CN1202069C - 一种二萜单体化合物在制备抗癌药物中的应用 - Google Patents
一种二萜单体化合物在制备抗癌药物中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1202069C CN1202069C CN 03112707 CN03112707A CN1202069C CN 1202069 C CN1202069 C CN 1202069C CN 03112707 CN03112707 CN 03112707 CN 03112707 A CN03112707 A CN 03112707A CN 1202069 C CN1202069 C CN 1202069C
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- diterpene compound
- anticancer
- type diterpene
- kaur
- compound
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
一种抗癌药物贝壳杉烷型二萜化合物，它是从光叶番荔枝茎中提取得到的抗癌单体化合物，其制备方法是首先将风干的光叶荔枝茎粉碎后用乙醇提取，浓缩得浸膏；其次，再用氯仿提取，经柱层析，用洗脱剂脱洗后再柱层析；最后再用洗脱剂脱洗而得到贝壳杉烷型二萜化合物，经抗癌药理实验，对食管癌细胞，人肝癌细胞的生长有明显的抑制作用，并具有高效低毒、毒副作用小、抗癌谱广、抗癌活性高等优点。
Description
一、技术领域
本发明涉及一种抗癌药物及其制法，具体地说是以光叶番荔枝为原料提取的一种抗癌活性物质贝壳杉烷型二萜化合物及其制备方法。
二、背景技术
癌症是危害人类健康的大敌。我国每年新发癌症病例约有160万人，每年死于癌症的约有130万人，全国因癌症而死亡的人数逐年上升，我国为肝癌、胃癌、食管癌、乳腺癌、肺癌等癌症的高发区域，癌症死亡率居高不下。
目前尚无有效的药物治愈大多数癌症患者。化疗药物对癌症虽有一定疗效，但毒副作用大，中成药对癌症的疗效普遍较低，如参莲胶曩对肺、胃癌的癌灶缓解率为3.5％，软坚口服液对肝癌的癌灶缓解率为6.0％，疗效均不理想。
本发明人研究了光叶番荔枝(又名圆滑番荔枝，Annona glabra Linn)的根皮或树皮、或枝叶、或种子、或者它们的混合物的乙醇提取物的制剂，经动物试验表明对动物移植性肉瘤S180和肝癌H22均有显著的体内抗癌治疗效果，(见中国专利，抗癌药物光叶番荔枝浸膏及其制法，申请号为：01108285.2)。在上述基础上，本发明人又从浸膏中提取出抗癌单体化合物(活性成分)。
三、发明内容
1、发明目的：本发明的目的是提供一种高效低毒、抗癌谱广的抗癌单体化合物，具体地说是以光叶番荔枝为原料提取的一种贝壳杉烷型二萜化合物及其在制备治疗肝癌、食管癌的药物方面的应用。
2、技术方案：本发明人在现有技术的基础上又作了进一步的研究，发现光叶番荔枝茎叶的浸膏中其抗癌的活性成分主要是本发明的贝壳杉烷型二萜化合物。并经资料查阅目前还没有文献报道贝壳杉烷型二萜化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid用于抗肝癌、食管癌等癌症的治疗。本发明从光叶番荔枝(又称圆滑番荔枝，Annona glabra Linn)中提取的一种贝壳杉烷型二萜化合物，它是ent-kaur-16-en-19-oic acid，其分子式为C20H30O2，化学结构式如下：
一种贝壳杉烷型二萜化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid的制备方法，其步骤是：
A、将风干的光叶番荔枝茎粉碎后用乙醇加热提取，回收乙醇然后将提取液浓缩，得浸膏；
B、把浸膏再用氯仿提取，得氯仿提取液；
C、将氯仿提取液进行硅胶(100-200目)柱层析，用3000ml石油醚-氯仿(2∶1)为洗脱剂A洗脱，得到提取物；
D、将步骤C中所得的提取物再进行硅胶(200-300目)柱层析，用3000ml石油醚-乙酸乙脂(100∶2)为洗脱剂B，得到首先洗脱下的化合物即为本发明的贝壳杉烷型二萜化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid。它可以用乙酸乙酯重结晶纯化。
本发明涉及一种贝壳杉烷型二萜化合物在制备治疗肝癌的药物方面的应用。
采用常规MTT法。取对数生长期SMMC-7721肝癌细胞，用完全培养液调整细胞浓度为5×105/ml，接种细胞于96孔板(5×104/孔)，24h后实验组分别加入化合物终浓度为10umol/L、20umol/L、40umol/L、80umol/L、160umol/L，另设无药物(含配制药物的乙醇)培养液和空白对照孔(同时作3个板)，每个浓度设9个复孔(分3次重复)。加药后将96孔板置于CO2温箱37℃培养。加药培养72h后，每孔加入5mg/mlMTT试剂10ul，继续培养4h，再加入DMSO100ul，放震荡器震荡15min，用酶标仪(λ570nm)测每孔OD值。抑制率(％)＝(对照孔OD值-实验组OD值)/对照孔OD值×100％。
实验结果表明，随贝壳杉烷型二萜化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid浓度的升高，对人肝癌细胞的抑制率也升高，二萜化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid在10umol/L以上剂量对人肝癌细胞生长均有明显的抑制作用，其中160umol/L浓度的抑制作用最高，其抑制率达80.49％。
本发明涉及一种贝壳杉烷型二萜化合物在制备治疗食管癌的药物方面的应用。
采用MTT法测定光叶番荔枝贝壳杉烷型二萜化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid(用无水乙醇配制)对食管癌细胞生长抑制作用。取对数生长期的食管癌细胞调整至1×105/ml，0.2ml接种于96孔板上，置37□、5％CO2培养24h后弃原培养液，加入含不同浓度光叶番荔枝贝壳杉烷型二萜化合物培养液各0.2ml(每种单体设7个浓度)，每个浓度设9个复孔(分3次重复)，并设无药物(含配制药物的乙醇)培养液和空白对照孔(同时作3个板)。作用24h后倾去上清液，各孔加入MTT0.1ml，37□4h后吸去上清液，加入DMSO0.1ml于各孔，30min后上酶标仪570nm处测OD值。抑制率(％)＝(对照孔OD值-实验组OD值)/对照孔OD值×100％。
实验结果表明，随光叶番荔枝贝壳杉烷型二萜化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid浓度的升高，对食管癌细胞的抑制率也升高，二萜化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid在0.25×10-7mol/L以上剂量对食管癌细胞生长有明显抑制作用，其中1×10-7mol/L剂量的抑制作用最高，其抑制率达60.42％。
根据本发明人的研究，光叶番荔枝贝壳杉烷型二萜化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid可以用于制备抗肝癌或抗食管癌药物。
3、有益效果：本发明的贝壳杉烷型二萜化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid是从植物光叶番荔枝中提取的抗癌单体化合物，毒副作用小，抗癌谱广，对癌细胞有很明显的抑制作用。本发明的贝壳杉烷型二萜化合物经抗癌药理实验，结果表明其抗癌活性高。光叶番荔枝贝壳杉烷型二萜化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid在0.25×10-7mol/L浓度以上，对食管癌细胞生长有明显的抑制作用，在1×10-7mol/L剂量时抑制作用最高，其抑制率达60.42％；在10umol/L以上剂量对人肝癌细胞生长均有明显抑制作用，其中160umol/L剂量的抑制作用最高，其抑制率达80.49％。
四、具体实施方式
实施例1：光叶番荔枝贝壳杉烷型二萜化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid提取方法
①光叶番荔枝植物样品采自海南，经自然风干后粉碎，粉碎的光叶番荔枝茎3.5kg，用95％的酒精3000ml回流提取，回收乙醇后浓缩得浸膏300g；
②将浸膏再用氯仿提取，得到氯仿提取液；
③将氯仿提取液，经硅胶(100-200目，2kg)进行柱层析，以3000ml石油醚-氯仿(2∶1)为洗脱剂A，得到提取物部分；
④将提取物再用硅胶(200-300目)300g进行柱层析，以3000ml石油醚-乙酸乙酯(100∶2)为洗脱剂B进行洗脱，每50ml洗脱液为一个单位分别接受，将洗脱液分别作硅胶薄板层析，薄板喷香草醛硫酸溶液后在105℃下加热3分钟显色，合并相同的洗脱液，最先洗脱下的化合物即为本发明的贝壳杉烷型二萜化合物ent-kaur-16-en-19-oicacid。
实施例2：贝壳杉烷型二萜化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid结构鉴定：
ent-kaur-16-en-19-oic acid为无色块状结晶，易溶于氯仿、乙酸乙酯、丙酮等有机溶剂，熔点166-169℃(CHCI3)。1H NMR提示ent-kaur-16-en-19-oic acid为贝壳杉烷型二萜化合物。分子式C20H30O2，其化学结构式如下：
实施例3：ent-kaur-16-en-19-oic acid的抗食管癌作用
1、细胞培养与单体化合物
食管癌细胞株(Eca-109)由南京中医药大学微生物教研室提供。细胞培养于199培养液中，内加10％小牛血清，培育在37℃、5％CO2培养箱内。单体化合物是经化学结构鉴定的光叶番荔枝二萜化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid。
2、实验方法
采用MTT法测定光叶番荔枝二萜化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid(用无水乙醇配制)对食管癌细胞生长抑制作用。取对数生长期的食管癌细胞调整至1×105/ml，0.2ml接种于96孔板上，置37℃、5％CO2培养24h后弃原培养液，加入含不同浓度光叶番荔枝二萜化合物培养液各0.2ml(每种单体设7个浓度)，每个浓度设9个复孔(分3次重复)，并设无药物(含配制药物的乙醇)培养液和空白对照孔(同时作3个板)。作用24h后倾去上清液，各孔加入MTT0.1ml，37℃4h后吸去上清液，加入DMSO0.1ml于各孔，30min后上酶标仪570nm处测OD值。抑制率(％)＝(对照孔OD值-实验组OD值)/对照孔OD值×100％。
3、实验结果
结果如表1显示，随光叶番荔枝二萜化合物浓度的升高，对食管癌细胞的抑制率也升高，二萜化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid在0.25×10-7mol/L以上剂量对食管癌细胞生长有明显抑制作用。
表1 光叶番荔枝二萜化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid对食管癌细胞生长抑制作用(n＝9)
药物 浓度(mol/L) OD值(A±S) 抑制率(％)
0 0.331±0.011 0.0
二萜化合物 1×107 0.131±0.006** 60.42
0.5×10-7 0.190±0.008* 42.60
0.25×10-7 0.229±0.005* 30.82
*P＜0.05，**P＜0.01与对照组比较
实施例4：二萜化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid的抗肝癌作用
1、细胞培养与化合物：
将人肝癌细胞株SMMC-7721常规培养于含10％灭活小牛血清、100U/ml青霉素和100ug/ml链霉素的RPM11640培养液中，置饱和湿度、37℃的5％CO2温箱培养。单体化合物是经化学结构鉴定的光叶番荔枝二萜化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid。
2、实验方法：
采用常规MTT法。取对数生长期SMMC-7721细胞，用完全培养液调整细胞浓度为5×105/ml，接种细胞于96孔板(5×104/孔)，24h后实验组分别加入二萜化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid终浓度为10umol/L、20umol/L、40umol/L、80umol/L、160umol/L，另设无药物(含配制药物的乙醇)培养液和空白对照孔(同时作3个板)，每个浓度设9个复孔(分3次重复)。加药后将96孔板置于CO2温箱37℃培养。加药培养72h后，每孔加入5mg/mlMTT试剂10ul，继续培养4h，再加入DMSO100ul，放震荡器震荡15min，用酶标仪(λ570nm)测每孔OD值。抑制率(％)＝(对照孔OD值-实验组OD值)/对照孔OD值×100％。
3、实验结果
结果如表2显示，随光叶番荔枝二萜化合物浓度的升高，对人肝癌细胞的抑制率也升高，二萜化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid在10umol/L以上剂量对人肝癌细胞生长均有明显抑制作用。
表2 光叶番荔枝二萜化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid对肝癌细胞生长的抑制作用(n＝9)
药物 浓度(umol/L) OD值(A±S) 抑制率(％)
0 1.435±0.132 0.0
二萜化合物 10 0.983±0.084* 31.50
20 0.831±0.096** 42.09
40 0.734±0.057** 48.85
80 0.465±0.023** 67.60
160 0.280±0.031** 80.49
*P＜0.05，**P＜0.01与对照组比较
Claims (2)
1、一种二萜单体化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid在制备治疗抗食管癌药物中的应用。
2、一种二萜单体化合物ent-kaur-16-en-19-oic acid在制备治疗肝癌药物中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 03112707 CN1202069C (zh) | 2003-01-17 | 2003-01-17 | 一种二萜单体化合物在制备抗癌药物中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 03112707 CN1202069C (zh) | 2003-01-17 | 2003-01-17 | 一种二萜单体化合物在制备抗癌药物中的应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1431187A CN1431187A (zh) | 2003-07-23 |
| CN1202069C true CN1202069C (zh) | 2005-05-18 |
Family
ID=4790262
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 03112707 Expired - Fee Related CN1202069C (zh) | 2003-01-17 | 2003-01-17 | 一种二萜单体化合物在制备抗癌药物中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN1202069C (zh) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1900046B (zh) * | 2005-07-20 | 2011-03-30 | 北京华医神农医药科技有限公司 | 贝壳杉烷型二萜化合物及其制备方法与应用 |
| CN101633609B (zh) * | 2009-08-12 | 2013-11-06 | 曹庸 | 一种从山莓叶中分离出的新化合物、制备方法及用途 |
| CN101974046B (zh) * | 2010-10-14 | 2013-04-24 | 江苏先声药物研究有限公司 | 一种新的天然对映贝壳杉烷衍生物及其制备方法和用途 |
| BRPI1015495B1 (pt) * | 2010-12-23 | 2023-02-14 | Universidade Federal De Minas Gerais | Composições farmacêuticas antimaláricas contendo derivados de diterpenos caurânicos |
| CN102603519B (zh) * | 2012-02-25 | 2014-08-20 | 中国科学院昆明植物研究所 | 贝壳杉烷型二萜衍生物及其药物组合物和其在医药中的用途 |
| CN103086879B (zh) * | 2013-01-16 | 2014-11-05 | 浙江大学宁波理工学院 | 从三裂叶蟛蜞菊中分离制备对映贝壳杉烷-16-烯-19-酸的方法 |
| CN105198897A (zh) * | 2015-10-26 | 2015-12-30 | 沈健龙 | 一种新的贝壳杉烷类二萜化合物及其制备方法和治疗肝癌的医药用途 |
-
2003
- 2003-01-17 CN CN 03112707 patent/CN1202069C/zh not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN1431187A (zh) | 2003-07-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN113004432B (zh) | 一种铁皮石斛寡糖、铁皮石斛寡糖衍生物及其制备方法和应用 | |
| CN102731365B (zh) | 猴头菌抑制幽门螺杆菌的生物小分子及其在治疗消化道疾病中的应用 | |
| CN1202069C (zh) | 一种二萜单体化合物在制备抗癌药物中的应用 | |
| CN102702071A (zh) | 一种天仙子中新化合物和制备方法及应用 | |
| CN115611839B (zh) | 白花地胆草中的倍半萜内酯类化合物的制备及其应用 | |
| CN101531968B (zh) | 红曲协同发酵提高蛹虫草子实体和虫草菌素产量的方法 | |
| CN1539010A (zh) | 隐孔菌发酵产物及其制备方法和应用 | |
| CN100420679C (zh) | 化合物、菌株、及应用该菌株生产该化合物的方法 | |
| CN1594267A (zh) | 二萜化合物单体及其制法和在制备治疗抗癌药物中的应用 | |
| CN101293886B (zh) | 白木香内生真菌产物螺光黑壳菌酮a的制备方法及应用 | |
| CN109705183B (zh) | 臭七次生代谢物及其药物组合物与其制备方法和其应用 | |
| CN107501072A (zh) | 化合物colletotriconeA及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
| CN1537849A (zh) | 羟基茋类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN1171850C (zh) | 一种二萜化合物及其制法和用途 | |
| CN1488355A (zh) | 芒果叶总苷止咳中药制剂及其生产方法 | |
| CN1158298C (zh) | 抗肿瘤化合物及其制备方法和制药用途 | |
| CN100432065C (zh) | 一种内酯单体化合物在制备治疗肝癌药物中的应用 | |
| CN114591286B (zh) | 新型大环内酯化合物acautalides A-C及其制备方法和应用 | |
| CN111253352A (zh) | 一种从中药斑叶兰中提取分离的化合物及其制备方法和应用 | |
| CN1176103C (zh) | 二色桌片参中新的抗肿瘤化合物Intercedenside C | |
| CN1171851C (zh) | 二萜化合物及其制法和用途 | |
| CN1113869C (zh) | 具有抗肿瘤活性的两个新阿扑菲－苄基异喹啉化合物 | |
| CN1164610C (zh) | 二色桌片参中新的抗肿瘤化合物Intercedenside B | |
| CN115181083B (zh) | 化合物Cyophiobiolins A-B制备方法及其在制备抗炎药物中的应用 | |
| CN1149587A (zh) | 人参寡糖素、人参单体寡糖及其制备工艺和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| C19 | Lapse of patent right due to non-payment of the annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |