CN117721079A - 一种促进nk细胞抗肿瘤活性的培养基及培养方法 - Google Patents
一种促进nk细胞抗肿瘤活性的培养基及培养方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN117721079A CN117721079A CN202410109188.7A CN202410109188A CN117721079A CN 117721079 A CN117721079 A CN 117721079A CN 202410109188 A CN202410109188 A CN 202410109188A CN 117721079 A CN117721079 A CN 117721079A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- culture medium
- concentration
- medium
- culture
- cells
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 title claims abstract description 97
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 title claims abstract description 74
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 title claims abstract description 18
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 title claims abstract description 13
- 238000012136 culture method Methods 0.000 title abstract description 15
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 claims abstract description 34
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims abstract description 32
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims abstract description 21
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims abstract description 21
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims abstract description 21
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims abstract description 21
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 15
- DFPAKSUCGFBDDF-ZQBYOMGUSA-N [14c]-nicotinamide Chemical compound N[14C](=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-ZQBYOMGUSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 claims abstract description 8
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 claims abstract description 8
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 25
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 19
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 claims description 16
- SECPZKHBENQXJG-FPLPWBNLSA-N palmitoleic acid Chemical compound CCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O SECPZKHBENQXJG-FPLPWBNLSA-N 0.000 claims description 16
- DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N Nicotinamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 235000021319 Palmitoleic acid Nutrition 0.000 claims description 8
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 claims description 8
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 claims description 8
- SECPZKHBENQXJG-UHFFFAOYSA-N cis-palmitoleic acid Natural products CCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O SECPZKHBENQXJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- TWJNQYPJQDRXPH-UHFFFAOYSA-N 2-cyanobenzohydrazide Chemical compound NNC(=O)C1=CC=CC=C1C#N TWJNQYPJQDRXPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 235000021360 Myristic acid Nutrition 0.000 claims description 6
- TUNFSRHWOTWDNC-UHFFFAOYSA-N Myristic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCC(O)=O TUNFSRHWOTWDNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229960003966 nicotinamide Drugs 0.000 claims description 6
- 235000005152 nicotinamide Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000011570 nicotinamide Substances 0.000 claims description 6
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 abstract description 9
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 abstract description 3
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 abstract description 3
- 230000022534 cell killing Effects 0.000 description 16
- 102000046299 Transforming Growth Factor beta1 Human genes 0.000 description 6
- 101800002279 Transforming growth factor beta-1 Proteins 0.000 description 6
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 5
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 3
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 3
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 3
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 2
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 2
- TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N tetradecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCC[14C](O)=O TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N 0.000 description 2
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012606 in vitro cell culture Methods 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明涉及细胞体外培养技术领域。本发明提供了一种促进NK细胞抗肿瘤活性的培养基及培养方法，所述培养基包括第一培养基和第二培养基；所述第一培养基以AIM‑V培养基为基础添加IL‑2和IL‑21；所述第二培养基以AIM‑V培养基为基础添加IL‑2、IL‑21、烟酰胺、TGFβ1抑制剂和脂肪酸。本发明的培养基可以用于NK细胞的体外培养，能够有效提高NK细胞的代谢，提高培育的NK细胞的自身活性、抗肿瘤活性、ros抗性，增强免疫抑制抗性。
Description
技术领域
本发明涉及细胞体外培养技术领域，尤其涉及一种促进NK细胞抗肿瘤活性的培养基及培养方法。
背景技术
自然杀伤细胞(naturalkiller cell，NK)是机体重要的免疫细胞，不仅与抗肿瘤、抗病毒感染和免疫调节有关，而且在某些情况下参与超敏反应和自身免疫性疾病的发生，能够识别靶细胞、杀伤介质。
NK细胞在于正常人体中通常处于免疫静止状态，约占血液中淋巴细胞的5％～15％。对于NK细胞的体外培养，目前面临的困难主要包括：1.纯度越高的细胞扩增难度越大；2.目前多使用基因改造的肿瘤细胞系K562系或EBV转化的淋巴母细胞系病毒来刺激NK细胞的高速扩增。但这些因素的加入，对细胞产品带来了安全性的隐忧。
因此，寻求一种能够提高细胞活性，抗肿瘤活性高的NK细胞培养方法非常重要。
发明内容
本发明的目的在于提供一种促进NK细胞抗肿瘤活性的培养基及培养方法，用于NK细胞的体外培养。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种促进NK细胞抗肿瘤活性的培养基，所述培养基包括第一培养基和第二培养基；
所述第一培养基以AIM-V培养基为基础添加IL-2和IL-21；
所述第二培养基以AIM-V培养基为基础添加IL-2、IL-21、烟酰胺、TGFβ1抑制剂和脂肪酸。
作为优选，所述第一培养基中IL-2的浓度为1200～1500IU/mL，IL-21的浓度为12～15ng/mL。
作为优选，所述第二培养基中IL-2的浓度为700～800IU/mL，IL-21的浓度为6～8ng/mL，烟酰胺的浓度为40～50mM，TGFβ1抑制剂浓度为4～6μM，所述脂肪酸的浓度为0.1～0.3mM。
作为优选，所述脂肪酸为花生四烯酸、肉豆蔻酸和棕榈油酸，所述花生四烯酸、肉豆蔻酸和棕榈油酸的体积比为1：2.5～3.5：1.5～1.9。
本发明还提供了所述的培养基在促进NK细胞抗肿瘤活性中的应用。
本发明还提供了一种利用所述的培养基培育NK细胞的方法，包括如下步骤：
(1)将NK细胞接种到第一培养基中，培育10～14d；
(2)将培养基更换为第二培养基，继续培育16～25d。
作为优选，步骤(1)中所述接种时NK细胞的接种浓度为6～8×105个/mL。
作为优选，步骤(1)中所述培育的方法为：每60～72h添加一次第一培养基，使NK细胞的浓度保持在6～8×105个/mL。
作为优选，步骤(2)中所述继续培育的方法为：每36～48h更换一次培养基，当使NK细胞的浓度达到1.8×106个/mL以上时，添加总体积40～60％的第二培养基。
本发明提供了一种促进NK细胞抗肿瘤活性的培养基及培养方法，所述培养基包括第一培养基和第二培养基；所述第一培养基以AIM-V培养基为基础添加IL-2和IL-21；所述第二培养基以AIM-V培养基为基础添加IL-2、IL-21、烟酰胺、TGFβ1抑制剂和脂肪酸。本发明的培养基可以用于NK细胞的体外培养，能够有效提高NK细胞的代谢，提高培育的NK细胞的自身活性、抗肿瘤活性、ros抗性，增强免疫抑制抗性。
具体实施方式
本发明提供了一种促进NK细胞抗肿瘤活性的培养基，所述培养基包括第一培养基和第二培养基；
所述第一培养基以AIM-V培养基为基础添加IL-2和IL-21；
所述第二培养基以AIM-V培养基为基础添加IL-2、IL-21、烟酰胺、TGFβ1抑制剂和脂肪酸。
在本发明中，所述第一培养基中IL-2的浓度优选为1200～1500IU/mL，进一步优选为1350IU/mL，IL-21的浓度优选为12～15ng/mL，进一步优选为13～14ng/mL。
在本发明中，所述第二培养基中IL-2的浓度优选为700～800IU/mL，进一步优选为750IU/mL，IL-21的浓度优选为6～8ng/mL，进一步优选为7ng/mL，烟酰胺的浓度优选为40～50mM，进一步优选为45mM，TGFβ1抑制剂的浓度优选为4～6μM，进一步优选为5μM，所述脂肪酸的浓度优选为0.1～0.3mM，进一步优选为0.2mM。
在本发明中，所述脂肪酸优选为花生四烯酸、肉豆蔻酸和棕榈油酸，所述花生四烯酸、肉豆蔻酸和棕榈油酸的体积比优选为1：2.5～3.5：1.5～1.9，进一步优选为1：3：1.7。
本发明还提供了所述的培养基在促进NK细胞抗肿瘤活性中的应用。
本发明还提供了一种利用所述的培养基培育NK细胞的方法，包括如下步骤：
(1)将NK细胞接种到第一培养基中，培育10～14d；
(2)将培养基更换为第二培养基，继续培育16～25d。
在本发明中，步骤(1)中所述接种时NK细胞的接种浓度优选为6～8×105个/mL，进一步优选为7×105个/mL。
在本发明中，步骤(1)中所述培育的方法优选为：每60～72h添加一次第一培养基，使NK细胞的浓度保持在6～8×105个/mL，进一步优选为每66h添加一次第一培养基，使NK细胞的浓度保持在6～8×105个/mL。
在本发明中，步骤(2)中所述继续培育的方法优选为：每36～48h更换一次培养基，当使NK细胞的浓度达到1.8×106个/mL以上时，添加总体积40～60％的第二培养基，进一步优选为每42h更换一次培养基，当使NK细胞的浓度达到1.8×106个/mL以上时，添加总体积50％的第二培养基。
下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
本发明实施例所用的AIM-V培养基购买自赛默飞世尔科技公司。
实施例1
一种培育NK细胞的方法，包括如下步骤：
(1)将花生四烯酸、肉豆蔻酸和棕榈油酸按照体积比为1：3.5：1.5的比例混合，得到脂肪酸；
(2)在AIM-V培养基中添加IL-2和IL-21，使IL-2的浓度为1200IU/mL，IL-21的浓度为15ng/mL，得到第一培养基；
在AIM-V培养基中添加IL-2、IL-21、烟酰胺、TGFβ1抑制剂和脂肪酸，使IL-2的浓度为700IU/mL，IL-21的浓度为8ng/mL，烟酰胺的浓度为40mM，TGFβ1抑制剂浓度为6μM，所述脂肪酸的浓度为0.3mM，得到第二培养基；
(3)将NK细胞按照8×105个/mL的比例接种到第一培养基中，培育14d，培育过程中72h添加一次第一培养基，使NK细胞的浓度降低至8×105个/mL；
(4)随后将培养基更换为第二培养基，继续培育16d，培育过程中每36h更换一次培养基，当使NK细胞的浓度达到1.8×106个/mL以上时，添加总体积40％的第二培养基。
实施例2
一种培育NK细胞的方法，包括如下步骤：
(1)将花生四烯酸、肉豆蔻酸和棕榈油酸按照体积比为1：2.5：1.9的比例混合，得到脂肪酸；
(2)在AIM-V培养基中添加IL-2和IL-21，使IL-2的浓度为1500IU/mL，IL-21的浓度为12ng/mL，得到第一培养基；
在AIM-V培养基中添加IL-2、IL-21、烟酰胺、TGFβ1抑制剂和脂肪酸，使IL-2的浓度为800IU/mL，IL-21的浓度为6ng/mL，烟酰胺的浓度为50mM，TGFβ1抑制剂浓度为4μM，所述脂肪酸的浓度为0.1mM，得到第二培养基；
(3)将NK细胞按照6×105个/mL的比例接种到第一培养基中，培育10d，培育过程中60h添加一次第一培养基，使NK细胞的浓度降低至6×105个/mL；
(4)随后将培养基更换为第二培养基，继续培育25d，培育过程中每48h更换一次培养基，当使NK细胞的浓度达到1.8×106个/mL以上时，添加总体积60％的第二培养基。
实施例3
一种培育NK细胞的方法，包括如下步骤：
(1)将花生四烯酸、肉豆蔻酸和棕榈油酸按照体积比为1：3：1.7的比例混合，得到脂肪酸；
(2)在AIM-V培养基中添加IL-2和IL-21，使IL-2的浓度为1350IU/mL，IL-21的浓度为14ng/mL，得到第一培养基；
在AIM-V培养基中添加IL-2、IL-21、烟酰胺、TGFβ1抑制剂和脂肪酸，使IL-2的浓度为750IU/mL，IL-21的浓度为7ng/mL，烟酰胺的浓度为45mM，TGFβ1抑制剂浓度为5μM，所述脂肪酸的浓度为0.2mM，得到第二培养基；
(3)将NK细胞按照7×105个/mL的比例接种到第一培养基中，培育12d，培育过程中66h添加一次第一培养基，使NK细胞的浓度降低至7×105个/mL；
(4)随后将培养基更换为第二培养基，继续培育20d，培育过程中每42h更换一次培养基，当使NK细胞的浓度达到1.8×106个/mL以上时，添加总体积50％的第二培养基。
对比例
一种培育NK细胞的方法，包括如下步骤：
(1)在AIM-V培养基中添加IL-2和IL-21，使IL-2的浓度为1350IU/mL，IL-21的浓度为14ng/mL，得到第一培养基；
在AIM-V培养基中添加IL-2和IL-21，使IL-2的浓度为750IU/mL，IL-21的浓度为7ng/mL，得到第二培养基；
(3)将NK细胞按照7×105个/mL的比例接种到第一培养基中，培育12d，培育过程中66h添加一次第一培养基，使NK细胞的浓度降低至7×105个/mL；
(4)随后将培养基更换为第二培养基，继续培育20d，培育过程中每42h更换一次培养基，当使NK细胞的浓度达到1.8×106个/mL以上时，添加总体积50％的第二培养基。
试验例
(1)将NK细胞分别采用实施例1～3和对比例的方法进行培养，培养结束后检测细胞纯度和扩增倍数。
(2)将实施例1～3和对比例培养后的NK细胞分别与肿瘤细胞K562按照3：1的比例混合，采用乳酸脱氢酶释放法测定各组别培育的NK细胞对K562肿瘤细胞的杀伤效果。
结果
(1)采用流式细胞术对细胞纯度和扩增倍数进行检测，结果显示：
实施例1的培养方法得到的NK细胞的细胞纯度为94.7％，扩增倍数为891.3倍；
实施例2的培养方法得到的NK细胞的细胞纯度为93.1％，扩增倍数为798.3倍；
实施例3的培养方法得到的NK细胞的细胞纯度为96.2％，扩增倍数为910.3倍；
对比例的培养方法得到的NK细胞的细胞纯度为87.8％，扩增倍数为434.7倍。
(2)采用乳酸脱氢酶释放法测定NK细胞对K562肿瘤细胞的杀伤效果，结果显示：
实施例1的培养方法得到的NK细胞的效靶比为5：1时的细胞杀伤率为52.76％，效靶比为10：1时的细胞杀伤率为69.73％，效靶比为20：1时的细胞杀伤率为89.11％，效靶比为40：1时的细胞杀伤率达100％；
实施例2的培养方法得到的NK细胞的效靶比为5：1时的细胞杀伤率为53.81％，效靶比为10：1时的细胞杀伤率为67.09％，效靶比为20：1时的细胞杀伤率为86.10％，效靶比为40：1时的细胞杀伤率达100％；
实施例3的培养方法得到的NK细胞的效靶比为5：1时的细胞杀伤率为54.09％，效靶比为10：1时的细胞杀伤率为70.21％，效靶比为20：1时的细胞杀伤率为90.35％，效靶比为40：1时的细胞杀伤率达100％；
对比例的培养方法得到的NK细胞的效靶比为5：1时的细胞杀伤率为31.04％，效靶比为10：1时的细胞杀伤率为53.87％，效靶比为20：1时的细胞杀伤率为78.06％，效靶比为40：1时的细胞杀伤率为88.55％。
由以上实施例可知，本发明提供了一种促进NK细胞抗肿瘤活性的培养基及培养方法，所述培养基包括第一培养基和第二培养基；所述第一培养基以AIM-V培养基为基础添加IL-2和IL-21；所述第二培养基以AIM-V培养基为基础添加IL-2、IL-21、烟酰胺、TGFβ1抑制剂和脂肪酸。本发明的培养基可以用于NK细胞的体外培养，能够有效提高NK细胞的代谢，提高培育的NK细胞的自身活性、抗肿瘤活性、ros抗性，增强免疫抑制抗性。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (9)
1.一种促进NK细胞抗肿瘤活性的培养基，其特征在于，所述培养基包括第一培养基和第二培养基；
所述第一培养基以AIM-V培养基为基础添加IL-2和IL-21；
所述第二培养基以AIM-V培养基为基础添加IL-2、IL-21、烟酰胺、TGFβ1抑制剂和脂肪酸。
2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述第一培养基中IL-2的浓度为1200～1500IU/mL，IL-21的浓度为12～15ng/mL。
3.根据权利要求2所述的培养基，其特征在于，所述第二培养基中IL-2的浓度为700～800IU/mL，IL-21的浓度为6～8ng/mL，烟酰胺的浓度为40～50mM，TGFβ1抑制剂浓度为4～6μM，所述脂肪酸的浓度为0.1～0.3mM。
4.根据权利要求1～3任意一项所述的培养基，其特征在于，所述脂肪酸为花生四烯酸、肉豆蔻酸和棕榈油酸，所述花生四烯酸、肉豆蔻酸和棕榈油酸的体积比为1：2.5～3.5：1.5～1.9。
5.权利要求1～4任意一项所述的培养基在促进NK细胞抗肿瘤活性中的应用。
6.一种利用权利要求1～4任意一项所述的培养基培育NK细胞的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将NK细胞接种到第一培养基中，培育10～14d；
(2)将培养基更换为第二培养基，继续培育16～25d。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述接种时NK细胞的接种浓度为6～8×105个/mL。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述培育的方法为：每60～72h添加一次第一培养基，使NK细胞的浓度保持在6～8×105个/mL。
9.根据权利要求6～8任意一项所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述继续培育的方法为：每36～48h更换一次培养基，当使NK细胞的浓度达到1.8×106个/mL以上时，添加总体积40～60％的第二培养基。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202410109188.7A CN117721079A (zh) | 2024-01-26 | 2024-01-26 | 一种促进nk细胞抗肿瘤活性的培养基及培养方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202410109188.7A CN117721079A (zh) | 2024-01-26 | 2024-01-26 | 一种促进nk细胞抗肿瘤活性的培养基及培养方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN117721079A true CN117721079A (zh) | 2024-03-19 |
Family
ID=90209067
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202410109188.7A Pending CN117721079A (zh) | 2024-01-26 | 2024-01-26 | 一种促进nk细胞抗肿瘤活性的培养基及培养方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN117721079A (zh) |
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20090263410A1 (en) * | 2005-10-24 | 2009-10-22 | Proyecto De Biomedicina Cima, S.L. | Use of tgf-b1 inhibitor peptides in the preparation of an immune response modulating agent |
| US20170304418A1 (en) * | 2016-04-25 | 2017-10-26 | Regen BioPharma, Inc. | Universal donor checkpoint inhibitor silenced/gene edited cord blood killer cells |
| US20180245044A1 (en) * | 2015-09-04 | 2018-08-30 | Miltenyi Biotec Gmbh | Method for natural killer cell expansion |
| CN109593711A (zh) * | 2017-10-02 | 2019-04-09 | 盖米达细胞有限公司 | 扩增自然杀手细胞部份的扩增方法及用途 |
| CN113527306A (zh) * | 2020-04-17 | 2021-10-22 | 南京圣和药物研发有限公司 | 喹啉类TGF-β1抑制剂的晶型 |
| CN114196630A (zh) * | 2022-01-17 | 2022-03-18 | 顾加明 | 一种nk细胞培养基及nk细胞的培养方法 |
| WO2023018621A1 (en) * | 2021-08-10 | 2023-02-16 | Gamida-Cell Ltd. | Engineered nk cells, methods of their production and uses thereof |
| CN117398457A (zh) * | 2017-01-06 | 2024-01-16 | 供石公司 | 亚型特异性、背景许可性TGFβ1抑制剂及其用途 |
-
2024
- 2024-01-26 CN CN202410109188.7A patent/CN117721079A/zh active Pending
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20090263410A1 (en) * | 2005-10-24 | 2009-10-22 | Proyecto De Biomedicina Cima, S.L. | Use of tgf-b1 inhibitor peptides in the preparation of an immune response modulating agent |
| US20180245044A1 (en) * | 2015-09-04 | 2018-08-30 | Miltenyi Biotec Gmbh | Method for natural killer cell expansion |
| US20170304418A1 (en) * | 2016-04-25 | 2017-10-26 | Regen BioPharma, Inc. | Universal donor checkpoint inhibitor silenced/gene edited cord blood killer cells |
| CN117398457A (zh) * | 2017-01-06 | 2024-01-16 | 供石公司 | 亚型特异性、背景许可性TGFβ1抑制剂及其用途 |
| CN109593711A (zh) * | 2017-10-02 | 2019-04-09 | 盖米达细胞有限公司 | 扩增自然杀手细胞部份的扩增方法及用途 |
| CN113527306A (zh) * | 2020-04-17 | 2021-10-22 | 南京圣和药物研发有限公司 | 喹啉类TGF-β1抑制剂的晶型 |
| WO2023018621A1 (en) * | 2021-08-10 | 2023-02-16 | Gamida-Cell Ltd. | Engineered nk cells, methods of their production and uses thereof |
| CN114196630A (zh) * | 2022-01-17 | 2022-03-18 | 顾加明 | 一种nk细胞培养基及nk细胞的培养方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3934877B2 (ja) | 動物細胞培養用無血清培地 | |
| US5976833A (en) | Method for animal cell culture | |
| JPS63164891A (ja) | 酵母によるヒト腫瘍壊死因子の生産方法 | |
| EP0144064B1 (en) | Method for producing interferons | |
| EP4242301A1 (en) | Compound enzyme and application thereof in preparation of l-ergothioneine | |
| Lee et al. | Production of androsta-1, 4-diene-3, 17-dione from cholesterol using immobilized growing cells of Mycobacterium sp. NRRL B-3683 adsorbed on solid carriers | |
| CN114561358B (zh) | 一种提高细胞慢病毒感染率的增强感染培养基及方法 | |
| CN117721079A (zh) | 一种促进nk细胞抗肿瘤活性的培养基及培养方法 | |
| JP2004509606A (ja) | 糖類の追加供給を伴う高濃縮ポリグルタミン酸の製造方法 | |
| CN113817685A (zh) | 一种car-t细胞无血清培养基及其培养方法 | |
| CN101450961A (zh) | 人工合成的猪干扰素基因及制备猪干扰素的方法 | |
| CN113355286A (zh) | 一种高效表达重组猫干扰素ω2的哺乳动物细胞培养工艺 | |
| CN113789276B (zh) | 一株产β-烟酰胺单核苷酸的植物乳杆菌及其应用 | |
| CN114032210A (zh) | 一种nk细胞扩增用培养基及培养方法 | |
| CN113462629A (zh) | 一种提高大肠杆菌工程菌合成2’-岩藻糖基乳糖产量的方法 | |
| JP3085700B2 (ja) | 組換え宿主細胞を用いたタンパク質の調製法 | |
| Glick | The industrial impact of the biological revolution | |
| CN1452658A (zh) | 由遗传工程酵母生产人干扰素α的方法 | |
| CA1108077A (en) | High potency glucamylase and alapha amylase enzyme system by cultivation of aspergillus niger | |
| EP0658202A1 (en) | Eucaryotic cells transformed with a mammalian phospholipid kinase or protein kinase and assays using them | |
| RU2145351C1 (ru) | Способ активации дрожжей | |
| JPH08258A (ja) | キャンディダ属に属する微生物およびそれを用いたイノシトールの製造方法 | |
| JP2990805B2 (ja) | 無血清培地、動物細胞の培養方法および異種蛋白質の製造方法 | |
| Zhang et al. | Production of granulocyte-macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) by high cell density fermentation of secretory recombination Escherichia coli | |
| KR100241266B1 (ko) | 재조합 효모에서 인간 알파-인터페론을 고수율로 생산하는 방법 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |