CN117503748A - 对甲氧基肉桂酸乙酯的生发、防脱用途 - Google Patents
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Abstract
本申请提出对甲氧基肉桂酸乙酯的生发、防脱用途。对甲氧基肉桂酸乙酯在制备皮肤施用组合物上的用途。皮肤施用组合物为生发、防脱药物。皮肤施用组合物用于促进毛发生长。促进毛发生长包括加快毛发的自然生长速度、和/或延长毛发自然生长周期中的生长期、和/或上调细胞分泌生长因子VEGF和HGF、和/或下调抑制因子TGF-β1。皮肤施用组合物用于预防和/或治疗自然或病理原因下的头发脱落。皮肤施用组合物用于预防和/或治疗雄激素脱发。皮肤施用组合物应用于药物制剂或日化用品中。药物制剂包括贴剂、酊剂、霜剂、乳膏制剂、软膏剂、凝胶剂和喷雾剂。对甲氧基肉桂酸乙酯在药物制剂或日化用品中添加的质量百分比为0.1%-20%。
Description
技术领域
本申请涉及化合物及制剂领域,尤其涉及对甲氧基肉桂酸乙酯的生发、防脱用途,以及进一步应用于药物制剂或日化用品领域。
背景技术
人类头发存在周期性循环,周期约为3-7年,由生长期、退行期和休止期三个阶段组成。生长期一般持续2-7年,头发每天生长0.3-0.5毫米。退行期持续2-4周,头发停止生长,毛囊开始萎缩。休止期持续2-3个月,头发脱落,毛囊进入新的生长周期,据调查每人平均每天掉落50-100根头发。但头发的生长与脱落一直处于一个动态的平衡当中,因此头发的总量不会发生太大变化。然而当头发毛囊的周期性生长受到遗传因素、自身免疫紊乱、压力应激等影响下,平衡被打破,出现过度脱落,这将严重影响人的正常社交、生活,影响心理健康,已越来越引起社会重视,脱发逐渐成为一种社会问题。
脱发分为生理性脱发与病理性脱发。生理性脱发指健康毛发到休止期而自然掉落的情况,包括新生婴儿脱发、产后脱发、老年性脱发等,又称为休止期脱发,一般无需特殊处理。病理性脱发是指头发异常或过度脱落的现象,又称非生理性脱发,其中最为常见的雄激素脱发(androgeneticalopecia,AGA),也称遗传性脱发,且发病率随年龄增长而增加,常发于皮脂腺分泌较多的男性青壮年群体,又称男性型脱发或脂溢性脱发,发病机理是雄激素作用于毛囊导致的进行性毛囊微小化。此外,病理性脱发还包括精神因素引起的神经性脱发(又称斑秃)、外界刺激导致的损伤性脱发和营养异常性脱发。
目前,已有针对脱发的药物治疗仍然匮乏,国内外唯二被批准使用的药物是米诺地尔和非那雄胺。米诺地尔是钾离子通道开放剂和血管扩张剂,能促进局部血液循环,减少毛囊的微小化进程。非那雄胺是Ⅱ型5α-还原酶抑制剂,能抑制睾酮转化为二氢睾酮,抑制二氢睾酮与雄激素受体结合,抑制头皮毛囊变小,促使毛囊生发功能恢复。然而这两种药物均存在包括皮肤过敏、胃肠道不适、性功能障碍等各种副作用,因此急于寻求安全有效的具有生发、防脱活性的其他物质。
对甲氧基肉桂酸乙酯(Ethylp-methoxycinnamate),分子式C12H14O3,分子量206.24,CAS号24393-56-4,是在山奈(Kaempferia galangal)中发现的一种天然芳香产物,也是山奈的主要气味成分,具有抗炎、抗肿瘤、抗微生物等作用,其结构式为:
在目前的国内外研究中,对甲氧基肉桂酸乙酯具有舒张血管、色素减退、抗真菌以及吸收紫外线等作用,如专利《育发生发促进剂》(CN 108135879B)中,提到将对甲氧基肉桂酸异丙酯等甲氧基肉桂酸衍生物作为紫外线吸收/阻断剂进行添加应用,但至今尚未有文献、专利公开报道对甲氧基肉桂酸乙酯在生发、防脱发方面的相关应用。
发明内容
本申请实施例提供一种对甲氧基肉桂酸乙酯的生发、防脱用途,以解决相关技术存在的问题,技术方案如下:
本申请实施例提供了对甲氧基肉桂酸乙酯在制备皮肤施用组合物上的用途。
在一种实施方式中,所述皮肤施用组合物为生发、防脱药物。
在一种实施方式中,所述皮肤施用组合物用于促进毛发生长。
在一种实施方式中,所述促进毛发生长包括加快毛发的自然生长速度、和/或延长毛发自然生长周期中的生长期、和/或上调细胞分泌生长因子VEGF和HGF、和/或下调抑制因子TGF-β1。
在一种实施方式中,所述皮肤施用组合物用于预防和/或治疗自然或病理原因下的头发脱落。
在一种实施方式中,所述皮肤施用组合物用于预防和/或治疗雄激素脱发。
在一种实施方式中,所述皮肤施用组合物应用于药物制剂或日化用品中。
在一种实施方式中,所述药物制剂包括贴剂、酊剂、霜剂、乳膏制剂、软膏剂、凝胶剂和喷雾剂。
在一种实施方式中,所述日化用品包括洗发水、护发素、头发护理液、护发精油、洗护发精华液、护发油、护发乳液、头皮秀发滋养品、毛发精华、头皮膏、护发胶、喷发胶、护发膜和眉毛护理液。
在一种实施方式中,所述对甲氧基肉桂酸乙酯在药物制剂或日化用品中添加的质量百分比为0.1%-20%。
上述技术方案中的优点或有益效果至少包括:
本申请提供的对甲氧基肉桂酸乙酯可用作活性成分应用于生发、防脱发,首次提出了对甲氧基肉桂酸乙酯的新用途。对甲氧基肉桂酸乙酯可被制备为多种药物制剂,通过皮肤给药实现减少胃肠道刺激、用量可控、使用便捷。此外还可添加于日化用品中,实现广泛的应用前景。
本申请公开的对甲氧基肉桂酸乙酯是一种安全有效,能满足预防、治疗、美容等效果的生发活性物质,可制备为不同药物制剂或日化用品进行应用,达到促毛发生长、预防和/或治疗头发脱落的效果。
对甲氧基肉桂酸乙酯在本申请所涉及的两种模型(自然生长模型、雄激素脱发模型)中,均具有优异的生发、防脱效果,与FDA批准的米诺地尔相比药效相近甚至更优,且无明显副作用,可以作为护发、防治脱发的安全有效的新活性物质进行开发应用。
上述概述仅仅是为了说明书的目的,并不意图以任何方式进行限制。除上述描述的示意性的方面、实施方式和特征之外,通过参考附图和以下的详细描述,本申请进一步的方面、实施方式和特征将会是容易明白的。
附图说明
在附图中,除非另外规定,否则贯穿多个附图相同的附图标记表示相同或相似的部件或元素。这些附图不一定是按照比例绘制的。应该理解,这些附图仅描绘了根据本申请公开的一些实施方式,而不应将其视为是对本申请范围的限制。
图1为不同浓度对甲氧基肉桂酸乙酯的细胞增殖作用实验结果图。
图2为对甲氧基肉桂酸乙酯对细胞周期的影响实验结果图。
图3为对甲氧基肉桂酸乙酯对VEGF的影响实验结果图。
图4为对甲氧基肉桂酸乙酯对HGF的影响实验结果图。
图5为对甲氧基肉桂酸乙酯对TGF-β1的影响实验结果图。
图6为对甲氧基肉桂酸乙酯酊剂在小鼠自然毛发生长模型中的促生长作用实验结果图。
图7为对甲氧基肉桂酸乙酯酊剂在小鼠自然毛发生长模型中对皮肤组织的影响实验结果图。
图8为对甲氧基肉桂酸乙酯酊剂在小鼠雄激素脱发模型中的防脱发作用实验结果图。
具体实施方式
在下文中,仅简单地描述了某些示例性实施例。正如本领域技术人员可认识到的那样,在不脱离本申请的精神或范围的情况下,可通过各种不同方式修改所描述的实施例。因此,附图和描述被认为本质上是示例性的而非限制性的。
本申请实施例提供了对甲氧基肉桂酸乙酯在制备皮肤施用组合物上的用途。
在一种实施方式中,皮肤施用组合物为生发、防脱药物。
在一种实施方式中,皮肤施用组合物用于促进毛发生长。
在一种实施方式中,促进毛发生长包括加快毛发的自然生长速度、和/或延长毛发自然生长周期中的生长期、和/或调节毛囊细胞相关的生长因子。调节毛囊细胞相关的生长因子包括上调细胞分泌生长因子VEGF和HGF、和/或下调抑制因子TGF-β1。
实验表明,在对甲氧基肉桂酸乙酯的作用下,体外实验中人毛乳头细胞增殖明显,细胞周期中的生长期延长,上调了细胞分泌生长因子VEGF(血管内皮生长因子,vascularendothelial growth factor)和HGF(肝细胞生长因子,hepatocyte growth factor),下调了抑制因子TGF-β1(转化生长因子-β,Transforming growth factor beta);而小鼠在体毛囊也呈现更强的再生趋势,小鼠再生毛发区域增加。
在一种实施方式中,皮肤施用组合物用于预防和/或治疗自然或病理原因下的头发脱落。
在一种实施方式中,皮肤施用组合物用于预防和/或治疗雄激素脱发。
实验表明,在注射丙酸睾酮构建雄激素脱发模型后,对甲氧基肉桂酸乙酯可一定程度上拮抗雄激素影响,恢复毛发再生。
在一种实施方式中,皮肤施用组合物应用于药物制剂或日化用品中。
在预防或治疗脱发时,以对甲氧基肉桂酸乙酯为活性成分,可制备为不同药物制剂或日化用品进行皮肤局部施用。
在一种实施方式中,药物制剂包括贴剂、酊剂、霜剂、乳膏制剂、软膏剂、凝胶剂和喷雾剂。应当理解,以上药物制剂类型仅为列举,本申请对具体的药物制剂类型并不限定。
在一种实施方式中,日化用品包括洗发水、护发素、头发护理液、护发精油、洗护发精华液、护发油、护发乳液、头皮秀发滋养品、毛发精华、头皮膏、护发胶、喷发胶、护发膜和眉毛护理液。应当理解,以上日化用品类型仅为列举,本申请对具体的日化用品类型并不限定,对甲氧基肉桂酸乙酯可用于制备多种化妆品、护理品或美容品等日化用品中。
在一种实施方式中,对甲氧基肉桂酸乙酯在药物制剂或日化用品中添加的质量百分比为0.1%-20%。
实施例1对甲氧基肉桂酸乙酯对体外细胞培养的促增殖作用
细胞培养:毛乳头细胞(HFDPCs)使用含有10%(v/v)胎牛血清以及1%(v/v)抗生素的杜尔贝科改良伊格尔培养基(DMEM,Dulbecco Modified EagleMedium),在37℃、5%CO2条件下进行培养。
样品配制:对甲氧基肉桂酸乙酯经二甲基亚砜(DMSO)溶解后,用培养基稀释成不同浓度的实验样品(0.0002%-0.002%)。
CCK-8法检测:将细胞以5×103/孔的密度接种在96孔板中孵育24h,分别加入含不同浓度对甲氧基肉桂酸乙酯的培养基,以无血清DMEM培养基和0.1%DMSO培养基分别作空白对照和阴性对照。处理24h后,每孔加入10%CCK-8溶液,再孵育1h。在检测波长450nm下测量吸光度OD。细胞活力(%)=(OD样品-OD空白)/(OD阴性对照-OD空白)。
实验结果如图1所示。在不同浓度的对甲氧基肉桂酸乙酯共孵育下,细胞活力相对于未给药处理的阴性对照组均明显提高,0.01%浓度下的细胞活力最高,可达133.81%。证明对甲氧基肉桂酸乙酯可促进毛乳头细胞的增殖,从而促进毛发生长。
实施例2对甲氧基肉桂酸乙酯对细胞周期的调节作用
细胞培养及样品配制:同实施例1。此外,米诺地尔以样品配制同样的方法制成0.0002%阳性对照组。
实验方法:取对数生长期细胞HFDPCs,以3×105个/孔的密度接种在6孔板中孵育24h,待贴壁后分别加入0.1%DMSO(空白对照)、0.0002%米诺地尔(阳性对照)和0.0002%-0.02%的不同浓度对甲氧基肉桂酸乙酯。共孵育24h后用胰酶消化细胞,收集于离心管中1000g离心3分钟,沉淀细胞,并用预冷PBS缓冲液洗涤沉淀。预冷70%乙醇对细胞进行固定过夜,离心后沉淀细胞,再次用PBS洗涤。根据细胞周期试剂盒说明书的说明,配制碘化丙啶染色液,加入细胞样品进行染色,37℃避光温浴30分钟,随后用流式细胞仪进行周期检测。
实验结果如图2所示。细胞周期中的G1期为合成前期,主要为下阶段S期的DNA复制作好物质和能量的准备;S期为DNA合成期,细胞生长旺盛;G2/M期为DNA合成后期,在这一时期,DNA合成终止。由流式检测结果可知,对甲氧基肉桂酸乙酯可使HFDPCs细胞的准备期G1期缩短,而生长期S期显著延长,高浓度的对甲氧基肉桂酸乙酯效果甚至优于阳性对照组,表明其可以调控毛囊生长周期,促进DNA合成以延长生长期,从而促进毛发生长。
实施例3对甲氧基肉桂酸乙酯对细胞生长因子的调节作用
细胞培养:同实施例1及实施例2,收集细胞培养上清液备用。
样品配制:同实施例1及实施例2。实验组中对甲氧基肉桂酸乙酯终浓度为0.0002%-0.001%。
实验方法:通过ELISA试剂盒(欣博盛,货号EHC108.96,EHC138.96,EHC107b.96)对经对甲氧基肉桂酸乙酯处理后所得培养上清液中生发相关的生长因子VEGF(血管内皮生长因子,vascular endothelial growth factor),HGF(肝细胞生长因子,hepatocyte growthfactor)和TGF-β1(转化生长因子-β,Transforming growth factor beta)的调节作用,对照试剂盒说明书进行操作,结果如图3所示。
结果表明,在给予对甲氧基肉桂酸乙酯后,增加了人头囊毛乳头细胞所产生的VEGF量和HGF量,这两种细胞因子主要在毛囊的生长中发挥作用。另一方面,作为阳性对照的米诺地尔与空白对照相比,显著地增加了人头发毛乳头细胞所产生的VEGF量;此外,雄激素脱发是由睾酮经过5α-还原酶转化为二氢睾酮(DHT)后,DHT和毛囊内的雄激素受体结合,产生一系列细胞因子,其中包括TGF-β1,导致毛囊萎缩,最后脱发。而阳性对照和实验组均可在一定程度上显著抑制TGF-β1的产生量。
该结果表明,通过将对甲氧基肉桂酸乙酯应用于头皮等,可提高生发相关的细胞因子产生量,抵抗抑制因子的产生,从而可起到生发及固发的效果。
实施例4对甲氧基肉桂酸乙酯酊剂对小鼠自然毛发生长模型的疗效评估
样品制备:在动物实验层面上的用药量,需在细胞水平上的给药量进行放大。对甲氧基肉桂酸乙酯酊剂由溶剂(丙二醇:无水乙醇:水=5:3:2)制备为质量百分比1%和5%的酊剂样品;米诺地尔溶于乙醇溶液中,备用。
实验方法:7周龄的C57BL/6小鼠的毛发生长处于休止期,可用于构建自然毛发生长模型,通过脱去小鼠背部休止期毛发,诱导毛发进入高度同步的生长期。将C57BL/6小鼠分为4组,分别为实验组(1%酊剂和5%酊剂)、阳性对照组及空白对照组,每组3只小鼠。将小鼠背部剃毛后,实验组小鼠的背部连续14天涂抹100μL的1%或5%对甲氧基肉桂酸乙酯酊剂,阳性对照组涂抹5%米诺地尔,空白对照组涂抹空白溶剂。涂抹14天后对比各组小鼠的背部毛发生长区域,毛发生长区域(%)=背部新生毛发面积/脱毛区域面积*100%。并取皮肤组织进行切片染色观察。结果分别如图4、图5所示。
结果表明:脱毛后自然毛发生长模型中的小鼠在不同浓度对甲氧基肉桂酸乙酯酊剂涂抹处理后,毛发生长区域均大于空白对照组,且高浓度的酊剂处理后效果与阳性对照组相近,表明所制备的酊剂有一定促进小鼠毛发再生的趋势。而组织切片结果显示在脱毛后、给药第1天时,毛囊处于休止期。而在给药14天时,各组毛囊呈现生长期表型,其体积变大,单位面积的密度也增大,周围附着黑色颗粒。实验组和阳性组的再生毛囊生长趋势强于空白对照组,表现为更大的毛囊体积以及更深入真皮层。即对甲氧基肉桂酸乙酯酊剂处理后,促进小鼠在体毛囊的生长,且再生毛发区域明显大于空白对照组,促毛发生长效果明显。
实施例5对甲氧基肉桂酸乙酯酊剂对小鼠雄激素脱发模型的疗效评估
样品制备:同实施例4所述,此外,将造模使用的丙酸睾酮用注射用玉米油溶解。
实验方法:C57BL/6小鼠分为4组,分别为空白对照组、模型组、阳性对照组及实验组,每组3只小鼠。除空白组以外,其它3组均每天皮下注射丙酸睾酮5mg/kg诱导脱发,注射30分钟后,空白对照组和模型组涂抹空白溶剂,阳性对照组涂抹5%米诺地尔,实验组涂抹5%对甲氧基肉桂酸乙酯酊剂,各100μL。在涂抹第14天时观察计算毛发再生区域(%),计算公式如效果实施例4。
实验结果如图6所示,在连续注射雄激素的作用下,模型组小鼠毛发再生受到影响,在实验第14天仍有大部分区域未长出新生毛发;而实验组涂抹对甲氧基肉桂酸乙酯酊剂后,可有效抵抗雄激素脱发的进程,恢复毛发生长,整体趋势明显。
实施例6含对甲氧基肉桂酸乙酯的头皮护理液使用体验评估
含对甲氧基肉桂酸乙酯的头皮护理液组分按重量百分比为:对甲氧基肉桂酸乙酯5%,乙二胺四乙酸二钠1%,丙二醇6%,苯甲酸钠0.2%,柠檬酸钠及香精适量,纯净水补足剩余体积。制备步骤:称取对甲氧基肉桂酸乙酯,并添加丙二醇和苯甲酸钠,均匀混合后得到混合液A;称取乙二胺四乙酸二钠、柠檬酸钠和香精,溶解于纯净水中,得到混合液B;将混合液A和混液B混匀,得到护理液。
对比例:配方如上述护理液,用纯净水代替对甲氧基肉桂酸乙酯所占分量。
选取年龄20-50岁的志愿者共20人(男女等比例)分为两组,对所制备的含对甲氧基肉桂酸乙酯的头皮护理液或对比例进行使用体验的双盲测试,测试方法为将护理液或对比例直接喷在头皮上,按摩3分钟,每天一次,连续使用2周,使用感受的问卷调查结果如表1。
表1含对甲氧基肉桂酸乙酯头皮护理液使用感受评价
头皮舒适 | 发质坚韧 | 新生头发 | 减少脱发 | |
护理液 | 男5/女5 | 男/3女3 | 男4/女3 | 男4/女5 |
对比例 | 男5/女4 | 男1/女0 | 男2/女2 | 男1/女0 |
通过上述效果测试可知,本申请提供了一种含对甲氧基乙酯的头皮护理液,该产品对照对比例而言,具有发质改善、稳定发根、防脱的效果,且使用过程中无不适现象,男女志愿者均有不同程度的改善脱发。
在本说明书的描述中,参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包括于本申请的至少一个实施例或示例中。而且,描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外,在不相互矛盾的情况下,本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
此外,术语“第一”、“第二”仅用于描述目的,而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此,限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或隐含地包括至少一个该特征。在本申请的描述中,“多个”的含义是两个或两个以上,除非另有明确具体的限定。
以上所述,仅为本申请的具体实施方式,但本申请的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本申请揭露的技术范围内,可轻易想到其各种变化或替换,这些都应涵盖在本申请的保护范围之内。因此,本申请的保护范围应以权利要求的保护范围为准。
Claims (10)
1.对甲氧基肉桂酸乙酯在制备皮肤施用组合物上的用途。
2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于,所述皮肤施用组合物为生发、防脱药物。
3.根据权利要求2所述的用途,其特征在于,所述皮肤施用组合物用于促进毛发生长。
4.根据权利要求3所述的用途,其特征在于,所述促进毛发生长包括加快毛发的自然生长速度、和/或延长毛发自然生长周期中的生长期、和/或上调细胞分泌生长因子VEGF和HGF、和/或下调抑制因子TGF-β1。
5.根据权利要求2所述的用途,其特征在于,所述皮肤施用组合物用于预防和/或治疗自然或病理原因下的头发脱落。
6.根据权利要求5所述的用途,其特征在于,所述皮肤施用组合物用于预防和/或治疗雄激素脱发。
7.根据权利要求1-6任一项所述的用途,其特征在于,所述皮肤施用组合物应用于药物制剂或日化用品中。
8.根据权利要求7所述的用途,其特征在于,所述药物制剂包括贴剂、酊剂、霜剂、乳膏制剂、软膏剂、凝胶剂和喷雾剂。
9.根据权利要求7所述的用途,其特征在于,所述日化用品包括洗发水、护发素、头发护理液、护发精油、洗护发精华液、护发油、护发乳液、头皮秀发滋养品、毛发精华、头皮膏、护发胶、喷发胶、护发膜和眉毛护理液。
10.根据权利要求7所述的用途,所述对甲氧基肉桂酸乙酯在药物制剂或日化用品中添加的质量百分比为0.1%-20%。
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