CN1403471A - 天然活性蛋白质和肽的分级制备方法 - Google Patents

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天然活性蛋白质和肽的分级制备方法，其特点是将富含蛋白质的天然原料，经脱脂、清洗并进行匀浆，称取匀浆后的原料100重量份和去离子水100～250重量份加入到生化反应器中，调节pH＝5～8，升温70～90℃，保温搅拌10～30分钟，然后迅速降温至30～50℃；加入复合蛋白酶0.02～0.5重量份，搅拌均匀后，进行酶解反应，获得蛋白质和肽的混合物；通过0.2μm的微孔滤膜去除微粒，采用经OMEGA技术处理的聚醚砜超低蛋白质吸附膜和切向流超滤技术，将酶解后的活性蛋白质和肽进行分级和浓缩，控制操作温度20～30℃，压力0.1～0.25MPa，pH＝5～7，时间2～5小时；选择超滤膜的截留上限和下限，依次超滤得到不同分级水平分子量和结构的天然活性蛋白质和肽。

Description

天然活性蛋白质和肽的分级制备方法
一、技术领域
本发明涉及一种天然活性蛋白质和肽的分级制备方法，属于生物制品加工领域。
二、背景技术
近年来，蛋白质和肽的研究进展迅速，已从动物、植物、细菌、真菌中分离出了众多的天然生物活性蛋白质和肽。无论从结构和功能来说，天然生物活性蛋白质和肽是自然界中种类、功能最复杂的化合物。大量的研究证实活性蛋白质和肽具有促进免疫、激素、酶抑制剂、抗菌、抗血脂等作用。随着研究的深入，更多的生物活性蛋白质和肽的生理和药理功能已逐渐被人们所确认。
利用天然蛋白质原料所提取的活性蛋白质和肽，其产物是分子量不同的众多蛋白质和肽的混合物，而不同分子结构和分子大小的蛋白质和肽，具有不同的生物活性和功能，其应用也各不相同。若能利用现代分离手段，分离出不同级分的活性蛋白质和肽，将其进一步深加工为具有特殊功能的医药、保健品、美容整形品等，其社会效益、经济效益将会更加显著。因此，按不同的应用目的将天然活性蛋白质和肽进行分级制备，是对天然蛋白质和肽深度开发和利用的重要技术，而至今仍未见到天然活性蛋白质和肽分级的制备方法报道。
三、发明内容
本发明的目的是针对现有技术的不足而提供一种天然活性蛋白质和肽的分级制备方法。其特点是在低温条件下，采用OMEGA技术处理的聚醚砜超低蛋白质吸附膜和切向流超滤技术，以保证天然蛋白和肽的最大限度的活性回收，并可根据天然活性蛋白质和肽不同的用途，自由地获取相应分子量范围的产品。
本发明的目的由以下技术措施实现，其中所述原料份数除特殊说明外，均为重量份数。
天然活性蛋白质和肽的分级制备方法：
1.将富含蛋白质的天然原料，经脱脂、清洗并匀浆后，称取匀浆后的原料100份和去离子水100～250份加入到生化反应器中，调节pH＝5～8，升温70～90℃后保温搅拌10～30分钟，然后迅速降温至30～50℃；加入复合蛋白酶0.02～0.5份，搅拌均匀后，进行酶解反应，获得蛋白质和肽的混合物；
2.将蛋白质和肽的混合物进行适当稀释，通过0.2μm的微孔滤膜去除微粒；
3.采用经OMEGA技术处理的聚醚砜超低蛋白质吸附膜和切向流超滤技术，将酶解后的天然活性蛋白质和肽进行分级和浓缩，控制操作温度在20～30℃，压力0.1～0.25Mpa，pH＝5～7，时间2～5小时；
4.选择截留上限为100kD，截留下限为50kD超滤膜，经超滤后得到100kD～50kD的活性蛋白质浓缩液；依次超滤分别得到100kD～50kD、50kD～30kD、30kD～10kD、10kD～5kD、5kD～3kD、3kD～1kD和小于1kD的活性蛋白质和肽的不同浓缩液；
5.将浓缩液冷冻分别保存。
本发明具有如下优点：
1.采用OMEGA技术处理的聚醚砜超低蛋白质吸附膜和切向流超滤技术，运行成本底，生产效率高；
2.采用切向流超滤技术，无相变发生，无致热源导入，不使用有机溶剂，不改变溶液pH值和离子强度，这些都有利于天然蛋白和肽活性的保留；
3.在低温条件下，超低蛋白质吸附膜超滤，最大限度地保证了天然蛋白和肽的的活性回收；
4.根据天然活性蛋白质和肽不同的用途，可自由地选择超滤膜的截留分子量的参数，从而获取相应分子量范围的产品；
5.整个工艺无三废产生，为环境友好的绿色工艺，其产品是安全绿色的。
四、具体实施方式
下面通过实施例对本发明进行具体的描述，有必要在此指出的是以下实施例只用于对本发明进行进一步的说明，但不能理解为对本发明保护范围的限制，该领域的技术熟练人员可以根据上述本发明的内容作出一些非本质的改进和调整。
实施例
1.天然活性胶原蛋白和肽的分级制备方法
(1)将动物皮用3％ Na2CO3溶液进行脱脂，用去离子水漂洗3次，进行匀浆，称取匀浆后的原料100千克；与去离子水150千克混合，加入到生化反应器中；调节pH＝7，升温85℃搅拌保持10分钟，迅速降温至40℃；加入复合蛋白酶20克，搅拌均匀后酶解，获得胶原蛋白质和肽的混合物；
(2)通过0.2μm的微孔滤膜去除微粒；然后使用超低蛋白质吸附膜，控制操作温度25℃，压力0.15Mpa，pH＝6，采用切向流技术超滤3小时；
(3)选择截留上限为100kD，截留下限为50 kD超滤膜，经超滤后得到100kD～50kD的活性蛋白质浓缩液；依次超滤分别得到100kD～50kD、50kD～30kD、30kD～10kD、10kD～5kD、5kD～3kD、3kD～1kD和小于1kD的活性蛋白质和肽的不同浓缩液；
(4)将浓缩液冷冻分别保存。
2.天然活性卵清蛋白和肽的分级制备方法
(1)将卵清100千克与去离子水100千克，充分混合后加入到生化反应器中；调节pH＝7，升温至40℃；加入20克复合蛋白酶，搅拌均匀后酶解，获得蛋白质和肽的混合物；
(2)通过0.2μm的微孔滤膜去除微粒；然后使用超低蛋白质吸附膜，控制操作温度25℃，压力0.15Mpa，pH＝6，采用切向流技术超滤2小时；
(3)选择截留上限为100kD，截留下限为50kD超滤膜，经超滤后得到100kD～50kD的活性蛋白质浓缩液；依次超滤分别得到100kD～50kD、50kD～30kD、30kD～10kD、10kD～5kD、5kD～3kD、3kD～1kD和小于1kD的活性蛋白质和肽的不同浓缩液；
(4)将浓缩液冷冻分别保存。
3.天然活性大豆或玉米蛋白和肽的分级制备方法
(1)将经过严格检验的大豆或玉米，进行清洗、压榨、脱脂并匀浆，称取匀浆后原料100千克与去离子水100千克混合，加入到生化反应器中；调节pH＝7，升温至40℃；加入25克的复合蛋白酶于生化反应器中，搅拌均匀后酶解，获得的蛋白质和肽的混合物；
(2)通过0.2μm的微孔滤膜去除微粒；然后使用超低蛋白质吸附膜，控制操作温度25℃，压力0.15Mpa，pH＝6～7，采用切向流技术超滤4小时；
(3)选择截留上限为100kD，截留下限为50kD超滤膜，经超滤后得到100kD～50kD的活性蛋白质浓缩液；依次超滤分别得到100kD～50kD、50kD～30kD、30kD～10kD、10kD～5kD、5kD～3kD、3kD～1kD和小于1kD的活性蛋白质和肽的不同浓缩液；
(4)将浓缩液分别冷冻保存。

Claims (1)

1、天然活性蛋白质和肽的分级制备方法，其特征在于：
(1)将富含蛋白质的天然原料，经脱脂、清洗并进行匀浆，称取匀浆后的天然原料100重量份和去离子水100～250重量份加入到生化反应器中，调节pH＝5～8，升温70～90℃，保温搅拌10～30分钟，然后迅速降温至30～50℃，加入复合蛋白酶0.02～0.5重量份，搅拌均匀后，进行酶解反应，获得蛋白质和肽的混合物；
(2)将上述不同分子量的天然活性蛋白质和肽的混合物溶液，通过0.2μm的微孔滤膜去除微粒；
(3)采用OMEGA技术处理的聚醚砜超低蛋白质吸附膜和切向流超滤技术，将酶解后的天然活性蛋白质和肽进行分级和浓缩；
(4)控制操作温度20～30℃，压力0.1～0.25Mpa，pH＝5～7，时间2～5小时；
(5)选择截留上限为100kD，截留下限为50kD超滤膜，经超滤后得到100kD～50kD的活性蛋白质浓缩液；依次超滤分别得到100kD～50kD、50kD～30kD、30kD～10kD、10kD～5kD、5kD～3kD、3kD～1kD和小于1kD的活性蛋白质和肽的不同浓缩液；
(6)将浓缩液冷冻分别保存。
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