CN117538475A - 一种百合药材基原的薄层检测方法以及鉴别方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种百合药材基原的薄层检测方法以及鉴别方法,其中,一种百合药材基原的薄层检测方法,包括:吸取供试品溶液点于硅胶G薄层板上,以质量比为(16‑20):(1.8‑2.2):(1.2‑1.8):(0.8‑1.2)的乙酸乙酯‑甲醇‑甲酸‑水为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%‑20%硫酸乙醇溶液加热至斑点显色清晰,置365nm的紫外光灯下检视即可。本发明能够有效获取显著斑点更多的百合药材的薄层色谱,且针对不同基原的百合药材,所显示的物质信息丰富且存在明显的差异;因此可以有效判断出百合药材的基原,有效实现百合药材的基原的鉴别。
Description
技术领域
本发明涉及中药检测领域,具体涉及一种百合药材基原的薄层检测方法以及鉴别方法。
背景技术
2020版《中国药典》规定了百合药材来源为百合科植物卷丹Lilium lancifoliumThunb.、百合Lilium brownii F.E.Brown var.viridulum Baker或细叶百合LiliumpumilumDC.的干燥肉质鳞叶。目前市场上的药用百合主要以卷丹为主,其次为百合,细叶百合流通量较低,以细叶百合、卷丹和百合为基原的百合药材无论从有效成分含量,还是药效上都有较大差别,不同来源百合饮片性状比较相似,无经验人员无法准确鉴别。
现有技术中公开了百合药材基原的鉴别方法,例如:中国专利申请CN116609448A中公开了一种不同基原的百合药材及其制剂的特征图谱的构建方法及鉴别方法,其采用的是高效液相色谱法进行检测,并未公开如何通过薄层色谱进行鉴别。
而《中国药典》百合药材质量评价依据中公开了薄层鉴别的手段,其中公开的薄层鉴别手段为:取本品粉末1g,加甲醇10ml,超声处理20分钟,滤过,滤液浓缩至1ml,作为供试品溶液。另取百合对照药材1g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验,吸取上述两种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以石油醚(60~90℃)-乙酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%磷钼酸乙醇溶液,加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;在该薄层条件下不同基原的百合药材斑点色谱斑点基本一致。
上述现有的薄层鉴别手段仅为性状薄层鉴别,经过验证其无法明显的区分不同基原百合薄层色谱,无具体品种的鉴别的功效,难以保障入药的准确性。因此,现有公开的薄层方法并不能适用于以卷丹、百合和细叶百合为基原的百合药材的区分。
发明内容
因此,本发明要解决的技术问题在于,克服现有技术的薄层方法获得的百合药材的薄层色谱中无法实现不同基原的区别的问题;从而提供具有更多显著斑点的一种百合药材基原的薄层检测方法,有效为利用该薄层检测方法获得的薄层色谱进行百合药材基原的区分提供前提条件,并给出了利用该薄层检测方法获得的薄层色谱进行百合药材基原的区分的方法。
为了解决上述问题,本发明提供的技术方案如下:
一种百合药材基原的薄层检测方法,包括:
吸取供试品溶液点于硅胶G薄层板上,以质量比为(16-20):(1.8-2.2):(1.2-1.8):(0.8-1.2)的乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%-20%硫酸乙醇溶液加热至斑点显色清晰,置365nm的紫外光灯下检视即可。
所述加热的温度为100-110℃,加热的时间为3-10分钟。
所述供试品溶液所采用的供试品包括百合、细叶百合和卷丹中的至少一种。
所述供试品溶液的制备过程为:
取供试品粉末,加入甲醇,超声处理,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇溶解即为供试品溶液。
每克供试品中加入10-20ml甲醇进行超声;
和/或,每克供试品得到的残渣中,添加的甲醇的量为1ml;
和/或,所述超声处理的条件为200-500w,20分钟。
所述硅胶G薄层板为默克板或烟台板。
一种百合药材基原的鉴别方法,包括:采用上述的薄层检测方法获得对照药材溶液和/或对照品溶液以及百合药材基原的薄层色谱,根据薄层色谱显示的斑点进行鉴别。
所述对照品溶液的制备方法为:分别取王百合苷A、2-乙酰王百合苷A对照品,加甲醇分别制成每1ml含0.5-2mg的溶液,作为对照品溶液;
和/或,所述对照药材溶液的制备方法与供试品溶液的制备方法相同。
所述鉴别的规则为:
当与王百合苷A和2-乙酰王百合苷A对照品的薄层色谱的相应位置显相同颜色斑点,和/或与卷丹对照药材的薄层色谱的相应位置显相同颜色斑点,该薄层色谱对应的百合药材基原为卷丹;
当与王百合苷A对照品的薄层色谱和/或百合对照药材的薄层色谱的相应位置显相同颜色斑点,与2-乙酰王百合苷A对照品的薄层色谱的相应位置无相同颜色斑点,且在Rf值0.3-0.6之间不显示2个黄绿色特异性荧光斑点,该薄层色谱对应的百合药材基原为百合;
当与王百合苷A对照品的薄层色谱的相应位置显相同颜色斑点,与2-乙酰王百合苷A对照品的薄层色谱的相应位置无相同颜色斑点,且在Rf值0.3-0.6之间显示2个黄绿色特异性荧光斑点,该薄层色谱对应的百合药材基原为细叶百合。
本发明技术方案,具有如下优点:
1、本发明提供的一种百合药材基原的薄层检测方法,能够有效获取显著斑点更多的百合药材的薄层色谱,且针对不同基原的百合药材,所显示的物质信息丰富且存在明显的差异;因此,可以直观地确定百合药材的基原,进而可以为百合药材的基原的鉴别提供前提条件。
2、本发明提供的一种百合药材基原的鉴别方法,采用上述的一种百合药材基原的薄层检测方法获得百合药材基原的薄层色谱,可以有效获取王百合苷A和2-乙酰王百合苷A对应的斑点信息,并结合薄层色谱上Rf值0.3-0.6之间是否存在2个黄绿色特异性荧光斑点,有效判断出百合药材的基原,有效实现百合药材的基原的鉴别;同时也可有效扩展到百合药材的配方颗粒以及制剂中,实现百合药材基原的判断。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案,下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图是本发明的一些实施方式,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明实施例1中不同基原百合药材的供试品溶液的薄层色谱图;
图2是本发明实施例2中不同点样量下供试品溶液的薄层色谱图;
图3是本发明实施例2中低温(5℃、RH:56%)下供试品溶液的薄层色谱图;
图4是本发明实施例2中常温(23.6℃、RH:56%)下供试品溶液的薄层色谱图;
图5是本发明实施例2中低湿(RH:18%)下供试品溶液的薄层色谱图;
图6是本发明实施例2中高湿(RH:88%)下供试品溶液的薄层色谱图;
图7是本发明实施例2中青岛硅胶G板的薄层鉴别的薄层色谱图;
图8是本发明实施例2中烟台G板的薄层鉴别的薄层色谱图;
图9是本发明实施例2中默克Merck硅胶预制薄层板的薄层色谱图;
图10是本发明实施例2中人员甲检测的薄层色谱图;
图11是本发明实施例2中人员乙检测的薄层色谱图;
图12是本发明实施例2中6.1色谱条件下的薄层色谱图;
图13是本发明实施例2中6.2色谱条件下的薄层色谱图;
图14是本发明对比例1中供试品溶液的薄层色谱图;
图15是本发明对比例2中(1)薄层条件下的薄层色谱图;
图16是本发明对比例2中(2)薄层条件下的薄层色谱图。
具体实施方式
实施例中未注明具体实验步骤或条件者,按照本领域内的文献所描述的常规实验步骤的操作或条件即可进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市购获得的常规试剂产品。
仪器:薄层全自动点样仪(型号:ATS4)、薄层自动成像仪(型号:TLCvisualizer2)、百万分之一天平(型号:ME365)、展开缸、硅胶G薄层板。
试药:
百合对照药材(批号:121100-201906;购于中国食品药品检定研究院);
卷丹对照药材(批号:121767-202101;购于中国食品药品检定研究院);
王百合苷A对照品(批号:114420-66-5;购于普思生物科技有限公司);
2-乙酰王百合苷A对照品(批号:112079-202101;纯度99.3%;购于中国食品药品检定研究院)。
试剂:
甲醇(批号:2023030115;来源:广州化学试剂厂);
乙酸乙酯(批号:20230305;来源:广东光华科技股份有限公司);
甲酸(批号:20200608;来源:广东光华科技股份有限公司);
硫酸(批号:2022020518;来源:广州化学试剂厂);
乙醇(批号:20230525;来源:广东光华科技股份有限公司)。
实施例1
一种百合药材基原的薄层检测方法,包括:
1、供试品溶液制备
分别采用3批百合药材、3批细叶百合药材、3批卷丹药材分别制备成供试品溶液,制备过程为:取供试品粉末1g,加甲醇10ml,超声处理20分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使其溶解,作为供试品溶液。
再分别取百合对照药材、卷丹对照药材各1g,加甲醇10ml,超声处理20分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使其溶解,作为对照药材溶液。
最后取王百合苷A、2-乙酰王百合苷A对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。
2、薄层方法
吸取上述的供试品溶液5μL、对照药材溶液5μL、对照品溶液2μl,分别点于同一硅胶G薄层板(默克板)上,以乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水(18∶2∶1.5∶1)为展开剂,在23.5℃(常温)、RH:56%条件下展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热5分钟至斑点显色清晰,置紫外光灯(365nm)下检视。
3、检测结果
本实施例中,其检测结果如图1所示。
图1中,标号1为百合对照药材、标号2-4为百合、标号5-7为细叶百合、标号8-10为卷丹、标号11为卷丹对照药材、标号12为王百合苷A、标号13为2-乙酰王百合苷A。
根据上述的拳参薄层鉴别方法,相比现有百合的薄层方法,有效获取显著斑点更多的百合药材的薄层色谱,且针对不同基原的百合药材,所显示的物质信息丰富且存在明显的差异,因此可以为百合药材的基原的鉴别提供前提条件。
根据图1的结果可知,在卷丹的薄层色谱中,与王百合苷A和2-乙酰王百合苷A以及与卷丹对照药材的薄层色谱的相应位置均显相同颜色斑点;在百合的薄层色谱中,与王百合苷A对照品以及百合对照药材的薄层色谱的相应位置显相同颜色斑点,但与2-乙酰王百合苷A对照品的薄层色谱的相应位置不显相同颜色斑点,以及在Rf值0.3-0.6之间不显示2个黄绿色特异性荧光斑点;在细叶百合的薄层色谱中,与王百合苷A对照品的薄层色谱的相应位置显相同颜色斑点,但与2-乙酰王百合苷A对照品的薄层色谱的相应位置不显相同颜色斑点,且在Rf值0.3-0.6之间显示2个黄绿色特异性荧光斑点(参见图1中虚线框位置处)。
因此,此本申请的薄层方法可以对不同基原的百合药材进行区别。基于上述一种百合药材基原的薄层检测方法的检测结果,得到的一种百合药材基原的鉴别方法中的鉴别规则如下:
当与王百合苷A和2-乙酰王百合苷A对照品的薄层色谱的相应位置显相同颜色斑点,和/或与卷丹对照药材的薄层色谱的相应位置显相同颜色斑点,该薄层色谱对应的百合药材基原为卷丹;
当与王百合苷A对照品的薄层色谱和/或百合对照药材的薄层色谱的相应位置显相同颜色斑点,与2-乙酰王百合苷A对照品的薄层色谱的相应位置无相同颜色斑点,且在Rf值0.3-0.6之间不显示2个黄绿色特异性荧光斑点,该薄层色谱对应的百合药材基原为百合;
当与王百合苷A对照品的薄层色谱的相应位置显相同颜色斑点,与2-乙酰王百合苷A对照品的薄层色谱的相应位置无相同颜色斑点,且在Rf值0.3-0.6之间显示2个黄绿色特异性荧光斑点,该薄层色谱对应的百合药材基原为细叶百合。
实施例2
一种百合药材基原的薄层检测方法,采用不同色谱条件对其进行考察,包括:
1、点样量考察
获取上述实施例1中其中一批百合药材的不同点样量的供试品溶液(1μL、3μL、5μL)、对照药材溶液(5μL)、对照品溶液(2μL),采用上述实施例1中相同的薄层方法进行不同点样量的考察,考察结果如图2所示。
图2中,标号1为百合药材(1μL)、标号2为百合药材(3μL)、标号3为百合药材(5μL)、标号4为百合对照药材、标号5为卷丹对照药材、标号6为王百合苷A、标号7为2-乙酰王百合苷A。
根据图2的结果可知,供试品色谱中,百合色谱在与百合对照药材、王百合苷A对照品色谱相应的位置显相同颜色的斑点,卷丹对照药材在与王百合苷A、2-乙酰王百合苷A对照品色谱相应的位置显相同颜色的斑点。根据斑点的分离度及清晰度,确定百合药材的点样量为5uL、百合对照药材的点样量为5ul、对照品的点样量为2uL。
2、不同温度考察
采用上述实施例1中其中一批次的供试品溶液(1批百合药材、1批细叶百合药材、1批卷丹药材)、对照药材溶液、对照品溶液,分别吸取供试品溶液5μL、对照药材溶液5μL、对照品溶液2μL,点于同一硅胶G板(默克板)上,采用上述实施例1薄层条件,分别在不同温度(5℃、23.6℃)下进行考察,考察结果如图3-图4所示。
图3为低温(5℃、RH:56%)下的薄层鉴别图谱,图4为常温(23.6℃、RH:56%)下的薄层鉴别图谱。图3-图4中,标号1为百合对照药材、标号2为百合、标号3为细叶百合、标号4为卷丹、标号5为卷丹对照药材、标号6为王百合苷A、标号7为2-乙酰王百合苷A。
根据图3-图4的结果可知,供试品色谱中,在常温和低温条件下,百合的色谱在与百合对照药材、王百合苷A对照品色谱相应的位置显相同颜色的斑点;细叶百合的色谱在与王百合苷A对照品色谱相应的位置显相同颜色的斑点,且在Rf值0.3-0.6左右显示2个黄绿色特异性荧光斑点;卷丹在与卷丹对照药材、王百合苷A、2-乙酰王百合苷A对照品色谱相应的位置显相同颜色的斑点,且色谱斑点分离效果都较好。实验结果表明,温度对百合药材不同基原区分薄层鉴别无显著影响,该薄层鉴别方法对温度有较好的耐用性。
3、不同湿度考察
采用上述温度考察中相同的供试品溶液、对照药材溶液、对照品溶液,分别吸取供试品溶液5μL、对照药材溶液5μL、对照品溶液2μL,点于同一硅胶G板(默克板)上,采用上述实施例1薄层条件,分别在常温、不同湿度(RH:18%、RH:88%)条件下进行考察,考察结果如图5-图6所示。
图5为低湿(RH:18%)下的薄层鉴别图谱,图6为高湿(RH:88%)下的薄层鉴别图谱。图5-图6中,标号1为百合对照药材、标号2为百合、标号3为细叶百合、标号4为卷丹、标号5为卷丹对照药材、标号6为王百合苷A、标号7为2-乙酰王百合苷A。
根据图5-图6的结果可知,供试品色谱中,在低湿和高湿条件下,百合的色谱在与百合对照药材、王百合苷A对照品色谱相应的位置显相同颜色的斑点;细叶百合的色谱在与王百合苷A对照品色谱相应的位置显相同颜色的斑点,且在Rf值0.3-0.6左右显示2个黄绿色特异性荧光斑点;卷丹在与卷丹对照药材、王百合苷A、2-乙酰王百合苷A对照品色谱相应的位置显相同颜色的斑点,且色谱斑点分离效果都较好。实验结果表明,湿度对百合药材不同基原区分薄层鉴别无显著影响,该薄层鉴别方法对湿度有较好的耐用性。
4、不同薄层板考察
采用上述温度考察中相同的供试品溶液、对照药材溶液、对照品溶液,分别吸取供试品溶液5μL、对照药材溶液5μL、对照品溶液2μL,点于不同硅胶G板(青岛硅胶G板、烟台G板及默克Merck硅胶预制薄层板)上,采用上述实施例1薄层条件,分别进行考察,考察结果如图7-图9所示。
图7为青岛硅胶G板的薄层鉴别图谱,图8为烟台G板的薄层鉴别图谱,图9为默克Merck硅胶预制薄层板(即默克板)的薄层鉴别图谱。图7-图9中,标号1为百合对照药材、标号2为百合、标号3为细叶百合、标号4为卷丹、标号5为卷丹对照药材、标号6为王百合苷A、标号7为2-乙酰王百合苷A。
通过上述结果可知:不同厂家生产薄层板,百合药材色谱在与百合对照药材、王百合苷A对照品色谱相应的位置显相同颜色的斑点;细叶百合药材在与王百合苷A对照品色谱相应的位置显相同颜色的斑点,且在Rf值0.3-0.6之间显示2个黄绿色特异性荧光斑点;卷丹药材在与卷丹对照药材、王百合苷A、2-乙酰王百合苷A对照品色谱相应的位置显相同颜色的斑点,且色谱斑点分离效果都较好,仅青岛板色谱斑点稍淡;实验结果表明,本发明的薄层鉴别方法适用于所有硅胶G薄层板,其中默克板和烟台板的薄层鉴别效果更好。
5、不同人员重现性考察
分别由甲乙两位实验人员,分别制备按照实施例1中公开的方法制备供试品溶液、对照药材溶液和对照品溶液,分别吸取百合、细叶百合、卷丹药材制备得到的供试品溶液,百合对照药材、卷丹对照药材制备得到的对照药材溶液各5μL,以及王百合苷A、2-乙酰王百合苷A的对照品溶液2μL,点于同一硅胶G薄层板(默克板)上,在实施例1相同的薄层色谱条件下展开、取出、晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热5分钟至斑点显色清晰,在365nm下检视,实验结果如图10-图11所示。
图10为人员甲检测得到的薄层鉴别图谱,图11为人员乙检测得到的薄层鉴别图谱。图10中,标号1为百合对照药材、标号2为百合、标号3为细叶百合、标号4为卷丹、标号5为卷丹对照药材、标号6为王百合苷A、标号7为2-乙酰王百合苷A;图11中,标号1为百合对照药材、标号2为细叶百合、标号3为卷丹、标号4为百合、标号5为卷丹对照药材、标号6为王百合苷A、标号7为2-乙酰王百合苷A。
通过上述结果可知:由甲乙不同实验人员制备的供试品溶液和对照药材、对照品溶液,百合药材色谱在与百合对照药材、王百合苷A对照品色谱相应的位置显相同颜色的斑点,细叶百合药材在与王百合苷A对照品色谱相应的位置显相同颜色的斑点,卷丹药材在与卷丹百合对照药材、2-乙酰王百合苷A对照品色谱相应的位置显相同颜色的斑点,且色谱斑点分离效果都较好。实验结果表明,该方法在不同实验人员间的重现性较好。
6、不同薄层条件考察
采用上述实施例1中其中一批次的供试品溶液(1批百合药材、1批细叶百合药材、1批卷丹药材)、对照药材溶液、对照品溶液,分别吸取供试品溶液5μL、对照药材溶液5μL、对照品溶液2μL,点于同一硅胶G板(默克板)上,分别采用下述6.1和6.2中的薄层条件进行考察:
6.1、吸取供试品溶液点于硅胶G薄层板上,以质量比为16:1.8:1.2:0.8的乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%硫酸乙醇溶液加热至斑点显色清晰,置365nm的紫外光灯下检视即可,实验结果如图12所示。
6.2、吸取供试品溶液点于硅胶G薄层板上,以质量比为20:2.2:1.8:1.2的乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水为展开剂,展开,取出,晾干,喷以20%硫酸乙醇溶液加热至斑点显色清晰,置365nm的紫外光灯下检视即可,实验结果如图13所示。
图12-图13中,标号1为百合对照药材、标号2为百合、标号3为细叶百合、标号4为卷丹、标号5为卷丹对照药材、标号6为王百合苷A、标号7为2-乙酰王百合苷A。
通过上述结果可知:上述薄层条件下,百合药材色谱在与百合对照药材、王百合苷A对照品色谱相应的位置显相同颜色的斑点,细叶百合药材在与王百合苷A对照品色谱相应的位置显相同颜色的斑点,卷丹药材在与卷丹百合对照药材、2-乙酰王百合苷A对照品色谱相应的位置显相同颜色的斑点,且色谱斑点分离效果都较好。
对比例1
采用药典方法(2020版中国药典百合薄层方法)对实施例1中的药材的供试品溶液进行检测,鉴别方法如下:
取本品粉末1g,加甲醇10ml,超声处理20分钟,滤过,滤液浓缩至1ml,作为供试品溶液。另取百合对照药材1g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验,吸取上述两种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板(默克板)上,以石油醚(60~90℃)-乙酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%磷钼酸乙醇溶液,加热至斑点显色清晰。
检测结果如图14所示,图14中,标号1为王百合苷A、标号2为2-乙酰王百合苷A、标号3为百合对照药材、标号4为百合、标号5为细叶百合、标号6为卷丹。
根据上述的薄层色谱图显示,虽然相应药材与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点,但不同基原药材均不能与王百合苷A、2-乙酰王百合苷A对照品色谱相应的位置显相同颜色的斑点,且不同基原药材显示的斑点信息基本相同,无法准确对三者药材进行区别。
对比例2
采用与对比例1不同的色谱条件进行供试品溶液的薄层检测。具体的:
(1)以石油醚(60~90℃)-二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(7∶10∶7∶2)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(254nm)下检视,其他与实施例1相同,检测结果如图15所示,图15中,标号1为王百合苷A、标号2为2-乙酰王百合苷A、标号3为百合、标号4为细叶百合、标号5为卷丹。
(2)以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(3∶15∶5)为展开剂,展开,取出,晾干,碘蒸气熏蒸后,自然光下检视,其他与实施例1相同,检测结果如图16所示,图16中,标号1为王百合苷A、标号2为2-乙酰王百合苷A、标号3为百合对照药材。
根据上述图15-图16的薄层色谱图显示,王百合苷A和2-乙酰王百合苷A在254nm下检视和碘蒸气熏蒸显色条件下斑点明显,但百合药材供试品薄层色谱斑点不明显,该条件不能够鉴别不同基原的百合药材。
显然,上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例,而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说,在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
Claims (9)
1.一种百合药材基原的薄层检测方法,其特征在于,包括:
吸取供试品溶液点于硅胶G薄层板上,以质量比为(16-20):(1.8-2.2):(1.2-1.8):(0.8-1.2)的乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%-20%硫酸乙醇溶液加热至斑点显色清晰,置365nm的紫外光灯下检视即可。
2.根据权利要求1所述的薄层检测方法,其特征在于,所述加热的温度为100-110℃,加热的时间为3-10分钟。
3.根据权利要求1或2所述的薄层检测方法,其特征在于,所述供试品溶液所采用的供试品包括百合、细叶百合和卷丹中的至少一种。
4.根据权利要求3所述的薄层检测方法,其特征在于,所述供试品溶液的制备过程为:
取供试品粉末,加入甲醇,超声处理,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇溶解即为供试品溶液。
5.根据权利要求4所述的薄层检测方法,其特征在于,每克供试品中加入10-20ml甲醇进行超声;
和/或,每克供试品得到的残渣中,添加的甲醇的量为1ml;
和/或,所述超声处理的条件为200-500w,20分钟。
6.根据权利要求1-5任一项所述的薄层检测方法,其特征在于,所述硅胶G薄层板为默克板或烟台板。
7.一种百合药材基原的鉴别方法,其特征在于,包括:采用权利要求1-6任一项所述的薄层检测方法获得对照药材溶液和/或对照品溶液以及百合药材基原的薄层色谱,根据薄层色谱显示的斑点进行鉴别。
8.根据权利要求7所述的鉴别方法,其特征在于,所述对照品溶液的制备方法为:分别取王百合苷A、2-乙酰王百合苷A对照品,加甲醇分别制成每1ml含0.5-2mg的溶液,作为对照品溶液;
和/或,所述对照药材溶液的制备方法与供试品溶液的制备方法相同。
9.根据权利要求7或8所述的鉴别方法,其特征在于,所述鉴别的规则为:
当与王百合苷A和2-乙酰王百合苷A对照品的薄层色谱的相应位置显相同颜色斑点,和/或与卷丹对照药材的薄层色谱的相应位置显相同颜色斑点,该薄层色谱对应的百合药材基原为卷丹;
当与王百合苷A对照品的薄层色谱和/或百合对照药材的薄层色谱的相应位置显相同颜色斑点,与2-乙酰王百合苷A对照品的薄层色谱的相应位置无相同颜色斑点,且在Rf值0.3-0.6之间不显示2个黄绿色特异性荧光斑点,该薄层色谱对应的百合药材基原为百合;
当与王百合苷A对照品的薄层色谱的相应位置显相同颜色斑点,与2-乙酰王百合苷A对照品的薄层色谱的相应位置无相同颜色斑点,且在Rf值0.3-0.6之间显示2个黄绿色特异性荧光斑点,该薄层色谱对应的百合药材基原为细叶百合。
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