CN118453801A - 一种治疗子宫内膜异位症的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及中药领域，具体是一种治疗子宫内膜异位症的中药组合物机器制备方法和应用，所述的中药组合物由原料药生牡蛎、石见穿、鬼箭羽、煅瓦楞子、皂角刺、大血藤、蒲公英、浙贝母、桃仁、丹参、猫爪草、猫人参、白茯苓、炒白术、生薏苡仁、炙鸡内金、莪术、广郁金、续断和桂枝组成。本发明提供的中药组合物遵循辩证施治的原则，以化瘀散结、清热祛湿法，从临床和实验研究证实了该方法对子宫内膜异位症具有显著的治疗效果，丰富了中医治疗子宫内膜异位症的思路，可进一步推广使用。

Description

一种治疗子宫内膜异位症的中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及中药领域，具体地说，是一种治疗子宫内膜异位症的中药组合物及其制备方法。

背景技术

子宫内膜异位症(endometriosis，EMS)简称内异症，是一种痛苦性疾病、表现形式多样化的疾病、极其复发的疾病。EMS的发病率逐年升高，其引发的顽固性疼痛、难治性不孕、高复发率的问题一直是现今妇科领域治疗的难点和棘手问题。EMS虽然是一种良性疾病，极少恶变，但因为具有类似于恶性肿瘤的增殖性、种植性、复发性和转移性的特点，严重影响患者的健康、生活质量和生育能力，被称为“良性癌”。这些具有生长功能的子宫内膜组织类似“沙尘暴”，可多处粘附、侵袭并生根、生长、生病，病变范围广泛，常常异位在卵巢、输卵管、子宫肌层、盆腔、腹膜，也可在腹壁切口、会阴切口、泌尿道、肠道、肺部、脑部等远处种植、播散形成病灶。EMS病变形态多样化，腹腔镜手术中可见到囊肿、结节、瘢痕、缺损、粘连、纤维化等特征。据统计，在不孕患者中，50％有EMS存在，80％伴有慢性盆腔痛，EMS人群中有50％合并不孕，临床多见于生育年龄妇女，以25～45岁多见，此外青春期EMS延迟诊断率较高，围绝经期EMS警惕恶变风险，这些问题已受到医学界广泛关注。

EMS的发病机制目前尚未明确，主要学说有经血逆流种植学说、诱导学说、体腔上皮化生学说、“在位内膜决定论”、“3A”学说、免疫、凋亡、遗传等，但确切病机尚未完全明确，因此治疗效果不佳。目前西医治疗方法主要包含药物和手术两种，药物治疗主要有高效孕激素、口服避孕药、假绝经疗法GnRH-a，已广泛应用于临床。单用孕激素对缓解疼痛有明确的疗效、用药期间可一定程度上控制囊肿生长，但存在着不规则阴道出血或闭经等副作用，且停药后仍复发，而且对于深部浸润型内异症治疗效果不理想；使用口服避孕药可减少术后复发率，但对于有禁忌症者不能服用，长期服用有发生血栓疾病的风险，而且不适用于有乳腺肿瘤或家族史的患者；GnRH-a类药物是一种假绝经治疗方法，该方法抑制卵巢分泌雌激素，此方法不适用于16岁以下的患者，有些患者应用期间出现围绝经期症状，如潮热、烦躁或骨质疏松等副作用。此外，以上几种方法不适用于有生育要求的女性，且有可能影响卵巢功能进一步导致生育能力的下降。手术治疗主要有腹腔镜手术和开腹手术两种，其中腹腔镜手术是诊断EMS的金标准，同时较开腹手术术后的并发症更少，目前主张选择适宜的时机做手术，尽量做到“一生只做一次手术”，但手术也存在着损伤卵巢功能、增加盆腔粘连以及术后复发的风险。综上所述，西医采用药物或手术的方式治疗EMS，虽然具有较好的短期疗效，但是副作用较多，且用药期间无法受孕，不能涵盖全部患者人群，使其不能持久应用。

EMS是一种慢性病，强调长期管理，治疗目的是“减灭和消除病灶、缓解和消除疼痛、改善和促进生育、减少和避免复发”。长期管理在于早诊断、早发现、早治疗，坚持以临床问题为导向，治疗上根据患者年龄、症状、病变部位和范围及生育要求等进行分层处理和综合治疗，药物治疗尤为重要，可以将治疗关口提前，减少EMS病灶形成，控制病程进展并减少术后复发率。对于青春期EMS应尽早开启药物治疗，减缓疾病进展，加强长期随访与管理；育龄期是EMS的主体人群，临床针对问题如疼痛、囊肿、不孕、深部浸润型内异症、复发的治疗，保护卵巢功能，长期管理并减少复发；围绝经期EMS需警惕恶变风险，积极随访和治疗。以上EMS现状和慢病长期管理，提示我们妇科医生寻求一种安全有效且可持久应用的治疗手段迫在眉睫。

子宫内膜异位症在中医学上归属于“痛经”、“癥瘕”、“不孕”的疾病范畴。血瘀是内异症的基本病机已达成共识，瘀血阻滞胞宫、冲任，气血运行不畅则引起疼痛，故表现为痛经；瘀血于胞宫、冲任瘀积，瘀久而致不孕，积聚成癥。瘀血影响人体整体的脏腑、气血功能从而导致气滞、痰湿内生，呈现瘀血、气滞、痰湿交织，成瘕化癥的病理改变，故血瘀在内异症的生成过程中至关重要。临床以活血祛瘀为主要治法，通过辨证施治，发挥中药多成分、多靶点、多通路协同起效的特点，达到缓解疼痛、促进生育、预防复发，从而治疗内异症，并且中医药具有整体调节、安全有效，不影响生育、无毒副作用和长期应用的优势。临床和实验研究已表明，中药能改善局部血液微循环，降低前列腺素浓度，促进异位病灶的萎缩，可止痛、助孕和减少复发，临床疗效确凿。现今中医药疗法备受关注，已纳入内异症的诊疗共识。

发明内容

本发明的目的在于提供一种治疗子宫内膜异位症的中药组合物及其制备方法和应用。

本发明课题组在多年临床实践中发现，内异症的病机在于“血瘀、湿热、虚”三者交互，虚实夹杂。血瘀是内异症的基本病机已达成共识，内异灶形成的关键在于“离经之血”，即异位的子宫内膜随着月经周期性出血，聚积于常道以外无法排出，瘀积之血逐渐长大而成癥瘕，为离经之血和有形邪实，因此活血化瘀法为第一治法。同时瘀血停滞，可致津液敷布失常而水湿继生，如《金匮要略》所谓：“血不利则为水”。湿为有形之邪，易阻滞气机，气滞则血瘀，形成湿瘀互阻。此外，血瘀日久化热、湿邪郁久化热，与余血相搏结，伤及脾肾，导致瘀血、湿热、正虚之间恶性循环,日久胶结不解，形成正虚邪实的病理改变。因此该病的致病特点为粘滞、病程长、缠绵难愈。课题组基于以上中医理论和临证经验积累，以化瘀散结消癥、清热祛湿为大法，凝练出本发明的内异消方剂，方中以牡蛎、石见穿为君药，软坚散结、活血化瘀，消散癥瘕；臣以浙贝母、瓦楞子化痰散结，鬼箭羽、桃仁、丹参活血化瘀，促进血行，皂角刺、大血藤、蒲公英、猫爪草、猫人参清热化痰，活血消肿，诸药配伍君药内消血瘕，茯苓、白术、薏苡仁、鸡内金健脾祛湿，与君臣相合扶正消积；佐以莪术、郁金行气消积，气畅血行，续断补肾调血脉；使以桂枝温运阳气，以消瘀浊。全方扶正祛邪，寒温并用，从瘀、湿、热、虚入手，顾护正气，攻补兼施，治其根本。临床观察发现，本发明的内异消方剂可以降低EMS患者的VAS评分，缓解其疼痛症状，改善中医证候，控制卵巢内膜异位囊肿的生长速度，减缓复发，适用于治疗湿热瘀结型EMS，疗效确凿，且无明显毒副反应，不影响生育，可持久应用。

本发明的第一方面，提供一种治疗子宫内膜异位症的中药组合物，由如下重量份的中药原料药制成：

生牡蛎15～30份，石见穿10～20份，鬼箭羽10～20份，煅瓦楞子10～20份，皂角刺10～20份，大血藤10～20份，蒲公英10～20份，浙贝母10～15份，桃仁10～15份，丹参10～20份，猫爪草6～12份，猫人参6～12份，白茯苓10～15份，炒白术6～12份，生薏苡仁10～15份，炙鸡内金6～12份，莪术6～12份，广郁金6～12份，续断6～12份，桂枝3～9份。

进一步地，所述的治疗子宫内膜异位症的中药组合物，由如下重量份的中药原料药制成：

生牡蛎20～30份，石见穿15～20份，鬼箭羽15～20份，煅瓦楞子15～20份，皂角刺15～20份，大血藤15～20份，蒲公英15～20份，浙贝母12～15份，桃仁12～15份，丹参15～20份，猫爪草9～12份，猫人参9～12份，白茯苓12～15份，炒白术10～12份，生薏苡仁12～15份，炙鸡内金9～12份，莪术9～12份，广郁金9～12份，续断9～12份，桂枝6～9份。

更进一步地，所述的治疗子宫内膜异位症的中药组合物，由如下重量份的中药原料药制成：

生牡蛎20份，石见穿15份，鬼箭羽15份，煅瓦楞子15份，皂角刺15份，大血藤15份，蒲公英15份，浙贝母12份，桃仁12份，丹参15份，猫爪草9份，猫人参9份，白茯苓15份，炒白术10份，生薏苡仁15份，炙鸡内金12份，莪术12份，广郁金9份，续断12份，桂枝6份。

本发明的第二方面，提供一种如上所述的治疗子宫内膜异位症的中药组合物的制备方法，包括以下步骤：

按重量份比例称取各中药原料药，混合后，水煎提取，即得所述的治疗子宫内膜异位症的中药组合物。

进一步地，所述的水煎提取中，加水400ml～800ml，浸泡0.5～2小时后，水煎0.5～1小时。

更进一步地，所述的水煎提取中，加水500ml，浸泡半小时后，水煎30min。

本发明的第三方面，提供一种以如上所述的治疗子宫内膜异位症的中药组合物作为活性成份的中药制剂，所述的中药制剂是采用本领域常规制备方法制备成药剂学上的常用剂型。

进一步地，所述的中药制剂的剂型为汤剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、口服液或糖浆剂。

进一步地，所述的中药制剂中还包括药学上可接受的辅料。

本发明的第四方面，提供一种如上所述的中药组合物在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用。

本发明的第五方面，提供一种如上所述的中药制剂在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用。

进一步地，所述的子宫内膜异位症为湿热瘀结型子宫内膜异位症。

本发明优点在于：

相对于现有技术而言，本发明提出从“血瘀、湿热、虚”三方面治疗EMS，本发明提供的中药组合物遵循辩证施治的原则，以活血化瘀、清热散结消癥、健脾祛湿之法组方，方中牡蛎、浙贝母、瓦楞子化痰散结；石见穿、鬼箭羽、桃仁、丹参活血化瘀消癥；皂角刺、大血藤、蒲公英、猫爪草、猫人参清热化痰散结；茯苓、白术、薏苡仁、鸡内金健脾祛湿；莪术、郁金行气消积；续断补肾调血脉；桂枝温运阳气，以消瘀浊。全方扶正祛邪，寒温并用，从瘀、湿、热、虚入手，顾护正气，攻补兼施，治其根本。对EMS患者进行6个月的临床观察，评价VAS评分、中医证候积分、盆腔B超，证实了本发明的中药组合物对EMS具有显著的治疗效果，丰富了中医药治疗EMS的思路，临床可进一步推广使用。

附图说明

图1.各组小鼠药物干预后异位内膜病灶图片。

图2.各组小鼠药物干预后异位内膜体积比较(x±s，mm³)(注：与模型组比较，*P<0.05)。

图3.正常及异位内膜ICAM-1、MMP-9及VEGF蛋白表达(S-P，×200)。

图4.各组小鼠异位内膜ICAM-1、MMP-9、VEGF蛋白表达比较(注：与正常组比较，#P<0.05，##P<0.01；与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01)。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明提供的具体实施方式作详细说明。

实施例1：本发明的中药组合物

由如下重量份的原料药组成：生牡蛎15份，石见穿10份，鬼箭羽10份，煅瓦楞子10份，皂角刺10份，大血藤10份，蒲公英10份，浙贝母10份，桃仁10份，丹参10份，猫爪草6份，猫人参6份，白茯苓10份，炒白术6份，生薏苡仁10份，炙鸡内金6份，莪术6份，广郁金6份，续断6份，桂枝3份。

实施例2：本发明的中药组合物

由如下重量份的原料药组成：生牡蛎20份，石见穿12份，鬼箭羽12份，煅瓦楞子12份，皂角刺12份，大血藤12份，蒲公英12份，浙贝母12份，桃仁12份，丹参12份，猫爪草8份，猫人参8份，白茯苓12份，炒白术8份，生薏苡仁12份，炙鸡内金8份，莪术8份，广郁金8份，续断8份，桂枝6份。

实施例3：本发明的中药组合物

由如下重量份的原料药组成：生牡蛎25份，石见穿15份，鬼箭羽15份，煅瓦楞子15份，皂角刺15份，大血藤15份，蒲公英15份，浙贝母14份，桃仁14份，丹参15份，猫爪草9份，猫人参9份，白茯苓14份，炒白术9份，生薏苡仁14份，炙鸡内金9份，莪术9份，广郁金9份，续断9份，桂枝8份。

实施例4：本发明的中药组合物

由如下重量份的原料药组成：生牡蛎30份，石见穿20份，鬼箭羽20份，煅瓦楞子20份，皂角刺20份，大血藤20份，蒲公英20份，浙贝母15份，桃仁15份，丹参20份，猫爪草12份，猫人参12份，白茯苓15份，炒白术12份，生薏苡仁15份，炙鸡内金12份，莪术12份，广郁金12份，续断12份，桂枝9份。

实施例5：本发明的中药组合物

由如下重量份的原料药组成：生牡蛎20份，石见穿15份，鬼箭羽15份，煅瓦楞子15份，皂角刺15份，大血藤15份，蒲公英15份，浙贝母12份，桃仁12份，丹参15份，猫爪草9份，猫人参9份，白茯苓15份，炒白术10份，生薏苡仁15份，炙鸡内金12份，莪术12份，广郁金9份，续断12份，桂枝6份。

实施例6：汤剂的制备

采用中药汤剂常规的制作方法，即按重量份比例称取各中药原料药，加水煎煮成汤剂。

实施例7：片剂/胶囊的制备

按重量份比例称取各中药原料药，研细，煎煮，减压浓缩得浸膏，将浸膏干燥粉碎制成颗粒，加入制药辅料，压制成片剂或填充装胶囊。

实施例8：颗粒剂的制备

按重量份比例称取各中药原料药，研细，煎煮，减压浓缩得浸膏，将浸膏干燥粉碎制成颗粒剂。

实施例9：丸剂的制备

按重量份比例称取各中药原料药，研细，煎煮，取上清液，浓缩至稠浸膏；加适当制药辅料(白糖、蜂蜜、苯甲丙酸或羟苯乙酯等)，制成丸剂。

实施例10：制备本发明的中药组合物水煎剂(内异消方剂)

称取以下重量的各中药原料：生牡蛎20克，石见穿15克，鬼箭羽15克，煅瓦楞子15克，皂角刺15克，大血藤15克，蒲公英15克，浙贝母12克，桃仁12克，丹参15克，猫爪草9克，猫人参9克，白茯苓15克，炒白术10克，生薏苡仁15克，炙鸡内金12克，莪术12克，广郁金9克，续断12克，桂枝6克。将上述中药原料药各组分混合后，加水500ml，浸泡半小时后，水煎30min。

实施例11：临床试验

1.临床资料

1.1病例来源

2022年12月～2023年12月就诊于上海中医药大学附属曙光医院妇科，诊断为EMS(湿热瘀结)的患者。

1.2诊断标准

1.2.1西医诊断标准

EMS诊断标准采用2021年《子宫内膜异位症中西医结合诊治指南》，具体如下：

1)渐进性痛经者；

2)经期少、腹部不适，进行性加剧者；

3)周期性、渐进性直肠刺激症状者；

4)妇科检查于阴道后穹窿、子宫峡部或子宫骶骨韧带等处有触痛性结节者；

5)有附件囊肿或伴粘连、紧张感者；

6)未经抗炎治疗时附件肿块于月经前后有明显变化者；

7)腹腔镜检查发现典型子宫内膜异位症病灶或对可疑病变进行了组织学鉴定者；

8)子宫内膜异位症术后复发者。

凡有以上1)～3)中任意1项和4)～6)中任意1项，或7)，或8)即可诊断EMS。

1.2.2中医诊断标准

参照《中药新药临床研究指导原则》和《中医妇科学》确立湿热瘀结型中医临床诊断标准如下：

主症：1)经行腹痛；2)非经期下腹疼痛；3)非经期肛门坠痛；4)性交痛。

次症：1)经行量多，色黯红，质稠有块或夹较多黏液；2)胸闷纳呆，口干不欲饮；3)白带量多，色黄质稠；4)肛门灼热，大便溏或结，味臭秽；5)小便黄赤。6)舌脉：舌质红或暗红，见边尖有瘀点或瘀斑，舌黄腻或白腻，脉弦滑或濡数。

以上主证1)、2)必备一项，或兼具3)、4)，同时符合次症1)～3)中一项或全部、4)～6)中一项或全部，结合舌脉，即可辨证为湿热瘀结证。

1.3纳入标准

1)符合EMS中医及西医的诊断标准；

2)年龄20岁～45岁，月经来潮，月经周期25～35天，经期3～7天；

3)既往无严重药物过敏史，无其他原发性疾病史；

4)患者签署“知情同意书”，自愿参加研究者。

1.4排除标准

1)不符合纳入标准者；

2)服用过激素类药物，或同类型药物者；

3)不按规定用药和检查，或资料不全者；

4)盆腔部位疼痛原因是子宫附件炎症导致的患者；

5)一般患有卵巢囊肿或卵巢癌的患者；

6)生殖器官结核的患者；

7)患有心脑血管疾病以及血液、免疫、代谢方面等严重疾病者；

8)排除其他疾病引起的痛经、腹痛、月经异常及不孕症。

2.研究设计方法

试验设计：采用随机分组方法进行研究，按1:1比例随机分组分配到试验组(中药组)和对照组(西药组)。随机方案由课题组不参与临床试验的人员专门管理。

样本含量：根据本研究的实际情况，拟进行小样本临床研究，治疗组26例和对照组25例患者。

3.治疗方法

试验组：治疗周期同对照组，3个月中患者分别于月经结束后第1天开始服用实施例10制备的本发明的中药组合物内异消方剂。中药煎煮方法：上海中医药大学附属曙光医院中药房代煎，每剂浓煎2袋，每袋200ml。服用方法：每日两次，每次一袋，早中饭后2小时温服。连续服药至月经来潮。

对照组：治疗3个月为1疗程，2个疗程后进行统计。3个月中患者分别于月经周期的第1天口服唯散宁片(Dienogest，地诺孕素)，批号：S125102，规格：10mg，1片/d，连续服用。

4.观察指标

疗程和随访：两组患者分别于治疗前、治疗后进行VAS评分、中医证候积分、盆腔B超。并且监测治疗前后的血常规、尿常规和肝肾功能、乳腺超声。

5.临床观察结果

5.1综合疗效评价

对51例EMS患者治疗前后综合疗效进行比较。试验组：痊愈4例(15.38％)，显效12例(46.15％)，有效5例(19.23％)，无效5例(19.23％)，总有效率80.77％；对照组：痊愈3例(12％)，显效8例(32％)，有效8例(32％)，无效6例(24％)，总有效率76％。两组比较无统计学差异，如表1所示。

表1.综合疗效评价

5.2中医证候疗效评价

对患者入组前以及治疗2个疗程后的各症状进行评价，如表2所示：试验组：痊愈5例(19.23％)，显效14例(53.85％)，有效4例(15.38％)，无效3例(11.54％)，总有效率为88.46％。对照组：痊愈0例(0％)，显效6例(24％)，有效13例(52％)，无效6例(24％)，总有效率76％。两组比较有统计学差异(P＜0.05)，如表2所示。

表2.中医证候疗效评价

*与对照组比较P＜0.05。

5.3中医证候积分和VAS评分比较

如表3所示，51例患者治疗前后中医证候积分比较，结果显示：试验组治疗前后积分为23.92±7.93、15.62±3.67；对照组治疗前后的积分22.40±7.61、18.32±4.87，两组治疗后较治疗前评分明显降低(P＜0.05)，差异有统计学意义。

同时，51例患者治疗前后VAS评分比较，结果显示：试验组治疗前后积分为4.77±2.39、2.92±1.20；对照组治疗前后的积分5.28±2.13、4.12±1.62，两组治疗后较治疗前评分明显降低(P＜0.05)，差异有统计学意义。两组比较有统计学差异(P＜0.05)。表明内异消方剂在一定程度上能改善患者的中医证候和降低患者的VAS评分，缓解患者的疼痛症状，如表3所示。

表3.治疗前后中医证候积分和VAS评分比较(x±s，分)

*与同组治疗前比较P＜0.05；与对照组治疗后比较P＜0.05。

5.4B超囊肿大小(最大直径)

如表4所示，治疗后和治疗前卵巢囊肿大小进行比较(P＜0.05)，差异有统计学意义，表明内异消方剂在一定程度上能够抑制卵巢子宫内膜异位囊肿的生长速度，如表4所示。

表4.治疗前后囊肿直径比较(最大直径mm)(M，Q)

*与同组治疗前比较P＜0.05。

5.5副反应发生情况

两组治疗后安全检测显示：对照组16例阴道不规则出血，1例抑郁，1例乳腺结节增大；试验组无1例副反应出现，表明中药组较西药组更安全表，如表5所示。

表5.副反应发生情况比较(例，％)

5.6复发情况

两组停药后6个月进行复发观察，结果显示：对照组囊肿复发2例，疼痛复发4例；试验组无1例复发，表明内异消方剂可减缓复发，远期疗效较好。

表6.复发情况比较(例，％)

实施例12：动物试验

1.实验方案：

1.1动物及分组

选择雌性SPF级BALB/c小鼠50只，6～8周龄，体质量18～22g。饲养于上海中医药大学动物实验室，温度控制在20～25℃，相对湿度40％～60％。适应性喂养7天后开始实验。

分组：分6组：正常对照组、模型组、西药组及内异消方剂低、中、高剂量组。

药物：中药：内异消方剂(由白茯苓15克，炒白术10克，生薏苡仁15克，炙鸡内金12克，煅瓦楞子15克，生牡蛎20克，浙贝母12克，石见穿15克，鬼箭羽15克，桃仁12克，丹参15克，皂角刺15克，大血藤15克，蒲公英15克，猫爪草9克，猫人参9克，莪术12克，广郁金9克，续断12克，桂枝6克组成)；西药：孕三烯酮胶囊(2.5mg/粒)，北京紫竹药业有限公司生产。

1.2采用腹腔注射法建立EMs小鼠模型

采用BALB/c小鼠腹腔注射含供体小鼠子宫碎片的生理盐水法建立EMs模型。50只BALB/c雌性小鼠适应性喂养至第7天，随机数字表法取5只小鼠作为正常对照组(正常饲养)、30只小鼠作为实验组(进行造模)，余15只小鼠作为供体鼠。

造模方法：小鼠造模前5天给予补佳乐0.5mg/kg灌胃，连续5天；然后颈椎脱臼法处死供体小鼠，将其仰卧位固定于手术台上，碘伏消毒腹部皮肤，铺巾，沿腹部正中线剖开腹腔，取出子宫，立即置入装有生理盐水的培养皿中，剔除子宫周围的脂肪组织，漂洗干净；沿Y型子宫正中线剪开，将子宫均分为左右两半，分别放入含有1ml生理盐水的培养皿中，用眼科剪将子宫纵向剖开，暴露出子宫内膜面，然后剪碎呈约1mm³大小的小碎片；1只供体小鼠子宫平分后供给2只受体小鼠，即每处理好1只供体小鼠子宫后，迅速选取2只受体小鼠，消毒受体小鼠腹部后，使小鼠呈头低位，以下腹部偏腹中线0.5cm处的左下腹为进针点，用16号针头注射器将含有子宫碎片的1ml生理盐水注入受体小鼠的腹腔，出针时用干棉签快速按压进针点，防止子宫碎片溢出；手术全程为无菌条件，全程操作控制在5分钟内；造模后连续以补佳乐0.5mg/kg灌胃3天，促进异位病灶的生长。

1.3给药方法

在造模后的第22天，将实验组的小鼠用随机数字表法分为模型组、西药组及内异消方剂低、中、高剂量组，每组6只。模型组与另设的正常对照组，每天灌胃生理盐水；西药组，将孕三烯酮药粉溶于生理盐水灌胃，每周两次予0.325mg/kg，其余天时间进行生理盐水灌胃；内异消方剂低、中、高剂量组，低剂量为临床等效剂量25.8g/kg，中剂量为临床等效剂量51.6g/kg，高剂量为103.2g/kg灌胃，药物量为成人剂量换算结果。均连续干预28天。

1.4观察指标

1.4.1异位内膜的生长情况

打开造模后小鼠的腹腔，观察移植的异位内膜组织与周围组织的黏连、血管生成等情况；游标卡尺测量异位内膜组织的长、宽、高。异位病灶多位于小鼠左盆腹腔，少数异位于膀胱旁、肠系膜旁，为囊性不规则形态，有的呈半透明色，有的呈暗红色，内有液体积聚，表面有结缔组织覆盖及血管形成，有些与周围组织粘连存在，但粘连易分解，尚可清楚分离出异位病灶。病理检测镜下可见子宫内膜腺体或上皮、间质细胞，提示EMs造模成功。

1.4.2异位内膜中ICAM-1、MMP-9及VEGF蛋白表达检测

运用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白－过氧化酶连接(S-P)法测定。

1.5统计分析

采用SPSS24.0统计软件对所有数据进行统计学分析，计量资料以均数±标准差(mean±SD)表示。两组间比较，采用两独立样本t检验；多组间比较，若数据呈正态分布且方差齐性，采用单因素方差分析(one-way ANOVA)，组间比较采用LSD-t检验；若数据呈非正态分布和(或)方差不齐，则采用非参数检验的Kruskal-Wallis t检验。P<0.05认为差异具有统计学意义。

2.结果

2.1异位内膜的肉眼观察及体积比较

与模型组比较，西药组、内异消方剂高剂量组、中剂量组小鼠异位内膜体积均有不同程度的缩小，有统计学差异(P＜0.05)。见图1和图2。

2.2ICAM-1、MMP-9及VEGF蛋白表达的影响

免疫组化S-P法检测ICAM-1、MMP-9、VEGF 3种蛋白在正常内膜中呈低表达；模型组小鼠异位内膜ICAM-1、MMP-9、VEGF蛋白较正常组呈高表达(P＜0.05)；与模型组比较，西药组、内异消方剂高剂量组、中剂量组小鼠异位内膜ICAM-1、MMP-9表达均有不同程度的下降，西药组、内异消方剂高剂量组VEGF表达亦有下降，有统计学差异(P＜0.05)。见图3，图4。

结论：本研究发现与西药对照组比较，实施例1的中药组合物内异消方剂可以降低EMS患者的VAS评分，缓解其疼痛症状，改善中医证候，控制卵巢内膜异位囊肿的生长速度，减缓复发，适用于治疗湿热瘀结型EMS，且无明显毒副反应。动物实验也证实内异消方剂可以缩小异位内膜的体积，从蛋白表达对黏附、侵袭和血管形成这三个环节都进行抑制，与临床研究相互补充，收效满意，值得推广。

以上已对本发明创造的较佳实施例进行了具体说明，但本发明创造并不限于所述实施例，熟悉本领域的技术人员在不违背本发明创造精神的前提下还可做出种种的等同的变型或替换，这些等同的变型或替换均包含在本申请权利要求所限定的范围内。

Claims (10)

1.一种治疗子宫内膜异位症的中药组合物，其特征在于，由如下重量份的中药原料药制成：

生牡蛎15～30份，石见穿10～20份，鬼箭羽10～20份，煅瓦楞子10～20份，皂角刺10～20份，大血藤10～20份，蒲公英10～20份，浙贝母10～15份，桃仁10～15份，丹参10～20份，猫爪草6～12份，猫人参6～12份，白茯苓10～15份，炒白术6～12份，生薏苡仁10～15份，炙鸡内金6～12份，莪术6～12份，广郁金6～12份，续断6～12份，桂枝3～9份。

2.根据权利要求1所述的治疗子宫内膜异位症的中药组合物，其特征在于，由如下重量份的中药原料药制成：

生牡蛎20～30份，石见穿15～20份，鬼箭羽15～20份，煅瓦楞子15～20份，皂角刺15～20份，大血藤15～20份，蒲公英15～20份，浙贝母12～15份，桃仁12～15份，丹参15～20份，猫爪草9～12份，猫人参9～12份，白茯苓12～15份，炒白术10～12份，生薏苡仁12～15份，炙鸡内金9～12份，莪术9～12份，广郁金9～12份，续断9～12份，桂枝6～9份。

3.根据权利要求1所述的治疗子宫内膜异位症的中药组合物，其特征在于，由如下重量份的中药原料药制成：

生牡蛎20份，石见穿15份，鬼箭羽15份，煅瓦楞子15份，皂角刺15份，大血藤15份，蒲公英15份，浙贝母12份，桃仁12份，丹参15份，猫爪草9份，猫人参9份，白茯苓15份，炒白术10份，生薏苡仁15份，炙鸡内金12份，莪术12份，广郁金9份，续断12份，桂枝6份。

4.一种如权利要求1-3任一所述的治疗子宫内膜异位症的中药组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：按重量份比例称取各中药原料药，混合后，水煎提取，即得所述的治疗子宫内膜异位症的中药组合物。

5.根据权利要求4所述的治疗子宫内膜异位症的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述的水煎提取中，加水400ml～800ml，浸泡0.5～2小时后，水煎0.5～1小时。

6.一种以如权利要求1-3任一所述的治疗子宫内膜异位症的中药组合物作为活性成份的中药制剂，其特征在于，所述的中药制剂是采用本领域常规制备方法制备成药剂学上的常用剂型。

7.根据权利要求6所述的中药制剂，其特征在于，所述的中药制剂的剂型为汤剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、口服液或糖浆剂。

8.一种如权利要求1-3任一所述的中药组合物在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用。

9.一种如权利要求6或7所述的中药制剂在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用。

10.根据权利要求8或9所述的应用，其特征在于，所述的子宫内膜异位症为湿热瘀结型子宫内膜异位症。