CN1208064C - 高水合化胞磷胆碱、方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及高水合形式的胞磷胆碱及其制剂，它们具有所希望的特性，包括晶体形成、耐湿性、更高的储存稳定性、以及制剂多样性。本发明还公开了制备胞磷胆碱高水合物的方法及其在制备稳定药物剂型中的应用。

Description

高水合化胞磷胆碱、方法和应用

相关申请

本发明要求于1997年12月24日申请的共同未决的临时申请60/068,733的优先权日的权益，该申请的全文在此并入作为参考。

1、发明领域

本发明涉及胞磷胆碱的新型制剂，该化合物也称为CDP-胆碱或者胞嘧啶二磷酸胆碱。具体而言，本发明公开了新型的、稳定的、高水合的、晶体形式的胞磷胆碱。还描述了制备该胞磷胆碱高水合物的方法，包括其稳定的药物形式和/或制剂。

2、发明背景

胞磷胆碱是式(I)代表的化合物：

胞磷胆碱是无定形的吸湿性粉末，具有治疗用途，例如作为脑保护剂或神经保护剂。具体而言，胞磷胆碱有益于缺血性中风、脑创伤、以及可能的神经变性疾病的患者。另外，胞磷胆碱用于治疗由颅创伤、出血、脑血栓以及动脉粥样硬化引发的脑疾病而产生的无意识(Secades JJ.，CDP-胆碱：药理学和临床综述(CDP-choline：pharmacological and clinicalreview).Methods Find Exp Clin Pharmacol 19995 Oct；17 Suppl B：2-54)。

对于药物应用，胞磷胆碱已配制成溶液剂，适用于非胃肠道给药，通常是静脉给药。但是，目前市售的固体形式的胞磷胆碱还有许多缺陷。市售形式的胞磷胆碱(或其盐，通常为胞磷胆碱钠)的水含量不超过5重量％(相对于胞磷胆碱)，其是通过干燥时水分的丢失或者通过KarlFischer湿度分析法测定的。正常情况下，市售形式的胞磷胆碱钠中的水含量在2-4重量％之间。此等常规固体剂型的胞磷胆碱在暴露于空气湿度时是不稳定的。由于分子的吸湿性，该不稳定性也存在于包含常规胞磷胆碱的固体剂型中，如片剂、胶囊剂等。

因为其对水分敏感，而且所述产品规格都涉及水含量，所以胞磷胆碱必须在特殊的条件下处理，包括低湿度环境，以提供并维持相对较低的水含量。药物产品的制造商必须能够表明他们的最终剂型是稳定的，而且仍在某些声明的规格范围内，包括水含量、硬度和物理完整性。为在正常储存条件下保护该化合物免受湿气的侵害，必须使用特殊的包装材料，包括铝箔囊和装有干燥剂的双层聚乙烯袋。例如，4,861,591号美国专利公开了一种硬明胶胶囊剂，其基本上由几层防潮湿性赋形剂的非透湿性外层组成，其中包胶吸湿性活性成分。

的确，胞磷胆碱钠在成型期间必须用赋形剂包衣，如蓖麻油和滑石，以有助于推迟湿气的吸收。尽管如此，片剂最终还会吸收水分、溶涨并碎裂，限制了产品的寿命。因此，如果不是全部，本领域也是进行了许多努力来防止胞磷胆碱、其盐及其药物制剂不令人希望地暴露于空气中的湿气。现有技术中已使用了各种其他的方法，以得到稳定形式的吸湿性或潮解性药物如胞磷胆碱。

颁于Nakamichi等人的第5,688,510号美国专利公开了用多螺杆挤出剂处理块状物，其中生理惰性的粉末添加剂和大分子的添加剂被添加在不稳定的活性成分中。虽然声称该方法可适用于胞磷胆碱，但其与本发明无关，这是因为其基于完全不同的物理和化学原理。

颁于相同发明人Nakamichi等人的第5,811,547号美国专利披露了另外一种获得稳定药物的方法，其是通过在晶体状态中引入过渡态，其中目的药物由两个独立的区域中通过，这两个区域保持在不同的温度下。而且，所公开的方法与本发明没有任何共同之处，无论在原理还是在设计上。

颁于Nakamachi等人的第3,687,932号美国专利公开了晶体状的CDP-胆碱单水合物，声称在制剂中水含量约为5-6％时该药物是稳定的。但是，其公开的内容没有证实或者提示具有更高水合水平的稳定的晶体形式的胞磷胆碱也有可能存在。的确，所有目前制造的胞磷胆碱剂型所包含的水都不超过5重量％。因此，现有技术中占主导地位的观点是高含量的水会使胞磷胆碱不稳定，而且不能用于制造药物制剂。

因此，提供一种新型而且与目前市售形式相比具有更高稳定性、结构完整性以及其他物理化学、制造或药理学优势的胞磷胆碱、以及其固体片剂、胶囊等固体剂型对于本领域将是一个显著的进步。更具体而言，提供一种在暴露于空气中的湿气时不会产生损坏性后果的胞磷胆碱固体剂型或者其固体剂型具有更高的物理储存稳定性，将使本领域前进一大步。类似地，提供制备此等稳定的晶体形式的胞磷胆碱、以及包含胞磷胆碱的储存稳定的胶囊、片剂、凝胶胶囊等的方法，将是一个深受欢迎的贡献和进步。

此等“稳定化”形式的胞磷胆碱是本发明的发明者发现的。具体而言，本发明提供高水合形式的胞磷胆碱，其显著地消除了常规胞磷胆碱及其常规制剂的缺点。因此，常规胞磷胆碱之药物剂型的较差且有问题的储存特性至少被本发明基本上消除。虽然不希望囿于任何理论，但可理解的是，新发现的高水合形式的胞磷胆碱实质上是胞磷胆碱四水合物。但是，药物组合物可包含少量的或低或高水合形式的胞磷胆碱，如单水合物、二水合物、三水合物等。但由于高度的水含量，这些形式不易于遇到。还应理解的是，胞磷胆碱四水合物是胞磷胆碱的高水合形式，而且这两个术语在以后是可以相互交换使用的。该新形式的胞磷胆碱的优点、以及制备该高水合胞磷胆碱的方法将在以下详细描述。重要的是注意本发明的“稳定化”制剂可通过以下方法来制得：使用高水合形式的胞磷胆碱作为初始成分或者起始物，或者在剂型中掺入足够的总水量，以确保由常规得到的胞磷胆碱作为起始物在原位配制胞磷胆碱高水合物成为所希望制剂。

3、发明简述

本发明涉及以下发现：在有适当量的水存在时，胞磷胆碱形成推定的高水合形式，该形式可产升胞磷胆碱药物的非常稳定的晶体状的制剂。具体而言，本发明涉及固体高水合形式的胞磷胆碱，其水含量不低于约10重量％(w/w)一种固体高水合物形式的胞磷胆碱或其盐，其中水含量不低于10重量％，而且其X射线粉末衍射图谱至少在6、18、24.3和31.2峰位处具有特征衍射峰。在优选的实施方案中胞磷胆碱高水合物的水含量不低于约10.5重量％(w/w)，更优选不低于约11重量％(w/w)，并最优选不低于约12重量％(w/w)。本发明的其他实施方案包括胞磷胆碱的制剂，其中以胞磷胆碱的量计，制剂的水含量在约10-15重量％(w/w)的范围内。在优选的制剂中，水含量的范围是约10.5-14重量％(w/w)，更优选的水含量范围是约11-13重量％(w/w)，最优选的水含量范围是约12-13重量％(w/w)。水含量不低于约10重量％(w/w)的晶体状的胞磷胆碱是优选的，并可用在此所述的方法制备。

另外，根据本发明的高水合胞磷胆碱或其盐还具有在17.5和28.3峰位处的额外峰。

本发现适用于任何胞磷胆碱游离酸、盐或酯。胞磷胆碱的盐可包含由钠、钾、钙、铁、铵、二低级烷基铵、三低级烷基铵组成的离子。优选形式的胞磷胆碱包括但不限于其碱金属或碱土金属盐，优选锂、钠、钾、镁等盐。如果在本发明的制剂中使用胞磷胆碱的钠盐，则水含量的范围在约12-13重量％(w/w)之间是有利的，优选水含量为约12.5重量％(w/w)。

也可使用胞磷胆碱的其他优选盐。例如，可如第4,789,666号美国专利所公开的，使用通过添加磺酸而形成的CDP-胆碱盐。其他的酸加成盐是可以想象的，其中成盐部分是盐酸、氢溴酸、硫酸、乙酸、三氟乙酸、柠檬酸、乳酸、丙二酸、酒石酸、丙烯酸、甲基丙烯酸、苹果酸、马来酸、富马酸、苯甲酸、水杨酸、肉桂酸、甲磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸、烟酸、或者它们合适的组合。该酸加成盐的水含量范围在约12-13重量％之间，优选为约12.5重量％。

其他“酯”形式的CDP-胆碱可用作本发明的优选实施方案。例如，第4,772,463号美国专利公开了共价键结合在包含羧基的聚合物基质上的CDP-胆碱，其是通过可生物降解的酰胺键，其中涉及羧基和CDP-胆碱的芳香核的4位上的NH2基团，和/或通过羧基和核糖的2′和3′位中的OH基团之间的可生物降解的酯基。聚合物基质可选自于以下组中：聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸、聚马来酸、聚氨基酸、或可聚合的酸与丙烯酸或丙烯酰胺的共聚物。该酯形式的胞磷胆碱的水含量范围在约12-13重量％之间，优选为约12.5重量％。

本发明的进一步目的是提供高水合物形式的胞磷胆碱，其基本上至少具有在图4的X射线粉末衍射图谱中所示的用“A”箭头和用“B”箭头标记的峰。本发明的高水合胞磷胆碱优选包含胞磷胆碱钠高水合物或胞磷胆碱钾高水合物。或者，这些高水合物是通过在所希望的制剂中添加足够量的水以便形成高水合物而在原位形成的。

本发明的再一个目的是提供在暴露于潮湿条件时重量变化低于约2％的胞磷胆碱，所述潮湿条件的相对湿度(RH)在约10-80％的范围内。

与本发明的目的一致，所提供的制剂包括胞磷胆碱，其总水含量足以使水的量相对于制剂中胞磷胆碱的重量不低于约10.5％。在本发明中可使用药物学上可接受的载体。其他实施方案包括的制剂是制剂的总水含量足以使水的量相对于制剂中胞磷胆碱的重量不低于约11.5重量％，更优选的是，总水含量足以使水的量相对于制剂中胞磷胆碱的重量不低于约12.5重量％。虽然可以考虑到有许多固体制剂，包括但不限于胶囊、小囊、片剂、丸剂或锭剂，但口服制剂在商业上是更吸引人的。

根据本发明，上述和其他目的可部分地通过制造包含约10-15％(w/w)水的胞磷胆碱片剂的方法来实现，该方法包括：混合胞磷胆碱高水合物和药物学上可接受的赋形剂或者与足够量的水一起混合常规的胞磷胆碱低水合物和药物学上可接受的赋形剂，所述水的量足以在原位形成高水合物。除常规赋形剂外，制剂可包括或不包括选自于以下组中的其他添加剂：粘合剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、防腐剂、抗氧剂、等渗剂、缓冲剂、包衣剂、成粒剂、填料、增量剂、增塑剂、矫正剂、溶解助剂、稀释剂、增稠剂、碱、分散剂、稳定剂、着色剂、遮光剂、甜味剂、遮味剂、或者它们的组合。

本领域普通技术人员由以下详细描述中可更容易地理解本发明的其他目的和优点，其中仅显示和描述了优选实施方案，这些实施方案仅简单地说明了认为是实施本发明的最佳方式。可以理解的是，本发明能够有其他不同的实施方案，而且其细节在不偏离本发明的情况下可有各种明显的改进。因此，附图和描述仅是说明性的，而不是限制性的。以下是更为详细的描述。

4、附图简要描述

图1表示由商品制造商1号得到的胞磷胆碱钠的吸收/解吸等温曲线。

图2表示由商品制造商2号得到的胞磷胆碱钠的吸收/解吸等温曲线。

图3表示由商品制造商3号得到的胞磷胆碱钠的吸收/解吸等温曲线。

图4表示本发明的高水合胞磷胆碱钠的X射线粉末衍射图谱。

图5表示本发明的“湿”制粒法的流程图。

图6表示本发明之高水合胞磷胆碱良好形成的正面体的柱晶。

图7表示晶体状的高水合胞磷胆碱的红外(KBr片)吸收图谱。

5、优选实施方案的详细描述

胞磷胆碱、特别是其碱金属盐是吸湿性的。文献中描述的水合形式的胞磷胆碱是单水合物。例如，颁于Nakamachi等人的第3,687,932号美国专利公开了单水合的CDP-胆碱。有许多市售的胞磷胆碱，包括Takeda、Kuoya、Yamasa(以上都是日本厂商)、Ferrer International(西班牙)、ProBio Sint(意大利)和Sunry(中国)。

所有常规胞磷胆碱的制造商都对胞磷胆碱制订了类似的标准/规格，包括水不超过5重量％的限制。正常情况下，水的量在2-4重量％之间。本发明的发明者已经确认，此等常规形式的胞磷胆碱在暴露于空气的湿气时是不稳定的。的确，人们已经发现，如果未经保护的胞磷胆碱被有目的地长时间暴露于高湿度条件下，其平衡在高水合物状态，其中发现胞磷胆碱高水合物包含约12-12.5％(w/w)的水。在高水合物状态时，分子的吸湿性被抑制，而且其存在更稳定的晶体形式。虽然本发明不想囿于任何理论，但水的百分数“理论上”相应于以前从未被描述过的“四水合物”形式的胞磷胆碱。(“胞磷胆碱钠四水合物”的理论水含量为12.4重量％)

胞磷胆碱四水合物可以高度晶体形式得到(图6)。有可能的是一些或者全部水分子构成结晶水；也就是说，水分子可能部分或者完全包含在晶体晶格中，紧密地与胞磷胆碱分子缔合。还有可能的是，所有或者部分水吸附在并存留在晶体表面上。晶体内的水和吸附在晶体表面上的水的组合当然也是可能的。

随后对胞磷胆碱进行几种评估，以证实分子水合的优选状态。从湿度吸收/解吸等温曲线中得到了一些最有力的证据。等温曲线是由三个市售商品制造商提供的胞磷胆碱钠产生的。三者得到了类似的结果。见图1-3。开始时，低水含量(＜5％)的化合物样品被干燥至恒定平衡重量。经干燥的材料然后缓慢地暴露于更高的相对湿度(RH)，并记录样品重量的变化。在RH低于40％时，胞磷胆碱钠很容易吸收水，而且可以得到低于理论“四水合物”水平的各种水合状态。但是，在RH接近40％RH时，胞磷胆碱就不太容易吸收水，并似乎是不太吸湿性的，达到水含量的表观稳定状态。固体样品的水含量在约10-13％(w/w)、优选约11-13％(w/w)、更优选约12-13％(w/w)时达到平衡。在40-85％RH时，胞磷胆碱钠维持在四水合物状态。在85％以上的RH时，胞磷胆碱钠吸收更高比例的水，并表现出潮解性。

在反方向中(湿度解吸；见三角形等温曲线)，随着RH水平的下降，胞磷胆碱钠容易失去(或者解吸)水，直至样品在四水合物状态时又一次达到平衡(即、约12-13％(w/w)的水)。在约75-80％RH(在高端)至约10％RH(在低端)的范围中可观察到四水合物。因此，解吸等温曲线进一步表明胞磷胆碱的优选水含量是约12-13重量％水。

进行第二评估，其中由商品供应商提供的三种不同的胞磷胆碱样品直接暴露于40℃和75％RH的高温/高湿条件中24和48小时。在各时间间隔时，用Karl Fischer分析法测定水含量百分数。所有样品的结果都证实，胞磷胆碱、特别是胞磷胆碱钠吸收约12.2-12.5重量％的水，并在该水合状态下保持稳定。

得到本发明之胞磷胆碱钠(即、由相同供应商得到的常规胞磷胆碱钠制得的高水合胞磷胆碱的样品)的X射线衍射图谱。本发明之高水合胞磷胆碱的衍射图谱示于图4中。高水合胞磷胆碱的衍射图谱表明与常规胞磷胆碱的X射线衍射图谱(见第3,687,932号美国专利的图2)有显著的差异。峰的位置和/或两个衍射图谱的强度的分析支持所述差异是由于胞磷胆碱的水合状态，而不是存在不同的多晶核形式。的确，“低水合物”还不是晶体，这是因为除偶然某些晶体外，其包含无定形的非晶体(第3,687,932号美国专利中的图1)，而高水合物具有良好的晶体特征。本发明之代表性的胞磷胆碱晶体见图6所示。晶体样品是通过暴露于40℃和75％RH的高温/高湿条件下24和48小时而制得的。然后将晶体分散在硅油中，并用放大10×7倍的偏振光显微镜检查，其中使用交叉的极和第一级补偿器。观察到良好形成的正面体柱形的高水合胞磷胆碱晶体。

因此，术语“高水合物”或“高水合的”在此是用于表示胞磷胆碱的水合状态，其特征是水含量为约10.5-14.5％(w/w)、优选为约11.5-13.5％(w/w)、更优选为约12-13％(w/w)、并最优选为约12.2-12.5％(w/w)。如本发明说明书中其他地方所述，胞磷胆碱的该水合状态基本上由胞磷胆碱四水合物组成。

5.1药物产品制剂

本发明广泛地包括各种药物产品制剂，该制剂包含在此所述的高水合形式的胞磷胆碱或者其促进在制剂内高水合物的原位形成。此等制剂包括使用胞磷胆碱高水合物制备的固体、粉末、晶体、液体、乳剂、混悬剂等剂型。各种剂型当然可以用各种途径给药，其包括但不限于肠道和非胃肠道模式，透皮、透粘膜、阴道、直肠、颊、鼻腔内等模式。更具体的是，本发明包括口服剂型，静脉内、肌肉内、腔内、腹膜内、皮下、鼻腔内、眼内、颅内、心内给药等剂型。胞磷胆碱高水合物的药物剂型可局部、或者通常全身给药。但是，本发明最好是通过用固体剂型给药于患者来使用。

为进行比较，首先描述包含常规胞磷胆碱的片剂的制造。所得片剂在暴露于空气中的湿气时是较不稳定的。一种方法是使用合适的产品包装，以延迟胞磷胆碱药物吸收水分。制造过程需要较低湿度的环境，以确保药品制造商所建议的药物的低水含量。所述方法涉及混合药物和赋形剂，包括脂质、滑石等，然后进行压制步骤以形成片剂。压制步骤产生硬、密实而且良好地呈现如所述的无定形晶体状态的物质。赋形剂有助于延迟水分的吸收。片剂之水含量的最终规格要求不超过8％(w/w)。

接下来，将包含常规胞磷胆碱的片剂暴露于周围条件下。最后，片剂溶涨并破裂。有人发现片剂溶涨并最终破裂的速率和程度取决于测试条件的RH水平。

在本发明的优选实施方案中，制得稳定、立即释放、固体的口服剂型，其包含522.5mg的胞磷胆碱钠(该量等于约500mg的游离酸)。优选的剂型适合于临床应用。与上述相反的是，有意地使常规胞磷胆碱起始物水合化至其平衡状态。实现高水合状态的一种方法是经过湿制粒法。在湿制粒法期间的有效时间中，实现推测性的胞磷胆碱高水合物。除胞磷胆碱钠外还可使用以下赋形剂(每片中以mg为单位)：

胞磷胆碱钠	522.5
		硬脂酸镁	7.8
胶体二氧化硅	3.9
		交联羧甲基纤维素钠	25.0
微晶纤维素	101.1
		玉米淀粉	50.0
总的水	89.7

赋形剂	mg/片	估计残留/吸收的水(％	水的估计mg
				硬脂酸镁	7.8	4.0	0.3
胶体二氧化硅	3.9	2.5	0.1
				交联羧甲基纤维素钠	25.0	10.0	2.5
微晶纤维素	101.1	8.0	8.1
				玉米淀粉	50.0	14.0	7.0
与赋形剂缔合的总水量(mg)＝18.0

根据本发明的发现，1摩尔的胞磷胆碱钠将吸收4摩尔的水。因此，在包含522.5mg无水胞磷胆碱钠的片剂中，药物分子将吸收72mg的水。所以，如上述湿制粒法制得的单个片剂中所包含的纯水的总量为72mg+18mg＝90mg(或89.7mg)。可以控制湿制粒法的干燥时间，以产生每片剂重量中水含量约为11-12％、优选11.6％的水合物质。另一方面，增加干燥时间将使片剂的水含量低于9重量％。其后果是，对于如此“干燥”的样品，需要在制剂中加入额外的水以在原位形成高水合的胞磷胆碱。最佳的水量似乎是约12重量％。本发明的片剂不会随时间溶涨或破裂，具有更高的使用寿命和长期稳定性。

另外，暴露于高湿度环境下3天后，不包含高水合状态的胞磷胆碱的制剂变得非常软(片剂硬度下降至2Kp，表示人们可非常容易地压碎该片剂)，而且表现出溶涨和破裂。相反地，用本发明的湿制粒法制造的制剂没有任何溶涨和/或破裂的迹象，虽然在某些情况下片剂的硬度下降至8.1Kp。优选的是，本发明制剂的硬度保持在约8-15Kp、更优选9-14Kp、最优选10-13Kp的范围内。最重要的是，应随时间基本上保持初始硬度。根据需要可进行最佳化以提供所希望的硬度。再者，本发明的片剂是稳定的。其在长时间中不吸收明显量的水。

5.2胶囊研究

用本发明还可制得整体性和储存稳定性优异的软明胶胶囊。在研究期间进行的实验证明，仅在使药物吸收的水量等于理论的“四水合物”时才能得到最稳定的剂型。的确，如果药物配制成在油基质中的混悬剂，该剂型假设不向药物提供水分，则在老化时，药物将寻求从明胶壳中得到水分。该过程使胶囊变硬、变脆，而且在接缝处破裂。

对于典型的软明胶产品，明胶壳所包含的正常水量为明胶壳重量的6-8％。在填充制剂中可引入各种量的水，优选的填充制剂包含约6.5％(w/w)的水。以下是优选胶囊填料的组成(每胶囊中以mg为单位)，其中高水合胞磷胆碱钠是以悬浮体的形式存在：

胞磷胆碱钠	522.5
		豆油	443.0
Gelucire 44/14	20.0
		卵磷脂	8.0
总水	69.5

水含量是在产品的稳定性评估期间测定的，而且记录到恒定的值，等于约12％(w/w)水(以胞磷胆碱钠的重量计)。本实施例中的Gelucire44/14是聚乙二醇化的甘油酯。也可成功地使用由C8-C18甘油酯和聚乙二醇酯组成的其他Gelucire等价物，如LABRASOL、Gelucire 35/10、Gelucire 37/02、或WL 2514CS。

5.3优选的制造条件

以下进一步描述用于制造包含胞磷胆碱的片剂或胶囊的湿制粒法。作为本发明之优选制造方法的后果，可有意地将药物的水合状态改变为更稳定的状态。具体而言，所得产物的潮解性较低，对环境条件更稳定，而且不需要大量的包装以保护其化学和物理性质。使用合适的混合器或混料机可很好地混合或搀混活性成分、稀释剂、崩解剂、以及其他的赋形剂。合适混合器和混料机的例子包括但不限于行星式混合器、高剪切混合器、或双壳混料机。另外，稀释剂等的例子包括但不限于玉米淀粉、交联羧甲基纤维素钠、微晶纤维素等。然后，所得的粉末物质用合适量的水“湿润”，该量通常超过使胞磷胆碱钠水合至9-15％(w/w)水平所需要的量，并产生合适的稠度。可用粉碎磨机和高剪切混合器筛选湿颗粒。然后例如通过盘式干燥或流化床干燥来干燥湿颗粒。在干燥湿颗粒期间，优选的是保持颗粒中的残留水含量，以使胞磷胆碱钠维持9-15％(w/w)的水含量。通常情况下，湿颗粒干燥至8-12％(w/w)水含量，但这可根据配制片剂所用的赋形剂来变化。

干燥后，使颗粒由筛网中通过或者用粉碎磨机，由此使颗粒的粒径降低。可添加另外的赋形剂/润滑剂，例如交联羧甲基纤维素钠。所得混合物然后用合适的混合器混合物，如行星式混合器或者“V”型混料机。在该步骤可添加合适的润滑剂，其包括但不限于硬脂酸镁和/或二氧化硅。所得颗粒接着被压制成片剂或者填充入胶囊中。图5提供了本发明的湿制粒法的流程图。

在此还提供了另一种制备方法。使胞磷胆碱药物吸收水至约10-15％(w/w)的水平。活性成分吸收水可通过暴露于空气或者环境受控湿度条件下来完成，优选在超过约30％RH的湿度条件下。达到等于约10-15％(w/w)水的水合状态所需要的时间是可以变化的。具体而言，合适的时间取决于相对湿度以及药物的暴露表面积。可用常规实验来测定样品何时达到所希望的水合状态。

一旦药物被水合至足够的水平，可使用合适的混合器或混料机来混合或搀混稀释剂、崩解剂、填料和/或润滑剂。所述混合器或混料机例如是但不限于“V”型混料机、行星式混合器、或双壳混料机。常规赋形剂的例子包括但不限于硬脂酸镁、二氧化硅、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠等。可添加和搀混另外的润滑剂、崩解剂和/或稀释剂，如滑石、硬脂酸镁、二氧化硅、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠等。所得产物对于环境条件是稳定的，而且不需要广泛的包装步骤。

本发明的片剂可包括一种或多种惰性的常规载体和/或稀释剂。如上述已经提到的，其包括但不限于淀粉、玉米淀粉、乳糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、微晶纤维素、磷酸二钙、硬脂酸、硬脂酸镁、聚(乙烯吡咯烷酮)、柠檬酸、酒石酸、黄蓍胶、或明胶、乙氧基化的异硬脂酰基醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨醇酯、氢氧化铝、膨润土、琼脂-琼脂、黄蓍质、交联羧甲基纤维素钠、胶体二氧化硅、以及它们的混合物。

本发明片剂中的惰性常规载体和/或稀释剂可以各种范围的量存在。制备片剂药物时通常使用的其他添加剂也可加入，条件是它们与本发明的目的相一致。

本发明的胶囊可同样地包括惰性载体、载剂和/或稀释剂。优选的载体、载剂和/或稀释剂是例如植物油，如花生油和豆油，卵磷脂，聚氧乙烯硬脂酸酯，水，白蛋白、和Gelucire(甘油酯或脂肪酸的部分聚甘油酯)、以及它们的混合物。油的例子包括但不限于选自于以下组中的脂质：豆油、棉籽油、亚麻子油、芝麻油、玉米油、花生油和葵花油、三油精、三亚油精、三棕榈精、三硬脂精、三肉豆蔻精、三花生精以及胆固醇酯。可以使用其他脂质如磷酯、糖脂、硬脂酰基糖苷、硬脂酰胺、以及二鲸蜡基磷酸酯。在通常情况下，任何多元醇酯和油脂肪酸的甘油酯是可以接受的。

一些优选的疏水性材料可包括单硬脂酸甘油酯；单棕榈酸甘油酯；单硬脂酸甘油酯和单棕榈酸甘油酯的混合物；单亚油酸甘油酯；单油酸甘油酯；单棕榈酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯、单油酸甘油酯和单亚油酸甘油酯的混合物；单亚麻酸甘油酯；单顺-二十碳烯酸甘油酯；单棕榈酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯、单油酸甘油酯的混合物；单亚油酸甘油酯、单亚麻酸甘油酯和单顺-二十碳烯酸甘油酯的混合物；乙酰甘油酯；丙二醇单酯、经蒸馏的单甘油酯、硬脂酰基乳酸钠和二氧化硅的混合物；丙烯单酯、经蒸馏的单甘油酯、硬脂酰基乳酸钠和二氧化硅的混合物；d-α生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯；单和二-甘油酯的混合物；硬脂酰基乳酸钙；乙氧基化单和二甘油酯；乳酸化单和二甘油酯；甘油和丙二醇的乳酰化羧酸酯；长链羧酸的乳酰基酯；长链羧酸的聚甘油酯；长链羧酸的丙二醇单和二酯；硬脂酰基乳酸钠；脱水山梨醇单硬脂酸酯；脱水山梨醇单油酸酯；其他的长链羧酸的脱水山梨醇酯；琥珀酰基化单甘油酯；硬脂酰基单甘油基柠檬酸酯；硬脂酰基庚酸酯；蜡的鲸蜡基酯；硬脂酰基辛酸酯；C10-C30胆固醇/lavosterol酯；以及蔗糖长链羧酸酯或者它们的混合物。

在本发明胶囊中的惰性常规载体和/或稀释剂可以常规的范围存在。其可进一步包含至少一种选自于以下组中的添加剂：赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、湿润剂、乳化剂、防腐剂、抗氧剂、等渗剂、缓冲剂、包衣剂、成粒剂、填料、增量剂、增塑剂、矫正剂、溶解助剂、碱、分散剂、稀释剂、增稠剂、稳定剂、着色剂、遮光剂、甜味剂、以及遮味剂。

本领域技术人员将知晓如何选择具体的在上述添加剂类别范围内的化学物质。例如，分散剂可选自于以下组中：交联羧甲基纤维素钠、淀粉甘醇钠、预明胶化的玉米淀粉和crospovidone。粘合剂可选自于以下组中：羟丙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、以及甲基纤维素，而崩解剂可选自于以下组中：羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钙盐、以及羧甲基纤维素钠。成粒剂和/或甜味剂可选自于以下组中：甘露糖、山梨醇、葡萄糖、蔗糖、和乳糖。增塑剂和/或包衣剂可以是二丁基癸二酸酯和/或各种柠檬酸酯。缓释物质可选自于以下组中：羟丙基甲基纤维素、微晶纤维素、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素钠、低取代的羟丙基纤维素、阿拉伯胶、明胶和紫胶。可水分散的赋形剂可选自于以下组中：晶体纤维素、玉米淀粉、硅酸、硅酸镁、以及硅酸铝。这些添加剂优选为药物惰性的，或者可以具有协同或增加作用，以增强胞磷胆碱的治疗活性。其他化学物质可根据需要来选择。

剂型可包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、粉末剂、细颗粒剂、小球剂、丸剂、含锭、含片、栓剂、安瓿、糖衣片剂、扁囊剂、或锭剂、油膏剂、或囊剂。

胞磷胆碱药物组合物也可以是用于吸入或吹入给药的微细粉末剂型，该剂型可另外包含足够量的支气管扩张药。稳定化的胞磷胆碱还可用于成型为软膏剂、注射液、乳剂、混悬剂、或糖浆剂。还可加入制备胶囊药物中常规使用的添加剂、制剂尺寸和形状，条件是它们与本发明的目的相一致。

6、实施例

以下实施例仅是用于进一步说明本发明，而绝不是对本发明的限制。具体而言，虽然在以下实施例中仅描述了胞磷胆碱钠，但还可使用胞磷胆碱的游离酸、酯或其他盐来制备高水合物形式的胞磷胆碱。此等其他的高水合胞磷胆碱化合物可用于药物制剂中，包括片剂、胶囊、软明胶胶囊等。优选形式的胞磷胆碱是胞磷胆碱的碱金属盐，包但不限于其钠或钾盐。

6.1胞磷胆碱高水合物的制备

如下制备胞磷胆碱高水合物或胞磷胆碱四水合物：将常规胞磷胆碱干燥至无水状态。添加略微超过理论量的水以形成混合物，该混合物在能够控制湿度的混合器中混合。或者，该混合器可装配有喷嘴以提供足够量的水。

在另一种方法中，使常规胞磷胆碱在合适的湿度或潮湿条件下平衡至其高水合状态。然后用胞磷胆碱高水合物形成本发明的稳定制剂。如其他地方所述，在本发明的说明书中，在常规胞磷胆碱的制剂中提供足够量的水，以原位形成胞磷胆碱高水合物，由此可将常规胞磷胆碱成型为本发明的稳定制剂。对于其他易于得到的胞磷胆碱的不同盐，还可参见EP 329627 A2中的描述。

6.2吸收/解析等温曲线的产生

用日本生产商的胞磷胆碱钠形成湿度吸收/解析等温曲线。将胞磷胆碱钠样品干燥至恒定平衡重量。然后使样品缓慢地暴露于更高的相对湿度(RH)，并记录样品的重量变化。结果见图1所示。低于40％RH时，样品明显存在各种水合状态。在接近40％RH时，样品容易吸收水分，并平衡于约12-13％(w/w)水的状态。在40％-85％RH之间，样品保持该状态。高于85％RH时，样品吸收高百分数的水，并表现出潮解性。随着RH降低，样品失去水分，直至其重新达到处于约12-13％(w/w)水的平衡状态。该水平的水含量在直至10％RH时仍保持相对稳定。

6.3另外的湿度吸收/解析研究

根据上述实施例6.2中所述的方法，用欧洲生产商的胞磷胆碱钠形成湿度吸收/解析等温曲线。结果见图2所示。等温曲线表明，该物质的优选水含量是约12-13％水。

6.4另一个湿度吸收/解析研究

根据上述实施例6.2中所述的方法，用远东生产商的胞磷胆碱钠形成湿度吸收/解析等温曲线。结果见图3所示。等温曲线表明，该物质的优选水含量是约12-13％水。

6.5高温/湿度条件下的研究

分别由如上所述的三个生产商得到的胞磷胆碱钠样品直接暴露于40℃/75％RH的高温/湿度条件下共24和48小时。在每个时间间隔时，用Karl Fischer分析技术测定水的百分含量。结果示于表1中。所有样品的结果证明，在上述条件下，常规胞磷胆碱钠样品吸收的水分在12.2-12.5％之间，而且在该状态下保持稳定。

     表1：胞磷胆碱药物的百分水分测试

样品	初始水分％(w/w)	平均％水分(w/w)
				24小时	48小时
		生产商1	2.910			12.53	12.50
生产商2	2.944			12.43	12.53
		生产商3	3.311			12.32	12.20

高温/湿度条件：40℃/75％RH

6.6X射线粉末衍射研究

用本发明的胞磷胆碱钠样品产生X射线粉末衍射图谱，该胞磷胆碱钠样品的水含量为约12.2-12.5％。使用带有铜照射源的Siemens D5000衍射计进行X射线粉末衍射研究。高水合样品的结果见图4所示。“常规”胞磷胆碱钠表现出与结晶度低和无定形之样品一致的X射线粉末衍射图谱。相反地，本发明之胞磷胆碱钠高水合物的X射线粉末衍射图谱与结晶度更高的样品相一致。另外，峰位置的差异似乎更是由于存在不同的水合状态，而不是由于不同的多晶核形式。

胞磷胆碱钠四水合物的X射线衍射图谱见图4所示。至少一些特征性的衍射峰用箭头(A和B)表示。

6.7湿制粒法条件下制得的片剂

使用湿制粒法制造包含552.6mg之胞磷胆碱钠(等于500mg的游离酸)的稳定的、立即释放的、固体口服片剂。其流程图见图5所示。优选的片剂包含以下成分(单位是毫克)：

胞磷胆碱钠	522.5
		硬脂酸镁	7.8
胶体二氧化硅	3.9
		交联羧甲基纤维素钠	25.0
微晶纤维素	120.8
		玉米淀粉	100.0
总的水	98.6

根据本发明还可容易地想到其他片剂，以所希望制剂中胞磷胆碱的量计，其包括的水确保存在足够量的水，其比例为12重量％。

6.8稳定性研究

用实施例6.7的片剂评估稳定性。将片剂直接暴露于高湿度环境(40℃/75％RH)下2周。用本发明之湿制粒法制成的片剂没有显示任何溶涨和/或破裂的迹象。

6.9软明胶胶囊剂

制备软明胶胶囊剂。以胞磷胆碱钠的重量计，最终制剂包含约12％的水。以下是胶囊填充物的组成(每个胶囊中单位是毫克)：

胞磷胆碱钠	522.5
		豆油	459.5
Gelucire 44/14	20.0
		卵磷脂	8.0
纯水	70.0

在胶囊的稳定性评估期间测量水含量，并记录到恒定的值，等于约12％(以胞磷胆碱钠的重量计)。优选的聚乙二醇化的甘油酯是Gelucire44/14。但是，也可使用由C8-C18甘油酯和聚乙二醇酯组成的其他Gelucire等价物，如LABRASOL、Gelucire 35/10、Gelucire 37/02、或WL2514CS。

6.10其他的片剂

使用滚筒压制或湿制粒法制备包含539mg胞磷胆碱钾(等于500mg的游离酸)的片剂。胞磷胆碱药物与乳糖、磷酸二钙和其他赋形剂一起配制。该片剂包括以下成分(每片剂中以毫克为单位)：

胞磷胆碱钾	539
		硬脂酸镁	7.8
胶体二氧化硅	3.9
		交联羧甲基纤维素钠	25.0
微晶纤维素	101.1
		玉米淀粉	50.0
纯水	90.0

在本发明的描述中，公开了许多具体的细节，例如具体的结构、化学品、方法等，以能够充分地理解本发明。但是，本领域普通技术人员将认识到，本发明的实施并不依赖于具体公开的实施例或实施方案。所述具体实施方案的最佳化也是在本领域技术人员的能力范围之内的。还应理解到，本发明能够使用各种组合及环境，包括那些对于比本领域技术人员显而易见的变化和/或改进。本发明不限于所提供的实施例。其仅限于以下的权利要求书。

Claims (26)

1、一种固体高水合物形式的胞磷胆碱或其盐，其中水含量不低于10重量％，而且其X射线粉末衍射图谱至少在6、18、24.3和31.2峰位处具有特征衍射峰。

2、如权利要求1所述的胞磷胆碱或其盐，其中水含量不低于10.5重量％。

3、如权利要求1所述的胞磷胆碱或其盐，其中水含量不低于11重量％。

4、如权利要求1所述的胞磷胆碱或其盐，其中水含量不低于12重量％。

5、如权利要求1所述的胞磷胆碱或其盐，其中水含量的范围是10-15重量％。

6、如权利要求5所述的胞磷胆碱或其盐，其中水含量的范围是10.5-14重量％。

7、如权利要求5所述的胞磷胆碱或其盐，其中水含量的范围是11-13重量％。

8、如权利要求5所述的胞磷胆碱或其盐，其中水含量的范围是12-13重量％。

9、如权利要求1所述的胞磷胆碱或其盐，其中所述盐包括胞磷胆碱的碱金属盐。

10、如权利要求9所述的胞磷胆碱或其盐，其中所述盐包括胞磷胆碱钠。

11、如权利要求9所述的胞磷胆碱或其盐，其中所述盐包括胞磷胆碱钾。

12、如权利要求10所述的胞磷胆碱或其盐，其中水含量的范围是12-13重量％。

13、如权利要求12所述的胞磷胆碱或其盐，其中水含量是12.5重量％。

14、如权利要求1所述的胞磷胆碱或其盐，其中所述胞磷胆碱的盐是包括选自以下组中的盐形成部分的酸加成盐：盐酸、氢溴酸、磺酸、硫酸、乙酸、三氟乙酸、柠檬酸、乳酸、丙二酸、酒石酸、丙烯酸、甲基丙烯酸、苹果酸、马来酸、富马酸、苯甲酸、水杨酸、肉桂酸、甲磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸、或烟酸。

15、如权利要求14所述的胞磷胆碱或其盐，其中水含量的范围是12-13重量％。

16、如权利要求15所述的胞磷胆碱或其盐，其中水含量是12.5重量％。

17、如权利要求1所述的胞磷胆碱或其盐，其中所述胞磷胆碱共价键地连接在包含羧基的聚合物基质上，所述聚合物基质选自于以下组中：聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸、聚马来酸、聚氨基酸、或者可聚合的酸与丙烯酸或丙烯酰胺的共聚物。

18、如权利要求17所述的胞磷胆碱或其盐，其中水含量的范围是12-13重量％。

19、如权利要求18所述的胞磷胆碱或其盐，其中水含量是12.5重量％。

20、如权利要求1所述的高水合胞磷胆碱或其盐，其还具有在17.5和28.3峰位处的额外峰。

21、如权利要求1所述的胞磷胆碱或其盐，其中在暴露于相对湿度为10-80％的湿度条件时的重量变化低于2％。

22、一种包括胞磷胆碱的制剂，其中相对于该制剂中胞磷胆碱的量，总的水含量不低于10.5重量％，而且其X射线粉末衍射图谱至少在6、18、24.3和31.2峰位处具有特征衍射峰。

23、如权利要求22所述的制剂，其中相对于该制剂中胞磷胆碱的量，总的水含量不低于11.5重量％。

24、如权利要求22所述的制剂，其中相对于该制剂中胞磷胆碱的量，总的水含量不低于12.5重量％。

25、如权利要求22所述的制剂，其是片剂、胶囊剂、颗粒剂、粉末剂、小球剂、丸剂、含锭、含片、栓剂、安瓿、糖衣片剂、扁囊剂、囊剂、油膏剂、或锭剂。

26、如权利要求22所述的制剂，其进一步包括选自于以下组中的添加剂：赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、湿润剂、乳化剂、稀释剂、增稠剂、防腐剂、抗氧剂、等渗剂、缓冲剂、包衣剂、成粒剂、填料、增量剂、增塑剂、矫正剂、溶解助剂、碱、分散剂、稳定剂、着色剂、遮光剂、甜味剂、遮味剂、或者它们的组合。

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