)空白对照组  10      0          1.251±0.290       0.392±0.163     1.586±0.329小剂量组    10      0.24       1.452±0.566       0.399±±±0.217 1.798±0.814中剂量组    10      0.48       1.360±±0.363     0.675±0.270^*#  2.066±0.501#大剂量组    10      0.96       1.841 ±0.778^*    0.717±0.396^**  2.242±0.702^*呋塞米组    10      0.02       0.484±0.293^**    0.142±0.038^*   0.908±0.360^*逍遥丸组    10      2.00       1.097±0.436^**    5.947±2.525     1.390±0.759

与空白对照组比较：方差分析结果^*P＜0.05,^**P＜0.01

与逍遥丸组比较：t-检验结果#P＜0.05

表6-2．经前安片对大鼠给药2小时尿液中Na⁺、K⁺、CI^-含量的影响组别       例数  剂量(g/药kg)  Na⁺(mol/L)      K⁺(mol/L)      CI^-(mol/L)空白对照组  10      0         0.812±0.398      0.372±0.237    1.627±0.672小剂量组    10      0.24      0.943±0.550      0.366±0.161    1.558±0.709中剂量组    10      0.48      1.448±0392^*     0.551±0.245#   2.271±0.604^*大剂量组    10      0.96      2.091±0.380^**   0.741±0.192^** 2.856±0.277^**呋塞米组    10      0.02      1.223±0.323      0.295±0.076    1.958±0.347逍遥丸组    10      2.00      1.287±0.366      0.379±0.172    1.728±0.784

与空白对照组比较：方差分析结果^*P＜0.05 ^**P＜0.01

与呋塞米组比较：t-检验结果  #P＜0.05

表6-3．经前安片对大鼠给药3小时尿液中Na⁺、K⁺、CI^-含量的影响组别       例数  剂量(g/药kg)  Na⁺(mol/L)     K⁺(mol/L)     CI^-(mol/L)空白对照组  7      0           1.077±0.202    0.439±0.068   1.929±0.273小剂量组    8      0.24        1.031±0.323    0.383±0.139   1.773±0.531中剂量组    6      0.48        1.467±0.568    0.430±0.195   2.215±0.760大剂量组    6      0.96        2.023±0.665^** 0.573±0.142^* 2.673±0.363呋塞米组    10     0.02        1.259±0.242    0.476±0.151   2.208±0.363逍遥丸组    8      2.00        1.706±0.528^*  0.496±0.350   2.258±0.773

与空白对照组比较：t-检验结果^*P＜0.05,^**P＜0.01

从表6可见，同空白对照组相比，经前安片具有显著地提高大鼠尿液中的Na⁺、K⁺、CI^-排放量。中剂量组经前安片促进尿液中Na⁺、K⁺、CI^-排放量的能力明显优于同为中剂量的逍遥丸组或呋塞米组(p＜0.05)。经前安片随着剂量的增加，其足进大鼠尿液中Na⁺、K⁺、CI^-排放量的作用显著提高。

表7．经前安片对大鼠不同给药时间尿液中pH值的影响组别        1小时PH(例数)    2小时pH(例数)  3小时pH(例数)  4小时pH(例数)空白对照组  6.3±0.3(10)     5.9±0.3(10)    5.6±0.2(7)    5.8±0.5(6)小剂量组    5.9±0.4(10)^*   5.9±0.2(10)    5.7±0.3(8)    5.6±0.2(6)中剂量组    6.0±0.3(10)^*   6.0±0.3(10)    5.5±0.2(6)    5.7±0.2(10)大剂量组    6.1±0.4(10)     6.2±0.5(10)    5.7±0.2(6)    5.7±0.5(7)呋塞米组    5.6±0.1(10)^**  5.9±0.5(10)    5.6±0.3(10)   5.6±0.2(3)逍遥丸组    5.9±0.3(10)^*   5.9±0.5(10)    5.8±0.4(8)    5.7±0.2(3)

与空白对照组比较：方差分析结果^*P＜0.05 ^**P＜0.01

从表7可见，同空白对照相比，经前安片具有降落低大鼠尿液PH值的作用。

四、经前安片对大鼠性征发育的影响

1．经前安片对大鼠性器官发育的影响

取体重范围为210±10g的雌性大鼠50只，按体重随机分成5组，每组10只，分别为空白对照组、经前安片小、中、大三个剂量组和逍遥丸组。各组大鼠的给药剂量同前，连续给药30天。各组在最后一次给药30分钟后，分别断头处死大鼠，解剖取子宫和卵巢称重，计算子宫和卵巢的脏器系数。结果见表8。

           表8．经前安片对大鼠性器官发育的影响组别       例数 剂量(g/药kg)    子宫(×10^-3) 卵巢(×10^-3)空白对照组 10      0           1.862±0.518   0.513±0.073小剂量组   10      0.24        1.835±0.514   0.551±0.053中剂量组   10      0.48        1.764±0.380   0.545±0.097大剂量组   10      0.96        1.533±0.271^* 0.471±0.061逍遥丸组   10      2.00        1.875±0.493   0.473±0.064

与空白对照组比较：方差分析结果^*P＜0.05

从表8可见，同空白对照组相比，经前安片具有明显抑制大鼠子宫发育的作用，同时具有抑制大鼠卵巢发育的作用趋势。经前安片随着剂量的增加，其抑制大鼠性器官司发育的作用显著增强。

1．经前安片对大鼠性激素水平的影响

取体重范围为210±10g的雌性大鼠50只，按体重随机分成5组，每组10只，分别为空白对照组、经前安片小、中、大三个剂量组和加味逍遥丸组。各组大鼠的给药剂量同前，连续给药30天。各组在最后一次给药30分钟后，分别断头处死大鼠，取大鼠血清，用国营262厂产FJ-2008G型γ自动免疫计数器测定血液中的睾酮(T)、雌二醇(E₂)、促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、催乳素(PRL)、孕酮(P)、绒毛膜促性腺激素(HCG)含量。结果见表9。

        表9-1．经前安片对大鼠性激素水平的影响组别        例数     T(Pg/ml)       E₂(ng/ml)   E₂/T      FSH(mIU/ml)空白对照组  10  314.3±54.8    1.610±0.366   5.195±1.122  6.14±1.71小剂量组    10  305.8±130.4   1.282±0.348   4.766±2.024  6.24±1.06中剂量组    10  294.8 ±74.2   1.184±0.358   4.175±1.426  5.59±1.30大剂量组    10  288.9±68.9    1.077±0.357   3.902±1.573  6.05±3.72加味逍遥丸组 10  256.9±82.1  1.661±0.362  6.650±2.890  5.73±1.59

         表9-2．经前安片对大鼠性激素水平的影响组别       例数  LH(mIU/ml)   PRL(μIU/ml)  P(ng/ml)      HCG(mIU/ml)空白对照组  10   9.89±1.07   90.62±27.10  7.56±4.84    23.88±2.65小剂量组    10   9.45±1.02   94.31±19.23  9.51±7.08    21.40±2.83中剂量组    10   10.32±1.82  88.24±23.64  8.89±5.26    22.95±4.25大剂量组    10   11.35±0.85  83.10±17.15  12.25±.6.47  24.63±3.27加味逍遥丸组10   10.15±2.98  86.20±28.90  5.60±4.45    20.71±5.03

从表8可见，同空白对照组相比，经前安片具有降低大鼠E₂/T比值的作用趋势。经前安片随着剂量的增加，其降低大鼠E₂/T比值的作用趋势有所增强。结合经前安片明显抑制大鼠性器官发育的作用，提示经前安片具有类雄性激素样的作用。

五、其他

实验期间通过具体观察动物的一般形态、体重、进食及饮水量、排便等情况，各组之间未见明显差异。

讨论

经前安片是在多年临床经验基础上总经出的有效方剂，具有舒肝理气，活血通络的作用，临床上用于妇女经前期紧张综合症效果良好。为评价新药经前安片的有效性，我们进行了有关试验。通过本项工作，发现通过甩尾法、热板法、扭体法镇痛试验，表明经前安片具有显著提高实验动物镇痛能力的作用；通过睡眠法镇静试验，表明经前安片具有显著增强小鼠镇静能力的作用；通过利尿试验，表明经前安片具有提高大鼠排尿量的作用趋势，明显提高大鼠尿液中Na⁺、K⁺、CI^-排放量，同时显著降低大鼠尿液PH值；通过测定大鼠性器官脏器系数，表明经前安片具有明显抑制雌性大鼠性器官发育的作用；通过测定大鼠性激素水平，表明经前安片具有降低大鼠E₂/T比值的作用趋势，提示经前安片具有类雄性激素样作用。经前安片量效关系明显，与阳性对照药逍遥丸、卡马西平、呋塞米(速尿)的药理作用相似，部份指标优于逍遥丸、卡马西平、呋塞米。

综上所述，总结本项工作，经前安片具有如下特点：

1．提高小鼠的镇痛能力。

2．提高小鼠的镇静能力。

3．提高大鼠的排尿量和尿液中Na⁺、K⁺、CI^-排放量，降低大鼠尿液pH值。

4．抑制雌性大鼠性器官发育，提示具有类雄性激素样作用。

5．量效关系明显。

6．与阳性对照药逍遥丸、卡马西平、呋塞米(速尿)的药理作用相似，部分指标优于阳性对照药。

本发明(经前安片)活血化瘀作用的实验研究

药物及动物

一、药物

经前安片由柴胡、枳壳、合欢皮、郁金、香附、橘核、路路通、青皮、当归、白芍、川芎、茯苓等组成，东莞市中亚制药厂提供，药粉呈深棕褐色，含量为16.88g生药/g药粉，0.24g药粉/片，批号970721。经前安片具有舒肝理气，活血通络的作用，临床上用于妇女经前期紧张综合症。

逍遥丸，广东华天宝药厂。批号970603。

二、动物

雌性Wistar种大白鼠，购自中国医学科学院实验动物研究所繁育场，级别为二级，经检疫，动物健康无病，动物合格证书为医动字第01-3008号。

将实验动物于我院二级动物室中饲养观察，动物室合格证书为京动管准字(1996)第009号。

方法和结果

取体重范围为240±10g的雌性Wistar种大鼠50只，按体重随机分成5组，每组10只，空白对照组和模型对照组的各10只大鼠分别灌胃同体积自来水，经前安片小、大二个剂量组的各10只大鼠分别灌胃经前安片0.48、0.96g药/kg(分别相当于推荐临床用量0.048g药/kg的各10、20倍)，阳性对照组的10只大鼠灌胃加味逍遥丸2.00g药/kg(相当于推荐临床用量0.20g药/kg的10倍)。各组用药以水稀释至相应浓度，每天灌胃给药1次，每次2.0ml/250g体重，连续给药14天。在第14天给药30分钟后，除空白对照组外，对余下4组大鼠进行急性血瘀模型的制备。过程为分别对这4组大鼠皮下注射盐酸肾上腺素注射液，济量为10、26μg/kg，二小时后分别将造型大鼠置于0～4℃冰水浴中冷浸5分钟，再二小时后分别对造型大鼠皮下注射同样剂量的盐酸肾上腺素注射液，再过二小时后同样分别将大鼠置于0-4℃冰水浴中冷浸5分钟，完成急性血瘀模型大鼠的制备。随后将所有大鼠禁食(不禁水)过夜，次日晨断头取动脉肝素抗凝血，测定血液流变学指标的改变，观察经前安片对大鼠活血化瘀功能的影响。

用日本东京计器株式会社ELD型椎-板粘度计测定血液粘度。从表1可见，同模型对照组相比，经前安片明显降低急性血瘀模型大鼠的血液粘度。

表1．经前安片对急性血瘀模型大鼠血液粘度的影响    单位：mpa.s

               1.92秒^-1       9.6秒^-1      38.4秒^-1       192秒^-1组别       例数     X±SD           X±SD         X±SD           X±SD空白对照组 10    21.93±3.32^**  15.78±3.99^** 10.03±0.92^** 5.80±0.28^**模型对照组 10    30.71±3.15     25.48±3.41    11.42±0.76    6.33±0.41小剂量组   10    26.71 ±2.45^** 21.22±4.52^*  10.19±1.05^*  5.91±0.25^*大剂量组   10    23.16±2.77^**  18.18±2.15^** 10.03±0.84^** 5.88±0.21^**逍遥丸组   10    25.37±2.57^**  20.31±2.05^** 10.28±1.32^*  5.95±0.39^*

方差分析：与模型对照组比较，^*P＜0.05,^**P＜0.01

用日本KUBOTA KH-120Ⅱ型红细胞压积仪，通过毛细管微量法测定红细胞压积，用温氏常规血沉法测定红细胞沉降率。从表2可见，同模型对照组相比，经前安片明显降低急性血瘀模型大鼠的血浆比粘度(生理盐水与血浆分别通过毛细管时间的比值)、红细胞压积和红细胞沉降率。

表2．经前安片对急性血瘀模型大鼠血浆比粘度和血浆纤维蛋白原的影响

             剂量   血浆比粘度    红细胞压积(％)  红细胞沉降率(mm/h)组别       例数 g药/kg     X±SD          X±SD         X±SD空白对照组 10   0      1.711±0.021^**  40.10±2.39^**  1.80±0.26^*模型对照组 10   0      1.792±0.030     45.05±2.49     2.35±0.47小剂量组   10   0.48   1.732±0.028^**  42.50±2.85    1.95±0.55大剂量组   10   0.96   1.718±0.023^**  40.10±2.72^*  1.80±0.67^*逍遥丸组   10   2.00   1.737±0.035^**  42.60±2.33    1.90±0.57

方差分析：与模型对照组比较，^*P＜0.05,^**P＜0.01

用日本KUBOTA KH-120Ⅱ型高速离心机和测量板，通过毛细管微量热沉法测定血浆纤维蛋白原。用北京普利生集团LBY-BX₂型红细胞聚集仪测定红细胞聚集指数。用江苏省丹阳市电子研究所PAM-3型双通道血小板聚集仪，用比浊法测定通过1.0μmol ADP诱导的血小板聚集率。从表3可见，同模型对照组相比，经前安片明显降低急性血瘀模型大鼠的血浆纤维蛋白原含量、红细胞聚集指数和血小板聚集率。表3．经前安片对血瘀模型大鼠血浆纤维蛋白原、红细胞聚集指数和血小板聚集率的影响

              剂量  血浆纤维蛋白原(g/L)   红细胞聚集指数  血小板聚集率(％)组别       例数  (g药/kg)   X±SD                 X±SD            X±SD空白对照组 10     0      3.28±0.42^**        14.61 ±3.36^**  48.82±5.05^**模型对照组 10     0      3.84±0.20           20.60±2.38      67.16±6.37小剂量组   10     0.48   3.60±0.36           18.76±2.89      59.68±4.73^**大剂量组   10     0.96   3.35±0.42^*         15.84±2.97^**   51.86±4.20^**逍遥丸组   10     2.00   3.55±0.31           17.24±2.64^*    54.20±4.43^**

方差分析：与模型对照组比较，^*P＜0.05,^**P＜0.01

讨论

经前安片是在多年临床经验基础上总结出的有效方剂，具有舒肝理气，活血通络的作用，临床上用于妇女经前期紧张综合症效果良好。为评价新药经前安片活血化瘀作用的有效性，我们进行了有关试验。

中医辩证为血瘀证的患者，在血液变性上具有粘、浓、凝聚的特点。本实验所用急性血瘀动物模型系依据中医关于血瘀证的“暴怒”“寒邪”病因、病机所设计。给大鼠皮下注射大剂量肾上腺素模拟暴怒时机体状态，以冰水浸泡模拟寒邪侵袭，二者综合作用可迅速复制出血液流变性呈粘、浓、凝聚状态的血瘀模型。

通过本项工作，表明经前安片具有显著提高实验大鼠活血化瘀功能的作用。表现为明显降低大鼠的血液粘度和血浆比粘度，使血瘀大鼠血液流变性上“粘”的特点得到明显改善；明显降低大鼠的红细胞压积和红细胞沉降率，使血瘀大鼠血液流变性上“浓”的特点得到明显改善；明显降低大鼠的血浆纤维蛋白原含量、红细胞聚集指数和血小板聚集率，使血瘀大鼠血液流变性上“凝聚”的特点得到明显改善。

经前安片的使用剂量与药效之间具有明显的量效关系。

经前安片具有阳性对照药逍遥丸相似的药效作用。

本发明(经前安片)急性毒性的实验研究

材料和方法

一、药物

经前安片由柴胡、枳壳、合欢皮、郁金、香附、橘核、路路通、青皮、当归、白芍、川芎、茯苓等组成，东莞市中亚制药厂提供，药粉呈深棕褐色，含量为16.88g生药/g药粉，0.24g药粉/片，批号970721。

二、动物

雌性及雌性种昆明种小白鼠，购自中国医学科学院实验动物研究所繁育场，级别为二级，经检疫，动物健康无病，动物合格证书为医动字第01-3001号。于我院二级动物室中饲养观察，动物室合格证书为京动管准字(1996)第009号。

三、方法

将经前安片药粉溶于水中，含量为为0.32g药粉/ml(此为本药可以灌胃给药的最大浓度)。选取体重范围在19±1g的昆明种小白鼠雄、雌性各10只，同性别的10只小鼠合放于一笼，给药前分别对这20只小鼠禁食(不禁水)14小时。按照216.1g生药/kg体重(0.8ml/20g体重)的剂量，分别对20只空腹小鼠经口灌胃给药(此为小鼠胃所能容纳的最大体积)。约药后每笼均加饲料200g。间隔12小时再次给药，24小时内给药2次，每次给药后立即观察小鼠的即刻反应，随后每天观察一次，连续观察7天。实验室温度为22±2℃。

结果和讨论

第1次灌胃给药后，所有小鼠均表现为活动减少，精神不振，卧伏嗜睡，给药2小时前后逐渐恢复正常活动和进食饮水，6小时后有暗褐色药物状大便排出，身体状态恢复正常。间隔12小时后再次给药，剂量同前，小鼠产生症状同上。24小时内给药2小时，小鼠表现均一致，无一只小鼠死亡。对全部存活小鼠连继观察7天，均健康存活，无死亡现象发生，记录7天后的体重和饲料消耗量，见表1。

              表1．小鼠给药前后的体重和饲料消耗量

性别 例数   给药前体重(g) 7天后体重(g)  饲料消耗量(g/7天/10只)

♂    10    18.7±0.4      28.8±1.2     200-30=170

♀    10    18.7±1.1      24.4±0.9     200-49=151

经前安片最大耐受量计算的参考系数如下：

性别 例数   给药途径     给药剂刘(g/生药kg) 死亡数 死亡率(％)

♂    10    经口灌胃    216.1×2次=432.2    0    0

♀    10    经口灌胃    216.1×2次=432.2    0    0

经前安片的最大耐受量＞432.2g生药/kg

相当于推荐临床用量(0.81g生药/kg)的533.6倍以上。

结论

经前安片在最大给药浓度和最大给药体积条件下未测出半数致死剂量。当24小时内给药2次，无一只实验小鼠死亡时，方测出最大耐受量大于432.2g生药/kg，为推荐临床用量的533.6倍以上。证明经前安片作为口服中成药，在正常使用的剂量范围内是安全可靠的。

本发明(经前安片)长期毒性的实验研究

材料和方法

一、药物

经前安片由柴胡、枳壳、合欢皮、郁金、香附、橘核、路路通、青皮、当归、白芍、川芎、茯苓等组成，东莞市中亚制药厂提供，药粉呈深棕褐色，含量为16.88g生药/g药粉，0.24g药粉/片，批号970721。

尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒，北京中生生物工程高技术公司生产，批号971203。

二、动物

雌性及雌性Wistar种大白鼠，体重范围为150±10g，购自中国医学科学院实验动物研究所繁育场，级别为二级，经检疫，动物健康无病，动物合格证书为医动字第01-3008号。于我院二级动物室中饲养观察，动物室合格证书为京动管准字(1996)第009号。

三、方法

大白鼠按体重随机分成四组，分别为对照组、大剂量组、中剂量组和小剂量组，每组20只，10雄10雌，雌雄分开，分别饲养于4个笼中，每笼5只大鼠。大、中、小三个剂量组给药剂量分别为72.90、36.45、14.58g生药/kg，相当于推荐临床用量(0.81g生药/kg)的90、45和18倍，剂距为5.0∶2.5∶1.0。经前安片大、中、小三个剂量组用药以水配制，调成相应浓度。对照组用等量水。大白鼠按1ml/100g体重的给药剂量每日一次经口灌胃，连续给药11周。观察动物服药后的一般状态、行为、皮毛及大小便等情况。每周称量一次体重和进食量，以调节给药剂量。在第11周末次给药24小时后，停止大鼠给药，体检，查血常规。随后将每组大鼠各处死12只(6雄6雌)，每组余下的8只大鼠(4雄4雌)分别饲养于2个笼中，每笼4只。将每组分别处死的12只大鼠取血检查肝肾功能，并取心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、十二指肠、子宫、卵巢等脏器做病理形态学剖检。观察动物因连续用药而产生的毒性反应和严重程度。各组剩余大鼠的8只大鼠停药观察2周，处死后再次检测有关指标，以考察其停药后的发展和恢复情况。数据处理采用方差分析。

实验结果

一、预实验情况

正式实验开始前，取体重范围为150±10g的雄雌性大鼠各10只，以72.90g生药/kg剂量，相当于推荐临床用量(0.81g生药/kg)的90倍，对大白鼠按1ml/100g体重的给药剂量每日一次经口灌胃给药，连续给药一周进行灌胃给药，大鼠未见任何异常，故确定大、中、小三个剂量组给药剂量分别为72.90、36.45和14.58g生药/kg，相当于推荐临床用量(0.81g生药/kg)的90、45和18倍，对大鼠进行长期毒性实验。

二、对一般状态及体重的影响

在给药11周及停药2周后，各组大鼠的行为活泼，皮毛色泽光润，进食饮水正常，大小便未见异常，未见有胃肠反应，各组间无明显差异。从表1可见，各组间每笼内每只大鼠每日的平均进食量在给药期间和停药2周后进食量基本相同，没有明显的统计学差异(P＞0.05)。

表1．经前安片对大鼠进食量的影响    (单位：克)周数          大鼠平均进食量±标准差(笼数)

对照组      小剂量组      中剂量组      大剂量组0 19.8±4.4(4)  18.2±2.5(4)  18.3±3.4(4)  18.6±2.1(4)1 19.9±2.6(4)  19.7±2.8(4)  20.7±5.7(4)  20.0±5.8(4)2 21.8±5.6(4)  21.1±6.4(4)  21.5±6.1(4)  20.0±5.6(4)3 21.6±6.2(4)  21.6±5.9(4)  21.2±5.6(4)  20.0±5.1(4)4 21.7±5.6(4)  21.3±5.7(4)  21.1±5.2(4)  20.6±5.1(4)5 21.7±6.2(4)  21.2±5.4(4)  20.9±6.1(4)  20.9±5.1(4)6 22.2±4.3(4)  22.0±6.0(4)  21.0±5.1(4)  21.0±6.0(4)7 22.1±5.2(4)  22.1±5.4(4)  20.9±4.4(4)  21.2±4.7(4)8  22.4±5.9(4)    21.8±6.2(4)    21.5±5.0(4)    22.1±5.0(4)9  23.7±8.2(4)    23.1±7.2(4)    22.8±8.0(4)    22.5±4.8(4)10 24.2±6.9(4)    23.8±5.1(4)    23.7±7.6(4)    23.7±7.0(4)11 25.5±5.6(4)    25.8±6.6(4)    25.0±6.3(4)    24.5±6.6(4)12 25.6±9.4(2)    26.1±8.3(2)    25.6±4.4(2)    25.1±12.6(2)13 25.4±8.0(2)    26.6±8.3(2)    25.4±2.7(2)    23.5±4.6(2)

三、对体重的影响

在给药11周及停药2周后，随着时间的延续，各组间的大鼠体重均逐渐增加，从表2可见，各组间的大鼠在给药期间和停药2周后体重增长情况基本一致，没有明显的统计学差异(P＞0.05)。

表2．经前安片对大鼠体重的影响    (单位：克)周数         大鼠平均体重±标准差(例数)

      对照组             小剂量组           中剂量组           大剂量组

0    170.9±13.5(20)    169.6±13.1(20)    167.3±12.4(20)    168.4±13.5(20)

1    200.4±15.6(20)    198.7±20.3(20)    198.5±13.8(20)    192.4±18.3(20)

2    231.6±29.8(20)    232.2±35.8(20)    231.4±24.7(20)    224.2±32.4(20)

3    252.5±42.9(20)    252.1±43.4(20)    251.2±31.2(20)    244.6±36.5(20)

4    273.7±49.2(20)    273.0±49.7(20)    266.1±36.0(20)    264.7±41.8(20)

5    281.1±56.1(20)    281.3±60.0(20)    274.4±12.6(20)    272.4±44.5(20)

6    286.8±70.5(20)    285.3±58.3(20)    280.2±47.3(20)    278.7±50.4(20)

7    298.5±71.5(20)    297.3±62.2(20)    294.5±55.2(20)    293.9±55.5(20)

8    309.4±67.3(20)    312.8±71.7(20)    309.6±69.8(20)    310.4±61.4(20)

9    312.1±73.5(20)    315.2±74.3(20)    311.0±70.4(20)    315.1±60.4(20)

10   321.7±80.4(20)    321.8±74.9(20)    318.5±72.4(20)    320.2±65.1(20)

11   319.1±76.2(20)    321.5±77.3(20)    321.9±79.9(20)    321.8±76.7(20)

12   334.0±84.7(8)     330.4±84.6(8)     331.0±67.1(8)     330.8±61.9(8)

13   336.3±91.9(8)     333.6±85.7(8.)    335.0±65.8(8)    331.8±65.8(8)

四、对外周血常规的影响

用日本NIHON KOHDEN公司产血液学分析仪测定大鼠的外周血象。服用经前安片11周后，与对照相比，各组间的红、白细胞数量和血色素含量都无明显差异，均在正常范围之内(P＞0.05)，结果见表3。停药2周后，各组指标与对照组比较亦无明显差异(P＞0.05)，同样在正常范围内，结果见表4。

表3．灌胃经前安片11周后对大鼠血象的影响组别       例数   RBC(×10¹²/L)WBC(×10⁹/L)   HB(g/L)对照组      20    5.23±1.10    10.99±2.10    169.0±19.7小剂量组    20    4.90±1.27    11.06±1.86    170.3±22.9中剂量组    20    4.80±1.11    11.07±1.80    167.9±14.1大剂量组    20    4.50±1.16    11.90±1.70    166.8±12.7

表4．停止灌胃经前安片2周后对大鼠血象的影响组别      例数   RBC(×10¹²/L)WBC(×10⁹/L)   HB(g/L)对照组      8    6.27±0.81    9.90±1.28     176.6±10.3小剂量组    8    6.15±0.84    10.03±1.41    172.6±9.9中剂量组    8    6.13±0.97    10.83±1.64    171.0±7.2大剂量组    8    6.12±0.74    10.86±1.92    174.1±11.8

服用经前安片11周后，与对照组相比，各组间的白细胞分类检查亦未见异常(P＞0.05)，停药2周后，各组指标与对照组比较亦无明显差异(P＞0.05)，结果见表5。

表5．长期灌胃经前安片对大鼠各类白细胞的影响

             灌胃11周后                                停药2周后组别     例数   淋巴(％)     中性(％)   单核  例数   淋巴(％)   中性(％)     单核对照组    20    69.1±6.1    30.3±5.5  ＜2.0   8    69.1±6.0  30.9±4.9    ＜2.0小剂量组  20    68.1±5.7    30.0±6.3  ＜2.0   8    66.8±7.6  32.6±7.0    ＜2.0中剂量组  20    69.0±6.5    30.5±6.8  ＜2.0   8    69.0±7.8  30.0±7.5    ＜2.0大剂量组  20    69.1±6.1    30.2±6.1  ＜2.0   8    68.8±6.7  30.5±6.3    ＜2.0

五、对肝功能的影响

通过比色法，在olympus650型生化自动分析仪上测定大鼠血清谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶(LDH)活性，以检测经前安片对肝功能的影响。从表6可见，与对照组比较，灌胃给药11周后各组的GPT、GOT、LDH活性无明显变化(P＞0.05)。结果见表7。

表6．灌胃经前安片11周后对大鼠肝功能的影响组别    例数    GPT(U/L)    GOT(U/L)    LDH(U/L)对照组    12    52.5±10.6    176.0±18.7    524.8±70.3小剂量组  12    52.3±12.1    173.9±33.2    531.2±93.0中剂量组  12    53.8±12.7    173.9±33.2    551.6±78.6大剂量组  12    52.0±12.2    158.2±39.4    531.0±92.1

表7．停止灌胃经前安片2周后对大鼠肝功能的影响组别     例数    GPT(U/L)    GOT(U/L)     LDH(U/L)对照组    8     63.6±12.4   174.9±28.8   542.3±91.3小剂量组  8     63.8±6.9    177.3±24.4   541.1±66.7中剂量组  8     63.3±19.7   173.5±29.7   547.1±60.9大剂量组  8     62.7±12.2   174.1±22.5   536.0±84.5

六、对肾功能的影响

通过比色法，在olympus650型生化自动分析仪上测定大鼠血清尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)含量，观察经前安片对大鼠肾功能的影响。灌胃给药经前安片11周的大、中剂量组大鼠BUN含量与对照组比较明显降低(P＜0.01)，停药2周后即恢复到对照组水平，三个剂量组与对照组比较均无显著差异(P＞0.05)。而灌胃给药经前安片11周的各剂量组Cr含量与对照组比较无明显区别(P＞0.05)，停药2周后亦无显著差异(P＞0.05)，结果见表8．

表8．长期灌胃经前安片对大鼠肾功能的影响

           BUN(mg％)                            Cr(mg％)组别     例数  灌胃11周后   停药2周后  例数  灌胃11周后   停药2周后对照组    12   24.0±3.1    23.9±2.7   8    0.61±0.12   0.65±0.08小剂量组  12   22.7±4.2    24.3±1.4   8    0.54±0.12   0.66±0.07中剂量组  12   19.4±3.2^** 24.3±2.4   8    0.54±0.09   0.68±0.05大剂量组  12   17.3±3.1^** 24.0±2.4   8    0.53±0.14   0.66±0.05

方差分析：与对照组比较，^**P＜0.01

七、对脏器组织的影响

以对给药11周及停药2周后大鼠的解剖过程中，肉眼仔细观察经前安片对大鼠的心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、睾丸、子宫、卵巢、胃、肠等脏器组织发育的影响，均未见异常，各组间无明显差异。并对以上除胃和肠以外的其它脏器组织进行称重。从表9、表10可见，各剂量组的脏器重量和脏器系数与对照组比较，均无明显差异(P＞0.05)。

表9．长期灌胃经前安片对大鼠各脏器重量的影响(单位：克)

              大鼠脏器重量(例数)脏器  周数    对照组           小剂量组        中剂量组          大剂量组心     11    1.03±0.20(12)   1.06±0.23(12)   1.06±0.23(12)    1.08±0.26(12)

   13    1.09±0.21(8)    1.12±0.15(8)    1.09±0.14(8)     1.06±0.16(8)肝     11    10.6±2.9(12)    11.6±3.1(12)    11.7±3.8(12)     12.2±3.8(12)

   13    12.2±3.5(8)     11.9±3.6(8)     11.2±2.2(8)      11.9±2.6(8)脾     11    0.53±0.12(12)   0.57±0.12(12)   0.56±0.11(12)    0.56±0.15(12)

   13    0.61±0.09(8)    0.58±0.17(8)    0.60±0.12(8)     0.58±0.06(8)肺     11    1.82±0.19(12)   1.84±0.40(12)   1.94±0.35(12)    2.07±0.39(12)

   13    2.05±0.44(8)    1.92±0.29(8)    1.98±0.32(8)     2.11±0.36(8)肾     11    2.16±0.34(12)   2.26±0.38(12)   2.22±0.41(12)    2.34±0.45(12)

   13    2.14±0.29(8)    2.16±0.38(8)    2.18±0.31(8)     2.31±0.39(8)肾上腺 11    0.10±0.02(12)   0.09±0.02(12)   0.10±0.02(12)    0.11±0.02(12)

   13    0.09±0.02(8)    0.10±0.01(8)    0.09±0.01(8)     0.10±0.02(8)胸腺   11    0.37±0.10(12)   0.35±0.10(12)   0.40±0.12(12)    0.39±0.12(12)

   13    0.38±0.07(8)    0.35±0.08(8)    0.41±0.10(8)     0.40±0.09(8)睾丸   11    3.58±0.27(6)    3.61±0.26(6)    3.66±0.33(6)     3.65±0.38(6)

   13    3.88±0.45(4)    3.66±0.42()     3.47±0.26(4)     3.50±0.47(4)子宫   11    0.81±0.38(6)    0.80±0.42(6)    0.67±0.34(6)     0.72±0.20(6)

   13    0.72±0.24(4)    0.69±0.14(4)    0.61±0.20(4)     0.77±0.11(4)卵巢   11    0.16±0.03(6)    0.18±0.06(6)    0.18±0.06(6)     0.16±0.06(6)

   13    0.16±0.02(4)    0.18±0.02(4)    0.14±0.02(4)     0.17±0.02(4)

表10．长期灌胃经前安片对大鼠各脏器系数和影响(单位：克/体重，即×10^-3)

                      大鼠脏器重量(例数)脏器 周数   对照组            小剂量组         中剂量组          大剂量组心    11    3.35±0.32(12)    3.32±0.33(12)   3.30±0.35(12)    3.30±0.27(12)

  13    3.26±0.51(8)     3.21±0.96(8)    3.29±0.32(8)     3.23±0.35(8)肝    11    33.9±2.0.(12)    35.5±3.6(12)    35.9±2.1(12)     36.5±2.8(12)

  13    35.8±2.1(8)      35.3±2.1(8)     33.6±1.3(8)      35.6±1.8(8)脾    11   1.75±0.28(12)   1.78±0.17(12)   1.76±0.27(12)   1.73±0.35(12)

  13   1.79±0.25(8)    1.80±0.30(8)    1.80±0.25(8)    1.78±0.27(8)肺    11   6.09±1.33(12)   5.78±1.15(12)   6.17±1.26(12)   6.57±1.88(12)

  13   6.20±1.15(8)    5.90±0.95(8)    5.99±0.76(8)    5.88±1.96(8)肾    11   7.11±0.80(12)   7.06±0.74(12)   6.99±0.96(12)   7.23±0.69(12)

  13   6.51±1.15(8)    6.61±0.77(8)    6.55±0.55(8)    7.05±0.76(8)肾上腺11   0.36±0.12(12)   0.30±0.10(12)   0.34±0.10(12)   0.34±0.13(12)

  13   0.29±0.11(8)    0.30±0.07(8)    0.28±0.07(8)    0.31±0.10(8)胸腺  11   1.12±0.24(12)   1.14±0.47(12)   1.23±0.24(12)   1.23±0.32(12)

  13   1.20±0.39(8)    1.10±0.32(8)    1.25±0.36(8)    1.24±0.33(8)睾丸  11   9.42±0.75(6)    9.13±0.73(6)    8.92±0.49(6)    9.00±1.07(6)

  13   8.94±1.16(4)    9.05±0.63(4)    8.79±0.21(4)    9.01±0.61(4)子宫  11   2.94±0.89(6)    3.22±1.89(6)    2.71±1.26(6)    2.82±0.70(6)

  13   2.84±0.96(4)    2.62±0.47(4)    2.21±0.65(4)    2.78±0.31(4)卵巢  11   0.65±0.17(6)    0.71±0.26(6)    0.71±0.20(6)    0.65±0.23(6)

  13   0.62±0.12(4)    0.68±0.18(4)    0.52±0.08(4)    0.60±0.06(4)

八、病理形态学检查

将给药11周及停药2周后大剂量组和对照组大鼠断头处死后，肉眼观察心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、十二指肠、胃、睾丸、子宫和卵巢等脏器，二组之间均无明显区别。取给药11周及停药2周后大剂量组和对照组大鼠的心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、卵巢、子宫和十二指肠等脏器，常规取材固定，H-E染色，制片后进行病理组织形态学检查。显微镜下所见，所有大鼠不分组别及是否用药和药量大小，均无明显区别。结果如下：

①对大剂量组给药11周及对照组给水11周后处死动物的心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、卵巢、子宫、十二指肠等脏器进行组织形态学观察，未发现明显的病理性改变，仅个别动物的肺部可见少量炎性细胞浸润，与对照组相比无差异性，表明该药在剂量范围内无毒、副作用。

②对大剂量组停药2周及对照组停水2周后处死动物的心、肝脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、卵巢、子宫、十二指肠等脏器进行组织形态学观察，未发现明显的病理性改变，说明未出现迟缓性毒性反应。

③对照组及大剂量组个别大鼠肺组织出现少量炎细胞浸润和轻度瘀血，考虑为动物长期喂药呛入肺部所致，与药物毒性无关。

对照组和大剂量组各脏器病理显微照片见图1～20。

综上所述：病理形态学观察结果表明，经前安片在给定的剂量范围内使用，对服药大鼠的心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、十二指肠、睾丸、子宫和卵巢等脏器组织均未见毒、副作用。

结论：

通过对经前安片进行长期毒性的实验观察，发现灌胃经前安片11周对实验动物的行为、皮毛、进食饮水、大小便、胃肠、体重和有关脏器的重量、脏器系数及病理改变均无明显影响；对血常规及白细胞分类无明显影响；对肝功能无明显影响；对肾功能的Cr含量无明显影响，而中、大剂量组大鼠的BUN含量明显降低。停药2周后对上述指标进行可逆性变化观察，同对照组比较，中、大剂量组大鼠的BUN含量恢复到正常水平，其它各组间的各项指标亦无明显差异。本实验大、中、小三个剂量组给药剂量分别为72.90、36.45和14.58g生药/kg，相当于推荐临床用量(0.81g生药/kg)的90、45和18倍，大鼠按大、中、小三个剂量组长期灌胃经前安片未见明显毒副作用，大、中剂量组大鼠灌胃经前安片11周后BUN含量明显降低，但停药2周后即可恢复到正常水平。

经前安片治疗经前期综合症临床观察总结

经前安片具有舒肝理气、活血通络之功，用于妇女经前期紧张症由肝郁气滞所致者，自1997年10月至1998年4月我院使用本药观察了60例患者，近期总有效率86.67％，治愈率31.67％，远期有效率为78.33％，同时以逍遥丸做对照观察了30例，近期有效率66.67％，治愈率16.67％，远期有效率46.67％，经统计学处理，p＜0.05，疗效优于对照组，且治疗中未发生不良反应。

现将临床验证结果报告如下：

一、一般情况：

(一)年龄：

     表1．两组年龄分布情况(岁)

     18～  30～  40～50    合计治疗组    32    15    13       60对照组    15    7     8        30

经Ridit分析，p＞0.05，两组年龄无显著性差别。

(二)病程：

    表2．两组病程比较(年、例)

      1～   2～  3～  4～4.5    合计治疗组    32    21    6     2       60对照组    16    10    3     1       30

经Ridit分析，p＞0.05，两组病程无显著性差别。

(三)症状体征：

        表3．两组患者症状体征情况表(例)

    性情急躁  性情低落

                       乳房胀痛   小腹痛   头痛    浮肿

      易怒    抑郁悲伤治疗组    50        10       54         49      43       7对照组    24         6       29         20      19       5

经X²检验，各组症状及体征均无显著性差异(p＞0.05)。

(四)舌脉

表4两组患者舌脉比较表(例)

       舌质         舌苔            脉

  暗   瘀斑  红   黄    白    经    涩   细治疗组50    9    5    50    10    60    9    2对照组28    8    2    26    4     30    2    2

经X2检验，各组症状及体征均无显著性差异(p＞0.05)。

二、病例选择

(一)诊断标准：参照《实用妇产科学》、《临床妇科学》和上海第二医科大学附属广慈医院关于经前期紧张症的诊断标准。

1．西医诊断标准：

(1)症状：经前出现情绪激动、急躁易怒或情绪低落，抑郁悲伤，乳房胀痛，小腹痛或头痛，或有不同程度水肿等。上述症状多出现在月经前3～14天左右，尤以经前2～7天明显，往往数种症状联合出现，具有周期性出现特点。

(2)经后症状自动消失。

(3)妊娠时不发生。

2．中医辩证标准：肝郁气滞症

经前情绪激动、急躁易怒或情绪低落，抑郁悲伤，乳房胀痛，或小腹痛，头痛，或有不同程度水肿，经量或多或少，色暗，舌质暗，脉经等。

(二)病例入选标准：

1．符合上述西医诊断标准者；

2．中医辩证标准属肝郁气滞症者；

3．年龄在14岁至50岁者。

(三)病例排除标准：

1．不符合上述诊断标准与病例入选标准者；

2．对本药过敏者；

3．合并有心血管、肝、肾和造血系统等原发疾病、重度糖病患者；

4．未按规定用药，无法判断疗效或资料不全等影响疗效或安全性判断者。

三、观察方法：

(一)本研究采用随机对照试验的方法，临床设治疗组60例，对照组逍遥丸30例。

(二)给药方法：

1．治疗组：经前安片，口服，每次5片，每日2次，于经前14天开始服药，服至月经来潮停药，连用3个月经周期，随访三个月，判断疗效。

2．对照组：逍遥丸，口服，每次6克，每日2次。服用方法与治疗组相同。

3．治疗组与对照组在用药治疗期间，不得服用其他任何治疗经前期紧张症之药物。

四、观察指标：

1．安全性观察：

(1)一般体检项目；

(2)血、尿、便常规化验；

(3)心、肝、肾功能检查；

(4)注意观察不良反应，认真记录，并说明处理方法。

2．疗效性观察：

(1)临床表现：包括症状，舌、脉变化；

(2)妇科常规检查；

(3)测定基础体温曲线；

(4)经前两周内放免法测血清泌乳素。

五、疗效判断标准：

近期痊愈：

(1)经前症状消失；

(2)恢复排卵或血清泌乳素显著降低。

有效：

(1)经前症状有不同程度改善；

(2)血清泌乳素有不同程度降低；

无效：经前症状及内分泌指标无变化。

随访：疗程结束，停药后判断疗效为近期疗效；停药三个月随访判断疗效为远期疗效。

六、验证结果：

(一)疗效总结：

1．总疗效数比较(近期疗效)

               表5．两组总疗效比较表(例)

    合   痊愈      有效       无效     总有效

    计 例   ％    例   ％   例    ％   例   ％治疗组  60 19  31.67  33  55.00  8  13.33  52  86.67对照组  30  5  16.67  15  53.33  9  30.00  20  66.67

经X2检验，两组总疗效有显著性差异(p＜0.05)。

2．主要症状疗效数比较(见表6)

症状各组经X²检验，治疗后情绪激动、急躁易怒、乳房胀痛、小腹痛或头痛均有显著性差异，而情绪低落、抑郁悲伤及浮肿治疗后两组对照无显著性差异。

                     表6．主要症状恢复情况

                     消失       改善       无效

             合计                                      P值

                    例数(％)   例数(％)    例数(％)性情激动  治疗组  50    12(24.00)  33(66.00)   5(10.00)

                                                     ＜0.005急躁易怒  对照组  24    3(12.50)   9(37.50)    12(50.00)情绪低落  治疗组  10    1(10.00)   6(60.00)    3(30.00)

                                                     ＞0.05抑郁悲泣  对照组  6     0(0.00)    4(66.67)    2(33.33)乳房胀痛

      治疗组    54   21(38.89)  28(51.85)  5(9.30)

                                                      ＜0.025

      对照组    29   5(17.24)   15(51.72)  9(31.03)小腹痛

      治疗组    49   21(42.86)  22(44.90)  6(12.25)

                                                      ＜0.05

      对照组    20    2(10.00)  15(75.00)  3(15.00)头痛

      治疗组    43  18(41.86)   21(48.84)  4(9.30)

                                                      ＜0.05

      对照组    19   2(10.53)   13(68.42)  4(21.05)浮肿

      治疗组    7    0(0.00)     4(57.14)   3(42.86)

                                                      ＞0.05

      对照组    5    0(0.00)     3(60.00)   2(40.00)

3．治疗后舌脉变化。

          表7．两组治疗后舌脉变化表(例)

          疗前异常 疗后异常   复常率(％)

      舌质   55      11       80.00治疗组    舌苔   50      18       64.00

      脉象   60      30       50.00

      舌质   28      14       50.00对照组    舌苔   26      8        69.23

      脉象   30      18       40.00

经X²检验，两组患者治疗后舌质变化有显著性差异p＜0.005。治疗后舌苔，脉象两组比较无显著差异(p＞0.05)。

4．两组远期疗效的比较：

      表8  两组治疗后远期疗效的比较

     合计       有效          无效

               例数(％)       例数(％)治疗组    60       47(78.33)      13(21.67)对照组    30       14(46.67)      16(53.33)

经X²检验，两组患者治疗后随访，远期疗效有显著性差异(p＜0.005)。

5．两组患者治疗前后血清泌乳素检测比较：

      表9．两组患者治疗前后血清泌乳素测值(X±S)

     合计      治疗前         治疗后          随访前治疗组    57    18.74±14.23    14.16±11.76    16.88±12.35对照组    29    19.67±14.27    15.20±14.64    17.96±14.57

经t检验，两组治疗后血清泌乳素均有下降，具有统计学意义(p＜0.05)。治疗前两组比较，血清泌乳素无显著性差异(p＞0.05)。但治疗后两组比较结果有显著性差异(p＜0.05)。但两组治疗后随访，在停药三个月后复测血清泌乳素其变化无统计学意义(p＞0.05)。

(二)安全性检测：

治疗组和对照组所有病例均有治疗前后查肝，肾功能，用药前后测值均正常，治疗过程中无明显不良反应发生，只有一例在服药过程中出现腹痛，未经治疗，三天后痛自行缓解。

(三)典型病例：

陈祥梅，女，19岁，未婚，学生。

11月28日初诊。主诉：经前小腹胀痛一年，近发二天。患者一年来，每次经期前二周出现小腹胀痛，乳痛作胀，情绪波动，急躁易怒，时有头痛，经期前后不定，经色暗红，有小雪块，量中等，经后腹胀头痛，诸症好转，大便正常，小便微黄，舌质暗，苔薄黄，脉弦。

妇科检查：外阴已婚式，宫颈I°糜烂，双侧附件压痛(±)。

实验室检查：血清泌乳素(放免法)32mg/ml，血，尿，粪常规及肝，肾功能均正常。

心电图：窦性心率。

基础体温曲线：双相曲线。

诊断：西医：经前期紧张症。中医：月经前后诸症(肝郁气滞症)。

治疗经过：经前安片5片，每日二次。连服12天，月经来潮停药，第二个月经期前二周，微感小腹部疼痛，乳胀头痛及易于急躁之症均消失，复查血清泌乳素19mg/ml。再服经前安片5片，每日二次。连服14天，月经来潮停药，等第三个月经周期前二周诸症悉除，舌脉恢复正常，继续服药(同上)，复查血清泌乳素10.02mg/ml，停药2个月经周期后，小腹疼痛诸症均未出现。复查血清泌乳素9.8mg/ml。血，尿，粪常规及肝，肾功能均在正常范围。基础体温曲线为双相曲线。

七、小结

经前安片由柴胡、枳壳、合欢皮、郁金、香附、橘核、路路通、青皮、当归、白芍、川芎、茯苓、大腹皮、甘草等14味药组成，具有疏肝理气，活血通络之功，治疗经前期紧张症有较好的疗效。

1．临床实验资料表明：经前安片治疗经前期紧张症近期总有效率86.67％，治愈率31.67％，对照组逍遥丸近期总有效率66.67％，治愈率16.67％，两组疗效有显著性差异，经前安片疗效明显优于逍遥丸。

2．治疗后主要症状如性情急躁易怒，乳房胀痛，小腹痛，头痛的有效率经前安片优于逍遥丸。

3．随访远期疗效，经前安片治疗组有效率78.33％，对照组46.67％，治疗组明显优于对照组。

4．两组治疗后血清泌乳素均有明显下降(p＜0.05)，但经前安片治疗组下降幅度明显大于对照组，但随访后血清泌乳素值两组比较无统计学意义。

5．两组病人均未出现明显的不良反应，说明经前安片服用安全。

本发明具有舒肝理气、活血通络之功效，为治疗行经妇女经前期紧张症的理想药物，且价格适宜，易服用。

Claims (1)

1．一种治疗经前期紧张的药物，其特征在于它的组成成分及各成分的组份为：

柴胡 8～12  枳壳 8～12  合欢皮 6～10  郁金 6～10

香附 6～10  青皮 4～8   路路通 4～8   橘核 4～8

当归 6～10  白芍 6～10  川芎   4～8   茯苓 4～8

大腹皮 4～8  甘草 2～6

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