CN1202122C - 天然活性蛋白质和肽的分级制备方法 - Google Patents

天然活性蛋白质和肽的分级制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN1202122C
CN1202122C CN 02133463 CN02133463A CN1202122C CN 1202122 C CN1202122 C CN 1202122C CN 02133463 CN02133463 CN 02133463 CN 02133463 A CN02133463 A CN 02133463A CN 1202122 C CN1202122 C CN 1202122C
Authority
CN
China
Prior art keywords
peptide
ultrafiltration
active protein
protein
natural
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
CN 02133463
Other languages
English (en)
Other versions
CN1403471A (zh
Inventor
谢君
张义正
张铭让
张强
徐宁
舒子斌
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Xie Jun
Original Assignee
GUANGDONG OURIKA BIOTECHNOLOGY CO Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by GUANGDONG OURIKA BIOTECHNOLOGY CO Ltd filed Critical GUANGDONG OURIKA BIOTECHNOLOGY CO Ltd
Priority to CN 02133463 priority Critical patent/CN1202122C/zh
Publication of CN1403471A publication Critical patent/CN1403471A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN1202122C publication Critical patent/CN1202122C/zh
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Landscapes

  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

天然活性蛋白质和肽的分级制备方法，其特点是将富含蛋白质的天然原料，经脱脂、清洗并进行匀浆，称取匀浆后的原料100重量份和去离子水100～250重量份加入到生化反应器中，调节pH＝5～8，升温70～90℃，保温搅拌10～30分钟，然后迅速降温至30～50℃；加入复合蛋白酶0.02～0.5重量份，搅拌均匀后，进行酶解反应，获得蛋白质和肽的混合物；通过0.2μm的微孔滤膜去除微粒，采用经OMEGA技术处理的聚醚砜超低蛋白质吸附膜和切向流超滤技术，将酶解后的活性蛋白质和肽进行分级和浓缩，控制操作温度20～30℃，压力0.1～0.25Mpa，pH＝5～7，时间2～5小时；选择超滤膜的截留上限和下限，依次超滤得到不同分级水平分子量和结构的天然活性蛋白质和肽。

Description

天然活性蛋白质和肽的分级制备方法
一、技术领域
本发明涉及一种天然活性蛋白质和肽的分级制备方法，属于生物制品加工领域。
二、背景技术
近年来，蛋白质和肽的研究进展迅速，已从动物、植物、细菌、真菌中分离出了众多的天然生物活性蛋白质和肽。无论从结构和功能来说，天然生物活性蛋白质和肽是自然界中种类、功能最复杂的化合物。大量的研究证实活性蛋白质和肽具有促进免疫、激素、酶抑制剂、抗菌、抗血脂等作用。随着研究的深入，更多的生物活性蛋白质和肽的生理和药理功能已逐渐被人们所确认。
利用天然蛋白质原料所提取的活性蛋白质和肽，其产物是分子量不同的众多蛋白质和肽的混合物，而不同分子结构和分子大小的蛋白质和肽，具有不同的生物活性和功能，其应用也各不相同。若能利用现代分离手段，分离出不同级分的活性蛋白质和肽，将其进一步深加工为具有特殊功能的医药、保健品、美容整形品等，其社会效益、经济效益将会更加显著。因此，按不同的应用目的将天然活性蛋白质和肽进行分级制备，是对天然蛋白质和肽深度开发和利用的重要技术，而至今仍未见到天然活性蛋白质和肽分级的制备方法报道。
三、发明内容
本发明的目的是针对现有技术的不足而提供一种天然活性蛋白质和肽的分级制备方法。其特点是在低温条件下，采用OMEGA技术处理的聚醚砜超低蛋白质吸附膜和切向流超滤技术，以保证天然蛋白和肽的最大限度的活性回收，并可根据天然活性蛋白质和肽不同的用途，自由地获取相应分子量范围的产品。
本发明的目的由以下技术措施实现，其中所述原料份数除特殊说明外，均为重量份数。
天然活性蛋白质和肽的分级制备方法：
1.将富含蛋白质的天然原料，经脱脂、清洗并匀浆后，称取匀浆后的原料100份和去离子水100～250份加入到生化反应器中，调节pH＝5～8，升温70～90℃后保温搅拌10～30分钟，然后迅速降温至30～50℃；加入复合蛋白酶0.02～0.5份，搅拌均匀后，进行酶解反应，获得蛋白质和肽的混合物；
2.将蛋白质和肽的混合物进行适当稀释，通过0.2μm的微孔滤膜去除微粒；
3.采用经OMEGA技术处理的聚醚砜超低蛋白质吸附膜和切向流超滤技术，将酶解后的天然活性蛋白质和肽进行分级和浓缩，切向流超滤的控制操作温度在20～30℃，压力0.1～0.25Mpa，pH＝5～7，时间2～5小时；
4.切向流超滤选择截留上限为100kD，截留下限为50kD超滤膜，经超滤后得到100kD～50kD的活性蛋白质浓缩液；用相应截流上限和下限的超滤膜依次超滤分别得到100kD～50kD、50kD～30kD、30kD～10kD、10kD～5kD、5kD～3kD、3kD～1kD和小于1kD的活性蛋白质和肽的不同浓缩液；
5.将浓缩液冷冻分别保存。
本发明具有如下优点：
1.采用OMEGA技术处理的聚醚砜超低蛋白质吸附膜和切向流超滤技术，运行成本底，生产效率高；
2.采用切向流超滤技术，无相变发生，无致热源导入，不使用有机溶剂，不改变溶液pH值和离子强度，这些都有利于天然蛋白和肽活性的保留；
3.在低温条件下，超低蛋白质吸附膜超滤，最大限度地保证了天然蛋白和肽的的活性回收；
4.根据天然活性蛋白质和肽不同的用途，可自由地选择超滤膜的截留分子量的参数，从而获取相应分子量范围的产品；
5.整个工艺无三废产生，为环境友好的绿色工艺，其产品是安全绿色的。
四、具体实施方式
下面通过实施例对本发明进行具体的描述，有必要在此指出的是以下实施例只用于对本发明进行进一步的说明，但不能理解为对本发明保护范围的限制，该领域的技术熟练人员可以根据上述本发明的内容作出一些非本质的改进和调整。
实施例
1.天然活性胶原蛋白和肽的分级制备方法
(1)将动物皮用3％Na2CO3溶液进行脱脂，用去离子水漂洗3次，进行匀浆，称取匀浆后的原料100千克；与去离子水150千克混合，加入到生化反应器中；调节pH＝7，升温85℃搅拌保持10分钟，迅速降温至40℃；加入复合蛋白酶20克，搅拌均匀后酶解，获得胶原蛋白质和肽的混合物；
(2)通过0.2μm的微孔滤膜去除微粒；然后使用超低蛋白质吸附膜，控制操作温度25℃，压力0.15Mpa，pH＝6，采用切向流技术超滤3小时；
(3)选择截留上限为100kD，截留下限为50kD超滤膜，经超滤后得到100kD～50kD的活性蛋白质浓缩液；依次超滤分别得到100kD～50kD、50kD～30kD、30kD～10kD、10kD～5kD、5kD～3kD、3kD～1kD和小于1kD的活性蛋白质和肽的不同浓缩液；
(4)将浓缩液冷冻分别保存。
2.天然活性卵清蛋白和肽的分级制备方法
(1)将卵清100千克与去离子水100千克，充分混合后加入到生化反应器中；调节pH＝7，升温至40℃；加入20克复合蛋白酶，搅拌均匀后酶解，获得蛋白质和肽的混合物；
(2)通过0.2μm的微孔滤膜去除微粒；然后使用超低蛋白质吸附膜，控制操作温度25℃，压力0.15Mpa，pH＝6，采用切向流技术超滤2小时；
(3)选择截留上限为100kD，截留下限为50kD超滤膜，经超滤后得到100kD～50kD的活性蛋白质浓缩液；依次超滤分别得到100kD～50kD、50kD～30kD、30kD～10kD、10kD～5kD、5kD～3kD、3kD～1kD和小于1kD的活性蛋白质和肽的不同浓缩液；
(4)将浓缩液冷冻分别保存。
3.天然活性大豆或玉米蛋白和肽的分级制备方法
(1)将经过严格检验的大豆或玉米，进行清洗、压榨、脱脂并匀浆，称取匀浆后原料100千克与去离子水100千克混合，加入到生化反应器中；调节pH＝7，升温至40℃；加入25克的复合蛋白酶于生化反应器中，搅拌均匀后酶解，获得的蛋白质和肽的混合物；
(2)通过0.2μm的微孔滤膜去除微粒；然后使用超低蛋白质吸附膜，控制操作温度25℃，压力0.15Mpa，pH＝6～7，采用切向流技术超滤4小时；
(3)选择截留上限为100kD，截留下限为50kD超滤膜，经超滤后得到100kD～50kD的活性蛋白质浓缩液；依次超滤分别得到100kD～50kD、50kD～30kD、30kD～10kD、10kD～5kD、5kD～3kD、3kD～1kD和小于1kD的活性蛋白质和肽的不同浓缩液；
(4)将浓缩液分别冷冻保存。

Claims (1)

1、天然活性蛋白质和肽的分级制备方法，其特征在于：
(1)将富含蛋白质的天然原料，经脱脂、清洗并进行匀浆，称取匀浆后的天然原料100重量份和去离子水100～250重量份加入到生化反应器中，调节pH＝5～8，升温70～90℃，保温搅拌10～30分钟，然后迅速降温至30～50℃，加入复合蛋白酶0.02～0.5重量份，搅拌均匀后，进行酶解反应，获得蛋白质和肽的混合物；
(2)将上述不同分子量的天然活性蛋白质和肽的混合物溶液，通过0.2μm的微孔滤膜去除微粒；
(3)采用OMEGA技术处理的聚醚砜超低蛋白质吸附膜和切向流超滤技术，将酶解后的天然活性蛋白质和肽进行分级和浓缩；
(4)(3)中的切向流超滤的控制操作温度20～30℃，压力0.1～0.25Mpa，pH＝5～7，时间2～5小时；
(5)(3)中的切向流超滤选择截留上限为100kD，截留下限为50kD超滤膜，经超滤后得到100kD～50kD的活性蛋白质浓缩液；用相应截留上限和下限的超滤膜依次超滤分别得到100kD～50kD、50kD～30kD、30kD～10kD、10kD～5kD、5kD～3kD、3kD～1kD和小于1kD的活性蛋白质和肽的不同浓缩液；
(6)将浓缩液冷冻分别保存。
CN 02133463 2002-07-12 2002-07-12 天然活性蛋白质和肽的分级制备方法 Expired - Lifetime CN1202122C (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN 02133463 CN1202122C (zh) 2002-07-12 2002-07-12 天然活性蛋白质和肽的分级制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN 02133463 CN1202122C (zh) 2002-07-12 2002-07-12 天然活性蛋白质和肽的分级制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1403471A CN1403471A (zh) 2003-03-19
CN1202122C true CN1202122C (zh) 2005-05-18

Family

ID=4747207

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN 02133463 Expired - Lifetime CN1202122C (zh) 2002-07-12 2002-07-12 天然活性蛋白质和肽的分级制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN1202122C (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102977184B (zh) * 2012-11-13 2014-07-09 天津耀宇生物技术有限公司 家蚕蚕蛹中30kD蛋白群的纯化方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN1403471A (zh) 2003-03-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101096696B (zh) 从玉米蛋白粉中酶法制取玉米蛋白多肽的工业生产方法
CN109402204B (zh) 一种小球藻免疫活性肽的制备方法
CN1994107A (zh) 一种多肽营养物质的制备方法
CN101096697A (zh) 从禽卵中酶法制取卵蛋白多肽的工业生产方法
CN101869169B (zh) 以鱼下脚料发酵耦合膜技术制备鱼低聚肽的方法
CN101297675B (zh) 从谷朊粉中酶法制取小麦肽的工业生产方法
CN111154824A (zh) 一种高浓度两步酶解获得螺旋藻抗氧化低聚肽的工业生产方法
CN1827773A (zh) 用低次烟叶蛋白制备抑菌肽的方法
CN103849671A (zh) 一种鲭鱼罐头加工副产物酶解制备抗氧化肽的方法
CN102228125A (zh) 海藻活性肽的制备方法
CN1202122C (zh) 天然活性蛋白质和肽的分级制备方法
CN103421868A (zh) 一种金枪鱼皮胶原蛋白小分子肽的制备方法
CN113584108A (zh) 一种脾氨肽的制备方法
CN108396047A (zh) 一种小公鱼免疫调节肽的制备方法
CN112522354A (zh) 一种大米抗氧化活性肽的制备方法
CN110042139A (zh) 一种动物血活性复合肽的制备方法及其应用
CN107022593B (zh) 一种富含脯氨酸多肽的初乳肽及其制备方法
CN104818310A (zh) 一种快速富集水产蛋白酶解液中活性肽的方法
CN101971909A (zh) 从炸茸水中分离制备鹿茸蛋白及其水解物的方法
CN1137270C (zh) 以大豆分离蛋白生产小分子量肽的制备方法及其所用设备
CN1300169C (zh) 一种应用膜分离技术精制羊胎活性成分的方法
CN100537596C (zh) 制备动物胎盘兽用复方氨基酸口服液的方法
CN1226418C (zh) 天然活性蛋白质和肽的分离纯化方法
CN1403583A (zh) 天然活性蛋白质和肽的制备方法
CN112125948A (zh) 一种从植物叶片中同步提取植物多酚和植物蛋白并制备植物蛋白水解肽的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
ASS Succession or assignment of patent right

Owner name: GUANGDONG OU RUI KA BIOLOGICAL ENGINEERING CO., L

Free format text: FORMER OWNER: XINYOU BIOTECHNOLOGY, CO., LTD., CHENGDU CITY

Owner name: XIE JUN

Effective date: 20041217

C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20041217

Address after: 510515, Guangdong, Guangzhou Province Road, Guangzhou Road, Beijing long building, 11 floor

Applicant after: GUANGDONG OURIKA BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd.

Co-applicant after: Xie Jun

Address before: 610031 23A1 building, Dahua building, No. 71, Lime Street, Chengdu, Sichuan

Applicant before: Chengdu Xinyou Biotechnology Co.,Ltd.

C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20081219

Address after: Yuexiu District Guangyuan West Road Guangzhou City No. 121 Meibo Building No. thirty-third first floor zip code: 510410

Patentee after: GUANGZHOU JORBLE BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd.

Address before: Building 11, Beijing long tower, Guangzhou Road, Tonghe Road, Guangdong, Guangzhou Province: 510515

Co-patentee before: Xie Jun

Patentee before: GUANGDONG OURIKA BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd.

ASS Succession or assignment of patent right

Owner name: GUANGZHOU JINNABAO BIOTECHNOLOGY CO., LTD.

Free format text: FORMER OWNER: GUANGDONG OU RUI KA BIOLOGICAL ENGINEERING CO., LTD.

Effective date: 20081219

ASS Succession or assignment of patent right

Owner name: XIE JUN

Free format text: FORMER OWNER: GUANGZHOU JORBLE BIOLOGICAL TECHNOLOGY CO., LTD.

Effective date: 20100709

C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
COR Change of bibliographic data

Free format text: CORRECT: ADDRESS; FROM: 510410 NO.33, GROUND FLOOR, MAIN BUILDING, MEIBOCHENG, NO.121, GUANGYUAN WEST ROAD, YUEXIU DISTRICT, GUANGZHOU CITY TO: 510642 ROOM 505, BUILDING 18, NO.483, WUSHAN ROAD, TIANHE DISTRICT, GUANGZHOU CITY

TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20100709

Address after: 510642, room 18, building 483, No. five, 505 mountain road, Guangzhou, Tianhe District

Patentee after: Xie Jun

Address before: 510410 Guangzhou city Yuexiu District Guangyuan West Road No. 121 Building No. thirty-third the first floor of the United States Bo

Patentee before: GUANGZHOU JORBLE BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd.

C56 Change in the name or address of the patentee

Owner name: GUANGZHOU GREEN VALLEY BIOTECHNOLOGY CO., LTD.

Free format text: FORMER NAME: XIE JUN

CP03 Change of name, title or address

Address after: Plaza 836 No. 510080 Guangzhou Yuexiu District City Dongfeng Road 1 room 1905

Patentee after: Guangzhou ruigu Biological Technology Co.,Ltd.

Address before: 510642, room 18, building 483, No. five, 505 mountain road, Guangzhou, Tianhe District

Patentee before: Xie Jun

ASS Succession or assignment of patent right

Owner name: HUAINAN JIARUI BIOTECHNOLOGY LLC

Free format text: FORMER OWNER: GUANGZHOU GREEN VALLEY BIOTECHNOLOGY CO., LTD.

Effective date: 20150730

C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20150730

Address after: 232002 Anhui Province, Huainan city tianjia'an District National Road West (Ancheng Economic Development Zone)

Patentee after: Huainan Jiarun biotechnology LLC

Address before: Plaza No. 836 Guangzhou Yuexiu District City, Guangdong province 510000 Dongfeng East Road 1 room 1905

Patentee before: Guangzhou ruigu Biological Technology Co.,Ltd.

C56 Change in the name or address of the patentee
CP01 Change in the name or title of a patent holder

Address after: 232002 Anhui Province, Huainan city tianjia'an District National Road West (Ancheng Economic Development Zone)

Patentee after: ANHUI JIARUN BIOTECHNOLOGY CO.,LTD.

Address before: 232002 Anhui Province, Huainan city tianjia'an District National Road West (Ancheng Economic Development Zone)

Patentee before: Huainan Jiarun biotechnology LLC

TR01 Transfer of patent right
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20220216

Address after: 510642 No. five, 483 mountain road, Guangzhou, Guangdong, Tianhe District

Patentee after: Xie Jun

Address before: 232002 Guoqing West Road, tianjia'an District, Huainan City, Anhui Province

Patentee before: ANHUI JIARUN BIOTECHNOLOGY CO.,LTD.

CX01 Expiry of patent term

Granted publication date: 20050518

CX01 Expiry of patent term