CN117538520B - 一种HBc-IgM抗体检测试剂盒及其制备方法 - Google Patents
一种HBc-IgM抗体检测试剂盒及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN117538520B CN117538520B CN202410018236.1A CN202410018236A CN117538520B CN 117538520 B CN117538520 B CN 117538520B CN 202410018236 A CN202410018236 A CN 202410018236A CN 117538520 B CN117538520 B CN 117538520B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- silicon core
- selenium
- preparation
- shell
- hbc
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 76
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 43
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N Selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 121
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 claims abstract description 106
- 239000011669 selenium Substances 0.000 claims abstract description 106
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims abstract description 39
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 claims abstract description 8
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 143
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 claims description 88
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical group [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 74
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 claims description 58
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 claims description 57
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 claims description 46
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims description 26
- JPJALAQPGMAKDF-UHFFFAOYSA-N selenium dioxide Chemical compound O=[Se]=O JPJALAQPGMAKDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 25
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 25
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 23
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 claims description 23
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 claims description 23
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 20
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 20
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 20
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 20
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 18
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 17
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 16
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 14
- 238000003746 solid phase reaction Methods 0.000 claims description 14
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims description 13
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims description 13
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims description 13
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 12
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 10
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000001785 acacia senegal l. willd gum Substances 0.000 claims description 8
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 8
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 8
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 8
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 claims description 8
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims description 8
- FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 2-(chloromethyl)pyridine-3-carbonitrile Chemical compound ClCC1=NC=CC=C1C#N FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 7
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 7
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 claims description 7
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 7
- 239000003607 modifier Substances 0.000 claims description 7
- 238000005507 spraying Methods 0.000 claims description 7
- 229940014800 succinic anhydride Drugs 0.000 claims description 7
- 239000011258 core-shell material Substances 0.000 claims description 5
- 108010067755 dinitrophenyl-bovine serum albumin Proteins 0.000 claims description 5
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 claims description 5
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 claims description 5
- 230000035040 seed growth Effects 0.000 claims description 5
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims description 2
- 238000001132 ultrasonic dispersion Methods 0.000 claims description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 claims 1
- 239000000700 radioactive tracer Substances 0.000 claims 1
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000010703 silicon Substances 0.000 claims 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 abstract description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 79
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 13
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 10
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 10
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 9
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 6
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 5
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 5
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 5
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 4
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 4
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 4
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 4
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 4
- 208000000419 Chronic Hepatitis B Diseases 0.000 description 3
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000003317 immunochromatography Methods 0.000 description 2
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 101710142246 External core antigen Proteins 0.000 description 1
- 230000021523 carboxylation Effects 0.000 description 1
- 238000006473 carboxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000011841 epidemiological investigation Methods 0.000 description 1
- FDWREHZXQUYJFJ-UHFFFAOYSA-M gold monochloride Chemical compound [Cl-].[Au+] FDWREHZXQUYJFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 description 1
- 239000010420 shell particle Substances 0.000 description 1
- 238000007711 solidification Methods 0.000 description 1
- 230000008023 solidification Effects 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000011895 specific detection Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/531—Production of immunochemical test materials
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/531—Production of immunochemical test materials
- G01N33/532—Production of labelled immunochemicals
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56983—Viruses
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/576—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for hepatitis
- G01N33/5761—Hepatitis B
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Abstract
本发明涉及一种HBc‑IgM抗体检测试剂盒及其制备方法，涉及体外诊断技术领域，HBc‑IgM抗体检测试剂盒的制备方法包括标记垫的制备方法，标记垫的制备方法为：将HBcAg‑硅芯硒壳标记物和DNP‑硅芯硒壳标记物按4:1体积比混合均匀后喷射于玻璃纤维SB08上，即得标记垫，本发明采用硅芯硒壳纳米颗粒作为标记物，制备成本低，检测灵敏度高。
Description
技术领域
本发明涉及体外诊断技术领域，具体是一种HBc-IgM抗体检测试剂盒及其制备方法。
背景技术
乙肝病毒（HBV）感染人体后，乙肝核心抗原（HBcAg）刺激肝细胞产生抗体，主要包括HBc-IgM和HBc-IgG。HBc-IgM在人体感染乙肝病毒后一周左右出现，是血液中最早出现的特异性抗体，随着病程的延长或者病情的好转，HBc-IgM慢慢消失。HBc-IgG是乙肝病毒既往感染的标志，具有流行病学调查意义。
HBc-IgM作为是机体感染乙肝病毒后在血液中最早出现的特异性抗体，是乙肝表面抗原（HBsAg）窗口期时检测的重要手段。HBc-IgM的检测水平比HBeAg/HBeAb系统更能反映机体HBV-DNA复制水平，是乙型肝炎病毒复制的一种可靠指标，常常提示为急性HBV感染，或者在慢性乙肝急性发作、慢性乙肝进入活动期，以确定乙肝病毒是否在复制，是否具有传染性。
目前判断乙肝病毒复制的常用手段是HBV-DNA检测，但需要依赖设备、操作要求高且较易产生污染、检测周期长。HBc-IgM作为乙肝病毒复制的另一重要标志物，目前商品化的检测试剂已有十几家，但具体方法学主要是集中在化学发光平台。胶体金平台检测的仍为HBcAb总抗体，不能很好的区分是急性感染还是既往感染。因此，建立快速准确的HBc-IgM诊断方法，一方面可有效降低HBsAg窗口期时带来的隐形感染风险，另一方面可作为自测OTC试剂确定慢性乙肝的急性发作或活动期。
胶体金具有等离子体特性，其颗粒小、制备需高温沸腾、原材料价格昂贵，作为标记物使用往往灵敏度低且成本高。与胶体金相比，胶体硒作为非金属胶体颗粒具有对电解质不敏感、常温制备、方法简单、原材料成本低等优点，已经逐渐被应用于侧向免疫层析试剂。然而胶体硒由于粒径小、分散性差等缺点，这些年发展缓慢，应用并不广泛。因此，急需制备一种粒径大、成本低、分散性好的纳米颗粒应用于侧向免疫层析平台以提高检测灵敏度。
发明内容
本发明的目的在于提供一种HBc-IgM抗体检测试剂盒及其制备方法，采用硅芯硒壳纳米颗粒作为标记物，制备成本低，检测灵敏度高。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：一种HBc-IgM抗体检测试剂盒的制备方法，包括标记垫的制备方法，标记垫的制备方法为：将HBcAg-硅芯硒壳标记物和DNP-硅芯硒壳标记物按4:1体积比混合均匀后喷射于玻璃纤维SB08上，即得标记垫。
HBcAg-硅芯硒壳标记物的制备方法：取5mL硅芯硒壳纳米颗粒溶液，用0.1M碳酸钾调节pH至8.0；迅速加入0.8mg/mL HBc抗原，充分反应10min，加入终浓度1%的BSA，充分反应10min，10000rpm离心15min，5mL重悬液重悬得HBcAg-硅芯硒壳标记物；
DNP-硅芯硒壳标记物的制备方法：取5mL硅芯硒壳纳米颗粒溶液，用0.1M碳酸钾调节pH至8.5；迅速加入1mg/mL DNP抗体，充分反应10min，加入终浓度1%的BSA，充分反应10min，10000rpm离心15min，5mL重悬液重悬得DNP-硅芯硒壳标记物；
所述的硅芯硒壳纳米颗粒溶液利用种子生长法，先对二氧化硅微球（SNPs）进行表面接枝改性，再在改性SNPs表面进行PEG修饰，以PEG修饰SNPs为硅芯种子，二氧化硒为生长液，在硅芯种子表面再生长硒壳层，制得核壳结构的硅芯硒壳纳米颗粒。
硅芯硒壳纳米颗粒溶液制备方法包括如下步骤：
S1、二氧化硅微球的制备：采用Stober法制备二氧化硅微球，制备过程中，通过调控氨水浓度制得粒径110nm的二氧化硅微球，经HNO3酸化、离心水洗，最终制得表面带正电荷的浓度为1mg/mL的二氧化硅微球。
S2、PEG修饰二氧化硅微球溶液的制备：对S1制得的二氧化硅微球进行表面接枝改性，丁二酸酐作为改性剂，进行表面羧基功能基团化，得羧基化二氧化硅微球。取10mL羧基化二氧化硅微球，加入10mL PEG溶液，常温条件下以500rpm高速搅拌30min，超声分散10min，离心水洗3次，10mL超纯水重悬得PEG修饰二氧化硅微球溶液。
S3、硅芯硒壳纳米颗粒溶液的制备：取50mL超纯水置于100mL烧杯中，加入0.2%阿拉伯胶、1% PVP作为稳定剂，搅拌溶解；加入S2制得的PEG修饰二氧化硅微球溶液10mL作为硅芯种子，加入0.3M二氧化硒10mL作为生长液，加入抗坏血酸10mL作为还原剂，常温条件下100rpm搅拌反应30min，使得胶体硒聚集在微球表面形成一定厚度的硒壳，离心水洗3次，10mL超纯水重悬得硅芯硒壳纳米颗粒溶液，4℃冰箱内保存待用。
硅芯硒壳纳米颗粒的粒径为150-200nm。
作为一种优化方案，所述PEG溶液浓度为0.5%-1.5%；
作为一种优化方案，所述抗坏血酸的浓度为0.6-1.5M；
作为一种优化方案，一种HBc-IgM抗体检测试剂盒的制备方法，还包括固相反应膜的制备方法，固相反应膜的制备方法为：分别将鼠抗人IgM抗体和DNP-BSA为检测T线和质控C线包被于NC膜；
作为一种优化方案，一种HBc-IgM抗体检测试剂盒的制备方法制备的试剂盒，包括测试条，测试条包括PVC板，PVC板上从左到右依次设有吸水纸、固相反应膜、标记垫、样品垫。
本发明采取以上技术方案，具有以下优点：本发明标记物为一种粒径为150-200nm的硅芯硒壳纳米颗粒，制备无需昂贵的氯化金原材料和繁琐的高温沸腾制备步骤，相比传统的胶体金颗粒，制备成本低。二氧化硅微球外层包覆一层硒壳，增加了纳米颗粒的粒径和表面积，使得纳米颗粒表面有更多的位点与标记蛋白结合，提高标记蛋白标记固化率，从而提高与包被抗体的结合力，相比传统的胶体硒标记，检测灵敏度更高。
本发明硅芯硒壳纳米颗粒的制备及应用，是本试剂盒提高灵敏度的关键技术之一。制备的二氧化硅微球首先进行酸化，无数正电荷形成的电荷层使得微球稳定、均匀的分布于溶剂中。对二氧化硅微球进行羧基化修饰，使得PEG与二氧化硅微球结合更加牢固、致密，在二氧化硅微球表面形成一层PEG非免疫致密层。PEG非免疫致密层的引入，在增强二氧化硅胶体稳定性的同时还可以控制胶体硒的生长速度，提高胶体硒的结合效率。通过控制硒生长液和抗坏血酸的比例，调节硒在二氧化硅微球表面的生长速度及覆盖量，从而调控硅芯硒壳颗粒的形状、粒径及分散性。
下面结合具体实施方式对本发明作进一步说明。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，实施例中未注明具体条件，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市场购买获得的常规产品。
所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例，基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种HBc-IgM抗体检测试剂盒的制备方法，包括标记垫的制备方法，标记垫的制备方法为：将HBcAg-硅芯硒壳标记物和DNP-硅芯硒壳标记物按4:1体积比混合均匀后喷射于Tris缓冲液处理的玻璃纤维SB08上，即得标记垫。
HBcAg-硅芯硒壳标记物的制备方法：取5mL硅芯硒壳纳米颗粒溶液，用0.1M碳酸钾调节pH至8.0；迅速加入0.8mg/mL HBc抗原，充分反应10min，加入终浓度1%的BSA，充分反应10min，10000rpm离心15min，5mL重悬液重悬得HBcAg-硅芯硒壳标记物；
DNP-硅芯硒壳标记物的制备方法：取5mL硅芯硒壳纳米颗粒溶液，用0.1M碳酸钾调节pH至8.5；迅速加入1mg/mL DNP抗体，充分反应10min，加入终浓度1%的BSA，充分反应10min，10000rpm离心15min，5mL重悬液重悬得DNP-硅芯硒壳标记物；
所述的硅芯硒壳纳米颗粒溶液利用种子生长法，先对二氧化硅微球（SNPs）进行表面接枝改性，再在改性SNPs表面进行PEG修饰，以PEG修饰SNPs为硅芯种子，二氧化硒为生长液，在硅芯种子表面再生长硒壳层，制得核壳结构的硅芯硒壳纳米颗粒。
硅芯硒壳纳米颗粒溶液制备方法包括如下步骤：
S1、二氧化硅微球的制备：采用Stober法制备二氧化硅微球，制备过程中，通过调控氨水浓度制得粒径110nm的二氧化硅微球，经HNO3酸化、离心水洗，最终制得表面带正电荷的浓度为1mg/mL的二氧化硅微球。
S2、PEG修饰二氧化硅微球溶液的制备：对S1制得的二氧化硅微球进行表面接枝改性，丁二酸酐作为改性剂，进行表面羧基功能基团化，得羧基化二氧化硅微球。取10mL羧基化二氧化硅微球，加入10mL 0.5%PEG溶液，常温条件下以500rpm高速搅拌30min，超声分散10min，离心水洗3次，10mL超纯水重悬得PEG修饰二氧化硅微球溶液。
S3、硅芯硒壳纳米颗粒溶液的制备：取50mL超纯水置于100mL烧杯中，加入0.2%阿拉伯胶、1% PVP作为稳定剂，搅拌溶解；加入S2制得的PEG修饰二氧化硅微球溶液10mL作为硅芯种子，加入0.3M二氧化硒10mL作为生长液，加入0.6M抗坏血酸10mL作为还原剂，常温条件下100rpm搅拌反应30min，使得胶体硒聚集在微球表面形成一定厚度的硒壳，离心水洗3次，10mL超纯水重悬得硅芯硒壳纳米颗粒溶液，4℃冰箱内保存待用。
上述步骤制备的硅芯硒壳纳米颗粒溶液经透射电子显微镜（TEM）检测，呈现球形，粒径为200nm，且分散性良好。
一种HBc-IgM抗体检测试剂盒的制备方法，还包括固相反应膜的制备方法，固相反应膜的制备方法为：分别将鼠抗人IgM抗体和DNP-BSA为检测T线和质控C线包被于NC膜；
一种HBc-IgM抗体检测试剂盒的制备方法制备的试剂盒，包括测试条，测试条包括PVC板，PVC板上从左到右依次设有吸水纸、固相反应膜、标记垫、样品垫。
实施例2
一种HBc-IgM抗体检测试剂盒的制备方法，包括标记垫的制备方法，标记垫的制备方法为：将HBcAg-硅芯硒壳标记物和DNP-硅芯硒壳标记物按4:1体积比混合均匀后喷射于Tris缓冲液处理的玻璃纤维SB08上，即得标记垫。
HBcAg-硅芯硒壳标记物的制备方法：取5mL硅芯硒壳纳米颗粒溶液，用0.1M碳酸钾调节pH至8.0；迅速加入0.8mg/mL HBc抗原，充分反应10min，加入终浓度1%的BSA，充分反应10min，10000rpm离心15min，5mL重悬液重悬得HBcAg-硅芯硒壳标记物；
DNP-硅芯硒壳标记物的制备方法：取5mL硅芯硒壳纳米颗粒溶液，用0.1M碳酸钾调节pH至8.5；迅速加入1mg/mL DNP抗体，充分反应10min，加入终浓度1%的BSA，充分反应10min，10000rpm离心15min，5mL重悬液重悬得DNP-硅芯硒壳标记物；
所述的硅芯硒壳纳米颗粒溶液利用种子生长法，先对二氧化硅微球（SNPs）进行表面接枝改性，再在改性SNPs表面进行PEG修饰，以PEG修饰SNPs为硅芯种子，二氧化硒为生长液，在硅芯种子表面再生长硒壳层，制得核壳结构的硅芯硒壳纳米颗粒。
硅芯硒壳纳米颗粒溶液的制备方法包括如下步骤：
S1、二氧化硅微球的制备：采用Stober法制备二氧化硅微球，制备过程中，通过调控氨水浓度制得粒径110nm的二氧化硅微球，经HNO3酸化、离心水洗，最终制得表面带正电荷的浓度为1mg/mL的二氧化硅微球。
S2、PEG修饰二氧化硅微球溶液的制备：对S1制得的二氧化硅微球进行表面接枝改性，丁二酸酐作为改性剂，进行表面羧基功能基团化，得羧基化二氧化硅微球。取10mL羧基化二氧化硅微球，加入10mL 1.0%PEG溶液，常温条件下以500rpm高速搅拌30min，超声分散10min，离心水洗3次，10mL超纯水重悬得PEG修饰二氧化硅微球溶液。
S3、硅芯硒壳纳米颗粒溶液的制备：取50mL超纯水置于100mL烧杯中，加入0.2%阿拉伯胶、1% PVP作为稳定剂，搅拌溶解；加入S2制得的PEG修饰二氧化硅微球溶液10mL作为硅芯种子，加入0.3M二氧化硒10mL作为生长液，加入0.9M抗坏血酸10mL作为还原剂，常温条件下100rpm搅拌反应30min，使得胶体硒聚集在微球表面形成一定厚度的硒壳，离心水洗3次，10mL超纯水重悬得硅芯硒壳纳米颗粒溶液，4℃冰箱内保存待用。
上述步骤制备的硅芯硒壳纳米颗粒经透射电子显微镜（TEM）检测，呈现球形，粒径为180nm，且分散性良好。
一种HBc-IgM抗体检测试剂盒的制备方法，还包括固相反应膜的制备方法，固相反应膜的制备方法为：分别将鼠抗人IgM抗体和DNP-BSA为检测T线和质控C线包被于NC膜；
一种HBc-IgM抗体检测试剂盒的制备方法制备的试剂盒，包括测试条，测试条包括PVC板，PVC板上从左到右依次设有吸水纸、固相反应膜、标记垫、样品垫。
实施例3
一种HBc-IgM抗体检测试剂盒的制备方法，包括标记垫的制备方法，标记垫的制备方法为：将HBcAg-硅芯硒壳标记物和DNP-硅芯硒壳标记物按4:1体积比混合均匀后喷射于Tris缓冲液处理的玻璃纤维SB08上，即得标记垫。
HBcAg-硅芯硒壳标记物的制备方法：取5mL硅芯硒壳纳米颗粒溶液，用0.1M碳酸钾调节pH至8.0；迅速加入0.8mg/mL HBc抗原，充分反应10min，加入终浓度1%的BSA，充分反应10min，10000rpm离心15min，5mL重悬液重悬得HBcAg-硅芯硒壳标记物；
DNP-硅芯硒壳标记物的制备方法：取5mL硅芯硒壳纳米颗粒溶液，用0.1M碳酸钾调节pH至8.5；迅速加入1mg/mL DNP抗体，充分反应10min，加入终浓度1%的BSA，充分反应10min，10000rpm离心15min，5mL重悬液重悬得DNP-硅芯硒壳标记物；
所述的硅芯硒壳纳米颗粒溶液利用种子生长法，先对二氧化硅微球（SNPs）进行表面接枝改性，再在改性SNPs表面进行PEG修饰，以PEG修饰SNPs为硅芯种子，二氧化硒为生长液，在硅芯种子表面再生长硒壳层，制得核壳结构的硅芯硒壳纳米颗粒。
硅芯硒壳纳米颗粒溶液的制备方法包括如下步骤：
S1、二氧化硅微球的制备：采用Stober法制备二氧化硅微球，制备过程中，通过调控氨水浓度制得粒径110nm的二氧化硅微球，经HNO3酸化、离心水洗，最终制得表面带正电荷的浓度为1mg/mL的二氧化硅微球。
S2、PEG修饰二氧化硅微球溶液的制备：对S1制得的二氧化硅微球进行表面接枝改性，丁二酸酐作为改性剂，进行表面羧基功能基团化，得羧基化二氧化硅微球。取10mL羧基化二氧化硅微球，加入10mL 1.5%PEG溶液，常温条件下以500rpm高速搅拌30min，超声分散10min，离心水洗3次，10mL超纯水重悬得PEG修饰二氧化硅微球溶液。
S3、硅芯硒壳纳米颗粒溶液的制备：取50mL超纯水置于100mL烧杯中，加入0.2%阿拉伯胶、1% PVP作为稳定剂，搅拌溶解；加入S2制得的PEG修饰二氧化硅微球溶液10mL作为硅芯种子，加入0.3M二氧化硒10mL作为生长液，加入1.5M抗坏血酸10mL作为还原剂，常温条件下100rpm搅拌反应30min，使得胶体硒聚集在微球表面形成一定厚度的硒壳，离心水洗3次，10mL超纯水重悬得硅芯硒壳纳米颗粒溶液，4℃冰箱内保存待用。
上述步骤制备的硅芯硒壳纳米颗粒经透射电子显微镜（TEM）检测，呈现球形，粒径为150nm，且分散性良好。
一种HBc-IgM抗体检测试剂盒的制备方法，还包括固相反应膜的制备方法，固相反应膜的制备方法为：分别将鼠抗人IgM抗体和DNP-BSA为检测T线和质控C线包被于NC膜；
一种HBc-IgM抗体检测试剂盒的制备方法制备的试剂盒，包括测试条，测试条包括PVC板，PVC板上从左到右依次设有吸水纸、固相反应膜、标记垫、样品垫。
将实施例1-3制备的HBc-IgM抗体检测试剂盒对乙型肝炎病毒核心IgM抗体诊断试剂国家参考品（340025-201801）进行验证，验证结果见表1。
表1HBc-IgM抗体国家参考品验证结果
由表1可知，本发明HBc-IgM抗体检测试剂盒检测乙型肝炎病毒核心IgM抗体诊断试剂国家参考品（340025-201801）符合要求；本发明试剂盒灵敏度为1:16稀释度，高于中检院1:8稀释度的要求。
为了更好的证明本发明试剂盒具有较好的敏感度和特异性，以实施例1-3为参考，通过5个对比例，将本发明实施例1-3制备的试剂盒与对比例1-5制备的试剂盒同时检测雅培化学发光数值样本，具体检测结果见表2。
对比例1
一种HBc-IgM抗体检测试剂盒的制备方法，与实施例2的不同之处在于：标记垫的制备方法为：将胶体金颗粒标记的HBc抗原和DNP抗体按4:1体积比混合均匀后喷射于Tris缓冲液处理的玻璃纤维SB08上，即得标记垫。
对比例2
一种HBc-IgM抗体检测试剂盒的制备方法，与实施例2的不同之处在于：标记垫的制备方法为：将胶体硒颗粒标记的HBc抗原和DNP抗体按4:1体积比混合均匀后喷射于Tris缓冲液处理的玻璃纤维SB08上，即得标记垫。
对比例3
一种HBc-IgM抗体检测试剂盒的制备方法，与实施例2的不同之处在于：硅芯硒壳纳米颗粒溶液的制备方法包括如下步骤：
S1、二氧化硅微球的制备：采用Stober法制备二氧化硅微球，制备过程中，通过调控氨水浓度制得粒径110nm的二氧化硅微球，经HNO3酸化、离心水洗，最终制得表面带正电荷的浓度为1mg/mL的二氧化硅微球。
S2、硅芯硒壳纳米颗粒溶液的制备：取50mL超纯水置于100mL烧杯中，加入0.2%阿拉伯胶、1% PVP作为稳定剂，搅拌溶解；加入S1制得的二氧化硅微球溶液10mL作为硅芯种子，加入0.3M二氧化硒10mL作为生长液，加入0.9M抗坏血酸10mL作为还原剂，常温条件下100rpm搅拌反应30min，使得胶体硒聚集在微球表面形成一定厚度的硒壳，离心水洗3次，10mL超纯水重悬得硅芯硒壳纳米颗粒溶液，4℃冰箱内保存待用。
对比例4
一种HBc-IgM抗体检测试剂盒的制备方法，与实施例2的不同之处在于：硅芯硒壳纳米颗粒溶液制备方法包括如下步骤：
S1、二氧化硅微球的制备：采用Stober法制备二氧化硅微球，制备过程中，通过调控氨水浓度制得粒径110nm的二氧化硅微球，经HNO3酸化、离心水洗，最终制得表面带正电荷的浓度为1mg/mL的二氧化硅微球。
S2、PEG修饰二氧化硅微球溶液的制备：对S1制得的二氧化硅微球进行表面接枝改性，丁二酸酐作为改性剂，进行表面羧基功能基团化，得羧基化二氧化硅微球。取10mL羧基化二氧化硅微球，加入10mL 1.0%PEG溶液，常温条件下以500rpm高速搅拌30min，超声分散10min，离心水洗3次，10mL超纯水重悬得PEG修饰二氧化硅微球溶液。
S3、硅芯硒壳纳米颗粒溶液的制备：取50mL超纯水置于100mL烧杯中，加入0.2%阿拉伯胶、1% PVP作为稳定剂，搅拌溶解；加入S2制得的PEG修饰二氧化硅微球溶液10mL作为硅芯种子，加入0.3M二氧化硒10mL作为生长液，加入0.3M抗坏血酸10mL作为还原剂，常温条件下100rpm搅拌反应30min，使得胶体硒聚集在微球表面形成一定厚度的硒壳，离心水洗3次，10mL超纯水重悬得硅芯硒壳纳米颗粒溶液，4℃冰箱内保存待用。
对比例5
一种HBc-IgM抗体检测试剂盒的制备方法，与实施例2的不同之处在于：硅芯硒壳纳米颗粒溶液制备方法包括如下步骤：
S1、二氧化硅微球的制备：采用Stober法制备二氧化硅微球，制备过程中，通过调控氨水浓度制得粒径110nm的二氧化硅微球，经HNO3酸化、离心水洗，最终制得表面带正电荷的浓度为1mg/mL的二氧化硅微球。
S2、PEG修饰二氧化硅微球溶液的制备：对S1制得的二氧化硅微球进行表面接枝改性，丁二酸酐作为改性剂，进行表面羧基功能基团化，得羧基化二氧化硅微球。取10mL羧基化二氧化硅微球，加入10mL 1.0%PEG溶液，常温条件下以500rpm高速搅拌30min，超声分散10min，离心水洗3次，10mL超纯水重悬得PEG修饰二氧化硅微球溶液。
S3、硅芯硒壳纳米颗粒溶液的制备：取50mL超纯水置于100mL烧杯中，加入0.2%阿拉伯胶、1% PVP作为稳定剂，搅拌溶解；加入S2制得的PEG修饰二氧化硅微球溶液10mL作为硅芯种子，加入0.3M二氧化硒10mL作为生长液，加入2.1M抗坏血酸10mL作为还原剂，常温条件下100rpm搅拌反应30min，使得胶体硒聚集在微球表面形成一定厚度的硒壳，离心水洗3次，10mL超纯水重悬得硅芯硒壳纳米颗粒溶液，4℃冰箱内保存待用。
表2 实施例与对比例对比检测结果
由表2可知：
实施例1-3检测结果与雅培发光结果一致，符合率为100%；
对比例1、2为传统工艺的胶体金、胶体硒制备，较实施例1-3存在明显漏检；
对比例3未对二氧化硅微球进行PEG修饰，制备的硅芯硒壳纳米颗粒溶液浑浊、分散性差，TEM检测结果粒径大小不一且形状不规则；
对比例4中抗坏血酸的加入量过低，制备的硅芯硒壳纳米颗粒大小不一且形状不规则，较实施例1-3存在假阳；
对比例5中抗坏血酸的加入量过高，粒径小于实施例1-3，灵敏度低，存在漏检。
相对于对比例1-5，本发明实施例1-3制备的试剂盒在实际检测应用中敏感度更高，特异性更强。
以上所述仅为本发明的优选实施例，并不用于限制本发明，实施方式的举例，其中未详细描述的部分均为本领域普通技术人员的公知常识，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种HBc-IgM抗体检测试剂盒的制备方法，其特征在于：包括标记垫的制备方法，标记垫的制备方法为：将HBcAg-硅芯硒壳标记物和DNP-硅芯硒壳标记物按4:1体积比混合均匀后喷射于玻璃纤维SB08上，即得标记垫，HBcAg-硅芯硒壳标记物和DNP-硅芯硒壳标记物均由硅芯硒壳纳米颗粒溶液作为示踪物标记制得；
所述硅芯硒壳纳米颗粒溶液利用种子生长法，先对二氧化硅微球进行表面接枝改性，再在改性SNPs表面进行PEG修饰，以PEG修饰SNPs为硅芯种子，二氧化硒为生长液，在硅芯种子表面再生长硒壳层，制得核壳结构的硅芯硒壳纳米颗粒；
所述硅芯硒壳纳米颗粒溶液制备方法包括如下步骤：
S1、二氧化硅微球的制备：采用Stober法制备二氧化硅微球，制备过程中，通过调控氨水浓度制得粒径110nm的二氧化硅微球，经HNO3酸化、离心水洗，最终制得表面带正电荷的浓度为1mg/mL的二氧化硅微球；
S2、PEG修饰二氧化硅微球溶液的制备：对S1制得的二氧化硅微球进行表面接枝改性，丁二酸酐作为改性剂，进行表面羧基功能基团化，得羧基化二氧化硅微球；取10mL羧基化二氧化硅微球，加入10mL PEG溶液，常温条件下以500rpm高速搅拌30min，超声分散10min，离心水洗3次，10mL超纯水重悬得PEG修饰二氧化硅微球溶液；
S3、硅芯硒壳纳米颗粒溶液的制备：取50mL超纯水置于100mL烧杯中，加入0.2%阿拉伯胶、1% PVP作为稳定剂，搅拌溶解；加入S2制得的PEG修饰二氧化硅微球溶液10mL作为硅芯种子，加入0.3M二氧化硒10mL作为生长液，加入抗坏血酸10mL作为还原剂，常温条件下100rpm搅拌反应30min，使得胶体硒聚集在微球表面形成硒壳，离心水洗3次，10mL超纯水重悬得硅芯硒壳纳米颗粒溶液，4℃冰箱内保存待用；
所述抗坏血酸的浓度为0.6-1.5M。
2.根据权利要求1所述的一种HBc-IgM抗体检测试剂盒的制备方法，其特征在于：所述HBcAg-硅芯硒壳标记物的制备方法：取5mL硅芯硒壳纳米颗粒溶液，用0.1M碳酸钾调节pH至8.0；迅速加入0.8mg/mL HBc抗原，充分反应10min，加入终浓度1%的BSA，充分反应10min，10000rpm离心15min，5mL重悬液重悬得HBcAg-硅芯硒壳标记物。
3.根据权利要求2所述的一种HBc-IgM抗体检测试剂盒的制备方法，其特征在于：所述DNP-硅芯硒壳标记物的制备方法：取5mL硅芯硒壳纳米颗粒溶液，用0.1M碳酸钾调节pH至8.5；迅速加入1mg/mL DNP抗体，充分反应10min，加入终浓度1%的BSA，充分反应10min，10000rpm离心15min，5mL重悬液重悬得DNP-硅芯硒壳标记物。
4.根据权利要求3所述的一种HBc-IgM抗体检测试剂盒的制备方法，其特征在于：所述硅芯硒壳纳米颗粒的粒径为150-200nm。
5.根据权利要求4所述的一种HBc-IgM抗体检测试剂盒的制备方法，其特征在于：所述PEG溶液浓度为0.5%-1.5%。
6.根据权利要求1-5其中之一所述的一种HBc-IgM抗体检测试剂盒的制备方法，其特征在于：还包括固相反应膜的制备方法，固相反应膜的制备方法为：分别将鼠抗人IgM抗体和DNP-BSA为检测T线和质控C线包被于NC膜。
7.根据权利要求6所述的一种HBc-IgM抗体检测试剂盒的制备方法制备的试剂盒，其特征在于：包括测试条，测试条包括PVC板，PVC板上从左到右依次设有吸水纸、固相反应膜、标记垫、样品垫。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202410018236.1A CN117538520B (zh) | 2024-01-05 | 2024-01-05 | 一种HBc-IgM抗体检测试剂盒及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202410018236.1A CN117538520B (zh) | 2024-01-05 | 2024-01-05 | 一种HBc-IgM抗体检测试剂盒及其制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN117538520A CN117538520A (zh) | 2024-02-09 |
| CN117538520B true CN117538520B (zh) | 2024-04-02 |
Family
ID=89786483
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202410018236.1A Active CN117538520B (zh) | 2024-01-05 | 2024-01-05 | 一种HBc-IgM抗体检测试剂盒及其制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN117538520B (zh) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0304238A2 (en) * | 1987-08-14 | 1989-02-22 | Ortho Diagnostic Systems Inc. | Method for detecting and confirming the presence of antibodies |
| JP2001221802A (ja) * | 2000-02-08 | 2001-08-17 | Tosoh Corp | 抗ＨＢｃ抗体の免疫測定法 |
| CN115283690A (zh) * | 2022-08-16 | 2022-11-04 | 山东康华生物医疗科技股份有限公司 | 一种乙肝表面抗体检测试剂盒用胶体金溶液的制备方法及试剂条、试剂盒 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20100216256A1 (en) * | 2009-02-17 | 2010-08-26 | Florida State University Research Foundation | Nanobelt-based sensors and detection methods |
| CN103217533B (zh) * | 2012-01-21 | 2016-01-06 | 厦门大学 | Anti-HBc定量检测方法及其在监控慢性乙肝患者病情发展和预测治疗疗效中的用途 |
| US20160313333A1 (en) * | 2015-04-23 | 2016-10-27 | Ted Titmus | Diagnostic test strips for detection of past or present infection of various strains of hepatitis |
| US20200246484A1 (en) * | 2017-10-03 | 2020-08-06 | Northwestern University | Spherical nucleic acids (snas) with sheddable peg layers |
-
2024
- 2024-01-05 CN CN202410018236.1A patent/CN117538520B/zh active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0304238A2 (en) * | 1987-08-14 | 1989-02-22 | Ortho Diagnostic Systems Inc. | Method for detecting and confirming the presence of antibodies |
| JP2001221802A (ja) * | 2000-02-08 | 2001-08-17 | Tosoh Corp | 抗ＨＢｃ抗体の免疫測定法 |
| CN115283690A (zh) * | 2022-08-16 | 2022-11-04 | 山东康华生物医疗科技股份有限公司 | 一种乙肝表面抗体检测试剂盒用胶体金溶液的制备方法及试剂条、试剂盒 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| Bifunctional nanoencapsulated eutectic phase change material core with SiO2/SnO2 nanosphere shell for thermal and electrical energy storage;Imran Hussain S et al.;Materials and Design;20180520;第154卷;第291-301页 * |
| Hepatitis B Virus: Advances in Prevention, Diagnosis, and Therapy;Mindie H. Nguyen et al.;Clinical Microbiology Reviews;20200421;第33卷(第2期);第1-38页 * |
| 乙型肝炎病毒核心抗体IgM时间分辨荧光免疫分析试剂盒的研制;胡妮娅等;南方医科大学学报;20090120;第29卷(第01期);第84-86页 * |
| 胶体金免疫结合试验在检验医学中的应用;王培之等;中华检验医学杂志;20000930;第23卷(第5期);第308-309页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN117538520A (zh) | 2024-02-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA1304006C (en) | Particle separation method | |
| US5536644A (en) | Particle separation method | |
| US4935147A (en) | Particle separation method | |
| JP5035622B2 (ja) | 着色ラテックス | |
| CN109752536B (zh) | 基于金纳米颗粒高效组装结构的光学探针及其制备与应用 | |
| Wang et al. | Preparation and application of selenium nanoparticles in a lateral flow immunoassay for clenbuterol detection | |
| Hao et al. | Core–Shell‐Heterostructured Magnetic–Plasmonic Nanoassemblies with Highly Retained Magnetic–Plasmonic Activities for Ultrasensitive Bioanalysis in Complex Matrix | |
| CN104538168B (zh) | 一种磁珠的制备方法及应用 | |
| JPH03504303A (ja) | カプセル化された超常磁性粒子 | |
| EP3150665B1 (en) | Method for preparing magnetic microspheres for the capture of proteins and their use in quantitative chemiluminescence immunoassays | |
| CN103063828A (zh) | 共价偶联制备量子点-抗体复合物的方法 | |
| CN104634973A (zh) | 一种纳米金复合材料免疫传感器的制备方法及应用 | |
| JP2816414B2 (ja) | サブミクロン粒子，調整及び免疫反応診断学における用途 | |
| CN117538520B (zh) | 一种HBc-IgM抗体检测试剂盒及其制备方法 | |
| JP2019082356A (ja) | 磁性粒子および検出・分離方法 | |
| US6177088B1 (en) | Surface-functionalized, probe-containing nanospheres | |
| Yuan et al. | Carboxyl-functionalized superparamagnetic Fe3O4/poly (St-co-MPS)/SiO2 composite particles for rapid and sensitive immunoassay | |
| CN115595146A (zh) | 一种比色荧光双信号纳米微球及其制备方法与应用 | |
| CN115837255A (zh) | 一种胶体金-二氧化硅复合微球的制备方法 | |
| JP2001242171A (ja) | 抗リン脂質抗体測定試薬及びその製造方法ならびに抗リン脂質抗体測定方法 | |
| CN116430039A (zh) | 一种用于检测新型冠状病毒的受体试剂及其应用 | |
| CN113003562A (zh) | 一种碳纳米粒及其制备方法和应用 | |
| CN115902196B (zh) | 一种chi3l1检测试剂盒及其制备方法 | |
| CN117805374A (zh) | 一种高危型hpv检测试剂盒及其制备方法 | |
| Ying et al. | A novel and efficient method for synthesizing magnetic PS-PMMA@ Fe3O4 microspheres for protein separation and detection |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |