CN1199632C - 复合抗龋齿IgY粗制剂的制备方法及一种防龋消炎含片 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种IgY提取新工艺，用本发明IgY制备的防龋消炎漱口水或含片可以直接抑灭变链菌和口腔致病菌、无化学有害物质并可直接吞服。
Description
技术领域
本发明涉及一种漱口水或含片，特别是涉及一种防龋消炎漱口水或含片。
背景技术
当前国内外尚没有具特异性功能的防龋漱口水和含片，仅有消炎或抗菌的漱口水和含片。目前市面上流行的漱口水和含片以及医院口腔科使用的漱口水大都是采用化学药品配制，这种化学药品漱口水会刺激口腔粘膜和齿科手术的伤口，长期使用，还将损害口腔粘膜。而且，这种漱口水和含片都不可吞咽；但是，漱口或口含后，总会有部分被误吞咽；因而，这类化学药品调制的漱口水或配制的含片总体来讲，是不利健康的。开发一种有特异性、天然成份的、吞咽对人体无害的漱口水和含片成为长期以来口腔医学界急待解决的课题。
国内外现有的IgY粗提技术，有的是采取有机溶剂，如用辛酸，或酒精，或丙酮，或氯仿等。该方法对IgY活性有一定影响，并且会残留有机物，影响环境和身体健康。有的是采用沉淀法，如聚乙二醇、硫酸葡聚糖等，缺点是得率较低，且也同样存在有机化学物质残留问题。有的是用水稀释法。该法优点多—工艺流程简单，产率高，成本低，无化学物质污染，安全性好；缺点是脂类去除不完全。
技术内容
本发明的目的是提供一种改进的制备复合抗龋齿IgY粗制剂的工艺；本发明的另一个目的是提供一种以该IgY作为主要成分，全新配方的、类似食用饮料或糖果、直接抑灭变链菌和口腔致病菌、无化学有害物质并可吞服的防龋消炎漱口水或含片。
本发明复合抗龋齿IgY粗制剂的制备工艺如下：
将分别用超声波处理的C型和D型变链菌与口腔致病菌按等比例混合，并加入等量的福氏佐剂按常规方法制成复合抗原；取该复合抗原对市售亨利良种产蛋母鸡进行皮下或翅静脉注射；隔二周一次，共计三次；经过上述鸡产蛋后的免疫蛋，用蛋黄筛取出蛋黄，搅打均匀，加入4-6倍体积的蒸馏水稀释混匀，用1.0N HCL调pH值至4.5-6.5，加入2％食品用海藻酸钠至终浓度为1.0‰-2.0‰，搅拌直至浑浊沉淀，加入2％食品用CaCl2液至终浓度为0.5‰-1.0‰，搅拌均匀，2-6℃过夜，虹吸收取上清液8,000-12,000rpm离心20分钟，得取上清，超滤浓缩，0.22μ膜过滤除菌，冷冻干燥，即得复合抗龋齿IgY粗制剂。
本发明IgY防龋消炎漱口水的制备工艺如下：
本发明复合抗龋齿IgY粗制剂0.005-0.1重量份，阿斯巴甜0.01~0.10重量份，薄荷香精0.01~0.10重量份，香橙香精0.01~0.10重量份，水蜜桃香精0.01~0.10重量份，香兰精0.1~0.3重量份，以上基料均为食品用物。根据贮藏期的长短，可适量加入食用型防腐剂；将以上成分一一加入于80~100重量体积比蒸馏水中，搅拌混匀，最后加入蒸馏水定容，搅拌均匀；0.22μ膜除菌。
活性检测 间接血凝抑制试验效价1∶32；ELISA 12800单位。
本发明IgY防龋消炎含片的制备工艺如下：
复合抗龋齿IgY粗制剂 0.1～1.0重量份
阿斯巴甜 0.1～0.15重量份
微囊化薄荷香精 0.3～0.5重量份
微囊化香橙香精 0.1～0.3重量份
微囊化水蜜桃香精 0.1～0.2重量份
1％羧甲基纤维素钠液 0.5～1.5重量份
硬脂酸镁 0.1～0.5重量份
山梨糖醇 加至100重量份
山梨糖醇，过80目筛，阿斯巴甜加羧甲基纤维素钠CMC-Na液，混和，软材14目筛制粒，40～70℃干燥，12目筛整粒，加入复合抗龋齿IgY粗制剂、配加该复合抗龋齿IgY粗制剂时，温度40-60℃，微囊化薄荷香精、微囊化香橙香精、微囊化水蜜桃香精及硬脂酸镁，混匀，压片，0.3克/片，外包保护膜。
本发明复合抗龋齿IgY粗制剂实验研究如下：
1)长期毒性实验：选用健康SD大鼠，喂以本发明IgY，每日80mg/kg体重，30天。结果：大鼠无任何临床症状；血、尿常规检查正常；肝、肾功能试验正常；病解检查，脑、心、肝、肾、睾丸无任何异常发现。
2)活性检测：间接血凝抑制试验效价达1∶512；ELISA达204800单位。
3)杀菌试验：1∶50稀释，3min对大肠杆菌杀灭率达100.00％。1∶100稀释，10min金黄色葡萄球菌杀灭率达100.00％。1∶200稀释，3min对白色念珠菌杀灭率达100.00％。
4)抑制粘附实验：1∶8稀释，仍有明显的抑制主要几种口腔致病菌粘附作用。
5)动物实验：选用SD健康大鼠20只，随机分成二组(本发明IgY粗制剂组和对照组)各10只。结果用本发明复合抗龋齿IgY粗制剂喂养经杏链菌感染的大鼠，能有效地防止龋齿的发生。见下表：
| 对照组 | 实验组 | |
| 仅釉质龋损龋损深至牙本质1/4龋损深至整个牙本质 | 47258 | 190.570 |
龋齿计分按Keyes记分法，使用方统计，使用方统计，P＜0.01，两组具非常显著性差异。
人群观察：志愿者45人，随机分成二组，分别以本发明IgY粗制剂(制成漱水或含片)、安慰剂进行了为期21d防龋临床观察。观察内容为牙菌斑中变链菌在实验前后占总厌氧菌的百分比。结果见下表：
| 实验前 实验后 P值 |
| IgY组 50.8 22.3 ＜0.01安慰组 54.1 50.7 0.242 |
经统计学处理本发明复合抗龋齿IgY粗制剂组实验前后有非常显著性差异，这表明本发明IgY粗制剂可明显抑制牙菌斑中变链菌的生长，且有特异性防龋作用。
综上所述，本发明方法制备复合抗龋齿IgY粗制剂具有活性高、特异性强、疗效好、应用安全，而且工艺简单、成本低、无环境污染等优点；另外，蛋壳、蛋清和蛋黄的其它成分均可得到综合利用。为了更方便使用，本发明可将IgY防龋消炎漱口水的剂型由液体改为含片，即用山梨糖醇或甘露醇或淀粉等代替蒸馏水作为填充剂。把抗龋齿IgY粗制剂或复合抗龋齿IgY粗制剂加上各种香味剂，以山梨糖醇或者甘露醇或淀粉等填充剂充分混合再压成各种形状的含片，患者只要将含片放入口中含服，就可达到防龋和消炎的效果，十分简便。由于本品可以特异性地抑制变链菌和一些主要口腔致病菌，克服了一般中药制成的口腔含片，效果不明显的缺点。本品可吞咽，特别是可保护口腔内有益菌，维护口腔内菌群生态环境；又绝不会刺激和损害口腔粘膜。本发明在IgY防龋消炎漱口水和含片中特别加入了口腔粘膜吸附剂(缓释剂)，如Caborpl(卡波浦尔)等，使IgY在口腔粘膜和牙面上停留时间延长，加大了抑制致病菌的作用时间，进一步增强其功效。
活性检测 间接血凝抑制试验效价1∶128；ELISA 51200单位。
使用本发明IgY防龋消炎漱口水和含片防龋效果显著，对已发生龋病的患者，使用后可制止龋病加重，同时可完全避免再出现新的龋齿。由于本品对口腔内主要致病菌有显著的抑灭作用，因而可明显控制口腔炎症的发生。特别是对刚作完齿科手术后的病人，如使用本漱口水或含片，由于该漱口水和含片成份天然，药性温和，绝不会刺激口腔粘膜和伤口，因而可以有效地防止伤口发炎，并且十分有助于手术伤口更快愈合。
具体实施例
实施例1：复合抗龋齿IgY粗制剂的制备工艺：
将分别用超声波处理的C型和D型变链菌与口腔致病菌按等比例混合，并加入等量的福氏佐剂按常规方法制成复合抗原；取该复合抗原对市售亨利良种产蛋母鸡进行皮下或翅静脉注射；隔二周一次，共计三次；经过上述鸡产蛋后的免疫蛋，用蛋黄筛取出蛋黄，搅打均匀，加入5倍体积的蒸馏水稀释混匀，用1.0N HCL调pH值至4.5-6.5，加入2％食品用海藻酸钠至终浓度为1.0‰-2.0‰，搅拌直至浑浊沉淀，加入2％食品用CaCl2液至终浓度为0.5‰-1.0‰，搅拌均匀，5℃过夜，虹吸收取上清液8,000-12,000rpm离心20分钟，得取上清，超滤浓缩，0.22μ膜过滤除菌，冷冻干燥，即得复合抗龋齿IgY粗制剂。
实施例2：IgY防龋消炎漱口水的制备：
复合抗龋齿IgY粗制剂0.1克，阿斯巴甜0.10克，薄荷香精0.10克，香橙香精0.10克，水蜜桃香精0.05克，香兰精0.15克，将以上成分加入于90ml蒸馏水中，搅拌混匀，最后加入蒸馏水定容，搅拌均匀；0.22μ膜除菌，即得。
实施例3：IgY防龋消炎含片的制备：
复合抗龋齿IgY粗制剂 0.5克
阿斯巴甜 0.13克
微囊化薄荷香精 0.4克
微囊化香橙香精 0.2克
微囊化水蜜桃香精 0.15克
1％羧甲基纤维素钠(CMC-Na)液(注1) 1.0克
硬脂酸镁 0.3克
山梨糖醇 加至100克
山梨糖醇，过80目筛，阿斯巴甜加1％羧甲基纤维素钠(CMC-Na)液，混和，软材14目筛制粒，40～70℃干燥，12目筛整粒，加入复合抗龋齿IgY粗制剂、配加复合抗龋齿IgY粗制剂时，温度50℃，微囊化薄荷香精、微囊化香橙香精、微囊化水蜜桃香精及硬脂酸镁，混匀，压片，0.3克/片，外包保护膜。
Claims (6)
1、一种复合抗龋齿IgY粗制剂的制备工艺，其特征在于该制备工艺为：
将分别用超声波处理的C型和D型变链菌与口腔致病菌按等比例混合，并加入等量的福氏佐剂按常规方法制成复合抗原；取该复合抗原对市售亨利良种产蛋母鸡进行皮下或翅静脉注射；隔二周一次，共计三次；经过上述鸡产蛋后的免疫蛋，用蛋黄筛取出蛋黄，搅打均匀，加入4-6倍体积的蒸馏水稀释混匀，用1.0N HCL调pH值至4.5-6.5，加入2％食品用海藻酸钠至终浓度为1.0‰-2.0‰，搅拌直至浑浊沉淀，加入2％食品用CaCl2液至终浓度为0.5‰-1.0‰，搅拌均匀，2-6℃过夜，虹吸收取上清液8,000-12,000rpm离心20分钟，得取上清，超滤浓缩，0.22μ膜过滤除菌，冷冻干燥，即得复合抗龋齿IgY粗制剂。
2、根据权利要求1所述的复合抗龋齿IgY粗制剂的制备工艺，其特征在于该制备工艺为：
将分别用超声波处理的C型和D型变链菌与口腔致病菌按等比例混合，并加入等量的福氏佐剂按常规方法制成复合抗原；取该复合抗原对市售亨利良种产蛋母鸡进行皮下或翅静脉注射；隔二周一次，共计三次；经过上述鸡产蛋后的免疫蛋，用蛋黄筛取出蛋黄，搅打均匀，加入5倍体积的蒸馏水稀释混匀，用1.0N HCL调pH值至4.5-6.5，加入2％食品用海藻酸钠至终浓度为1.0‰-2.0‰，搅拌直至浑浊沉淀，加入2％食品用CaCl2液至终浓度为0.5‰-1.0‰，搅拌均匀，5℃过夜，虹吸收取上清液8,000-12,000rpm离心20分钟，得取上清，超滤浓缩，0.22μ膜过滤除菌，冷冻干燥，即得复合抗龋齿IgY粗制剂。
3、一种防龋消炎含片，其特征在于该含片是由下述方法制得：
复合抗龋齿IgY粗制剂 0.1～1.0重量份
阿斯巴甜 0.1～0.15重量份
微囊化薄荷香精 0.3～0.5重量份
微囊化香橙香精 0.1～0.3重量份
微囊化水蜜桃香精 0.1～0.2重量份
1％羧甲基纤维素钠液 0.5～1.5重量份
硬脂酸镁 0.1～0.5重量份
山梨糖醇 加至100重量份
山梨糖醇，过80目筛，阿斯巴甜加1％羧甲基纤维素钠液，混和，软材14目筛制粒，40～70℃干燥，12目筛整粒，加入复合抗龋齿IgY粗制剂、配加该复合抗龋齿IgY粗制剂时，温度40-60℃，微囊化薄荷香精、微囊化香橙香精、微囊化水蜜桃香精及硬脂酸镁，混匀，压片，0.3克/片，外包保护膜；其中复合抗龋齿IgY粗制剂是由如下方法制成：
将分别用超声波处理的C型和D型变链菌与口腔致病菌按等比例混合，并加入等量的福氏佐剂按常规方法制成复合抗原；取该复合抗原对市售亨利良种产蛋母鸡进行皮下或翅静脉注射；隔二周一次，共计三次；经过上述鸡产蛋后的免疫蛋，用蛋黄筛取出蛋黄，搅打均匀，加入4-6倍体积的蒸馏水稀释混匀，用1.0N HCL调pH值至4.5-6.5，加入2％食品用海藻酸钠至终浓度为1.0‰-2.0‰，搅拌直至浑浊沉淀，加入2％食品用CaCl2液至终浓度为0.5‰-1.0‰，搅拌均匀，2-6℃过夜，虹吸收取上清液8,000-12,000rpm离心20分钟，得取上清，超滤浓缩，0.22μ膜过滤除菌，冷冻干燥，即得复合抗龋齿IgY粗制剂。
4、根据权利要求3所述的防龋消炎含片，其特征在于该含片是由下述原料制得的：复合抗龋齿IgY粗制剂0.5重量份，阿斯巴甜0.13重量份，微囊化薄荷香精0.4重量份，微囊化香橙香精0.2重量份，微囊化水蜜桃香精0.15重量份，1％羧甲基纤维素钠液1.0重量份，硬脂酸镁0.3重量份，再加山梨糖醇加至100重量份。
5、根据权利要求3或4所述的防龋消炎含片，其特征在于复合抗龋齿IgY粗制剂是由如下方法制成：
将分别用超声波处理的C型和D型变链菌与口腔致病菌按等比例混合，并加入等量的福氏佐剂按常规方法制成复合抗原；取该复合抗原对市售亨利良种产蛋母鸡进行皮下或翅静脉注射；隔二周一次，共计三次；经过上述鸡产蛋后的免疫蛋，用蛋黄筛取出蛋黄，搅打均匀，加入5倍体积的蒸馏水稀释混匀，用1.0N HCL调pH值至4.5-6.5，加入2％食品用海藻酸钠至终浓度为1.0‰-2.0‰，搅拌直至浑浊沉淀，加入2％食品用CaCl2液至终浓度为0.5‰-1.0‰，搅拌均匀，5℃过夜，虹吸收取上清液8,000-12,000rpm离心20分钟，得取上清，超滤浓缩，0.22μ膜过滤除菌，冷冻干燥，即得复合抗龋齿IgY粗制剂。
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