CN118090958A - 一种油性基质软膏中依地酸盐测定的前处理方法和含量测定方法 - Google Patents
一种油性基质软膏中依地酸盐测定的前处理方法和含量测定方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN118090958A CN118090958A CN202410194065.8A CN202410194065A CN118090958A CN 118090958 A CN118090958 A CN 118090958A CN 202410194065 A CN202410194065 A CN 202410194065A CN 118090958 A CN118090958 A CN 118090958A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution
- clear liquid
- edetate
- ointment
- metal salt
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000002674 ointment Substances 0.000 title claims abstract description 31
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 27
- 229940009662 edetate Drugs 0.000 title claims abstract description 27
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 title claims abstract description 26
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 title claims abstract description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 67
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 47
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims abstract description 23
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims abstract description 21
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims abstract description 18
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims abstract description 18
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 claims abstract description 18
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 15
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 13
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 12
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 5
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 33
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 229910000365 copper sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 18
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 15
- VDZOOKBUILJEDG-UHFFFAOYSA-M tetrabutylammonium hydroxide Chemical compound [OH-].CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC VDZOOKBUILJEDG-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 10
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 8
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 8
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000002585 base Substances 0.000 claims description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 6
- ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L EDTA disodium salt (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].OC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC(O)=O)CC([O-])=O ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 5
- 239000010949 copper Substances 0.000 claims description 5
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 claims description 5
- QIWWZEXNQJWZCR-UHFFFAOYSA-M phosphoric acid tetrabutylazanium hydroxide Chemical compound P(O)(O)(O)=O.[OH-].C(CCC)[N+](CCCC)(CCCC)CCCC QIWWZEXNQJWZCR-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- VCJMYUPGQJHHFU-UHFFFAOYSA-N iron(3+);trinitrate Chemical compound [Fe+3].[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O VCJMYUPGQJHHFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- 239000012085 test solution Substances 0.000 claims description 4
- UEAVLBXLOZNDHT-UHFFFAOYSA-K calcium;sodium;2-[2-[bis(carboxylatomethyl)amino]ethyl-(carboxymethyl)amino]acetate Chemical compound [Na+].[Ca+2].OC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CC([O-])=O UEAVLBXLOZNDHT-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 3
- OPQARKPSCNTWTJ-UHFFFAOYSA-L copper(ii) acetate Chemical compound [Cu+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O OPQARKPSCNTWTJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 3
- 239000000945 filler Substances 0.000 claims description 3
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 3
- YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N octadecylsilane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[SiH3] YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 claims description 3
- 229910021578 Iron(III) chloride Inorganic materials 0.000 claims description 2
- ORTQZVOHEJQUHG-UHFFFAOYSA-L copper(II) chloride Chemical compound Cl[Cu]Cl ORTQZVOHEJQUHG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- XTVVROIMIGLXTD-UHFFFAOYSA-N copper(II) nitrate Chemical compound [Cu+2].[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O XTVVROIMIGLXTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- RUTXIHLAWFEWGM-UHFFFAOYSA-H iron(3+) sulfate Chemical compound [Fe+3].[Fe+3].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O RUTXIHLAWFEWGM-UHFFFAOYSA-H 0.000 claims description 2
- PVFSDGKDKFSOTB-UHFFFAOYSA-K iron(3+);triacetate Chemical compound [Fe+3].CC([O-])=O.CC([O-])=O.CC([O-])=O PVFSDGKDKFSOTB-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- 229910000360 iron(III) sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229940037001 sodium edetate Drugs 0.000 claims description 2
- UEUXEKPTXMALOB-UHFFFAOYSA-J tetrasodium;2-[2-[bis(carboxylatomethyl)amino]ethyl-(carboxylatomethyl)amino]acetate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CC([O-])=O UEUXEKPTXMALOB-UHFFFAOYSA-J 0.000 claims description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 2
- 231100000956 nontoxicity Toxicity 0.000 abstract description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 9
- 239000012490 blank solution Substances 0.000 description 8
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 6
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- SHWNNYZBHZIQQV-UHFFFAOYSA-J EDTA monocalcium diisodium salt Chemical compound [Na+].[Na+].[Ca+2].[O-]C(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CC([O-])=O SHWNNYZBHZIQQV-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 3
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920002385 Sodium hyaluronate Polymers 0.000 description 3
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 3
- 229950004777 sodium calcium edetate Drugs 0.000 description 3
- 229940010747 sodium hyaluronate Drugs 0.000 description 3
- YWIVKILSMZOHHF-QJZPQSOGSA-N sodium;(2s,3s,4s,5r,6r)-6-[(2s,3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-2-[(2s,3s,4r,5r,6r)-6-[(2r,3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2- Chemical compound [Na+].CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 YWIVKILSMZOHHF-QJZPQSOGSA-N 0.000 description 3
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 229960004048 pantoprazole sodium Drugs 0.000 description 2
- YNWDKZIIWCEDEE-UHFFFAOYSA-N pantoprazole sodium Chemical compound [Na+].COC1=CC=NC(CS(=O)C=2[N-]C3=CC=C(OC(F)F)C=C3N=2)=C1OC YNWDKZIIWCEDEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N Manganese Chemical compound [Mn] PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004264 Petrolatum Substances 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000008139 complexing agent Substances 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000002845 discoloration Methods 0.000 description 1
- 229940124274 edetate disodium Drugs 0.000 description 1
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000622 irritating effect Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011572 manganese Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 229940066842 petrolatum Drugs 0.000 description 1
- 235000019271 petrolatum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 231100000572 poisoning Toxicity 0.000 description 1
- 230000000607 poisoning effect Effects 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- OTYBMLCTZGSZBG-UHFFFAOYSA-L potassium sulfate Chemical compound [K+].[K+].[O-]S([O-])(=O)=O OTYBMLCTZGSZBG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910052939 potassium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011151 potassium sulphates Nutrition 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229910021655 trace metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940099259 vaseline Drugs 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明提供一种油性基质软膏中依地酸盐测定的前处理方法,包括以下步骤:1)用可溶性碱溶液对油性基质软膏进行提取,得到清液A;油性基质软膏和可溶性碱溶液的用量比为0.5g:8~15mL,可溶性碱溶液的浓度为0.15~0.3M;2)将清液A和金属盐溶液混合反应后进行固液分离,得到清液B;清液A和金属盐溶液的用量比为5ml:4~7ml,金属盐溶液的浓度为0.2~0.3mg/ml。本发明采用可溶性碱溶液作为溶散提取剂,低成本、无毒性、操作简单且提取纯度高。进一步地,使用金属盐溶液去除清液A中残留的碱并使依地酸盐全部反应形成稳定的水溶性络合物,从而使得本发明能够简单、准确地使用高效液相色谱法检测油性基质软膏中依地酸盐的含量,具有准确度高、重复性好的特点。
Description
技术领域
本发明涉及药物分析技术领域,尤其涉及油性基质软膏中依地酸盐测定的前处理方法和含量测定方法。
背景技术
在药物领域,铜、铁、锰等微量金属离子能使药品成分发生氧化反应,依地酸盐作为常用的金属离子络合剂,可以与金属离子形成稳定的水溶性络合物,可以防止药物因金属离子而引起的变质变色等,来提高软膏的稳定性。目前通常采用HPLC高效液相色谱法来测定药品中依地酸盐的含量。例如,CN 102798678A专利中披露了一种注射用泮托拉唑钠中依地酸钙钠的含量测定方法,其测定前样品配置采用pH=2.42的水为提取溶剂、室温对药品中依地酸钙钠成分进行提取,再加入三氯化铁溶液混匀制得供试品溶液,然后再采用高效液相色谱法测定。玻璃酸钠滴眼液进口注册标准(标准号:JX20160038)中披露了玻璃酸钠滴眼液中依地酸二钠的含量测定方法,其测定前样品配置方式为加入醋酸铜溶液制得供试品溶液,然后再采用高效液相色谱法测定。不管是注射用泮托拉唑钠还是玻璃酸钠滴眼液,药品本身即是水溶性的,因此样品配置中采用水为提取溶剂或无需提取,即可实现对药品中依地酸钙钠成分的提取。然而,对于油性基质软膏,部分辅料在水或常温水中无法完全溶解,影响了依地酸盐含量的测定。
公开号为CN115290783A的中国专利提出采用有机溶剂(正庚烷、正己烷等)、稀释剂(硫酸钠、氯化钠、硫酸钾、氯化钾等)水浴加热对油溶性软膏中依地酸盐进行提取,采用涡旋混合、离心进行分离。然而采用的如正庚烷、正己烷等的有机具有一定的毒性,对眼睛和上呼吸道有刺激性,长期接触可引起中毒;而且有机溶剂具有易挥发性,对环境造成污染;有机溶剂价格比较高,加重了企业研发成本。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种低成本、无毒性、操作简单且提取纯度高的方法用于油性基质软膏中依地酸盐成分的提取,以适于依地酸盐的精确检测。
为了实现上述发明目的,本发明提供以下技术方案:
本发明提供了一种油性基质软膏中依地酸盐测定的前处理方法,包括以下步骤:
1)用可溶性碱溶液对油性基质软膏进行提取,得到清液A。
所述可溶性碱溶液包括NaOH溶液、KOH溶液、Ba(OH)2溶液中的至少一种。
所述油性基质软膏包括克立硼罗软膏中的至少一种。
所述依地酸盐为依地酸二钠、依地酸钙钠、依地酸钠、依地酸四钠中的至少一种。
所述可溶性碱溶液的用量为去除油性基质软膏中油脂成分的有效量。优选地,所述油性基质软膏和可溶性碱溶液的用量比为0.5g:8~15mL,所述可溶性碱溶液的浓度为0.15~0.3M。更优选地,所述克立硼罗软膏和NaOH溶液的用量比为0.5g:10mL,所述NaOH溶液的浓度为0.2M。
优选地,步骤1)中,所述提取的具体步骤为:油性基质软膏和可溶性碱溶液混合后于70~90℃加热至少1h,然后再进行固液分离,得到清液A。优选地,所述加热方式为水浴加热,加热时间1~3h。
优选地,步骤1)中,所述固液分离的方式为趁热涡旋再离心。
进一步地,所述前处理方法,还包括以下步骤:
2)将所述清液A和金属盐溶液混合反应后进行固液分离,得到清液B。
所述金属盐溶液中的金属离子为Cu2+、Fe3+中的至少一种。
所述Fe3+来自硫酸铁、硝酸铁、氯化铁、醋酸铁中的至少一种。
所述Cu2+来自硫酸铜、醋酸铜、氯化铜、硝酸铜中的至少一种。
所述金属盐溶液的用量为去除清液A中残留的碱并使依地酸盐全部反应形成稳定的水溶性络合物的有效量。优选地,所述清液A和金属盐溶液的用量比为5ml:4~7ml,所述金属盐溶液的浓度为0.2~0.3mg/ml。更优选地,所述清液A和硫酸铜溶液的用量比为5ml:5ml,所述硫酸铜溶液的浓度为0.25mg/ml。
优选地,所述清液A和金属盐溶液反应后固液分离的方式为涡旋静置后再过滤。更优选地,所述过滤时,弃去初滤液,取续滤液,得到清液B。
优选地,将磷酸与清液A和金属盐溶液共同混合。优选地,所述清液A、硫酸铜溶液和磷酸的用量比为5ml:4~7ml:0.07~0.09ml。更优选地,所述清液A和磷酸的用量比为5ml:0.08ml。更优选地,将所述磷酸预先加入硫酸铜溶液中,然后再与清液A混合。
另一方面,本发明还提供一种油性基质软膏中依地酸盐含量测定方法,包括以下步骤:采用清液B为供试品溶液,采用高效液相色谱法进行检测。
进一步地,所述高效液相色谱法检测的色谱条件为:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,四丁基氢氧化铵磷酸溶液为流动相A,乙腈为流动相B进行梯度洗脱;检测波长254nm,流速1.2ml/min,柱温35℃,进样量25μl;所述四丁基氢氧化铵磷酸溶液的配置方法为:取一定体积水,加入40%四丁基氢氧化铵溶液,混匀,用磷酸调节pH值至7.4~7.5,再分别加入甲醇、乙腈,混匀,所述水:四丁基氢氧化铵溶液:甲醇:乙腈的体积比为1440:13:280:280。
本发明具有如下优点或有益效果:
本发明采用可溶性碱溶液作为溶散提取剂,低成本、无毒性、操作简单且提取纯度高。油性基质软膏中的凡士林等油性基质在水中几乎不溶,在可溶性碱溶液中溶解性较好,然后将油性基质软膏中不溶的成分通过固液分离等方式去除,从而可有效避免基质对依地酸盐测定的影响,同时保证依地酸盐的有效提取。进一步地,使用金属盐溶液去除清液A中残留的碱并使依地酸盐全部反应形成稳定的水溶性络合物,从而使得本发明能够简单、准确地使用高效液相色谱法检测油性基质软膏中依地酸盐的含量,具有准确度高、重复性好的特点。
附图说明
附图是用来提供对本发明实施例的进一步理解,并且构成说明书的一部分,与下面的具体实施方式一起用于解释本发明实施例,但并不构成对本发明实施例的限制。
图1为空白溶液的HPLC色谱图;
图2为供试品重复性-1的HPLC色谱图;
图3为供试品重复性-2的HPLC色谱图;
图4为供试品重复性-3的HPLC色谱图;
图5为供试品重复性-4的HPLC色谱图;
图6为供试品重复性-5的HPLC色谱图;
图7为供试品重复性-6的HPLC色谱图。
具体实施方式
为了能够更清楚地理解本发明的上述目的、特征和优点,下面结合附图和具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述,显然,所描述的实施例是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明,但是,本发明还可以采用其他不同于在此描述的其他方式来实施。因此,本发明的保护范围并不受下面公开的具体实施例的限制。
本发明采用清液B为供试品溶液,采用高效液相色谱法进行检测。HPLC检测的色谱条件为:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,四丁基氢氧化铵磷酸溶液(取水1440ml,加入40%四丁基氢氧化铵溶液13ml,混匀,用磷酸调节pH值至7.4~7.5,再分别加入甲醇280ml、乙腈280ml,混匀)为流动相A,乙腈为流动相B进行梯度洗脱;检测波长254nm,流速1.2ml/min,柱温35℃,进样量25μl。
实施例1
供试品溶液配制:取克立硼罗软膏约0.5g于50ml离心管中,精密加入0.2M氢氧化钠溶液10ml,置水浴80℃加热1h,取出,趁热涡旋60s,离心,得到清液A;精密量取清液A5ml于50ml离心管中,精密加入硫酸铜溶液(取125mg硫酸铜,置500ml的量瓶中,加8ml磷酸,水稀释至刻度,混匀即得)5ml,涡旋60s,放置1h;过滤,弃去初滤液4ml,取续滤液,得到清液B。
空白溶液配置:精密量取0.2M氢氧化钠溶液5ml于50ml离心管中,精密加入硫酸铜溶液(取约125mg硫酸铜,置500ml的量瓶中,加8ml磷酸,水稀释至刻度,混匀即得)5ml,涡旋60s,放置1h,得到空白溶液。
按照上述高效液相色谱法,以空白溶液为参照,对供试品溶液进行依地酸盐含量的测定,测定结果见表1所示。图1为空白溶液的HPLC色谱图;图2-7为供试品溶液重复6次的HPLC色谱图。重复6次RSD为1.33%,表明检测结果重复性好。
表1进样结果
实施例2
为了进一步验证检测结果的准确性,以约0.5mg凡士林为基质,加入一定量的依地酸钙钠(具体加入量参见表2),配置成油性基质软膏。
供试品溶液配制:取上述自配的油性基质软膏于50ml离心管中,精密加入0.2M氢氧化钠溶液10ml,置水浴80℃加热1h,取出,趁热涡旋60s,离心,得到清液A;精密量取清液A5ml于50ml离心管中,精密加入硫酸铜溶液(取125mg硫酸铜,置500ml的量瓶中,加8ml磷酸,水稀释至刻度,混匀即得)5ml,涡旋60s,放置1h;过滤,弃去初滤液4ml,取续滤液,得到清液B。
空白溶液配置:精密量取0.2M氢氧化钠溶液5ml于50ml离心管中,精密加入硫酸铜溶液(取约125mg硫酸铜,置500ml的量瓶中,加8ml磷酸,水稀释至刻度,混匀即得)5ml,涡旋60s,放置1h,得到空白溶液。
按照上述高效液相色谱法,以空白溶液为参照,对供试品溶液进行依地酸盐含量的测定,测定结果见表2所示。可以看出依地酸盐的提取回收率高,平均检测准确性达到了97.73%,准确度高。
表2回收率试验结果
Claims (11)
1.一种油性基质软膏中依地酸盐测定的前处理方法,包括以下步骤:
1)用可溶性碱溶液对油性基质软膏进行提取,得到清液A;
所述油性基质软膏和可溶性碱溶液的用量比为0.5g:8~15mL,所述可溶性碱溶液的浓度为0.15~0.3M;
2)将所述清液A和金属盐溶液混合反应后进行固液分离,得到清液B;
所述清液A和金属盐溶液的用量比为5ml:4~7ml,所述金属盐溶液的浓度为0.2~0.3mg/ml。
2.如权利要求1所述的前处理方法,其特征在于,
所述可溶性碱溶液包括NaOH溶液、KOH溶液、Ba(OH)2溶液中的至少一种;
所述油性基质软膏包括克立硼罗软膏中的至少一种;
所述依地酸盐为依地酸二钠、依地酸钙钠、依地酸钠、依地酸四钠中的至少一种。
3.如权利要求1所述的前处理方法,其特征在于,
步骤1)中,所述提取的具体步骤为:油性基质软膏和可溶性碱溶液混合后于70~90℃加热至少1h,然后再进行固液分离,得到清液A。
4.如权利要求1所述的前处理方法,其特征在于,
所述油性基质软膏为克立硼罗软膏,所述可溶性碱溶液为NaOH溶液;
所述克立硼罗软膏和NaOH溶液的用量比为0.5g:10mL,所述NaOH溶液的浓度为0.2M。
步骤1)中,所述提取的具体步骤为:油性基质软膏和可溶性碱溶液混合后于70~90℃加热至少1h,然后再进行固液分离,得到清液A;所述固液分离的方式为趁热涡旋再离心。
5.如权利要求1所述的前处理方法,其特征在于,
所述金属盐溶液中的金属离子为Cu2+、Fe3+中的至少一种;
所述Fe3+来自硫酸铁、硝酸铁、氯化铁、醋酸铁中的至少一种;
所述Cu2+来自硫酸铜、醋酸铜、氯化铜、硝酸铜中的至少一种。
6.如权利要求5所述的前处理方法,其特征在于,
所述清液A采用权利要求4所述的前处理方法制备所得,
所述清液A和硫酸铜溶液的用量比为5ml:5ml,所述硫酸铜溶液的浓度为0.25mg/ml。
7.如权利要求5所述的前处理方法,其特征在于,
将磷酸与清液A和金属盐溶液共同混合,所述清液A、硫酸铜溶液和磷酸的用量比为5ml:4~7ml:0.07~0.09ml。
8.如权利要求5所述的前处理方法,其特征在于,
所述清液A和金属盐溶液反应后固液分离的方式为涡旋静置后再过滤。更优选地,所述过滤时,弃去初滤液,取续滤液,得到清液B。
9.如权利要求6所述的前处理方法,其特征在于,
所述清液A和磷酸的用量比为5ml:0.08ml;所述磷酸预先加入硫酸铜溶液中,然后再与清液A混合。
10.一种油性基质软膏中依地酸盐含量测定方法,其特征在于,包括以下步骤:采用权利要求1~9任一项所述方法制备的清液B为供试品溶液,采用高效液相色谱法进行检测。
11.如权利要求10所述的依地酸盐含量测定方法,其特征在于,所述高效液相色谱法检测的色谱条件为:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,四丁基氢氧化铵磷酸溶液为流动相A,乙腈为流动相B进行梯度洗脱;检测波长254nm,流速1.2ml/min,柱温35℃,进样量25μl;所述四丁基氢氧化铵磷酸溶液的配置方法为:取一定体积水,加入40%四丁基氢氧化铵溶液,混匀,用磷酸调节pH值至7.4~7.5,再分别加入甲醇、乙腈,混匀,所述水:四丁基氢氧化铵溶液:甲醇:乙腈的体积比为1440:13:280:280。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202410194065.8A CN118090958A (zh) | 2024-02-21 | 2024-02-21 | 一种油性基质软膏中依地酸盐测定的前处理方法和含量测定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202410194065.8A CN118090958A (zh) | 2024-02-21 | 2024-02-21 | 一种油性基质软膏中依地酸盐测定的前处理方法和含量测定方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN118090958A true CN118090958A (zh) | 2024-05-28 |
Family
ID=91147086
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202410194065.8A Pending CN118090958A (zh) | 2024-02-21 | 2024-02-21 | 一种油性基质软膏中依地酸盐测定的前处理方法和含量测定方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN118090958A (zh) |
-
2024
- 2024-02-21 CN CN202410194065.8A patent/CN118090958A/zh active Pending
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN107561172B (zh) | 一种同时检测营养素软胶囊中多种维生素含量的方法 | |
CN111443151B (zh) | 复方氨基酸注射液中微量半胱氨酸含量的检测方法 | |
CN107449850A (zh) | 快速协同浊点萃取‑高效液相色谱联用测定环境水样中烷基酚的方法 | |
CN111518229B (zh) | 一种除去舒更葡糖钠精制品中元素杂质和色素的方法 | |
CN110174470A (zh) | 一种水产品中海洋生物毒素的高通量检测方法 | |
Chen et al. | Development of a high-performance liquid chromatography method for the simultaneous quantification of four organoarsenic compounds in the feeds of swine and chicken | |
CN109682900B (zh) | 采用高效液相色谱法测定神经酸含量的方法 | |
CN118090958A (zh) | 一种油性基质软膏中依地酸盐测定的前处理方法和含量测定方法 | |
CN111965273A (zh) | 一种坎地沙坦酯中基因毒杂质的hplc法检测方法 | |
CN103901147B (zh) | 一种穿心莲内酯滴丸溶出度的测定方法 | |
CN114384179A (zh) | 一种利用高效液相紫外法同时定量检测月桂酰基甲基牛磺酸钠中牛磺酸和甲基牛磺酸的方法 | |
CN103175930A (zh) | 一种测定亚硫酸钠含量的高效液相色谱分析方法 | |
CN115327004B (zh) | 一种氧化氯吡格雷粗品的检测方法 | |
CN114200036B (zh) | 一种化妆品或其原料中添加物的检测方法 | |
CN115327021B (zh) | 一种测定枸橼酸铁及其有机酸杂质的离子色谱法 | |
CN113447593B (zh) | 一种那非类物质的检测方法 | |
CN117147711B (zh) | 一种在线吸释技术检测小麦粉中次磷酸盐、正磷酸盐、溴酸盐及溴离子的方法 | |
CN113624888B (zh) | 一种血清和粪便中吲哚乙酸和吲哚丙酸的检测方法 | |
JP3470639B2 (ja) | ステンレス鋼硫酸酸洗液中の有機化合物の迅速分析方法 | |
CN108508099B (zh) | 一种化妆品中3-亚苄基樟脑含量的测定方法 | |
CN114088826A (zh) | 一种维生素d3的提取方法、检测维生素d3含量的方法 | |
CN115290783A (zh) | 油溶性软膏中依地酸盐的含量测定方法 | |
CN117554524A (zh) | 一种注射液中氰化物残留的液相色谱检测方法 | |
CN117347539A (zh) | 同时测定药用胶塞中8种抗氧剂可提取量与迁移量的方法 | |
CN117269407A (zh) | 一种采用离子色谱法检测亚硝酸根的方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination |