CN117679485A

CN117679485A - 一种葛根肽及其应用

Info

Publication number: CN117679485A
Application number: CN202410124167.2A
Authority: CN
Inventors: 王柯凯; 张克让
Original assignee: Yantai Youda Biotechnology Development Co ltd
Current assignee: Yantai Youda Biotechnology Development Co ltd
Priority date: 2024-01-30
Filing date: 2024-01-30
Publication date: 2024-03-12
Anticipated expiration: 2044-01-30
Also published as: CN117679485B

Abstract

本发明涉及功能性组合物技术领域，具体公开了一种葛根肽及其应用，所述葛根肽包括质量比75‑85:1的有效成分和稳定剂，所述有效成分包括葛根提取物、紫茉莉根提取物和番石榴根提取物，所述葛根提取物、紫茉莉根提取物和番石榴根提取物的质量比为3‑5:1:1；所述稳定剂包括质量比为2‑4:1的海藻糖和β‑环状糊精。本发明的葛根肽可应用于护肤品、功能性食品、保健品或药品中，具有显著的降血糖、调血脂效果；通过控制葛根提取物、紫茉莉根提取物和番石榴根提取物的复配比例，将三者复配用于降糖降脂，能够起到显著的协同增效作用，实现低剂量和高效应的治疗效果。

Description

一种葛根肽及其应用

技术领域

本发明涉及功能性组合物技术领域，具体涉及一种葛根肽及其应用。

背景技术

糖尿病是一种多病因引起的代谢疾病，特点是慢性高血糖，伴随因胰岛素分泌或作用缺陷引起的糖、脂肪和蛋白质代谢紊乱，主要分为1型糖尿病（T1DM）、2型糖尿病（T2DM）。其中，2型糖尿病是一种以高血糖和胰岛素抵抗为特征的代谢疾病，占患病人数的95%以上。

葛根为豆科植物野葛的干燥根，含多种黄酮类成分，主要活性成分为大豆素、大豆甙、葛根素、葛根素-7-木糖甙等。葛根性良、气平、味甘，具有清热、降火、排毒、抗炎、抗氧化、抗肿瘤等功效。近年来，研究发现葛根对糖尿病也有一定的治疗作用。葛根中的黄酮类化合物和皂角苷等成分具有明显的降血糖作用，可以促进胰岛素分泌，改善胰岛素抵抗，降低血糖水平；同时，还能改善血脂代谢，降低胆固醇和甘油三酯水平，预防心血管疾病的发生。在糖尿病治疗领域，含有葛根的食品、药品、保健品逐渐被开发。

发明专利CN115364170B公开了一种糖代谢调节剂及其制备方法和应用，按重量份计，由以下组份组成：山药5-10份、黑木耳5-10份、栀子3-6份、葛根3-6份、酒炙黄精3-6份、桑叶3-6份、普洱熟茶1-2份、肉桂1-2份；其制备方法包括以下步骤：S1备料：按所述重量份称取各组份；S2水提：加水8-10倍煎煮20-40min，煎煮2-3次，过滤，合并滤液；S3醇沉：减压浓缩至密度为1.06-1.07g/mL，加入1.5-3倍量无水乙醇，醇沉24-48h后，回流提取1.5h-2h，过滤，将滤液减压蒸馏除去乙醇，得精制液；S4干燥：将精制液浓缩，真空冷冻干燥或喷雾干燥，粉碎，即得糖代谢调节剂。上述配方组分种类多，葛根仅作为辅助成分，且经上述制备方法处理后的葛根有效活性成分生物利用率低。

发明内容

为了解决现有技术中葛根仅作为降糖辅助成分添加，有效活性成分生物利用率低等缺陷，本发明提供了一种葛根肽及其应用。

第一方面，本发明提供一种葛根肽，采用如下的技术方案：

一种葛根肽，其有效成分包括葛根提取物、紫茉莉根提取物和番石榴根提取物，所述葛根提取物、紫茉莉根提取物和番石榴根提取物的质量比为3-5:1:1。

优选的，所述葛根提取物、紫茉莉根提取物和番石榴根提取物的质量比为4:1:1。

优选的，所述葛根提取物由以下方法制得：

S11、葛根粉碎过60-80目筛得葛根粉；

S12、按料液比1:8-10，将葛根粉加入质量分数为30-40%的1,3-丁二醇水溶液中，于70-80℃的温度下搅拌提取3-5h后，降温至40-50℃，加入葛根粉重量1-2%的α-淀粉酶酶解30-50min后，过滤得提取液；

S13、将提取液加柠檬酸调节pH值至3-3.8，接入复合菌室温发酵10-16h，得发酵液；

S14、向发酵液中加入10-15倍重量的去离子水，常压沸腾提取2-3h后，经8000-10000rpm/min离心3-5min，离心液经膜过滤获得分子量1500-2500Da的过滤液，控制进风温度为170-180℃，出风温度为60-70℃，将过滤液喷雾干燥，得葛根提取物。

优选的，所述复合菌包括活菌数比为3:1的植物乳杆菌和黑曲霉菌，且提取液中活菌数不低于1.0×10⁶CFU/g。

优选的，所述紫茉莉根提取物由以下方法制得：

S21、将紫茉莉根粉碎后过60-80目筛，得紫茉莉根粉；

S22、按料液比1:20-30，将紫茉莉根粉加入到质量分数为25-35%的乙醇水溶液中，于60-70℃的温度下搅拌提取2-3h后过滤得提取液，将提取液减压浓缩得到60℃下相对密度为1.05-1.15的紫茉莉根提取物浸膏；

S23、将紫茉莉根提取物浸膏置于60-80℃的真空干燥箱内干燥至恒重后，粉碎研磨得粒径为170-200目的紫茉莉根提取物。

优选的，所述番石榴根提取物由以下方法制得：

S31、将番石榴根粉碎后过60-80目筛，得番石榴根粉末；

S32、按料液比1:12-18，将番石榴根粉末加入到质量分数为70-80%的乙醇水溶液中，控制超声提取功率为300-500W，温度为48-55℃，时间为20-30min，超声提取后，过滤得提取液，将提取液减压浓缩得到60℃下相对密度为1.05-1.15的番石榴根提取物浸膏；

S33、将番石榴根提取物浸膏置于60-80℃的真空干燥箱内干燥至恒重后，粉碎研磨得粒径为170-200目的番石榴根提取物。

优选的，所述葛根肽还包括稳定剂，且有效成分和稳定剂的质量比为75-85:1。

优选的，所述稳定剂包括质量比为2-4:1的海藻糖和β-环状糊精。

优选的，所述葛根肽由以下方法制得：

将葛根提取物、紫茉莉根提取物和番石榴根提取物混合均匀后，再加入预混合的海藻糖和β-环状糊精继续混合均匀即得所需葛根肽。

第二方面，本发明提供上述葛根肽在制备功能性食品、保健品和药品中的应用。

本发明具有以下有益效果：

紫茉莉为药食同源的天然植物，其根部富含蛋白质、维生素、矿物质等营养物质和丰富的膳食纤维，有助于促进消化系统健康，调节血糖和血脂水平，预防肥胖和心血管疾病等；紫茉莉根提取物中的黄酮类化合物具有很强的抗氧化作用，能够中和自由基，减缓皮肤衰老；紫茉莉根提取物中含有的天然保湿因子能够增强皮肤的保水能力，改善肌肤干燥、粗糙等问题；紫茉莉根提取物在抗癌、抗菌、抗病毒、降血糖、强心等方面均有一定的疗效，具有较高的药用价值。番石榴根为传统中草药，被广泛用于治疗和保健，番石榴根含有丰富的纤维素、多种维生素、天然矿物质和类似于胰岛素的天然成分，具有一定的促进消化吸收、降脂、降血糖等作用；番石榴根中含有的多酚类、黄酮类、番石榴酸、芦丁等活性物质赋予其显著的抗菌抗炎、抗氧化抗衰老、降压保肝、增强免疫力等功效。葛根提取物、紫茉莉根提取物和番石榴根提取物三者复配制得的葛根肽具有清热解毒、抗菌抗炎、降糖降脂、抗氧化抗衰老等功效。

本发明通过控制葛根提取物、紫茉莉根提取物和番石榴根提取物的复配比例，将三者复配用于降糖降脂，能够起到显著的协同增效作用，从而实现低剂量和高效应的治疗效果。

本发明通过在葛根肽制备过程中添加复配稳定剂，在葛根肽有效成分表面形成独特的保护膜，提高有效成分稳定性和生物利用率的同时，还能够显著改善葛根肽的口感。

具体实施方式

下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅为帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。

实施本发明的过程、条件、试剂、实验方法等，除专门提及的内容之外，均为本领域的普遍知识和公知常识。各实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规条件或制造厂商所建议的条件。

一种葛根肽，包括质量比为75-85:1有效成分和稳定剂；

其中，有效成分包括葛根提取物、紫茉莉根提取物和番石榴根提取物，且葛根提取物、紫茉莉根提取物和番石榴根提取物的质量比为3-5:1:1；

稳定剂包括质量比为2-4:1的海藻糖和β-环状糊精。

上述葛根提取物由以下方法制得：

S11、葛根粉碎过60-80目筛得葛根粉；

S13、将提取液加柠檬酸调节pH值至3-3.8，接入复合菌室温发酵10-16h，得发酵液，其中，复合菌包括活菌数比为3:1的植物乳杆菌CGMCC1.557和黑曲霉菌CICC 2420，且提取液中活菌数不低于1.0×10⁶CFU/g；

上述紫茉莉根提取物由以下方法制得：

S21、将紫茉莉根粉碎后过60-80目筛，得紫茉莉根粉；

上述番石榴根提取物由以下方法制得：

S31、将番石榴根粉碎后过60-80目筛，得番石榴根粉末；

上述葛根肽由以下方法制得：

按质量比3-5:1:1，将葛根提取物、紫茉莉根提取物和番石榴根提取物混合均匀得有效成分；

按质量比2-4:1，将海藻糖和β-环状糊精搅拌混合均匀得稳定剂；

按质量比75-85:1，将有效成分和稳定剂继续混合均匀即得所需葛根肽。

上述葛根肽在制备治疗或辅助治疗糖尿病的功能性食品、保健品或药品中的应用。

下面结合具体制备例、实施例和对比例对本发明作进一步阐述：

制备例1-3提供了葛根提取物的制备方法。

制备例1

葛根提取物由以下方法制得：

S11、葛根粉碎过60目筛得葛根粉；

S12、按料液比1:8，将葛根粉加入质量分数为30%的1,3-丁二醇水溶液中，于80℃的温度下搅拌提取3h后，降温至50℃，加入葛根粉重量1%的α-淀粉酶酶解50min后，过滤得提取液；

S13、将提取液加柠檬酸调节pH值至3，接入复合菌室温发酵10h，得发酵液，其中，复合菌包括活菌数比为3:1的植物乳杆菌CGMCC1.557和黑曲霉菌CICC 2420，且提取液中活菌数为低于1.0×10⁶CFU/g；

S14、向发酵液中加入15倍重量的去离子水，常压沸腾提取3h后，经8000rpm/min离心5min，离心液经膜过滤获得分子量1500Da的过滤液，控制进风温度为170℃，出风温度为60℃，将过滤液喷雾干燥，得葛根提取物。

制备例2

葛根提取物由以下方法制得：

S11、葛根粉碎过70目筛得葛根粉；

S12、按料液比1:9，将葛根粉加入质量分数为35%的1,3-丁二醇水溶液中，于75℃的温度下搅拌提取4h后，降温至45℃，加入葛根粉重量1.5%的α-淀粉酶酶解40min后，过滤得提取液；

S13、将提取液加柠檬酸调节pH值至3.4，接入复合菌室温发酵13h，得发酵液，其中，复合菌包括活菌数比为3:1的植物乳杆菌CGMCC1.557和黑曲霉菌CICC 2420，且提取液中活菌数不低于1.5×10⁶CFU/g；

S14、向发酵液中加入12倍重量的去离子水，常压沸腾提取2.5h后，经9000rpm/min离心4min，离心液经膜过滤获得分子量2000Da的过滤液，控制进风温度为175℃，出风温度为65℃，将过滤液喷雾干燥，得葛根提取物。

制备例3

葛根提取物由以下方法制得：

S11、葛根粉碎过80目筛得葛根粉；

S12、按料液比1:10，将葛根粉加入质量分数为40%的1,3-丁二醇水溶液中，于70℃的温度下搅拌提取5h后，降温至40℃，加入葛根粉重量2%的α-淀粉酶酶解30min后，过滤得提取液；

S13、将提取液加柠檬酸调节pH值至3.8，接入复合菌室温发酵10h，得发酵液，其中，复合菌包括活菌数比为3:1的植物乳杆菌CGMCC1.557和黑曲霉菌CICC 2420，且提取液中活菌数不低于2.0×10⁶CFU/g；

S14、向发酵液中加入10倍重量的去离子水，常压沸腾提取2h后，经10000rpm/min离心3min，离心液经膜过滤获得分子量2500Da的过滤液，控制进风温度为180℃，出风温度为70℃，将过滤液喷雾干燥，得葛根提取物。

制备例4-6提供了紫茉莉根提取物的制备方法。

制备例4

紫茉莉根提取物由以下方法制得：

S21、将紫茉莉根粉碎后过60目筛，得紫茉莉根粉；

S22、按料液比1:20，将紫茉莉根粉加入到质量分数为25%的乙醇水溶液中，于70℃的温度下搅拌提取2h后过滤得提取液，将提取液减压浓缩得到60℃下相对密度为1.05的紫茉莉根提取物浸膏；

S23、将紫茉莉根提取物浸膏置于80℃的真空干燥箱内干燥至恒重后，粉碎研磨得粒径为170目的紫茉莉根提取物。

制备例5

紫茉莉根提取物由以下方法制得：

S21、将紫茉莉根粉碎后过70目筛，得紫茉莉根粉；

S22、按料液比1:25，将紫茉莉根粉加入到质量分数为30%的乙醇水溶液中，于65℃的温度下搅拌提取2.5h后过滤得提取液，将提取液减压浓缩得到60℃下相对密度为1.10的紫茉莉根提取物浸膏；

S23、将紫茉莉根提取物浸膏置于70℃的真空干燥箱内干燥至恒重后，粉碎研磨得粒径为180目的紫茉莉根提取物。

制备例6

紫茉莉根提取物由以下方法制得：

S21、将紫茉莉根粉碎后过80目筛，得紫茉莉根粉；

S22、按料液比1:30，将紫茉莉根粉加入到质量分数为35%的乙醇水溶液中，于60℃的温度下搅拌提取3h后过滤得提取液，将提取液减压浓缩得到60℃下相对密度为1.15的紫茉莉根提取物浸膏；

S23、将紫茉莉根提取物浸膏置于60℃的真空干燥箱内干燥至恒重后，粉碎研磨得粒径为200目的紫茉莉根提取物。

制备例7-9提供了番石榴根提取物的制备方法。

制备例7

番石榴根提取物由以下方法制得：

S31、将番石榴根粉碎后过60目筛，得番石榴根粉末；

S32、按料液比1:12，将番石榴根粉末加入到质量分数为70%的乙醇水溶液中，控制超声提取功率为300W，温度为55℃，时间为20min，超声提取后，过滤得提取液，将提取液减压浓缩得到60℃下相对密度为1.05的番石榴根提取物浸膏；

S33、将番石榴根提取物浸膏置于60℃的真空干燥箱内干燥至恒重后，粉碎研磨得粒径为170目的番石榴根提取物。

制备例8

番石榴根提取物由以下方法制得：

S31、将番石榴根粉碎后过70目筛，得番石榴根粉末；

S32、按料液比1:15，将番石榴根粉末加入到质量分数为75%的乙醇水溶液中，控制超声提取功率为400W，温度为52℃，时间为25min，超声提取后，过滤得提取液，将提取液减压浓缩得到60℃下相对密度为1.10的番石榴根提取物浸膏；

S33、将番石榴根提取物浸膏置于70℃的真空干燥箱内干燥至恒重后，粉碎研磨得粒径为180目的番石榴根提取物。

制备例9

番石榴根提取物由以下方法制得：

S31、将番石榴根粉碎后过80目筛，得番石榴根粉末；

S32、按料液比1:18，将番石榴根粉末加入到质量分数为80%的乙醇水溶液中，控制超声提取功率为500W，温度为48℃，时间为30min，超声提取后，过滤得提取液，将提取液减压浓缩得到60℃下相对密度为1.15的番石榴根提取物浸膏；

S33、将番石榴根提取物浸膏置于80℃的真空干燥箱内干燥至恒重后，粉碎研磨得粒径为200目的番石榴根提取物。

实施例1-3提供了葛根肽的制备方法。

实施例1

葛根肽由以下方法制得：

按质量比3:1:1，将制备例1中的葛根提取物、制备例4中的紫茉莉根提取物和制备例7中的番石榴根提取物混合均匀得有效成分；

按质量比2:1，将海藻糖和β-环状糊精搅拌混合均匀得稳定剂；

按质量比75:1，将有效成分和稳定剂继续混合均匀即得所需葛根肽。

实施例2

葛根肽由以下方法制得：

按质量比4:1:1，将制备例2中的葛根提取物、制备例5中的紫茉莉根提取物和制备例8中的番石榴根提取物混合均匀得有效成分；

按质量比3:1，将海藻糖和β-环状糊精搅拌混合均匀得稳定剂；

按质量比80:1，将有效成分和稳定剂继续混合均匀即得所需葛根肽。

实施例3

葛根肽由以下方法制得：

按质量比5:1:1，将制备例3中的葛根提取物、制备例6中的紫茉莉根提取物和制备例9中的番石榴根提取物混合均匀得有效成分；

按质量比4:1，将海藻糖和β-环状糊精搅拌混合均匀得稳定剂；

按质量比85:1，将有效成分和稳定剂继续混合均匀即得所需葛根肽。

为验证实施例中制备得到的葛根肽的降糖降脂功效，本发明设置了对比例1-5。

对比例1

葛根肽由以下方法制得：

按质量比1:1:1，将制备例2中的葛根提取物、制备例5中的紫茉莉根提取物和制备例8中的番石榴根提取物混合均匀得有效成分；

对比例2

葛根肽由以下方法制得：

按质量比8:1:1，将制备例2中的葛根提取物、制备例5中的紫茉莉根提取物和制备例8中的番石榴根提取物混合均匀得有效成分；

对比例3

葛根肽由以下方法制得：

按质量比80:1，将有效成分和海藻糖继续混合均匀即得所需葛根肽。

对比例4

葛根肽由以下方法制得：

按质量比80:1，将有效成分和β-环状糊精继续混合均匀即得所需葛根肽。

对比例5

葛根肽由以下方法制得：

按质量比4:1:1，将制备例2中的葛根提取物、制备例5中的紫茉莉根提取物和制备例8中的番石榴根提取物混合均匀得所需葛根肽。

实验例

本实验以上述实施例2、对比例1-5、制备例2、5、8作为药物样品，以二甲双胍为对照样品，按如下实验方法开展研究。

1、造模

随机选取110只SD雄性大鼠（购自辽宁长生生物技术有限公司），体重180-220g，适应性喂养1周后，随机抽取10只作为空白组，予普通饲料喂养（普通饲料大小鼠维持料（普通级），购自吉林省金泰美迪生物技术有限公司），剩余100只大鼠予高脂饲料喂养（高脂饲料由6 %蛋黄粉，10 %猪油，8 %蔗糖，1 %胆酸钠，1 %胆固醇，74 %普通饲料组成）。

喂养6周后，所有大鼠禁食不禁水12h，空白组大鼠注射生理盐水，高脂饲料100只大鼠按100mg/kg单次腹腔注射链脲佐菌素（STZ）诱发大鼠2型糖尿病，STZ被溶解在柠檬酸钠盐水缓冲液（pH=4.5）中，诱导l周后，禁食不禁水12h，通过尾静脉采集大鼠的血液，测定大鼠空腹血糖，连续3天同一时间测定空腹血糖浓度FBG值大于11.1 mmol/L视为T2DM模型建立成功。

2、分组

将100只高脂饲料喂养大鼠按血糖随机分为10组，分别为模型组、实施例2组、对比例1组、对比例2组、对比例3组、对比例4组、对比例5组、制备例2组、制备例5组、制备例8组和对照组（二甲双胍），每组10只大鼠。

3、给药

分别控制实施例2组、对比例1组、对比例2组、对比例3组、对比例4组、对比例5组、制备例2组、制备例5组、制备例8组的药物样品给药量为1.5g/kg/d，均用适量生理盐水溶解后进行灌胃处理；对照组二甲双胍给药量为0 .25g/kg/d，以同等体积生理盐水溶解后进行灌胃处理，空白组及模型组每日给予同等体积生理盐水灌胃，每日于同一时间给药一次，连续干预6周，以基础饲料、高脂饲料正常饲养各对应组大鼠，维持到实验结束。

4、血糖、血脂检测

实验结束后，所有大鼠禁食不禁水12h，检测各组大鼠空腹血糖值和血脂指标（血清总胆固醇TC、甘油三酯TG、高密度脂蛋白胆固醇HDL-C和低密度脂蛋白胆固醇LDL-C），检测结果见表1。

5、统计分析

数据以平均值±标准差表示，多组间比较采用ANOVA单因素方差分析，事后比较采用LSD，P<0.05代表有统计学差异。

表1 空腹血糖和血脂四项检测结果

注：不同字母代表P<0.05。

由表1数据可知：本发明采用有效成分复配稳定剂制得的葛根肽能够有效降低T2DM模型大鼠血糖，调节血脂；尤其是有效成分选用葛根提取物、紫茉莉根提取物和番石榴根提取物复配，且控制复配比例为4:1:1时，获得的葛根肽能够起到显著协同作用，从而实现低剂量和高效应的降糖降脂效果。

Claims

1.一种葛根肽，其特征在于，其有效成分包括葛根提取物、紫茉莉根提取物和番石榴根提取物，所述葛根提取物、紫茉莉根提取物和番石榴根提取物的质量比为3-5:1:1。

2.根据权利要求1所述的一种葛根肽，其特征在于，所述葛根提取物、紫茉莉根提取物和番石榴根提取物的质量比为4:1:1。

3.根据权利要求1所述的一种葛根肽，其特征在于，所述葛根提取物由以下方法制得：

S11、葛根粉碎过60-80目筛得葛根粉；

4.根据权利要求3所述的一种葛根肽，其特征在于，所述复合菌包括活菌数比为3:1的植物乳杆菌和黑曲霉菌，且提取液中活菌数不低于1.0×10⁶CFU/g。

5.根据权利要求1所述的一种葛根肽，其特征在于，所述紫茉莉根提取物由以下方法制得：

S21、将紫茉莉根粉碎后过60-80目筛，得紫茉莉根粉；

6.根据权利要求1所述的一种葛根肽，其特征在于，所述番石榴根提取物由以下方法制得：

S31、将番石榴根粉碎后过60-80目筛，得番石榴根粉末；

7.根据权利要求1所述的一种葛根肽，其特征在于，所述葛根肽还包括稳定剂，且有效成分和稳定剂的质量比为75-85:1。

8.根据权利要求7所述的一种葛根肽，其特征在于，所述稳定剂包括质量比为2-4:1的海藻糖和β-环状糊精。

9.根据权利要求8所述的一种葛根肽，其特征在于，所述葛根肽由以下方法制得：

10.一种如权利要求1-9任一项所述的葛根肽在制备治疗或辅助治疗糖尿病的功能性食品、保健品或药品中的应用。