CN118286278A - 一种采用瞬时加压工艺获得草珊瑚提取物的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种采用瞬时加压工艺获得草珊瑚提取物的方法，该方法通过粉碎草珊瑚、制备匀浆液，并在酶解过程中采用瞬间加压工艺，以高效释放细胞内有效成分；再通过离心、浓缩、灭菌步骤，实现了草珊瑚有效成分的快速提取和高效纯化；该方法具有操作简便、提取效率高的优点，为草珊瑚提取物的开发和利用提供了新的思路和方法。
Description
技术领域
本发明涉及中药提取物制备技术领域，具体为一种采用瞬时加压工艺获得草珊瑚提取物的方法。
背景技术
草珊瑚，别名有肿节风、九节茶、九节红、九节风、驳节茶、接骨木、接骨茶、接骨金栗兰、骨风消、满山香等，最早以“接骨草”之名记载于唐《本草拾遗》，作为药用最早见于清《生草药性备要》。现代研究发现，草珊瑚化学成分丰富，含有多种黄酮类、萜类、香豆素类、有机酸类、挥发油类等。其药理作用多样，是《中国药典》收载的常用中药，为多种中成药组成及民间常用中草药，兼具药用、食疗及观赏价值，在中成药、口腔保健品、日化用品、药茶、民间食用均有运用，具有较高的开发应用价值。
现有草珊瑚有效成分迷迭香酸和异嗪皮啶的提取工艺主要包含：超声提取、索氏提取和加热提取。近年来，随着草珊瑚应用领域的不断开拓，针对草珊瑚工业化大生产过程中的提取效率低、药材利用不充分等一系列问题开始出现，对于草珊瑚的提取工艺，特别是贴近工业化大生产的提取工艺研究相对较少。
公开号CN102772456A的专利公开了一种草珊瑚提取物流浸膏的生产方法，所述生产方法包括：1）碎解：将原料草珊瑚切断，打碎磨成粗粉备用；2）水提取：将磨好的粗粉以1:20的料液比加入相应倍量的水，进行沸水回流提取；3）沉淀：将沸水回流提取液在室温不超于30度的温度下静置沉淀2个小时，得到白色膏状粘稠物；4）浓缩：对白色膏状粘稠物先进行普通浓缩然后进行真空浓缩；5）醇稀：浓缩得到的物体，在搅拌条件下以1:4的料液比加入乙醇对其进行稀释，取上清液；6）热回流：将醇稀得到的上清液在室温条件下进行沸水回流处理。该专利中最终制备浓度为32g/ml，浓度较低。
公开号CN108670973A的专利公开了一种草珊瑚抗流感病毒活性提取物的制备方法，通过将草珊瑚用去离子水两次回流提取，醇沉之后制得草珊瑚水提取物干浸膏，然后将该干浸膏配制成一定浓度往大孔吸附树脂进样，然后用20％乙醇溶液进行洗脱，收集洗脱液，即得到所述草珊瑚抗流感病毒活性提取物。最终提取物含有相对于所述提取物总重量0.001％-0.008％重量的异嗪皮啶和0.083％-0.158％重量的迷迭香酸，所含比例较低。
综上，目前草珊瑚有效成分的提取主要是通过水加热提取和醇加热提取两种方式，存在有效成分产率低的问题。为此，需要提供一种高效提取草珊瑚有效成分的工艺方法，对推动草珊瑚的产业化发展具有非常重要的现实意义。
发明内容
（一）解决的技术问题
针对现有技术的不足，本发明提供了一种采用瞬时加压工艺获得草珊瑚提取物的方法，具有耗时短、提取效率高、活性功能成分高的优点。
（二）技术方案
为实现上述目的，本发明提供以下技术方案：
一种采用瞬时加压工艺获得草珊瑚提取物的方法，所述方法通过在草珊瑚匀浆液酶解的过程中进行一次或多次瞬时加压，来获取含有草珊瑚提取物的反应液，进而获得草珊瑚提取物，该方法包括以下步骤：
步骤S1，粉碎：将新鲜的100-200重量份的草珊瑚经过粉碎，过60-80目网筛，然后加入碎料20重量份的纯化水搅拌均匀成混合浆。
步骤S2，瞬时加压提取：向混合浆中继续加入20-40重量份的纯化水搅拌均匀成匀浆液并置于反应装置内，向匀浆液中加入0.5%-1%重量份的纤维素酶，对所述反应装置进行加热；在酶解的过程中采用瞬时加压工艺1-4次，每次持续时间1-2s，瞬时压力保持在45-65MPa，酶解时间结束后获得反应液。
所述瞬时加压工艺通过高压泵实现，向匀浆液中加入纤维素酶后保持反应装置处于常压状态，至少间隔5min才进行第一次瞬时加压，所述高压泵采用压缩空气实现对反应装置的加压，在0.1-0.2s内将反应装置的压力上升至45-65MPa，保持反应装置内压力1-2s后进入减压过程，减压速率维持在20-25MPa/min，将所述反应装置减压至常压，下一次瞬时加压工艺保持间隔3min以上。
在酶解过程中，保持反应装置内的PH值在5.8-6.3之间，采用缓冲液来调节PH值，所述缓冲液为醋酸或稀盐酸。
进一步的，所述步骤S1和步骤S2中，所述纯化水的温度在加入混合浆时控制在10-20℃。
进一步的，所述步骤S2中，对反应装置进行加热的过程中，所述反应装置的温度控制在25-35℃。
进一步的，所述步骤S2中，酶解时间为15-25min。
步骤S3，离心：将所述反应液进行离心，依次使用3000-3200r/min的三足离心机和15000-16000r/min的管式分离机进行离心分离，离心时间为30-40min，得到离心液。
进一步的，所述步骤S3中，离心温度保持在20-30℃。
步骤S4，浓缩：将离心液经过醋酸纤维素膜反渗透膜，过滤去除离心液中的水，浓缩后的红褐色浸膏即为提取液；
步骤S5，灭菌：将所述提取液先后经过5um、1.2um、0.2um的陶瓷滤菌器进行逐级过滤灭菌，得到草珊瑚提取物。
（三）有益的技术效果
1.本发明通过在草珊瑚匀浆液酶解的过程中进行瞬间加压，采用瞬时加压工艺，能够有效破坏草珊瑚细胞壁，破壁率高达98%，促进细胞内有效成分的释放，从而提高提取效率。这种技术相较于传统的提取方法，能够显著缩短提取时间，提高生产效率；采用瞬时加压工艺可以在较短的时间内完成破壁过程，避免了长时间高温对草珊瑚提取物中活性成分的破坏，保证提取物的活性和稳定性。
2.本发明的方法简化了提取流程，减少了化学试剂的使用量，降低了生产成本。
附图说明
图1为本发明的一种采用瞬时加压工艺获得草珊瑚提取物的方法流程图。
图2为本发明的反应液进行离心后剩余的草珊瑚滤渣的SEM图。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
需要说明的是，如图1所示为本发明一种采用瞬时加压工艺获得草珊瑚提取物的方法流程图，实施例1-5均采用粉碎-瞬时加压提取-离心-浓缩-灭菌的步骤得到草珊瑚提取物，以下为各实施例的具体参数配置。
实施例1
将新鲜的100重量份的草珊瑚经过粉碎，过60目网筛，然后加入碎料20重量份的10℃的纯化水搅拌均匀成混合浆；加入混合浆20重量份的纯化水搅拌均匀成匀浆液置于反应装置内，加入匀浆液0.5%重量份的纤维素酶，酶解时间为15min，加热温度为25℃，在酶解的过程中进行瞬间加压1次，每次1s，瞬间压力为45MPa，酶解时间结束后获得反应液。
瞬时加压通过高压泵实现，向匀浆液中加入纤维素酶后保持反应装置处于常压状态，5min后进行瞬时加压，在0.2s内将反应装置的压力上升至45MPa，保持反应装置内压力1s后进入减压过程，减压速率维持在20MPa/min，将所述反应装置减压至常压，在酶解过程中，保持反应装置内的PH值在5.8-6.3之间，采用缓冲液来调节PH值，缓冲液为醋酸。
将上述反应液进行离心，依次使用3000r/min的三足离心机、15000r/min的管式分离机进行离心分离，离心温度为20℃，离心时间为30min，得到离心液；将离心液经过醋酸纤维素膜反渗透膜，过滤除去离心液中的水，浓缩温度控制在10℃，浓缩后的红褐色浸膏即为提取液；提取液先后经过5um、1.2um、0.2um陶瓷滤菌器进行逐级过滤灭菌，得到草珊瑚提取物。
实施例2
将新鲜的200重量份的草珊瑚经过粉碎，过80目网筛，然后加入碎料20重量份的20℃的纯化水搅拌均匀成混合浆；加入混合浆40重量份的纯化水搅拌均匀成匀浆液置于反应装置内，加入匀浆液1%重量份的纤维素酶，酶解时间为25min，加热温度为35℃，在酶解的过程中进行瞬间加压4次，每次2s，瞬间压力为65MPa，酶解时间结束后获得反应液。
瞬时加压通过高压泵实现，向匀浆液中加入纤维素酶后保持反应装置处于常压状态，间隔5min进行第一次瞬时加压，在0.1s内将反应装置的压力上升至65MPa，保持反应装置内压力2s后进入减压过程，减压速率维持在25MPa/min，将所述反应装置减压至常压，下一次瞬时加压工艺保持间隔3min，重复加压和减压过程；在酶解过程中，保持反应装置内的PH值在5.8-6.3之间，采用缓冲液来调节PH值，缓冲液为稀盐酸。
将上述反应液进行离心，依次使用3200r/min的三足离心机、16000r/min的管式分离机进行离心分离，离心温度为30℃，离心时间为40min，得到离心液；将离心液经过醋酸纤维素膜反渗透膜，过滤除去离心液中的水，浓缩温度控制在20℃，浓缩后的红褐色浸膏即为提取液；提取液先后经过5um、1.2um、0.2um陶瓷滤菌器进行逐级过滤灭菌，得到草珊瑚提取物。
实施例3
将新鲜的150重量份的草珊瑚经过粉碎，过70目网筛，然后加入碎料20重量份的15℃的纯化水搅拌均匀成混合浆；加入混合浆30重量份的纯化水搅拌均匀成匀浆液置于反应装置内，加入匀浆液0.75%重量份的纤维素酶，酶解时间为20min，加热温度为30℃，在酶解的过程中进行瞬间加压2次，每次1.5s，瞬间压力为55MPa，酶解时间结束后获得反应液。
瞬时加压通过高压泵实现，向匀浆液中加入纤维素酶后保持反应装置处于常压状态，间隔5min进行第一次瞬时加压，在0.15s内将反应装置的压力上升至55MPa，保持反应装置内压力1.5s后进入减压过程，减压速率维持在22MPa/min，将所述反应装置减压至常压，下一次瞬时加压工艺保持间隔4min，重复加压和减压过程；在酶解过程中，保持反应装置内的PH值在5.8-6.3之间，采用缓冲液来调节PH值，缓冲液为醋酸。
将上述反应液进行离心，依次使用3100r/min的三足离心机、15500r/min的管式分离机进行离心分离，离心温度为25℃，离心时间为35min，得到离心液；将离心液经过醋酸纤维素膜反渗透膜，过滤除去离心液中的水，浓缩温度控制在15℃，浓缩后的红褐色浸膏即为提取液；提取液先后经过5um、1.2um、0.2um陶瓷滤菌器进行逐级过滤灭菌，得到草珊瑚提取物。
实施例4
将新鲜的100重量份的草珊瑚经过粉碎，过60目网筛，然后加入碎料20重量份的10℃的纯化水搅拌均匀成混合浆；加入混合浆20重量份的纯化水搅拌均匀成匀浆液置于反应装置内，加入匀浆液0.5%重量份的纤维素酶，酶解时间为15min，加热温度为25℃，在酶解的过程中进行瞬间加压1次，每次1s，瞬间压力为45MPa，酶解时间结束后获得反应液。
瞬时加压工艺通过高压泵实现，向匀浆液中加入纤维素酶后保持反应装置处于常压状态，间隔5min进行瞬时加压，在0.2s内将反应装置的压力上升至45MPa，保持反应装置内压力1s后进入减压过程，减压速率维持在20MPa/min，将所述反应装置减压至常压；在酶解过程中，保持反应装置内的PH值在5.8-6.3之间，采用缓冲液来调节PH值，缓冲液为稀盐酸。将上述反应液进行离心，依次使用3200r/min的三足离心机、16000r/min的管式分离机进行离心分离，离心温度为30℃，离心时间为40min，得到离心液；将离心液经过醋酸纤维素膜反渗透膜，过滤除去离心液中的水，浓缩温度控制在20℃，浓缩后的红褐色浸膏即为提取液；提取液先后经过5um、1.2um、0.2um陶瓷滤菌器进行逐级过滤灭菌，得到草珊瑚提取物。
实施例5
将新鲜的200重量份的草珊瑚经过粉碎，过80目网筛，然后加入碎料20重量份的20℃的纯化水搅拌均匀成混合浆；加入混合浆40重量份的的纯化水搅拌均匀成匀浆液置于反应装置内，加入匀浆液1%重量份的纤维素酶，酶解时间为25min，加热温度为35℃，在酶解的过程中进行瞬间加压4次，每次2s，瞬间压力为65MPa，酶解时间结束后获得反应液。
瞬时加压通过高压泵实现，向匀浆液中加入纤维素酶后保持反应装置处于常压状态，间隔5min进行第一次瞬时加压，在0.1s内将反应装置的压力上升至65MPa，保持反应装置内压力2s后进入减压过程，减压速率维持在25MPa/min，将所述反应装置减压至常压，下一次瞬时加压工艺保持间隔4min，重复加压和减压过程；在酶解过程中，保持反应装置内的PH值在5.8-6.3之间，采用缓冲液来调节PH值，所述缓冲液为醋酸或稀盐酸。将上述反应液进行离心，依次使用3100r/min的三足离心机、15500r/min的管式分离机进行离心分离，离心温度为25℃，离心时间为35min，得到离心液；将离心液经过醋酸纤维素膜反渗透膜，过滤除去离心液中的水，浓缩温度控制在15℃，浓缩后的红褐色浸膏即为提取液；提取液先后经过5um、1.2um、0.2um陶瓷滤菌器进行逐级过滤灭菌，得到草珊瑚提取物。
对比例1
按照专利CN102772456A公开的一种草珊瑚提取物流浸膏的生产方法。
对实施例和对比例1中的草珊瑚提取物进行破壁率测试和有效物质收率测定，结果分析如下：
对实施例1-5和对比例1进行破壁率测试，结果如表1所示，实施例1-5中的破壁率均在98%及以上。
表1：实施例1-5和对比例1的破壁率测试结果
对实施例1-5和对比例1进行有效物质收率测定，有效物质包括：异嗪皮啶、迷迭香酸和总黄酮，结果见表2。
表2：实施例1-5和对比例1有效物质收率测定结果
异嗪皮啶收率＝异嗪皮啶的量(g，根据HPLC测定的浓度换算得到)/原药材的量(g)*100％。
迷迭香酸收率＝迷迭香酸的量(g，根据HPLC测定的浓度换算得到)/原药材的量(g)*100％。
总黄酮收率＝总黄酮的量(g，根据HPLC测定的浓度换算得到)/原药材的量 (g)*100％。
由表1和表2可知，本发明实施例1-5和对比例1具有较好的破壁率和有效物质收率，经统计，破壁率均能达到98%，有效物质收率的测定中，实施例1-5中的异嗪皮啶收率在0.007%以上，迷迭香酸收率在0.01%以上，总黄酮收率在0.034%以上。
如图2所示，展示的是实施例4中的反应液进行离心后剩余的草珊瑚滤渣的SEM图，可以看到，采用瞬时加压工艺结合酶解过程，草珊瑚的细胞壁基本上完全破除（图中椭圆虚线圈出的为破壁细胞的扫描电镜影像），图中其他部分展示的草珊瑚的植物纤维。
另外，实施例1-5相较于对比例1的草珊瑚提取物，化学溶剂无残留。
为进一步验证本申请的中采用的瞬时加压工艺结合酶解过程在破壁率和有效物质收率上的提升效果，在实施例1-5的基础上，设置对比例2-6，做进一步的对比说明，其中，对比例2匀浆液中不加入纤维素酶，不采用瞬时加压工艺，对比例3匀浆液中不加入纤维素酶，采用瞬时加压工艺，对比例4加入纤维素酶，但不采用瞬时加压工艺；对比例5和对比例6加入纤维素酶，同时采用瞬时加压工艺，但加压工艺的压力值不在45-65MPa范围内，对比例5采用30MPa，对比例6采用75 MPa；以下为具体对比例：
对比例2
将新鲜的100重量份的草珊瑚经过粉碎，过60目网筛，然后加入碎料20重量份的10℃的纯化水搅拌均匀成混合浆；加入混合浆20重量份的纯化水搅拌均匀成匀浆液置于反应装置内，匀浆液中不加入纤维素酶，不采用瞬时加压工艺，静置25min后。
将反应液进行离心，依次使用3000r/min的三足离心机、15000r/min的管式分离机进行离心分离，离心温度为20℃，离心时间为30min，得到离心液；将离心液经过醋酸纤维素膜反渗透膜，过滤除去离心液中的水，浓缩温度控制在10℃，浓缩后的红褐色浸膏的提取液；提取液先后经过5um、1.2um、0.2um陶瓷滤菌器进行逐级过滤灭菌，得到草珊瑚提取物。
对比例3
将新鲜的200重量份的草珊瑚经过粉碎，过80目网筛，然后加入碎料20重量份的20℃的纯化水搅拌均匀成混合浆；加入混合浆40重量份的纯化水搅拌均匀成匀浆液置于反应装置内，匀浆液中不加入纤维素酶，间隔5min，瞬间加压1次，共计瞬间加压4次，每次2s，瞬间压力为65MPa；25min结束后获得反应液。
瞬时加压工艺通过高压泵实现，向匀浆液中加入纤维素酶后保持反应装置处于常压状态，间隔5min进行第一次瞬时加压，在0.2s内将反应装置的压力上升至65MPa，保持反应装置内压力2s后进入减压过程，减压速率维持在20MPa/min，将所述反应装置减压至常压，下一次瞬时加压工艺保持间隔5min，重复加压和减压过程；在酶解过程中，保持反应装置内的PH值在5.8-6.3之间，采用缓冲液来调节PH值，缓冲液为醋酸。
将上述反应液进行离心，依次使用3200r/min的三足离心机、16000r/min的管式分离机进行离心分离，离心温度为30℃，离心时间为40min，得到离心液；将离心液经过醋酸纤维素膜反渗透膜，过滤除去离心液中的水，浓缩温度控制在20℃，浓缩后的红褐色浸膏即为提取液；提取液先后经过5um、1.2um、0.2um陶瓷滤菌器进行逐级过滤灭菌，得到草珊瑚提取物。
对比例4
将新鲜的150重量份的草珊瑚经过粉碎，过70目网筛，然后加入碎料20重量份的15℃的纯化水搅拌均匀成混合浆；加入混合浆30重量份的纯化水搅拌均匀成匀浆液置于反应装置内，加入匀浆液0.75%重量份的纤维素酶，酶解时间为20min，加热温度为30℃，在酶解的过程中不采用瞬时加压工艺。
将上述反应液进行离心，依次使用3100r/min的三足离心机、15500r/min的管式分离机进行离心分离，离心温度为25℃，离心时间为35min，得到离心液；将离心液经过醋酸纤维素膜反渗透膜，过滤除去离心液中的水，浓缩温度控制在15℃，浓缩后的红褐色浸膏即为提取液；提取液先后经过5um、1.2um、0.2um陶瓷滤菌器进行逐级过滤灭菌，得到草珊瑚提取物。
对比例5
将新鲜的100重量份的草珊瑚经过粉碎，过60目网筛，然后加入碎料20重量份的10℃的纯化水搅拌均匀成混合浆；加入混合浆20重量份的纯化水搅拌均匀成匀浆液置于反应装置内，加入匀浆液0.5%重量份的纤维素酶，酶解时间为15min，加热温度为25℃，在酶解的过程中进行瞬间加压2次，每次2s，瞬间压力小于45MPa，采用30 MPa，酶解时间结束后获得反应液。
瞬时加压工艺通过高压泵实现，向匀浆液中加入纤维素酶后保持反应装置处于常压状态，间隔5min进行瞬时加压，在0.2s内将反应装置的压力上升至30MPa，保持反应装置内压力1s后进入减压过程，减压速率维持在20MPa/min，将所述反应装置减压至常压，间隔5min后，重复加压和减压过程；在酶解过程中，保持反应装置内的PH值在5.8-6.3之间，采用缓冲液来调节PH值，缓冲液为稀盐酸。
将上述反应液进行离心，依次使用3200r/min的三足离心机、16000r/min的管式分离机进行离心分离，离心温度为30℃，离心时间为40min，得到离心液；将离心液经过醋酸纤维素膜反渗透膜，过滤除去离心液中的水，浓缩温度控制在20℃，浓缩后的红褐色浸膏即为提取液；提取液先后经过5um、1.2um、0.2um陶瓷滤菌器进行逐级过滤灭菌，得到草珊瑚提取物。
对比例6
将新鲜的200重量份的草珊瑚经过粉碎，过80目网筛，然后加入碎料20重量份的20℃的纯化水搅拌均匀成混合浆；加入混合浆40重量份的的纯化水搅拌均匀成匀浆液置于反应装置内，加入匀浆液1%重量份的纤维素酶，酶解时间为25min，加热温度为35℃，在酶解的过程中进行瞬间加压4次，每次2s，瞬间压力大于65MPa，采用75 MPa，酶解时间结束后获得反应液。
瞬时加压通过高压泵实现，向匀浆液中加入纤维素酶后保持反应装置处于常压状态，间隔5min进行第一次瞬时加压，在0.1s内将反应装置的压力上升至75MPa，保持反应装置内压力2s后进入减压过程，减压速率维持在25MPa/min，将所述反应装置减压至常压，下一次瞬时加压工艺保持间隔4min，重复加压和减压过程；在酶解过程中，保持反应装置内的PH值在5.8-6.3之间，采用缓冲液来调节PH值，所述缓冲液为醋酸或稀盐酸。
将上述反应液进行离心，依次使用3100r/min的三足离心机、15500r/min的管式分离机进行离心分离，离心温度为25℃，离心时间为35min，得到离心液；将离心液经过醋酸纤维素膜反渗透膜，过滤除去离心液中的水，浓缩温度控制在15℃，浓缩后的红褐色浸膏即为提取液；提取液先后经过5um、1.2um、0.2um陶瓷滤菌器进行逐级过滤灭菌，得到草珊瑚提取物。
将对比例2-6中的提取物进行破壁率测试，结果如表3所示：
表3：对比例2-6的提取物破壁率测试结果
可以看出，对比例2匀浆液中不加入纤维素酶，不采用瞬时加压工艺，其破壁率仅仅为37%，不能满足草珊瑚工业化提取要求；对比例3匀浆液中不加入纤维素酶，采用瞬时加压工艺，其破壁率可以达到66%，草珊瑚的有效成分浪费较多；对比例4加入纤维素酶，但不采用瞬时加压工艺，能够达到78%的破壁率，相对于对比例2-3有很大提升，然而，从药材成本和工艺成本综合考量，仍不能满足工业化提取的要求；对比例5和对比例6加入纤维素酶，同时采用瞬时加压工艺，对比例5采用30MPa，对比例6采用75 MPa，可以看出对比例5的破壁率为89%，相对于现有技术CN102772456A没有获得有效提升，而对比例6能够达到99%，然而，其采用的75 MPa的压力对反应装置有非常高的要求，在实际生产中，压力高于65 MPa时，随着压力的增大，生产安全事故的风险呈指数上升，同时应为该风险的安全措施成本也呈指数上升，因此，虽然75 MPa的压力可以满足破壁率要求，但不能应用在实际生产中。
将对比例2-6中的提取物进行有效物质收率测定，结果见表4。
表4：对比例2-6有效物质收率测定结果
从表4的结果，可以得到，不采用瞬时加压工艺，或者不加入纤维素酶，均不能有效的提取到草珊瑚的有效成分；瞬时加压压力过低也不能达到对草珊瑚的有效成分提取的理想效果。
通过深入研究草珊瑚有效成分的提取过程，我们得出结论：采用瞬时加压工艺结合酶解过程（即加入纤维素酶）在提取草珊瑚有效成分中的高效性和实用性。实验结果表明，单独采用瞬时加压工艺或仅加入纤维素酶均不能达到理想的破壁率和有效成分提取率。然而，当这两种技术相结合时，草珊瑚的破壁率显著提高，尤其是在采用适中压力（非过高压力）的瞬时加压工艺下，破壁率达到了98%，几乎实现了完全破壁，从而极大地提升了草珊瑚有效成分的提取效率。
纤维素酶作为一种特定的酶类，能够有效降解植物细胞壁中的纤维素，使得细胞壁变得更为脆弱，易于破壁，而瞬时加压工艺则通过短时间内施加高压，迅速破坏细胞壁结构，使得细胞内的有效成分得以释放。这两种技术的结合，实现了对草珊瑚细胞壁的双重作用，从而显著提高了破壁率和有效成分提取率。
以上所述的具体实施方式，对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详细说明，所应理解的是，以上所述仅为本发明的具体实施方式而已，并不用于限定本发明的保护范围，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (5)
1.一种采用瞬时加压工艺获得草珊瑚提取物的方法，其特征在于，所述方法通过在草珊瑚匀浆液酶解的过程中进行一次或多次瞬时加压，来获取含有草珊瑚提取物的反应液，进而获得草珊瑚提取物，该方法包括以下步骤：
步骤S1，粉碎：将新鲜的100-200重量份的草珊瑚经过粉碎，过60-80目网筛，然后加入碎料20重量份的纯化水搅拌均匀成混合浆；
步骤S2，瞬时加压提取：向混合浆中继续加入20-40重量份的纯化水搅拌均匀成匀浆液并置于反应装置内，向匀浆液中加入0.5%-1%重量份的纤维素酶，对所述反应装置进行加热；在酶解的过程中采用瞬时加压工艺1-4次，每次持续时间1-2s，瞬时压力保持在45-65MPa，酶解时间结束后获得反应液；
所述瞬时加压工艺通过高压泵实现，向匀浆液中加入纤维素酶后保持反应装置处于常压状态，至少间隔5min才进行第一次瞬时加压，所述高压泵采用压缩空气实现对反应装置的加压，在0.1-0.2s内将反应装置的压力上升至45-65MPa，保持反应装置内压力1-2s后进入减压过程，减压速率维持在20-25MPa/min，将所述反应装置减压至常压，下一次瞬时加压工艺保持间隔3min以上；
在酶解过程中，保持反应装置内的PH值在5.8-6.3之间，采用缓冲液来调节PH值，所述缓冲液为醋酸或稀盐酸；
步骤S3，离心：将所述反应液进行离心，依次使用3000-3200r/min的三足离心机和15000-16000r/min的管式分离机进行离心分离，离心时间为30-40min，得到离心液；
步骤S4，浓缩：将离心液经过醋酸纤维素膜反渗透膜，过滤去除离心液中的水，浓缩后的红褐色浸膏即为提取液；
步骤S5，灭菌：将所述提取液先后经过5um、1.2um、0.2um的陶瓷滤菌器进行逐级过滤灭菌，得到草珊瑚提取物。
2.根据权利要求1所述的一种采用瞬时加压工艺获得草珊瑚提取物的方法，其特征在于，所述步骤S1和步骤S2中，所述纯化水的温度在加入混合浆时控制在10-20℃。
3.根据权利要求2所述的一种采用瞬时加压工艺获得草珊瑚提取物的方法，其特征在于，所述步骤S2中，对反应装置进行加热的过程中，所述反应装置的温度控制在25-35℃。
4.根据权利要求3所述的一种采用瞬时加压工艺获得草珊瑚提取物的方法，其特征在于，所述步骤S2中，酶解时间为15-25min。
5.根据权利要求4所述的一种采用瞬时加压工艺获得草珊瑚提取物的方法，其特征在于，所述步骤S3中，离心温度保持在20-30℃。
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