CN112022868A - 龙胆苦苷的防脱发和生发用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种龙胆苦苷及其生理上可接受的盐或溶剂合物在制备皮肤施用组合物上的用途以及所述皮肤施用组合物进一步在药物制剂、化妆品、护理品、美容品中的应用。所述皮肤施用组合物以及进一步应用的制剂可以全面有效的针对脱发的多种原因，从而更加有助于平衡需求对象的代谢状况，调整其精神状态以达到更好的治疗，护理协同作用，且所述龙胆苦苷活性成分安全性高，毒副作用小，因而在药物制剂、化妆品、护理品、美容品等领域具有广泛的应用前景。

Description

龙胆苦苷的防脱发和生发用途

技术领域

本发明属于化合物及其制剂领域，具体的，涉及龙胆苦苷在制备防脱发、生发制剂中的用途，以及进一步应用于药物，化妆品，护理品，美容品等领域。

背景技术

脱发是由多种因素，包括激素、化疗和营养不足等引起的，尽管脱发不会威胁生命，但是它对社交互动和患者心理健康的深远影响是不可否认的，因此脱发是关乎外观的当代人所面临的一个严重问题。毛发移植和生长因子注射液可用于治疗脱发，但到目前为止，只有两种药物，即米诺地尔和非那雄胺，被美国FDA批准用于治疗脱发。米诺地尔是一种动脉扩张剂，最初是被开发出来并用作高血压的治疗剂，但发现可用于治疗脱发。非那雄胺是5α-还原酶的特异性抑制剂，被用于前列腺增生的治疗以及改善雄激素脱发。但是以上两种药物需要长久地每天使用两次以维持疗效，并且会出现常见的副作用如接触性皮炎。

头发的生长周期主要是由于毛囊周期性变化引起的，头发在一生中经历了生长期、退行期和静止期的毛发循环。因此，通过维持毛发生长期、缩短毛发退行期和静止期、促进毛发进入生长期来控制毛发周期，对于促进毛发生长是很重要的。

脱发主要可以分为雄激素脱发(Androgenic Alopecia,AGA)、斑秃(AlopeciaAreata,AA)和化疗后脱发(Chemotherapy-Induced Alopecia,CIA)。

雄激素性脱发(AGA)也称为男性型秃发，是进行性脱发的最常见类型。雄激素脱发通常涉及颞骨和顶部区域，而保留枕骨区域，呈现特征性的“马蹄形”图案。雄激素主要通过多步细胞内信号传导途径影响人类皮肤的几种功能，包括皮脂腺的生长和分化，头发的生长等。在易感男性的头皮毛囊中，雄激素抑制毛发生长并促进生长阶段的毛发微型化，从而导致脱发。

斑秃(AA)是一种自身免疫性疾病，其特征是短暂、无疤痕的脱发。斑秃是仅次于雄激素脱发的第二高频率的非疤痕性脱发。斑秃临床最常见的模式是在头皮上一个小的环形秃顶病变，可进展为仅失去头皮头发和失去全身毛发。毛囊免疫特权的下降被认为是斑秃的重要驱动因素。

化疗后脱发(CIA)是临床肿瘤学中未解决的主要挑战之一。据报道，与这种外观缺陷有关的极度焦虑促使8％的患者拒绝化疗。化疗药会破坏活跃生长中的毛囊有丝分裂和代谢过程，并在迅速增殖的毛发基质细胞中诱导DNA损伤反应，引起细胞凋亡从而导致脱发。在大多数情况下，毛囊干细胞在很大程度上不受化疗药物的影响，因为在治疗后3–6个月，头发会再生。

龙胆苦苷，英文名称：Gentiopicroside，CAS：20831-76-9，分子式：C₁₆H₂₀O₉，分子量：356.32，结构式如下：

龙胆苦苷是龙胆科龙胆属植物龙胆的有效成分之一，属于裂环环烯醚萜苷类，具有利胆、抗炎、健胃、降压等作用。龙胆苦苷具有抗炎，抗菌和清除自由基，减轻氧化应激的活性，以上特性都对毛发生长具有有益作用。

综上，亟需寻找一种针对脱发产生的多种原因，促进毛发自然生长，减少脱发，安全稳定不刺激，能够充分满足护理，治疗，美容效果的活性物质。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明提供了龙胆苦苷及其生理上可接受的盐或溶剂合物在制备皮肤施用组合物上的用途。

根据本发明的实施方案，所述皮肤施用组合物是具有抗雄激素，刺激毛发生长，抗皮脂作用中的一种或多种协同作用的组合物；在一些实施方案中，所述皮肤施用组合物是抗雄激素组合物；在一些实施方案中，所述皮肤施用组合物是用于刺激毛发生长的组合物；在一些实施方案中，所述皮肤施用组合物是抗皮脂组合物。

根据本发明的实施方案，所述皮肤包括覆盖人或动物身体表面的组织，进一步包括覆盖脸部或身体的表面、及头皮和毛发的组织；所述毛发涵盖身体的毛发和头部的毛发(例如，少发，脱发中的“发”进一步包含涵盖身体的毛发和头部的毛发)；优选的，所述皮肤为头皮；优选的所述毛发为头发。

根据本发明的实施方案，所述皮肤施用组合物的施用对象包括人和动物。

根据本发明的实施方案，所述刺激毛发生长包括刺激产生新毛发，以及促进已有毛发以健康状态生长(降低脱发风险)；

根据本发明的实施方案，所述皮肤施用组合物可以抑制雄激素，刺激毛囊细胞的毛乳头细胞增殖和促进毛发生长，同时控制皮脂过度分泌。

根据本发明的实施方案，所述抗皮脂组合物可应用于调理或改善皮脂腺过度分泌导致的皮肤问题，例如，毛囊扩张，痤疮，脂溢性皮炎等。

根据本发明的实施方案，所述皮肤施用组合物用于预防和/或治疗病人化疗后脱发。

根据本发明的实施方案，所述皮肤施用组合物用于预防和/或治疗雄激素脱发。

根据本发明的实施方案，所述皮肤施用组合物用于预防和/或治疗自身免疫性疾病斑秃产生的脱发。

根据本发明的实施方案，在一些实施方式中，所述组合物包括龙胆苦苷及其生理上可接受的盐或溶剂合物作为唯一生理学活性成分；在另一些实施方式中，所述组合物除了龙胆苦苷及其生理上可接受的盐或溶剂合物作为活性成分，还包括其它生理学活性成分。

本发明进一步提供所述皮肤施用组合物在药物制剂、化妆品、护理品、美容品中的应用。

根据本发明的实施方案，所述药物制剂应用于预防，护理和治疗少发、脱发以及促进毛发健康及生长、抑制皮脂分泌。

所述药物制剂可通过皮肤，局部施用，所述制剂剂型选自霜剂、贴剂、软膏剂、乳膏制剂、凝胶剂和喷雾剂等，也可通过口服方式(即为口服制剂)，所述口服制剂片剂、颗粒剂、胶囊、口服液体制剂、丸剂、混悬剂、滴丸等。所述药物制剂进一步包括生理学上可接受的载体(例如具有生物相容性的材料)，例如任选地包括表面活性剂、赋形剂、保湿剂、乳化促进剂、助悬剂、用于调节渗透压的盐或缓冲剂、着色剂、香精、稳定剂、杀菌剂、防腐剂或其它常规补充剂。

根据本发明的实施方案，所述药物制剂可包括含量占制剂总重量的0.01wt％-20wt％的龙胆苦苷及其生理上可接受的盐或溶剂合物。优选的，所述龙胆苦苷及其生理上可接受的盐或溶剂合物占制剂总重量的3wt％～7wt％。

根据本发明的实施方案，所述化妆品、护理品或美容品可选自洗发香波、护发素、毛发护理、护发精华液、护发油、护发液、护发乳液、头皮秀发滋养品、毛发精华、头皮膏、护发胶、喷发胶、护发膜、眉毛护理液等。

有益效果

发明人发现，龙胆苦苷能够促进自然生长毛发的生长速度，增加毛长和毛重，养护毛囊，调理或改善皮脂腺过度分泌，尤其能够防治化疗药物导致的脱发，有效治疗雄激素脱发和斑秃，相较于上市药品米诺地尔，能够更有效的增加新增毛发或脱发后剩余毛发的生长重量、长度等。且龙胆苦苷的生理活性可以全面有效的针对脱发的多种原因，从而更加有助于平衡需求对象的代谢状况，调整其精神状态以达到更好的治疗，护理协同作用，且所述活性成分安全性高，毒副作用小，因而在医药护理等领域具有广泛的应用前景。

附图说明

图1为龙胆苦苷在自然生发模型小鼠上的毛长柱状图；

图2为龙胆苦苷在自然生发模型小鼠上的毛重柱状图；

图3为龙胆苦苷在化疗后脱发模型小鼠上的毛发生长评分柱状图；

图4为龙胆苦苷在化疗后脱发模型小鼠上的毛长柱状图；

图5为龙胆苦苷在化疗后脱发模型小鼠上的毛重柱状图；

图6为龙胆苦苷在雄激素脱发模型小鼠上的毛发生长评分折线图；

图7为龙胆苦苷在雄激素脱发模型小鼠上的毛长柱状图；

图8为龙胆苦苷在雄激素脱发模型小鼠上的毛重柱状图。

具体实施方式

下文将结合具体实施例对本发明的技术方案做更进一步的详细说明。应当理解，下列实施例仅为示例性地说明和解释本发明，而不应被解释为对本发明保护范围的限制。凡基于本发明上述内容所实现的技术均涵盖在本发明旨在保护的范围内。

除非另有说明，以下实施例中使用的原料和试剂均为市售商品，或者可以通过已知方法制备。

除非另有说明，实施例中所涉及“％”均意为质量百分比。

实施例1：本发明龙胆苦苷对于C57BL/6小鼠自然生发模型的疗效评估实验

1、动物实验设计

SPF级雄性C57BL/6小鼠，7周龄，体重18-20g，购于扬州大学，适应性饲养于SPF级动物房一周。一周后小鼠进行称重，按10ml/kg剂量腹腔注射4％水合氯醛，待小鼠麻醉完成后，电动剃毛器小心剃除小鼠所有背部毛发，剪裁大小为5.2cm×2.6cm的脱毛蜡纸，撕开后顺小鼠毛发生长方向贴于小鼠背部正中央，固定小鼠尾部，逆毛发生长方向快速撕开蜡纸，后用润肤纸擦拭，拔除所有的终止期毛发，诱导高度同步的生长期毛囊的发育。

2、龙胆苦苷药物制备：

2.1 10mg/ml的龙胆苦苷CMC-Na溶液：

称取5.0g羧甲基纤维素钠(CMC-Na)均匀铺于1000ml蒸馏水表面，溶胀过夜配得0.5％CMC-Na溶液。每次称取20.0mg龙胆苦苷，加入2.0ml 0.5％CMC-Na溶液，配制成10mg/ml的龙胆苦苷CMC-Na溶液。

2.2 4％(O/W)龙胆苦苷的外用乳膏，由下述原料药物制成：

龙胆苦苷400重量份，硬脂酸1000重量份，硬脂酸甘油酯200重量份，蜂蜡200重量份，棕榈油200重量份，丁二醇600重量份，乙醇200重量份，水4800重量份，卡波姆3重量份，三乙醇胺2重量份。按上述原料组分，

制备本发明中的外用乳膏：

(1)按比例称取硬脂酸，硬脂酸甘油酯，蜂蜡，棕榈油水浴加热至融化后过滤，70-80℃恒温保存；

(2)按比例称取丁二醇，乙醇，水，卡波姆，三乙醇胺加入到上述溶液中并水浴加热搅拌，保温乳化10-20分钟；

(3)加入称取好的龙胆苦苷原料，边加边搅拌至溶液冷凝成乳膏状得到4％(O/W)的龙胆苦苷外用乳膏

3、脱毛小鼠的治疗实验

24只脱毛小鼠随机分4组，每组6只：模型组、口服龙胆苦苷组、涂抹龙胆苦苷组、米诺地尔组。模型组给不含药物的空白乳膏；口服龙胆苦苷组按照100mg/kg的剂量灌胃10mg/ml的龙胆苦苷CMC-Na溶液；涂抹龙胆苦苷组给药浓度为2.5％，每次给药使用注射器挤出膏剂0.2ml使用棉签涂抹于脱毛区域；市售米诺地尔酊浓度为5％，加入等体积无水乙醇稀释到2.5％，给药剂量为200μl每只。从脱毛后的第2天起，按照每天给药1次，连续给药13天。

4、龙胆苦苷对脱毛小鼠毛发自然生长的疗效评估实验

给药后的第14天，小鼠腹腔注射10ml/kg 4％水合氯醛，待小鼠麻醉稳定，用镊子小心夹取小鼠背部10个固定位点毛发，每次夹取约10根，放置于洁净白纸上，游标卡尺测量长度并选取其中最长值为记录值，整个测量过程重复2次。

结果如图1所示，与空白乳膏模型组相比，口服龙胆苦苷组和涂抹龙胆苦苷组均能增加毛发长度，且涂抹龙胆苦苷组更显著，具有统计学意义(***P＜0.001)。龙胆苦苷与阳性药米诺地尔相比，龙胆苦苷能够显著增加毛发长度，具有统计学意义(***P＜0.001)。由此可见，龙胆苦苷具有促进毛发生长速度的显著活性。

待毛长测量完成后，用动物剃毛器小心剃除造模区域毛发，称量纸收集保存后用十万分之一天平称重，记录毛重值。

结果如图2所示，与空白乳膏模型组相比，口服龙胆苦苷组和涂抹龙胆苦苷组均能增加毛发重量，且涂抹龙胆苦苷组更显著，具有统计学意义(*P＜0.05)，由此可见，龙胆苦苷具有促进毛发生长的显著活性。与阳性药米诺地尔相比，龙胆苦苷能够增加毛发重量，但没有统计学意义(P＝0.397)。

实施例2：本发明龙胆苦苷对于C57BL/6小鼠化疗脱发模型的疗效评估实验

1、动物实验设计

SPF级雄性C57BL/6小鼠，7周龄，体重18-20g，购于扬州大学，适应性饲养于SPF级动物房一周。一周后小鼠进行称重，按10ml/kg剂量腹腔注射4％水合氯醛，待小鼠麻醉完成后，电动剃毛器小心剃除小鼠所有背部毛发，剪裁大小为5.2cm×2.6cm的脱毛蜡纸，撕开后顺小鼠毛发生长方向贴于小鼠背部正中央，固定小鼠尾部，逆毛发生长方向快速撕开蜡纸，后用润肤纸擦拭，拔除所有的终止期毛发，诱导高度同步的生长期毛囊的发育。

脱毛后第9天，脱毛区毛囊进入生长Ⅵ期，单剂量腹腔注射80mg/kg浓度为10mg/ml的环磷酰胺溶液，诱导所有的生长期毛囊凋亡从而诱导化疗后脱发。

2、化疗脱发小鼠的治疗实验

24只脱毛小鼠随机分4组，每组6只：模型组、口服龙胆苦苷组、涂抹龙胆苦苷组、米诺地尔组。模型组给不含药物的空白乳膏；口服龙胆苦苷组按照100mg/kg的剂量灌胃10mg/ml的龙胆苦苷CMC-Na溶液；涂抹龙胆苦苷组给药浓度为2.5％，每次给药使用注射器挤出膏剂0.2ml使用棉签涂抹于脱毛区域；市售米诺地尔酊浓度为5％，加入等体积无水乙醇稀释到2.5％，给药剂量为200μl每只。从脱毛后的第2天起，按照每天给药1次，持续给药至环磷酰胺造模后第5天，共计13天。

3、龙胆苦苷对化疗脱发小鼠抑制脱发的疗效评估实验

环磷酰胺造模后第6天，小鼠腹腔注射10ml/kg 4％水合氯醛，待小鼠麻醉稳定，在标准条件下拍照记录各组小鼠背部皮肤状况和毛发生长情况并评分统计。评分标准：所剩毛发面积占脱毛区域总面积的比例。

结果如图3所示，与空白乳膏模型组相比，口服龙胆苦苷组和涂抹龙胆苦苷组均能显著增加毛发生长评分，涂抹龙胆苦苷组更加显著，具有统计学意义(**P＜0.01)。与阳性药米诺地尔相比，龙胆苦苷能够提高毛发生长评分，但没有统计学意义(P＝0.318)。龙胆苦苷在表观上能抑制化疗药物导致的脱发。

用镊子小心夹取小鼠背部10个固定位点毛发，每次夹取约10根，放置于洁净白纸上，游标卡尺测量长度并选取其中最长值为记录值，整个测量过程重复2次。

结果如图4所示，与空白乳膏模型组相比，口服龙胆苦苷组和涂抹龙胆苦苷组均能显著增加毛发长度，涂抹龙胆苦苷组更加显著，具有统计学意义(**P＜0.01)。与阳性药米诺地尔相比，龙胆苦苷能够增加毛发长度，但无统计学意义(P＝0.146)。龙胆苦苷能抑制化疗药物导致的脱发。

待毛长测量完成后，用动物剃毛器小心剃除造模区域毛发，称量纸收集保存后用十万分之一天平称重，记录毛重值。

结果如图5所示，与空白乳膏模型组相比，口服龙胆苦苷组和涂抹龙胆苦苷组均能增加剩余毛发重量，而涂抹龙胆苦苷组更加显著，具有统计学意义(**P＜0.01)。与阳性药米诺地尔相比，龙胆苦苷能够显著增加剩余毛发重量，具有统计学意义(*P＜0.05)。龙胆苦苷能抑制化疗药物导致的脱发。

实施例3：本发明龙胆苦苷对于C57BL/6小鼠雄激素脱发模型的疗效评估实验

1、动物实验设计

SPF级雄性C57BL/6小鼠，7周龄，体重18-20g，购于扬州大学，适应性饲养于SPF级动物房一周。采用丙酸睾酮建立雄激素脱发动物模型，市售的丙酸睾酮浓度为25mg/ml，将注射液和橄榄油1:24进行稀释，配制成1mg/ml的丙酸睾酮稀溶液，将100μl的1mg/ml的丙酸睾酮稀溶液注射到C57小鼠背部皮下，每天一次，持续注射4周，造模2周毛发失去光泽，随着注射丙酸睾酮时间的延长毛发开始变的稀疏，并且背部皮肤有大量的油脂溢出，造模8周大片掉落。在造模4周时开始给药，给药周期为4周。

2、雄激素脱发小鼠的治疗实验

24只脱毛小鼠随机分4组，每组6只：模型组、口服龙胆苦苷组、涂抹龙胆苦苷组、米诺地尔组。模型组给不含药物的空白乳膏；口服龙胆苦苷组按照100mg/kg的剂量灌胃10mg/ml的龙胆苦苷CMC-Na溶液；涂抹龙胆苦苷组给药浓度为2.5％，每次给药使用注射器挤出膏剂0.2ml使用棉签涂抹于脱毛区域；市售米诺地尔酊浓度为5％，加入等体积无水乙醇稀释到2.5％，给药剂量为200μl每只。从注射丙酸睾酮造模的第4周起，按照每天给药1次，持续给药4周，共计28天。

3、龙胆苦苷对雄激素脱发小鼠抑制脱发的疗效评估实验

从给药开始起，每7天记录各组小鼠毛发生长情况并评分统计。评分标准：所剩毛发面积占背部区域总面积的比例。

结果如图6所示，给药1周后，与空白乳膏模型组相比，口服龙胆苦苷组和涂抹龙胆苦苷组的毛发生长评分下降趋势均被抑制，2周后涂抹龙胆苦苷组毛发生长评分与模型组相比显著更高，具有统计学意义(*P＜0.05)，且差距越来越大。与阳性药米诺地尔相比，龙胆苦苷能够抑制毛发评分下降的趋势，但没有统计学意义。说明龙胆苦苷在表观上能抑制雄激素导致的脱发。

给药后的第28天，小鼠腹腔注射10ml/kg 4％水合氯醛，待小鼠麻醉稳定，用镊子小心夹取小鼠背部10个固定位点毛发，每次夹取约10根，放置于洁净白纸上，游标卡尺测量长度并选取其中最长值为记录值，整个测量过程重复2次。

结果如图7所示，与空白乳膏模型组相比，口服龙胆苦苷组和涂抹龙胆苦苷组均能增加毛发长度，涂抹龙胆苦苷组更显著，具有统计学意义(**P＜0.01)。与阳性药米诺地尔相比，龙胆苦苷能够增加毛发长度，但不具有统计学意义(P＝0.779)。说明龙胆苦苷能抑制雄激素导致的脱发。

待毛长测量完成后，用动物剃毛器小心剃除造模区域毛发，称量纸收集保存后用十万分之一天平称重，记录毛重值。

结果如图8所示，与空白乳膏模型组相比，口服龙胆苦苷组和涂抹龙胆苦苷组均能增加剩余毛发重量，而涂抹龙胆苦苷组更加显著，具有统计学意义(**P＜0.01)。与阳性药米诺地尔相比，龙胆苦苷能够显著增加剩余毛发重量，具有统计学意义(*P＜0.05)。龙胆苦苷能抑制雄激素导致的脱发。

以上，对本发明的实施方式进行了说明。但是，本发明不限定于上述实施方式。凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.龙胆苦苷及其生理上可接受的盐或溶剂合物在制备皮肤施用组合物上的用途。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述皮肤施用组合物是具有抗雄激素，刺激毛发生长，抗皮脂作用中的一种或多种协同作用的组合物；优选的，所述皮肤施用组合物是抗雄激素组合物；或所述皮肤施用组合物是用于刺激毛发生长的组合物；或所述皮肤施用组合物是抗皮脂组合物。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述皮肤包括覆盖人或动物身体表面的组织，进一步包括覆盖脸部或身体的表面、及头皮和毛发的组织；所述毛发涵盖身体的毛发和头部的毛发；优选的，所述皮肤为头皮；优选的所述毛发为头发。

4.根据权利要求1-3任一项所述的应用，其特征在于，所述刺激毛发生长包括刺激产生新毛发，以及促进已有毛发以健康状态生长。

5.根据权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于，所述皮肤施用组合物可以抑制雄激素，刺激毛囊的毛乳头细胞和毛基质细胞增殖，同时控制皮脂过度分泌；所述抗皮脂组合物可应用于调理或改善皮脂腺过度分泌导致的皮肤问题；所述皮肤施用组合物用于预防和/或治疗病人化疗后脱发；所述皮肤施用组合物用于预防和/或治疗雄激素脱发；所述皮肤施用组合物用于预防和/或治疗自身免疫性疾病斑秃产生的脱发。

6.根据权利要求1-5任一项所述皮肤施用组合物在药物制剂、化妆品、护理品、美容品中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，所述药物制剂应用于预防，护理和治疗少发、脱发以及促进毛发健康及生长、抑制皮脂分泌；优选的，所述药物制剂可通过皮肤，局部施用，所述制剂剂型选自霜剂、贴剂、软膏剂、乳膏制剂、凝胶剂和喷雾剂，也可通过口服方式，所述口服制剂包括片剂、颗粒剂、胶囊、口服液体制剂、丸剂、混悬剂、滴丸等。

8.根据权利要求7所述的应用，所述药物制剂进一步包括生理学上可接受的载体。

9.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述龙胆苦苷及其生理上可接受的盐或溶剂合物占制剂总重量的3wt%~7wt% 。

10.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述化妆品、护理品或美容品选自洗发香波、护发素、毛发护理、护发精华液、护发油、护发液、护发乳液、头皮秀发滋养品、毛发精华、头皮膏、护发胶、喷发胶、护发膜、眉毛护理液。

Images